Бензофуразановые антимилоидные соединения и способы - RU2641293C2

Чертежи

Показать все 7 чертежа(ей)

Описание

ПЕРЕКРЕСТНЫЕ ССЫЛКИ НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

В настоящем изобретении заявлен приоритет к предварительной заявке на патент США 61/693011, поданной 24 августа 2012 года, которая включена сюда в качестве ссылки полностью.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Образование амилоидных белков в живых тканях, состояние, известное как амилоидоз, является либо причиной, либо основным фактором в патологии многих так называемых амилоидных заболеваний, таких как болезни Альцгеймера, Паркинсона, Хантингтона и прионная болезнь. Исторически, агрегации белков классифицируются как амилоидные, если они демонстрируют светло-зеленое двойное лучепреломление в поляризованном свете при окрашивании красителями конго красным или Thioflavin T (ThT) (Sipe and Cohen, 2000, J. Struct. Biol. 130:88-98). Это определение амилоида недавно было расширено до применения к любому полипептиду, который может полимеризоваться в поперечной бета-складчатой конформации in vitro или in vivo, независимо от последовательности (Xu, 2007, Amyloid 14:119-31). Определенные типы амилоидоза могут возникать главным образом в центральной нервной системе, как, например, агрегация бета-амилоидного белка при болезни Альцгеймера, тау-белка при прогрессирующем надъядерном параличе, альфа-синуклеина при болезни Паркинсона, белка хантингтина при болезни Хантингтона, и белка приона при болезни Крейцфельдта-Якоба и других прионных болезнях. Другие типы амилоидоза являются системными по природе, как, например, при агрегации транстиретина при системном амилоидозе у пожилых людей.

Все из перечисленных выше заболеваний являются заведомо смертельными при лечении текущими медицинскими средствами. Ни для одного из этих заболеваний не имеется известной, общепринятой терапии или лечения, которые могли бы остановить и/или обратить агрегацию амилоидных отложений. Существует острая необходимость в новых методах лечения.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В общем, в одном аспекте представлены соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли:

где R₁₁ является бензиламино, N-метилбензиламино, N-метил(4-фторбензил)амино, N-метил(4-метоксибензил)амино, N-метил(3,5-диметоксибензил)амино, N-метил(пиридин-2-ил)амино, N-метил(пиридин-3-ил)амино, пиперидино, 4-метилпиперазин-1-илом, морфолино, тиоморфолино, пирролидино, 3-метилпирролидин-1-илом, 3-метоксипирролидин-1-илом, пирролидин-3-ол-1-илом, 2-(2-метанол-1-ил)пирролид-1-илом, 2-(пирролидин-1-илметил)пирролидин-1-илом, 2-(2-пропанол-2-ил)пирролидин-1-илом, изоиндолин-2-илом, 4-(пирролидин-1-ил)пиперидин-1-илом, Ν,Ν-диэтиламино, N-метил-N-этиламино, N-метил-N-изопропиламино, N-метил-N-циклопропиламино, N-метил-N-этиниламино, N-(2-метоксиэтил)-N-метиламино, N-(тиазол-2-илметил)-N-метиламино, азетидин-1-илом, 3-метил-3-ол-азетидин-1-илом, 3-(этанол-2-ил)азетидин-1-илом, 3-метоксиазетидин-1-илом, 3-гидроксиазетидин-1-илом, 3-этоксиазетидин-1-илом, 3-изопропоксиазетидин-1-илом, 3-(2-пропанол-2-ил)азетидин-1-илом, 3-(морфолинометил)азетидин-1-илом, 3-морфолиноазетидин-1-илом, 3-(пирролидин-1-ил)азетидин-1-илом, 3-(пирролидин-1-илметил)азетидин-1-илом или 3-(1-метоксиэтил)азетидин-1-илом;

R₁₃ является 3-(1-этанол-2-ил)фенилом, 3-(1-ол-2,2,2-трифторэтан-2-ил)фенилом, 2-(1-ол-2,2,2-трифторэтан-2-ил)фенилом, 4-(1-ол-2,2,2-трифторэтан-2-ил)фенилом, 3-(3-ол-оксетан-3-ил)фенилом, 3-метанонилфенилом, 3-((пиперазин-1-ил)метанон-2-ил)фенилом, 3-((морфолин-1-ил)метанон-2-ил)фенилом, 3-((пирролидин-1-ил)метанон-2-ил)фенилом, 3-((N-циклопропил)амид-2-ил)фенилом, метанонилом, трифторметанонилом, 1-ол-2,2,2-трифторэтан-2-илом, 3-ол-оксетан-3-илом, (1-ол-2,2,2-трифторэтан-2-ил)тиофен-2-илом, 1-ол-проп-2-ен-3-илом, 2-ол-бут-3-ен-4-илом или 2-ол-2-трифторметил-(1,1,1-трифтор)бут-3-ен-4-илом;

и R₁₂ и R₁₄ каждый независимо являются водородом или алкилом.

В общем, в одном аспекте представлены способы, применяемые при лечении амилоидоза. Способы включают введение пациенту терапевтического соединения в соответствии с настоящим изобретением, которое ингибирует агрегацию амилоида. Амилоидозом может быть болезнь Альцгеймера, прогрессирующий надъядерный паралич, болезнь Паркинсона, болезнь Хантингтона, прионная болезнь, старческий системный амилоидоз или некоторые другие системные или центральные нервные системные амилоидозы.

В общем, в одном аспекте представлены фармацевтические композиции для лечения амилоидоза. Фармацевтические композиции включают терапевтическое соединение в соответствии с настоящим изобретением в количестве, эффективном для ингибирования агрегации амилоида и фармацевтически приемлемый наполнитель или носитель.

Согласно вышесказанному, настоящее изобретение также относится к фармацевтически приемлемым солям, стереоизомерам, полиморфам, метаболитам, аналогам и пролекарствам соединений, и к любым их сочетаниям.

Учитывая вышесказанное и другие преимущества и характеристики настоящего изобретения, которые далее станут очевидными, природа настоящего изобретения может быть более четко понята из представленного ниже подробного описания настоящего изобретения и формулы изобретения.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

На фиг. 1 показан анализ агрегации бета-амилоида для соединения в соответствии с настоящим изобретением.

На фиг. 2 показан анализ агрегации бета-амилоида для соединения в соответствии с настоящим изобретением.

На фиг. 3 показан анализ агрегации тау для соединения в соответствии с настоящим изобретением.

На фиг. 4 показан анализ агрегации тау для соединения в соответствии с настоящим изобретением.

На фиг. 5 показан анализ агрегации тау для соединения в соответствии с настоящим изобретением.

На фиг. 6 показан анализ агрегации тау для соединения в соответствии с настоящим изобретением.

На фиг. 7 показан анализ агрегации тау для соединения в соответствии с настоящим изобретением.

ОПИСАНИЕ

Все патенты, заявки на патенты и другие публикации, приведенные здесь в качестве ссылок, включены сюда в качестве ссылок полностью.

В одном варианте представлены соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли:

где R₁₁ выбирают из группы, включающей бензиламино, N-метилбензиламино, N-метил(4-фторбензил)амино, N-метил(4-метоксибензил)амино, N-метил(3,5-диметоксибензил)амино, N-метил(пиридин-2-ил)амино, N-метил(пиридин-3-ил)амино, пиперидино, 4-метилпиперазин-1-ил, морфолино, тиоморфолино, пирролидино, 3-метилпирролидин-1-ил, 3-метоксипирролидин-1-ил, пирролидин-3-ол-1-ил, 2-(2-метанол-1-ил)пирролид-1-ил, 2-(пирролидин-1-илметил)пирролидин-1-ил, 2-(2-пропанол-2-ил)пирролидин-1-ил, изоиндолин-2-ил, 4-(пирролидин-1-ил)пиперидин-1-ил, Ν,Ν-диэтиламино, N-метил-N-этиламино, N-метил-N-изопропиламино, N-метил-N-циклопропиламино, N-метил-N-этиниламино, N-(2-метоксиэтил)-N-метиламино, N-(тиазол-2-илметил)-N-метиламино, азетидин-1-ил, 3-метил-3-ол-азетидин-1-ил, 3-(этанол-2-ил)азетидин-1-ил, 3-метоксиазетидин-1-ил, 3-гидроксиазетидин-1-ил, 3-этоксиазетидин-1-ил, 3-изопропоксиазетидин-1-ил, 3-(2-пропанол-2-ил)азетидин-1-ил, 3-(морфолинометил)азетидин-1-ил, 3-морфолиноазетидин-1-ил, 3-(пирролидин-1-ил)азетидин-1-ил, 3-(пирролидин-1-илметил)азетидин-1-ил и 3-(1-метоксиэтил)азетидин-1-ил;

R₁₃ выбирают из группы, включающей 3-(1-этанол-2-ил)фенил, 3-(1-ол-2,2,2-трифторэтан-2-ил)фенил, 2-(1-ол-2,2,2-трифторэтан-2-ил)фенил, 4-(1-ол-2,2,2-трифторэтан-2-ил)фенил, 3-(3-ол-оксетан-3-ил)фенил, 3-метанонилфенил, 3-((пиперазин-1-ил)метанон-2-ил)фенил, 3-((морфолин-1-ил)метанон-2-ил)фенил, 3-((пирролидин-1-ил)метанон-2-ил)фенил, 3-((N-циклопропил)амид-2-ил)фенил, метанонил, трифторметанонил, 1-ол-2,2,2-трифторэтан-2-ил, 3-олоксетан-3-ил, (1-ол-2,2,2-трифторэтан-2-ил)тиофен-2-ил, 1-олпроп-2-ен-3-ил, 2-олбут-3-ен-4-ил и 2-ол-2-трифторметил-(1,1,1-трифтор)бут-3-ен-4-ил;

и R₁₂ и R₁₄ каждый независимо являются водородом или алкилом. В некоторых вариантах R₁₁ выбирают из группы, включающей бензиламино, N-метилбензиламино, N-метил(4-фторбензил)амино, пирролидино, изоиндолин-2-ил и 4-(пирролидин-1-ил)пиперидин-1-ил; и R₁₃ выбирают из группы, включающей 3-(1-этанол-2-ил)фенил и 3-(1-ол-2,2,2-трифторэтан-2-ил)фенил.

В одном варианте представлен способ лечения амилоидного заболевания у пациента, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения в соответствии с настоящим изобретением пациенту. В некоторых вариантах амилоидным заболеванием является болезнь Альцгеймера. В некоторых вариантах амилоидным заболеванием является болезнь Паркинсона. В некоторых вариантах амилоидным заболеванием является болезнь Хантингтона.

В одном варианте представлена фармацевтическая композиция, содержащая соединение в соответствии с настоящим изобретением и фармацевтически приемлемый носитель.

Полагают, что соединения в соответствии с настоящим изобретением ингибируют агрегацию амилоидного белка. Данные, подтверждающие это заключение, представлены в примерах ниже.

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Если не указано иначе, термины, применяемые в описании, имеют следующие определения, представленные ниже.

Термины "введение" или "вводить" соединение означает предоставление соединения в соответствии с настоящим изобретением индивидууму в форме, которая может быть введена в тело индивидуума в количестве, эффективном для профилактики, лечения или диагностики, если применимо. Такие формы могут включать, например, пероральные лекарственные формы, лекарственные формы для инъекций, чрезкожные лекарственные средства, лекарственные средства для ингаляций и ректальные лекарственные формы.

Термин "алкокси" в данном описании означает алкильную группу, такую как определена здесь, присоединенную к основной молекулярной группе через атом кислорода. Типовые примеры алкокси включают, но не ограничены ими, метокси, этокси, пропокси, 2-пропокси, бутокси, трет-бутокси, пентилокси и гексилокси.

Термин "алкил" в данном описании означает прямую или разветвленную углеводородную цепь, содержащую от 1 до 20 атомов углерода, предпочтительно от 1 до 10 атомов углерода, более предпочтительно 1, 2, 3, 4, 5 или 6 атомов углерода. Типовые примеры алкила включают, но не ограничены ими, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, изобутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, неопентил, н-гексил, 3-метилгексил, 2,2-диметилпентил, 2,3-диметилпентил, н-гептил, н-октил, н-нонил и н-децил.

Термин "карбонил" в данном описании означает группу -C(=O)-.

Термин "карбокси" в данном описании означает группу -COOH, которая может быть защищена группой сложного эфира: -COO-алкил.

Термин "фтор" в данном описании означает -F.

Термин "гало" или "галоген" в данном описании означает Cl, Br, I или F.

Термин "гетероарил" в данном описании относится к ароматическому кольцу, содержащему один или более гетероатомов, независимо выбранных из азота, кислорода или серы, или его таутомеру. Такие кольца могут быть моноциклическими или бициклическими, как описано ниже. Гетероарильные кольца соединены с основной молекулярной группой через атом углерода иди азота.

Термины "гетероарил" или "5- или 6-членное гетероарильное кольцо" в данном описании относятся к 5- или 6-членным ароматическим кольцам, содержащим 1, 2, 3 или 4 гетероатома, выбранных из азота, кислорода или серы, или их таутомерам. Примеры таких колец включают, но не ограничены ими, кольцо, в котором один атом углерода замещен атомом O; или одним, двумя или тремя атомами N, сгруппированными подходящим образом для получения ароматического кольца; или кольцо, в котором два атома углерода в кольце замещены атомом O или S и одним атомом N. Такие кольца могут включать, но не ограничены ими, шестичленное ароматическое кольцо, в котором от одного до четырех атомов углерода в кольце замещены атомами азота, пятичленные кольца, содержащие серу, кислород или азот в кольце; пятичленные кольца, содержащие от одного до четырех атомов азота; и пятичленные кольца, содержащие кислород или серу и от одного до трех атомов азота. Типовые примеры 5-6-членных гетероарильных колец включают, но не ограничены ими, фурил, имидазолил, изоксазолил, изотиазолил, оксазолил, пиразинил, пиразолил, пиридазинил, пиридинил, пиримидинил, пирролил, тетразолил, [1,2,3]тиадиазолил, [1,2,3]оксадиазолил, тиазолил, тиенил, [1,2,3]триазинил, [1,2,4]триазинил, [1,3,5]триазинил, [1,2,3]триазолил и [1,2,4]триазолил.

Гетероарильные группы в соответствии с настоящим изобретением могут быть замещены водородом или алкилом. Моноциклические гетероарильные или 5- или 6-членные гетероарильные кольца замещены 0, 1, 2, 3, 4 или 5 заместителями. Гетероарильные группы в соответствии с настоящим изобретением могут присутствовать в виде таутомеров.

Термин "гидрокси" в данном описании означает группу -OH.

Если не указано иначе, термин "пролекарство" охватывает фармацевтически приемлемые сложные эфиры, карбонаты, тиокарбонаты, производные N-ацила, производные N-ацилоксиалкила, четвертичные производные третичных аминов, основания N-Манниха, основания Шиффа, конъюгаты аминокислоты, сложные эфиры фосфата, соли металлов и сложные эфиры сульфонатов соединений, описанных здесь. Примеры пролекарств включают соединения, которые содержат биогидролизуемую часть (например, биогидролизуемый амид, биогидролизуемый карбамат, биогидролизуемый карбонат, биогидролизуемый сложный эфир, биогидролизуемый фосфат или биогидролизуемый уреидный аналог). Пролекарства описанных здесь соединений очевидны и могут быть легко получены специалистами в данной области техники. См., например, Design of Prodrugs, Bundgaard, A. Ed., Elseview, 1985; Bundgaard, hours., "Design and Application of Prodrugs," A Textbook of Drug Design and Development, Krosgaard-Larsen and hours. Bundgaard, Ed., 1991, Chapter 5, p. 113-191; и Bundgaard, hours., Advanced Drug Delivery Review, 1992, 8, 1-38.

Если не указано иначе, термин "защищающая группа" или "защитная группа" при применении относительно части молекулы, подверженной химической реакции, означает химическую группу, которая не является реакционно-способной в условиях данной химической реакции и которая может быть удалена для получения группы, которая является реакционно-способной в данных условиях. Защищающие группы хорошо известны в данной области техники. См., например, Greene, T. W. and Wuts, P.G.M., Protective Groups in Organic Synthesis (3rd ed., John Wiley & Sons: 1999); Larock, R. C., Comprehensive Organic Transformations (2nd ed., John Wiley & Sons: 1999). Некоторые примеры включают бензил, дифенилметил, тритил, Cbz, Boc, Fmoc, метоксикарбонил, этоксикарбонил и фталимидо. Защитные группы включают, например, азотные защитные группы и гидроксизащитные группы.

Термин "сульфонил" в данном описании означает группу -S(O)₂-.

Термин "тиоалкокси" в данном описании означает алкильную группу, описанную здесь, присоединенную к основной молекулярной группе через атом серы. Типовые примеры тиоалкокси включают, но не ограничены ими, метилтио, этилтио и пропилтио.

Соединения в соответствии с настоящим изобретением могут применяться в виде фармацевтически приемлемых солей, полученных из неорганических или органических кислот. Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны в данной области техники. Для ясности, термин "фармацевтически приемлемые соли" в данном описании, в общем, относится к солям, полученным из фармацевтически приемлемых нетоксичных кислот или оснований, включая неорганические кислоты или основания и органические кислоты или основания. Подходящие фармацевтически приемлемые основно-аддитивные соли включают металлические соли, полученные из алюминия, кальция, лития, магния, калия, натрия и цинка, или органические соли, полученные из лизина, Ν,Ν'-дибензилэтилендиамина, хлоропрокаина, холина, диэтаноламина, этилендиамина, меглумина (N-метилглюкамина) и прокаина. Подходящие нетоксичные кислоты включают неорганические и органические кислоты, такие как уксусная, альгиновая, антраниловая, бензолсульфоновая, бензойная, камфорсульфоновая, лимонная, этенсульфоновая, муравьиная, фумаровая, фуранкарбоновая, галактуроновая, глюконовая, глюкуроновая, глутаминовая, гликолевая, бромистоводородная, хлористоводородная, изетионовая, молочная, малеиновая, яблочная, миндальная, метансульфоновая, слизевая, азотная, памовая, пантотеновая, фенилуксусная, фосфорная, пропионовая, салициловая, стеариновая, янтарная, сульфаниловая, серная, винная кислоты и п-толуолсульфоновая кислота. Типовые нетоксичные кислоты включают соляную, бромистоводородную, фосфорную, серную и метансульфоновую кислоты. Примеры конкретных солей включают гидрохлорид и мезилат. Других хорошо известны в данной области техники. См., например, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed. (Mack Publishing, Easton Pa.: 1990) и Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19th ed. (Mack Publishing, Easton Pa.: 1995). Получение и применение кислотно-аддитивных солей, карбоксилатов, аминокислотных аддитивных солей и цвиттер-ионных солей соединений в соответствии с настоящим изобретением также могут считаться фармацевтически приемлемыми, если они, согласно медицинской оценке, подходят для применения в контакте с тканями человека и низших животных не вызывая излишней токсичности, раздражения, аллергической реакции и подобных, соизмеримы с разумным соотношением польза/риск и эффективны для их предполагаемого применения. Такие соли также могут включать различные сольваты и гидраты соединения в соответствии с настоящим изобретением.

Определенные соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть мечеными изотопами, например, различными изотопами углерода, фтора или йода, применимо к рассматриваемым соединениям, содержащим по меньшей мере один такой атом. В предпочтительных вариантах способы диагностики в соответствии с настоящим изобретением включают введение такого меченого изотопами соединения.

Определенные соединения в соответствии с настоящим изобретением могут существовать в виде стереоизомеров, в которых присутствуют асимметричные или хиральные центры. Эти стереоизомеры включают "R" или "S" в зависимости от конфигурации заместителей вокруг хирального атома углерода. Термины "R" и "S" в данном описании являются конфигурациями, определенными в IUPAC 1974 Recommendations for Section E, Fundamental Stereochemistry, в Pure Appl. Chem., 1976, 45: 13-30. Изобретение охватывает различные стереоизомеры и их смеси, и они отдельно включены в объем настоящего изобретения. Стереоизомеры включают энантиомеры и диастереомеры и смеси энантиомеров и диастереомеров. Отдельные стереоизомеры соединений в соответствии с настоящим изобретением могут быть получены синтетически из коммерчески доступных исходных материалов, которые содержат асимметрические или хиральные центры, или получением рацемических смесей с последующим разделением, хорошо известным специалистам в данной области техники. Эти способы разделения представлены (1) присоединением смеси энантиомеров к хиральному вспомогательному ингредиенту, разделением полученной смеси диастереомеров перекристаллизацией или хроматографией и необязательным высвобождением оптически чистого продукта из вспомогательного ингредиента, как описано у Furniss, Hannaford, Smith and Tatchell, "Vogel's Textbook of Practical Organic Chemistry", 5th edition (1989), Longman Scientific & Technical, Essex CM20 2JE, England, или (2) прямым разделением смеси оптических энантиомеров на хиральных хроматографических колонках, или (3) методами фракционной перекристаллизации.

Определенные соединения в соответствии с настоящим изобретением могут существовать в виде цис- или транс-изомеров, где заместители на кольце могут быть присоединены таким образом, чтобы они находились на одной и той же стороне кольца (цис) относительно друг друга или на противоположных сторонах кольца относительно друг друга (транс). Такие способы хорошо известны специалистам в данной области техники и могут включать разделение изомеров перекристаллизацией или хроматографией. Должно быть понятно, что соединения в соответствии с настоящим изобретением могут иметь таутомерные формы, а также существовать в виде геометрических изомеров, и это также составляет аспект настоящего изобретения.

Необходимо отметить, что химическая группа, которая образует часть большего соединения, может быть описана здесь с применением наименования, применяемого обычно, когда она существует в виде одной молекулы, или наименования, обычно означающего ее радикал. Например, термины "пиридин" и "пиридил" имеют одинаковые значения, если они применяются для описания молекулы, присоединенной к другим химическим группам. Таким образом, например, две фразы "XOH, где X является пиридилом" и "XOH, где X является пиридином" имеют одинаковое значение и включают соединения пиридин-2-ол, пиридин-3-ол и пиридин-4-ол.

Термин "фармацевтически приемлемый носитель" в данном описании означает нетоксичный инертный твердый, полутвердый или жидкий наполнитель, разбавитель, инкапсулирующий материал или вспомогательное вещество любого типа. Некоторые примеры материалов, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлозу и ее производные, такие как карбоксиметилцеллюлоза натрия, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; порошковый трагакант; солод; желатин; тальк; масло какао и воски для суппозиториев; масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, сафлоровое масло, конопляное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; гликоли, такие как пропиленгликоль; сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; агар; буферные агенты, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; альгиновую кислоту; апирогенную воду; изотонический физиологический раствор; раствор Рингера; растворы этилового спирта и фосфатного буфера, а также другие нетоксичные совместимые смазывающие агенты, такие как лаурилсульфат натрия и стеарат магния, а также красители, разделительные средства, покрывающие агенты, подсластители, вкусовые и ароматизирующие агенты, консерванты и антиоксиданты также могут присутствовать в композиции, исходя из выбора специалиста в области составления композиций.

Если не указано иначе, термины "предотвращать", "предотвращая" и "предотвращение" охватывают действие, которое возникает до того, как пациент начинает страдать от указанного заболевания или расстройства, которое ингибирует или снижает тяжесть заболевания или расстройства или одного или более его симптомов. Термины включают профилактику.

Если не указано иначе, "профилактически эффективным количеством" соединения является количество, достаточное для профилактики заболевания или состояния или одного или более симптомов, связанных с заболеванием или состоянием, или профилактики его рецидива. Профилактически эффективным количеством соединения является количество терапевтического агента, отдельно или в сочетании с другими агентами, которое обеспечивает профилактическую пользу в предотвращении заболевания. Термин "профилактически эффективное количество" может охватывать количество, которое улучшает общую профилактику или способствует профилактической эффективности другого профилактического агента.

Если не указано иначе, "диагностически эффективным количеством" соединения является количество, достаточное для диагностики заболевания или состояния. В общем, введение соединения в диагностических целях не длится так долго, как терапевтическое применение соединение, и введение может производиться только один раз, если такое введение эффективно для получения диагноза.

Если не указано иначе, "терапевтически эффективным количеством" соединения является количество, достаточное для лечения заболевания или состояния или одного или более симптомов, связанных с заболеванием или состоянием.

Термин "пациент" включает живые организмы, в которых может возникнуть заболевание. Примеры пациентов включают людей, обезьян, коров, овец, коз, собак, кошек, мышей, крыс и их трансгенные виды.

Термин "практически чистый" означает, что выделенный материал является по меньшей мере на 90% чистым, предпочтительно на 95% чистым, даже более предпочтительно на 99% чистым по оценке аналитическими методами, известными в данной области техники.

Фармацевтические композиции могут быть составлены для перорального введения в твердой или жидкой форме, для парентерального внутривенного, подкожного, внутримышечного, внутрибрюшинного, внутриартериального или чрезкожного введения, или для вагинального, назального, местного и ректального введения.

Фармацевтические композиции в соответствии с настоящим изобретением, подходящие для перорального введения, могут быть представлены в виде отдельных лекарственных форм, например, таблеток, жевательных таблеток, капсул, каплетов, жидкостей и ароматизированных сиропов. Такие лекарственные формы содержат предопределенные количества активных ингредиентов и могут быть получены способами фармацевтики, известными специалистам в данной области техники. См., в основном, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed., Mack Publishing, Easton Pa. (1990).

Парентеральные лекарственные формы могут вводиться пациентам различными путями, включая подкожный, внутривенный (включая болюсные инъекции), внутримышечные и внутриартериальные. Так как их введение обычно обходит естественную защиту пациента от загрязнений, парентеральные лекарственные формы являются, в частности, стерильными или могут быть простерилизованы до введения пациенту. Примеры парентеральных лекарственных форм включают растворы, готовые для инъекций, сухие продукты, готовые для растворения или суспендирования в фармацевтически приемлемом носителе для инъекций, суспензии, готовые для инъекций, и эмульсии. Фармацевтические композиции для парентерального введения включают фармацевтически приемлемые стерильные водные и неводные растворы, дисперсии, суспензии или эмульсии, и стерильные порошки для восстановления в стерильные растворы или дисперсии для инъекций. Примеры подходящих водных и неводных носителей, разбавителей, растворителей или носителей включают воду, этанол, многоатомные спирты (пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, глицерин и подобные и их подходящие смеси), растительные масла (такие как оливковое масло) и органические сложные эфиры для инъекций, такие как этилолеат, или их подходящие смеси. Подходящая текучесть композиции может поддерживаться, например, применением покрытия, такого как лецитин, сохранением требуемого размера частиц для дисперсий и применением поверхностно-активных веществ. Эти композиции также могут содержать адъюванты, такие как консерванты, смачивающие агенты, эмульгаторы и диспергирующие агенты. Профилактика воздействия микроорганизмов может быть обеспечена различными антибактериальными и противогрибковыми агентами, например, парабенами, хлорбутанолом, фенолом, сорбиновой кислотой и подобными. Также может быть желательным включать изотонические агенты, например, сахара, хлорид натрия и подобные. Пролонгированная абсорбция фармацевтических форм для инъекций может достигаться применением агентов, задерживающих абсорбцию, например, моностеарата алюминия и желатина.

В некоторых случаях, для пролонгации эффекта лекарственного средства часто желательно замедлить абсорбцию лекарственного средства, введенного подкожной или внутримышечной инъекцией. Это может быть осуществлено применением жидкой суспензии кристаллического или аморфного материала с плохой растворимостью в воде. Скорость абсорбции лекарственного средства зависит от его скорости растворения, которая, в свою очередь, может зависеть от размера кристалла и кристаллической формы. Альтернативно, замедленная абсорбция парентерально введенного лекарственного средства достигается растворением или суспендированием лекарственного средства в масляном носителе.

Суспензии, в дополнение к активным соединениям, могут содержать суспендирующие агенты, например, этоксилированные изостеариловые спирты, сложные эфиры полиоксиэтиленсорбита и -сорбитана, микрокристаллическую целлюлозу, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар, трагакант и их смеси. При желании и для более эффективного распределения, соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть добавлены в системы с медленным выделением или целевой доставки, такие как полимерные матрицы, липосомы и микросферы. Они могут быть стерилизованы, например, фильтрацией через удерживающие бактерии фильтр или введением стерилизующих агентов в форме стерильных твердых композиций, которые могут быть растворены в стерильной воде или некоторых других стерильных средах для инъекций непосредственно перед применением.

Инъекционные формы депо получают через образование микроинкапсулированных матриц лекарственного средства в биоразлагаемых полимерах, таких как полилактид-полигликолид. В зависимости от отношения лекарственного средства к полимеру и природы конкретного применяемого полимера, скорость выделения лекарственного средства может контролироваться. Примеры других биоразлагаемых полимеров включают сложные поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды). Инъекционные композиции депо также получают удерживанием лекарственного средства в липосомах или микроэмульсиях, которые совместимы с тканями тела. Композиции для инъекций могут быть стерилизованы, например, фильтрацией через удерживающий бактерии фильтр или введением стерилизующих агентов в форме стерильных твердых композиций, которые могут быть растворены или диспергированы в стерильной воде иди других стерильных средах для инъекций непосредственно перед применением.

Препараты для инъекций, например, стерильные, водные или масляные суспензии для инъекций, могут быть составлены согласно известному уровню техники с применением подходящих диспергирующих или смачивающих агентов и суспендирующих агентов. Стерильными препаратами для инъекций также могут быть стерильные растворы, суспензии или эмульсии для инъекций в нетоксичных, парентерально приемлемых разбавителях или растворителях, такие как раствор в 1,3-бутандиоле. Приемлемые носители и растворители, которые могут применяться, включают воду, раствор Рингера, U.S.P. и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные нелетучие масла обычно применяют в качестве растворителя или суспендирующей среды. Для этой цели может применяться любое безвкусное нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, жирные кислоты, такие как олеиновая кислота, применяют для получения инъекций.

Твердые лекарственные формы для перорального введения включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых лекарственных формах одно или более соединений в соответствии с настоящим изобретением смешивают с по меньшей мере одним инертным фармацевтически приемлемым носителем, таким как цитрат натрия или фосфат дикальция и/или a) наполнителями или расширителями, такими как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, манит и салициловая кислота; b) связующими агентами, такими как карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидинон, сахароза и аравийская камедь; c) смачивающими агентами, такими как глицерин; d) разрыхляющими агентами, такими как агар-агар, карбонат кальция, картофельный или тапиоковый крахмал, альгиновая кислота, определенные силикаты и карбонат натрия; e) замедлителями раствора, такими как парафин; f) усилителями абсорбции, такими как соединения четвертичного аммония; g) смачивающими агентами, такими как цетиловый спирт и моностеарат глицерина; h) абсорбентами, такими как каолин и бентонит; и i) смазывающими агентами, такими как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия и их смеси. В случае капсул, таблеток и пилюль лекарственная форма также может содержать буферные агенты.

