Производные тетрагидропиридо[3,4-b]индола, полезные при лечении рака - RU2664109C2

Код документа: RU2664109C2

Чертежи

Показать все 12 чертежа(ей)

Описание

Изобретение относится к некоторым новым производным индола или их фармацевтически приемлемым солям, которые обладают противораковой активностью и, соответственно, являются полезными в способах лечения человека или животного. Изобретение также относится к способам получения указанных производных индола, фармацевтических композиций, содержащих такие производные, и их применению в терапевтических способах, например, при изготовлении лекарственных средств для применения в предупреждении или лечении злокачественных новообразований у теплокровного животного, например, человека, включая применение в предупреждении или лечении рака.

Настоящее изобретение также относится к производным индола, которые являются селективными негативными регуляторами рецептора эстрогенов.

Рецептор эстрогенов альфа (ERα, ESR1, NR3A (ядерный рецептор А подсемейства 3)) и рецептор эстрогенов бета (ERβ, ESR2, NR3b) представляют собой рецепторы стероидных гормонов, которые являются членами большого семейства ядерных рецепторов. Схожий по структуре со всеми ядерными рецепторами, ERα состоит из шести функциональных доменов (обозначенных как A-F) (Dahlman-Wright, et al., Pharmacol. Rev.. 2006, 58: 773-781) и классифицируется как лиганд-зависимый транскрипционный фактор, поскольку после его ассоциации со специфическим лигандом, женским половым стероидным гормоном 17b-эстрадиолом (Е2), полученный комплекс связывается с геномными последовательностями, называемыми элементами рецептора эстрогенов (ERE; estrogen receptor elements), и взаимодействует с корегуляторами, модулируя транскрипцию генов-мишеней. Ген ERα локализован на 6q25.1 и кодирует состоящий из 595 аминокислот (АА) белок, и в результате альтернативного сплайсинга и наличия альтернативных сайтов начала трансляции могут продуцироваться многочисленные изоформы. Помимо ДНК-связывающего домена (домена С) и лиганд-связывающего домена (домена Е), данный рецептор содержит N-концевой (А/В) домен, шарнирный (D) домен, который соединяет C и Е домены, и удлинение на С-конце (F домен). В то время как домены C и E у ERα и ERβ являются довольно консервативными (идентичность аминокислот составляет 96% и 55%, соответственно), консервативность доменов A/B, D и F является низкой (идентичность аминокислот составляет ниже 30%). Оба рецептора вовлечены в регуляцию и развитие женских половых путей и помимо этого принимают участие в работе центральной нервной системы, сердечно-сосудистой системы и в костном метаболизме. Геномное действие ER осуществляется в ядре клетки, когда рецептор связывается с ERE непосредственно (прямая активация или классический путь) или опосредованно (непрямая активация или неклассический путь). В отсутствие лиганда молекулы ER образуют ассоциаты с белками теплового шока, Hsp90 и Hsp70, и объединенная шаперонная машина стабилизирует лиганд-связывающий домен (LBD), делая его доступным для лиганда. Связавшийся с лигандом ER диссоциирует из комплекса с белками теплового шока, вызывая конформационное изменение в рецепторе, что способствует димеризации, связыванию с ДНК, взаимодействию с коактиваторами или корепрессорами и модулированию экспрессии генов-мишеней. В неклассическом пути, последовательности АР-1 (активаторный белок 1) и Sp-1 (specificity protein 1) представляют собой альтернативные регуляторные последовательности ДНК, используемые обеими изоформами рецептора для модулирования генной экспрессии. В этом примере ER не взаимодействует с ДНК напрямую, а взаимодействует посредством ассоциации с другими связанными с ДНК транскрипционными факторами, например c-Jun или c-Fos (Kushner et al., Pure Applied Chemistry, 2003, 75: 1757-1769). Точный механизм, посредством которого ER воздействует на транскрипцию генов, изучен плохо, но по-видимому он опосредуется многочисленными ядерными факторами, которые рекрутируются связанным с ДНК рецептором. Этот рекрутмент корегуляторов главным образом опосредуется двумя участками белковой поверхности, AF2 (функциональный активатор транскрипции; activation function 2) и AF1, которые расположены в Е-домене и А/В-домене, соответственно. AF1 регулируется факторами роста, и его активность зависит от клеточного окружения и окружения промотора, в то время как активность AF2 полностью зависит от связывания с лигандом. Несмотря на то, что эти два домена могут действовать независимо, максимальная транскрипционная активность ER достигается в результате синергического взаимодействия этих двух доменов (Tzukerman, et al., Mol. Endocrinology, 1994, 8: 21-30). Несмотря на то, что ER считаются транскрипционными факторами, они также могут действовать через негеномные механизмы, о чем свидетельствуют быстрые эффекты ER в тканях после введения Е2 в сроки, которые считаются слишком быстрыми для проявления геномного действия. До сих пор неясно, являются ли рецепторы, ответственные за быстрое действие эстрогенов, теми же самыми ядерными ER или особыми G-белок-связанными стероидными рецепторами (Warner, et al., Steroids, 2006, 71: 91-95), тем не менее идентифицировано возрастающее число Е2-индуцируемых сигнальных путей, например, путь MAPK/ERK (митоген-активируемая протеинкиназа/внеклеточная сигнал-регулируемая киназа), и путь активации эндотелиальной синтазы оксида азота, и путь PI3K/Akt (фосфоинозитид-3-киназа/протеинкиназа В). Помимо участия в лиганд-зависимых путях, было показано, что ERα обладают не зависимой от лиганда активностью через AF-1, что ассоциируется со стимуляцией МАРK в сигнальном пути через ростовой фактор, например инсулиноподобный фактор роста 1 (IGF-1) и эпидермальный фактор роста (EGF). Активность AF-1 зависит от фосфорилирования Ser118, и примером взаимодействия между сигнальными путями через ER и ростовой фактор, является фосфорилирование Ser118 под действием МАРK в ответ на такие факторы роста, как IGF-1 и EGF (Kato, et al., Science, 1995, 270: 1491-1494).

Было показано, что с ER связывается большое количество различных по структуре соединений. Некоторые соединения, такие как эндогенный лиганд Е2, действуют как агонисты рецепторов, в то время как другие конкурентно ингибируют связывание с Е2 и действуют как антагонисты рецепторов. Эти соединения можно разделить на 2 класса в зависимости от их функциональных проявлений. Селективные модуляторы рецепторов эстрогенов (SERM), такие как тамоксифен, обладают способностью действовать в качестве как агонистов, так и антагонистов рецепторов в зависимости от клеточного окружения и окружения промотора, а также от целевой изоформы ER. Например, тамоксифен действует в качестве антагониста в молочной железе, но действует в качестве частичного агониста в кости, сердечно-сосудистой системе и матке. Все SERM, по-видимому, действуют как антагонисты AF2, а посредством AF1 проявляют свои свойства как частичные агонисты. Представители второй группы, примером которой является фулвестрант, классифицируются как полные антагонисты, способные блокировать активность эстрогенов посредством полного ингибирования доменов AF1 и AF2 в результате индуцирования уникального конформационного изменения в лиганд-связывающем домене (LBD) при связывании с соединением, что приводит к полному упразднению взаимодействия между спиралью 12 и остальной частью LBD, блокируя рекрутмент кофакторов (Wakeling, et al., Cancer Res., 1991, 51: 3867-3873; Pike, et al., Structure, 2001, 9: 145-153).

Внутриклеточные уровни ERα снижаются в присутствии Е2 по пути убиквитин/протеасома (Ub/26S). Полиубиквитинилирование связанного с лигандом ERα катализируется по меньшей мере тремя ферментами; убиквитин, активированный убиквитин-активирующим ферментом Е1, под действием Е2 соединяется изопептидной связью с остатками лизина с участием убиквитинлигазы Е3, и полиубиквитинилированный ERα затем направляется в протеасому для деградации. Несмотря на то что ER-зависимая регуляция транскрипции и протеасома-опосредуемая деградация ER связаны друг с другом (Lonard, et al., Mol. Cell, 2000, 5: 939-948), самой по себе транскрипции не требуется для деградации ERα, и достаточно сборки комплекса инициации транскрипции, чтобы направить ERα в ядро для протеасомной деградации. Считается, что этот Е2-индуцированный процесс деградации необходим для его способности быстро активировать транскрипцию в ответ на требования, касающиеся пролиферации, дифференцировки и метаболизма клеток (Stenoien, et al., Mol. Cell Biol., 2001, 21: 4404-4412). Фулвестрант также классифицируют как селективный негативный регулятор рецепторов эстрогенов (SERD), разновидность антагонистов, которые также могут индуцировать быструю отрицательную регуляцию ERα посредством связанного с 26S-протеасомой пути. В противоположность этому, SERM, такой как тамоксифен, может приводить к повышению уровней ERα, хотя влияние на транскрипцию аналогично тому, которое наблюдается для SERD.

Приблизительно в 70% случаев рака молочной железы экспрессируются ER и/или рецепторы прогестерона, что указывает на зависимость роста этих опухолевых клеток от гормонов. Также полагают, что рост других раковых опухолей, например яичника и эндометрия, зависит от передачи сигнала через ERα. Терапевтические средства для таких пациентов могут ингибировать передачу сигнала через ER, либо антагонизируя связывание лиганда с ER, например, как тамоксифен, который применяют для лечения раннего и распространенного ER-положительного рака молочной железы как в пред-, так и в постменопаузальном состоянии; либо антагонизируя и отрицательно регулируя ERα, как например фулвестрант, который применяют для лечения рака молочной железы у женщин, прогрессирующего, несмотря на терапию тамоксифеном или ингибиторами ароматазы; либо блокируя синтез эстрогенов, как например ингибиторы ароматазы, которые применяют для лечения раннего и распространенного ER-положительного рака молочной железы. Хотя эти терапии оказали чрезвычайно положительное влияние на лечение рака молочной железы, значительное количество пациентов, опухоли у которых экспрессируют ER, демонстрируют de novo устойчивость к существующим ER-опосредованным терапиям, или устойчивость к этим терапиям у них развивается со временем. Для объяснения устойчивости к первичной терапии тамоксифеном был описан несколько отличный механизм, который в основном связан с переключением действия тамоксифена как антагониста к его действию как агониста либо посредством снижения аффинности связывания определенных кофакторов с комплексом тамоксифен-ERα вследствие сверхэкспрессии этих кофакторов, либо посредством образования вторичных сайтов, которые облегчают взаимодействие комплекса тамоксифен-ERα с кофакторами, которые в норме не связываются с этим комплексом. Поэтому устойчивость могла возникать в результате разрастания клеток, экспрессирующих специфические кофакторы, которые управляют активностью комплекса тамоксифен-ERα. Также существует вероятность того, что сигнальные пути, опосредованные другими факторами роста, непосредственно активируют рецептор ER или коактиваторы для управления клеточной пролиферацией независимо от лиганд-опосредстванной передачи сигнала.

Совсем недавно были идентифицированы мутации в ESR1 с частотами в диапазоне 17-25%, которые возможно обуславливают механизм устойчивости в образцах от пациентов с метастатическими ER-положительными опухолями и в моделях ксенотрансплантатов, выделенных из пациентов (PDX). Эти мутации в большинстве случаев, но не исключительно, располагаются в лиганд-связывающем домене, что приводит к образованию мутированных функциональных белков; примеры аминокислотных замен включают Ser463Pro, VaI543Glu, Leu536Arg, Tyr537Ser, Tyr537Asn и Asp538Gly, при этом замены по аминокислотам 537 и 538 составляют большинство описанных в настоящее время замен. Эти мутации прежде не обнаруживали в геномах из образцов первичного рака молочной железы, охарактеризованных в базе данных Атласа ракового генома. Из 390 образцов первичного рака молочной железы, положительных в отношении экспрессии ER, не обнаружено ни одной мутации в ESR1 (Cancer Genome Atlas Network, 2012, Nature, 490: 61-70). Полагают, что мутации в лиганд-связывающем домене развиваются как устойчивый ответ на эндокринные терапии ингибиторами ароматазы, поскольку эти мутантные рецепторы демонстрируют базальную транскрипционную активность в отсутствие эстрадиола. Анализ кристаллической структуры ER, имеющего мутации в аминокислотах 537 и 538, показал, что наличие обеих мутаций способствовало образованию конформации ER, благоприятной для агониста, в результате смещения положения спирали 12, предоставляя возможность для рекрутмента коактиваторов и тем самым имитируя активированный агонистом ER дикого типа. Опубликованные данные показали, что эндокринные терапевтические средства, такие как тамоксифен и фулвестрант, все еще могут связываться с мутантным ER и ингибировать до некоторой степени активацию транскрипции, и что фулвестрант способен привести к расщеплению рецептора с мутацией Try537Ser, однако для полного ингибирования рецептора могут потребоваться более высокие дозы (Toy et al., Nat. Genetics, 2013, 45: 1439-1445; Robinson et al., Nat. Genetics, 2013, 45: 144601451; Li, S. et al. Cell Rep., 4, 1116-1130 (2013). Поэтому возможно, что некоторые соединения формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соли будут способны отрицательно регулировать и антагонизировать мутантный ER, хотя неизвестно, связаны ли мутации в ESR¹ на этой стадии с измененным клиническим исходом.

Независимо от того, какой механизм устойчивости или какая комбинация механизмов имеет место, в основе многих из них тем не менее лежат ER-зависимые активности, и такое удаление рецептора посредством механизма с использованием SERD является наилучшим путем удаления рецептора ERα из клетки. В настоящее время единственным SERD, одобренным для клинического применения, является фулвестрант, но несмотря на его механизм действия, фармакологические свойства этого лекарственного средства лимитируют его эффективность ввиду существующего ограничения в 500 мг для месячной дозы, что приводит к обновлению рецептора менее чем на 50% в образцах от пациентов в сравнении с полной отрицательной регуляцией рецептора, наблюдаемой в экспериментах in vitro на линиях клеток молочной железы (Wardell, et al., Biochem. Pharm., 2011, 82: 122-130). Поэтому существует потребность в новых ER-направляющих агентах, имеющих необходимые фармацевтические свойства и демонстрирующих механизм SERD, для обеспечения улучшенной эффективности на ранних стадиях заболевания, стадиях с метастазированием и приобретением устойчивости.

