Модуляторы транспортеров атф-связывающей кассеты - RU2640420C2

Описание

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

[0001] Данная заявка заявляет приоритет относительно предварительной заявки США 61/557043, поданной 8 ноября 2011, и предварительной заявки США 61/610257, поданной 13 марта 2012, полное содержание которых включено в настоящее описание посредством ссылки в полном объеме.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

[0002] Настоящее изобретение относится к модуляторам транспортеров АТФ-связывающей кассеты ("ABC") или их фрагментов, включая муковисцидозный регулятор трансмембранной проводимости ("CFTR"), содержащим их композициям и способам их получения. Настоящее изобретение также относится к способам лечения заболеваний, опосредованных ABC-транспортерами, с использованием указанных модуляторов.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[0003] АВС-транспортеры представляют собой семейство мембранных белков-транспортеров, которые регулируют транспорт широкого круга фармакологических агентов, потенциально токсичных лекарственных средств и ксенобиотиков, а также анионов. АВС-транспортеры являются гомологичными мембранными белками, которые связывают и используют клеточный аденозинтрифосфат (АТФ) вследствие их специфических активностей. Некоторые из этих транспортеров были обнаружены как белки устойчивости к многочисленным лекарственным средствам (подобно гликопротеину MDR1-P или белку устойчивости к многочисленным лекарственным средствам, MRP1), защищающие злокачественные раковые клетки от химиотерапевтических агентов. К настоящему времени было идентифицировано 48 АВС-транспортеров, которые на основе идентичности их последовательностей и функций были распределены на 7 семейств.

[0004] АВС-транспортеры регулируют различные важные физиологические функции в организме и обеспечивают защиту против вредных соединений, находящихся в окружающей среде. Вследствие этого они представляют собой важные потенциальные мишени для лекарственных средств при лечении заболеваний, связанных с дефектами в транспортере, для предотвращения транспорта лекарственных средств из клетки-мишени и вмешательства в другие заболевания, при которых модулирование активности АВС-транспортера может оказаться полезной.

[0005] Один из членов семейства АВС-транспортеров, обычно связанных с заболеванием, является цАМФ/АТФ-опосредуемый анионный канал, CFTR. CFTR экспрессируется в различных типах клеток, включая абсорбирующие и секреторные эпителиальные клетки, где он регулирует анионный поток через мембрану, а также активность других ионных каналов и белков. В эпителиальных клетках нормальное функционирование CFTR является критичным для поддерживания транспорта электролита по всему организму, включая ткани дыхательных путей и пищеварительного тракта. CFTR состоит из приблизительно 1480 аминокислот, которые кодируют белок, состоящий из тандемных повторов трансмембранных доменов, причем каждый содержит шесть трансмембранных спиралей и нуклеотидный связывающий домен. Два трансмембранных домена связаны большим полярным регуляторным (R)-доменом с многочисленными сайтами фосфорилирования, которые регулируют активность канала и клеточный транспорт.

[0006] Кодирующий CFTR ген был идентифицирован и секвенирован (см. Gregory, R. J. et al. (1990) Nature 347:382-386; Rich, D. P. et al. (1990) Nature 347:358-362), (Riordan, J. R. et al. (1989) Science 245:1066-1073). Дефект в этом гене вызывает мутации в CFTR, приводящие к муковисцидозу (“CF”), наиболее распространенной смертельной генетической болезни у людей. Муковисцидоз поражает приблизительно одного из каждых 2500 детей в США. Из всего населения США вплоть до 10 миллионов жителей несут одну копию дефектного гена без очевидных эффектов заболевания. Напротив, индивидуумы с двумя копиями ассоциированного с CF гена страдают от ослабляющих и фатальных эффектов CF, включая хронические заболевания легких.

[0007] У пациентов с муковисцидозом мутации в CFTR, эндогенно экспрессируемом в респираторном эпителии, приводят к пониженной апикальной секреции анионов, вызывающей дисбаланс в транспорте ионов и жидкостей. Происходящее в результате уменьшение транспорта анионов вносит вклад в увеличение накопления слизи в легких и к сопутствующим микробным инфекциям, которые, в конечном счете, являются причиной смерти пациентов с CF. В дополнение к респираторному заболеванию пациенты с CF обычно страдают от желудочно-кишечных проблем и панкреатической недостаточности, которые, если их не лечить, приводят к смерти. Кроме того, большинство мужчин с муковисцидозом бесплодны, а у женщин с муковисцидозом уменьшается фертильность. В противоположность тяжелым эффектам двух копий CF-ассоциированного гена индивидуумы с одной копией CF-ассоциированного гена проявляют повышенную устойчивость к холере и к обезвоживанию, возникающему при диареи, что, возможно, объясняет относительно высокую частоту CF-гена внутри популяции.