Твердые композиции подобного типа также могут применяться в качестве наполнителей для мягких и твердых наполняемых желатиновых капсул с применением лактозы или молочного сахара, а также полиэтиленгликолей с высокой молекулярной массой. Твердые лекарственные формы в виде таблеток, драже, пилюль и гранул могут быть получены с покрытиями и в оболочках, таких как энтеросолюбильные покрытия и другие покрытия, хорошо известные в области фармацевтических композиций. Они могут необязательно содержать средства, придающие непрозрачность, а также могут представлять собой композицию, которая выделяет активные ингредиент только, или в основном, в определенной части кишечника замедленным способом. Примеры материалов, которые могут применяться для замедленного выделения активного агента, могут включать полимерные вещества и воски.

Композиции для ректального или вагинального введения предпочтительно являются суппозиториями, которые могут быть получены смешиванием соединений в соответствии с настоящим изобретением с подходящими нераздражающими носителями, такими как масло какао, полиэтиленгликоль или воск для суппозиториев, которые являются твердыми при температуре окружающей среды, но жидкими при температуре тела и поэтому плавятся в прямой кишке или влагалище с выделением активного соединения.

Жидкие лекарственные формы для перорального введения включают фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. Кроме активных соединений, жидкие лекарственные формы могут содержать инертные разбавители, обычно применяемые в данной области техники, такие как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие агенты и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла (в частности, хлопковое, арахисовое, кукурузное, зародышевое, оливковое, касторовое и конопляное масла), глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоль и сложные эфиры жирных кислот сорбита, и их смеси.

Кроме инертных разбавителей, пероральные композиции также могут включать адъюванты, такие как смачивающие агенты, эмульгирующие и суспендирующие агенты, подсластители, вкусовые добавки и отдушки.

Лекарственные формы для местного или чрезкожного введения соединения в соответствии с настоящим изобретением включают мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, порошки, растворы, спреи, ингаляторы или пластыри. Желаемое соединение в соответствии с настоящим изобретением смешивают в стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и любыми необходимыми консервантами или буферами, при необходимости. Офтальмологическая композиция, глазные капли, глазные мази, порошки и растворы также включены в объем настоящего изобретения. Мази, пасты, кремы и гели могут содержать, в дополнение к активному соединению в соответствии с настоящим изобретением, животные и растительные жиры, масла, воски, парафины, крахмалы, трагакант, производные целлюлозы, полиэтиленгликоли, силиконы, бентониты, кремниевую кислоту, тальк и оксид цинка, или их смеси.

Порошки и спреи могут содержать, в дополнение к соединениям в соответствии с настоящим изобретением, лактозу, тальк, кремниевую кислоту, гидроксид алюминия, силикаты кальция и полиамидный порошок, или смеси этих веществ. Спреи могут дополнительно содержать обычные газы-вытеснители, такие как хлорфторуглеводороды.

Соединения в соответствии с настоящим изобретением также могут вводиться в форме липосом. Как известно в данной области техники, липосомы обычно получают из фосфолипидов или других жировых веществ. Липосомы получают из моно- или мультиламеллярных гидрированных жидких кристаллов, которые диспергируют в водной среде. Могут применяться любые не токсичные физиологически приемлемые и метаболизируемые жиры, способные образовывать липосомы. Композиции в соответствии с настоящим изобретением в форме липосом могут содержать, в дополнение к соединениям в соответствии с настоящим изобретением, стабилизаторы, консерванты и подобные. Предпочтительные жиры являются природными и синтетическими фосфолипидами и фосфатидилхолинами (лецитинами), применяемыми по отдельности или вместе. Способы получения липосом известны в данной области техники. См., например, Prescott, Ed., Methods in Cell Biology, Volume XIV, Academic Press, New York, N.Y., (1976), p 33 et seq.

Актуальные уровни дозирования активных ингредиентов в фармацевтических композициях в соответствии с настоящим изобретением могут варьироваться так, чтобы получить количество активного соединения, эффективное для достижения желаемой терапевтической реакции для конкретного пациента, композиции и способа введения. Выбранный уровень дозирования зависит от активности конкретного соединения, способа введения, тяжести лечимого состояния и состояния и анамнеза лечимого пациента. Однако специалист в данной области техники может начать применять соединение в количествах, меньших чем требуемые для достижения желаемого терапевтического эффекта, и постепенно повышать дозу до тех пор, пока желаемый эффект не будет достигнут.

Эффективное количество одного из соединений в соответствии с настоящим изобретением может применяться в чистой форме или, если такие формы существуют, в форме фармацевтически приемлемой соли. Альтернативно, соединение может вводиться в виде фармацевтической композиции, содержащей рассматриваемое соединение в сочетании с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями. Должно быть понятно, однако, что общая суточная доза соединений и композиций в соответствии с настоящим изобретением будет определяться лечащим врачом в пределах погрешности медицинской оценки. Конкретная эффективная доза для любого конкретного пациента будет зависеть от множества факторов, включая лечимое расстройство и тяжесть расстройства; активность конкретного применяемого соединения; конкретную применяемую композицию; возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол и режим питания пациента; Время введения, способ введения и скорость выведения конкретного применяемого соединения; длительность лечения; отношение риск/польза; лекарственные средства, применяемые в сочетании или одновременно с конкретным применяемым соединением; и подобные факторы, хорошо известнее в области медицины. Например, специалист в данной области техники может начать применять соединение в количествах, меньших чем требуемые для достижения желаемого терапевтического эффекта, и постепенно повышать дозу до тех пор, пока желаемый эффект не будет достигнут.

Общая суточная доза соединений в соответствии с настоящим изобретением, вводимая человеку или низшим животным, может варьироваться от около 0,0003 до около 50 мг/кг массы тела. Для целей перорального введения более предпочтительные дозы могут составлять от около 0,0003 до около 5 мг/кг массы тела. При желании, эффективная суточная доза может быть разделена на множество доз для введения; следовательно, композиции с одной дозой могут содержать такие количества или их подмножества для получения суточной дозы. Для перорального введения композиции в соответствии с настоящим изобретением предпочтительно представлены в виде таблеток, содержащих около 1,0, около 5,0, около 10,0, около 15,0, около 25,0, около 50,0, около 100, около 250 или около 500 миллиграмм активного ингредиента.

ПРИМЕРЫ

Способы синтеза

Если не указано иначе, соединения, наименования которых содержат "TRV-", которые имеют хиральные центры, найденные в группах

NR₁R₂ = бензиламин, пирролидин, N-метил-1-фенилметанамин, этилпирролидин-2-карбоксилат, морфолин, 4-метилимидазол, 1-метилпиперазин, N-изопропилметиламин, 2-метилпирролидин, пиперидин, диэтиламин, (2-метоксиэтил)метиламин, N-метилэтанамин, тиоморфолин, 4-(пирролидин-1-ил)пиперидин, пиразол, 4-метилпиразол, 4-фтор-N-метилбензиламин, этиламин, изоиндолин, 3-гидроксиазетидин, азетидин, пропаргиламин, циклопропиламин, 3-гидроксипирролидин, N-метил-N-(2-пиридинилметил)амин, N-метил-N-(3-пиридинилметил)амин, 4-метоксибензиламин, 3,5-диметоксибензиламин, 3-азетидинкарбоновая кислота, азетидин, (S)-этилпирролидин-2-карбоксилат, N-метил-1-(тиазол-2-ил)метанамин

a) i) н-BuLi, -78°C; ii) I₂, ТГФ, -78°C; b) метилпропиолят, Pd(PPh₃)₂Cl₂, CuI, K₂CO₃, ТГФ, 65°C; c) i) н-BuLi, -78°C; ii) ДМФА; d) i) триметилфосфоноацетат, NaH, ТГФ, 0°C; e) i) CF₃TMS, TBAF; f) DIBAL, ДХМ, от -78 до -30°C; g) CF₃TMS, TBAF; h) i) н-BuLi, -78°C; ii) метилхлорформиат, ТГФ, -78°C;

a) i) н-BuLi/-78°C; ii) ацетальдегид; b) NaH/ТГФ/MeI; c) Десс-Мартин/ДХМ; d) MeMgBr/ТГФ/-78°C;

NXR₁R₂ = морфолин, 1-метилпиперазин, N-изопропилметиламин, 2-метилпирролидин, пиперидин, диэтиламин, (2-метоксиэтил)метиламин, N-метилэтанамин, тиоморфолин, 4-(пирролидин-1-ил)пиперидин, пиразол, 4-метилпиразол, 4-фтор-N-метилбензиламин, изоиндолин, N-метилпропаргиламин, N-метил-N-(2-пиридинилметил)амин, N-метил-N-(3-пиридинилметил)амин, азетидин, N-метил-1-(тиазол-2-ил)метанамин

а) (СOCl)₂/ДМСО/ТЭА/ДХМ; b) NaH/ТГФ/MeI

а) 3-формилфенилбороновая кислота Pd(PPh₃)₄/ДМЭ/100°С 2 М Na₂CO₃; b) CF₃TMS/TBAF

а) пиперазин/ГАТУ/ДИПЭА; b) циклопропиламин/ГАТУ/ДИПЭА; с) морфолин/ГАТУ/ДИПЭА; d) гидрохлорид азетидина/ГАТУ/ДИПЭА; е) гидрохлорид 3-гидроксиазетидина/ГАТУ/ДИПЭА

а) пирролидин/EtOAc/T₃P/ТЭА; b) циклопропиламин/EtOAc/T₃P/ТЭА; с) морфолин/EtOAc/T₃P/ТЭА

а) 3-формилфенилбороновая кислота Pd(PPh₃)₄/ДМЭ/100°С 2 М Na₂CO₃; b) CF₃TMS/TBAF

TRV-1256

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол 4 (0,9678 г, 3,48 ммоль) и бензиламин (1,9 мл, 17,4 ммоль) растворяют в ДМСО (10,5 мл) в атмосфере аргона и перемешивают в герметично закрытой пробирке в течение 3 дней, после чего пробирку нагревают до 60°C в течение 12 часов. При охлаждении до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (5×), 1 н. HCl (водн.), насыщенной NaHCO₃ (водн.) и насыщенным раствором соли, затем сушат с Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют. Темное твердое вещество перекристаллизовывают из EtOH, и темные кристаллы собирают фильтрацией и сушат с получением 0,4516 г (выход 43%) N-бензил-6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амина. Этот продукт (0,1980 г, 0,651 ммоль), гидрохлорид бензоилпиперазина (0,1771 г, 0,781 ммоль) и CS₂CO₃ (0,6353 г, 1,95 ммоль) добавляют в пробирку. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Толуол (2 мл) и NMP (1,2 мл) затем добавляют в пробирку, и ее содержимое дегазируют в течение 15 минут, в этот момент быстро добавляют Pd₂(dba)₃ (0,0119 г, 0,0130 ммоль) и BINAP (0,0162 г, 0,026 ммоль), пробирку герметично закрывают и нагревают при 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (5×), 1 н. HCl (водн.), насыщенным NaHCO₃ (водн.) и насыщенным раствором соли, затем сушат с Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (40% EtOAc/гексан) с получением 0,188 г (выход 70%) TRV-1256.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,46-7,43 (м, 5H), 7,39-7,36 (м, 4H), 7,34-7,31 (м, 1H), 6,13 (д, J=1,0 Гц, 1H), 5,88 (с, 1H), 5,32 (т, J=5,5 Гц, 1H), 4,48 (д, J=5,5 Гц, 2H), 3,90 (шир.с, 2H), 3,58 (шир.с, 2H), 3,29 (шир.с, 2H), 3,15 (шир.с, 2H).

TRV-1259

N-бензил-6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амин (0,2235 г, 0,735 ммоль) и 3-ацетилбензолбороновую кислоту (0,1566 г, 0,955 ммоль) добавляют в пробирку. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Добавляют 2 M Na₂CO₃ (1,1 мл, 2,21 ммоль) и ДМЭ (1,6 мл), и раствор дегазируют в течение 15 минут. Быстро добавляют Pd(PPh₃)₄ (0,0425 г, 0,0368 ммоль), и пробирку нагревают при 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (5×), насыщенным NaHCO₃ (водн.) и насыщенным раствором соли, затем сушат с Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт растворяют в метаноле (15 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют NaBH₄ (0,0556 г, 1,47 ммоль), и смесь перемешивают при 0°C в течение 3 часов. Реакционную смесь гасят насыщенным NaHCO₃. Эту густую смесь разбавляют водой и экстрагируют ДХМ (5×). Затем экстракты сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (30% EtOAc/гексан) с получением 0,1412 г (выход 56%) TRV-1259.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,47 (с, 1H), 7,46-7,38 (м, 7H), 7,36-7,33 (м, 1H), 7,18 (с, 1H), 6,36 (с, 1H), 5,44 (т, J=5,5 Гц, 1H), 4,99-4,95 (м, 1H), 4,57 (д, J=5,5 Гц, 2H), 1,88 (д, J=3,5 Гц, 1H), 1,54 (д, J=7,0 Гц, 3H).

TRV-1310

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,3122 г, 1,12 ммоль), пирролидин (0,10 мл, 1,12 ммоль) и ДИПЭА (0,20 мл, 1,12 ммоль) растворяют в NMP (2 мл) в атмосфере аргона и перемешивают в герметично закрытой пробирке при 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (5×), 1 н. HCl (водн.), насыщенным NaHCO₃ (водн.) и насыщенным раствором соли, затем сушат с Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют с получением неочищенного 6-бром-4-(пирролидин-1-ил)бензо[c][1,2,5]оксадиазола (0,2247 г, выход 75%). Неочищенный продукт (0,1964 г, 0,73 ммоль) и 3-ацетилбензолбороновую кислоту (0,1558 г, 0,95 ммоль) добавляют в пробирку. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Добавляют 2 M Na₂CO₃ (1,1 мл, 2,21 ммоль) и ДМЭ (1,6 мл), и раствор дегазируют в течение 15 минут. Быстро добавляют Pd(PPh₃)₄ (0,0422 г, 0,0365 ммоль), и пробирку нагревают при 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (5×), насыщенным NaHCO₃ (водн.) и насыщенным раствором соли, затем сушат с Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт растворяют в метаноле (12 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют NaBH₄ (0,0552 г, 1,46 ммоль), и смесь перемешивают при 0°C в течение 3 часов. Реакционную смесь гасят насыщенным NaHCO₃. Эту густую смесь разбавляют водой и экстрагируют ДХМ (5×). Затем экстракты сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (30% EtOAc/гексан) с получением 0,2029 г (выход 90%, за 2 стадии) TRV-1310.¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ = 7,65 (с, 1H), 7,55 (д, J=7,0 Гц, 1H), 7,47-7,42 (м, 2H), 7,07 (с, 1H), 6,11 (с, 1H), 5,00-4,99 (м, 1H), 3,81 (с, 4H), 2,12-2,09 (м, 4H), 1,92 (д, J=3,0 Гц, 1H), 1,56 (д, J=6,5 Гц, 3H).

TRV-1358

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,5607 г, 2,0 ммоль), N-метил-1-фенилметанамин (0,28 мл, 2,2 ммоль) и ДИПЭА (0,52 мл, 3,0 ммоль) растворяют в NMP (3 мл) в атмосфере аргона и перемешивают в герметично закрытой пробирке при 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (5×), 1 н. HCl (водн.), насыщенным NaHCO₃ (водн.) и насыщенным раствором соли, затем сушат с Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют с получением неочищенного продукта (N-бензил-6-бром-N-метилбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амина) в виде масла. Этот неочищенный продукт и 3-ацетилбензолбороновую кислоту (0,4263 г, 2,6 ммоль) добавляют в пробирку. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Добавляют 2 M Na₂CO₃ (3,0 мл, 6,0 ммоль) и ДМЭ (4,5 мл), и раствор дегазируют в течение 15 минут. Быстро добавляют Pd(PPh₃)₄ (0,1156 г, 0,10 ммоль), и пробирку нагревают при 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (5×), насыщенным NaHCO₃ (водн.) и насыщенным раствором соли, затем сушат с Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт растворяют в метаноле (33 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют NaBH₄ (0,1513 г, 4,0 ммоль), и смесь перемешивают при 0°C в течение 3 часов. Реакционную смесь гасят насыщенным NaHCO₃. Эту густую смесь разбавляют водой и экстрагируют ДХМ (5×). Затем экстракты сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (30% EtOAc/гексан) с получением 0,4843 г (выход 67%, за 3 стадии) TRV-1358 в виде желтого масла.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 7,60 (с, 1H), 7,51 (дт, J=6,5, 2,0 Гц, 1H), 7,47-7,42 (м, 2H), 7,35-7,32 (м, 2H), 7,29-7,28 (м, 3H), 7,24 (с, 1H), 6,37 (с, 1H), 5,16 (с, 2H), 5,01-4,96 (м, 1H), 3,22 (с, 3H), 1,85 (д, J=3,5 Гц, 1H), 1,55 (д, J=6,5 Гц, 3H).

TRV-1359

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,3765 г, 1,35 ммоль), гидрохлорид этилпирролидин-2-карбоксилата (0,2677 г, 1,49 ммоль) и ДИПЭА (0,59 мл, 3,38 ммоль) растворяют в NMP (1,8 мл) в атмосфере аргона и перемешивают в герметично закрытой пробирке при 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (5×), 1 н. HCl (водн.), насыщенным NaHCO₃ (водн.) и насыщенным раствором соли, затем сушат с Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют с получением 0,1756 г (выход 38%) неочищенного продукта. Этот неочищенный продукт и 3-ацетилбензолбороновую кислоту (0,1099 г, 0,67 ммоль) добавляют в пробирку. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Добавляют 2 M Na₂CO₃ (0,8 мл, 1,55 ммоль) и ДМЭ (1,2 мл), и раствор дегазируют в течение 15 минут. Быстро добавляют Pd(PPh₃)₄ (0,0298 г, 0,0258 ммоль), и пробирку нагревают при 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (5×), насыщенным NaHCO₃ (водн.) и насыщенным раствором соли, затем сушат с Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт затем растворяют в ДХМ (0,3 мл) и толуоле (1,6 мл), и этот раствор охлаждают до 0°C. По каплям добавляют DIBAL (1,7 мл, 1,0 M раствор в гексане), и реакционную смесь перемешивают в течение ночи. Добавляют дополнительных 1,5 экв. DIBAL (0,8 мл) при 0°C, и реакционную смесь перемешивают в течение дополнительных 24 часов. Смесь гасят насыщенным раствором тартрата калия натрия и экстрагируют этилацетатом. Объединенные экстракты промывают H₂O и насыщенным раствором соли, сушат с Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают на колонке 60% EtOAc/гексан с получением 0,1224 (выход 70%, 2 стадии) TRV-1359 в виде оранжевого твердого вещества.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 7,64 (с, 1H), 7,54 (дт, J=6,5, 2,0 Гц, 1H), 7,47-7,43 (м, 2H), 7,14 (с, 1H), 6,26 (с, 1H), 5,00-4,99 (шир.с, 1H), 4,74 (шир.с, 1H), 3,87-3,83 (м, 1H), 3,80-3,77 (м, 1H), 3,69-3,64 (м, 1H), 3,54-3,50 (м, 1H), 2,21-2,11 (м, 4H), 1,92-1,86 (м, 2H), 1,56 (д, J=6,5 Гц, 3H).

TRV-1360

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,5385 г, 1,94 ммоль), морфолин (0,17 мл, 1,94 ммоль) и ДИПЭА (0,34 мл, 1,94 ммоль) растворяют в NMP (2,5 мл) в атмосфере аргона и перемешивают в герметично закрытой пробирке при 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (5×), 1 н. HCl (водн.), насыщенным NaHCO₃ (водн.) и насыщенным раствором соли, затем сушат с Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют с получением 0,5360 г (выход 97%) коричневого твердого вещества. Этот неочищенный продукт (0,5002 г, 1,76 ммоль) и 3-формилфенилбороновую кислоту (0,3434 г, 2,29 ммоль) добавляют в пробирку. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Добавляют 2 M Na₂СО₃ (2,6 мл, 5,3 ммоль) и ДМЭ (3,9 мл), и раствор дегазируют в течение 15 минут. Быстро добавляют Pd(PPh₃)₄ (0,1040 г, 0,09 ммоль), и пробирку нагревают при 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют ДХМ. Объединенные органические слои промывают H₂O (5×), насыщенным NaHCO₃ (водн.) и насыщенным раствором соли, затем сушат с Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт затем растворяют в ТГФ (1,8 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют CF₃TMS (0,3003 г, 2,11 ммоль), затем TBAF (0,18 мл, 0,18 ммоль) при 0°C. После завершения добавления, ледяную баню удаляют, и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение нескольких часов, добавляют дополнительные 2 экв. CF₃TMS (0,52 мл) вместе с 0,1 экв. TBAF (0,18 мл) при 0°C. Повторно нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 часов. К этой смеси затем добавляют TBAF (7,6 мл, 7,6 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивают в течение ночи. Реакционную смесь гасят насыщенным раствором соли и экстрагируют EtOAc. Объединенные экстракты промывают H₂O (4×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Очистка флэш-хроматографией (30% EtOAc/гексан) дает 0,2303 г (выход 34%, за 3 стадии) TRV-1360 в виде желтого твердого вещества.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 7,74 (с, 1H), 7,67-7,65 (м, 1H), 7,57-7,52 (м, 2H), 7,40 (с, 1H), 6,58 (с, 1H), 5,17-5,12 (м, 1H), 3,97 (т, J=5,0 Гц, 4H), 3,65 (т, J=5,0 Гц, 4H), 2,75 (д, J=4,5 Гц, 1H).

TRV-1361

6-бром-4-(пирролидин-1-ил)бензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,4244 г, 1,58 ммоль) и 3-формилфенилбороновую кислоту (0,3149 г, 2,1 ммоль) добавляют в пробирку. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Добавляют 2 M Na₂CO₃ (2,4 мл, 4,7 ммоль) и ДМЭ (3,6 мл), и раствор дегазируют в течение 15 минут. Быстро добавляют Pd(PPh₃)₄ (0,0924 г, 0,08 ммоль), и пробирку нагревают при 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои промывают H₂O (5×), насыщенным NaHCO₃ (водн.) и насыщенным раствором соли, затем сушат с Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт затем растворяют в ТГФ (1,6 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют CF₃TMS (0,2702 г, 1,9 ммоль), затем TBAF (0,16 мл, 0,16 ммоль) при 0°C. После завершения добавления, ледяную баню удаляют, и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение нескольких часов, в этот момент добавляют дополнительные 2 экв. CF₃TMS (0,47 мл) вместе с 0,1 экв. TBAF (0,16 мл) при 0°C. Повторно нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 часов. К этой смеси затем добавляют TBAF (7,0 мл, 7,0 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивают в течение ночи. Реакционную смесь гасят насыщенным раствором соли и экстрагируют EtOAc. Объединенные экстракты промывают H₂O (4×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Очистка флэш-хроматографией (20% EtOAc/гексан) дает 0,2749 г (выход 48%, за 3 студии) TRV-1361 в виде оранжевого твердого вещества.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 7,74 (с, 1H), 7,68 (дт, J=7,0, 1,5 Гц, 1H), 7,55-7,50 (м, 2H), 7,07 (с, 1H), 6,09 (с, 1H), 5,13 (кв, J=6,5 Гц, 1H), 3,83-3,80 (м, 4H), 2,67 (шир.с, 1H), 2,14-2,09 (м, 4H).

TRV-1362

6-бром-4-(пирролидин-1-ил)бензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,1239 г, 0,46 ммоль) и 3-ацетилбензолбороновую кислоту (0,0984 г, 0,60 ммоль) добавляют в пробирку. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Добавляют 2 M Na₂СО₃ (0,70 мл, 1,38 ммоль) и ДМЭ (1,0 мл), и раствор дегазируют в течение 15 минут. Быстро добавляют Pd(PPh₃)₄ (0,0266 г, 0,023 ммоль), и пробирку нагревают при 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (5×), насыщенным NaHCO₃ (водн.) и насыщенным раствором соли, затем сушат с Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (25% EtOAc/гексан) с получением 0,0391 г (выход 28%) TRV-1362 в виде оранжевого твердого вещества.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 8,22 (д, J=1,5 Гц, 1H), 8,00 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,84 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,57 (т, J=8,0 Гц, 1H), 7,09 (с, 1H), 6,10 (с, 1H), 3,82 (с, 4H), 2,68 (с, 3H), 2,13-2,11 (м, 4H).

TRV-1363

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (1,00 г, 3,6 ммоль) и изопропанол (0,31 мл, 4,0 ммоль) растворяют в ТГФ (20 мл) в атмосфере аргона и охлаждают до -78°C. По каплям добавляют NaHMDS (4,0 мл 1,0M раствор в ТГФ), и реакционную смесь перемешивают в течение 30 минут при -78°C. Затем охлаждающую баню удаляют, и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение нескольких часов. Реакционную смесь затем охлаждают до 0°C и гасят насыщенным раствором NH₄Cl (водн.). Эту суспензию экстрагируют ДХМ (3×). Объединенные экстракты промывают H₂O, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением 0,9407 г неочищенного черного масла. Этот неочищенный продукт (0,6702 г, 2,6 ммоль) и 3-формилфенилбороновую кислоту (0,5098 г, 3,4 ммоль) добавляют в пробирку. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Добавляют 2 M Na₂СО₃ (3,9 мл, 7,8 ммоль) и ДМЭ (5,8 мл), и раствор дегазируют в течение 15 минут. Быстро добавляют Pd(PPh₃)₄ (0,1502 г, 0,13 ммоль), и пробирку нагревают при 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои промывают H₂O (5×), насыщенным NaHCO₃ (водн.) и насыщенным раствором соли, затем сушат с Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (20% EtOAc/гексан) с получением 0,4836 г (выход 66%) альдегида. Этот альдегид (0,6702 г, 2,6 ммоль) растворяют в ТГФ (2,0 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют CF₃TMS (0,23 мл, 1,56 ммоль), затем TBAF (0,1 мл, 0,1 ммоль) при 0°C. После завершения добавления, ледяную баню удаляют, и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение нескольких часов. Смесь затем повторно охлаждают до 0°C, и TBAF (2,8 мл, 2,8 ммоль) добавляют к реакционной смеси, которую перемешивают в течение ночи. Реакционную смесь гасят насыщенным раствором соли и экстрагируют EtOAc. Объединенные экстракты промывают H₂O (4×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Очистка флэш-хроматографией (25% EtOAc/гексан) дает 0,1468 г (выход 53%, за 2 стадии) TRV-1363 в виде желтого масла.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 7,74 (с, 1H), 7,66 (дт, J=7,0, 2,0 Гц, 1H), 7,58-7,54 (м, 2H), 7,48 (с, 1H), 6,78 (с, 1H), 5,17-5,13 (м, 1H), 4,99 (септ, J=6,0 Гц, 1H), 2,76 (д, J=4,5 Гц, 1H), 1,52 (д, J=6,0 Гц, 6H).

TRV-1364

6-бром-4-(пирролидин-1-ил)бензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,3898 г, 1,45 ммоль) и 5-формил-2-тиенилбороновую кислоту (0,2948 г, 1,89 ммоль) добавляют в пробирку. Пробирку откачивают и продувают аргоном 3 раза. Затем добавляют 2 M Na₂CO₃ (водн.) (2,2 мл) и ДМЭ (3,3 мл), и раствор дегазируют в течение 15 минут. Быстро добавляют Pd(PPh₃)₄ (0,0844 г, 0,073 ммоль), пробирку герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, определяют, что реакция не завершена. Дополнительно один эквивалент 5-формил-2-тиенилбороновой кислоты добавляют вместе с дополнительными 5 мол.% Pd(PPh₃)₄, и смесь повторно нагревают в течение ночи. При необходимости повторно добавляют бороновую кислоту и катализатор и нагревают в течение дополнительных 24 часов. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и затем водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические экстракты промывают водой (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт помещают в ТГФ (3 мл), и добавляют CF₃TMS (0,43 мл, 2,9 ммоль). Этот раствор охлаждают до 0°C, затем добавляют TBAF (0,15 мл, 0,145 ммоль). Смесь перемешивают в течение ночи, и затем добавляют дополнительных 2 экв. CF₃TMS и 0,1 экв. TBAF. После перемешивания в течение дополнительных 2 часов, реакционную смесь охлаждают до 0°C, и добавляют TBAF (8 мл, 8 ммоль). Смесь перемешивают в течение ночи, затем разбавляют водой. Водный слой экстрагируют EtOAc (3×). Объединенные экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают на колонке (15-20% EtOAc/гексан) с получением 0,1043 г (выход 19%, 3 стадии) TRV-1364 в виде оранжевого твердого вещества.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 700 MГц) δ = 7,35 (д, J=3,2 Гц, 1H), 7,19 (д, J=3,2 Гц, 1H), 7,13 (с, 1H), 6,10 (с, 1H), 5,31 (кв, J=3,2 Гц, 1H), 3,80 (шир.с, 4H), 2,90 (шир.с, 1H),2,11 (с, 4H).

TRV-1365

6-бром-4-(пирролидин-1-ил)бензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,3948 г, 1,47 ммоль) и 4-формилбензолбороновую кислоту (0,2864 г, 1,91 ммоль) добавляют в пробирку. Пробирку откачивают и продувают аргоном 3 раза. Затем добавляют 2 M Na₂CO₃ (водн.) (2,2 мл) и ДМЭ (3,3 мл), и раствор дегазируют в течение 15 минут. Быстро добавляют Pd(PPh₃)₄ (0,0855 г, 0,074 ммоль), пробирку герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и затем водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические экстракты промывают водой (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт помещают в ТГФ (3 мл), и добавляют CF₃TMS (0,43 мл, 2,94 ммоль). Этот раствор охлаждают до 0°C, затем добавляют TBAF (0,15 мл, 0,147 ммоль). После перемешивания в течение 2 часов, реакционную смесь охлаждают до 0°C, и добавляют TBAF (5,1 мл, 5,1 ммоль). Смесь перемешивают в течение ночи, затем разбавляют водой. Водный слой экстрагируют EtOAc (3×). Объединенные экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают на колонке (15% EtOAc/гексан) с получением 0,3795 г (выход 71%, 3 стадии) TRV-1365 в виде оранжевого твердого вещества.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 700 MГц) δ = 7,68 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,58 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,07 (с, 1H), 6,10 (с, 1H), 5,11 (кв, J=6,3 Гц, 1H), 3,81 (шир.с, 4H), 2,72 (шир.с, 1H), 2,13-2,09 (м, 4H).