Было установлено, что соединения по изобретению обладают сильной противоопухолевой активностью, являясь полезными для ингибирования неконтролируемой клеточной пролиферации, которая является результатом злокачественного заболевания. Соединения по изобретению обеспечивают противоопухолевый эффект посредством, как минимум, действия в качестве SERD.

Согласно одному из аспектов изобретения, предложены соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль

где:

R¹ и R² каждый независимо представляет собой Н или F;

R³ представляет собой Н или метил; и

либо:

а) R⁴ представляет собой Н, a R⁵ представляет собой F; либо

б) R⁴ представляет собой F, a R⁵ представляет собой Н.

Согласно другому аспекту изобретения, предложено соединение формулы (I), которое определено выше.

Соединения формулы (I) имеют один, два или три хиральных центра, и изобретение охватывает чистые хиральные формы или их смеси в любой пропорции. Синтез оптически активных форм может быть проведен с использованием стандартных методов органической химии, хорошо известных в данной области техники, например, путем синтеза из оптически активных исходных веществ или путем выделения из рацемической формы. Аналогично, вышеупомянутая активность может быть оценена с использованием стандартных лабораторных методов.

Конкретный энантиомер или диастереоизомер соединения, описанного в данной заявке, может быть более активным, чем другие энантиомеры или диастереоизомеры того же соединения.

Согласно другому аспекту изобретения, предложено соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль, которое является отдельным энантиомером, находящимся в энантиомерном избытке (% ее), составляющем не менее 95, не менее 98% или не менее 99%. Подходящим образом отдельный энантиомер присутствует в энантиомерном избытке (% ее) не менее 99%.

Согласно другому аспекту изобретения, предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I), которое является отдельным энантиомером, находящимся в энантиомерном избытке (% ее), составляющем не менее 95, не менее 98% или не менее 99%, или его фармацевтически приемлемую соль вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем. Подходящим образом отдельный энантиомер присутствует в энантиомерном избытке (% ее), составляющем не менее 99%.

Согласно другому аспекту изобретения, предложено соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль, которое является отдельным диастереоизомером, находящимся в диастереомерном избытке (% de), составляющем не менее 95, не менее 98% или не менее 99%. Подходящим образом отдельный диастереоизомер присутствует в диастереомерном избытке (% de), составляющем не менее 99%.

Согласно другому аспекту изобретения, предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I), которое является отдельным диастереоизомером, находящимся в диастереомерном избытке (% de), составляющем не менее 95, не менее 98% или не менее 99%, или его фармацевтически приемлемую соль вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем. Подходящим образом отдельный диастереоизомер присутствует в диастереомерном избытке (% de), составляющем не менее 99%.

Согласно одному конкретному аспекту, соединение формулы (I) представляет собой соединение формулы (IA):

Согласно другому аспекту, соединение формулы (I) представляет собой соединение формулы (IB):

Ссылку в данном описании на соединения формулы (I) следует понимать, как упоминание соединений формулы (IA) и/или (IB), если не указано иное.

Например, соединение из примера 1, (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловая кислота, представляет собой пример соединения формулы (IA).

Его изомер, (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1S,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловая кислота, представляет собой пример соединения формулы (IB).

Эти два изомера являются примерами (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты, которая представляет собой пример соединения формулы (I).

Некоторые соединения формулы (I) могут быть кристаллическими и могут существовать более чем в одной кристаллической форме. Следует понимать, что настоящее изобретение охватывает любую кристаллическую либо аморфную форму или их смеси, при этом форма обладает свойствами, полезными для проявления активности в качестве SERD, причем в данной области техники хорошо известно, как определить эффективность кристаллической или аморфной формы в отношении проявления активности в качестве SERD, используя стандартные тесты, описанные далее.

Общеизвестно, что анализ кристаллических веществ можно провести, используя традиционные методы, такие как анализ с применением дифракции рентгеновских лучей на порошке (далее XRPD), дифференциальная сканирующая калориметрия (далее DSC), термогравиметрический анализ (далее TGA), инфракрасная спектроскопия диффузного отражения с преобразованием Фурье (DRIFT), спектроскопия в ближней инфракрасной области (NIR), спектроскопия ядерного магнитного резонанса в растворе и/или твердом состоянии. Содержание воды в таких кристаллических веществах можно определить посредством анализа по методу Карла Фишера.

В качестве примера, соединение из примера 7 демонстрирует кристалличность, и была идентифицирована одна его кристаллическая форма.

Соответственно, другой аспект изобретения относится к Форме А (Е)-3-(4-(2-((S)-3-фтор-2-метилпропил)-3,3-диметил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты (пример 7).

Согласно другому аспекту настоящего изобретения, предложена кристаллическая форма, Форма A соединения из примера 7, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по меньшей мере с одним характерным пиком при 2-тета, приблизительно составляющем 4,5°.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения, предложена кристаллическая форма, Форма A соединения из примера 7, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по меньшей мере с двумя характерными пиками при 2-тета, приблизительно составляющих 4,5 и 10,8°.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения, предложена кристаллическая форма, Форма A соединения из примера 7, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по меньшей мере с характерными пиками при 2-тета, приблизительно составляющих 4,5; 4,8; 6,1; 7,9; 9,9; 10,8; 13,4; 14,0; 14,3 и 18,5°.

Согласно настоящему изобретению предложена, кристаллическая форма, Форма A соединения из примера 7, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке, по существу аналогичную картине дифракции рентгеновских лучей на порошке, показанной на Фиг. 1.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения, предложена кристаллическая форма, Форма A соединения из примера 7, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по меньшей мере с двумя характерными пиками при 2-тета, приблизительно составляющих 4,5 и 10,8°±0,2° 2-тета.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения, предложена кристаллическая форма, Форма A соединения из примера 7, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке с характерными пиками при 2-тета, приблизительно составляющих 4,5; 4,8; 6,1; 7,9; 9,9; 10,8; 13,4; 14,0; 14,3 и 18,5°±0,2° 2-тета.

Кроме того, соединение из примера 1 также является кристаллическим.

Согласно настоящему изобретению, предложена кристаллическая форма, Форма В (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по меньшей мере с одним характерным пиком при 2-тета, приблизительно составляющем 8,4°.

Согласно настоящему изобретению, предложена кристаллическая форма, Форма В (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по меньшей мере с двумя характерными пиками при 2-тета, приблизительно составляющих 8,4° и 10,9°.

Согласно настоящему изобретению, предложена кристаллическая форма, Форма В (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке с характерными пиками при 2-тета, приблизительно составляющих 8,4; 10,9; 18,3; 24,0 и 14,0°.

Согласно настоящему изобретению, предложена кристаллическая форма, Форма В (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке с характерными пиками при 2-тета, приблизительно составляющих 8,4; 10,9; 18,3; 24,0; 14,0; 19,0; 14,4; 13,0; 15,3; 20,6°.

Согласно настоящему изобретению, предложена кристаллическая форма, Форма В (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по существу аналогичную картине дифракции рентгеновских лучей на порошке, показанной на Фиг.2.

Согласно настоящему изобретению предложена кристаллическая форма, Форма В (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по меньшей мере с одним характерным пиком при 2-тета, составляющем 8,4°±0,2° 2-тета.

Согласно настоящему изобретению, предложена кристаллическая форма, Форма В (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке по меньшей мере с двумя характерными пиками при 2-тета, составляющих 8,4° и 10,9°, где указанные значения могут отклоняться на величину ±0,2° 2-тета.

Согласно настоящему изобретению, предложена кристаллическая форма, Форма В (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке с характерными пиками при 2-тета, приблизительно составляющих 8,4; 10,9; 18,3; 24,0 и 14,0°, где указанные значения могут отклоняться на величину ±0,2° 2-тета.

Согласно настоящему изобретению, предложена кристаллическая форма, Форма В (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты, которая имеет картину дифракции рентгеновских лучей на порошке с характерными пиками при 2-тета, составляющих 8,4; 10,9; 18,3; 24,0; 14,0; 19,0; 14,4; 13,0; 15,3; 20,6°, где указанные значения могут отклоняться на величину ±0,2° 2-тета.

Когда указано, что настоящее изобретение относится к кристаллической форме соединения из примера 1, Форме B, степень кристалличности подходящим образом составляет более чем примерно 60%, еще более подходящим образом более чем примерно 80%, предпочтительно более чем примерно 90% и более предпочтительно более чем примерно 95%. Наиболее предпочтительно, если степень кристалличности составляет более чем примерно 98%.

Кроме того, когда указано, что настоящее изобретение относится к кристаллической форме соединения из примера 1, Форме B, то это вещество предпочтительно по существу не содержит других кристаллических форм или аморфного вещества. Под термином «по существу не содержит» авторы подходящим образом понимают более чем примерно 60%, еще более подходящим образом более чем примерно 80%, предпочтительно более чем примерно 90%, более предпочтительно более чем примерно 95% и наиболее предпочтительно более чем примерно 99% отдельного полиморфа.

Будет понятно, что значения 2-тета на картинах дифракции рентгеновских лучей на порошке могут незначительно изменяться от одного устройства к другому или от одного образца к другому, и поэтому приведенные значения не следует истолковывать как абсолютные.

Известно, что можно получить картину дифракции рентгеновских лучей на порошке, которая имеет одну или более ошибок измерения в зависимости от условий измерения (таких как используемое оборудование или устройство). В частности, общеизвестно, что интенсивности на картине дифракции рентгеновских лучей на порошке могут колебаться в зависимости от условий измерения. Таким образом, следует понимать, что кристаллические формы по настоящему изобретению, описанные выше, если не указано иное, не ограничиваются кристаллами, которые обеспечивают получение картин дифракции рентгеновских лучей на порошке, идентичных картине дифракции рентгеновских лучей на порошке, показанной на релевантных Фигурах, и любые кристаллы, обеспечивающие получение картин дифракции рентгеновских лучей на порошке, по существу аналогичных показанным на этих Фигурах, попадают в объем настоящего изобретения. Специалист в области дифракции рентгеновских лучей на порошке в состоянии иметь суждение, насколько существенно идентичны картины дифракции рентгеновских лучей на порошке.

Специалистам в области дифракции рентгеновских лучей на порошке также понятно, что на относительную интенсивность пиков могут оказывать влияние, например, гранулы в размере свыше 30 микрон и с неунитарными соотношениями сторон, что может отразиться на анализе образцов. Специалисту также понятно, что на положение отражений может влиять точность размещения по высоте, на которой образец находится в дифрактометре, и калибровка нуля дифрактометра. Плоскостность поверхности образца также может производить небольшой эффект. Следовательно, представленные данные дифракционных картин не должны приниматься за абсолютные значения (см. Jenkins, R. and Snyder, R.L. "Introduction to X-Ray Powder Diffractometry", John Wiley and Sons, 1996; Bunn, C.W. (1948), Chemical Crystallography, Clarendon Press, London; Klug, H.P. and Alexander, L.E. (1974), X-Ray Diffraction Procedures).

Обычно ошибка измерения угла дифракции на картине дифракции рентгеновских лучей на порошке составляет приблизительно ±0,2° 2-тета, и такую величину ошибки измерения необходимо учитывать при рассмотрении данных дифракции рентгеновских лучей на порошке. Кроме того, следует понимать, что интенсивности могут колебаться в зависимости от условий эксперимента и подготовки образца (предпочтительной ориентации).

Конкретные соединения по изобретению представляют собой соединения из примеров, каждое из которых составляет дополнительный независимый аспект изобретения. Другими конкретными соединениями по изобретению являются фармацевтически приемлемая(ые) соль(и) тех соединений из примеров, каждое из которых обеспечивает дополнительный независимый аспект изобретения.

Согласно другому аспекту изобретения, предложено соединение формулы (I), которое получают, следуя любому из примеров, описанных в данном изобретении.

Следующим признаком является любой из объемов изобретения, определенных в данном описании, при условии, что конкретные соединения из примеров, таких как пример 1, 2, 3 и т.д., каждый в отдельности, исключены из притязаний.

Специалистам в данной области техники будет очевидно, что определенные соединения формулы (I) содержат асимметрические замещенные атомы углерода и соответственно могут существовать и могут быть выделены в оптически активных и рацемических формах. Некоторые соединения формулы (I) могут проявлять полиморфизм. Следует понимать, что настоящее изобретение охватывает любую рацемическую, оптически активную, полиморфную или стереоизомерную форму или их смеси, при этом форма обладает свойствами, полезными для использования ее в качестве SERD, причем в данной области техники хорошо известно, как получить оптически активные формы (например, путем выделения из рацемической формы методами перекристаллизации, путем синтеза из оптически активных исходных веществ, посредством хирального синтеза, путем разделения с использованием ферментов, путем биотрансформации или путем хроматографического разделения с использованием хиральной неподвижной фазы) и как определить эффективность в качестве SERD, используя стандартные тесты, описанные далее.

Следует понимать, что некоторые соединения формулы (I), определенные выше, могут демонстрировать явление таутомерии. Следует понимать, что настоящее изобретение включает в своем определении любую такую таутомерную форму или их смесь, которая обладает активностью в качестве SERD, и не должно быть ограничено только какой-либо одной таутомерной формой, использованной в изображениях формул или приведенной в названиях примеров. В общем случае, только одну из всех таких таутомерных форм приводят в названиях примеров, следующих далее, или представляют в любых релевантных изображениях формул, следующих далее.

Подразумевается, что настоящее изобретение включает все изотопы атомов, имеющихся в соединениях по настоящему изобретению. Понятно, что изотопы включают такие атомы, которые имеют один и тот же атомный номер, но разные массовые числа. Например, изотопы водорода включают тритий и дейтерий. Изотопы углерода включают¹³С и¹⁴С. Дейтерированный вариант соединения из примера 1 описан в примере 10.