[0008] Анализ последовательностей CF хромосом CFTR гена выявил различные заболевания, вызывающие мутации (Cutting, G. R. et al. (1990) Nature 346:366-369; Dean, M. et al. (1990) Cell 61:863:870; и Kerem, B-S. et al. (1989) Science 245:1073-1080; Kerem, B-S et al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:8447-8451). К настоящему времени было идентифицировано более 1000 заболеваний, вызывающих мутации CF гена (http://www.genet.sickkids.on.ca/cftr/). Наиболее распространенной мутацией является делеция фенилаланина в положении 508 аминокислотной последовательности CFTR, и ее обычно обозначают как ΔF508-CFTR. Эта мутация встречается приблизительно в 70% случаев муковисцидоза и связана с тяжелыми заболеваниями.

[0009] Указанная делеция остатка 508 в ΔF508-CFTR препятствует корректной укладке образуемого белка. Это приводит к неспособности мутантного белка к выходу из ER и к направленной транспортировке в пазменную мембрану. В результате количество каналов, присутствующих в мембране, оказывается гораздо меньше, чем наблюдается в клетках, экспрессирующих CFTR дикого типа. Помимо ухудшения направленной транспортировки мутация приводит к дефектной синхронизации каналов. Совместное уменьшение количества каналов в мембране и нарушенная синхронизация каналов приводит к уменьшению транспорта анионов через эпителий, приводя к нарушению транспорта ионов и жидкости (Quinton P.M., FASEB J., 4:2709-2727 (1990)). Исследования, однако, показали, что уменьшенные количества ΔF508-CFTR в мембране являются функциональными, хотя в меньшей степени, чем для дикого типа CFTR (Dalemans et al., Nature Lond., 354:526-528 (1991); Dennung et al., см. выше; Pasyk Foskett, J. Cell. Biochem., 270:12347-12350 (1995)). В дополнение к ΔF508-CFTR, другие заболевания, вызывающие мутации в CFTR, которые приводят к нарушенной направленной транспортировке, дефектному синтезу и/или нарушенной синхронизации каналов, можно регулировать в сторону усиления или ослабления для изменения секреции анионов и изменения развития и/или тяжести заболевания.

[0010] Хотя CFTR транспортирует различные молекулы помимо анионов, очевидно, что эту роль (транспорт анионов) выполняет один элемент в важном механизме транспортировки ионов и воды через эпителий. Другие элементы включают эпителиальный Na⁺ канал, ENaC, Na⁺/2Cl^-/K⁺ко-транспортер, Na⁺-K⁺-АТФаза-насос и К⁺-каналы базолатеральной мембраны, которые ответственны за включение хлорида в клетку.

[0011] Указанные элементы функционируют совместно для достижения направленного транспорта через эпителий за счет их селективной экспрессии и локализации внутри клетки. Абсорбция хлорида происходит за счет согласованной активности ENaC и CFTR, присутствующих в апикальной мембране, и Na⁺-K⁺-АТФаза-насоса и Cl^- каналов, экспрессируемых на базолатеральной поверхности клетки. Вторичный активный транспорт хлорида с люминальной стороны приводит к накоплению внутриклеточного хлорида, который затем может пассивно удаляться через Cl^- каналы, приводя к векториальному транспорту. Система, состоящая из Na⁺/2Cl^-/K⁺ ко-транспортера, Na⁺-K⁺-АТФаза-насоса и базолатеральных мембранных К⁺ каналов на базолатеральной поверхности, и CFTR на люминальной стороне координируют секрецию хлорида за счет CFTR на люминальной стороне. Так как вода, вероятно, сама никогда активно не транспортируется, ее поток через эпителий зависит от очень маленьких трансэпителиальных осмотических градиентов, создаваемых большим потоком натрия и хлорида.

[0012] В дополнение к муковисцидозу модулирование активности CFTR может оказаться полезной в случае других заболеваний, не вызываемых непосредственно мутациями в CFTR, таких как секреторные заболевания и другие заболевания, связанные с укладкой белка, опосредованные CFTR. Они включают, но ими не ограничиваются, эмфизему, хроническую обструктивную болезнь легких (COPD), болезнь сухих глаз и синдром Сьегрена.