TRV-1366

6-бром-4-(пирролидин-1-ил)бензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,3856 г, 1,44 ммоль) и 2-формилбензолбороновую кислоту (0,2804 г, 1,87 ммоль) добавляют в пробирку. Пробирку откачивают и продувают аргоном 3 раза. Затем добавляют 2 M Na₂CO₃ (водн.) (2,2 мл) и ДМЭ (3,3 мл), и раствор дегазируют в течение 15 минут. Быстро добавляют Pd(PPh₃)₄ (0,0832 г, 0,072 ммоль), пробирку герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и затем водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические экстракты промывают водой (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт помещают в ТГФ (3 мл), и добавляют CF₃TMS (0,43 мл, 2,94 ммоль). Этот раствор охлаждают до 0°C, затем добавляют TBAF (0,14 мл, 0,144 ммоль). После перемешивания в течение 2 часов, реакционную смесь охлаждают до 0°C, и добавляют TBAF (5,0 мл, 5,0 ммоль). Смесь перемешивают в течение ночи, затем разбавляют водой. Водный слой экстрагируют EtOAc (3×). Объединенные экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают на колонке (10% EtOAc/гексан) с получением 0,179 г (выход 34%, 3 стадии) TRV-1366 в виде оранжевого твердого вещества.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 7,78 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,52-7,45 (м, 2H), 7,34 (д, J=7,5 Гц, 1H), 6,85 (с, 1H), 5,79 (с, 1H), 5,26 (кв, J=6,5 Гц, 1H), 3,76 (шир.с, 4H), 2,55 (шир.с, 1H), 2,11-2,08 (м,4H).

TRV-1368

6-бром-4-(пирролидин-1-ил)бензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,7754 г, 2,89 ммоль) растворяют в ТГФ и охлаждают до -78°C. По каплям добавляют н-BuLi (1,6 мл, 2,0 M раствор в циклогексане), и смесь перемешивают в течение 30 минут. В этот момент к раствору, который перемешивают при -78°C, добавляют ДМФА (0,25 мл, 3,18 ммоль) сразу весь при -78°C. Реакционную смесь перемешивают в течение 30 минут и затем нагревают до комнатной температуры. Реакционную смесь затем гасят насыщенным NH₄Cl (водн.), экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением 0,4779 г неочищенного альдегида. Этот альдегид (0,1352 г, 0,622 ммоль) растворяют в ТГФ (2 мл), и обрабатывают CF₃TMS (0,18 мл, 1,24 ммоль). Раствор охлаждают до 0°C и затем добавляют TBAF (0,1 мл, 0,1 ммоль). После перемешивания в течение 2 часов, смесь повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (2,2 мл, 2,2 ммоль), реакционную смесь перемешивают в течение ночи. Смесь затем гасят водой и экстрагируют EtOAc. Объединенные экстракты промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают на колонке (25% EtOAc/гексан) с получением 0,0201 г (выход 11%) TRV-1368 в виде красного масла.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 700 MГц) δ = 7,06 (с, 1H), 5,97 (с, 1H), 5,01 (кв, J=6,3 Гц, 1H), 3,78 (шир.с, 4H), 2,74 (шир.с, 1H), 2,12-2,08 (м, 4H).

TRV-1369

6-бром-4-(пирролидин-1-ил)бензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,5785 г, 2,16 ммоль) и пиридин-3-бороновую кислоту (0,3442 г, 2,8 ммоль) добавляют в пробирку. Пробирку откачивают и продувают аргоном 3 раза. Затем добавляют 2 M Na₂CO₃ (водн.) (3,2 мл) и ДМЭ (4,8 мл), и раствор дегазируют в течение 15 минут. Быстро добавляют Pd(PPh₃)₄ (0,1248 г, 0,108 ммоль), пробирку герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и затем водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические экстракты промывают водой (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт очищают на колонке (50% EtOAc/гексан) с получением 0,1902 г продукта с примесями и 0,2624 г чистого продукта с общим выходом 79% TRV-1369 в виде оранжевого твердого вещества.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 700 MГц) δ = 8,90 (д, J=1,4 Гц, 1H), 8,65 (д, J=4,6 Гц, 1H), 7,93 (д, J=7,7 Гц, 1H), 7,39 (дд, J=7,7, 4,6 Гц, 1H), 7,07 (с, 1H), 6,05 (с, 1H), 3,82 (шир.с, 4 H), 2,14-2,10 (м, 4H).

TRV-1370

6-бром-4-(пирролидин-1-ил)бензо[c][1,2,5]оксадиазол 1 (0,7754 г, 2,89 ммоль) растворяют в ТГФ и охлаждают до -78°C. По каплям добавляют н-BuLi (1,6 мл 2,0 M раствора в циклогексане), и смесь перемешивают в течение 30 минут. В этот момент 2,9-мл аликвоту берут и добавляют по каплям в ледяной раствор насыщенного NH₄Cl (водн.). После нагревания до комнатной температуры, смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные экстракты промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт очищают на колонке (5% EtOAc/гексан) с получением 0,0654 г (выход 46%) TRV-1370 в виде оранжевого твердого вещества.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 7,22 (дд, J=8,5, 8,0 Гц, 1H), 6,91 (д, J=8,5 Гц, 1H), 5,87 (д, J=8,0 Гц, 1H), 3,76-3,73 (м, 4H), 2,10-2,05 (м, 4H).

TRV-1375

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (1,0173 г, 3,66 ммоль), 4-метилимидазол (0,3005 г, 3,66 ммоль), NMP (5 мл) и ДИПЭА (0,64 мл, 3,66 ммоль) герметично закрывают в пробирке и нагревают до 150°C в течение 3 дней. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O, 1 н. HCl (водн.), насыщенным NaHCO₃ (водн.), H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают на колонке 35% EtOAc/гексан с получением 0,5295 г (выход 52%) анилина. Анилин (0,2988 г, 1,07 ммоль) и 3-формилбензолбороновую кислоту (0,2084 г, 1,39 ммоль) герметично закрывают в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3 цикла). 2 M Na₂CO₃ (1,6 мл, водн. раствор) добавляют вместе с ДМЭ (2,4 мл). Раствор дегазируют в течение 10 минут, и затем добавляют Pd(PPh₃)₄ (0,0618 г, 0,0535 ммоль) весь сразу. Пробирку повторно герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт затем растворяют в ТГФ (2 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (0,24 мл, 1,61 ммоль) и затем TBAF (0,1 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (3,2 мл, 3,2 ммоль), смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (5% MeOH/ДХМ) с получением 0,0616 г (выход 15%, 3 стадии) TRV-1375 в виде 1:1 смеси региоизомеров.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 8,353 (с, 1H), 8,350 (с, 1H), 7,89 (с, 1H), 7,88 (с, 1H), 7,85 (с, 2H), 7,71-7,69 (м, 2H), 7,65-7,63 (м, 2H), 7,61-7,56 (м, 4H), 7,48 (с, 2H), 5,20 (кв, J=7,0 Гц, 2H), 5,07 (шир.с, 2H), 2,332 (с, 3H), 2,331 (с, 3H).

TRV-1376

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,3327 г, 1,2 ммоль), 1-метилпиперазин (0,13 мл, 1,2 ммоль), NMP (2 мл) и ДИПЭА (0,21 мл, 1,2 ммоль) герметично закрывают в пробирке и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O, 1 н. HCl (водн.), насыщенным NaHCO₃ (водн.), H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный анилин и 3-формилбензолбороновую кислоту (0,2338 г, 1,56 ммоль) герметично закрывают в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3 цикла). 2 M Na₂СО₃ (1,8 мл, водн. раствор) добавляют вместе с ДМЭ (2,7 мл). Раствор дегазируют в течение 10 минут, и затем Pd(PPh₃)₄ (0,0693 г, 0,06 ммоль) добавляют весь сразу. Пробирку повторно герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт затем растворяют в ТГФ (2,5 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (0,35 мл, 2,4 ммоль) и затем TBAF (0,1 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (4,2 мл, 4,2 ммоль), смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (5% MeOH/ДХМ) с получением 0,1695 г (выход 36%, 4 стадии) TRV-1376.¹Н-ЯМР (500 MГц, DMSO) δ = 7,91 (с, 1H), 7,85-7,83 (м, 1H), 7,60-7,54 (м, 2H), 7,54 (с, 1H), 6,94 (д, J=6,0 Гц, 1H), 6,75 (с, 1H), 5,31-5,28 (м, 1H), 3,64 (т, J=5,0 Гц, 4H), 2,54 (т, J=5,0 Гц, 4H), 2,25 (с, 3H).

TRV-1377

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,3113 г, 1,12 ммоль), N-изопропилметиламин (0,12 мл, 1,12 ммоль), ΝΜΡ (2 мл) и ДИПЭА (0,20 мл, 1,12 ммоль) герметично закрывают в пробирке и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O, 1 н. HCl (водн.), насыщенным NaHCO₃ (водн.), H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный анилин и 3-формилбензолбороновую кислоту (0,2189 г, 1,46 ммоль) герметично закрывают в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3 цикла). 2 M Na₂СО₃ (1,7 мл, водн. раствор) добавляют вместе с ДМЭ (2,5 мл). Раствор дегазируют в течение 10 минут, и затем Pd(PPh3)₄ (0,0647 г, 0,056 ммоль) добавляют весь сразу. Пробирку повторно герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт затем растворяют в ТГФ (2,5 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (0,33 мл, 2,24 ммоль) и затем TBAF (0,1 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (4,0 мл, 4,0 ммоль), смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (15% EtOAc/гексан) с получением 0,1283 г (выход 31%, 4 стадии) TRV-1377.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,74 (с, 1H), 7,68 (дт, J=5,0, 2,0 Гц, 1H), 7,55-7,51 (м, 2H), 7,18 (д, J=1,0 Гц, 1H), 6,30 (с, 1H), 5,24 (септ, J=6,5 Гц, 1H), 5,13 (кв, J=6,5 Гц, 1H), 3,01 (с, 3H), 2,71 (шир.с, 1H), 1,30 (д, J=6,5 Гц, 6H).

TRV-1378

N-бензил-6-бром-N-метилбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амин и 3-формилбензолбороновую кислоту (0,2293 г, 1,53 ммоль) герметично закрывают в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3 цикла). 2 M Na₂CO₃ (1,8 мл, водн. раствор) добавляют вместе с ДМЭ (2,6 мл). Раствор дегазируют в течение 10 минут, и затем Pd(PPh₃)₄ (0,0682 г, 0,059 ммоль) добавляют весь сразу. Пробирку повторно герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт затем растворяют в ТГФ (2,5 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (0,35 мл, 2,36 ммоль) и затем TBAF (0,1 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (4,2 мл, 4,2 ммоль), смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (15% EtOAc/гексан) с получением 0,2683 г (выход 55%, 4 стадии) TRV-1378.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,69 (с, 1H), 7,64 (дт, J=7,5, 1,5 Гц, 1H), 7,54-7,49 (м, 2H), 7,35-7,32 (м, 2H), 7,29-7,26 (м, 3H), 7,23 (д, J=1,0 Гц, 1H), 6,33 (с, 1H), 5,16 (с, 2H), 5,11 (кв, J=6,5 Гц, 1H), 3,24 (с, 3H), 2,68 (с, 1H).

TRV-1379

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,3414 г, 1,23 ммоль), 2-метилпирролидин (0,13 мл, 1,23 ммоль), NMP (2 мл) и ДИПЭА (0,21 мл, 1,23 ммоль) герметично закрывают в пробирке и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O, 1 н. HCl (водн.), насыщенным NaHCO₃ (водн.), H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный анилин и 3-формилбензолбороновую кислоту (0,2398 г, 1,6 ммоль) герметично закрывают в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3 цикла). 2 M Na₂СО₃ (1,9 мл, водн. раствор) добавляют вместе с ДМЭ (2,8 мл). Раствор дегазируют в течение 10 минут, и затем Pd(PPh₃)₄ (0,0716 г, 0,062 ммоль) добавляют весь сразу. Пробирку повторно герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт затем растворяют в ТГФ (2,5 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (0,36 мл, 2,46 ммоль) и затем TBAF (0,1 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (4,3 мл, 4,3 ммоль), смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (15% EtOAc/гексан) с получением 0,1319 г (выход 28%, 4 стадии) TRV-1379, 1:1:1:1 смеси диастереомеров из-за двух хиральных центров.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,74 (с, 1H), 7,67 (дт, J=7,0, 2,0 Гц, 1H), 7,55-7,50 (м, 2H), 7,07 (с, 1H), 6,12 (с, 1H), 5,13 (кв, J=6,5 Гц, 1H), 4,75-4,71 (м, 1H), 3,87-3,83 (м, 1H), 3,65-3,60 (м, 1H), 2,71 (шир.с, 1H), 2,24-2,08 (м, 3H), 1,85-1,81 (м, 1H), 1,29 (д, J=6,5 Гц, 3H).

TRV-1380

N-бензил-6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амин и 3-формилбензолбороновую кислоту (0,2488 г, 1,66 ммоль) герметично закрывают в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3 цикла). 2 M Na₂CO₃ (1,9 мл, водн. раствор) добавляют вместе с ДМЭ (2,9 мл). Раствор дегазируют в течение 10 минут, и затем Pd(PPh₃)₄ (0,074 г, 0,064 ммоль) добавляют весь сразу. Пробирку повторно герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт затем растворяют в ТГФ (3 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (0,28 мл, 1,92 ммоль) и затем TBAF (0,1 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (3,9 мл, 3,9 ммоль), смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (15% EtOAc/гексан) с получением 0,0655 г (выход 13%, 4 стадии) TRV-1380.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,67 (с, 1H), 7,63 (дт, J=7,5, 1,5 Гц, 1H), 7,57-7,52 (м, 2H), 7,49-7,42 (м, 4H), 7,40-7,36 (м, 1H), 7,22 (д, J=1,0 Гц, 1H), 6,37 (с, 1H), 5,51 (т, J=5,0 Гц, 1H), 5,14 (кв, J=6,5 Гц, 1H), 4,60 (д, J=5,0 Гц, 2H), 2,72 (шир.с, 1H).

TRV-1381

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,3095 г, 1,11 ммоль), пиперидин (0,11 мл, 1,11 ммоль), NMP (2 мл) и ДИПЭА (0,19 мл, 1,11 ммоль) герметично закрывают в пробирке и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O, 1 н. HCl (водн.), насыщенным NaHCO₃ (водн.), H₂O (3×), насыщенны раствор соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный анилин и 3-формилбензолбороновую кислоту (0,2159 г, 1,44 ммоль) герметично закрывают в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3 цикла). 2 M Na₂CO₃ (1,7 мл, водн. раствор) добавляют вместе с ДМЭ (2,5 мл). Раствор дегазируют в течение 10 минут, и затем Pd(PPh₃)₄ (0,0647 г, 0,056 ммоль) добавляют весь сразу. Пробирку повторно герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт затем растворяют в ТГФ (2,5 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (0,33 мл, 2,22 ммоль) и затем TBAF (0,1 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (3,9 мл, 3,9 ммоль), смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (20% EtOAc/гексан) с получением 0,3097 г (выход 74%, 4 стадии) TRV-1381.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,73 (с, 1H), 7,67-7,66 (м, 1H), 7,57-7,51 (м, 2H), 7,30 (с, 1H), 6,53 (с, 1H), 5,14 (кв, J=6,5 Гц, 1H), 3,65 (т, J=5,5 Гц, 4H), 2,70 (шир.с, 1H), 1,84-1,77 (м, 4H), 1,74-1,69 (м, 2H).

TRV-1382

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,3340 г, 1,2 ммоль), диэтиламин (0,13 мл, 1,2 ммоль), NMP (2 мл) и ДИПЭА (0,21 мл, 1,2 ммоль) герметично закрывают в пробирке и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O, 1 н. HCl (водн.), насыщенным NaHCO₃ (водн.), H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный анилин и 3-формилбензолбороновую кислоту (0,2338 г, 1,56 ммоль) герметично закрывают в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3 цикла). 2 M Na₂CO₃ (1,8 мл, водн. раствор) добавляют вместе с ДМЭ (2,7 мл). Раствор дегазируют в течение 10 минут, и затем Pd(PPh₃)₄ (0,0693 г, 0,06 ммоль) добавляют весь сразу. Пробирку повторно герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт затем растворяют в ТГФ (2,5 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (0,35 мл, 2,4 ммоль) и затем TBAF (0,1 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (4,2 мл, 4,2 ммоль), смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (20% EtOAc/гексан) с получением 0,2184 г (выход 50%, 4 стадии) TRV-1382.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,73 (с, 1H), 7,65 (дт, J=7,0, 2,0 Гц, 1H), 7,55-7,51 (м, 2H),7,11 (д, J=0,5 Гц, 1H), 6,25 (с, 1H), 5,13 (кв, J=6,5 Гц, 1H), 3,81 (кв, J=7,0 Гц, 4H), 2,76 (шир.с, 1H), 1,31 (т, J=7,0 Гц, 6H).

TRV-1383

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,3322 г, 1,2 ммоль), (2-метоксиэтил)метиламин (0,13 мл, 1,2 ммоль), NMP (2 мл) и ДИПЭА (0,21 мл, 1,2 ммоль) герметично закрывают в пробирке и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O, 1 н. HCl (водн.), насыщенным NaHCO₃ (водн.), H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный анилин и 3-формилбензолбороновую кислоту (0,2338 г, 1,56 ммоль) герметично закрывают в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3 цикла). 2 M Na₂CO₃ (1,8 мл, водн. раствор) добавляют вместе с ДМЭ (2,7 мл). Раствор дегазируют в течение 10 минут, и затем Pd(PPh₃)₄ (0,0693 г, 0,06 ммоль) добавляют весь сразу. Пробирку повторно герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенны раствор соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт затем растворяют в ТГФ (2,5 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (0,35 мл, 2,4 ммоль) и затем TBAF (0,1 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (4,2 мл, 4,2 ммоль), смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (20% EtOAc/гексан) с получением 0,2514 г (выход 55%, 4 стадии) TRV-1383.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,75 (с, 1H), 7,68 (дт, J=7,0, 2,0 Гц, 1H), 7,55-7,51 (м, 2H), 7,17 (д, J=1,0 Гц, 1H), 6,28 (с, 1H), 5,13 (кв, J=7,0 Гц, 1H), 4,18 (т, J=5,5 Гц, 2H), 3,68 (т, J=5,5 Гц, 2H), 3,35 (с, 3H), 3,28 (с, 3H), 2,78 (шир.с, 1H).

TRV-1384

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,3327 г, 1,2 ммоль), N-метилэтанамин (0,10 мл, 1,2 ммоль), ΝΜΡ (2 мл) и ДИПЭА (0,21 мл, 1,2 ммоль) герметично закрывают в пробирке и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O, 1 н. HCl (водн.), насыщенным NaHCO₃ (водн.), H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный анилин и 3-формилбензолбороновую кислоту (0,2338 г, 1,56 ммоль) герметично закрывают в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3 цикла). 2 M Na₂CO₃ (1,8 мл, водн. раствор) добавляют вместе с ДМЭ (2,7 мл). Раствор дегазируют в течение 10 минут, и затем Pd(PPh₃)₄ (0,0693 г, 0,06 ммоль) добавляют весь сразу. Пробирку повторно герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт затем растворяют в ТГФ (2,5 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (0,35 мл, 2,4 ммоль) и затем TBAF (0,1 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (4,2 мл, 4,2 ммоль), смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (20% EtOAc/гексан) с получением 0,2528 г (выход 60%, 4 стадии) TRV-1384.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,74 (с, 1H), 7,66 (дт, J=7,0, 2,0 Гц, 1H), 7,55-7,50 (м, 2H), 7,15 (д, J=1,0 Гц, 1H), 6,23 (с, 1H), 5,13 (кв, J=7,0 Гц, 1H), 4,00 (кв, J=7,0 Гц, 2H), 3,22 (с, 3H), 2,78 (шир.с, 1H), 1,25 (т, J=7,0 Гц, 3H).

TRV-1385

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,3373 г, 1,2 ммоль), тиоморфолин (0,12 мл, 1,2 ммоль), NMP (2 мл) и ДИПЭА (0,21 мл, 1,2 ммоль) герметично закрывают в пробирке и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O, 1 н. HCl (водн.), насыщенным NaHCO₃ (водн.), H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный анилин и 3-формилбензолбороновую кислоту (0,2338 г, 1,56 ммоль) герметично закрывают в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3 цикла). 2 M Na₂СО₃ (1,8 мл, водн. раствор) добавляют вместе с ДМЭ (2,7 мл). Раствор дегазируют в течение 10 минут, и затем Pd(PPh₃)₄ (0,0693 г, 0,06 ммоль) добавляют весь сразу. Пробирку повторно герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт затем растворяют в ТГФ (2,5 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (0,35 мл, 2,4 ммоль) и затем TBAF (0,1 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и TBAF (4,2 мл, 4,2 ммоль) добавляют, смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (20% EtOAc/гексан) с получением 0,1863 г (выход 39%, 4 стадии) TRV-1385.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,73 (с, 1H), 7,65 (дт, J=7,0, 2,0 Гц, 1H), 7,57-7,52 (м, 2H), 7,34 (д, J=0,5 Гц, 1H), 6,55 (с, 1H), 5,14 (кв, J=6,5 Гц, 1H), 4,06 (м, 4H), 2,86 (м, 4H), 2,76 (шир.с, 1H).

TRV-1386

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (8,9 г, 32,0 ммоль) и 3-формилбензолбороновую кислоту (5,037 г, 33,6 ммоль) загружают в колбу. Колбу откачивают и продувают аргоном (3 цикла). 2 M Na₂CO₃ (48 мл, водн. раствор) добавляют вместе с ДМЭ (72 мл). Раствор дегазируют в течение 15 минут, и затем Pd(PPh₃)₄ (1,85 г, 1,6 ммоль) добавляют весь сразу. Колбу нагревают до 100°C в течение 4 часов. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением 13,3 г желтого твердого вещества, которое представляет собой желаемый продукт, непрореагировавший исходный материал, неправильный региоизомер и бис-сопряженный продукт. Очистка неочищенного продукта хроматографией (0, 5, 10, 15, 20% EtOAc/гексан, градиентное элюирование) дает 1,9412 г (выход 20%) 3-(7-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-5-ил)бензальдегида. Этот материал (1,7903 г, 5,91 ммоль) затем растворяют в ТГФ (12 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (1,75 мл, 11,8 ммоль) и затем TBAF (0,6 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (22 мл, 22 ммоль), смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт растворяют в ТГФ (15 мл) и охлаждают до 0°C. NaH (0,2836 г, 7,09 ммоль) добавляют порциями, и реакционную смесь перемешивают в течение 10 минут при 0°C, затем нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение дополнительных 30 минут. Раствор затем повторно охлаждают и добавляют TBSCl (1,336 г, 8,87 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи в атмосфере аргона. Охлаждают до 0°C и гасят насыщенным NH₄Cl (водн.) и затем разбавляют EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (5% EtOAc/гексан) с получением 1,2744 г (выход 44%, 3 стадии) соответствующего простого эфира силила в виде коричневого твердого вещества. Этот материал (0,2732 г, 0,56 ммоль) растворяют в ТГФ (5 мл) и охлаждают до -78°C. н-BuLi (0,31 мл, 2,0 M раствор в циклогексан, 0,62 ммоль) добавляют по каплям, и раствор перемешивают в течение 30 минут, затем гасят насыщенным NH₄Cl (водн.) и нагревают до комнатной температуры. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт растворяют в ТГФ (10 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют TBAF (1,2 мл, 1,0 M раствор в ТГФ), и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Реакционную смесь гасят насыщенным раствором соли. Смесь затем разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией.

TRV-1387

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,3832 г, 1,38 ммоль), 4-(пирролидин-1-ил)пиперидин (0,2127 г, 1,38 ммоль), NMP (2 мл) и ДИПЭА (0,24 мл, 1,38 ммоль) герметично закрывают в пробирке и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный анилин и 3-формилбензолбороновую кислоту (0,2698 г, 1,8 ммоль) герметично закрывают в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3 цикла). 2 M Na₂CO₃ (2,1 мл, водн. раствор) добавляют вместе с ДМЭ (3,1 мл). Раствор дегазируют в течение 10 минут, и затем Pd(PPh₃)₄ (0,0797 г, 0,069 ммоль) добавляют весь сразу. Пробирку повторно герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт затем растворяют в ТГФ (2,8 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (0,41 мл, 2,76 ммоль) и затем TBAF (0,1 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (4,8 мл, 4,8 ммоль), смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (10% MeOH/ДХМ) с получением 0,1349 г (выход 22%, 4 стадии) TRV-1387.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,73 (с, 1H), 7,59 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,53-7,46 (м, 2H), 7,25 (с, 1H), 6,48 (с, 1H), 5,08 (кв, J=6,5 Гц, 1H), 4,34-4,28 (м, 2H), 3,05-3,00 (м, 2H), 2,65 (шир.с, 4H), 2,30-2,27 (м, 1H), 2,06-2,03 (м, 2H), 1,84 (шир.с, 4H), 1,77-1,66 (м, 3H);¹Н-ЯМР (ДМСО, 500 MГц) δ = 7,91 (с, 1H), 7,83 (д, J=10 Гц, 1H), 7,59 (д, J=10 Гц, 1H), 7,55 (т, J=10 Гц, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,97 (д, J=5 Гц, 1H), 6,73 (с, 1H), 5,31-5,26 (м, 1H), 4,20 (д, J=10 Гц, 2H), 3,16 (т, J=10 Гц, 2H), 2,52 (с, 4H), 2,26-2,22 (м, 1H), 2,00 (д, J=10 Гц, 2H), 1,67 (с, 4H), 1,63-1,56 (м, 2H).

TRV-1388

К раствору 4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазола (0,3106 г, 1,12 ммоль) и пиразола (0,0837 г, 1,23 ммоль) в ТГФ при -78°C по каплям добавляют NaHMDS (1,2 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Раствор перемешивают в течение 30 минут, затем нагревают до комнатной температуры. Раствор затем дегазируют в течение 5 минут, затем нагревают до 50°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры реакционную смесь гасят насыщенным NH₄Cl (водн.) и разбавляют EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный анилин и 3-формилбензолбороновую кислоту (0,2189 г, 1,46 ммоль) герметично закрывают в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3 цикла). 2 M Na₂СО3 (1,7 мл, водн. раствор) добавляют вместе с ДМЭ (2,5 мл). Раствор дегазируют в течение 10 минут, и затем Pd(PPh₃)₄ (0,0647 г, 0,056 ммоль) добавляют весь сразу. Пробирку повторно герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт затем растворяют в ТГФ (2,5 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (0,33 мл, 2,24 ммоль) и затем TBAF (0,1 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (3,9 мл, 3,9 ммоль), смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (20% EtOAc/гексан) с получением 0,0342 г (8,5% выход, 4 стадии) TRV-1388.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 8,91 (д, J=2,5 Гц, 1H), 8,33 (д, J=1,5 Гц, 1H), 7,84-7,83 (м, 3H), 7,76 (дт, J=7,5, 1,5 Гц, 1H), 7,59-7,52 (м, 2H), 6,62-6,61 (м, 1H), 5,15-5,12 (м, 1H), 3,40 (д, J=4,0 Гц, 1H).

TRV-1389

К раствору 4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазола (0,3457 г, 1,24 ммоль) и 4-метилпиразола (0,11 мл, 1,37 ммоль) в ТГФ при -78°C добавляют NaHMDS (1,3 мл, 1,0 M раствор в ТГФ) по каплям. Раствор перемешивают в течение 30 минут, затем нагревают до комнатной температуры. Раствор затем дегазируют в течение 5 минут, затем нагревают до 50°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, реакционную смесь гасят насыщенным NH₄Cl (водн.) и разбавляют EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный анилин и 3-формилбензолбороновую кислоту (0,2413 г, 1,61 ммоль) герметично закрывают в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3 цикла). 2 M Na₂CO₃ (1,9 мл, водн. раствор) добавляют вместе с ДМЭ (2,8 мл). Раствор дегазируют в течение 10 минут, и затем Pd(PPh₃)₄ (0,0716 г, 0,062 ммоль) добавляют весь сразу. Пробирку повторно герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт затем растворяют в ТГФ (2,5 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (0,37 мл, 2,48 ммоль) и затем TBAF (0,1 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и TBAF (4,3 мл, 4,3 ммоль) добавляют, смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (20% EtOAc/гексан) с получением 0,0365 г (7,9% выход, 4 стадии) TRV-1389.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 8,68 (с, 1H), 8,28 (д, J=1,0 Гц, 1H), 7,84 (с, 1H), 7,81 (д, J=1,0 Гц, 1H), 7,76 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,66 (с, 1H), 7,60-7,54 (м, 2H), 5,16-5,14 (м, 1H), 3,06 (д, J=3,5 Гц, 1H), 2,23 (с, 3H).

TRV-1390

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,3688 г, 1,33 ммоль), 4-фтор-N-метилбензиламин (0,18 мл, 1,39 ммоль), ΝΜΡ (3 мл) и ДИПЭА (0,26 мл, 1,5 ммоль) герметично закрывают в пробирке и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O, 1 н. HCl (водн.), насыщенным NaHCO₃ (водн.), H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением 6-бром-N-(4-фторбензил)-N-метилбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амина. Неочищенный анилин и 3-формилбензолбороновую кислоту (0,2593 г, 1,73 ммоль) герметично закрывают в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3 цикла). 2 M Na₂СО₃ (2,0 мл, водн. раствор) добавляют вместе с ДМЭ (3,0 мл). Раствор дегазируют в течение 10 минут, и затем Pd(PPh₃)₄ (0,0768 г, 0,066 ммоль) добавляют весь сразу. Пробирку повторно герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт затем растворяют в ТГФ (4,0 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (0,39 мл, 2,66 ммоль) и затем TBAF (0,1 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (4,7 мл, 4,7 ммоль), смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (15% EtOAc/гексан) с получением 0,2675 г (выход 47%, 4 стадии) TRV-1390.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,70 (с, 1H), 7,64 (дт, J=7,0, 2,0 Гц, 1H), 7,55-7,50 (м, 2H), 7,27-7,24 (м, 3H), 7,04-7,00 (м, 2H), 6,34 (с, 1H), 5,12-5,10 (м, 3H), 3,19 (с, 3H), 2,71 (с, 1H).