Подходящей фармацевтически приемлемой солью соединения формулы (I) является, например, соль щелочного или щелочноземельного металла, как например, соль натрия, кальция или магния, или соль аммония, или соль с органическим основанием, таким как метиламин, диметиламин, триметиламин, пиперидин, морфолин или трис-(2-гидроксиэтил)амин. Другими подходящими фармацевтически приемлемыми солями соединения формулы (I) могут быть соли других металлов, например, соли, имеющие катионы калия, цинка или других таких металлов, известные в данной области техники. Согласно одному из аспектов изобретения фармацевтически приемлемая соль соединения формулы (I) представляет собой соль с катионом металла, соль аммония или соль с органическим основанием.

Другой подходящей фармацевтически приемлемой солью соединения формулы (I) является, например, соль, образуемая в организме человека или животного после введения соединения формулы (I).

Подходящей фармацевтически приемлемой солью соединения формулы (I) также может быть, например, полученная присоединением кислоты соль соединения формулы (I), например соль присоединения сильной неорганической или органической кислоты, такой как соляная, бромистоводородная, серная или трифторуксусная кислота. Другой возможной подходящей фармацевтически приемлемой солью соединения формулы (I) также может быть соль, описанная ниже для примера 1. Согласно другому аспекту изобретения фармацевтически приемлемая соль соединения формулы (I) представляет собой соль присоединения кислоты.

В экспериментах, относящихся к образованию солей соединений формулы (I), исследовали способность соединения из примера 1 ((Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты) образовывать кристаллические соли. Исследовали следующие кислоты и основания:

уксусную кислоту, адипиновую кислоту, бензолсульфоновую кислоту, бензойную кислоту, коричную кислоту, лимонную кислоту, D,L-молочную кислоту, этандисульфоновую кислоту, этансульфоновую кислоту, фумаровую кислоту, соляную кислоту, L-винную кислоту, малеиновую кислоту, яблочную кислоту, малоновую кислоту, метансульфоновую кислоту, 1,5-нафталиндисульфоновую кислоту (napadisylic acid), фосфорную кислоту, сахарин, янтарную кислоту, серную кислоту, толуолсульфоновую кислоту, ацетат кальция, диэтиламин, этаноламин, этилендиамин, гидроксиэтилпирролидин, ацетат магния, меглумин, пиперазин, гидроксид калия, гидроксид натрия, трет-бутиламин, триэтаноламин, трис(гидроксиметил)аминометан (трис) и N,N-диэтилэтаноламин.

С использованием вышеупомянутых кислот и оснований не всегда получали или вообще не получали соли, которые в применяемых экспериментальных условиях можно было выделить в твердой кристаллической форме. Предпочтительные соли соединения из примера 1 включают соли, которые могут быть выделены в кристаллической форме, например, соль бензолсульфоновой кислоты (безилатную соль), соль янтарной кислоты (сукцинатную соль) и соль малеиновой кислоты (малеатную соль).

Согласно одному из аспектов подходящие соли соединения из примера 1 могут включать безилат, сукцинат и малеат. Согласно другому аспекту подходящей солью соединения из примера 1 может быть малеатная соль, которая описана в примере 11.

Кроме этого следует понимать, что подходящий фармацевтически приемлемый сокристалл соединения формулы (I) также образует аспект настоящего изобретения. Во избежание неясности, термин «со-кристалл (или сокристалл)» относится к многокомпонентной системе, в которой имеются молекула или молекулы хозяина - активного фармацевтического ингредиента (API) и молекула или молекулы гостя (или коформера). В сокристалле, и молекула API, и молекула гостя (или коформера) по отдельности существуют в виде твердого вещества при комнатной температуре, когда они находятся в своей чистой форме (чтобы отличать сокристалл от сольватов или гидратов). Соли, в которых происходит значительный или полный обмен протонами между молекулой API и молекулой гостя, исключены из этого конкретного определения. В сокристалле, молекулы API и коформера взаимодействуют посредством образования водородных связей и возможно других нековалентных взаимодействий. Фармацевтически приемлемые коформеры включают электронейтральные молекулы, такие как никотинамид, резорцин и ксиленолы, равно как и ионизируемые молекулы, такие как щавелевая кислота, 3,5-дигидроксибензойная кислота и изохинолин (при этом степень обмена протонами является определяющей в отношение того, образуется ли соль или сокристалл). Можно отметить, что сокристалл сам может образовывать сольваты, включая гидраты.

Кроме этого следует понимать, что подходящий фармацевтически приемлемый сольват соединения формулы (I) также образует аспект настоящего изобретения. Подходящим фармацевтически приемлемым сольватом является, например, гидрат, как например полугидрат, моногидрат, дигидрат или тригидрат, или его альтернативное количество.

Кроме этого следует понимать, что подходящее фармацевтически приемлемое пролекарство соединения формулы (I) также образует аспект настоящего изобретения. Соответственно, соединения по изобретению можно вводить в форме пролекарства, представляющего собой соединение, которое распадается в организме человека или животного с высвобождением соединения по изобретению. Пролекарство можно применять для изменения физических свойств и/или фармакокинетических свойств соединения по изобретению. Пролекарство может образовываться, если соединение по изобретению содержит подходящую группу или подходящий заместитель, к которой (которому) может присоединяться группа, модифицирующая какое-либо свойство. Примеры пролекарств включают расщепляемые in vivo производные сложных эфиров, которые могут образовываться по карбоксильной группе в соединении формулы (I).

Соответственно, настоящее изобретение включает те соединения формулы (I), как определено выше, которые становятся доступными посредством органического синтеза и которые становятся доступными в организме человека или животного в результате расщепления их пролекарственной формы. Соответственно, настоящее изобретение включает те соединения формулы (I), которые получают методами органического синтеза, а также те соединения, которые образуются в организме человека или животного в ходе метаболизма соединения-предшественника, то есть соединение формулы (I) может представлять собой полученное синтетическим путем соединение или полученное метаболическим путем соединение.

Подходящим фармацевтически приемлемым пролекарством соединения формулы (I) является пролекарство, которое, согласно обоснованному медицинскому мнению считается подходящим для введения в организм человека или животного без нежелательных фармакологических активностей и без чрезмерной токсичности.

Различные формы пролекарства описаны, например, в следующих документах:

а) Methods in Enzymoloqy, Vol. 42, p. 309-396, под ред. K. Widder и др. (Academic Press, 1985);

б) Design of Pro-drugs, под ред. H. Bundgaard, (Elsevier, 1985);

в) A Textbook of Drug Design and Development, под ред. Krogsgaard-Larsen и H. Bundgaard, Chapter 5 "Design and Application of Pro-drugs", by H. Bundgaard p.113-191 (1991);

г) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992);

д) H. Bundgaard ef al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988);

е) N. Kakeya et al., Chem. Pharm. Bull. 32, 692 (1984);

ж) Т. Higuchi and V. Stella, "Pro-drugs as Novel Delivery Systems", A.C.S. Symposium Series, Volume 14; и

з) E. Roche (редактор), "Bioreversible Carriers in Drug Design", Pergamon Press, 1987.

Подходящим фармацевтически приемлемым пролекарством соединения формулы (I), которое имеет карбоксильную группу, является, например, его сложный эфир, расщепляемый in vivo. Расщепляемым in vivo сложным эфиром соединения формулы (I), содержащего карбоксильную группу, является, например, фармацевтически приемлемый сложный эфир, который расщепляется в организме человека или животного с получением исходной кислоты. В случае карбоксильной группы подходящие фармацевтически приемлемые сложные эфиры включают (1-6С)алкиловые эфиры, такие как метиловый, этиловый и трет-бутиловый, (1-6С)алкоксиметиловые эфиры, такие как метоксиметиловые эфиры, (1-6С)алканоилоксиметиловые эфиры, такие как пивалоилоксиметиловые эфиры, 3-фталидиловые эфиры, (3-8С)циклоалкилкарбонилокси-(1-6С)алкиловые эфиры, такие как циклопентилкарбонилоксиметиловый и 1-циклогексил-карбонилоксиэтиловый эфиры, 2-оксо-1,3-диоксоленилметиловые эфиры, такие как 5-метил-2-оксо-1,3-диоксолен-4-илметиловые эфиры, и (1-6С)алкоксикарбонилокси-(1-6С)алкиловые эфиры, такие как метоксикарбонилоксиметиловый и 1-метоксикарбонилоксиэтиловый эфиры.

Подходящим фармацевтически приемлемым пролекарством соединения формулы (I), которое имеет карбоксильную группу, является, например, расщепляемый in vivo амид, такой как N-C_1-6алкил- и N,N-ди-(C_1-6алкил)амид, например N-метил-, N-этил-, N-пропил-, N,N-диметил-, N-этил-N-метил- или N,N-диэтиламид.

Действия in vivo соединения формулы (I) могут проявляться частично посредством одного или более метаболитов, которые образуются в организме человека или животного после введения соединения формулы (I). Как указано ранее, действия in vivo соединения формулы (I) также могут проявляться в процессе метаболизма соединения-предшественника (пролекарства).

Из in vitro систем клеток человека были идентифицированы две изомерные формы активного метаболита соединения из примера 1, которые показаны ниже (при этом данные изомеры являются диастереомерными соединениями вследствие существования обеих конфигураций при атоме углерода, отмеченном *), и синтез обоих изомеров приведен в данном описании в примерах 14А и B:

Помимо этого, считается, что приведенное ниже соединение представляет собой активный метаболит у некоторых видов, например у мышей:

Такие активные метаболиты образуют дополнительные независимые аспекты изобретения.

Во избежание неясности следует понимать, что там, где в данном описании группа квалифицируется как «ранее определенная» или «определенная ранее», указанная группа охватывает первое упоминаемое и самое широкое определение, а также каждое и все конкретные определения для этой группы.

Конкретные новые соединения по изобретению включают, например, соединения формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соли, где, если не указано иное, каждый из R¹ и R² имеет любое из значений, определенных ранее или в приведенных ниже утверждениях.

Согласно одному из аспектов R¹ представляет собой водород. Согласно другому аспекту R¹ представляет собой фтор.

Согласно одному из аспектов R² представляет собой водород. Согласно другому аспекту R² представляет собой фтор.

Согласно одному из аспектов оба R¹ и R² представляют собой водород. Согласно другому аспекту оба R¹ и R² представляют собой фтор. Согласно другому аспекту R¹ представляет собой водород, a R² представляет собой фтор.

Согласно одному из аспектов R³ представляет собой водород. Согласно другому аспекту R³ представляет собой метил.

Согласно одному из аспектов R⁴ представляет собой водород, a R⁵ представляет собой фтор. Согласно другому аспекту R⁵ представляет собой водород, a R⁴ представляет собой фтор.

Конкретными соединениями по изобретению являются, например, соединения формулы (I), раскрытые в Примерах, которые приведены далее.

Например, конкретным соединением по изобретению является соединение формулы (I), выбранное из любого соединения, приведенного ниже:

(Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты;

(Е)-3-(4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты;

(Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-((S)-3-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты;

(Е)-3-(4-((1R,3R)-2-((S)-3-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты;

(Е)-3-(3,5-дифтор-4-(2-((S)-3-фтор-2-метилпропил)-3,3-диметил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты;

(Е)-3-(3,5-дифтор-4-(2-(2-фтор-2-метилпропил)-3,3-диметил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты;

(Е)-3-(4-(2-((S)-3-фтор-2-метилпропил)-3,3-диметил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты;

(Е)-3-(4-(2-(2-фтор-2-метилпропил)-3,3-диметил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты;

(Е)-3-(3-фтор-4-(2-((S)-3-фтор-2-метилпропил)-3,3-диметил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты;

или его фармацевтически приемлемая соль.

Другим конкретным соединением по изобретению является соединение формулы (I), выбранное из любого соединения, приведенного ниже:

(Е)-3-(4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты;

(Е)-3-(4-((1R,3R)-2-((S)-3-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты;

(Е)-3-(3,5-дифтор-4(1R)-(2-((S)-3-фтор-2-метилпропил)-3,3-диметил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты;

(Е)-3-(3,5-дифтор-4(1R)-(2-(2-фтор-2-метилпропил)-3,3-диметил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты;

(Е)-3-(4(1R)-(2-((S)-3-фтор-2-метилпропил)-3,3-диметил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты;

(Е)-3-(4(1R)-(2-(2-фтор-2-метилпропил)-3,3-диметил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты;

(Е)-3-(3-фтор-4(1R)-(2-((S)-3-фтор-2-метилпропил)-3,3-диметил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты; и

(Е)-3-[4-[(1R,3R)-1-дейтеро-2-(2-фтор-2-метил-пропил)-3-метил-4,9-дигидро-3Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил]-3,5-дифтор-фенил]проп-2-еновой кислоты; или его фармацевтически приемлемая соль.

Конкретной фармацевтически приемлемой солью по изобретению является (1R,3R)-1-{4-[(Е)-2-карбоксиэтенил]-2,6-дифторфенил}-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-бета-карболин-2-ия малеат.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложен способ получения соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли. Подходящий способ проиллюстрирован следующими репрезентативными вариантами способа, в которых, если не указано иное, R¹-R⁵ принимают любое из значений, определенных ранее. Необходимые исходные вещества могут быть получены по стандартным методикам органической химии. Получение таких исходных веществ описано вместе со следующими далее репрезентативными вариантами способа и в сопроводительных примерах. Альтернативно, необходимые исходные вещества получают по методикам, аналогичным приведенным с целью иллюстрации, которые известны специалисту в области органической химии.

Соединения формулы (I) подходящим образом получают путем гидролиза сложноэфирного производного формулы (II), где R⁶ представляет собой (1-6С)алкил, такой как метил. Гидролиз подходящим образом осуществляют в присутствии основания, например, с использованием гидроксида натрия в подходящем растворителе (таком как водный THF (тетрагидрофуран) и МеОН (или другой аналогичный спирт) или таком как водный спирт, например водный изопропанол) и при подходящей температуре, подходящим образом, комнатной температуре.