[0013] COPD характеризуется ограничением дыхания, которое развивается и не является полностью обратимым. Ограничение дыхания связано с гиперсекрецией слизи, эмфиземой и бронхиолитом. Активаторы мутантного CFTR или дикого типа CFTR предлагают потенциальное лечение гиперсекреции слизи и нарушенного клиренса реснитчатого эпителия, что является обычным при COPD. Более конкретно, повышающаяся секреция анионов через CFTR может облегчать транспорт жидкости к поверхности дыхательных путей для гидратации слизи и оптимизации вязкости перицилиарной жидкости. Это должно привести к усилению клиренса реснитчатого эпителия и ослаблению симптомов, связанных с COPD. Болезнь сухих глаз характеризуется уменьшением выделения слезной жидкости и атипичной слезной пленкой липидного, белкового и муцинового профилей. Существует множество причин болезни сухих глаз, некоторые из которых включают возраст, лазерную хирургию глаз, артрит, лекарственную терапию, химические/термические ожоги, аллергии и заболевания, такие как муковисцидоз и синдром Сьегрена. Увеличение секреции анионов за счет CFTR должно повысить транспорт жидкости от корнеальных эндотелиальных клеток и секреторных желез, окружающих глаз, для повышения корнеальной гидратации. Это должно способствовать ослаблению симптомов, связанных с болезнью сухие глаза. Синдром Сьергена представляет собой аутоиммунное заболевание, при котором иммунная система воздействует на влагопродуцирующие железы во всем организме, включая глаза, полость рта, кожу, ткани дыхательных путей, печени, влагалища и кишок. Симптомы включают болезнь сухие глаза, полости рта и влагалища, а также болезнь легких. Заболевание также связано с ревматоидным артритом, системной красной волчанкой, системным склерозом и полимиозитом/дерматомиозитом. Считают, что транспорт дефектного белка вызывает заболевание, для лечения которого варианты ограничены. Модуляторы активности CFTR могут гидратировать разные органы, пораженные болезнью, и способствовать ослаблению связанных с заболеванием симптомов.

[0014] Как обсуждалось выше, считают, что делеция остатка 508 в ΔF508-CFTR препятствует корректной укладке образуемого белка, что приводит к неспособности указанного мутантного белка покинуть ER, и переместиться в плазменную мембрану. В результате, недостаточные количества зрелого белка присутствуют в плазменных мембранах, и транспорт хлора внутри эпителиальных тканей значительно снижен. На деле указанный клеточный феномен дефективного ER процессинга ABC-транспортеров за счет ER механизма, как было показано, является основой не только в случае CF заболевания, но также для широкого круга других выделенных и наследственных заболеваний. Существуют два пути, согласно которым может нарушаться функция механизма ER или за счет потери связи с ER экспортом белков, что приводит к деградации, или за счет ER накопления указанных дефектных/с некорректной укладкой белков [Aridor M. et al., Nature Med., 5(7), 745-751 (1999); Shastry B.S. et al., Neurochem. International, 43, 1-7 (2003); Rutishauer J. et al., Swiss Med Wkly, 132, 211-222 (2002); Morello J.P. et al., TIPS, 21, 466-469 (2000); Bross P. et al., Human Mut., 14, 186-198 (1999)]. Заболеваниями, связанными с первым классом нарушений функций ER, являются муковисцидоз (связанный с неправильной укладкой ΔF508-CFTR, как обсуждалось выше), эмфизема (обусловленная α1-антитрипсином; не Piz варианты), наследственный гемохроматоз, дефициты коагуляции-фибринолиза, такие как дефицит С белка, наследственная ангиоэдема типа 1, дефицит процессинга липидов, такой как семейная гиперхолестеринемия, хиломикронемия типа 1, абеталипопротеинемия, болезнь лизосомных накоплений, такая как болезни I-клеточных включений/псевдосиндром Гурлера, мукополисахароидоз (связанный с ферментами лизосомного процессинга), болезнь Сандхоффа-Тэя-Сакса (связанная с β-гексозаминидазой), болезнь Криглера/Найяра типа II (обусловленная UDP-глюкуронил-сиаликтрансферазой), полиэндокринопатия/гиперинсулемия, сахарной диабет (связанный с рецептором инсулина), карликовость Ларона (связанная с рецептором гормона роста), миелопероксидазная недостаточность, первичный гипопаратироидизм (обусловленный препропаратироидным гормоном), меланомы (обусловленные тирозиназой). Заболевания, связанные с последним классом нарушения функций ER, представляют собой гликаноз CDG типа 1, эмфиземы (обусловленные α1-антитрипсином (PiZ вариант), врожденный гипертироидоз, остеопсатироз (обусловленный проколлагеном типов I, II, IV), наследственная гипофибриногенемия (обусловленная фибриногеном), дефицит ACT (обусловленный α1-антихимотрипсином), несахарный диабет (DI), нейрофизеальный DI (обусловленный гормоном вазопрессина/V2-рецептором), нефрогенный DI (обусловленный аквапорином II), синдром Чаркот-Мари-Туута (обусловленный периферическим миелиновым белком 22), болезнь Перлицеуса-Мерцбахера, нейродегенеративные заболевания, такие как болезнь Альцгеймера (обусловленная βΑΡΡ и презенилинами), болезнь Паркинсона, амиотрофический латеральный склероз, синдром прогрессирующего супрануклеарного паралича, болезнь Пика, некоторые полиглутаминные неврологические нарушения, такие как болезнь Хантингтона, спиноцеребуллярная атаксия типа I, спинальная и бульбарная мышечная атрофия, дентаторубальный паллидолуизиан и миотоническая дистрофия, а также губчатая энцефалопатия, такая как наследственная болезнь Крейтцфельдта-Джекоба (обусловленная дефектом процессинга прионового белка), болезнь Фабри (обусловленная лизосомальной α-галактозидазой A) и синдром Страусслера-Шейнкера (обусловленный дефектом процессинга Prp).