TRV-1391

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (8,9 г, 32,0 ммоль) и 3-формилбензолбороновую кислоту (5,037 г, 33,6 ммоль) загружают в колбу. Колбу откачивают и продувают аргоном (3 цикла). 2 M Na₂СО₃ (48 мл, водн. раствор) добавляют вместе с ДМЭ (72 мл). Раствор дегазируют в течение 15 минут, и затем Pd(PPh₃)₄ (1,85 г, 1,6 ммоль) добавляют весь сразу. Колбу нагревают до 100°C в течение 4 часов. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением 13,3 г желтого твердого вещества, которое является смесью желаемого продукта, непрореагировавшего исходного материала, неправильного региоизосопряженного продукта. Очистка неочищенного продукта хроматографией (0, 5, 10, 15, 20% EtOAc/гексан градиентное элюирование) дает 1,9412 г (выход 20%) 3-(7-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-5-ил)бензальдегида. Этот продукт (1,7903 г, 5,91 ммоль) затем растворяют в ТГФ (12 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (1,75 мл, 11,8 ммоль) и затем TBAF (0,6 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (22 мл, 22 ммоль), смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот неочищенный продукт растворяют в ТГФ (15 мл) и охлаждают до 0°C. NaH (0,2836 г, 7,09 ммоль) добавляют порциями, и реакционную смесь перемешивают в течение 10 минут при 0°C, затем нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение дополнительных 30 минут. Раствор затем повторно охлаждают и добавляют TBSCl (1,336 г, 8,87 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи в атмосфере аргона. Охлаждают до 0°C и гасят насыщенным NH₄Cl (водн.) и затем разбавляют EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (5% EtOAc/гексан) с получением 1,2744 г (выход 44%, 3 стадии) коричневого твердого вещества. Это твердое вещество (0,2647 г, 0,543 ммоль) растворяют в ТГФ (5 мл) и охлаждают до -78°C. н-BuLi (0,30 мл, 2,0 M раствор в циклогексане, 0,60 ммоль) добавляют по каплям, и раствор перемешивают в течение 30 минут, затем добавляют ДМФА (0,050 мл, 0,652 ммоль). Смесь медленно нагревают до комнатной температуры. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и гасят насыщенным NH₄Cl (водн.). Эту смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные экстракты промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного альдегида. Альдегид очищают флэш-хроматографией на колонке (10% EtOAc/гексан) с получением 0,0913 г (выход 39%). Этот альдегид затем растворяют в ДХМ (1 мл) и добавляют пирролидин (0,026 мл, 0,313 ммоль). К этой смеси затем добавляют NaHB(OAc)₃ (0,0886 г, 0,418 ммоль) при энергичном перемешивании, и реакционную смесь перемешивают в течение ночи. Реакционную смесь гасят насыщенным NaHCO₃ (водн.) и экстрагируют ДХМ. Объединенные экстракты промывают водой, насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот продукт затем повторно растворяют в ТГФ (2 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют TBAF (0,42 мл, 1,0 M раствор в ТГФ), и смесь перемешивают в течение ночи в атмосфере аргона. Реакционную смесь гасят насыщенным раствором соли и экстрагируют EtOAc. Объединенные экстракты промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄) фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (5% MeOH/ДХМ) с получением 0,0181 г (выход 23%) TRV-1391.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 7,84 (т, J=0,5 Гц, 1H), 7,78 (с, 1H), 7,72-7,70 (м, 2H), 7,58-7,54 (м, 2H), 5,15 (кв, J=7,0 Гц, 1H), 4,12 (с, 2H), 2,69 (с, 4H), 1,86-1,84 (м, 4H).

TRV-1392

N-бензил-6-бром-N-метилбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амин (0,3720 г, 1,17 ммоль) растворяют в ТГФ (6 мл) в атмосфере аргона и охлаждают до -78°C. н-BuLi (0,65 мл, 2,0 M раствор в циклогексане) добавляют по каплям с получением темно-красного раствора. Эту смесь перемешивают в течение 30 минут при -78°C и затем быстро добавляют ДМФА (0,11 мл, 1,4 ммоль). Смесь медленно нагревают до комнатной температуры. Смесь затем повторно охлаждают до 0°C и гасят насыщенным NH₄Cl (водн.). Эту смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные экстракты промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного альдегида. Альдегид очищают флэш-хроматографией на колонке (10% EtOAc/гексан) с получением 0,1737 г (выход 56%) альдегида 4. Этот продукт (0,1737 г, 0,546 ммоль) затем растворяют в ТГФ (2,0 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (0,16 мл, 1,09 ммоль) и затем TBAF (0,06 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (2,0 мл, 2,0 ммоль), смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (15% EtOAc/гексан) с получением 0,1094 г (выход 60%) TRV-1392.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,38-7,35 (м, 2H), 7,33-7,28 (м, 4H), 6,26 (с, 1H), 5,17 (с, 2H), 5,05 (кв, J=6,5 Гц, 1H), 3,23 (с, 3H), 2,79 (шир.с, 1H).

TRV-1397

6-бром-N-(4-фторбензил)-N-метилбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амин (0,3753 г, 1,12 ммоль) растворяют в ТГФ (6 мл) и охлаждают до -78°C. н-BuLi (0,62 мл, 2,0 M раствор в циклогексане, 1,23 ммоль) добавляют по каплям, и раствор перемешивают в течение 30 минут, затем добавляют ДМФА (0,10 мл, 1,34 ммоль). Смесь перемешивают в атмосфере аргона при -78°C. Через 3 часа добавляют насыщенный NH₄Cl (водн.), и затем смесь нагревают до комнатной температуры. Эту смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные экстракты промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного альдегида. Альдегид очищают флэш-хроматографией на колонке (10% EtOAc/гексан) с получением 0,1846 г (выход 58%). Этот продукт (0,1846 г, 0,647 ммоль) затем растворяют в ТГФ (3 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (0,19 мл, 1,3 ммоль) и затем TBAF (0,06 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (2,3 мл, 2,26 ммоль), смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот продукт очищают хроматографией (20% EtOAc/гексан) с получением 0,0794 г (выход 34%) TRV-1397 в виде красного масла.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,26 (с, 1H), 7,24-7,22 (м, 2H), 7,03-6,99 (м, 2H), 6,23 (с, 1H), 5,09 (с, 2H), 5,02 (кв, J=7,0 Гц, 1H), 3,15 (с, 3H), 2,67 (шир.с, 1H).

TRV-1398

TRV-1378 (83 мг, 0,2 ммоль) растворяют в ТГФ (2 мл) и добавляют по каплям к суспензии NaH (50 мг), перемешивая в ТГФ (1 мл) при 0°C. После завершения добавления холодную баню удаляют и заменяют водяной баней при комнатной температуре. Через 5 минут реакционную смесь повторно охлаждают до 0°C и добавляют MeI (100 мкл, 0,8 ммоль). Холодную баню оставляют на месте, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Затем проводят стандартную обработку и флэш-хроматографию (9:1 гексан/EtOAc). Продукт выделяют в виде оранжевого твердого вещества (54 мг, выход 63%).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,68 (м, 2H), 7,54 (м, 2H), 7,37 (м, 2H), 7,32 (м, 4H), 6,38 (с, 1H), 5,20 (с, 2H), 4,61 (кв, J=7 Гц, 1H), 3,52 (с, 3H), 3,29 (с, 3H).

TRV-1399

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,9837 г, 3,53 ммоль), этиламин (0,29 мл, 3,53 ммоль), NMP (5 мл) и ДИПЭА (0,61 мл, 3,53 ммоль) герметично закрывают в пробирке и нагревают до 60°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O, 1 н. HCl (водн.), насыщенным NaHCO₃ (водн.), H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке (3% EtOAc/гексан) с получением 0,3952 г (выход 46%). Этот продукт (0,1298 г, 0,54 ммоль) растворяют в Ac₂O (5 мл) и нагревают до 140°C в течение 48 часов. После охлаждения до комнатной температуры, продукт концентрируют с получением соединения 4 с выходом 98%. Этот продукт (0,1499 г, 0,52 ммоль) добавляют в пробирку вместе с 3-формилбензeнбороновой кислотой (0,1013 г, 0,676 ммоль), и пробирку продувают и откачивают аргоном (3 раза). Добавляют Na₂СО₃ (1,6 мл, 3,12 ммоль, 2 M водный раствор) и ДМЭ (2,3 мл), и раствор дегазируют в течение 10 минут. Наконец добавляют Pd(PPh₃)₄ (0,030 г, 0,026 ммоль), пробирку герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют EtOAc и водой. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc (3×). Объединенные органические слои промывают H₂O (4×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного альдегида 6. Этот альдегид затем растворяют в ТГФ (3 мл) и охлаждают на ледяной бане. К этому раствору добавляют CF₃TMS (0,08 мл, 0,52 ммоль) и затем TBAF (0,05 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Через 5 минут, ледяную баню удаляют, и смесь перемешивают в течение дополнительных 2 часов. Раствор затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют TBAF (1,3 мл, 1,3 ммоль), смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой затем повторно экстрагируют. Объединенные органические экстракты затем промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли и затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Этот продукт очищают хроматографией (40% EtOAc/гексан) с получением 0,0327 г (выход 17% за 3 стадии) TRV-1399 в виде желтого твердого вещества.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,98 (с, 1H), 7,78 (с, 1H), 7,68-7,67 (м, 1H), 7,61-7,57 (м, 2H), 7,52 (с, 1H), 5,19-5,14 (м, 1H), 3,97 (кв, J=10 Гц, 2H), 3,33 (д, J=5 Гц, 1H), 2,02 (шир.с, 3H), 1,21 (т, J=10 Гц, 3H).

TRV-1400

CsF (0,0052 г, 0,034 ммоль) добавляют к смеси TRV-1402 (0,1162 г, 0,34 ммоль) и CF₃TMS (0,10 мл, 0,68 ммоль) в ТГФ (3 мл) при комнатной температуре. Этот раствор перемешивают до 100% превращения исходного материала и затем добавляют TBAF (1,2 мл, 1,0 M раствор в ТГФ), смесь перемешивают в течение дополнительных 16 часов. Реакционную смесь гасят насыщенным раствором соли и разбавляют EtOAc и водой. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают на колонке 10% EtOAc/гексан и затем повторно на колонке 5% EtOAc/гексан с получением 0,020 г (выход 13%) TRV-1400 в виде оранжевого твердого вещества.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,24-7,21 (м, 2H), 7,17 (д, J=15 Гц, 1H), 7,16 (с, 1H), 7,03-6,99 (м, 2H), 6,23 (д, J=15 Гц, 1H), 6,18 (с, 1H), 5,11 (с, 2H), 3,30 (шир.с, 1H), 3,17 (с, 3H).

TRV-1401

К раствору 6-бром-4-хлорбензо[c][1,2,5]оксадиазола (372 мг, 1,6 ммоль) в NMP (3 мл) в 4-драхмовой пробирке добавляют изоиндолин (238 мг, 2 ммоль) и триэтиламин (400 мкл, 2,9 ммоль). Крышку плотно закрывают, и реакционную смесь нагревают при 85°C ВТН. Реакционную смесь обрабатывают, разбавляя EtOAc (60 мл) и промывая 1 M HCl (3×20 мл) и насыщенным раствором соли (1×20 мл). Органическую фазу сушат с MgSO₄, фильтруют и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (9:1 гексан/EtOAc) с получением 208 мг (выход 41%) 6-бром-4-(изоиндолин-2-ил)бензо[c][1,2,5]оксадиазола.¹Н-ЯМР (300 MГц, CDCl₃) δ = 7,38 (м, 4H), 7,26 (с, 1H), 6,14 (с, 1H), 5,14 (с, 4H). К раствору полученного выше продукта (200 мг, 0,6 ммоль) в ДМЭ (4 мл)/Na₂CO₃ (0,9 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (134 мг, 0,9 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (35 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 115°C ВТН. Реакционную смесь обрабатывают разбавлением 1 M NaOH (40 мл) и экстрагированием с EtOAc (3×20 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт конденсируют с SiO₂ (2 г) и очищают флэш-хроматографией на колонке (2:1 ДХМ/гексан) с получением 190 мг (выход 92%).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 10,18 (с, 1H), 8,24 (м, 1H), 7,99 (дм, J=8 Гц, 2H), 7,70 (т, J=7 Гц, 1H), 7,44 (м, 4H), 7,26 (с, 1H), 6,30 (с, 1H), 5,25 (с, 4H). К перемешиваемому раствору полученного выше продукта (190 мг, 0,55 ммоль) и реагента Руперта (150 мг, 1,1 ммоль) в ДХМ (5 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,1 мл, 1 M ТГФ, 0,1 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь разбавляют ДХМ. Органические фазы промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт пропускают через слой SiO₂ (ДХМ) и затем очищают флэш-хроматографией на колонке (2:1 ДХМ/гексан).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,84 (с, 1H), 7,77 (дт, J=7 Гц, 2 Гц, 1H), 7,60 (м, 2H), 7,43 (м, 4H), 7,23 (с, 1H), 6,25 (с, 1H), 5,31 (с, 4H), 5,2 (м, 1H), 2,68 (с, 1H).

TRV-1402

6-бром-N-(4-фторбензил)-N-метилбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амин (1,5615 г, 4,65 ммоль) растворяют в ТГФ (45 мл) и охлаждают до -78°C. н-BuLi (2,6 мл, 2,0 M раствор в циклогексане) добавляют по каплям, и раствор перемешивают в течение 30 минут при -78°C. Добавляют ДМФА (0,54 мл, 7,0 ммоль), и реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 3 часов. Эту реакцию затем гасят насыщенным NH₄Cl (водн.) и медленно нагревают до комнатной температуры. Эту смесь экстрагируют EtOAc, и объединенные органические слои промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного альдегида. Этот продукт очищают на колонке 10% EtOAc/гексан с получением 0,7248 г (выход 55%) альдегида. Этот альдегид (0,5615 г, 1,97 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляют к перемешиваемой суспензии NaH (0,104 г, 2,6 ммоль) и фосфоноацетата триметила (0,31 мл, 2,17 ммоль) в ТГФ (20 мл) при 0°C. После завершения добавления смесь перемешивают в течение ночи, нагревая до комнатной температуры. После повторного охлаждения до 0°C, реакционную смесь гасят насыщенным NH₄Cl (водн.). Эту смесь затем экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают на колонке 20% EtOAc/гексан с получением 0,5945 г (выход 88%) TRV-1402 в виде транс-изомера.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,64 (д, J=15 Гц, 1H), 7,25 (с, 1H), 7,23-7,21 (м, 2H), 7,03-7,00 (м, 2H), 6,46 (д, J=15 Гц, 1H), 6,25 (с, 1H), 5,10 (с, 2H), 3,83 (с, 3H), 3,15 (с, 3H).

TRV-1403

К раствору 6-бром-4-хлорбензо[c][1,2,5]оксадиазола (353 мг, 1,5 ммоль) в NMP (3 мл) в 4-драхмовой пробирке добавляют гидрохлорид 3-гидроксиазетидина (180 мг, 1,65 ммоль) и триэтиламин (635 мкл, 4,5 ммоль). Крышку плотно закрывают, и реакционную смесь нагревают при 85°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют EtOAc (60 мл) и промывают 1 M HCl (3×20 мл) и насыщенным раствором соли (1×20 мл). Органическую фазу сушат с MgSO₄, фильтруют и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (ДХМ) с получением 264 мг (выход 65%) 1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-ола.¹Н-ЯМР (300 MГц, CDCl₃) δ = 7,23 (с, 1H), 5,95 (с, 1H), 4,92 (м, 1H), 4,59 (м, 2H), 4,15 (м, 2H), 2,20 (д, J=6 Гц, 1H). К перемешиваемому при 0°C раствору 1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-ола (480 мг, 2 ммоль) в NMP (12 мл) добавляют MeI (1,4 г, 10 ммоль), затем NaH (200 мг, 8,5 ммоль). Оставляя холодную баню на месте, реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 16 часов реакционную смесь осторожно гасят водой, обрабатывают насыщенным NH₄Cl и экстрагируют в EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промывают HCl (2 M), затем насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Продукт очищают хроматографией с сухим всасыванием (1:1 ДХМ/гексан) с получением 46 мг (выход 71%).¹Н-ЯМР (300 MГц, CDCl₃) δ = 7,22 (д, J=1 Гц, 1H), 5,92 (с, ушир, 1H), 4,44 (м, 3H), 4,16 (м, 2H), 3,37 (с, 3H). К раствору TKW-I-92 (406 мг, 1,43 ммоль) в ДМЭ (7 мл)/Na₂CO₃ (2,1 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (322 мг, 2,1 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (80 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 115°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют 1 M NaOH (40 мл) и экстрагируют EtOAc (3×20 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают фильтрацией с сухим отсасыванием (ДХМ) с получением 411 мг продукта.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 10,11 (с, 1H), 8,12 (м, 1H), 7,93 (дм, J=8 Гц, 1H), 7,88 (дм, J=8 Гц, 1H), 7,65 (т, J=8 Гц, 1H), 7,21 (м, 1H), 6,08 (м, 1H), 4,56 (дд, J=10 Гц/5 Гц, 2H), 4,46 (м, 1H), 4,21 (дд, J=10 Гц/4 Гц, 2H), 3,39 (с, 3H). К перемешиваемому раствору TKW-I-93 (411 мг, 1,33 ммоль) и реагента Руперта (378 мг, 2,7 ммоль) в ДХМ (13 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,2 мл, 1 M ТГФ, 0,2 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь разбавляют ДХМ. Органические фазы промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (ДХМ) с получением 477 мг (выход 94%).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,72 (с.шир, 1H), 7,65 (дт, J=7 Гц/2 Гц, 2H), 7,51 (м, 2H), 7,17 (д, J=1 Гц, 1H), 6,06 (с, 1H), 5,12 (м, 1H), 4,53 (м, 2H), 4,45 (м, 1H), 4,18 (дм, J=10 Гц, 2H), 3,38 (с, 3H).

TRV-1404

К раствору 6-бром-4-хлорбензо[c][1,2,5]оксадиазола (355 мг, 1,52 ммоль) в NMP (3 мл) в 4-драхмовой пробирке добавляют N-метилпропаргиламин (92 мг, 1,67 ммоль) и триэтиламин (635 мкл, 4,5 ммоль). Крышку плотно закрывают, и реакционную смесь нагревают при 85°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют EtOAc (60 мл) и промывают 1 M HCl (3×20 мл) и насыщенным раствором соли (1×20 мл). Органическую фазу сушат с MgSO₄, фильтруют и концентрируют в вакууме. Из-за летучей природы SM неочищенный продукт превращается только на 50%. Смесь применяют без дальнейшей очистки.¹Н-ЯМР (300 MГц, CDCl₃) δ = 8,03 (с, 1H, СМ), 7,55 (с, 1H, СМ), 7,41 (с, 1H), 6,35 (с, 1H), 4,66 (с, 2H), 3,24 (с, 3H), 2,27 (с, 1H). К раствору TKW-I-81 (180 мг, 0,7 ммоль) в ДМЭ (3 мл)/Na₂CO₃ (1,0 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (152 мг, 1,0 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (40 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 115°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют 1 M NaOH (40 мл) и экстрагируют EtOAc (3×20 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (9:1 гексан/EtOAc) с получением 58 мг продукта.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 10,12 (с, 1H), 8,17 (м, 1H), 7,99 (дм, J=8 Гц, 1H), 7,96 (дм, J=8 Гц, 1H), 7,39 (с, 1H), 6,54 (с, 1H), 4,71 (с, 2H), 3,31 (с, 3H), 2,28 (с, 1H). К перемешиваемому раствору TKW-I-87 (277 мг, 0,94 ммоль) и реагента Руперта (400 мг, 2,8 ммоль) в ДХМ (10 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,1 мл, 1 M ТГФ, 0,1 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь разбавляют ДХМ. Органические фазы промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (50-80% ДХМ в гексане).¹Н-ЯМР (300 MГц, CDCl₃) δ = 7,76 (м, 1H), 7,69 (м, 1H), 7,55 (м, 2H), 7,34 (д, J=1 Гц, 1H), 6,55 (д, J=1 Гц, 1H), 5,14 (м, 1H), 4,68 (д, J=2 Гц, 2H), 3,30 (с, 3H), 2,69 (д, J=4 Гц, 1H), 2,29 (т, J=2 Гц, 1H).

TRV-1405

К раствору 6-бром-4-хлорбензо[c][1,2,5]оксадиазола (388 мг, 1,66 ммоль) в NMP (3 мл) в 4-драхмовой пробирке добавляют циклопропиламин (104 мг, 1,83 ммоль) и триэтиламин (694 мкл, 4,9 ммоль). Крышку плотно закрывают, и реакционную смесь нагревают при 85°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют EtOAc (60 мл) и промывают 1 M HCl (3×20 мл) и насыщенным раствором соли (1×20 мл). Органическую фазу сушат с MgSO₄, фильтруют и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (ДХМ) с получением 264 мг (выход 65%).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,32 (м, 1H), 6,60 (м, 1H), 5,46 (с.шир, 1H), 2,65 (м, 1H), 0,94 (м, 2H), 0,74 (м, 2H). К раствору TKW-I-88 (214 мг, 0,8 ммоль) в ДМЭ (3 мл)/Na₂CO₃ (1,0 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (240 мг, 1,6 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (40 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 115°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют 1 M NaOH (40 мл) и экстрагируют EtOAc (3×20 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствор соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт конденсируют с SiO₂ (3 г) и очищают флэш-хроматографией на колонке (9:1 гексан/EtOAc) с получением 100 мг (выход 42%) продукта.¹Н-ЯМР (300 MГц, CDCl₃) δ = 10,13 (с, 1H), 8,19 (м, 1H), 7,94 (м, 2H), 7,69 (т, J=7 Гц, 1H), 7,32 (м, 1H), 6,83 (м, 1H), 3,57 (с, 3H), 2,77 (м, 1H), 1,01 (м, 2H), 0,76 (м, 2H). К перемешиваемому раствору TKW-I-91 (277 мг, 0,94 ммоль) и реагента Руперта (400 мг, 2,8 ммоль) в ДХМ (10 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,1 мл, 1 M ТГФ, 0,1 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь разбавляют ДХМ. Органические фазы промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (10-15% EtOAc в гексане) с получением 100 мг (выход 80%).¹Н-ЯМР (300 MГц, CDCl₃) δ = 7,77 (с, 1H), 7,68 (м, 1H), 7,53 (м, 2H), 7,28 (м, 1H), 6,82 (д, J=1 Гц, 1H), 5,13 (м, 1H), 3,54 (с, 3H), 2,67 (м, 2H), 0,96 (м, 2H), 0,75 (м, 2H).

TRV-1406

К раствору 1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-ола (260 мг, 0,9 ммоль) в ДМЭ (6 мл)/Na₂CO₃ (1,5 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (225 мг, 0,9 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (45 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 115°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют 1 M NaOH (40 мл) и экстрагируют EtOAc (3×20 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме с получением 277 мг. Неочищенный продукт был одним пятном по ТСХ, и применяют без дальнейшей очистки.¹Н-ЯМР (300 MГц, CDCl₃) δ = 10,12 (с, 1H), 8,14 (с, 1H), 7,98 (дм, J=7 Гц, 1H), 7,93 (дм, J=8 Гц, 1H), 7,70 (т, J=7 Гц, 1H), 7,24 (с, 1H), 6,11 (с, 1H), 4,95 (м, 1H), 4,63 (м, 2H), 4,19 (2H), 2,28 (м, 1H). К перемешиваемому раствору альдегида (277 мг, 0,94 ммоль) и реагента Руперта (400 мг, 2,8 ммоль) в ДХМ (10 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,1 мл, 1 M ТГФ, 0,1 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь разбавляют ДХМ. Органические фазы промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (40% EtOAc в гексане) с получением 147 мг (выход 42%) TRV-1406.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,76 (с, 1H), 7,69 (дт, J=7 Гц, 2 Гц, 1H), 7,57 (м, 2H), 7,23 (с, 1H), 6,12 (с, 1H), 5,16 (кв, J=6 Гц, 1H), 4,96 (м, 1H), 4,65 (дд, J=10 Гц/6 Гц, 2H), 4,20 (дд, J=10 Гц/6 Гц, 2H), 2,71 (с.шир, 1H), 2,22 (с.шир, 1H).

TRV-1408

6-бром-N-(4-фторбензил)-N-метилбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амин (0,2959 г, 0,88 ммоль) растворяют в ТГФ (5 мл) и охлаждают до -78°C. н-BuLi (0,51 мл, 1,01 ммоль, 2,0 M раствор в циклогексане) добавляют по каплям, и раствор перемешивают в течение 20 минут при -78°C. Добавляют I₂ (1,3 мл, 1,0 M раствор в ТГФ), и раствор медленно нагревают до 0°C в течение ночи. Реакционную смесь гасят насыщенным NH₄Cl (водн.) и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают на колонке 3% EtOAc/гексан с получением 0,1381 г (выход 41%, химическая чистота 89%) арилйодида 8. Арилйодид (0,1332 г, 0,348 ммоль) и метилпропиолат (0,12 мл, 1,39 ммоль) добавляют в пробирку. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Добавляют Pd(PPh₃)₂Cl₂ (0,0122 г, 0,0174 ммоль), CuI (0,0066 г, 0,0348 ммоль) и K₂CO₃ (0,0962 г, 0,696 ммоль). Пробирку герметично закрывают и нагревают до 65°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают на колонке 10% EtOAc/гексан с получением 0,0154 г (выход 13%) TRV-1408.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,42 (с, 1H), 7,21-7,18 (м, 2H), 7,03-7,00 (м, 2H), 6,17 (с, 1H), 5,11 (с, 2H), 3,86 (с, 3H), 3,13 (с, 3H).

TRV-1409

К перемешиваемому раствору TRV-1402 (0,5283 г, 1,55 ммоль) в ДХМ (10 мл) при -78°C добавляют DIBAL (3,6 мл, 1,0 M раствор в гексане) по каплям. После завершения добавления реакционную смесь нагревают до -40°C и перемешивают в атмосфере аргона до полного поглощения исходного материала. Гасят насыщенным раствором виннокислого калия-натрия и перемешивают в течение 30 минут. Эту смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенное масло очищают на колонке 50% EtOAc с гексаном с получением 0,3740 г (выход 77%) TRV-1409 в оранжевом масле.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,23-7,21 (м, 2H), 7,03 (с, 1H), 7,02-6,98 (м, 2H), 6,64 (д, J=15 Гц, 1H), 6,44 (дт, J=15,5 Гц, 1H), 6,26 (с, 1H), 5,06 (с, 2H), 4,38 (дд, J=5 Гц, 2H), 3,11 (с, 3H).

TRV-1410

6-бром-N-(4-фторбензил)-N-метилбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амин (0,1444 г, 0,43 ммоль) растворяют в ТГФ (5 мл) и охлаждают до -78°C. н-BuLi (0,23 мл, 0,45 ммоль, 2,0 M раствор в циклогексане) добавляют по каплям, и смесь перемешивают в течение 30 минут. Затем добавляют метилхлорформиат (0,050 мл, 0,65 ммоль), и реакционную смесь медленно нагревают до комнатной температуры. После повторного охлаждения до 0°C, реакционную смесь гасят насыщенным NH₄Cl (водн.). Эту смесь затем экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают на колонке 15% EtOAc/гексан с получением 0,0234 г (выход 17%) TRV-1410.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,88 (д, J=5 Гц, 1H), 7,22-7,19 (м, 2H), 7,03-6,98 (м, 2H), 6,75 (с, 1H), 5,12 (с, 2H), 3,95 (с, 3H), 3,17 (с, 3H).

TRV-1411

К раствору 6-бром-4-хлорбензо[c][1,2,5]оксадиазола (396 мг, 1,7 ммоль) в NMP (3 мл) в 4-драхмовой пробирке добавляют гидрохлорид 3-гидроксипирролидина (230 мг, 1,83 ммоль) и триэтиламин (710 мкл, 5,1 ммоль). Крышку плотно закрывают, и реакционную смесь нагревают при 85°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют EtOAc (60 мл) и промывают 1 M HCl (3×20 мл) и насыщенным раствором соли (1×20 мл). Органическую фазу сушат с MgSO₄, фильтруют и концентрируют в вакууме. Неочищенный анилин применяют без дальнейшей очистки. К перемешиваемому при 0°C раствору анилина (480 мг, 1,7 ммоль) в NMP (10 мл) добавляют MeI (1,06 мл мг, 17 ммоль) затем NaH (200 мг, 8,5 ммоль). Оставив холодную баню на месте, реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 16 часов реакционную смесь осторожно гасят водой, обрабатывают насыщенным NH₄Cl и экстрагируют в EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промывают HCl (2 M), затем насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Полученный продукт применяют без дальнейшей очистки. К раствору полученного выше простого эфира (1,7 ммоль) в ДМЭ (8 мл)/Na₂CO₃ (2,5 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (382 мг, 2,6 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (80 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 115°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют 1 M NaOH (40 мл) и экстрагируют EtOAc (3×20 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией (4:1 гексан/EtOAc) с получением 415 мг продукта.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 10,11 (с, 1H), 8,15 (с, 1H), 7,91 (м, 2H), 7,64 (т, J=8 Гц, 1H), 7,14 (с, 1H), 6,14 (с, 1H), 4,94 (м, 1H), 3,95 (м, 4H), 3,41 (с, 3H), 2,17 (м, 2H). К перемешиваемому раствору альдегида (415 мг, 1,33 ммоль) и реагента Руперта (365 мкл, 2,6 ммоль) в ДХМ (10 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,2 мл, 1 M ТГФ, 0,2 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь разбавляют ДХМ. Органические фазы промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (10-30% EtOAc в гексане) с получением 240 мг (выход 48%) TRV-1411, 1:1:1:1 смеси диастереомеров из-за двух хиральных центров.¹Н-ЯМР (500 MГц, ДМСО-D₆) δ = 7,90 (с, 1H), 7,82 (дм, J=7 Гц, 1H), 7,53 (м, 2H), 7,29 (с, 1H), 6,93 (д, J=6 Гц, 1H), 6,29 (с, 1H), 5,28 (м, 1H), 4,18 (с, 1H), 3,87 (м, 3H), 3,77 (м, 1H), 2,15 (м, 2H).