Соединения формулы (II) могут быть получены, например:

а) в результате взаимодействия соединения формулы (III) с соединением формулы (IV) в условиях, известных в данной области техники как подходящие для реакций Пикте-Шпенглера (как например, в присутствии кислоты (такой как уксусная кислота) и в подходящем растворителе (например, толуоле) и при подходящей температуре (такой как 80°С)); или

б) в результате взаимодействия соединения формулы (V) с соединением формулы (VI), где LG представляет собой уходящую группу, известную в данной области техники, такую как галогенид или трифторметансульфонат (трифлат), подходящим образом трифлат, в присутствии основания (например, аминного основания, такого как N-этил-N-изопропилпропан-2-амин) и подходящего полярного растворителя (такого как диоксан) при подходящей температуре (например, от комнатной температуры до 90°С).

Соединения формулы (III) могут быть получены в результате взаимодействия соединения формулы (VII) с соединением формулы (VI) в условиях, которые описаны выше для взаимодействия соединений формул (V) и (VI).

Соединения формулы (IV) могут быть получены в результате взаимодействия соединения формулы (VIII) со сложным алкилакрилатным эфиром (таким как метилакрилат, если R⁶ представляет собой метил) в условиях, известных в данной области техники для реакции Хека; то есть в присутствии арилфосфина (например, три-о-толилфосфина), палладиевого катализатора (такого как ацетат палладия(II)) и основания (такого как триэтиламин) в подходящем растворителе (таком как DMA (диметилацетамид)) и при подходящей температуре (например, 80°С).

Соединения формулы (V) могут быть получены в результате взаимодействия соединения формулы (VII) с соединением формулы (IV) с использованием условий, аналогичных описанным для взаимодействия приведенных выше соединений формул (III) и (IV).

Соединения формулы (VI), где LG представляет собой трифлат, могут быть получены так, как показано ниже на схемах 1 и 2. Другое соединение формулы (VI), где LG представляет собой группу, отличную от трифлата, могут быть получены аналогичными способами, известными в данной области техники.

Схема 1

Стадия 1: фторирующий агент, например N,N-диэтил-1,1,2,3,3,3-гексафторпропан-1-амин/DCM(дихлорметан)/КТ(комнатная температура), затем восстанавливающий агент, например алюмогидрид лития/THF/KT.

Стадия 2: трифторметансульфоновый ангидрид/основание, например 2,6-лутидин/ОСМ/0°С.

Схема 2

Стадия 1: восстанавливающий агент, например алюмогидрид лития/эфир/0°С.

Стадия 2: трифторметансульфоновый ангидрид/основание, например 2,6-лутидин/DCM/-10°С.

Соединения формулы (I) являются хиральными. Специалисту будет очевидно, что для получения желаемых изомеров можно использовать стереоизбирательные взаимодействия. Альтернативно, соотношение стереоизомеров (стереохимию) можно откорректировать подходящим образом, например, путем эпимеризации цис-изомеров в транс-изомеры посредством подкисления промежуточного соединения с защищенной аминогруппой, как проиллюстрировано в данном изобретении в примере 4 (и описано, например, в J. Org. Chem., 2009, 74, 2771-2779).

Согласно другому аспекту изобретения предложен способ получения соединения формулы (I), включающий гидролиз соединения формулы (II), подходящим образом в присутствии основания.

Следует понимать, что также возможны другие изменения стадий способа в описанных выше вариантах способа.

Следует понимать, что при необходимости любое соединение формулы (I), полученное любым из способов, изложенных ранее, может быть преобразовано в другое соединение формулы (I).

Когда требуется фармацевтически приемлемая соль соединения формулы (I), ее можно получить, например, путем взаимодействия указанного соединения с подходящим основанием.

Когда требуется фармацевтически приемлемое пролекарство соединения формулы (I), его можно получить с использованием традиционной методики. Например, расщепляемый in vivo сложный эфир соединения формулы (I) может быть получен, например, путем взаимодействия соединения формулы (I), содержащего карбоксильную группу, с фармацевтически приемлемым спиртом. Дополнительная информация по пролекарствам приведена ранее.

Также будет очевидно, что в некоторых из упомянутых ранее реакций необходимой или желательной может оказаться защита всех чувствительных групп в соединениях. Случаи, где необходима или желательна защита, и подходящие для этого методы известны специалистам в данной области техники. В соответствии с общепринятой практикой можно использовать традиционные защитные группы (для иллюстрации см. T.W. Green, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, 1991). Так, если реагенты включают такие группы, как амино, карбокси или гидрокси, может оказаться желательным защитить данную группу в некоторых из упомянутых в данном описании реакций.

Подходящей защитной группой для амино- или алкиламиногруппы является, например, ацильная группа, например алканоильная группа, такая как ацетил, алкоксикарбонильная группа, например метоксикарбонильная, этоксикарбонильная или трет-бутоксикарбонильная группа, арилметоксикарбонильная группа, например бензилоксикарбонильная, или ароильная группа, например бензоильная. Условия удаления защиты для вышеупомянутых защитных групп, несомненно, меняются в зависимости от выбора защитной группы. Так, например, ацильная группа, такая как алканоильная или алкоксикарбонильная группа, или ароильная группа могут быть удалены, например путем гидролиза в присутствии подходящего основания, такого как гидроксид щелочного металла, например гидроксид лития или натрия. Альтернативно, ацильная группа, такая как трет-бутоксикарбонильная группа, может быть удалена, например, путем обработки подходящей кислотой, такой как соляная, серная или фосфорная кислота либо трифторуксусная кислота, арилметоксикарбонильная группа, такая как бензилоксикарбонильная группа, может быть удалена, например, путем гидрирования над катализатором, таким как палладий-на-угле, или путем обработки кислотой Льюиса, например трис(трифторацетатом) бора. Подходящей альтернативной защитной группой для первичной аминогруппы является, например, фталоильная группа, которая может быть удалена путем обработки алкиламином, например диметиламинопропиламином, или гидразином.

Подходящей защитной группой для гидроксильной группы является, например, ацильная группа, например алканоильная группа, такая как ацетил, ароильная группа, например бензоил, или арилметильная группа, например бензил. Условия удаления защиты для вышеупомянутых защитных групп, несомненно, будут меняться в зависимости от выбора защитной группы. Так, например, ацильная группа, такая как алканоильная или ароильная группа, может быть удалена, например, путем гидролиза в присутствии подходящего основания, такого как гидроксид щелочного металла, например гидроксид лития или натрия. Альтернативно, арилметильная группа, такая как бензильная группа, может быть удалена, например, путем гидрирования над катализатором, таким как палладий-на-угле.

Подходящей защитной группой для карбоксильной группы является, например, этерифицирующая группа, например метильная или этильная группа, которая может быть удалена, например, путем гидролиза в присутствии основания, такого как гидроксид натрия, или, например, трет-бутильная группа, которая может быть удалена, например, путем обработки кислотой, например органической кислотой, такой как трифторуксусная кислота, или, например, бензильная группа, которая может быть удалена, например, путем гидрирования над катализатором, таким как палладий-на-угле.

Защитные группы можно удалить на любой соответствующей стадии синтеза, применяя традиционные методы, хорошо известные в области химии.

Некоторые из промежуточных соединений (например, соединения формул II, III, IV, V, VI, VII и VIII, в частности, соединения формулы II, III и/или V) определенных в данном описании, являются новыми, и они предложены в качестве следующего признака данного изобретения.

Биологические анализы

Приведенные далее анализы использовали для измерения эффектов соединений по настоящему изобретению.

Анализ связывания с ERα

Способность соединений связываться с выделенным лиганд-связывающим доменом рецептора эстрогенов альфа (ERальфа-LBD (GST (глутатион-3-трансфераза))) оценивали в конкурентных анализах с использованием метода резонансного переноса энергии флуоресценции с временным разрешением (TR-FRET) с детекцией по конечной точке (LanthaScreen™). Для анализа LanthaScreen с применением TR-FRET с детекцией по конечной точке приобретали у Invitrogen подходящий флуорофор (Fluormone ES2, код продукта Р2645) и рекомбинантный лиганд-связывающий домен рецептора эстрогенов альфа человека (код продукта PV4543) и использовали для измерения связывания с соединениями. Принцип анализа состоит в том, что ERальфa-LBD (GST) добавляют к флуоресцентному лиганду с образованием комплекса рецептор/флуорофор. Меченное тербием антитело (Ab) к GST (код продукта PV3551) используют для осуществления непрямого мечения рецептора в результате связывания с его GST-меткой, и детекцию конкурентного связывания осуществляют по способности тестируемых соединений вытеснять флуоресцентный лиганд, что приводит к потере сигнала TR-FRET между Tb-антителом к GST и индикатором. Данный анализ проводили, как описано ниже, при этом добавление всех реагентов выполняли с использованием рабочей станции для микрожидкостных систем BioRAPTR FRD от Beckman Coulter:

1) с помощью акустического диспенсера добавить по 120 нл раствора тестируемого соединения в используемые в анализе черные 384-луночные планшеты с лунками малого объема;

2) приготовить раствор 1х ERальфa-LBD/Tb-Ab к GST в буфере для скрининга по ES2 и выполнить инкубирование в течение 20 минут;

3) перед применением добавить 1х флуорофор к раствору 1х ERaльфa-LBD/Tb-Ab к GST;

4) внести по 12 мкл реагента 1х AR-LBD/Tb-Ab к GST/флуорофор в каждую лунку используемого в анализе планшета;

5) закрыть используемый в анализе планшет для защиты реагентов от света и испарения и выполнить инкубирование при комнатной температуре в течение 1 часа;

6) осуществить возбуждение флуоресценции излучением при 337 нм и провести измерение сигнала эмиссии флуоресценции для каждой лунки при 490 нм и 520 нм, используя PheraSTAR от BMG.

Соединения вносили непосредственно из микропланшета с исходными растворами соединений, содержащего соединения в серийных разведениях (4 лунки, содержащие соединения в конечной концентрации 10 мМ, 0,1 мМ, 1 мкМ и 10 нМ, соответственно), в микропланшет для анализа, используя Echo 550 от Labcyte. Echo 550 представляет собой устройство для дозирования жидкостей, в котором применяется основанная на акустических волнах технология для осуществления непосредственных переносов из-микропланшета-в-микропланшет растворов соединений в DMSO (диметилсульфоксид), и эта система может быть запрограммирована для переноса большого числа проб соединений небольшого объема (нл) из разных лунок планшета с исходными растворами соединений с целью получения в этом анализе желаемого серийного разведения соединений, которые затем наполняют для нормирования концентрации DMSO во всем диапазоне разведений. В общей сложности в каждую лунку добавляли по 120 нл соединения плюс DMSO, и соединения тестировали в формате концентрация-ответ по 12 точкам в диапазоне конечных концентраций соединений 100; 29,17; 10,42; 2,083; 1; 0,292; 0,104; 0,02083; 0,01; 0,002917; 0,001042; 0,0001 мкМ, соответственно. Данные TR-FRET в формате доза-ответ, полученные для каждого соединения, экспортировали в подходящий пакет программ (такой как Origin или Genedata) для проведения анализа с приненением аппроксимации кривых. Конкурентное связывание с ERальфa выражали в виде величины IC₅₀. Ее определяли, рассчитывая концентрацию соединения, необходимую для получения уменьшения на 50% связывания меченого соединения с ER альфа-LBD.