[0015] Кроме высокого уровня регуляции активности CFTR пониженная секреция анионов за счет модуляторов CFTR может оказаться полезной при лечении секреторных диарей, при которых транспорт эпителиальной воды резко возрастает в результате активируемого усиливающим секрецию средством транспорта хлоридов. Механизм включает повышение цАМФ и стимуляцию CFTR.

[0016] Хотя имеются многочисленные причины диареи, основные последствия диспептических заболеваний, возникающих из-за избыточного транспорта хлоридов, являются общими для всех видов диареи и включают обезвоживание, ацидоз, нарушенный рост и смерть.

[0017] Острые и хронические диареи представляют собой основную медицинскую проблему во многих областях по всему миру. Диарея является как существенным фактором при недостаточном питании, так и основной причиной гибели (5000000 смертей в год) детей в возрасте менее пяти лет.

[0018] Секреторные диареи также являются опасным состоянием для пациентов с синдромом приобретенного иммунодефицита (СПИД) и хроническим воспалительным заболеванием кишечника (IBD). У 16 миллионов путешественников из индустриализованных государств в развивающиеся страны возникает диарея, причем тяжесть и число случаев диареи изменяются в зависимости от страны и области путешествия.

[0019] Диарея у сельскохозяйственных и домашних животных, таких как коровы, свиньи и лошади, овцы, козы, кошки и собаки, является основной причиной гибели этих животных. Диарея может возникнуть от любого значительного перемещения, такого как отъемное или физическое действие, а также ответ на различные бактериальные или вирусные инфекции, и обычно проявляется в первые пять часов жизни животного.

[0020] Наиболее распространенной из вызывающих диарею бактерий является энтеротоксогенная E. coli (ETEC), имеющая пилусный антиген К99. Обычные вирусные причины диареи включают ротавирус и коронавирус. Другие инфекционные агенты включают, наряду с другими, криптоспоридий, giardia lamblia и сальмонеллу.

[0021] Симптомы ротавирусной инфекции включают экскрецию жидких фекалий, обезвоживание и слабость. Коронавирус вызывает еще более тяжелое болезненное состояние у новорожденных животных и отличается более высокой смертностью, нежели ротавирусная инфекция. Однако часто молодое животное может быть инфицировано более чем одним вирусом или одновременно комбинацией вирусного и бактериального организмов. Это резко повышает тяжесть заболевания.

[0022] Соответственно, существует необходимость в модуляторах активности ABC-транспортеров, и содержащих их композициях, которые можно использовать для модуляции активности ABC-транспортеров в клеточных мембранах млекопитающего.

[0023] Существует необходимость в создании способов лечения заболеваний, опосредованных ABC-транспортерами, используя указанные модуляторы активности ABC-транспортеров.

[0024] Существует необходимость в способах модулирования активности ABC-транспортеров в ex vivo клеточных мембранах млекопитающего.

[0025] Существует необходимость в модуляторах CFTR активности, которые можно использовать для модуляции активности CFTR в клеточных мембранах млекопитающего.

[0026] Существует необходимость в способах лечения CFTR-опосредованных заболеваниях, используя указанные модуляторы CFTR активности.