TRV-1412

К раствору 6-бром-4-хлорбензо[c][1,2,5]оксадиазола (355 мг, 1,52 ммоль) в NMP (3 мл) в 4-драхмовой пробирке добавляют N-метил-N-(2-пиридинилметил)амин (204 мг, 1,67 ммоль) и триэтиламин (400 мкл, 2,9 ммоль). Крышку плотно закрывают, и реакционную смесь нагревают при 85°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют EtOAc (60 мл) и промывают 1 M HCl (3×20 мл) и насыщенным раствором соли (1×20 мл). Органическую фазу сушат с MgSO₄ фильтруют и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (4:1 гексан/EtOAc) с получением 293 мг (выход 60%) анилина. К раствору этого анилин (293 мг, 0,91 ммоль) в ДМЭ (5 мл)/Na₂CO₃ (1,4 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (202 мг, 1,4 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (50 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 115°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют 1 M NaOH (40 мл) и экстрагируют EtOAc (3×20 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт конденсируют с SiO₂ (3 г) и очищают флэш-хроматографией на колонке (4:1 гексан/EtOAc) с получением 280 мг альдегида.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 10,01 (с, 1H), 8,60 (дм, J=4 Гц, 1H), 8,09 (т, J=2 H, 1H), 7,93 (дт, J=7 Гц/2 Гц, 1H), 7,87 (дм, J=8 Гц, 1H), 7,64 (м, 2H), 7,28 (м, 2H), 7,20 (м, 1H), 6,39 (с, 1H), 5,28 (с, 2H), 3,37 (с, 3H). К перемешиваемому раствору альдегида (280 мг, 0,81 ммоль) и реагента Руперта (230 мг, 1,63 ммоль) в ДХМ (10 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,1 мл, 1 M ТГФ, 0,1 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь разбавляют ДХМ. Органические фазы промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (10% EtOAc в гексане) с получением 120 мг (выход 35%) TRV-1412.¹Н-ЯМР (500 MГц, ДМСО-D₆) δ = 8,51 (д, J=6 Гц, 1H), 7,87 (с, 1H), 7,80 (дм, J=8 Гц, 1H), 7,74 (тд, J=8 Гц/2 Гц, 1H), 7,57 (м, 2H), 7,36 (с, 1H), 7,32 (д, J=8 Гц, 1H), 7,26 (м, 1H), 6,95 (д, J=5 Гц, 1H), 5,27 (м, 3H), 3,36 (с, 3H).

TRV-1413

К раствору 6-бром-4-хлорбензо[c][1,2,5]оксадиазола (360 мг, 1,54 ммоль) в NMP (3 мл) в 4-драхмовой пробирке добавляют N-метил-N-(3-пиридинилметил)амин (207 мг, 1,69 ммоль) и триэтиламин (400 мкл, 2,9 ммоль). Крышку плотно закрывают, и реакционную смесь нагревают при 85°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют EtOAc (60 мл) и промывают 1 M HCl (3×20 мл) и насыщенным раствором соли (1×20 мл). Органическую фазу сушат с MgSO₄, фильтруют и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (5% EtOAc в ДХМ) с получением 247 мг (выход 50%) анилина.¹Н-ЯМР (500 MГц, ДМСО-D₆) δ = 8,50 (д, J=2 Гц, 1H), 8,48 (дд, J=5 Гц/1 Гц, 1H), 7,64 (дм, J=8 Гц, 1H), 7,52 (д, J=1 Гц, 1H), 7,35 (дд, J=8 Гц/5 Гц, 1H), 6,35 (м, 1H), 5,17 (с, 2H), 3,21 (с, 3H). К раствору анилина (247 мг, 0,77 ммоль) в ДМЭ (4 мл)/Na₂CO₃ (1,1 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (173 мг, 1,2 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (40 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 115°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют 1 M NaOH (40 мл) и экстрагируют EtOAc (3×20 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме с получением 312 мг неочищенного альдегида. К перемешиваемому раствору альдегида (0,77 ммоль) и реагента Руперта (400 мг, 2,8 ммоль) в ДХМ (8 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,1 мл, 1 M ТГФ, 0,1 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь разбавляют ДХМ. Органические фазы промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (2% MeOH в ДХМ).¹Н-ЯМР (300 MГц, CDCl₃) δ = 8,51 (м, 2H), 7,70-7,55 (м, 3H), 7,50-7,45 (м, 2H), 7,28 (м, 1H), 7,25 (м, 1H), 6,35 (с, 1H), 5,14 (м, 3H), 4,24 (с.шир, 1H), 3,19 (с, 3H).

TRV-1414

К раствору 6-бром-4-хлорбензо[c][1,2,5]оксадиазола (357 мг, 1,5 ммоль) в NMP (3 мл) в 4-драхмовой пробирке добавляют 4-метоксибензиламин (230 мг, 1,65 ммоль) и триэтиламин (400 мкл, 2,9 ммоль). Крышку плотно закрывают, и реакционную смесь нагревают при 85°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют EtOAc (60 мл) и промывают 1 M HCl (3×20 мл) и насыщенным раствором соли (1×20 мл). Органическую фазу сушат с MgSO₄, фильтруют и концентрируют в вакууме. Неочищенный анилин применяют без дальнейшей очистки. К перемешиваемому при 0°C раствору анилина (220 мг, 0,6 ммоль) в NMP (5 мл) добавляют NaH (151 мг, 6,3 ммоль). После окончания выделения газа MeI (446 мг, 3,1 ммоль) добавляют по каплям. Оставив холодную баню на месте, реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 16 часов реакционную смесь осторожно гасят водой, обрабатывают насыщенным NH₄Cl и экстрагируют в EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Полученный анилин применяют без дальнейшей очистки. К раствору анилина (0,6 ммоль) в ДМЭ (4 мл)/Na₂CO₃ (1,0 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (142 мг, 0,9 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (45 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 115°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют 1 M NaOH (40 мл) и экстрагируют EtOAc (3×20 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме с получением 220 мг неочищенного продукта.¹Н-ЯМР (300 MГц, CDCl₃) δ = 10,1 (с, 1H), 8,1 (с, 1H), 7,9 (м, 2H), 7,7 (м, 1H), 7,2 (м, 2H), 6,9 (д, J=6 Гц, 2H), 6,4 (м, 1H), 5,1 (с, 2H), 3,8 (с, 3H), 3,2 (с, 3H). К перемешиваемому раствору альдегида (220 мг, 0,59 ммоль) и реагента Руперта (168 мг, 1,2 ммоль) в ДХМ (6 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,1 мл, 1 M ТГФ, 0,1 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь разбавляют ДХМ. Органические фазы промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (20% EtOAc в гексане).¹Н-ЯМР (300 MГц, CDCl₃) δ = 7,7 (с, 1H), 7,6 (дт, J=7 Гц, 1 Гц, 1H), 7,5 (м, 2H), 7,19 (м, 3H), 6,8 (д, J=8 Гц, 2H), 6,3 (с, 1H), 5,1 (м, 1H), 5,0 (с, 2H), 3,8 (с, 3H), 3,2 (с, 3H).

TRV-1415

К раствору 6-бром-4-хлорбензо[c][1,2,5]оксадиазол (345 мг, 1,5 ммоль) в NMP (3 мл) в 4-драхмовой пробирке добавляют 3,5-диметоксибензиламин (272 мг, 1,6 ммоль) и триэтиламин (600 мкл, 4,3 ммоль). Крышку плотно закрывают, и реакционную смесь нагревают при 85°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют EtOAc (60 мл) и промывают 1 M HCl (3×20 мл) и насыщенным раствором соли (1×20 мл). Органическую фазу сушат с MgSO₄, фильтруют и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт применяют без дальнейшей очистки. К перемешиваемому при 0°C раствору анилина (1,5 ммоль) в NMP (5 мл) добавляют NaH (211 мг, 8,8 ммоль). После прекращения выделения газа MeI (570 мг, 4 ммоль) добавляют по каплям. Оставив холодную баню на месте, реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 16 часов реакционную смесь осторожно гасят водой, обрабатывают насыщенным NH₄Cl и экстрагируют в EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт конденсируют с SiO₂ и промывают (10% EtOAc в гексане) с получением 163 мг продукта. К раствору анилина (165 мг, 0,44 ммоль) в ДМЭ (4 мл)/Na₂CO₃ (0,7 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (98 мг, 0,9 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (40 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 115°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют 1 M NaOH (40 мл) и экстрагируют EtOAc (3×20 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме с получением 277 мг. Неочищенный продукт применяют без дальнейшей очистки. К перемешиваемому раствору альдегида (277 мг, 0,4 ммоль) и реагента Руперта (125 мг, 0,8 ммоль) в ДХМ (4 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,1 мл, 1 M ТГФ, 0,1 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь разбавляют ДХМ. Органические фазы промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт конденсируют с SiO₂ (3 г) очищают флэш-хроматографией на колонке (10-20% EtOAc в гексане).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,7 (с, 1H), 7,6 (дт, 7 Гц, 1 Гц, 2H), 7,5 (м, 2H), 7,2 (с, 1H), 6,4 (м, 1H), 6,3 (м, 2H), 5,1 (м, 1H), 5,0 (с, 2H), 3,7 (с, 3H), 3,3 (с, 3H), 2,7 (с.шир, 1H).

TRV-1416

TRV-1397 (0,0768 г, 0,22 ммоль) растворяют в ТГФ (5 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют NaH (0,0132 г, 0,33 ммоль), и суспензию перемешивают в течение 30 минут. Затем добавляют йодметан (0,03 мл, 0,44 ммоль), и реакционную смесь перемешивают в течение ночи, нагревая до комнатной температуры. Смесь затем повторно охлаждают до 0°C и гасят насыщенным хлоридом аммония. Смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные органические экстракты промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт затем очищают на колонке 10% EtOAc/гексан с получением 0,0259 г (выход 32%) TRV-1416 в виде оранжевого масла.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,30-7,27 (м, 2H), 7,23 (с, 1H), 7,07-7,04 (м, 2H), 6,22 (с, 1H), 5,11 (с, 2H), 4,52 (кв, J=5 Гц, 1H), 3,50 (с, 3H), 3,20 (с, 3H).

TRV-1417

К раствору оксалилхлорида (0,032 мл, 0,37 ммоль) в ДХМ (1 мл) при -78°C добавляют раствор ДМСО (0,024 мл, 0,34 ммоль) в ДХМ (1,1 мл). Раствор перемешивают в течение 5 минут, и затем добавляют раствор TRV-1397 (0,1097 г, 0,31 ммоль) в ДХМ (1,0 мл), и смесь перемешивают в течение дополнительных 15 минут. ТЭА (0,22 мл, 1,55 ммоль) добавляют одной порцией, реакционную смесь перемешивают в течение 10 минут при -78°C и затем нагревают до комнатной температуры. Смесь затем разбавляют водой и этилацетатом. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют. Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного трифторкетона. Этот продукт затем очищают флэш-хроматографией (30% EtOAc/гексан) с получением 0,0356 г (выход 32%) TRV-1417 в виде оранжевого масла.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,93 (с, 1H), 7,23-7,20 (м, 2H), 7,04-7,00 (м, 2H), 6,67 (с, 1H), 5,16 (с, 2H), 3,23 (с, 3H).

TRV-1418

TRV-1421 (0,3511 г, 1,17 ммоль) растворяют в ДХМ (50 мл) и добавляют реагент Десса-Мартина (1,4845 г, 3,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 40 минут и затем гасят насыщенным NaHCO₃ (водн.) и избытком Na₂S₂O₃. Смесь перемешивают до растворения всех твердых веществ и затем несколько раз экстрагируют ДХМ. Объединенные органические экстракты промывают насыщенным NaHCO₃, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают на колонке 10% EtOAc/гексан с получением 0,2322 г (выход 66%) TRV-1418 в виде оранжевого твердого вещества.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,74 (с, 1H), 7,22-7,19 (м, 2H), 7,02-6,97 (м, 2H), 6,74 (с, 1H), 3,17 (с, 3H), 2,65 (с, 3H).

TRV-1419

К перемешиваемому раствору 6-бром-4-(изоиндолин-2-ил)бензо[c][1,2,5]оксадиазола (158 мг, 0,3 ммоль) в ТГФ (5 мл) при -78°C добавляют н-BuLi (0,25 мл, 2 M). После перемешивания в течение 30 минут при низкой температуре, оксатенанон (72 мг, 1 ммоль) растворяют в ТГФ (4 мл). Холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и отслеживают ТСХ. Реакционную смесь обрабатывают разбавленной HCl и экстрагируют в EtOAc (3×20 мл). Органическую фазу сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт конденсируют с SiO₂ (3 г) и очищают флэш-хроматографией на колонке (ДХМ модифицированный MeOH) с получением 40 мг продукта.¹Н-ЯМР (300 MГц, ДМСО-D₆) δ = 7,5 (м, 2H), 7,4 (м, 2H), 7,2 (с, 1H), 6,6 (с, 1H) 6,5 (с, 1H), 6,5 (с, 1H), 5,1 (с, 4H), 4,8 (м, 4H).

TRV-1420

К перемешиваемому раствору 6-бром-4-(изоиндолин-2-ил)бензо[c][1,2,5]оксадиазола (98 мг, 0,3 ммоль) в ТГФ (3 мл) при -78°C добавляют н-BuLi (0,15 мл, 2 M). После перемешивания в течение 30 минут при низкой температуре, добавляют сухой ДМФА (0,5 мл), и реакционную смесь перемешивают в течение дополнительного часа, затем гасят MeOH, затем HCl (4 M). Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры, разбавляют водой и экстрагируют в ДХМ (3×20 мл). Органическую фазу сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт конденсируют с SiO₂ (3 г) и очищают флэш-хроматографией на колонке (1:1 ДХМ/гексан) с получением 71 мг продукта. К перемешиваемому раствору альдегида (71 мг, 0,26 ммоль) и реагента Руперта (74 мг, 0,52 ммоль) в ДХМ (3 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,1 мл, 1 M ТГФ, 0,1 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь разбавляют ДХМ. Органические фазы промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (ДХМ).¹Н-ЯМР (500 MГц, ДМСО-D₆) δ = 7,50 (м, 2H), 7,37 (м, 2H), 7,27 (с, 1H),7,11 (д, J=5 Гц, 1H), 6,32 (с, 1H), 5,29 (м, 1H), 5,09 (с, 4H).

TRV-1421

6-бром-N-(4-фторбензил)-N-метилбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амин (0,8514 г, 2,53 ммоль) растворяют в ТГФ (25 мл) и охлаждают до -78°C. н-BuLi (1,3 мл, 2,0 M раствор в циклогексане) добавляют по каплям при -78°C, и реакционную смесь затем перемешивают в течение 15-20 минут. Затем добавляют ацетальдегид (0,21 мл, 3,8 ммоль), и реакционную смесь медленно нагревают до комнатной температуры. Раствор повторно охлаждают до 0°C и гасят насыщенным хлоридом аммония. Смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные органические экстракты промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт затем очищают на колонке 40% EtOAc/гексан с получением 0,5340 г (выход 70%) TRV-1421 в виде оранжевого масла.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,24-7,21 (м, 2H), 7,10 (с, 1H), 7,02-6,98 (м, 2H), 6,16 (с, 1H), 5,06 (с, 2H), 4,87 (кв, J=5 Гц, 1H), 3,11 (с, 3H), 1,90 (с, 1H), 1,51 (д, J=5 Гц, 3H).

TRV-1422

TRV-1421 (0,1381 г, 0,458 ммоль) растворяют в ТГФ (5 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют NaH (0,0275 г, 0,687 ммоль), и суспензию перемешивают в течение 30 минут. Затем добавляют йодметан (0,06 мл, 0,916 ммоль), и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Раствор повторно охлаждают до 0°C и гасят насыщенным хлоридом аммония. Смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные органические экстракты промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт затем очищают на колонке 10% EtOAc/гексан с получением 0,1243 г (выход 86%) TRV-1422 в виде желтого масла.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,25-7,23 (м, 2H), 7,02 (с, 1H), 7,02-6,98 (м, 2H), 6,14 (с, 1H), 5,07 (д, J=15 Гц, 1H), 5,03 (д, J=15 Гц, 1H), 4,27 (кв, J=5 Гц, 1H), 3,26 (с, 3H), 3,12 (с, 3H), 1,44 (д, J=5 Гц, 3H).

TRV-1423

К раствору 6-бром-4-(изоиндолин-2-ил)бензо[c][1,2,5]оксадиазола (647 мг, 2,0 ммоль) в ДМЭ (10 мл)/Na₂CO₃ (3 мл) добавляют 3-ацетилфенилбороновую кислоту (500 мг, 0,9 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (90 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 115°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют 1 M NaOH (40 мл) и экстрагируют EtOAc (3×20 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт растворяют в ДХМ и элюируют через короткий слой SiO₂ с получением 456 мг продукта, который подходит для дальнейших реакций.¹Н-ЯМР (300 MГц, CDCl₃) δ = 8,3 (м, 1H), 8,0 (д, J=8 Гц, 1H), 7,8 (д, J=8 Гц, 1H), 7,6 (т, J=8 Гц, 1H), 7,4 (м, 4H), 7,2 (с, 1H), 6,2 (с, 1H), 5,1 (с, 4H), 2,7 (с, 3H). К перемешиваемому раствору кетона (222 мг, 0,6 ммоль), растворенного в ТГФ (4 мл) при 0°C, добавляют MeMgBr (0,9 мл, 0,9 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре, реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и гасят разбавленной HCl и экстрагируют в EtOAc (3×20 мл). Органическую фазу сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (ДХМ).¹Н-ЯМР (300 MГц, CDCl₃) δ = 7,8 (м, 1H), 7,5 (м, 2H0, 7,4-7,3 (м, 5H), 7,2 (с, 1H), 5,1 (с,4H), 1,0 (с, 1H), 1,6 (с, 6H).

TRV-1424

К раствору 6-бром-4-(изоиндолин-2-ил)бензо[c][1,2,5]оксадиазола (647 мг, 2,0 ммоль) в ДМЭ (10 мл)/Na₂CO₃ (3 мл) добавляют 3-ацетилфенилбороновую кислоту (500 мг, 0,9 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (90 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 115°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют 1 M NaOH (40 мл) и экстрагируют EtOAc (3×20 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт растворяют в ДХМ и элюируют через короткий слой SiO₂ с получением 456 мг продукта, который подходит для дальнейших реакций.¹Н-ЯМР (300 MГц, CDCl₃) δ = 8,3 (м, 1H), 8,0 (д, J=8 Гц, 1H), 7,8 (д, J=8 Гц, 1H), 7,6 (т, J=8 Гц, 1H), 7,4 (м, 4H), 7,2 (с, 1H), 6,2 (с, 1H), 5,1 (с, 4H), 2,7 (с, 3H). К перемешиваемому раствору кетона (230 мг, 0,65 ммоль), растворенного в MeOH/ТГФ при 0°C, добавляют NaBH₄ (80 мг, 2 ммоль). Когда первоначальная экзотермическая реакция утихнет, холодную баню удаляют и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа и затем выливают в воду, через 30 минут реакционную смесь подкисляют и экстрагируют в EtOAc (3×20 мл). Органическую фазу сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (ДХМ).¹Н-ЯМР (300 MГц, CDCl₃) δ = 7,7 (с, 1H), 7,6 (дт, J=10 Гц, 1 Гц), 7,5-7,3 (м, 6H), 7,1 (с, 1H), 6,2 (с, 1H), 5,2 (с, 4H), 5,0 (м, 1H), 1,9 (м, lh), 1,5 (д, J=6 Гц, 3H).

TRV-1425

TRV-1418 (0,1195 г, 0,399 ммоль) растворяют в ТГФ (5 мл) и охлаждают до 0°C. MeMgBr (0,52 мл, 1,0 M раствор в Bu₂O) добавляют по каплям, и реакционную смесь перемешивают до завершения реакции по ТСХ. Раствор повторно охлаждают до 0°C и гасят насыщенным хлоридом аммония. Смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные органические экстракты промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт затем очищают на двух последовательных колонках 30% EtOAc/гексан с получением 0,0626 г (выход 50%) TRV-1425 в виде оранжевого масла при химической чистоте приблизительно 90%.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,23-7,20 (м, 2H), 7,19 (с, 1H), 7,02-6,95 (м, 2H), 6,33 (с, 1H), 5,04 (с, 2H), 3,12 (с, 3H), 1,59 (с, 6H).

TRV-1426

К раствору 6-бром-4-хлорбензо[c][1,2,5]оксадиазола (347 мг, 1,49 ммоль) в NMP (3 мл) в 4-драхмовой пробирке добавляют бензолтиол (104 мг, 1,83 ммоль) и триэтиламин (400 мкл, 2,8 ммоль). Крышку плотно закрывают, и реакционную смесь нагревают при 85°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют EtOAc (60 мл) и промывают 1 M HCl (3×20 мл) и насыщенным раствором соли (1×20 мл). Органическую фазу сушат с MgSO₄, фильтруют и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (ДХМ) с получением 264 мг (выход 65%).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,8 (м, 1H), 7,6 (м, 2H), 7,5 (м, 3H), 6,7 (м, 1H). К раствору тиоэфира (220 мг, 0,7 ммоль) в ДМЭ (6 мл)/Na₂CO₃ (1,5 мл) добавляют 3-ацетилфенилбороновую кислоту (185 мг, 1,1 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (75 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 115°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют 1 M NaOH (40 мл) и экстрагируют EtOAc (3×20 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают пропусканием через слой SiO₂ с ДХМ.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 8,0 (с, 1H), 7,9 (м, 1H), 7,7 (с, 1H), 7,6 (м, 3H), 7,5 (м, 1H), 7,5 (м, 3H), 7,1 (м, 1H), 2,6 (с, 3H). К перемешиваемому раствору кетона, растворенного в MeOH/ТГФ при 0°C, добавляют NaBH₄ (80 мг, 2 ммоль). После того, как исходная экзотермическая реакция утихнет, холодную баню удаляют и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа и затем выливают в воду, через 30 минут реакционную смесь подкисляют и экстрагируют в EtOAc (3×20 мл). Органическую фазу сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (ДХМ).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,7 (д, J=1 Гц, 1H), 7,6 (м, 2H), 7,5-7,3 (м, 7H), 7,1 (д, J=1 Гц, 1H), 4,9 (м, 1H), 1,8 (д, J=3 Гц, 1H), 1,5 (д, J=6 Гц, 3H).

TRV-1427

TRV-1409 (0,2077 г, 0,663 ммоль) растворяют в ДХМ (37 мл) и затем ДМП (0,8436 г, 1,99 ммоль) добавляют одной порцией. Реакционную смесь перемешивают в течение 3 часов и затем гасят насыщенным NaHCO₃ (водн.) и избытком Na₂S₂O₃. Эту смесь перемешивают до растворения всех твердых веществ и затем экстрагируют ДХМ. Объединенные органические слои сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного альдегида. Очистка флэш-хроматографией (20% EtOAc/гексан) дает 0,0556 г (выход 27%) альдегида 4. Этот альдегид (0,0532 г, 0,171 ммоль) растворяют в ТГФ (5 мл) и охлаждают до 0°C. MeMgBr (0,19 мл, 1,0 M раствор в Et₂O) добавляют по каплям, и реакционную смесь перемешивают до завершения реакции по ТСХ. Реакционную смесь затем гасят NH₄Cl и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические экстракты промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт затем очищают флэш-хроматографией с получением 0,0262 г (выход 47%) TRV-1427 в виде оранжевого масла.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,23-7,21 (м, 2H), 7,03-6,99 (м, 3H), 6,59 (д, J=15 Гц, 1H), 6,34 (дд, J=15, 5 Гц, 1H), 6,26 (с, 1H), 4,54 (м, 1H), 3,10 (с, 3H), 1,62 (д, J=5 Гц, 1H), 1,40 (д, J=10 Гц, 3H).

TRV-1428

В герметично закрытой пробирке 4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (2,2 г, 8 ммоль) объединяют с, (888 мг, 8,8 ммоль), Et₃N (3,3 мл, 24 ммоль) и NMP (13 мл). Смесь нагревают до 85°C в течение 2 дней. В этот момент реакционную смесь разбавляют 1 M NaOH (150 мл), и нерастворимый материал удаляют фильтрацией. Желаемое соединение осаждают добавлением HCl (конц.) к водному слою и выделяют фильтрацией в вакууме с получением 1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-карбоновой кислоты (1,7 г), которую применяют без дальнейшей очистки. Кислоту (1,5 г, 5 ммоль) растворяют в ТГФ (50 мл) и охлаждают до 0°C. К этому раствору добавляют BH₃-ТГФ (10 мл, 10 ммоль). Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. На следующий день реакционную смесь гасят AcOH и экстрагируют в EtOAc. Органический слой промывают 1 M NaOH до тех пор, пока промывки не станут голубым лакмусом и затем концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт конденсируют с SiO₂ и очищают флэш-хроматографией на колонке (3:2 гексан/EtOAc) с получением 800 мг (1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-ил)метанола (выход 56%).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,05 (с, 1H), 6,11 (с, 1H), 5,30 (с, 1H), 4,11 (т, J=8 Гц, 2H), 3,85 (м, 4H), 3,00 (м, 1H). К раствору полученного выше спирта (400 мг, 1,4 ммоль) в ДМЭ (7 мл)/Na₂СО₃ (2,1 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (315 мг, 2,1 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (50 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 115°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M NaOH (150 мл) и выделяют полученные твердые вещества вакуумной фильтрацией. Неочищенный продукт очищают пропусканием через слой SiO₂ (50% EtOAc в гексане) с получением 350 мг продукта, который применяют как есть. К перемешиваемому раствору альдегида (400 мг, 1,4 ммоль) и реагента Руперта (483 мг, 3,3 ммоль) в ДХМ (13 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,1 мл, 1 M ТГФ, 0,2 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. После перемешивания в течение ночи добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь разбавляют ДХМ. Органические фазы промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (30% EtOAc в гексане) с получением 150 мг (выход 34%).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,72-7,66 (м, 2H), 7,5 (м, 2H), 7,14 (с, 1H0, 6,04 (с, 1H), 5,11 (м, 1H), 4,41 (т, J=8 Гц, 2H), 4,15 (дд, 2H), 3,93 (д, J=5 Гц, 2H), 3,06 1H), 2,82 (с.шир.), 1,63 (с.шир.).

TRV-1429

1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-ол (574 мг, 2,1 ммоль) растворяют в ДХМ (25 мл) и охлаждают до -78°C, и DAST (421 мкл, 3,2 ммоль) добавляют по каплям, и холодную баню удаляют. Через 2 часа при комнатной температуре реакционную смесь охлаждают до 0°C и гасят MeOH. Реакционную смесь затем разбавляют водой и экстрагируют ДХМ. Объединенные экстракты сушат (MgSO₄) и концентрируют в вакууме. Остаток очищают флэш-хроматографией на колонке (50% ДХМ в гексане) с получением продукта в виде желтого твердого вещества (160 мг, выход 27%).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,27 (с, 1H), 5,96 (с, 1H), 5,51 (дм,²J_hf=57 Гц, 1H), 4,56 (м, 2H), 4,42 (дм,³J_hf=23 Гц, 2H). К раствору анилина (330 мг, 1,2 ммоль) в ДМЭ (7 мл)/Na₂CO₃ (1,8 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (270 мг, 1,9 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (50 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 115°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M NaOH (150 мл), и выделяют в вакууме полученное твердое вещество. Неочищенный продукт очищают пропусканием через SiO₂ (20% EtOAc в гексане) и применяют без дальнейшей очистки. К перемешиваемому раствору альдегида (около 1,0 ммоль) и реагента Руперта (348 мг, 2,0 ммоль) в ДХМ (13 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,1 мл, 1 M ТГФ, 0,2 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. После перемешивания в течение ночи добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь разбавляют ДХМ. Органические фазы промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (25% EtOAc в гексане) с получением 300 мг (выход 80%).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,72 (с, 1H), 7,66 (дм, J=10 Гц, 1H), 7,51 (м, 2H), 7,23 (с, 1H), 6,12 (с, 1H), 5,53 (дм,²J_HF=56 Гц, 1H), 5,14 (м, 1H), 4,64 (м, 2H), 4,42 (ддм, J=23 Гц/10 Гц, 2H), 2,73 (с, 1H).

TRV-1430

TRV-1402 (0,1992 г, 0,58 ммоль) растворяют в ТГФ (10 мл) и охлаждают до -78°C. MeLi (0,80 мл, 1,6 M раствор в Et₂O) добавляют по каплям, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь затем повторно охлаждают до 0°C и гасят насыщенным хлоридом аммония. Эту смесь экстрагируют три раза EtOAc. Объединенные органические экстракты промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного спирта. Этот продукт затем очищают хроматографией (30% EtOAc/гексан) с получением 0,0843 г (выход 43%) оранжевого масла.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,23-7,21 (м, 2H), 7,03 (с, 1H), 7,02-6,98 (м, 2H), 6,61 (д, J=15 Гц, 1H), 6,42 (д, J=15 Гц, 1H), 6,25 (с, 1H), 5,08 (с, 2H), 3,10 (с, 3H), 1,45 (с, 6H).

TRV-1431

6-бром-N-(4-фторбензил)-N-метилбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амин (0,2771 г, 0,82 ммоль) растворяют в ТГФ (10 мл) и охлаждают до -78°C. н-BuLi (0,43 мл, 2,0 M раствор в циклогексане) добавляют по каплям, и смесь перемешивают в течение 30 минут, затем добавляют хлорид N,N-диметилкарбамила (0,10 мл, 1,1 ммоль) по каплям. Смесь затем нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь затем повторно охлаждают до 0°C и гасят насыщенным хлоридом аммония. Эту смесь экстрагируют три раза EtOAc. Объединенные органические экстракты промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного амида. Конечную очистку этого продукта проводят на колонке 50% EtOAc/гексан с получением 16,6 мг (6,2% выход) оранжевого масла.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,23-7,20 (м, 2H), 7,08 (с, 1H), 7,03-6,99 (м, 2H), 6,12 (с, 1H), 5,11 (с, 2H), 3,14 (с, 3H), 3,12 (с, 3H), 3,01 (с, 3H).