Анализ отрицательной регуляции ER в MCF-7

Способность соединений отрицательно регулировать численность рецепторов эстрогенов (ER) оценивали в основанном на использовании клеток иммунофлуоресцентном анализе с применением линии клеток протоковой карциномы молочной железы человека MCF-7. Клетки MCF-7 реактивировали непосредственно из криофлакона (приблизительно 5×10⁶ клеток) в среде для анализа (модифицированной Дульбекко среде Игла (DMEM) без фенолового красного (Sigma D5921), содержащей 2 мМ L-глутамин и 5% (об./об.) фетальной телячьей сыворотки, обработанной активированным углем/декстраном). Клетки вводили с помощью шприца один раз, используя стерильную иглу калибра 18G×1,5 дюйма (1,2×40 мм) широкого спектра применения, и плотность клеток измеряли, используя счетчик Коултера (Beckman). Клетки разбавляли далее в среде для анализа до плотности 3,75×10⁴ клеток в одном мл и добавляли по 40 мкл на одну лунку в черные, обработанные для культур тканей 384-луночные планшеты с прозрачным дном (Costar, №3712), используя Thermo Scientific Matrix WellMate или Thermo Multidrop. После посева клеток планшеты инкубировали в течение ночи при 37°C, 5% CO₂ (вращающийся инкубатор от Liconic). Данные тестирования получали, используя устройство для переформирования смесей (compound reformatter) Echo®, модель 555, от LabCyte, которое является частью автоматизированного производственного модуля (объединенного производственного модуля Echo 2). Чтобы сформировать 384-луночный планшет для дозирования соединений (Labcyte, Р-05525-CV1), использовали концентрированные 10 мМ растворы тестируемых соединений. По 40 мкл каждого из концентрированных 10 мМ растворов соединений вносили в лунки первого квадранта и затем выполняли постадийные серийные разведения 1:100 в DMSO, используя устройство для дозирования жидкостей Hydra II (MATRIX, UK) с получением по 40 мкл разбавленных растворов соединения в лунках 2 (0,1 мМ), 3 (1 мкМ) и 4 (0,01 мкМ) квадрантов, соответственно. В лунки ряда Р планшета с исходными растворами соединений вносили по 40 мкл DMSO для нормирования концентрации DMSO во всем диапазоне доз. Чтобы заполнить контрольные лунки, в планшет с исходными растворами соединений в лунки ряда O1 добавляли по 40 мкл DMSO, а в лунки ряда O3 добавляли по 40 мкл 100 мкМ Faslodex® в DMSO. В Echo 550 применяется основанная на акустических волнах технология для осуществления непосредственных переносов из-микропланшета-в-микропланшет растворов соединений в DMSO в используемые в анализе планшеты. Эта систему можно запрограммировать для переноса между микропланшетами проб объемом всего лишь 2,5 нл с многократными приращениями дозы, и тем самым можно получать серийное разведение соединения в лунках используемого в анализе планшета, которые затем наполняют для нормирования концентрации DMSO во всем диапазоне разведений. В планшеты с клетками вносили соединения из планшета с исходными растворами соединений, подготовленного, как описано выше, с получением 12 дублированных проб в диапазоне доз от 3 мкМ до 3 пМ с применением 3-кратных разведений и одной пробы в конечном 10-кратном разведении, используя объединенный производственный модуль Echo 2. В контрольные лунки для получения максимального сигнала вносили DMSO, получая конечную концентрацию 0,3%, а в контрольные лунки для получения минимального сигнала вносили Faslodex®, получая конечную концентрацию 100 нМ, соответственно. Далее планшеты инкубировали в течение 18-22 часов при 37°С, 5% CO₂ и затем фиксировали путем добавления 20 мкл 11,1%-ного (об./об.) раствора формальдегида (в забуференном фосфатом физиологическом растворе (PBS)), получая конечную концентрацию формальдегида 3,7% (об./об.). Клетки фиксировали при комнатной температуре в течение 20 мин, после чего промывали дважды, используя 250 мкл смеси PBS/ProClin (PBS с биоцидным консервантом), используя устройство для промывки планшетов от BioTek, затем во все лунки добавляли по 40 мкл смеси PBS/ProClin и планшеты хранили при 4°С. Описанный выше метод фиксирования осуществляли на объединенном производственном модуле Echo 2. Иммуноокрашивание проводили с использованием автоматизированного производственного модуля AutoElisa. Смесь PBS/ProClin отсасывали из всех лунок и клетки подвергали пермеабилизации, используя 40 мкл PBS, содержащего 0,5% Tween™ 20 (об./об.), в течение 1 часа при комнатной температуре. Планшеты трижды промывали, используя по 250 мкл смеси PBS/0,05% (об./об.) твина 20 с ProClin (PBST с биоцидным консервантом) и затем добавляли по 20 мкл раствора кроличьего моноклонального антитела к ERα (SP1) (Thermofisher) в разведении 1:1000 в смеси PBS/Tween™/3% (масс./об.) бычьего сывороточного альбумина. Планшеты инкубировали в течение ночи при 4°С (вращающийся инкубатор от Liconic) и затем трижды промывали, используя по 250 мкл смеси PBS/0,05% (об./об.) Tween™ 20 с ProClin (PBST). Затем планшеты инкубировали после добавления по 20 мкл/лунка антител козы к IgG кролика, конъюгированных с AlexaFluor 594, или антител козы к IgG кролика, конъюгированных с AlexaFluor 488 (Molecular Probes), с красителем Хехст (Hoechst) в разведении 1:5000 в смеси PBS/Tween™/3% (масс./об.) бычьего сывороточного альбумина в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем планшеты трижды промывали, используя по 250 мкл смеси PBS/0,05% (об./об.) Tween™ 20 с ProClin (PBST с биоцидным консервантом). В каждую лунку добавляли по 20 мкл PBS, планшеты закрывали крышкой для черных планшетов и хранили при 4°C, после чего прочитывали. Планшеты прочитывали с использованием Cellomics ArrayScan, определяя флуоресценцию на 594 нм (момент времени 24 ч) или на 488 нм (момент времени 5 ч) для измерения уровня рецептора ERα в каждой лунке. Среднее значение общей интенсивности нормировали на количество клеток, получая значение общей интенсивности от одной клетки. Данные экспортировали в подходящий пакет программ (такой как Origin) для проведения анализа с приненением аппроксимации кривых. Отрицательную регуляцию рецептора ERα выражали в виде величины IC₅₀, и ее определяли, рассчитывая концентрацию соединения, которая была необходима для получения уменьшения на 50% среднего значения максимальной общей интенсивности сигнала.

Хотя, как и ожидалось, фармакологические свойства соединений формулы (I) меняются в зависимости от структурных изменений, в большинстве случаев активность, которой обладают соединения формулы (I), может быть продемонстрирована для приведенных ниже концентраций или доз в одном или более чем одном из приведенных выше тестов.

Приведенные ниже данные получали для соединений из примеров (приведенные ниже данные могут быть результатом одного эксперимента или представлять собой среднее значение для многократно повторенных экспериментов).

Проводимое in vivo на ксенотрансплантатах MCF-7 исследование соединения из примера 1 в виде единственного агента и в комбинации с ингибитором mTOR (мишень рапамицина у млекопитающих)

Клетки MCF7 (5×10⁶ клеток, суспендированных в 100 мкл питательной среды RPMI (среда 1640 от Мемориального института Розуэлла Парка (Roswell Park Memorial Institute))) имплантировали подкожно в задний пах мышам с тяжелым комбинированным иммунодефицитом (SCID); спустя одни сутки каждой мыши хирургическим путем имплантировали гранулу эстрогена 0,5 мг с высвобождением в течение 21 суток (Innovative Research, USA). Опухоли измеряли два раза в неделю, и изменения в объеме опухолей и ингибировании роста определяли с помощью измерения двусторонним штангенциркулем (длина × ширина), при этом за длину принимали наибольший диаметр по всей опухоли, а за ширину - соответствующий перпендикуляр. Объем опухолей рассчитывали, используя формулу (длина × ширина) × √ (длина × ширина) × (π/6).

Опухоли измеряли через 13 суток после имплантации клеток, чтобы иметь возможность провести рандомизацию мышей в тестируемых группах. Обработку соединениями начинали на следующие сутки (т.е. через 14 суток после имплантации клеток).

Ингибитор mTOR AZD2014 вводили перорально (п.о.) разным группам мышей в дозе 15 мг/кг один раз в сутки ежедневно в объеме 0,1 мл на 10 г. Соединение из примера 1 вводили перорально в дозе 5 мг/кг один раз в сутки в объеме 0,1 мл/10 г. Одной группе животных в качестве контроля вводили п.о. разбавитель. По девять мышей на одну группу использовали для групп с введением активных агентов и для контрольной группы.

Данные, полученные в этом исследовании, показаны на Фиг. 10.

Эффект комбинации соединения формулы (I) с ингибитором РI3Кα/δ можно исследовать аналогично тому, как описано выше для комбинации с ингибитором mTOR.

Исследование эффективности на ксенотрансплантатах НСС1428 после длительной эстрогенной депривации (НСС1428 LTED)

По окончании подходящего периода клеточного культивирования LTED-клетки НСС1428 (1×10⁶) имплантировали подкожно в задний пах самок мышей NSG с ослабленным иммунитетом (Jackson Labs, USA), которых подвергали овариэктомии. Опухоли измеряли два раза в неделю, и изменения в объеме опухолей и ингибировании роста определяли с помощью измерения двусторонним штангенциркулем (длина × ширина), при этом за длину принимали наибольший диаметр по всей опухоли, а за ширину - соответствующий перпендикуляр. Объем опухолей рассчитывали, используя формулу (длина × ширина) × √ (длина × ширина) × (π/6). Опухоли измеряли один раз в неделю после имплантации клеток, пока средний размер не достигал 150 мм³, тогда мышей разделяли на рандомизированные тестируемые группы, при этом каждая группа содержала по 10 мышей. Обработку соединениями начинали на следующие сутки (62-е сутки в этом исследовании) и опухоли продолжали измерять один раз в неделю. Соединение из примера 1 вводили перорально (п.о.) в дозе 25 мг/кг один раз в сутки ежедневно в объеме 0,1 мл на 10 г. Другой группе животных в качестве контроля вводили п.о. разбавитель.

По окончании 28 суток введения обработанные разбавителем контрольные опухоли выросли в среднем на 220 мм³ (согласно среднегеометрическим значениям), в то время как опухоли у мышей, обработанных соединением из примера 1, уменьшились в размере на 46 мм³, что составляет ингибирование опухолевого роста на 121% (P<0,001 согласно t-критерию Стьюдента для непарных выборок).

Чтобы провести измерение уровней рецептора эстрогенов по белку в ксенотрансплантатных опухолях, отбирали образцы опухолей через 24 ч после заключительного введения разбавителя или соединения из примера 1 и мгновенно замораживали в жидком азоте. Чтобы экстрагировать белки, фрагменты опухоли добавляли к 700 мкл буфера для экстракции из клеток (Invitrogen, FNN0011) с добавлением ингибиторов фосфатаз от Sigma (№2 (Р5726) и 3 (Р0044) в разведении 1 к 100) и полного коктейля ингибиторов протеаз от Roche (11836145001) (1 таблетка на 50 мл), 1 мМ дитиотреита (DTT) в пробирки для образцов емкостью 2 мл, помещенные в воду со льдом. Гомогенизацию образца проводили, используя Mixer/Mill (уровень 27/с) и 3 цикла гомогенизации по 2 мин. Образцы центрифугировали в течение короткого промежутка времени, чтобы удостовериться в завершении гомогенизации опухолей. Гомогенат обрабатывали ультразвуком в течение 10 секунд и затем центрифугировали на высокоскоростной центрифуге (13000 об/мин) в течение 15 мин. Измеряли уровни белка в супернатанте и приблизительно по 45 мкг белка вносили в 15 лунок для разделения на гелях в бис-трис-буферной системе (гелях с градиентом 4-12%), используя стандартные методы. После разделения белков и переноса на нитроцеллюлозный фильтр добавляли антитело к альфа-пептиду (68 кДа) рецептора эстрогенов (ThermoFisher, SP1, №9101S), разбавленное 1:400 в смеси молоко/PBS/T, и инкубировали в течение ночи при 4°С. Фильтр промывали 3×5 мин приблизительно в 20 мл TBS/0,05% Т, добавляли вторичное детектирующее анти-кроличье антитело, разбавленное 1:2000 в 5%-ном молоке Marvel в TBS/T (забуференный трисом физиологический раствор/твин), и инкубировали в течение 1 ч при КТ. Детекцию сигнала осуществляли, используя хемилюминесцентный субстрат с увеличенной продолжительностью хемилюсценции SuperSignal West Dura, и выполняли количественное определение, используя программное обеспечение Syngene. Уровни белка винкулина измеряли в качестве контроля нагрузки, используя антитело V931 от Sigma, разбавленное 1:10000 в Marvel, и детектирующее анти-мышиное антитело. Результаты, приведенные на Фиг. 11 и 12, показывают, что уменьшение уровней ER на 60% наблюдали после обработки соединением из примера 1 относительно разбавителя как контроля.

Согласно другому аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, которые определены ранее, вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.

Подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты для композиции в форме таблетки включают, например, инертные разбавители, гранулирующие и разрыхляющие агенты, связывающие вещества, смазывающие вещества, консерванты и антиоксиданты. Другим подходящим фармацевтически приемлемым эксципиентом может быть хелатирующий агент. Композиции в форме таблетки могут быть без оболочки или покрыты оболочкой либо для модификации их распадаемости и последующего всасывания активного ингредиента в желудочно-кишечном тракте, либо для улучшения их стабильности и/или внешнего вида, в любом случае с использованием традиционных покрывающих агентов и методик, хорошо известных в данной области техники.

Композиции для перорального применения, альтернативно, могут быть представлены в форме твердых желатиновых капсул, в которых активный ингредиент смешан с инертным твердым разбавителем, или в форме мягких желатиновых капсул, в которых активный ингредиент смешан с водой или маслом.

Водные суспензии обычно содержат активный ингредиент в тонкоизмельченной форме вместе с одним или более чем одним суспендирующим агентом, диспергирующим или увлажняющим агентом. Водные суспензии также могут содержать один или более консервантов, антиоксидантов, красителей, корригентов и/или подсластителей.

Масляные суспензии могут быть изготовлены путем суспендирования активного ингредиента в растительном масле или минеральном масле. Кроме того, масляные суспензии также могут содержать загуститель. Для обеспечения приятного на вкус препарата для перорального приема можно добавить такие подсластители, как указанные выше, и корригенты. В эти композиции в качестве консерванта может быть добавлен антиоксидант.

Диспергируемые порошки и гранулы, подходящие для приготовления водной суспензии путем добавления воды, обычно содержат активный ингредиент вместе с диспергирующим или увлажняющим агентом, суспендирующим агентом и одним или более консервантами. Также могут присутствовать такие дополнительные эксципиенты, как подсластители, корригенты и красители.

Фармацевтические композиции по изобретению также могут быть представлены в форме эмульсий типа масло-в-воде. Масляной фазой может быть растительное масло или минеральное масло либо смесь любого из них. Эмульсии также могут содержать подсластители, корригенты и консерванты.

Сиропы и эликсиры могут быть изготовлены с использованием подсластителей и также могут содержать уменьшающее раздражение средство, консервант, корригент и/или краситель.

Фармацевтические композиции также могут быть представлены в форме стерильной водной или масляной суспензии для инъекций, которая может быть изготовлена согласно известным методикам с использованием одного или более чем одного соответствующего диспергирующего или увлажняющего агента и суспендирующего агента, которые упомянуты выше. Стерильный препарат для инъекций также может представлять собой стерильный раствор или стерильную суспензию для инъекций в нетоксичной приемлемой для парентерального введения системе разбавителей или растворителей.

Композиции для введения путем ингаляции могут быть представлены в форме традиционного находящегося под давлением аэрозоля, приспособленного для распределения активного ингредиента, либо в виде аэрозоля, содержащего тонкоизмельченное твердое вещество, либо в виде жидких капель. Можно использовать традиционные пропелленты для аэрозолей, как например, летучие фторированные углеводороды или углеводороды, и аэрозольное устройство удобным образом приспособлено для распределения отмеренного количества активного ингредиента. Сухие порошковые ингаляторы также могут быть приемлемы.

Для дополнительной информации по технологии изготовления лекарственных средств читатель отсылается к главе 25.2 тома 5 «Комплексной медицинской химии» (Comprehensive Medicinal Chemistry; Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press, 1990.

Согласно одному из аспектов изобретения описанная выше фармацевтическая композиция содержит соединение из примера 1 ((Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловую кислоту) или его фармацевтически приемлемую соль. Подходящим образом соединение из примера 1 представлено в виде своего полиморфа, описанного в данном изобретении как кристаллическая Форма В.