[0027] Существует необходимость в способах модулирования CFTR активности в ex vivo клеточных мембранах млекопитающего.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0028] Было обнаружено, что соединения настоящего изобретения и их фармацевтически приемлемые композиции можно использовать в качестве модуляторов активности ABC-транспортеров, в частности, активности CTFR. Указанные соединения имеют общую формулу I:

или их фармацевтически приемлемые соли, где независимо в каждом случае:

Y представляет собой OH или NH; и

X представляет собой CO₂J;

где J представляет собой H или C_1-С₆алкил;

R представляет собой H, OH, OCH₃, или два R, взятые вместе, образуют -OCH₂или -OCF₂O-;

R₁ представляет собой H или вплоть до двух C₁-C₆ алкилов;

R₂ представляет собой H или галоген; и

R₃ представляет собой H или C₁-C₆ алкил;

или Y и X, взятые вместе, образуют соединение формулы II:

или его фармацевтически приемлемую соль, где независимо для каждого случая:

R представляет собой H, OH, OCH₃, или два R, взятые вместе, образуют -OCH₂O- или -OCF₂O-;

R₁ представляет собой H или вплоть до двух C₁-C₆ алкилов;

R₂ представляет собой H или галоген;

R₃ представляет собой H или C₁-C₆ алкил;

Y представляет собой O или NR₄; и

R₄ представляет собой H или C₁-C₆ алкил.

[0029] В настоящем изобретении также предложены способы получения соединений формул I и II.

[0030] Указанные соединения и их фармацевтически приемлемые композиции можно использовать для лечения или облегчения тяжести различных заболеваний, нарушений или состояний, включая, но ими не ограничиваясь, муковисцидоз, эмфизему, наследственный гемохроматоз, коагуляционно-фибролитический дефицит, дефицит С белка, наследственные ангиоэдемы типа 1, дефицит процессинга липидов, семейную гиперхолестеринемию, хиломикронемию типа 1, абеталипопротеинемию, болезнь лизосомого накопления, болезнь I-клеточных включений/псевдосиндром Гурлера, мукополисахароидоз, болезнь Сандхоффа-Тея-Сакса, болезнь Криглера/Найяра типа II, полиэндокринопатии/гиперинсулемии, сахарный диабет, карликовость Ларона, миелопероксидазную недостаточность, первичный гипопаратироидизм, меланомы, гликаноз CDG типа 1, наследственный гипертироидоз, остеопсатироз, наследственную гипофибриногенемию, дефицит ACT, несахарный, нейрофизиологический, нефрогенный диабет, синдром Чаркот-Мари-Туута, болезнь Пелицеуса-Мерцбахера, нейродегенеративные заболевания, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, амиотрофический латеральный склероз, синдром прогрессирующего супрануклеарного паралича, болезнь Пика, полиглутаминные неврологические нарушения, болезнь Хантингтона, спиноцеребуллярную атаксию типа I, спинальную и бульбарную мышечную атрофию, дентаторубальный паллидолуизиан, миотоническую дистрофию, губчатую энцефалопатию, наследственную болезнь Крейтцфельдта-Джекоба, болезнь Фабри, синдром Страусслера-Шейнкера, COPD, сухость глаз и болезнь Сьогрена.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Определения

[0031] В том смысле, как здесь использованы, применяются следующие определения, если не указано иное.

[0032] Термин "ABC-транспортер" в том смысле, как здесь использован, означает ABC-транспортерный белок или его фрагмент, содержащий по меньшей мере один связывающий домен, где указанный белок или его фрагмент присутствует in vivo или in vitro. Термин "связывающий домен" в том смысле, как здесь использован, означает домен ABC-транспортера, который может связываться с модулятором. См., например, Hwang, T. C. et al., J. Gen. Physiol. (1998): 111(3), 477-90.

[0033] Термин "CFTR" в том смысле, как здесь использован, означает муковисцидозный регулятор трансмембранной проводимости или его мутацию, способную к регуляторной активности, включая, но ими не ограничиваясь, ΔF508 CFTR и G551D CFTR (см., например, http://www.genet.sickkids.on.ca/cftr/, относительно CFTR мутаций).

[0034] Термин "модулирующий" в том смысле, как здесь использован, означает увеличение или уменьшение, например, активности, на измеримое количество. Соединения, которые модулируют активность ABC-транспортера, такую как активность CFTR, путем повышения активности ABC-транспортера, например, анионного канала CFTR, называют агонистами. Соединения, которые модулируют активность ABC-транспортера, такую как активность CFTR, путем снижения активности ABC-транспортера, например, анионного канала CFTR, называют антагонистами. Агонист взаимодействует с ABC-транспортером, таким как анионный канал CFTR, для повышения способности рецептора к передаче внутриклеточного сигнала в ответ на связывание эндогенного лиганда. Антагонист взаимодействует с ABC-транспортером, таким как CFTR, и конкурирует с эндогенным лигандом(-ами) или субстратом(-ами) за сайт(-ы) связывания на рецепторе для снижения способности рецептора передавать внутриклеточный сигнал в ответ на связывание эндогенного лиганда.