TRV-1432

В герметично закрытой пробирке 4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (834 мг, 3 ммоль) объединяют с гидрохлоридом азетидина (309 мг, 3,3 ммоль), Et₃N (1,25 мл, 9 ммоль) и NMP (6 мл). Смесь нагревают до 85°C в течение 2 дней. Неочищенный продукт осаждают, выливая реакционную смесь в воду (150 мл). Неочищенный продукт пропускают через SiO₂ (10% EtOAc в гексане) с получением (540 мг) оранжевого твердого вещества, которое, по данным ЯМР, является смесью 2:1 исходного материала и 4-(азетидин-1-ил)-6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазола.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,05 (с, 1H), 5,85 (с, 1H), 4,33 (м, 4H), 2,53 (м, 2H). К раствору 4-(азетидин-1-ил)-6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазола (322 мг, 1,27 ммоль) в ДМЭ (7 мл)/Na₂CO₃ (2,0 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (286 мг, 1,9 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (50 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 115°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M NaOH (150 мл), и полученные твердые вещества выделяют в вакууме. Неочищенный продукт очищают пропусканием через SiO₂ (ДХМ) с получением 280 мг продукта, который применяют как есть. К перемешиваемому раствору альдегида (411 мг, 1,33 ммоль) и реагента Руперта (378 мг, 2,7 ммоль) в ДХМ (13 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,2 мл, 1 M ТГФ, 0,2 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа избыток добавляют TBAF, и реакционную смесь разбавляют ДХМ. Органические фазы промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (ДХМ) с получением 477 мг (выход 94%).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,72 (с, 1Н), 7,66 (м, 1H), 7,52 (м, 2H), 7,13 (с, 1H), 6,01 (с, 1H), 5,12 (кв, J=7 Гц, 1H), 4,35 (т, J=8 Гц, 4H), 2,74 (с, br, 1H), 2,53 (п, J=7 Гц, 2H).

TRV-1433

1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-карбоновую кислоту (около 600 мг, 2 ммоль) растворяют в MeOH (100 мл) и добавляют H₂SO₄ (2 капли). Устанавливают обратный конденсатор, и реакционную смесь осторожно кипятят с обратным холодильником в течение 24 часов. В это время реакционную смесь разбавляют EtOAc (200 мл) и экстрагируют водой (3×100 мл). Неочищенный продукт конденсируют с SiO₂ и очищают флэш-хроматографией на колонке (ДХМ) с получением практически количественного выхода (2,08 ммоль). Сложный эфир (650 мг, 2,08 ммоль) растворяют в ТГФ (20 мл) и охлаждают до 0°C. В полученный раствор добавляют MeMgBr (6 мл, 6 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре, реакционную смесь доводят до комнатной температуры и затем проводят ТСХ. Когда реакция считается завершенной, смесь охлаждают обратно до 0°C и осторожно гасят водным NH₄Cl. Смесь затем экстрагируют в EtOAc (3×100 мл), сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт конденсируют с SiO₂ и очищают флэш-хроматографией на колонке (20% ацетон в гексане) с получением 474 мг 2-(1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-ил)пропан-2-ола (выход 73%).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,20 (с, 1H), 5,89 (с, 1H), 4,26 (м, 4H), 2,87(м, 1H), 1,38 (с, 1H), 1,26 (с, 6H). К перемешиваемому раствору третичного спирта (223 мг, 0,71 ммоль), растворенного в ТГФ (10 мл) и охлажденного до 0°C, добавляют NaH (600 мг, 20 ммоль). После того, как изначальное выделение пузырьков прекратится, MeI (1,14 г, 8 ммоль) добавляют по каплям, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 18 часов реакционную смесь охлаждают до 0°C и осторожно добавляют NH₄Cl. Реакционную смесь экстрагируют EtOAc (3×50 мл), промывают насыщенным раствором соли (1×50 мл) и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт затем очищают флэш-хроматографией на колонке (10% ацетон в гексане). К раствору простого эфира (193 мг, 0,6 ммоль) в ДМЭ (4 мл)/Na₂CO₃ (2 M, 0,9 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (133 мг, 0,9 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (40 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 110°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M NaOH (150 мл), и полученное твердое вещество выделяют в вакууме. Неочищенный альдегид очищают пропусканием через SiO₂ (20% EtOAc в гексане) с получением 184 мг продукта, который применяют как есть. К перемешиваемому раствору альдегида (400 мг, 1,4 ммоль) и реагента Руперта (483 мг, 3,3 ммоль) в ДХМ (13 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,1 мл, 1 M ТГФ, 0,2 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. После перемешивания в течение ночи, добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь разбавляют ДХМ. Органические фазы промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (30% EtOAc в гексане) с получением 90 мг (выход 41%).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,72 (с, 1H), 7,66 (м, 1H), 7,50 (м, 2H), 7,11 (с, 1H), 6,01 (с, 1H), 5,11 (м, 1H), 4,25 (м, 4H), 3,24 (с, 3H), 2,96 (м, 1H).

TRV-1434

К перемешиваемому раствору (1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-ил)метанола (427 мг, 1,58 ммоль), растворенного в NMP (10 мл) и охлажденного до 0°C, добавляют NaH (758 мг, 20 ммоль). После того, как изначальное выделение пузырьков прекратится, MeI (2,24 г, 10 ммоль) добавляют по каплям, и реакционную смесь доводят до комнатной температуры. Через 18 часов реакционную смесь охлаждают до 0°C, и осторожно добавляют NH₄Cl. Реакционную смесь экстрагируют EtOAc (3×50 мл), промывают насыщенным раствором соли (1×50 мл) и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт затем очищают флэш-хроматографией на колонке (10% EtOAc в гексане).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,16 (с, 1H), 5,86 (с, 1H), 4,3 (м, 2H), 4,09 (м, 2H), 3,6 (д, J=6 Гц 2H), 3,40 (с, 3H), 3,08 (м, 1H). К раствору метилового эфира (245 мг, 0,8 ммоль) в ДМЭ (5 мл)/Na₂CO₃ (2 M, 1,2,0 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (184 мг, 1,9 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (40 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 110°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M NaOH (150 мл), и полученное твердое вещество выделяют в вакууме. Неочищенный продукт очищают пропусканием через SiO₂ (ДХМ) с получением 214 мг альдегида, который применяют как есть.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 10,11 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,94 (д, J=8 Гц, 1H), 7,88 (д, J=8 Гц, 1H), 7,65 (т, J=8 Гц, 1H), 7,17 (с, 1H), 6,03 (с, 1H), 4,42 (м, 2H), 4,13 (м, 2H), 3,65 (д, J=6 Гц, 2H), 3,41 (с, 3H), 3,11 (м, 1H). К перемешиваемому раствору альдегида (214 мг, 1,33 ммоль) и реагента Руперта (298 мг, 2,1 ммоль) в ДХМ (13 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,2 мл, 1 M ТГФ, 0,2 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь разбавляют ДХМ. Органические фазы промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (30% EtOAc в гексане) с получением 150 мг (выход 94%).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,71 (м, 1H), 7,64 (м, 1H), 7,51 (м, 2H), 7,13 (с, 1H), 6,02 (с, 1H), 5,11 (м 1H), 4,38 (т, J=8 Гц, 2H), 4,11 (м, 2H), 3,64 (д, J=7 Гц, 2H), 3,41 (с, 3H), 3,09 (м, 1H).

TRV-1435

В 1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-карбоновую кислоту (250 мг, 0,8 ммоль) в ДМЭ (5 мл)/Na₂CO₃ (2 M, 1,2 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (181 мг, 1,2 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (50 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 110°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M NaOH (150 мл), и полученное твердое вещество выделяют в вакууме. Неочищенный альдегид очищают пропусканием через SiO₂ (30% EtOAc в гексане) с получением 211 мг продукта, который применяют как есть. К перемешиваемому раствору альдегида (211 мг, 0,63 ммоль) и реагента Руперта (266 мг, 1,88 ммоль) в ДХМ (10 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,2 мл, 1 M ТГФ, 0,2 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре, холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь разбавляют ДХМ. Органические фазы промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (20-40% градиент EtOAc в гексане) с получением 70 мг (выход 27%).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,71 (с, 1H), 7,64 (м, 1H), 7,49 (м, 2H), 7,13 (с, 1H), 6,04 (с, 1H), 5,12 (с.шир, 1H), 4,33 (т, J=8 Гц, 2H), 4,25 (м, 2H), 2,91 (м, 1H), 2,74 (д, J=4 Гц, 1H), 1,43 (с, 1H), 1,27 (с, 6H).

TRV-1436

К перемешиваемому раствору 1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-ола (280 мг, 1,04 ммоль), растворенного в ДХМ (10 мл), добавляют реагент Десса-Мартина (571 мг, 1,3 ммоль), растворяют в ДХМ (4 мл). Через 1 час реакционная смесь становится мутной и образуется осадок. Продукт выливают в 1 M NaOH и экстрагируют ТБМЭ, полученный кетон применяют как есть.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,40 (с, 1H), 6,13 (с, 1H), 5,10 (с, 4H). К охлажденному до 0°C перемешиваемому раствору кетона (275 мг, 1,03 ммоль), растворенного в ТГФ (10 мл), добавляют MeMgBr (1 M ТГФ, 3 мл). Холодную баню оставляют на месте, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение 8 часов. В это время смесь повторно охлаждают и гасят NH₄Cl (водн.) и экстрагируют EtOAc (3×20 мл), сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный третичный спирт пропускают через слой SiO₂ (ДХМ) с получением желтого твердого вещества. К раствору третичного спирта (284 мг, 1 ммоль) в ДМЭ (6 мл)/Na₂CO₃ (2 M, 1,5 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (225 мг, 1,5 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (40 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 110°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M NaOH (150 мл), и полученное твердое вещество выделяют в вакууме. Неочищенный продукт очищают пропусканием через SiO₂ (10-30% градиент EtOAc в гексане) с получением 250 мг альдегида, который применяют как есть.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 10,11 (с, 1H), 8,11 (с, 1H), 7,92 (д, J=8 Гц, 1H), 7,87 (д, J=8 Гц, 1H), 7,65 (т, J=8 Гц, 1H), 7,21 (с, 1H), 6,09 (с, 1H), 4,30 (д, J=9 Гц, 2H), 4,24 (д, J=8 Гц, 2H), 2,19 (с.шир, 1H), 1,71 (с, 3H). К перемешиваемому раствору альдегида (250 мг, 0,81 ммоль) и реагента Руперта (344 мг, 2,4 ммоль) в ДХМ (10 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,2 мл, 1 M ТГФ, 0,2 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре, холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь разбавляют ДХМ. Органические фазы промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (20-40% градиент EtOAc в гексане) с получением 185 мг (выход 60%).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,71 (с, 1H), 7,64 (д, J=7 Гц, 1H), 7,51 (м, 2H), 7,18 (с, 1H), 6,08 (с, 1H), 5,12 (м, 1H), 4,29 (д, J=9 Гц, 2H), 4,22 (д, J=9 Гц, 2H), 2,71 (с.шир, 1H), 2,10 (с.шир, 1H), 1,70 (с, 3H).

TRV-1437

1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-ол (0,500 г, 1,85 ммоль) растворяют в NMP (2 мл) и охлаждают до 0°C. NaH (0,096 г, 2,4 ммоль) затем добавляют порциями, и перемешивание продолжают до прекращения выделения пузырьков, в этот момент добавляют этилйодид (0,16 мл, 2,0 ммоль). Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь затем повторно охлаждают до 0°C и гасят насыщенным NH₄Cl (водн.). Эту смесь затем экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой (2×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного этилового эфира. Этот эфир и 3-формилфенилбороновую кислоту (0,2908 г, 1,94 ммоль) собирают в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Затем добавляют ДМЭ (4,1 мл) и 2 M Na₂CO₃ (2,8 мл, 5,6 ммоль), затем Pd(PPh₃)₄ (0,1075 г, 0,093 ммоль). Пробирку затем герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (5×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением масла. Полученное неочищенное масло затем растворяют в ТГФ (5,6 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют CF₃TMS (0,41 мл, 2,8 ммоль), затем TBAF (0,1 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Реакционную смесь затем перемешивают в течение 60 минут, затем повторно охлаждают до 0°C. Добавляют TBAF (5,6 мл, 1,0 M раствор в ТГФ), и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь гасят насыщенным раствором соли и затем экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой (2×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного масла. Этот продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (20% EtOAc/гексан) с получением 0,3755 г (выход 51% за 3 стадии) TRV-1437.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 7,72 (с, 1H), 7,66-7,64 (м, 1H), 7,55-7,50 (м, 2H), 7,17 (с, 1H), 6,06 (с, 1H), 5,14-5,11 (м, 1H), 4,56-4,54 (м, 3H), 4,18 (д, J=5 Гц, 2H), 3,54 (кв, J=5 Гц, 2H), 2,67 (д, J=5 Гц, 1H), 1,26 (т, J=5 Гц, 3H).

TRV-1438

6-бром-N-(4-фторбензил)-N-метилбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амин (2,085 г, 6,20 ммоль) добавляют в пробирку, которую затем отсасывают и продувают аргоном (3 цикла). В эту пробирку затем добавляют диэтилмалонат (1,9 мл, 12,4 ммоль), P(_tBu)₃ (4 мл, 1,98 ммоль) и толуол (18 мл), затем добавляют Pd₂(dba)₃ (0,4542 г, 0,496 ммоль) и K₃PO₄ (4,6063 г, 21,7 ммоль). Пробирку затем герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение 16 часов. Реакционную смесь затем охлаждают и фильтруют через слой целита и затем концентрируют. Остаток очищают флэш-хроматографией на колонке (15% EtOAc/гексан) с получением 1,257 г (выход 49%) замещенного малоната. Этот продукт (1,2572 г, 3,03 ммоль) растворяют в ДМСО (30 мл) и NaCl (0,3536 г, 6,05 ммоль), и затем добавляют H₂O (1,8 мл, 97 ммоль). Эту смесь нагревают до 150°C в течение 8 часов. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют EtOAc и водой. Органический слой затем промывают H₂O (6×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного этилового эфира. Этот продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (10% EtOAc/гексан) с получением 0,7641 г (выход 73%) оранжевого твердого вещества. Этиловый эфир (0,5873 г, 1,71 ммоль) затем растворяют в ДХМ (20 мл) и охлаждают до -78°C. DIBAL (4,0 мл, 1,0 M раствор в гексане) добавляют по каплям. Реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 5 минут и затем нагревают до -30°C. После перемешивания при этой температуре в течение 3 часов, смесь гасят метанолом и нагревают до комнатной температуры. Добавляют воду (5 мл) и Na₂SO₄, смесь перемешивают в течение 30 минут и затем фильтруют с получением смеси альдегида и спирта. Эту смесь помещают в ДХМ (50 мл) и затем добавляют ДМП (0,7253 г, 1,71 ммоль) при энергичном перемешивании. Через 60 минут реакционную смесь гасят насыщенным водным NaHCO₃ и избытком Na₂S₂O₃, перемешивание продолжают до растворения всех твердых веществ. Смесь затем экстрагируют ДХМ. Объединенные органические слои сушат с Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют. Остаток затем очищают флэш-хроматографией (20% EtOAc/гексан) с получением 0,0726 г (выход 14%, 2 стадии) альдегида 9. Этот альдегид (0,0726 г, 0,243 ммоль) растворяют в ТГФ (5 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют CF₃TMS (0,05 мл), затем TBAF (0,03 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Смесь перемешивают в течение 60 минут и затем добавляют TBAF (0,46 мл, 1,0 M раствор в ТГФ), и реакционную смесь перемешивают в течение ночи. Реакционную смесь затем гасят насыщенным раствором соли и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой (2×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного масла. Этот продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (20% EtOAc/гексан) с получением 0,0349 г (выход 39%) TRV-1438.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 7,23-7,21 (м, 2H), 7,03-6,99 (м, 3H), 6,01 (с, 1H), 5,08 (с, 2H), 4,23 (ушир.с, 1H), 3,11 (с, 3H), 3,03 (дд, J=14, 2,5 Гц, 1H), 2,87 (дд, J=14, 10 Гц, 1H), 2,21 (с, 1H).

TRV-1439

6-бром-N-(4-фторбензил)-N-метилбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амин (2,085 г, 6,20 ммоль) добавляют в пробирку, которую затем откачивают и продувают аргоном (3 цикла). В эту пробирку затем добавляют диэтилмалонат (1,9 мл, 12,4 ммоль), P(tBu)₃ (4 мл, 1,98 ммоль) и толуол (18 мл), затем добавляют Pd₂(dba)₃ (0,4542 г, 0,496 ммоль) и K₃PO₄ (4,6063 г, 21,7 ммоль). Пробирку затем герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение 16 часов. Реакционную смесь затем охлаждают и фильтруют через слой целита и затем концентрируют. Остаток очищают флэш-хроматографией на колонке (15% EtOAc/гексан) с получением 1,257 г (выход 49%) соединения 2. Этот продукт (1,2572 г, 3,03 ммоль) растворяют в ДМСО (30 мл) и NaCl (0,3536 г, 6,05 ммоль) и затем добавляют H₂O (1,8 мл, 97 ммоль). Эту смесь нагревают до 150°C в течение 8 часов. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют EtOAc и водой. Органический слой затем промывают H₂O (6×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного этилового эфира. Этот продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (10% EtOAc/гексан) с получением 0,7641 г (выход 73%) оранжевого твердого вещества. Этот продукт (0,1736 г, 0,506 ммоль) растворяют в ТГФ (10 мл) и охлаждают до -78°C. MeLi (0,70 мл, 1,6 M раствор в Et₂O) добавляют по каплям, и реакционную смесь медленно нагревают до комнатной температуры. Смесь затем повторно охлаждают до 0°C и гасят хлоридом аммония. Эту смесь экстрагируют EtOAc, и объединенные органические экстракты промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного остатка. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (20% EtOAc/гексан) с получением 0,0288 г (выход 17%) третичного спирта TRV-1439.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 7,24-7,21 (м, 2H), 7,05-6,99 (м, 2H), 6,94 (с, 1H), 6,08 (с, 1H), 5,02 (с, 2H), 3,11 (с, 3H), 2,76 (с, 2H), 1,40 (с, 1H), 1,27 (с, 6H).

TRV-1440

К раствору 4-(азетидин-1-ил)-6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазола (480 мг, 0,6 ммоль) в ДМЭ (11 мл)/Na₂CO₃ (2 M, 2,8 мл) добавляют 3-карбоксифенилбороновую кислоту (470 мг, 2,8 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (93 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 100°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M HCl (150 мл), и полученное твердое вещество выделяют в вакууме. Неочищенную кислоту очищают флэш-хроматографией на колонке (ДХМ 1% AcOH) с получением 330 мг продукта, который применяют как есть. К перемешиваемому раствору этой кислоты (110 мг, 0,37 ммоль), растворенной в NMP (2 мл), добавляют ДИПЭА (130 мкл, 0,74 ммоль) и пиперазин (230 мг, 0,37 ммоль). После того, как смесь станет гомогенной, добавляют ГАТУ (140 мг, 0,37 ммоль), и реакционную смесь перемешивают. Через 1 час при комнатной температуре, реакционную смесь разбавляют EtOAc (100 мл) и разбавляют водой. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (50-100% EtOAc в гексане) с получением (20 мг) выход 14%.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,66 (м, 2H), 7,50 (т, J=8 Гц, 1H), 7,42 (д, J=8 Гц, 1H), 7,12 (с, 1H), 6,01 (с, 1H), 4,34 (т, J=7 Гц, 4H), 3,79 (с.шир, 2H), 3,43 (с.шир, 2H), 2,97 (с.шир, 2H), 2,82 (с.шир, 2H), 2,61 (с, 1H), 2,53 (п, J=7 Гц, 2H).

TRV-1441

К раствору 4-(азетидин-1-ил)-6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазола (480 мг, 0,6 ммоль) в ДМЭ (11 мл)/Na₂CO₃ (2 M, 2,8 мл) добавляют 3-карбоксифенилбороновую кислоту (470 мг, 2,8 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (93 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 100°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M HCl (150 мл), и полученное твердое вещество выделяют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (ДХМ 1% AcOH) с получением 330 мг продукта, который применяют как есть. К перемешиваемому раствору этой кислоты (165 мг, 0,56 ммоль), растворенной в NMP (2 мл), добавляют ДИПЭА (300 мкл, 1,7 ммоль) и циклопропиламин (55 мг, 0,59 ммоль). После того, как смесь станет гомогенной, добавляют ГАТУ (213 мг, 0,56 ммоль), и реакционную смесь перемешивают. Через 1 час при комнатной температуре, реакционную смесь разбавляют EtOAc (100 мл) и разбавляют водой. Органическую фазу промывают кислотой (1 M HCl, 1×100 мл), основанием (1 M NaOH, 1×100 мл) и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (EtOAc) с получением (120 мг), выход 64%.¹Н-ЯМР (500 MГц, ДМСО-D₆) δ = 7,91 (м, 2H), 7,66 (д, J=8 Гц, 1H), 7,57 (т, J=8 Гц, 1H), 7,35 (с, 1H), 6,23 (с, 1H), 4,33 (м, 6H), 4,07 (т, J=7 Гц, 2H), 2,45 (п, J=7 Гц, 2 H), 2,27 (п, J=7 Гц, 2H).

TRV-1442

К раствору 4-(азетидин-1-ил)-6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазола (480 мг, 0,6 ммоль) в ДМЭ (11 мл)/Na₂CO₃ (2 M, 2,8 мл) добавляют 3-карбоксифенилбороновую кислоту (470 мг, 2,8 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (93 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 100°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M HCl (150 мл), и полученное твердое вещество выделяют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (ДХМ 1% AcOH) с получением 330 мг продукта, который применяют как есть. К перемешиваемому раствору этой кислоты (110 мг, 0,37 ммоль), растворенной в NMP (2 мл), добавляют ДИПЭА (130 мкл, 0,74 ммоль) и морфолин (32 мкл, 0,37 ммоль). После того, как смесь станет гомогенной, добавляют ГАТУ (140 мг, 0,37 ммоль), и реакционную смесь перемешивают. Через 1 час при комнатной температуре, реакционную смесь разбавляют EtOAc (100 мл) и разбавляют водой. Органическую фазу промывают кислотой (1 M HCl, 1×100 мл), основанием (1 M NaOH, 1×100 мл) и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (50-100% EtOAc в гексане) с получением (40 мг), выход 29%.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,67 (м, 2H), 7,52 (т, J=8 Гц, 1H), 7,43 (д, J=7 Гц, 1H), 7,12 (с, 1H), 6,00 (с, 1H), 4,35 (т, J=7 Гц, 4H), 3,81 (м.шир, 4H), 3,65 (м.шир, 2H), 3,49 (м.шир, 2H), 2,54 (p, J=7 Гц, 2H).

TRV-1443

К раствору 4-(азетидин-1-ил)-6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазола (480 мг, 0,6 ммоль) в ДМЭ (11 мл)/Na₂CO₃ (2 M, 2,8 мл) добавляют 3-карбоксифенилбороновую кислоту (470 мг, 2,8 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (93 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 100°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M HCl (150 мл), и полученное твердое вещество выделяют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (ДХМ 1% AcOH) с получением 330 мг продукта, который применяют как есть. К перемешиваемому раствору этой кислоты (165 мг, 0,56 ммоль), растворенной в NMP (2 мл), добавляют ДИПЭА (300 мкл, 1,7 ммоль) и гидрохлорид азетидина (55 мг, 0,59 ммоль). После того, как смесь станет гомогенной, добавляют ГАТУ (213 мг, 0,56 ммоль), и реакционную смесь перемешивают. Через 1 час при комнатной температуре, реакционную смесь разбавляют EtOAc (100 мл) и разбавляют водой. Органическую фазу промывают кислотой (1 M HCl, 1×100 мл), основанием (1 M NaOH, 1×100 мл) и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (EtOAc) с получением (120 мг), выход 64%.¹Н-ЯМР (500 MГц, ДМСО-D₆) δ = 7,91 (м, 2H), 7,66 (д, J=8 Гц, 1H), 7,57 (т, J=8 Гц, 1H), 7,35 (с, 1H), 6,23 (с, 1H), 4,33 (м, 6H), 4,07 (т, J=7 Гц, 2H), 2,45 (п, J=7 Гц, 2H), 2,27 (п, J=7 Гц, 2H).

TRV-1444

К раствору 4-(азетидин-1-ил)-6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазола (480 мг, 0,6 ммоль) в ДМЭ (11 мл)/Na₂CO₃ (2 M, 2,8 мл) добавляют 3-карбоксифенилбороновую кислоту (470 мг, 2,8 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (93 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 100°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M HCl (150 мл), и полученное твердое вещество выделяют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (ДХМ 1% AcOH) с получением 330 мг продукта, который применяют как есть. К перемешиваемому раствору этой кислоты (165 мг, 0,56 ммоль), растворенной в NMP (2 мл), добавляют ДИПЭА (300 мкл, 1,7 ммоль) и гидрохлорид 3-гидроксиазетидина (64 мг, 0,59 ммоль). После того, как смесь станет гомогенной, добавляют ГАТУ (212 мг, 0,56 ммоль), и реакционную смесь перемешивают. Через 1 час при комнатной температуре, реакционную смесь разбавляют EtOAc (100 мл) и разбавляют водой. Органическую фазу промывают кислотой (1 M HCl, 1×100 мл), основанием (1 M NaOH, 1×100 мл) и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (EtOAc) с получением (60 мг) выход 30%.¹Н-ЯМР (500 MГц, ДМСО-D₆) δ = 7,89 (м, 2H), 7,67 (д, J=8 Гц, 1H), 7,58 (т, J=8 Гц, 1H), 7,35 (с, 1H), 6,22 (с, 1H), 4,50 (м 2H), 4,29 (м, 5H), 4,08 (м, 1H), 3,80 (дд, J=10 Гц, 2 Гц, 1H), 2,45 (п, J=7 Гц, 2H).

TRV-1445

6-бром-N-(4-фторбензил)-N-метилбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амин (0,3010 г, 0,895 ммоль) и 3-ацетилфенилбороновую кислоту (0,1542 г, 0,940 ммоль) объединяют в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Затем добавляют ДМЭ (2,1 мл) и 2 M Na₂CO₃ (1,4 мл, 2,69 ммоль), затем Pd(PPh₃)₄ (0,0518 г, 0,0448 ммоль). Пробирку затем герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (5×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением масла. Полученное неочищенное масло затем растворяют в ТГФ (10 мл) и охлаждают до 0°C. MeMgBr (1,2 мл, 1,0 M раствор в Bu₂O) добавляют по каплям, и затем реакционную смесь медленно нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Реакционную смесь охлаждают до 0°C и гасят насыщенным хлоридом аммония. Эту смесь затем экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Масло очищают флэш-хроматографией на колонке (20% EtOAc/гексан) с получением 0,0841 г (выход 24%, 2 стадии) TRV-1445.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 7,75 (д, J=5 Гц, 1H), 7,54 (д, J=10 Гц, 1H), 7,49-7,43 (м, 2H), 7,25-7,24 (м, 3H), 7,02 (т, J=7 Гц, 2H), 6,38 (с, 1H), 5,11 (с, 2H), 3,18 (с, 3H), 1,78 (с, 1H), 1,64 (с, 6H).

TRV-1446

6-бром-N-(4-фторбензил)-N-метилбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амин (0,3207 г, 0,954 ммоль) и 3-бромфенилбороновую кислоту (0,164 г, 1,00 ммоль) соединяют в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Затем добавляют ДМЭ (2,1 мл) и 2 M Na₂CO₃ (1,4 мл, 2,86 ммоль), затем Pd(PPh₃)₄ (0,0551 г, 0,0477 ммоль). Пробирку затем герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (5×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением масла. Неочищенное масло очищают флэш-хроматографией на колонке (5% EtOAc/гексан) с получением 0,3037 г (выход 77%) соответствующего арилбромида. Этот арилбромид (0,3037 г, 0,74 ммоль) растворяют в ТГФ (7,5 мл) и охлаждают до -78°C. н-BuLi (0,39 мл, 2,0 M раствор в циклогексане) добавляют по каплям. Раствор перемешивают в течение 30 минут при этой температуре, и затем оксетан-3-он (0,0692 г, 0,962 ммоль) в ТГФ (1 мл) добавляют по каплям. Раствор затем перемешивают и нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Реакционную смесь охлаждают до 0°C и гасят насыщенным хлоридом аммония. Эту смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют до неочищенного масла. Масло затем очищают флэш-хроматографией (45% EtOAc/гексан) с получением 0,0587 г (выход 19%) TRV-1446.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 7,83 (с, 1H), 7,70 (д, J=5 Гц, 1H), 7,58 (д, J=5 Гц, 1H), 7,53 (т, J=10 Гц, 1H), 7,25-7,24 (м, 3H), 7,02 (т, J=10 Гц, 2H), 6,36 (с, 1H), 5,12 (с, 2H), 4,96 (с, 4H), 3,18 (с, 3H), 2,62 (с, 1H).

TRV-1447

1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-ол (0,500 г, 1,85 ммоль) растворяют в NMP (2 мл) и охлаждают до 0°C. Затем добавляют NaH (0,096 г, 2,4 ммоль) порциями, и перемешивание продолжают до прекращения выделения пузырьков, в этот момент добавляют 2-бромпропан (0,19 мл, 2,0 ммоль). Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют NaH (0,192 г, 4,8 ммоль), 2-бромпропан (1,8 мл, 19 ммоль) и NaI (1 экв.). Реакционную смесь нагревают до 50°C в течение ночи. Смесь затем повторно охлаждают до 0°C и гасят насыщенным NH₄Cl (водн.). Эту смесь затем экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой (2×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного изопропилового эфира. Этот эфир (0,1942 г, 0,622 ммоль) и 3-формилфенилбороновую кислоту (0,0979 г, 1,94 ммоль) соединяют в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Затем добавляют ДМЭ (1,4 мл) и 2 M Na₂СО₃ (0,93 мл, 1,87 ммоль), затем Pd(PPh₃)₄ (0,0359 г, 0,0311 ммоль). Пробирку затем герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (5×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением масла. Это неочищенное масло (0,1047 г, 0,31 ммоль) затем растворяют в ТГФ (1,0 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют CF₃TMS (0,092 мл, 0,62 ммоль), затем TBAF (0,03 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Реакционную смесь затем перемешивают в течение 60 минут, затем повторно охлаждают до 0°C. Добавляют TBAF (1,0 мл, 1,0 M раствор в ТГФ), и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь гасят насыщенным раствором соли и затем экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой (2×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного масла. Этот продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (20% EtOAc/гексан) с получением 0,073 г (выход 58% за 3 стадии) TRV-1447.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 7,71 (с, 1H), 7,65 (д, J=5 Гц, 1H), 7,54-7,50 (м, 2H), 7,16 (с, 1H), 6,06 (с, 1H), 5,13-5,12 (м, 1H), 4,60-4,55 (м, 3H), 4,16-4,14 (м, 2H), 3,70 (септ, J=5 Гц, 1H), 2,71 (с, 1H), 1,21 (д, J=5 Гц, 6H).