Для способа синтеза (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты, представленного в примере 1, рекомендуется его проведение при отсутствии освещения и в атмосфере азота, чтобы избежать образования продукта разложения

Упомянутый продукт разложения, который представляет собой (R,E)-3-(3,5-дифтор-4-(2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-4,9-дигидро-3Н-пиридо[3,4-b]индол-2-ий-1-ил)фенил)акрилат, имеет следующую структуру:

и считается, что он может образовываться из соединения примера 1 ((Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты) в результате автоокисления на воздухе по свободнорадикальному механизму роста цепи. Во избежание неясности, считается, что этот продукт разложения не обладает существенной активностью в качестве SERD.

Это соединение также можно обозначить как (Е)-3-[3,5-дифтор-4-[(3R)-2-(2-фтор-2-метил-пропил)-3-метил-4,9-дигидро-3Н-пиридо[3,4-b]индол-2-ий-1-ил]фенил]проп-2-еноат, и способ синтеза для его получения приведен в примере 13.

Специалисту будет очевидно, что контроль процесса образования продуктов разложения является существенной мерой обеспечения безопасного производства и хранения фармацевтических средств. Кроме того, специалисту очевидно, что некоторые соединения могут разлагаться при хранении даже после изготовления их в составе фармацевтической композиции, и что такое разложение в некоторых случаях можно регулировать путем применения соответствующих эксципиентов в фармацевтической композиции и/или путем соответствующего упаковывания конечного продукта. Специалисту также будет очевидно, что окончательная композиция, разработанная для коммерческого применения, должна быть оптимизирована по ряду характеристик, включая химическую стабильность, и также включая, например, характеристики, относящиеся к физической стабильности и растворимости. Следовательно, такие композиции будут разработаны с соблюдением баланса ряда разных факторов.

Соответственно, композиции на основе (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли включают в себя соединение, действующее в качестве антиоксиданта.

Соединения-антиоксиданты, которые подходят для применения в фармацевтических композициях, известны в данной области техники и включают, например, ацетона-бисульфит натрия; альфа-липоевую кислоту; альфа-токоферол; аскорбиновую кислоту; аскорбилпальмитат; бутил-гидроксианизол; бутил-гидрокситолуол; каротины; моногидрат лимонной кислоты; додецилгаллат; эриторбовую кислоту; фумаровую кислоту; глутатион; гистидин; гипофосфористую кислоту; лактобионовую кислоту; липоевую кислоту; яблочную кислоту; мелатонин; метионин; d-маннозу; монотиоглицерин; октилгаллат; метабисульфит калия; пропионовую кислоту; пропилгаллат; аскорбат натрия; бисульфит натрия; формальдегидсульфоксилат натрия; метабисульфит натрия; сульфит натрия; тиосульфат натрия; хлорид олова; двуокись серы; тимол; токоферол; токотриенолы; убихинол; мочевую кислоту; витамин Е и полиэтиленгликольсукцинат витамина Е. Такие соединения могут проявлять свое антиоксидантное действие посредством разнообразных механизмов, и один или более из этих механизмов могут быть более эффективными по сравнению с другими в случае любого конкретного соединения. Некоторые соединения-антиоксиданты, такие как ВНА (бутилгидроксианизол), действуют как поглотители свободных радикалов. Другие антиоксиданты, такие как метабисульфит натрия и аскорбиновая кислота, легко окисляются и поэтому скорее могут быть подвергнуты окислению, чем активный ингредиент.

Например, если в механизм окисления вовлечено индуцируемое металлами образование перекисей, то применение хелатирующего агента, такого как, например, EDTA (этилендиаминтетрауксусная кислота), может быть полезным для удаления любых примесей металлов и тем самым для достижения непосредственно эффекта стабилизации. В данной области техники известны и другие металл-хелатирующие агенты, и они включают, например, натриевую соль сульфобутилового эфира бетадекса; ацетат кальция; моногидрат лимонной кислоты; циклодекстрины; эдетат динатрия; эдетовую кислоту; фумаровую кислоту; галактозу; глутаминовую кислоту; гистидин; гидроксипропилбетадекс; яблочную кислоту; триамин пентауксусной кислоты; фитохелатин; поли(метилвиниловый эфир/малеиновый ангидрид); цитрат калия; дигидрат цитрата натрия; двухосновный фосфат натрия; одноосновный фосфат натрия; винную кислоту и трегалозу.

Например, в типичные композиции на основе соединения из примера 1 включали пропилгаллат, метабисульфит натрия, аскорбиновую кислоту и бутил-гидроксианизол. Также включали EDTA. Пример такого изготовления композиций приведен в примере 12. Среди них композиции, содержащие метабисульфит натрия, оказались менее стабильными, чем композиции без какого-либо антиоксиданта, после четырех недель хранения в условиях различных температур и влажности. Композиции, содержащие аскорбиновую кислоту, оказались самыми стабильными спустя 4 недели хранения в условиях различных температур и влажности (что определено в анализе с использованием жидкостной хроматографии, например, UHPLC (ультра высокоэффективная жидкостная хроматография)).

Другие подходящие вспомогательные вещества для композиций, содержащих соединение из примера 1, включают эксципиенты с низким содержанием металлов, эксципиенты с низким содержанием перекисей, такие эксципиенты, как маннит, представляющий собой поглотитель свободных радикалов, а также наполнитель. Способ изготовления такой композиции также может влиять на стабильность. Например, что касается некоторых активных ингредиентов, то обеспечение тщательного перемешивания активного ингредиента с обуславливающими стабильность эксципиентами может быть важным фактором обеспечения максимальной стабильности. На результат тщательного перемешивания могут влиять, например, скорость перемешивания, размеры частиц и процессы влажного или сухого смешивания/гранулирования. Активный ингредиент можно подвергнуть гранулированию вместе с антиоксидантом и затем смешать с другими эксципиентами. Антиоксиданты также можно добавлять в любую оболочку, покрывающую фармацевтическую композицию снаружи.

Согласно одному из аспектов изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль вместе по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.

Согласно одному из аспектов изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль и также содержащая антиоксидант. Соответственно, в качестве антиоксиданта можно использовать аскорбиновую кислоту.

Согласно одному из аспектов изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль и также содержащая металл-хелатирующий агент. Соответственно, в качестве металл-хелатирующего агента можно использовать EDTA.

Согласно другому аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль вместе по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем, причем композиция содержит менее 5% (масс./масс.) (R,Е)-3-(3,5-дифтор-4-(2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-4,9-дигидро-3Н-пиридо[3,4-b]индол-2-ий-1-ил)фенил)акрилата.

Согласно другому аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтop-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль вместе по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем, причем композиция содержит менее 2% (масс./масс.) (R,Е)-3-(3,5-дифтор-4-(2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-4,9-дигидро-3Н-пиридо[3,4-b]индол-2-ий-1-ил)фенил)акрилата.

Согласно другому аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтop-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль вместе по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем, причем композиция содержит менее 1% (масс./масс.) (R,Е)-3-(3,5-дифтор-4-(2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-4,9-дигидро-3Н-пиридо[3,4-b]индол-2-ий-1-ил)фенил)акрилата.

Согласно другому аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтop-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль вместе по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем, причем композиция содержит менее 0,5% (масс./масс.) (R,Е)-3-(3,5-дифтор-4-(2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-4,9-дигидро-3Н-пиридо[3,4-b]индол-2-ий-1-ил)фенил)акрилата.

Согласно другому аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтop-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль вместе по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем, причем композиция содержит менее 0,1% (масс./масс.) (R,Е)-3-(3,5-дифтор-4-(2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-4,9-дигидро-3Н-пиридо[3,4-b]индол-2-ий-1-ил)фенил)акрилата.

Согласно другому аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая (Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтop-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль вместе по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем, причем композиция содержит менее 0,05% (масс./масс.) (R,Е)-3-(3,5-дифтор-4-(2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-4,9-дигидро-3Н-пиридо[3,4-b]индол-2-ий-1-ил)фенил)акрилата.

В упомянутых выше аспектах, в тех случаях, когда композиция описана как содержащая менее 5% (масс./масс.), 2% (масс./масс.), 1% (масс./масс.), 0,5% (масс./масс.), 0,1% (масс./масс.) или 0,05% (масс./масс.) (R,E)-3-(3,5-дифтор-4-(2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-4,9-дигидро-3Н-пиридо[3,4-b]индол-2-ий-1-ил)фенил)акрилата, специалисту будет понятно, что это подразумевает значение, приведенное в процентах по массе, в сравнении с (Е)-3-(3,5-дифтop-4-((1R,3R)-2-(2-фтop-2-мeтилпpoпил)-3-мeтил-2,3,4,9-тeтpaгидpo-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловой кислотой, присутствующей в этой композиции.

Таким образом, продукт разложения (R,Е)-3-(3,5-дифтор-4-(2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-4,9-дигидро-3Н-пиридо[3,4-b]индол-2-ий-1-ил)фенил)акрилат может быть использован в качестве маркера сравнения или стандарта сравнения в таких аналитических методах, как HPLC, с целью мониторинга стабильности соединения из примера 1 или содержащих его фармацевтических композиций.

Количество активного ингредиента, комбинированного с одним или более чем одним эксципиентом для изготовления лекарственной формы для разового введения, обязательно будет меняться в зависимости от подвергаемого лечению пациента и конкретного пути введения. Например, для перорального введения людям обычно необходимо, например, от 1 мг до 2 г подлежащего введению активного агента (более приемлемо от 100 мг до 2 г, например, от 250 мг до 1,8 г, как например, от 500 мг до 1,8 г, в частности, от 500 мг до 1,5 г, подходящим образом от 500 мг до 1 г) в смеси с соответствующим и удобным количеством эксципиентов, которое может изменяться от примерно 3 до примерно 98 процентов от массы всей композиции. Будет очевидно, что в случае необходимости в большой дозировке может потребоваться много лекарственных форм, например две или более таблеток или капсул, содержащих активный ингредиент в дозе, удобно поделенной между ними. В типичном случае, стандартные лекарственные формы будут содержать примерно от 10 мг до 0,5 г соединения по данному изобретению, хотя стандартная лекарственная форма может содержать до 1 г. Подходящим образом твердая лекарственная форма для разового введения может содержать от 1 до 300 мг активного ингредиента.

Размер дозы соединений по настоящему изобретению с точки зрения терапевтических или профилактических целей будет непременно меняться в зависимости от природы и тяжести болезненного состояния, возраста и пола животного или пациента и пути введения, согласуясь с хорошо известными принципами медицины.

В случае применения соединений по настоящему изобретению для терапевтических или профилактических целей обычно его будут вводить так, чтобы получить суточную дозу в диапазоне, например, от 1 мг/кг до 100 мг/кг массы тела, введенную при необходимости разделенными дозами. В общем случае, при использовании парентерального пути будут введены более низкие дозы. Так, например, в случае внутривенного введения обычно будет применена доза в диапазоне, например, от 1 мг/кг до 25 мг/кг массы тела. Подобно этому, в случае введения посредством ингаляции будет применена доза в диапазоне, например, от 1 мг/кг до 25 мг/кг массы тела. Однако пероральное введение, в частности в форме таблетки, является предпочтительным.

Согласно одному из аспектов изобретения соединения по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемые соли вводят в виде таблеток, содержащих от 10 мг до 100 мг соединения формулы (I) (или его фармацевтически приемлемой соли), при этом одну или более таблеток вводят так, как необходимо для достижения желаемой дозы.

Как указано выше, известно, что передача сигнала посредством ERα является причиной онкогенеза путем оказания одного или более действий по опосредованию пролиферации раковых и других клеток, опосредованию ангиогенных событий и опосредованию подвижности, миграции и инвазивности раковых клеток. Авторы изобретения обнаружили, что соединения по настоящему изобретению обладают сильной противоопухолевой активностью, которая, как полагают, возникает в результате антагонизма и отрицательной регуляции ERα, вовлеченного в стадии передачи сигнала, приводящие к пролиферации и выживаемости опухолевых клеток и инвазивной и миграционной способности метастазирующих опухолевых клеток.

Соответственно, соединения по настоящему изобретению могут быть полезны в качестве противоопухолевых агентов, в частности в качестве селективных ингибиторов пролиферации, выживаемости, подвижности, распространения и инвазивности раковых клеток млекопитающих, обуславливая ингибирование опухолевого роста и выживаемости и ингибирование роста метастатической опухоли. В частности, соединения по настоящему изобретению могут быть полезны в качестве антипролиферативных и антиинвазивных агентов для сдерживания распространения и/или лечения солидного опухолевого заболевания. В частности, соединения по настоящему изобретению могут быть полезны в предупреждении или лечении тех опухолей, которые чувствительны к ингибированию ERα и которые вовлечены в стадии передачи сигнала, приводящие к пролиферации и выживаемости опухолевых клеток и миграционной способности и инвазивности метастазирующих опухолевых клеток. Кроме того, соединения по настоящему изобретению могут быть полезны для предупреждения или лечения тех опухолей, воздействие на которые опосредовано исключительно или частично антагонизмом и отрицательной регуляцией ERα, т.е. соединения можно использовать для получения эффекта ингибирования ERα у теплокровного животного, нуждающегося в таком лечении.

Согласно другому аспекту изобретения предложены соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль, которые определены ранее, для применения в качестве лекарственного средства у теплокровного животного, такого как человек.

Согласно другому аспекту изобретения предложены соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль, которые определены ранее, для применения в получении антипролиферативного эффекта у теплокровного животного, такого как человек.

Согласно другому аспекту изобретения предложены соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль, которые определены ранее, для применения у теплокровного животного, такого как человек, в качестве антиинвазивного агента для сдерживания распространения и/или лечения солидного опухолевого заболевания.

Согласно другому аспекту изобретения предложено применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, которые определены ранее, для получения антипролиферативного эффекта у теплокровного животного, такого как человек.

Согласно другому аспекту изобретения предложено применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, которые определены ранее, в изготовлении лекарственного средства для применения у теплокровного животного, такого как человек, в качестве антиинвазивного агента для сдерживания распространения и/или лечения солидного опухолевого заболевания.