[0035] Выражение "лечение или уменьшение тяжести заболевания, опосредованного ABC-транспортерами" относится как к способам лечения заболеваний, которые непосредственно вызваны ABC-транспортерами и/или активностью CFTR, так и к облегчению симптомов заболеваний, непосредственно не вызванных ABC-транспортерами и/или активностями анионных каналов CFTR. Примеры заболеваний, симптомы которых могут быть вызваны ABC-транспортерами и/или активностью CFTR, включают, но ими не ограничиваются, муковисцидоз, эмфиземы, наследственный гемохроматоз, дефицит коагуляции-фибринолиза, такой как дефицит С белка, наследственная ангиоэдема типа 1, дефицит процессинга липидов, такой как семейная гиперхолестеринемия, хиломикронемия типа 1, абеталипопротеинемия, болезнь лизосомых накоплений, такая как болезнь I-клеточных включений/псевдосиндром Гурлера, мукополисахаридоз, болезнь Сандхоффа/Тея-Сакса, болезнь Криглера/Найяра типа II, полиэндокринопатия/гиперинсулемия, сахарный диабет, карликовости Ларона, миелопероксидазная недостаточность, первичный гипопаратироидизм, меланома, гликаноз CDG типа 1, эмфизема, наследственный гипертироидоз, остеопсатироз, наследственная гипофибриногенемия, дефицит ACT, несахарный диабет (DI), нейрофизиологический DI, нефрогенный DI, синдром Чаркот-Мари-Туута, болезнь Пелицеуса-Мерцбахера, нейродегенеративне заболевания, такие как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, амиотрофический латеральный склероз, синдром прогрессирующего супрануклеарного паралича, болезнь Пика, некоторые полиглутаминные неврологические нарушения, такие как болезнь Хантингтона, спиноцеребуллярная атаксия типа I, спинальная и бульбарная мышечная атрофия, дентаторубальный паллидолуизиан и миотоническая дистрофия, а также губчатая энцефалопатия, такая как наследственная болезнь Крейтцфельдта-Джекоба, болезнь Фабри, синдром Страусслера-Шейнкера, COPD, сухость глаз и болезнь Сьогрена.

[0036] Для целей настоящего изобретения химические элементы идентифицируют в соответствии с Периодической Таблицей элементов, CAS версией, Handbook of Chemistry and Physics, 75th Ed. Кроме того, общие принципы органической химии раскрыты в "Organic Chemistry", Thomas Sorrell, University Science Books, Sausolito: 1999, и "March's Advanced Organic Chemistry", 5th Ed., Ed.: Smith, M.B. and March, J., John Wiley & Sons, New York: 2001, полное содержание которых включено в описание посредством ссылки.

[0037] В том смысле, как здесь использован, термин "алифатический" включает термины алкил, алкенил, алкинил, каждый из которых необязательно замещен, как раскрыто далее.

[0038] В том смысле, как здесь использован, термин "алкильная" группа относится к насыщенной алифатической углеводородной группе, содержащей 1-12 (например, 1-8, 1-6 или 1-4) атомов углерода. Алкильная группа может быть неразветвленной или разветвленной. Примеры алкильных групп включают, но ими не ограничиваются, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, н-гептил или 2-этилгексил. Алкильная группа может быть замещенной (т.е., необязательно замещенной) одним или более заместителями, такими как галоген, фосфо, циклоалифатический [например, циклоалкил или циклоалкенил], гетероциклоалифатический [например, гетероциклоалкил или гетероциклоалкенил], арил, гетероарил, алкокси, ароил, гетероароил, ацил [например, (алифатический)карбонил, (циклоалифатический)карбонил, или (гетероциклоалифатический)карбонил], нитро, циано, амидо [например, (циклоалкилалкил)карбониламино, арилкарбониламино, аралкилкарбониламино, (гетероциклоалкил)карбониламино, (гетероциклоалкилалкил)карбониламино, гетероарилкарбониламино, гетероаралкилкарбониламино алкиламинокарбонил, циклоалкиламинокарбонил, гетероциклоалкиламинокарбонил, ариламинокарбонил или гетероариламинокарбонил], амино [например, алифатический амино, циклоалифатический амино или гетероциклоалифатический амино], сульфонил [например, алифатический-SO₂-], сульфинил, сульфанил, сульфокси, мочевина, тиомочевина, сульфамоил, сульфамид, оксо, карбокси, карбамоил, циклоалифатический окси, гетероциклоалифатический окси, арилокси, гетероарилокси, аралкилокси, гетероарилалкокси, алкоксикарбонил, алкилкарбонилокси или гидрокси. Без ограничений, некоторые примеры замещенных алкилов включают карбоксиалкил (такой как HOOC-алкил, алкоксикарбонилалкил и алкилкарбонилоксиалкил), цианоалкил, гидроксиалкил, алкоксиалкил, ацилалкил, аралкил, (алкоксиарил)алкил, (сульфониламино)алкил (такой как (алкил-SO₂-амино)алкил), аминоалкил, амидоалкил, (циклоалифатический)алкил или галогеналкил.