TRV-1448

К раствору 6-бром-4-хлорбензо[c][1,2,5]оксадиазола (396 мг, 1,7 ммоль) в NMP (3 мл) в 4-драхмовой пробирке добавляют гидрохлорид 3-гидроксипирролидина (230 мг, 1,83 ммоль) и триэтиламин (710 мкл, 5,1 ммоль). Крышку плотно закрывают, и реакционную смесь нагревают при 85°C ВТН. Реакционную смесь разбавляют EtOAc (60 мл) и промывают 1 M HCl (3×20 мл) и насыщенным раствором соли (1×20 мл). Органическую фазу сушат с MgSO₄, фильтруют и концентрируют в вакууме. Неочищенный анилин применяют без дальнейшей очистки. К раствору анилина (820 мг, 2,9 ммоль) в ДМЭ (12 мл)/Na₂CO₃ (2 M, 4,4 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (645 мг, 4,3 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (110 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 110°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M NaOH (150 мл), и полученное твердое вещество выделяют в вакууме. Неочищенный продукт очищают пропусканием через SiO₂ (EtOAc) с получением 680 мг продукта, который применяют как есть.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 10,11 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,94 (д, J=8 Гц, 1H), 7,88 (д, J=8 Гц, 1H), 7,65 (т, J=8 Гц, 1H), 7,17 (с, 1H), 6,03 (с, 1H), 4,42 (м, 2H), 4,13 (м, 2H), 3,65 (д, J=6 Гц, 2H), 3,41 (с, 3H), 3,11 (м, 1H). К перемешиваемому раствору альдегида (680 мг, 2,2 ммоль) и реагента Руперта (937 мг, 6,6 ммоль) в ДХМ (20 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,2 мл, 1 M ТГФ, 0,2 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре, холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа реакционную смесь концентрируют в вакууме, и в колбу загружают ТГФ (20 мл). К этому добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь перемешивают. После завершения снятия защиты добавляют EtOAc (100 мл), и реакционную смесь промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (50% EtOAc в гексане) с получением 380 мг (выход 38%) TRV-1448, смеси диастереомеров 1:1:1:1 из-за двух хиральных центров.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,73 (с, 1H), 7,66 (дт, J=7 Гц, 2 Гц, 2H), 7,51 (м, 2H), 7,10 (с, 1H), 6,12 (с, 1H), 5,1 (м, 1H), 4,7 (с.шир, 1H), 3,96 (м, 4H), 2,81 (д, J=3 Гц, 1H), 2,20 (м, 2H), 1,75 (д, J=3 Гц, 1Н).

TRV-1449

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (0,3765 г, 1,35 ммоль), гидрохлорид этилпирролидин-2-карбоксилата (0,2677 г, 1,49 ммоль) и ДИПЭА (0,59 мл, 3,38 ммоль) растворяют в NMP (1,8 мл) в атмосфере аргона и перемешивают в герметично закрытой пробирке при 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (5×), 1 н. HCl (водн.), насыщенным NaHCO₃ (водн.) и насыщенным раствором соли, затем сушат с Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют с получением 0,1756 г (выход 38%) неочищенного продукта. Анилин (0,4346 г, 1,28 ммоль) затем растворяют в ТГФ (12 мл) и охлаждают до 0°C. MeMgBr (3,2 мл, 1,0 M раствор в Bu₂O) добавляют по каплям, и реакционную смесь медленно нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Реакционную смесь гасят NH₄Cl (водн.) и затем экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением масла. Масло затем очищают флэш-хроматографией (15% EtOAc/гексан) с получением 0,1293 г (выход 31%) третичного спирта. Третичный спирт (0,1293 г, 0,316 ммоль) и 3-формилфенилбороновую кислоту (0,0624 г, 0,416 ммоль) соединяют в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Затем добавляют ДМЭ (1,0 мл) и 2 M Na₂CO₃ (0,6 мл, 1,19 ммоль), затем Pd(PPh₃)₄ (0,0229 г, 0,0198 ммоль). Пробирку затем герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (5×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением масла. Это неочищенное масло затем растворяют в ТГФ (3 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют CF₃TMS (0,12 мл, 0,792 ммоль), затем TBAF (0,05 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Реакционную смесь затем перемешивают в течение 60 минут, затем повторно охлаждают до 0°C. Добавляют TBAF (1,4 мл, 1,0 M раствор в ТГФ), и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Смесь гасят насыщенным раствором соли и затем экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой (2×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного масла. Этот продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (30% EtOAc/гексан) с получением 0,0748 г (выход 45% за 2 стадии) TRV-1449.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 7,73 (с, 1H), 7,67-7,65 (м, 1H), 7,54-7,49 (м, 2H), 7,14 (с, 1H), 6,46 (с, 1H), 5,12-5,10 (м, 1H), 4,92 (д, J=5 Гц, 1H), 3,99-3,95 (м, 1H), 3,73-3,68 (м, 1H), 2,83 (с, 1H), 2,77-2,21 (м, 1H), 2,11-2,02 (м, 3H), 1,82 (с, 1H), 1,31 (с, 3H), 1,24 (с, 3H).

TRV-1450

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (2,013 г, 7,24 ммоль) и гидрохлорид (S)-этилпирролидин-2-карбоксилата (1,43 г, 7,96 ммоль) соединяют в пробирке. Пробирку откачивают и промывают аргоном тремя циклами. Затем добавляют NMP (10 мл) и ДИПЭА (3,5 мл, 19,9 ммоль), и пробирку герметично закрывают и нагревают до 50°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (5×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением масла. Неочищенное масло затем очищают флэш-хроматографией на колонке (15% EtOAc/гексан) с получением 0,6105 г (выход 25%) анилина. Анилин (1,696 г, 4,9 ммоль) растворяют в ДХМ (20 мл) и охлаждают до -78°C. DIBAL (12,5 мл, 1,0 M раствор в гексане) добавляют по каплям, и затем реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Реакционную смесь гасят MeOH и затем добавляют Na₂SO₄, и смесь перемешивают в течение 30 минут, затем фильтруют через целит. Органическую фазу разбавляют EtOAc и водой. Слои разделяют, и органический слой промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (30% EtOAc/гексан) с получением 1,294 г (выход 87%) первичного спирта. Этот спирт (0,2926 г, 0,98 ммоль) и 3-формилфенилбороновую кислоту (0,1544 г, 1,03 ммоль) соединяют в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Затем добавляют ДМЭ (2,2 мл) и 2 M Na₂CO₃ (1,5 мл, 2,94 ммоль), затем Pd(PPh₃)₄ (0,0566 г, 0,049 ммоль). Пробирку затем герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (5×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением масла. Это неочищенное масло затем растворяют в ТГФ (10 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют CF₃TMS (0,29 мл, 1,96 ммоль), затем TBAF (0,1 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Реакционную смесь затем перемешивают в течение 60 минут, затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют 4 н. HCl (водн.) и перемешивают в течение 60 минут. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой подщелачивают. Водный слой затем повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного масла. Этот продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (35% EtOAc/гексан) с получением 0,2158 г (выход 56%, 2 стадии) TRV-1450.¹Н-ЯМР (ДМСО, 500 MГц) δ = 7,87 (с, 1H), 7,79 (д, J=5 Гц, 1H), 7,57-7,54 (м, 2H), 7,21 (с, 1H), 6,96 (д, J=5 Гц, 1H), 6,34 (т, J=5 Гц, 1H), 5,29-5,25 (м, 1H), 4,91-4,89 (м, 1H), 4,55 (ушир.с, 1H), 3,82-3,81 (м, 1H), 3,58-3,57 (м, 3H), 2,12-2,11 (м, 2H), 2,02-1,97 (м, 2H).

TRV-1451

1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-карбоновую кислоту (1,5 г, 5 ммоль) растворяют в ТГФ (50 мл) и охлаждают до 0°C. К смеси добавляют BH₃-ТГФ (10 мл, 10 ммоль). Реакционную смесь доводят до комнатной температуры в течение ночи. На следующий день реакционную смесь гасят AcOH и экстрагируют в EtOAc. Органический слой промывают 1 M NaOH до того, как промывки не станут голубым лакмусом, и затем концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт конденсируют с SiO₂ и очищают флэш-хроматографией на колонке (3:2 гексан/EtOAc) с получением 800 мг первичного спирта (выход 56%).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,05 (с, 1H), 6,11 (с, 1H), 5,30 (с, 1H), 4,11 (т, J=8 Гц, 2H), 3,85 (м, 4H), 3,00 (м, 1H). К перемешиваемому раствору спирта (500 мг, 1,76 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляют периодинан Десса-Мартина (1,1 г, 2,64 ммоль), и раствор перемешивают в течение 1 часа. В этот момент реакционную смесь разбавляют EtOAc (100 мл) и промывают карбонатом натрия (насыщ.). Органический слой сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают пропусканием через SiO₂ (ДХМ) с получением 420 мг (1,49 ммоль, выход 84%) альдегида.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 9,96 (д, J=2 Гц, 1Н), 7,26 (с, 1Н), 5,96 (с, 1Н), 4,47 (м, 4H), 3,7 (м, 1H). В 0°C перемешиваемый раствор этого альдегида (420 мг, 1,5 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляют бромид метилмагния (1 M, 1,8 мл). Через 10 минут при пониженной температуре, холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 1 час реакционную смесь охлаждают до 0°C и осторожно добавляют насыщенный NH₄Cl. Реакционную смесь затем разбавляют EtOAc (100 мл), и фазы разделяют. Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт конденсируют с SiO₂ (4 г) и промывают с градиентом (0-2% MeOH в ДХМ) с получением 380 мг (1,27 ммоль, выход 85%) вторичного спирта.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,18 (с, 1H), 5,898 (с, 1H), 4,36-4,08 (м, 5H), 2,85 (м, 1H), 1,25 (д, 3H). К раствору этого вторичного спирта (380 мг, 1,28 ммоль) в ДМЭ (8 мл)/Na₂CO₃ (2 M, 1,9 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (286 мг, 1,9 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (70 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 85°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M NaOH (150 мл), и полученное твердое вещество выделяют в вакууме. Неочищенный продукт очищают пропусканием через SiO₂ (50% EtOAc в гексане) с получением 356 мг продукта, который применяют как есть.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 10,1 (с, 1H), 8,11 (с, 1H), 7,63 (д, J=7 Гц, 1H), 7,88 (д, J=7 Гц, 1H), 7,65 (т, J=7 Гц, 1H), 7,17 (с, 1H), 6,05 (с, 1H), 4,40 (м, 2H), 4,27 (м, 1H), 4,15-4,05 (м, 2H), 2,87 (м, 1H), 1,26 (д, J=6 Гц, 3H).

К перемешиваемому раствору этого альдегида (356 мг, 1,1 ммоль) и реагента Руперта (488 мкл, 3,3 ммоль) в ТГФ (3 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,2 мл, 1 M ТГФ, 0,2 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре, холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа реакционную смесь концентрируют в вакууме, и колбу загружают ТГФ (20 мл). К этой смеси добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь перемешивают. После завершения снятия защиты добавляют EtOAc (100 мл), и реакционную смесь промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (20-40% EtOAc в гексане) с получением 100 мг (выход 23%) TRV-1451, смесь диастереомеров 1:1:1:1 из-за двух хиральных центров.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,71 (с, 1H), 7,64 (м, 1H), 7,51 (м, 2H), 7,14 (с, 1H), 6,04 (с, 1H), 5,11 (м, 1H), 4,39 (м, 2H), 4,24 (м, 1H), 4,10 (м, 2H), 2,85 (м, 1H), 2,74 (м, 1H), 1,26 (д, J=6 Гц, 3H).

TRV-1452

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (2,013 г, 7,24 ммоль) и гидрохлорид (S)-этил пирролидин-2-карбоксилата (1,43 г, 7,96 ммоль) соединяют в пробирке. Пробирку откачивают и промывают аргоном в течение трех циклов. Затем добавляют NMP (10 мл) и ДИПЭА (3,5 мл, 19,9 ммоль), и пробирку герметично закрывают и нагревают до 50°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (5×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением масла. Неочищенное масло затем очищают флэш-хроматографией на колонке (15% EtOAc/гексан) с получением 0,6105 г (выход 25%) анилина. Анилин (1,696 г, 4,9 ммоль) растворяют в ДХМ (20 мл) и охлаждают до -78°C. DIBAL (12,5 мл, 1,0 M раствор в гексане) добавляют по каплям, и затем реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Реакционную смесь гасят MeOH и затем добавляют Na₂SO₄, и смесь перемешивают в течение 30 минут, затем фильтруют через целит. Органическую фазу разбавляют EtOAc и водой. Слои разделяют, и органический слой промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (30% EtOAc/гексан) с получением 1,294 г (выход 87%) первичного спирта. Первичный спирт (0,9956 г, 3,34 ммоль) растворяют в ДХМ (100 мл) и добавляют ДМП (2,1249 г, 5,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов и затем гасят насыщенным NaHCO₃ (водн.) и добавляют избыток Na₂SO₄ (8,0 г), и смесь перемешивают до растворения всех твердых веществ. Эту смесь затем экстрагируют ДХМ, и объединенный органический слой сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Очистка (колонка 20% EtOAc/гексан) дает 0,6471 г (выход 65%) альдегида. Этот альдегид (0,200 г, 0,675 ммоль) и пирролидин (0,06 мл, 0,743 ммоль) растворяют в ДХМ (3,1 мл) и затем обрабатывают NaBH(OAc)₃ (0,2003 г, 0,945 ммоль), и смесь перемешивают в течение 2 часов. Раствор охлаждают до 0°C и гасят 1 н. NaOH. Эту смесь затем экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного амина. Этот амин и 3-формилфенилбороновую кислоту (0,1063 г, 0,709 ммоль) соединяют в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Затем добавляют ДМЭ (1,5 мл) и 2 M Na₂CO₃ (1,0 мл, 2,0 ммоль), затем Pd(PPh₃)₄ (0,0389 г, 0,033 ммоль). Пробирку затем герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (5×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением масла. Это неочищенное масло затем растворяют в ТГФ (3 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют CF₃TMS (0,20 мл, 1,35 ммоль), затем TBAF (0,1 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Реакционную смесь затем перемешивают в течение 60 минут, затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют 4 н. HCl (водн.) и перемешивают в течение 60 минут. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой подщелачивают. Водный слой затем повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного масла. Этот продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (5% MeOH/ДХМ) с получением 0,1537 г (выход 51%) TRV-1452.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 7,76-7,74 (м, 2H), 7,68-7,65 (м, 2H), 7,51-7,47 (м, 4H), 7,08 (с, 1H), 7,07 (с, 1H), 6,22 (с, 1H), 6,21 (с, 1H), 5,11-5,05 (м, 2H), 64,65 (шир.с, 1H), 4,52 (шир.с, 1H), 3,94-3,89 (м, 2H), 3,65-3,59 (м, 2H), 2,70-2,52 (м, 12H), 2,28-2,25 (м, 2H), 2,14-2,05 (м, 6H), 1,81 (шир.с, 8H).

TRV-1453

6-бром-N-(4-фторбензил)-N-метилбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амин (1,00 г, 2,97 ммоль) и 3-карбоксифенилбороновую кислоту (0,5176 г, 3,12 ммоль) соединяют в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Затем добавляют ДМЭ (8,9 мл) и 2 M Na₂CO₃ (6,0 мл, 11,9 ммоль), затем Pd(PPh₃)₄ (0,1733 г, 0,15 ммоль). Пробирку затем герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (5×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного продукта. Смесь очищают на колонке 5% MeOH/ДХМ с получением 1,0873 г (выход 97%, химическая чистота 90%) кислоты. Смесь кислоты (0,200 г, 0,529 ммоль), циклопропиламина (0,04 мл, 0,529 ммоль) и ТЭА (0,18 мл, 1,32 ммоль) перемешивают в EtOAc (6 мл) и охлаждают на ледяной бане. Раствор T3P (0,4040 г, 50% об./об. в EtOAc) добавляют по каплям. После завершения добавления реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Реакционную смесь затем гасят водой и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт затем очищают хроматографией (40% EtOAc/гексан) с получением 0,1109 г (выход 50%) TRV-1453.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 8,01 (с, 1H), 7,72 (дд, J=8, 1,6 Гц, 2H), 7,51 (т, J=8 Гц, 1H), 7,26-7,23 (м, 3H), 7,02 (т, J=8 Гц, 2H), 6,35 (с, 1H), 6,32 (шир.с, 1H), 5,13 (с, 2H), 3,17 (с, 3H), 2,94-2,92 (м, 1H), 0,92-0,85 (м, 2H), 0,67-0,64 (м, 2H).

TRV-1454

6-бром-N-(4-фторбензил)-N-метилбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амин (1,00 г, 2,97 ммоль) и 3-карбоксифенилбороновую кислоту (0,5176 г, 3,12 ммоль) соединяют в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Затем добавляют ДМЭ (8,9 мл) и 2 M Na₂CO₃ (6,0 мл, 11,9 ммоль), затем Pd(PPh₃)₄ (0,1733 г, 0,15 ммоль). Пробирку затем герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (5×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного продукта. Смесь очищают на колонке 5% MeOH/ДХМ с получением 1,0873 г (выход 97%, химическая чистота 90%) кислоты. Смесь кислоты (0,200 г, 0,529 ммоль), морфолина (0,05 мл, 0,529 ммоль) и ТЭА (0,18 мл, 1,32 ммоль) перемешивают в EtOAc (6 мл) и охлаждают на ледяной бане. Раствор T3P (0,4040 г, 50% об./об. в EtOAc) добавляют по каплям. После завершения добавления реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Реакционную смесь затем гасят водой и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт затем очищают хроматографией (65% EtOAc/гексан) с получением 0,1331 г (выход 56%) TRV-1454.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 7,67 (д, J=10 Гц, 1H), 7,64 (с, 1H), 7,52 (т, J=10 Гц, 1H), 7,44-7,41 (м, 2H), 7,26-7,23 (м, 2H), 7,02 (т, J=10 Гц, 2H), 6,33 (с, 1H), 5,13 (с, 2H), 3,81 (шир.с, 4H), 3,63 (шир.с, 2H), 3,48 (шир.с, 2H), 3,17 (с, 3H).

TRV-1455

К перемешиваемому раствору (1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-ил)метанола (500 мг, 1,76 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляют периодинан Десса-Мартина (1,1 г, 2,64 ммоль), и раствор перемешивают в течение 1 часа. В этот момент реакционную смесь разбавляют EtOAc (100 мл) и промывают карбонатом натрия (насыщ.). Органический слой сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают пропусканием через SiO₂ (ДХМ) с получением 420 мг (1,49 ммоль, выход 84%) альдегид.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 9,96 (д, J=2 Гц, 1H), 7,26 (с, 1H), 5,96 (с, 1H), 4,47 (м, 4H), 3,7 (м, 1H). К перемешиваемому раствору этого альдегида (316 мг, 1,1 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляют морфолин (105 мкл, 1,21 ммоль), затем триацетоксиборгидрид натрия (326 мг, 1,54 ммоль). Когда реакция завершается (отслеживают ТСХ), смесь разбавляют ДХМ (100 мл) и промывают водой (50 мл), гидроксидом натрия (1 M, 50 мл), затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме с получением 406 мг амина. Продукт применяют без дальнейшей очистки.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,16 (с, 1H), 5,85 (с, 1H), 4,39 (м, 2H), 3,97 (м, 2H), 3,70 (м, 4H), 3,05 (м, 1H), 2,68 (д, J=8 Гц, 2H), 2,45 (м, 4H). К раствору этого амина (406 мг, 1,15 ммоль) в ДМЭ (7 мл)/Na₂CO₃ (2 M, 1,7 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (259 мг, 1,9 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (60 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 85°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M NaOH (150 мл), и полученное твердое вещество выделяют в вакууме. Неочищенный продукт очищают пропусканием через SiO₂ (50% ацетон в EtOAc) с получением 380 мг (1 ммоль, выход 85%) альдегида, который применяют как есть.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 10,1 (с, 1H), 8,13 (с, 1H), 7,93 (д, J=8 Гц, 1H), 7,89 (д, J=8 Гц, 1H), 7,66 (т, J=8 Гц, 1H), 7,18 (с, 1H), 6,05 (с, 1H), 4,46 (т, J=8 Гц, 2H), 4,04 (м, 2H), 3,72 (т, J=4 Гц, 4H), 3,10 (м, 1H), 2,72 (д, J=7 Гц, 2H), 2,47 (м, 4H). К перемешиваемому раствору этого альдегида (380 мг, 1,0 ммоль) и реагента Руперта (220 мкл, 1,5 ммоль) в ТГФ (3 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,2 мл, 1 M ТГФ, 0,2 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре, холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа реакционную смесь концентрируют в вакууме, и колбу загружают ТГФ (20 мл). Туда добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь перемешивают. После завершения снятия защиты добавляют EtOAc (100 мл), и реакционную смесь промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (80% EtOAc, 2% ТЭА, баланс гексаном) с получением 100 мг (выход 22%).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,72 (с, 1H), 7,65 (дм, J=8 Гц, 1H), 7,52 (м, 2H), 7,15 (с, 1H), 6,03 (с, 1H), 5,13 (кв, J=5 Гц, 1H), 4,44 (т, J=8 Гц, 2H), 4,01 (м, 2H), 3,72 (т, J=6 Гц, 4H), 3,09 (м, 1H), 2,92 (с.шир, 1H), 2,71 (д, J=8 Гц, 2H), 2,47 (м, 4H).

TRV-1456

К перемешиваемому раствору 1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-ола (280 мг, 1,04 ммоль), растворенного в ДХМ (10 мл), добавляют реагент Десса-Мартина (Oakwood) (571 мг, 1,3 ммоль), растворяют в ДХМ (4 мл). Через 1 час реакционная смесь становится мутной и образуется осадок. Продукт выливают в 1 M NaOH и экстрагируют ТБМЭ с получением соответствующего кетона.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,40 (с, 1H), 6,13 (с, 1H), 5,10 (с, 4H). К перемешиваемому раствору кетона (226 мг, 0,8 ммоль) в ДХМ (4 мл) добавляют пирролидин (75 мкл, 0,9 ммоль), ледяную уксусную кислоту (45 мкл, 0,9 ммоль) и триацетоксиборгидрид натрия (250 мг, 1,26 ммоль). Когда реакция завершена (ТСХ), смесь разбавляют EtOAc (100 мл) и промывают гидроксидом натрия (1 M водн.). Органическую фазу затем промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный амин очищают флэш-хроматографией (EtOAc) с получением 216 мг (0,7 ммоль, выход 79%) продукта.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,18 (с, 1H), 5,89 (с, 1H), 4,28 (м, 2H), 4,21 (м, 2H), 3,53 (м, 1H), 2,57 (м, 4H), 1,58 (м, 4H). К раствору этого амина (216 мг, 0,7 ммоль) в ДМЭ (4 мл)/Na₂CO₃ (2 M, 1,05 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (158 мг, 1,05 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (60 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 85°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M NaOH (150 мл), и полученное твердое вещество выделяют в вакууме. Неочищенный продукт очищают пропусканием через SiO₂ (EtOAc 1% MeOH) с получением 212 мг альдегида, который применяют как есть.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 10,1 (с, 1H), 8,11 (с, 1H), 7,93 (д, J=8 Гц, 1H), 7,87 (д, J=8 Гц, 1H), 7,63 (м 1H), 7,17 (с, 1H), 6,05 (с, 1H), 4,43 (м, 2H), 4,24 (м, 2H), 3,53 (м, 1H), 2,58 (м, 4H), 1,85 (м, 4H). К перемешиваемому раствору этого альдегида (212 мг, 0,6 ммоль) и реагента Руперта (266 мкл, 1,8 ммоль) в ТГФ (3 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,2 мл, 1 M ТГФ, 0,2 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре, холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа реакционную смесь концентрируют в вакууме и колбу загружают ТГФ (20 мл). Туда добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь перемешивают. После завершения снятия защиты добавляют EtOAc (100 мл), и реакционную смесь промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (2% MeOH в ДХМ) с получением 16 мг (6,2% выход).¹Н-ЯМР (500 MГц, ДМСО) δ = 7,89 (с, 1H), 7,81 (дм, J=8 Гц, 1H), 7,56 (м, 2H), 7,31 (с, 1H), 6,96 (д, J=6 Гц, 1H), 6,25 (с, 1H), 5,28 (м 1H), 4,38 (м, 2H), 4,16 (м, 2H), 3,52 (м, 1H), 2,51 (м, 4H), 1,73 (м, 4H).

TRV-1457

К перемешиваемому раствору (1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-ил)метанола (500 мг, 1,76 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляют периодинан Десса-Мартина (1,1 г, 2,64 ммоль), и раствор перемешивают в течение 1 часа. В этот момент реакционную смесь разбавляют EtOAc (100 мл) и промывают карбонатом натрия (насыщ.). Органический слой сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают пропусканием через SiO₂ (ДХМ) с получением 420 мг (1,49 ммоль, выход 84%) альдегида.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 9,96 (д, J=2 Гц, 1H), 7,26 (с, 1H), 5,96 (с, 1H), 4,47 (м, 4H), 3,7 (м, 1H). К перемешиваемому раствору этого альдегида (316 мг, 1,1 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляют пирролидин (118 мкл, 1,45 ммоль), затем триацетоксиборгидрид натрия (385 мг, 1,82 ммоль). Когда реакция завершается (отслеживают ТСХ), смесь разбавляют ДХМ (100 мл) и промывают водой (50 мл), гидроксидом натрия (1 M, 50 мл), затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме с получением 425 мг. Продукт применяют без дальнейшей очистки.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,14 (с, 1H), 5,83 (с, 1H), 4,40 (м, 2H), 3,98 (м, 2H), 3,04 (м, 1H), 2,76 (д, J=8 Гц, 2H), 2,51 (м, 4H), 1,79 (м, 4H). К раствору амина (425 мг, 1,26 ммоль) в ДМЭ (8 мл)/Na₂CO₃ (2 M, 1,9 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (283 мг, 1,9 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (66 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 85°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M NaOH (150 мл), и полученное твердое вещество выделяют в вакууме. Неочищенный продукт очищают пропусканием через SiO₂ (50% ацетон в EtoAc) с получением 274 мг (0,75 ммоль, выход 75%) альдегида, который применяют как есть.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 10,10 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,93 (д, J=8 Гц, 1H), 7,89 (д, J=8 Гц, 1H), 7,65 (т, J=8 Гц, 1H), 7,17 (с, 1H), 6,03 (с, 1H), 4,48 (т, J=8 Гц, 2H), 4,05 (м, 2H), 3,10 (м, 1H), 2,81 (д, J=8 Гц, 2H), 2,54 (м, 4H), 1,80 (м, 4H). К перемешиваемому раствору этого альдегида (274 мг, 0,75 ммоль) и реагента Руперта (166 мкл, 1,1 ммоль) в ТГФ (3 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,1 мл, 1 M ТГФ, 0,1 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре, холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа реакционную смесь концентрируют в вакууме и колбу загружают ТГФ (20 мл). Туда добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь перемешивают. После завершения снятия защиты добавляют EtOAc (100 мл), и реакционную смесь промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (50% EtOAc, 49% гексан, 1% ТЭА) с получением 70 мг (выход 22%).¹Н-ЯМР (500 MГц, ДМСО-D₆) δ = 7,88 (с, 1H), 7,81 (д, J=8 Гц, 1H), 7,59 (дм, J=7 Гц, 1H), 7,54 (т, J=8 Гц, 1H), 7,30 (с, 1H), 6,96 (д, J=5 Гц, 1H), 6,24 (с, 1H), 5,28 (м, 1H),4,38 (м, 2H), 3,97 (м, 2H), 3,00 (м, 1H), 2,74 (д, J=7 Гц, 2H), 2,45 (м, 4H), 1,68 (м, 4H).

TRV-1458

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (2,013 г, 7,24 ммоль) и гидрохлорид (S)-этилпирролидин-2-карбоксилата (1,43 г, 7,96 ммоль) соединяют в пробирке. Пробирку откачивают и промывают аргоном в течение трех циклов. Затем добавляют NMP (10 мл) и ДИПЭА (3,5 мл, 19,9 ммоль), и пробирку герметично закрывают и нагревают до 50°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (5×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением масла. Неочищенное масло затем очищают флэш-хроматографией на колонке (15% EtOAc/гексан) с получением 0,6105 г (выход 25%) анилина. Анилин (1,696 г, 4,9 ммоль) растворяют в ДХМ (20 мл) и охлаждают до -78°C. DIBAL (12,5 мл, 1,0 M раствор в гексане) добавляют по каплям, и затем реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение ночи. Реакционную смесь гасят MeOH и затем добавляют Na₂SO₄, и смесь перемешивают в течение 30 минут, затем фильтруют через целит. Органическую фазу разбавляют EtOAc и водой. Слои разделяют, и органический слой промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией (30% EtOAc/гексан) с получением 1,294 г (выход 87%) первичного спирта. Первичный спирт (0,9956 г, 3,34 ммоль) растворяют в ДХМ (100 мл) и добавляют ДМП (2,1249 г, 5,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов и затем гасят насыщенным NaHCO₃ (водн.) и добавляют избыток Na₂SO₄ (8,0 г), и смесь перемешивают до растворения всех твердых веществ. Эту смесь затем экстрагируют ДХМ, и объединенный органический слой сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Очистка (колонка 20% EtOAc/гексан) дает 0,6471 г (выход 65%) альдегида. Этот альдегид (0,206 г, 0,696 ммоль) и гидрохлорид циклобутиламина (0,0794 г, 0,738 ммоль) растворяют в метаноле (3 мл) и добавляют ТЭА (0,19 мл, 1,39 ммоль). Полученный продукт перемешивают в течение 24 часов и затем охлаждают до 0°C. К этой смеси затем добавляют NaBH₄ (0,0685 г, 1,81 ммоль) порциями. Смесь перемешивают в течение 60 минут и затем гасят 1 н. NaOH (водн.). Смесь экстрагируют EtOAc (3×), и объединенные органические слои промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного амина. К раствору этого амина в ТГФ (5 мл) при 0°C добавляют ТЭА (0,19 мл, 1,39 ммоль), ДМАП (кристалл) и затем BOC₂O (0,1822 г, 0,835 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 0°C, отслеживая ТСХ. Смесь затем гасят H₂O и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают H₂O (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного карбамата. Этот карбамат и 3-формилфенилбороновую кислоту (0,1094 г, 0,73 ммоль) соединяют в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Затем добавляют ДМЭ (1,6 мл) и 2 M Na₂CO₃ (1,1 мл, 2,09 ммоль), затем Pd(PPh₃)₄ (0,0402 г, 0,0348 ммоль). Пробирку затем герметично закрывают и нагревают до 80°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (5×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением масла. Это неочищенное масло затем растворяют в ТГФ (4 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют CF₃TMS (0,21 мл, 1,39 ммоль), затем TBAF (0,07 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Реакционную смесь затем перемешивают в течение 60 минут, затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют 4 н. HCl (водн.) и перемешивают в течение 60 минут. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой подщелачивают. Водный слой затем повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением трифторкарбинола в виде смеси диастереомеров. Этот неочищенный продукт затем растворяют в ДХМ (15 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют ТФА (0,53 мл), и смесь перемешивают в течение 36 часов, затем гасят насыщенным NaHCO₃ (водн.). Эту смесь экстрагируют ДХМ (5×), и объединенные органические слои сушат с Na₂SO₄, фильтруют и затем концентрируют. Этот неочищенный продукт очищают на колонке 5% MeOH/ДХМ с получением 0,130 г свободного амина. Этот продукт затем растворяют в MeOH при 0°C и обрабатывают большим избытком метанольного HCl. Реакционную смесь перемешивают в течение 30 минут и затем концентрируют с получением 0,081 г (выход 24%, 8 стадий) TRV-1458.¹Н-ЯМР (MeOD, 700 MГц) δ = 7,83 (с, 1H), 7,74 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,56 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,52 (т, J=7,6 Гц, 1H), 7,26 (с, 1H), 6,43 (с, 1H), 5,16 (кв, J=7,1 Гц, 1H), 3,87 (м, 1H), 3,78-3,77 (м, 1H), 3,52-3,50 (м, 1H), 3,30 (с, 2H), 3,25 (дд, J=12,5, 2,1 Гц, 1H), 3,05 (т, J=11,0 Гц, 1H), 2,36-2,20 (м, 9H), 1,99-1,90 (м, 2H).