Согласно другому аспекту изобретения предложен способ получения антипролиферативного эффекта у теплокровного животного, такого как человек, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному животному эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено ранее.

Согласно другому аспекту изобретения предложен способ получения антиинвазивного эффекта посредством сдерживания распространения и/или лечения солидного опухолевого заболевания у теплокровного животного, такого как человек, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному животному эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено ранее.

Согласно другому аспекту изобретения предложен способ предупреждения или лечения рака у теплокровного животного, такого как человек, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному животному эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено ранее.

Согласно другому аспекту изобретения предложено применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, которые определены ранее, в изготовлении лекарственного средства для применения в предупреждении или лечении солидного опухолевого заболевания у теплокровного животного, такого как человек.

Согласно другому аспекту изобретения предложен способ предупреждения или лечения солидного опухолевого заболевания у теплокровного животного, такого как человек, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному животному эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено ранее.

Согласно другому аспекту изобретения предложены соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль, которые определены ранее, для применения в предупреждении или лечении тех опухолей, которые чувствительны к ингибированию ERα, вовлеченных в стадии передачи сигнала, приводящие к пролиферации, выживаемости, инвазивности и миграционной способности опухолевых клеток.

Согласно другому аспекту изобретения предложено применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, которые определены ранее, в изготовлении лекарственного средства для применения в предупреждении или лечении тех опухолей, которые чувствительны к ингибированию ERα, вовлеченных в стадии передачи сигнала, приводящие к пролиферации, выживаемости, инвазивности и миграционной способности опухолевых клеток.

Согласно другому аспекту изобретения предложен способ предупреждения или лечения тех опухолей, которые чувствительны к ингибированию ERα, вовлеченных в стадии передачи сигнала, приводящие к пролиферации, выживаемости, инвазивности и миграционной способности опухолевых клеток, включающий введение указанному животному эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено ранее.

Согласно другому аспекту изобретения предложены соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль, которые определены ранее, для применения в получении эффекта ингибирования ERα.

Согласно другому аспекту изобретения также предложен способ получения эффекта ингибирования ERα, включающий введение эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено ранее.

Согласно другому аспекту изобретения также предложен способ получения эффекта, селективного в отношении ингибирования ERα, включающий введение эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено ранее.

В данном изобретении описаны соединения, которые могут связываться с лиганд-связывающим доменом ERα и которые являются селективными веществами, способствующими деградации рецепторов эстрогенов. Согласно биохимическим и основанным на использовании клеток анализах показано, что соединения по настоящему изобретению являются эффективными связывающимися с рецепторами эстрогенов веществами, и что они снижают уровни ERα в клетках и поэтому могут быть использованы в лечении эстроген-чувствительных заболеваний или состояний (включая заболевания, при лечении которых развивается устойчивость к эндокринным терапиям), т.е. использованы для применения в лечении рака молочной железы и гинекологических раковых заболеваний (включая рак эндометрия, яичников и шейки матки) и раковых опухолей, экспрессирующих белки с мутацией по ERα, которые могут содержать de novo мутации или в которых мутации могут возникать в результате предшествующего лечения с использованием эндокринной терапии, как например, ингибитора ароматазы.

Согласно другому аспекту изобретения предложены соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль, которые определены в данном описании ранее, для применения в лечении рака молочной железы или гинекологических раковых заболеваний.

Согласно другому аспекту изобретения предложены соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль, которые определены в данном описании ранее, для применения в лечении рака молочной железы, эндометрия, яичника или шейки матки.

Согласно другому аспекту изобретения предложены соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль, которые определены в данном описании ранее, для применения в лечении рака молочной железы, при котором у данного рака развивается устойчивость к одной или более чем одной другой эндокринной терапии.

Согласно другому аспекту изобретения предложен способ лечения рака молочной железы или гинекологических раковых заболеваний, включающий введение эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено ранее.

Согласно другому аспекту изобретения предложен способ лечения рака молочной железы, эндометрия, яичника или шейки матки, включающий введение эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено ранее.

Согласно другому аспекту изобретения предложен способ лечения рака молочной железы, включающий введение эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено ранее.

Согласно другому аспекту изобретения предложен способ лечения рака молочной железы, при котором у данного рака развивается устойчивость к одной или более чем одной другой эндокринной терапии, включающий введение эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено ранее.

Согласно другому аспекту изобретения предложено применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, которые определены в данном описании ранее, в изготовлении лекарственного средства для применения в лечении рака молочной железы или гинекологических раковых заболеваний.

Согласно другому аспекту изобретения предложено применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, которые определены в данном описании ранее, в изготовлении лекарственного средства для применения в лечении рака молочной железы, эндометрия, яичника или шейки матки.

Согласно другому аспекту изобретения предложено применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, которые определены в данном описании ранее, в изготовлении лекарственного средства для применения в лечении рака молочной железы, при котором у данного рака развивается устойчивость к одной или более чем одной другой эндокринной терапии.

Согласно одному признаку данного изобретения подлежащий лечению рак представляет собой рак молочной железы. Согласно другому аспекту этого признака рак молочной железы является раком, положительным (+ve) по рецептору эстрогенов (ER+ve). В одном из воплощений этого аспекта соединение формулы (I) вводят в комбинации с другим противораковым средством, таким как антигормональный агент, как определено здесь.

Согласно другому аспекту изобретения предложен способ лечения ER+ve рака молочной железы, включающий введение эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено ранее.

Как указано ранее, эффекты, оказываемые соединением формулы (I) in vivo, частично могут быть обусловлены одним или более метаболитами, которые образуются в организме человека или животного после введения соединения формулы (I).

Таким образом, согласно настоящему изобретению также предположен способ ингибирования ER-α у пациента, включающий введение пациенту количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, эффективного для ингибирования ER-α у пациента.

Во всех приведенных выше применениях и способах подходящим соединением формулы (I) является соединение из примера 1 или его фармацевтически приемлемая соль. Согласно одному из аспектов соединение из примера 1 находится в кристаллической форме В, как изложено в данном описании.

В лечении рака, определенном в данном описании, можно применять монотерапию или можно, помимо введения соединения по изобретению, включать проведение стандартных хирургических операций, лучевую терапию или химиотерапию. Такая химиотерапия может включать введение одного или более противоопухолевых агентов следующих категорий:

(1) другие антипролиферативные/антинеопластические лекарственные средства и их комбинации, которые применяют в терапевтической онкологии, такие как алкилирующие агенты (например, цисплатин, оксалиплатин, карбоплатин, циклофосфамид, азотистый иприт, мелфалан, хлорамбуцил, бусульфан, темозоламид и нитрозомочевины); антиметаболиты (например, гемцитабин и антифолаты, такие как фторпиримидины типа 5-фторурацила и тегафура, ралтитрексед, метотрексат, цитозинарабинозид и гидроксимочевина); противоопухолевые антибиотики (например, антрациклины, такие как адриамицин, блеомицин, доксорубицин, дауномицин, эпирубицин, идарубицин, митомицин-С, дактиномицин и митрамицин); антимитотические агенты (например, алкалоиды барвинка, такие как винкристин, винбластин, виндезин и винорелбин, и таксоиды, такие как таксол и таксотер, и ингибиторы полокиназы); и ингибиторы топоизомеразы (например, эпиподофиллотоксины, такие как этопозид и тенипозид, амсакрин, топотекан и камптотецин);

(2) антигормональные агенты, такие как антиэстрогены (например, тамоксифен, фулвестрант, торемифен, ралоксифен, дролоксифен и иодоксифен), прогестогены (например, мегестрола ацетат), ингибиторы ароматазы (например, такие как анастрозол, летрозол, воразол и эксеместан;

(3) ингибиторы функции факторов роста и их расположенных ниже сигнальных путей: включены Ab модуляторы к любым целевым факторам роста или рецепторам факторов роста, обзор по которым представлен в Stern et al., Critical Reviews in Oncology/Haematology, 2005, 54, pp. 11-29; также включены низкомолекулярные ингибиторы таких мишеней, например, ингибиторы киназ: примеры включают антитело к erbВ2 трастузумаб (Herceptin™), антитело к рецептору эпидермального фактора роста (EGFR) панитумумаб, антитело к EGFR цетуксимаб (эрбитукс, С225) и ингибиторы тирозинкиназ, в том числе ингибиторы erbB-семейства рецепторов, как например, ингибиторы тирозинкиназ семейства рецепторов эпидермального фактора роста (EGFR/erbB1), такие как гефитиниб или эрлотиниб, ингибиторы тирозинкиназы erb2, такие как лапатиниб, и смешанные ингибиторы erb1/2, такие как афатиниб; подобные стратегии имеются для других классов факторов роста и их рецепторов, например, ингибиторов семейства факторов роста гепатоцитов или их рецепторов, включая c-met и ron; ингибиторы инсулина и семейства инсулиноподобных факторов роста или их рецепторов (IGFR (рецептор инсулиноподобного фактора роста), IR (инсулиновый рецептор)), ингибиторов семейства факторов роста тромбоцитов или их рецепторов (PDGFR (рецептор фактора роста тромбоцитов)) и ингибиторов передачи сигнала, опосредуемой другими рецепторными тирозинкиназами, такими как c-kit, киназа анапластической лимфомы (AnLK) и рецептор колониестимулирующего фактора-1 (CSF-1R);

также включены модуляторы, направленно воздействующие на белки передачи сигнала в РI3-киназа-опосредованном сигнальном пути, например, ингибиторы изоформ РI3-киназы, таких как РI3K-α/β/γ, и ser/thr-киназ, таких как АКТ, mTOR (такие как AZD2014), РI3K-зависимая киназа (PDK), сыворотка- и глюкокортикоид-индуцибельная киназа (SGK), фосфатидилинозитол-4-киназа (PI4K) или фосфатидилинозитол-4-фосфат-5-киназа (PIP5K);

также включены ингибиторы серин/треониновых киназ, не приведенных выше, например, ингибиторы raf-киназ, такие как вемурафениб, ингибиторы киназы митоген-активируемой протеинкиназы (МЕК), такие как селуметиниб (AZD6244), ингибиторы тирозинкиназы Абельсона (Abl), такие как иматиниб или нилотиниб, ингибиторы тирозинкиназы Бруттона (Btk), такие как ибрутиниб, ингибиторы тирозинкиназы из селезенки (Syk), такие как фостаматиниб, ингибиторы аврора-киназ (например, AZD1152), ингибиторы других ser/thr-киназ, таких как янус-киназа (JAK), передатчики сигнала и активаторы транскрипции (STAT) и киназа, ассоциированная с рецептором интерлейкина-4 (IRAK4), и ингибиторы циклин-зависимых киназ, такие как палбоциклиб;

(4) модуляторы сигнальных путей повреждения ДНК, например ингибиторы поли(АДФ-рибоза)-полимеразы (PARP) (например, олапариб), ингибиторы АТР(атаксия-телеангиэктазия + Rab3-родственной)-киназы или ингибиторы атаксия-телеангиэктазия-мутированной (ATM) киназы;

(5) модуляторы апоптотического и других путей гибели клетки, такие как модуляторы Bcl-семейства (например, АВТ-263/навитоклакс, АВТ-199);

(6) антиангиогенные агенты, например агенты, ингибирующие действие сосудистого эндотелиального фактора роста (например, антитело к фактору роста эндотелиальных клеток сосудов бевацизумаб (Avastin™) и, например, ингибитор рецепторной тирозинкиназы VEGF (сосудистый эндотелиальный фактор роста), такой как сорафениб, акситиниб, пазопаниб, сунитиниб и вандетаниб, и соединения, которые действуют по другим механизмам (например, линомид, ингибиторы функции интегрина αvβ3 и ангиостатин));

(7) агенты, повреждающие сосуды, такие как комбретастатин А4;

(8) антиинвазивные агенты, например ингибиторы c-Src-киназного семейства, такие как дазатиниб (J. Med. Chem., 2004, 47, 6658-6661) и босутиниб (SKI-606), и ингибиторы металлопротеиназ, такие как маримастат, ингибиторы функции рецептора урокиназного активатора плазминогена или антитела к гепараназе;

(9) иммунотерапевтические подходы, включая, например, подходы для повышения иммуногенности опухолевых клеток пациента в условиях ex vivo и in vivo, такие как трансфекция цитокинами, такими как интерлейкин 2, интерлейкин 4 или гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор, подходы для снижения Т-клеточной анергии, подходы с использованием трансфицированных иммунных клеток, таких как трансфицированные цитокинами дендритные клетки, подходы с использованием трансфицированных цитокинами линий опухолевых клеток и подходы с использованием антиидиотипических антител. Конкретные примеры включают моноклональные антитела, направленно воздействующие на белок 1 программируемой (клеточной) смерти (PD-1) (например, BMS-936558) или цитотоксический Т-лимфоцитарный антиген 4 (CTLA4) (например, ипилимумаб и тремелимумаб);

(10) средства, используемые в антисмысловой терапии или терапии, основанной на РНК-интерференции (RNAi), например, такие, которые направлены на перечисленные выше мишени;

(11) генотерапевтические подходы, включая, например, подходы с заменой аберрантных генов, такие как подходы, касающиеся аберратного гена р53 или аберрантного гена 1 рака молочной железы (BRCA1) или BRCA2, с применением пролекарственной терапии ген-направленным ферментом (GDEPT), например, с использованием цитозиндезаминазы, тимидинкиназы или бактериального фермента нитроредуктазы, и подходы, применяемые для повышения толерантности пациента к химиотерапии или лучевой терапии, такие как терапия с использованием генов множественной лекарственной устойчивости.

Согласно этому аспекту изобретения предложена комбинация, подходящая для применения в лечении рака, содержащая соединения по настоящему изобретению, определенные в данном описании, или их фармацевтически приемлемую соль и другой противоопухолевый агент, в частности любой из противоопухолевых агентов, перечисленных выше в пунктах (1)-(11). В частности, применение противоопухолевого агента, приведенного выше в пунктах (1)-(11), представляет собой стандартное лечение для конкретного подлежащего лечению рака; специалисту в данной области техники будет понятен смысл выражения «стандартное лечение». Согласно одному из аспектов соединением по настоящему изобретению является соединение из примера 1 или его фармацевтически приемлемая соль.