[0039] В том смысле, как здесь использован, термин "алкенильная" группа относится к алифатической углеродной группе, которая содержит 2-8 (например, 2-12, 2-6 или 2-4) атомов углерода и по меньшей мере одну двойную связь. Подобно алкильной группе, алкенильная группа может быть неразветвленной или разветвленной. Примеры алкенильной группы включают, но ими не ограничиваются, аллил, изопренил, 2-бутенил и 2-гексенил. Алкенильная группа может быть необязательно замещена одним или более заместителями, такими как галоген, фосфо, циклоалифатический [например, циклоалкил или циклоалкенил], гетероциклоалифатический [например, гетероциклоалкил или гетероциклоалкенил], арил, гетероарил, алкокси, ароил, гетероароил, ацил [например, (алифатический)карбонил, (циклоалифатический)карбонил или (гетероциклоалифатический)карбонил], нитро, циано, амидо [например, (циклоалкилалкил)карбониламино, арилкарбониламино, аралкилкарбониламино, (гетероциклоалкил)карбониламино, (гетероциклоалкилалкил)карбониламино, гетероарилкарбониламино, гетероаралкилкарбониламино алкиламинокарбонил, циклоалкиламинокарбонил, гетероциклоалкиламинокарбонил, ариламинокарбонил или гетероариламинокарбонил], амино [например, алифатический амино, циклоалифатический амино, гетероциклоалифатический амино или алифатический сульфониламино], сульфонил [например, алкил-SO₂-, циклоалифатический-SO₂- или арил-SO₂-], сульфинил, сульфанил, сульфокси, мочевина, тиомочевина, сульфамоил, сульфамид, оксо, карбокси, карбамоил, циклоалифатический окси, гетероциклоалифатический окси, арилокси, гетероарилокси, аралкилокси, гетероаралкокси, алкоксикарбонил, алкилкарбонилокси или гидрокси. Без ограничений, некоторые примеры замещенных алкенилов включают цианоалкенил, алкоксиалкенил, ацилалкенил, гидроксиалкенил, аралкенил, (алкоксиарил)алкенил, (сульфониламино)алкенил (такой как (алкил-SO₂-амино)алкенил), аминоалкенил, амидоалкенил, (циклоалифатический)алкенил, или галогеналкенил.

[0040] В том смысле, как здесь использован, термин "алкинильная" группа относится к алифатической углеродной группе, которая содержит 2-8 (например, 2-12, 2-6 или 2-4) атомов углерода и содержит по меньшей мере одну тройную связь. Алкинильная группа может быть неразветвленной или разветвленной. Примеры алкинильной группы включают, но ими не ограничиваются, пропаргил и бутинил. Алкинильная группа может быть необязательно замещена одним или более заместителями, такими как ароил, гетероароил, алкокси, циклоалкилокси, гетероциклоалкилокси, арилокси, гетероарилокси, аралкилокси, нитро, карбокси, циано, галоген, гидрокси, сульфо, меркапто, сульфанил [например, алифатический сульфанил или циклоалифатический сульфанил], сульфинил [например, алифатический сульфинил или циклоалифатический сульфинил], сульфонил [например, алифатический-SO₂-, алифатический амино-SO₂- или циклоалифатический-SO₂-], амидо [например, аминокарбонил, алкиламинокарбонил, алкилкарбониламино, циклоалкиламинокарбонил, гетероциклоалкиламинокарбонил, циклоалкилкарбониламино, ариламинокарбонил, арилкарбониламино, аралкилкарбониламино, (гетероциклоалкил)карбониламино, (циклоалкилалкил)карбониламино, гетероаралкилкарбониламино, гетероарилкарбониламино или гетероариламинокарбонил], мочевина, тиомочевина, сульфамоил, сульфамид, алкоксикарбонил, алкилкарбонилокси, циклоалифатический, гетероциклоалифатический, арил, гетероарил, ацил [например, (циклоалифатический)карбонил или (гетероциклоалифатический)карбонил], амино [например, алифатический амино], сульфокси, оксо, карбокси, карбамоил, (циклоалифатический)окси, (гетероциклоалифатический)окси или (гетероарил)алкокси.