TRV-1459

4,6-дибромбензо[c][1,2,5]оксадиазол (1,1509 г, 4,14 ммоль) и N-метил-1-(тиазол-2-ил)метанамин (4,97 ммоль) соединяют в пробирке. Пробирку откачивают и промывают аргоном в течение трех циклов. Затем добавляют NMP (6 мл) и ДИПЭА (0,94 мл, 5,38 ммоль), и пробирку герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (5×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением масла. Неочищенное масло затем очищают флэш-хроматографией на колонке (30% EtOAc/гексан) с получением 0,1872 г (выход 14%) анилина. Этот анилин (0,1872 г, 0,58 ммоль) и 3-формилфенилбороновую кислоту (0,0899 г, 0,60 ммоль) соединяют в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Затем добавляют ДМЭ (1,5 мл) и 2 M Na₂CO₃ (0,9 мл, 1,74 ммоль), затем Pd(PPh₃)₄ (0,0335 г, 0,029 ммоль). Пробирку затем герметично закрывают и нагревают до 85°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (5×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением масла. Это неочищенное масло затем растворяют в ТГФ (4 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют CF₃TMS (0,17 мл, 1,16 ммоль), затем TBAF (0,06 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Реакционную смесь затем перемешивают в течение 60 минут, затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют 4 н. HCl (водн.) и перемешивают в течение 60 минут. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой подщелачивают. Водный слой затем повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного масла. Этот продукт очищают флэш-хроматографией на колонке с пошаговым градиентом (100% ДХМ до 0,5% MeOH/ДХМ) с получением 0,0339 г (выход 14%, 3 стадии) TRV-1459.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 700 MГц) δ = 7,77 (д, J=3,2 Гц, 1H), 7,73 (с, 1H), 7,66 (дт, J=7,2, 1,6 Гц, 1H), 7,55-7,51 (м, 2H), 7,31 (с, 1H), 7,30 (д, J=3,2 Гц, 1H), 6,46 (с, 1H), 5,46 (с, 2H), 5,13 (кв, J=6,6 Гц, 1H), 3,32 (с, 3H).

TRV-1460

6-бром-N-(4-фторбензил)-N-метилбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-амин (1,00 г, 2,97 ммоль) и 3-карбоксифенилбороновую кислоту (0,5176 г, 3,12 ммоль) соединяют в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Затем добавляют ДМЭ (8,9 мл) и 2 M Na₂CO₃ (6,0 мл, 11,9 ммоль), затем Pd(PPh₃)₄ (0,1733 г, 0,15 ммоль). Пробирку затем герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (5×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного продукта. Продукт очищают на колонке 5% MeOH/ДХМ с получением 1,0873 г (выход 97%, химическая чистота 90%) кислоты. Смесь кислоты (0,3774 г, 1,0 ммоль), пирролидина (0,083 мл, 1,0 ммоль) и ТЭА (0,35 мл, 2,5 ммоль) перемешивают в EtOAc (10 мл) и охлаждают на ледяной бане. Раствор T3P (0,7636 г, 50% об./об. в EtOAc) добавляют по каплям. После завершения добавления реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Реакционную смесь затем гасят водой и экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой (3×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт затем очищают на двух последовательных колонках (75% EtOAc/гексан и затем 70% EtOAc/гексан) с получением 0,1436 г (выход 33%, 96% х.ч.) TRV-1460.¹Н-ЯМР (CDCl₃, 500 MГц) δ = 7,75 (с, 1H), 7,65 (д, J=10 Гц, 1H), 7,55 (д, J=10 Гц, 1H), 7,52-7,48 (м, 1H), 7,26-7,23 (м, 3H), 7,01 (т, J=10 Гц, 2H), 6,35 (с, 1H), 5,12 (с, 2H), 3,68 (т, J=5 Гц, 2H), 3,45 (т, J=5 Гц, 2H), 2,02-1,95 (м, 2H), 1,92-1,86 (м, 2H).

TRV-1461

1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-карбоновую кислоту (1,5 г, 5 ммоль) растворяют в ТГФ (50 мл) и охлаждают до 0°C. В полученный раствор добавляют BH₃-ТГФ (10 мл, 10 ммоль). Реакционную смесь доводят до комнатной температуры в течение ночи. На следующий день реакционную смесь гасят AcOH и экстрагируют в EtOAc. Органический слой промывают 1 M NaOH до того, как промывки станут лакмусовыми голубыми и затем концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт конденсируют с SiO₂ и очищают флэш-хроматографией на колонке (3:2 гексан/EtOAc) с получением 800 мг первичного спирта (выход 56%).¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,05 (с, 1H), 6,11 (с, 1H), 5,30 (с, 1H), 4,11 (т, J=8 Гц, 2H), 3,85 (м, 4H), 3,00 (м, 1H). К перемешиваемому раствору спирта (500 мг, 1,76 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляют периодинан Десса-Мартина (1,1 г, 2,64 ммоль), и раствор перемешивают в течение 1 часа. В этот момент реакционную смесь разбавляют EtOAc (100 мл) и промывают карбонатом натрия (насыщ.). Органический слой сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают пропусканием через SiO₂ (ДХМ) с получением 420 мг (1,49 ммоль, выход 84%) альдегида.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 9,96 (д, J=2 Гц, 1H), 7,26 (с, 1H), 5,96 (с, 1H), 4,47 (м, 4H), 3,7 (м, 1H). В 0°C перемешиваемый раствор этого альдегида (420 мг, 1,5 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляют бромид метилмагния (1M, 1,8 мл). Через 10 минут при пониженной температуре, холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 1 час реакционную смесь охлаждают до 0°C, и осторожно добавляют насыщенный NH₄Cl. Реакционную смесь затем разбавляют EtOAc (100 мл), и фазы разделяют. Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт конденсируют с SiO₂ (4 г) и градиентно промывают (0-2% MeOH в ДХМ) с получением 380 мг (1,27 ммоль, выход 85%) вторичного спирта. К раствору вторичного спирта (около 190 мг, 0,65 ммоль) растворяют в ТГФ (5 мл) и охлаждают до 0°C, добавляют NaH 60% в масле (100 мг, 3 ммоль). После окончания изначального выделения пузырьков добавляют по каплям MeI (200 мкл, 3 ммоль), реакционную смесь доводят до комнатной температуры. Через 18 часов реакционную смесь охлаждают до 0°C, и осторожно добавляют NH₄Cl. Реакционную смесь экстрагируют EtOAc (3×50 мл), промывают насыщенным раствором соли (150 мл) и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают пропусканием через SiO₂ (80 ДХМ в гексане) с получением 160 мг (выход 78%) метилового эфира. К раствору метилового эфира (160 мг, 0,5 ммоль) в ДМЭ (4 мл)/Na₂CO₃ (2 M, 0,75 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (113 мг, 1,5 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (40 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 85°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M NaOH (150 мл), и полученное твердое вещество выделяют в вакууме. Неочищенный продукт очищают пропусканием через SiO₂ (ДХМ/5% EtOAc) с получением 150 мг альдегида, который применяют как есть. К перемешиваемому раствору альдегида (150 мг, 0,4 ммоль) и реагента Руперта (98 мкл, 0,7 ммоль) в ТГФ (2 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,2 мл, 1 M ТГФ, 0,2 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа реакционную смесь концентрируют в вакууме, и колбу загружают ТГФ (20 мл). Туда добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь перемешивают. После завершения снятия защиты добавляют EtOAc (100 мл), и реакционную смесь промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (30% EtOAc в гексане) с получением 37 мг (выход 23%) TRV-1461, в виде смеси диастереомеров 1:1:1:1 из-за двух хиральных центров.¹Н-ЯМР (500 MГц, ДМСО) δ = 7,72 (с, 1H), 7,65 (д, J=7 Гц, 1 H), 7,52 (м, 2H), 7,13 (с, 1H), 6,02 (с, 1H), 5,13 (м, 1H), 4,38 (м, 2H), 4,19 (м, 1H), 4,09 (м, 1H), 3,55 (p, J=6 Гц, 1H), 3,39 (с, 3H), 2,88 (м, 1H), 2,71 (с, br, 1H), 1,78 (д, J=6 Гц, 3H).

TRV-1462

К перемешиваемому раствору 1-(6-бромбензо[c][1,2,5]оксадиазол-4-ил)азетидин-3-ола (730 мг, 2,7 ммоль), растворенного в ДХМ (10 мл), добавляют реагент Десса-Мартина (Oakwood) (1,26 г, 2,97 ммоль), растворяют в ДХМ (10 мл). Через 1 час реакционная смесь становится мутной и образуется осадок. Продукт выливают в 1 M NaOH и экстрагируют ТБМЭ с получением соответствующего кетона.¹Н-ЯМР (500 MГц, CDCl₃) δ = 7,40 (с, 1H), 6,13 (с, 1H), 5,10 (с, 4H). К перемешиваемому раствору кетона (300 мг, 1,1 ммоль) в ДХМ (4 мл) добавляют морфолин (160 мкл, 1,23 ммоль), ледяную уксусную кислоту (65 мкл, 1,1 ммоль) и триацетоксиборгидрид натрия (360 мг, 1,68 ммоль). Когда реакция завершается (ТСХ), смесь разбавляют EtOAc (100 мл) и промывают гидроксидом натрия (1 M водн.). Органическую фазу затем промывают насыщенным раствором соли, сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный амин очищают флэш-хроматографией (EtOAc) с получением 470 мг (1,4 ммоль, выход 52%) продукта. К раствору этого амина (470 мг, 1,4 ммоль) в ДМЭ (5 мл)/Na₂CO₃ (2 M, 2 мл) добавляют 3-формилфенилбороновую кислоту (180 мг, 1,05 ммоль) и Pd(P(Ph)₃)₄ (80 мг). Колбу затем оборудуют обратным конденсатором, продувают аргоном и нагревают до 85°C ВТН. Реакционную смесь выливают в 1 M NaOH (150 мл), и полученное твердое вещество выделяют в вакууме. Неочищенный продукт очищают пропусканием через SiO₂ (EtOAc 1% MeOH) с получением 300 мг альдегида, который применяют как есть. К перемешиваемому раствору этого альдегида (300 мг, 0,8 ммоль) и реагента Руперта (240 мкл, 1,6 ммоль) в ТГФ (3 мл) при 0°C добавляют TBAF (0,2 мл, 1 M ТГФ, 0,2 ммоль). Через 30 минут при низкой температуре холодную баню удаляют, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 3 часа реакционную смесь концентрируют в вакууме, и колбу загружают ТГФ (20 мл). Туда добавляют избыток TBAF, и реакционную смесь перемешивают. После завершения снятия защиты добавляют EtOAc (100 мл), и реакционную смесь промывают насыщенным NH₄Cl, насыщенным раствором соли и затем сушат с MgSO₄ и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (2% MeOH в ДХМ) с получением 40 мг (9% выход).¹Н-ЯМР (500 MГц, ДМСО) δ = 7,71 (с, 1H), 7,63 (д, J=7 Гц, 1H), 7,51 (м, 2H), 7,16 (с, 1H), 6,06 (с, 1H), 5,13 (м, 1H), 4,41 (т, J=8 Гц, 2H), 4,18 (м, 2H), 3,77 (м, 4H), 3,42 (p, J=6 Гц, 1H), 2,87 (с.шир, 1H), 2,48 (м, 4H).

TRV-1465

Смесь дибромбензофуразана (0,500 г, 1,8 ммоль), N1,N1,N3-триметилпропан-1,3-диамина (0,28 мл, 1,9 ммоль) и ДИПЭА (0,31 мл, 1,8 ммоль) в NMP (2 мл) нагревают до 100°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляют EtOAc и водой. После разделения слоев, водный слой подщелачивают и экстрагируют EtOAc (3×). Объединенные органические слои промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного анилина. Этот продукт очищают на колонке 10% MeOH/ДХМ с получением 0,3988 г анилина. Этот анилин (0,3988 г, 1,27 ммоль) и 3-формилфенилбороновую кислоту (0,2488 г, 1,66 ммоль) соединяют в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Затем добавляют ДМЭ (2,8 мл) и 2 M Na₂CO₃ (1,9 мл, 3,8 ммоль), затем Pd(PPh₃)₄ (0,074 г, 0,064 ммоль). Пробирку затем герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (5×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением масла. Это неочищенное масло затем растворяют в ТГФ (5 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют CF₃TMS (0,38 мл, 2,54 ммоль), затем TBAF (0,13 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Реакционную смесь затем перемешивают в течение 60 минут, затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют 4 н. HCl (водн.) и перемешивают в течение 60 минут. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой подщелачивают. Водный слой затем повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного масла. Этот продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (10% MeOH/ДХМ) с получением 0,061 г (выход 12%, 2 стадии) TRV-1465.¹Н-ЯМР (ДМСО, 500 MГц) δ = 7,89 (с, 1H), 7,81 (д, J=10 Гц, 1H), 7,59-7,53 (м, 2H), 7,29 (с, 1H), 6,95 (д, J=5 Гц, 1H), 6,40 (с, 1H), 5,31-5,25 (м, 1H), 3,92 (т, J=10 Гц, 2H), 3,24 (с, 3H), 2,24 (т, J=10 Гц, 2H), 2,08 (с, 6H), 1,77-1,71 (м, 2H).

TRV-1466

Смесь дибромбензофуразана (0,4669 г, 1,68 ммоль), N,N-диметилпиперидин-4-амина (0,2263 г, 1,76 ммоль) и ДИПЭА (0,29 мл, 1,68 ммоль) в NMP (3 мл) нагревают до 95°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляют EtOAc и водой. После разделения слоев, водный слой подщелачивают и экстрагируют EtOAc (3×). Объединенные органические слои промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного анилина. Этот продукт очищают на колонке 5% MeOH/ДХМ с получением 0,2221 г анилина. Этот анилин (0,2221 г, 0,68 ммоль) и 3-формилфенилбороновую кислоту (0,1334 г, 0,89 ммоль) соединяют в пробирке. Пробирку откачивают и продувают аргоном (3×). Затем добавляют ДМЭ (3,0 мл) и 2 M Na₂CO₃ (2,0 мл, 4 ммоль), затем Pd(PPh₃)₄ (0,039 г, 0,034 ммоль). Пробирку затем герметично закрывают и нагревают до 100°C в течение ночи. При охлаждении до комнатной температуры, смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои затем промывают водой (5×), насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением масла. Это неочищенное масло затем растворяют в ТГФ (5 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют CF₃TMS (0,20 мл, 1,36 ммоль), затем TBAF (0,07 мл, 1,0 M раствор в ТГФ). Реакционную смесь затем перемешивают в течение 60 минут, затем повторно охлаждают до 0°C и добавляют 4 н. HCl (водн.) и перемешивают в течение 60 минут. Смесь разбавляют водой и EtOAc. Слои разделяют, и водный слой подщелачивают. Водный слой затем повторно экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют с получением неочищенного масла. Этот продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (10% MeOH/ДХМ) с получением 0,061 г (выход 24%, 2 стадии) TRV-1466.¹Н-ЯМР (ДМСО, 700 MГц) δ = 7,90 (с, 1H), 7,83 (д, J=7 Гц, 1H), 7,59 (д, J=7 Гц, 1H), 7,55 (т, J=7 Гц, 1H), 7,51 (д, J=3 Гц, 1H), 6,96 (д, J=3 Гц, 1H), 6,73 (с, 1H), 5,30-5,27 (м, 1H), 4,33 (д, J=7 Гц, 2H), 3,05 (т, J=14 Гц, 2H), 2,41-2,39 (м, 1H), 2,23 (с, 6H), 1,93 (д, J=14 Гц, 2H), 1,61-1,54 (м, 2H).

БИОЛОГИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ

Применяют следующие методики:

Получение Αβ₄₀ исходных растворов

Αβ₄₀ (1,0 мг) предварительно обрабатывают в 1,5-мл микроцентрифужной трубке с применением ГФИП (1 мл) и обрабатывают ультразвуком в течение 20 минут для разборки любых предварительно образовавшихся агрегатов Αβ. ГФИП удаляют потоком аргона, и Αβ растворяют основанием Tris (5,8 мл, 20 мМ, pH около 10). pH доводят до 7,4 добавлением концентрированной HCl (около 10 мкл), и раствор фильтруют с применением шприцевого фильтра (0,2 мкл) перед применением.

Αβ₄₂ и тау-белки получают аналогично описанной выше методике.

Анализ агрегации ThT Αβ

Кинетический анализ ThT агрегации Αβ похож на тот, который описан у Chalifour et al. (Chalifour et al, 2003, J. Biol. Chem. 278:34874-81). Коротко, предварительно обработанный Αβ₄₀ или Αβ₄₂ (40 мкМ в 20 мМ Tris, pH 7,4) разбавляют равным объемом 8 мкМ Thioflavin T (ThT) в Tris (20 мМ, pH 7,4, 300 мМ NaCl). Аликвоты Αβ/ThT (200 мкл) добавляют в лунки черного полистирольного 96-луночного планшета, затем 2 мкл соединения в ДМСО (разные концентрации) или только ДМСО (контроль). Инкубирование проводят трижды, и они содержат 20 мкМ Αβ, различные концентрации соединения в 20 мМ Tris, pH 7,4, 150 мМ NaCl, 1% ДМСО. Планшеты покрывают прозрачными полистирольными крышками и инкубируют при 37°C в микропланшетном ридере Tecan Genios.

Анализ агрегации ThS тау

Кинетический анализ ThS агрегации тау обычно проводят по описанной выше методике, за исключением того, что Thioflavin S (ThS) применяют вместо ThT, и тау-белок применяют вместо Αβ.

Анализы исследований агрегации ThT и ThS

Считывания флуоресценции (λex=450 нм, λem=480 нм) проводят каждые 15 минут, после первого встряхивания при высокой интенсивности в течение 15 секунд и осаждения в течение 10 секунд перед каждым считыванием. Активные соединения уменьшают повышение флуоресценции в течение времени, которая имеет место в контролях. На фиг. 1-7 время проведения этого метода длится до 80 часов (самая крайняя правая часть оси X), в этот момент повышение флуоресценции обычно достигает асимптоты. Применяя определение контроля ДМСО в момент 80 часов за 100% агрегацию (0% ингибирование) и контроля ДМСО в момент 0 часов за 0% агрегацию (100% ингибирование), %ингибирования, чем выше, тем лучше, может быть рассчитан для данной концентрации соединения. Повторение этой методики для нескольких концентраций дает возможность получить среднюю ингибирующую концентрацию (IC₅₀), которая дана в таблице ниже для некоторых соединений.

Данные суммированы в таблице ниже; количества, данные в скобках, являются значениями в этом конкретном эксперименте для соединения ID 1027, данного в первой строке этой таблицы для сравнения.

IDСтруктураIC₅₀ Aβ_1-40% ингибирования Aβ₄₀
(20 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(10 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(5 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(3 мкМ)1027

1259

66,34 (66,24)1310

81,54 (64,67)1358

72,72 (67,72)

IDСтруктураIC₅₀ Aβ_1-40% ингибирования Aβ₄₀
(20 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(10 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(5 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(3 мкМ)1359

75,19 (67,72)1360

58,91
(67,72)1361

88,94
(67,72)1362

41,36 (65,29)1364

1,00 (10,47)1365

0,92 (10,47)1366

3,03 (10,47)1368

61,43
(53,47)

IDСтруктураIC₅₀ Aβ_1-40% ингибирования Aβ₄₀
(20 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(10 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(5 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(3 мкМ)1376

51,7 (14,7)1377

1,86
(22,1)1378

2,38 (22,1)1379

1,65
(22,1)1380

57,10 (55,8)1381

70,36 (55,78)1382

60,02 (55,78)1383

54,94 (55,78)

IDСтруктураIC₅₀ Aβ_1-40% ингибирования Aβ₄₀
(20 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(10 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(5 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(3 мкМ)1384

72,39 (55,78)1385

65,63 (55,78)1387

5,7678 (69)52 (56)40 (38)1390

75 (69)51 (48)1392

69 (53)36 (28)1397

61 (53)38 (28)1400

80 (58)48 (34)

IDСтруктураIC₅₀ Aβ_1-40% ингибирования Aβ₄₀
(20 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(10 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(5 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(3 мкМ)1401

58 (58)39 (34)1403

81 (58)51 (34)1404

69 (52)39 (28)1405

76 (52)46 (28)1406

83 (52)53 (28)1409

69 (52)50 (28)1411

81 (53)56 (28)

IDСтруктураIC₅₀ Aβ_1-40% ингибирования Aβ₄₀
(20 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(10 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(5 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(3 мкМ)1412

64 (53)51 (28)1413

61,3 (53)53 (28)1414

69 (53)53 (28)1415

53 (51)52 (33)1417

75 (51)52 (33)1418

55 (51)34 (33)

IDСтруктураIC₅₀ Aβ_1-40% ингибирования Aβ₄₀
(20 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(10 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(5 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(3 мкМ)1419

55 (51)48 (33)1420

48 (51)44 (33)1427

41 (38)18 (18)1428

78 (47)52 (26)1432

51 (47)23 (26)1435

66 (50)52 (34)1436

67 (50)48 (33)

IDСтруктураIC₅₀ Aβ_1-40% ингибирования Aβ₄₀
(20 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(10 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(5 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(3 мкМ)1437

50 (50)44 (33)1440

60 (50)52 (33)1441

64 (50)47 (33)1442

43 (50)29 (33)1446

50 (50)29 (36)1447

70 (50)54 (36)1448

55 (50)45 (36)1449

72 (50)55 (36)1450

79 (50)57 (36)

IDСтруктураIC₅₀ Aβ_1-40% ингибирования Aβ₄₀
(20 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(10 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(5 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(3 мкМ)1451

73 (56)54 (38)1452

63 (47)50 (23)1455

60 (47)41 (23)1456

64 (47)36 (23)1457

65 (47)51 (23)1459

62 (56)47 (38)1460

44 (56)36 (38)

IDСтруктураIC₅₀ Aβ_1-40% ингибирования Aβ₄₀
(20 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(10 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(5 мкМ)% ингибирования Aβ₄₀
(3 мкМ)1461

71,7 (46,8)58,9
(22,9)1462

48 (56)53 (38)1465Как для пара. 0383 выше62,043,81466Как для пара. 0386 выше49,036,9

Олигометрический анализ биотин-Αβ(1-42)

Представленный ниже анализ адаптирован из H. LeVine III. Biotin-avidin interaction-based screening assay for Alzheimer's β-peptide oligomer inhibitors, Anal. Biochem. 356 (2006) 265-272 и A. Frey, B. Meckelein, D. Externest, M.A. Schmidt. A stable and highly sensitive 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine-based substrate reagent for enzyme-linked immunosorbent assays, J. Immunol. Methods 233 (2000) 47-56.

Биотин-Αβ(1-42) (AnaSpec) при 0,2 мг/мл в гексафторизопропаноле (ГФИП) далее разводят в 20 объемах ГФИП, который затем выпаривают в потоке аргона. Добавляют 20 объемов трифторуксусной кислоты и оставляют на 10 минут, затем выпаривают в потоке аргона. Добавляют дополнительных 20 объемов ГФИП и выпаривают в потоке аргона. Биотин-Αβ(1-42) доводят до конечной концентрации 2,3 мг/мл в ДМСО. Образование олигомера инициируют в 96-луночных круглодонных полипропиленовых планшетах разведением полученного биотина-Αβ(1-42) 50× в 20 мМ фосфата натрия pH 7,5, 150 мМ NaCl в присутствии носителя или соединения. Образование олигомера останавливают через 30 минут добавлением 50 мкл/лунку 0,3% Tween-20.

96-луночные микропланшеты с высоким связыванием Costar покрывают в течение ночи при +4°C 50 мкл/лунку 1 мкг/мл NeutrAvidin (ThermoScientific) в 10 мМ фосфата натрия, pH 7,5. Планшеты блокируют в течение 2 часов при комнатной температуре 200 мкл/лунку 20 мМ фосфатом натрия pH 7,5, 150 мМ NaCl, 0,1% Tween-20. Препарат олигомера переносят при 50 мкл/лунку в блокированный планшет и инкубируют в течение 2 часов при комнатной температуре при встряхивании при 150 об./мин. Планшет затем промывают три раза 200 мкл/лунку 20 мМ трис-HCl pH 7,5, 34 мМ NaCl, 0,1% Tween-20 (TBS-T). Стрептавидин-HRP (Rockland Immunochemicals) [1:20000] в 20 мМ фосфате натрия, pH 7,5, 150 мМ NaCl, 0,1% Tween-20 добавляют при 50 мкл/лунку и инкубируют в темноте при комнатной температуре в течение 1 часа при встряхивании при 150 об/мин. Планшет промывают три раза 200 мкл/лунку TBS-T. Субстрат тетраметилбензидин/H₂O₂ готовят смешиванием 250 мкл 41 мМ 3,3',5,5'-тетраметилбензидина, 8,2 мМ боргидрида тетрабутиламмония в диметилацетамиде с 10 мл 205 мМ цитрата K₃, pH 4,0, 3,075 мМ H₂O₂ и инкубируют в течение 15 минут при комнатной температуре. Полученный раствор субстрата добавляют при 100 мкл/лунку, и реакцию проводят в течение 15 минут, после чего реакцию останавливают добавлением 100 мкл/лунку 1% H₂SO₄. OD_450нм определяют с применением планшетного ридера Tecan Infinite F200.

Ингибирование образования олигомера при 25 мкМ выбранными соединениями записано в таблице ниже, где более высокие цифры представляют более активные соединения (т.е. большее ингибирование олигомеров):

IDСтруктура% ингибирования при 25 мкМ1387

751435

291448

-231449

-31450

321451

41452

761455

291456

3

IDСтруктура% ингибирования при 25 мкМ1457

821459

-321460

101461

-281462

231465

691466

72

Реферат

Изобретение относится к соединениям формулы I:, где Rвыбирают из группы, включающей бензиламино, N-метилбензиламино, N-метил(4-фторбензил)амино, N-метил(4-метоксибензил)амино, N-метил(3,5-диметоксибензил)амино, N-метил(пиридин-2-ил)амино, N-метил(пиридин-3-ил)амино, пиперидино, 4-метилпиперазин-1-ил, морфолино, тиоморфолино, пирролидино, 3-метоксипирролидин-1-ил, пирролидин-3-ол-1-ил, 2-(2-метанол-1-ил)пирролид-1-ил, 2-(пирролидин-1-илметил)пирролидин-1-ил, 2-(2-пропанол-2-ил)пирролидин-1-ил, изоиндолин-2-ил, 4-(пирролидин-1-ил)пиперидин-1-ил, N,N-диэтиламино, N-метил-N-этиламино, N-метил-N-изопропиламино, N-метил-N-циклопропиламино, N-метил-N-этиниламино, N-(тиазол-2-илметил)-N-метиламино, азетидин-1-ил, 3-метил-3-ол-азетидин-1-ил, 3-(этанол-2-ил)азетидин-1-ил, 3-метоксиазетидин-1-ил, 3-гидроксиазетидин-1-ил, 3-этоксиазетидин-1-ил, 3-изопропоксиазетидин-1-ил, 3-(2-пропанол-2-ил)азетидин-1-ил, 3-(морфолинометил)азетидин-1-ил, 3-морфолиноазетидин-1-ил, 3-(пирролидин-1-ил)азетидин-1-ил, 3-(пирролидин-1-илметил)азетидин-1-ил, 3-(1-метоксиэтил)азетидин-1-ил, N-(3-(N,N-диметиламино)пропил)-N-метиламино и 4-(N,N-диметиламино)пиперидин-1-ил; Rвыбирают из группы, включающей 3-(этанол-1-ил)фенил, 3-(1-ол-2,2,2-трифторэтан-1-ил)фенил, 2-(1-ол-2,2,2-трифторэтан-1-ил)фенил, 4-(1-ол-2,2,2-трифторэтан-1-ил)фенил, 3-(3-ол-оксетан-3-ил)фенил, 3-((пиперазин-1-ил)метанон-2-ил)фенил, 3-((морфолин-1-ил)метанон-2-ил)фенил, 3-((пирролидин-1-ил)метанон-2-ил)фенил, 3-((N-циклопропил)амид-2-ил)фенил, 3-ол-оксетан-3-ил, 2-ол-бут-3-ен-4-ил и 2-ол-2-трифторметил-(1,1,1-трифтор)бут-3-ен-4-ил; и Rи Rкаждый независимо являются водородом. Технический результат: получены новые соединения, пригодные в лечении амилоидного заболевания, такого как болезнь Альцгеймера. 4 н. и 7 з.п. ф-лы, 2 табл., 7 ил.

Формула