Таким образом, согласно другому аспекту изобретения предложены соединения по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемая соль в комбинации с другим противоопухолевым агентом, в частности противоопухолевым агентом, выбранным из агентов, перечисленных выше в данном описании в пунктах (1)-(11).

Согласно другому аспекту изобретения предложено соединение из примера 1 ((Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловая кислота) или его фармацевтически приемлемая соль в комбинации с другим противоопухолевым агентом, в частности противоопухолевым агентом, выбранным из агентов, перечисленных выше в данном описании в пунктах (1)-(11).

Согласно другому аспекту изобретения предложены соединения по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемая соль в комбинации с другим противоопухолевым агентом, в частности противоопухолевым агентом, выбранным из агентов, перечисленных выше в пункте (1).

Согласно другому аспекту изобретения предложены соединение по настоящему изобретению, определенное в данном описании ранее, или его фармацевтически приемлемая соль и любой из противоопухолевых агентов, перечисленных выше в пункте (1).

Согласно другому аспекту изобретения предложено соединение из примера 1 или его фармацевтически приемлемая соль в комбинации с любым из противоопухолевых агентов, перечисленных выше в пункте (1).

Согласно другому аспекту изобретения предложена комбинация, подходящая для применения в лечении рака, содержащая соединения по настоящему изобретению, определенные ранее, или их фармацевтически приемлемую соль и таксоид, такой как, например, таксол или таксотер, подходящим образом таксотер. Например, подходящим соединением по изобретению в комбинации с таксоидом, таким как, например, таксол или таксотер, подходящим образом таксотер, является соединение из примера 1 или его фармацевтически приемлемая соль.

Согласно другому аспекту изобретения предложена комбинация, подходящая для применения в лечении рака, содержащая соединения по настоящему изобретению, определенные в данном описании ранее, или их фармацевтически приемлемую соль и любой из антигормональных агентов, перечисленных выше в пункте (2), например любой из антиэстрогенов, перечисленных выше в пункте (2), или, например, ингибитор ароматазы, перечисленный выше в пункте (2).

Согласно другому аспекту изобретения предложена комбинация, подходящая для применения в лечении рака, содержащая соединение из примера 1 или его фармацевтически приемлемую соль и любой из антигормональных агентов, перечисленных выше в пункте (2), например любой из антиэстрогенов, перечисленных выше в пункте (2), или, например, ингибитор ароматазы, перечисленный выше в пункте (2).

Согласно другому аспекту изобретения предложена комбинация, подходящая для применения в лечении рака, содержащая соединение из примера 1 или его фармацевтически приемлемую соль и ингибитор PI3Kα, такой как ингибиторы РI3Kα/δ, которые приведены в одной из заявок авторов настоящего изобретения, находящихся одновременно на рассмотрении патентного ведомства (РСТ), под номером PCT/GB2014/050163. Одним из примеров подходящего ингибитора PI3Kα/δ является соединение примера 3 из PCT/GB2014/050163, представляющее собой соединение 1-(4-(5-(5-амино-6-(5-трет-бутил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиразин-2-ил)-1-этил-1Н-1,2,4-триазол-3-ил)пиперидин-1-ил)-3-гидроксипропан-1-он или его фармацевтически приемлемую соль. Способ получения соединения примера 3 из PCT/GB2014/050163 приведен в ссылочном примере 1 в данном описании.

Согласно одному из аспектов вышеупомянутая комбинация соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, в частности, соединения из примера 1 или его фармацевтически приемлемой соли, с противоопухолевым агентом, перечисленным выше в пункте (2), или ингибитором mTOR (таким как AZD2014), или ингибитором PI3K-α (таким как ингибиторы PI3Kα/δ, которые приведены в одной из заявок авторов настоящего изобретения, находящихся одновременно на рассмотрении патентного ведомства (РСТ), под номером PCT/GB2014/050163, в частности, приведенное там соединение из примера 3), или палбоциклибом подходит для применения в лечении рака молочной железы или гинекологических раковых заболеваний, таких как рак молочной железы, эндометрия, яичника или шейки матки, в частности, рак молочной железы, такой как ER+ve рак молочной железы.

Там, где в данном описании используется термин «комбинация», следует понимать, что он относится к одновременному, раздельному или последовательному введению. Согласно одному из аспектов изобретения «комбинация» относится к одновременному введению. Согласно другому аспекту изобретения «комбинация» относится к раздельному введению. Согласно другому аспекту изобретения «комбинация» относится к последовательному введению. Если введение является последовательным или раздельным, то задержка во введении второго компонента не должна быть такой, чтобы привести к потере благоприятного эффекта от действия комбинации. Если комбинацию двух или более компонентов вводят раздельно или последовательно, то будет очевидно, что режим дозирования для каждого компонента может быть разным и независимым от других компонентов. Подходящим образом соединения по настоящему изобретению вводят один раз в сутки.

Согласно другому аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации с противоопухолевым агентом, выбранным из агентов, перечисленных выше в данном описании в пунктах (1)-(11), вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.

Согласно другому аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение из примера 1 ((Е)-3-(3,5-дифтор-4-((1R,3R)-2-(2-фтор-2-метилпропил)-3-метил-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-ил)фенил)акриловую кислоту) или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации с противоопухолевым агентом, выбранным из агентов, перечисленных выше в данном описании в пунктах (1)-(11), вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.

Согласно другому аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации с любым из антигормональных агентов, перечисленных выше в пункте (2), например, любым из антиэстрогенов, перечисленных выше в пункте (2), или, например, ингибитором ароматазы, перечисленным выше в пункте (2), вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.

Согласно другому аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение из примера 1 или его фармацевтически приемлемую соль и любой из антигормональных агентов, перечисленных выше в пункте (2), например любой из антиэстрогенов, перечисленных выше в пункте (2), или, например, ингибитор ароматазы, перечисленный выше в пункте (2), вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.

Согласно другому аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение из примера 1 или его фармацевтически приемлемую соль и ингибитор mTOR, такой как AZD2014 (см., например, WO 2008/023161), вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.

Согласно другому аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение из примера 1 или его фармацевтически приемлемую соль и ингибитор PI3Kα, такой как ингибиторы РI3α/δ, которые приведены в одной из заявок авторов настоящего изобретения, находящихся одновременно на рассмотрении патентного ведомства (РСТ), под номером PCT/GB2014/050163, вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем. Одним из примеров подходящего ингибитора PI3Kα/δ является соединение примера 3 из PCT/GB2014/050163, описанное ранее.

Согласно другому аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение из примера 1 или его фармацевтически приемлемую соль и палбоциклиб вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.

Согласно одному из аспектов вышеупомянутые фармацевтические композиции соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, в частности, соединения из примера 1 или его фармацевтически приемлемой соли, с противоопухолевым агентом, перечисленным выше в пункте (2), или ингибитором mTOR (таким как AZD2014), или ингибитором PI3K-α (таким как ингибиторы РI3Kα/δ, которые приведены в одной из заявок авторов настоящего изобретения, находящихся одновременно на рассмотрении патентного ведомства (РСТ), под номером PCT/GB2014/050163, в частности, приведенное там соединение из примера 3), или палбоциклибом, подходят для применения в лечении рака молочной железы или гинекологических раковых заболеваний, таких как рак молочной железы, эндометрия, яичника или шейки матки, в частности, рак молочной железы, такой как ER+ve рак молочной железы.

Согласно другому аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение из примера 1 или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации с противоопухолевым агентом, выбранным из агентов, перечисленных выше в данном описании в пунктах (1)-(11), вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем, для применения в лечении рака.

Согласно другому аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение из примера 1 или его фармацевтически приемлемую соль и ингибитор PI3Kα, такой как ингибиторы PI3Kα/δ, которые приведены в одной из заявок авторов настоящего изобретения, находящихся одновременно на рассмотрении патентного ведомства (РСТ), под номером PCT/GB2014/050163, вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем, для применения в лечении рака. Одним из примеров подходящего ингибитора РI3Kα/δ является соединение примера 3 из PCT/GB2014/050163, описанное ранее.

Согласно одному из аспектов вышеупомянутые фармацевтические композиции соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, в частности, соединения из примера 1 или его фармацевтически приемлемой соли, с противоопухолевым агентом, перечисленным в пункте (2) выше, или ингибитором mTOR (таким как AZD2014), или ингибитором PI3K-α (таким как ингибиторы РI3Kα/δ, которые приведены в одной из заявок авторов настоящего изобретения, находящихся одновременно на рассмотрении патентного ведомства (РСТ), под номером PCT/GB2014/050163, в частности, приведенное там соединение из примера 3), или палбоциклибом, подходят для применения в лечении рака молочной железы или гинекологических раковых заболеваний, таких как рак молочной железы, эндометрия, яичника или шейки матки, в частности, рак молочной железы, такой как ER+ve рак молочной железы.

Согласно другому признаку данного изобретения предложено применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с противоопухолевым агентом, выбранным из агентов, перечисленных выше в данном описании в пунктах (1)-(11), в изготовлении лекарственного средства для применения при лечении рака у теплокровного животного, такого как человек.

Согласно другому признаку данного изобретения предложено применение соединения из примера 1 или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с противоопухолевым агентом, выбранным из агентов, перечисленных выше в данном описании в пунктах (1)-(11), в изготовлении лекарственного средства для применения при лечении рака у теплокровного животного, такого как человек.

Согласно другому аспекту изобретения предложено применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с любым из антигормональных агентов, перечисленных выше в пункте (2), например, любым из антиэстрогенов, перечисленных выше в пункте (2), или, например, ингибитором ароматазы, перечисленным выше в пункте (2), в изготовлении лекарственного средства для применения в лечении рака у теплокровного животного, такого как человек.

Согласно другому аспекту изобретения предложено применение соединения из примера 1 или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с любым из антигормональных агентов, перечисленных выше в пункте (2), например, любым из антиэстрогенов, перечисленных выше в пункте (2), или, например, ингибитором ароматазы, перечисленным выше в пункте (2), в изготовлении лекарственного средства для применения в лечении рака у теплокровного животного, такого как человек.

Согласно другому аспекту изобретения предложено применение соединения из примера 1 или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с ингибитором mTOR, таким как AZD2014 (см., например, WO 2008/023161), в изготовлении лекарственного средства для применения в лечении рака у теплокровного животного, такого как человек.

Согласно другому аспекту изобретения предложено применение соединения из примера 1 или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с ингибитором PI3Kα, таким как ингибиторы Р13Kα/δ, которые приведены в одной из заявок авторов настоящего изобретения, находящихся одновременно на рассмотрении патентного ведомства (РСТ), под номером PCT/GB2014/050163, в изготовлении лекарственного средства для применения в лечении рака у теплокровного животного, такого как человек. Одним из примеров подходящего ингибитора PI3Kα/δ является соединение примера 3 из PCT/GB2014/050163, описанное ранее.

Согласно другому аспекту изобретения предложено применение соединения из примера 1 или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с палбоциклибом в изготовлении лекарственного средства для применения в лечении рака у теплокровного животного, такого как человек.

Согласно одному из аспектов вышеупомянутые применения соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, в частности, соединения из примера 1 или его фармацевтически приемлемой соли, в комбинации с противоопухолевым агентом, перечисленным выше в пункте (2), или ингибитором mTOR (таким как AZD2014), или ингибитором PI3K-α (таким как ингибиторы РI3Kα/δ, которые приведены в одной из заявок авторов настоящего изобретения, находящихся одновременно на рассмотрении патентного ведомства (РСТ), под номером PCT/GB2014/050163, в частности, приведенное там соединение из примера 3), или палбоциклибом подходят для применения в изготовлении лекарственного средства для лечения рака молочной железы или гинекологических раковых заболеваний, таких как рак молочной железы, эндометрия, яичника или шейки матки, в частности, рак молочной железы, такой как ER+ve рак молочной железы.

Таким образом, согласно другому признаку данного изобретения предложен способ лечения рака у теплокровного животного, такого как человек, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному животному эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с противоопухолевым агентом, выбранным из агентов, перечисленных выше в данном описании в пунктах (1)-(11).

Согласно другому аспекту изобретения предложен способ лечения рака у теплокровного животного, такого как человек, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному животному эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с любым из антигормональных агентов, перечисленных выше в пункте (2), например, любым из антиэстрогенов, перечисленных выше в пункте (2), или, например, ингибитором ароматазы, перечисленным выше в пункте (2).

Согласно другому аспекту изобретения предложен способ лечения рака у теплокровного животного, такого как человек, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному животному эффективного количества соединения из примера 1 или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с любым из антигормональных агентов, перечисленных выше в пункте (2), например, любым из антиэстрогенов, перечисленных выше в пункте (2), или, например, ингибитором ароматазы, перечисленным выше в пункте (2).

Согласно другому аспекту изобретения предложен способ лечения рака у теплокровного животного, такого как человек, нуждающегося в таком лечении, включающий введение указанному животному эффективного количества соединения из примера 1 или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с ингибитором PI3Kα, таким как ингибиторы РI3Kα/δ, которые приведены в одной из заявок авторов настоящего изобретения, находящихся одновременно на рассмотрении патентного ведомства (РСТ), под номером PCT/GB2014/050163. Одним из примеров подходящего ингибитора РI3Kα/δ является соединение примера 3 из PCT/GB2014/050163, описанное ранее.

Согласно одному из аспектов вышеупомянутые способы лечения рака представляют собой способы лечения рака молочной железы или гинекологических раковых заболеваний, таких как рак молочной железы, эндометрия, яичника или шейки матки, в частности, рак молочной железы, такой как ER+ve рак молочной железы.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложен набор, содержащий соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации с противоопухолевым агентом, выбранным из агентов, перечисленных выше в данном описании в пунктах (1)-(11).

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложен набор, содержащий:

а) соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль в первой стандартной лекарственной форме;

б) противоопухолевый агент, выбранный из агентов, перечисленных выше в данном описании в пунктах (1)-(11), во второй стандартной лекарственной форме; и