[0041] В том смысле, как здесь использован, термин "амидо" включает как "аминокарбонил", так и "карбониламино". Указанные термины, когда их используют отдельно или в связи с другими группами, относятся к амидогруппе, такой как -N(R^X)-C(O)-R^Y или -C(O)-N(R^X)₂, если это концевая группа, и -C(O)-N(R^X)- или -N(R^X)-C(O)-, если эта группа находится внутри цепи, где R^X и R^Y определены далее. Примеры амидогрупп включают алкиламидо (такой как алкилкарбониламино или алкиламинокарбонил), (гетероциклоалифатический)амидо, (гетероаралкил)амидо, (гетероарил)амидо, (гетероциклоалкил)алкиламидо, ариламидо, аралкиламидо, (циклоалкил)алкиламидо или циклоалкиламидо.

[0042] В том смысле, как здесь использован, термин "аминогруппа" относится к -NR^XR^Y_, где каждый из R^X и R^Y независимо представляет собой водород, алифатический, циклоалифатический, (циклоалифатический)алифатический, арил, аралифатический, гетероциклоалифатический, (гетероциклоалифатический)алифатический, гетероарил, карбокси, сульфанил, сульфинил, сульфонил, (алифатический)карбонил, (циклоалифатический)карбонил, ((циклоалифатический)алифатический)карбонил, арилкарбонил, (аралифатический)карбонил, (гетероциклоалифатический)карбонил, ((гетероциклоалифатический)алифатический)карбонил, (гетероарил)карбонил или (гетероаралифатический)карбонил, каждый из которых определен в описании и необязательно замещен. Примеры аминогрупп включают алкиламино, диалкиламино или ариламино. Если "амино" не является концевой группой (например, алкилкарбониламино), его представляют как -NR^X-. R^X имеет указанные выше значения.

[0043] В том смысле, как здесь использован, термин "арильная" группа, использованный отдельно или как часть более крупного фрагмента, как в "аралкил", "аралкокси" или "арилоксиалкил", относится к моноциклическим (например, фенил); бициклическим (например, инденил, нафталенил, тетрагидронафтил, тетрагидроинденил); и трициклическим (например, флуоренил, тетрагидрофлуоренил или тетрагидроантраценил, антраценил) кольцевым системам, в которых моноциклическая кольцевая система является ароматической, или по меньшей мере одно из колец в бициклической или трициклической кольцевой системе является ароматическим. Бициклические и трициклические группы включают бензоконденсированные 2-3-членные карбоциклические кольца. Например, бензоконденсированные группы включают фенил, конденсированный с двумя или более из C_4-8 карбоциклических фрагментов. Арил может быть необязательно замещен одним или более заместителями, включая алифатические [например, алкил, алкенил или алкинил]; циклоалифатические (циклоалифатический)алифатический; гетероциклоалифатический; (гетероциклоалифатический)алифатический; арил; гетероарил; алкокси; (циклоалифатический)окси; (гетероциклоалифатический)окси; арилокси; гетероарилокси; (аралифатический)окси; (гетероаралифатический)окси; ароил; гетероароил; амино; оксо (у неароматического карбоциклического кольца бензоконденсированного бициклического или трициклического арила); нитро; карбокси; амидо; ацил [например, (алифатический)карбонил; (циклоалифатический)карбонил; ((циклоалифатический)алифатический)карбонил; (аралифатический)карбонил; (гетероциклоалифатический)карбонил; ((гетероциклоалифатический)алифатический)карбонил; или (гетероаралифатический)карбонил); сульфонил [например, алифатический-SO₂- или амино-SO₂-]; сульфинил [например, алифатический-S(O)- или циклоалифатический-S(O)-]; сульфанил [например, алифатический-S-]; циано; галоген; гидрокси; меркапто; сульфокси; мочевина; тиомочевина; сульфамоил; сульфамид или карбамоил. Альтернативно, арил может быть незамещенным.

[0044] Неограничивающие примеры замещенных арилов включают галогенарил [например, моно-, ди (такой как п,м-дигалогенарил) и (тригалоген)арил]; (карбокси)арил [например, (алкоксикарбонил)арил, ((аралкил)карбонилокси)арил и (алкоксикарбонил)арил]; (амидо)арил [например, (аминокарбонил)арил, (((алкиламино)алкил)аминокарбонил)арил, (алкилкарбонил)аминоарил, (ариламинокарбонил)арил и (((гетероарил)амино)карбонил)арил]; аминоарил [например, ((алкилсульфонил)амино)арил или ((диалкил)амино)арил]; (цианоалкил)арил; (алкокси)арил; (сульфамоил)арил [например, (аминосульфонил)арил]; (алкилсульфонил)арил; (циано)арил; (гидроксиалкил)арил; ((алкокси)алкил)арил; (гидрокси)арил, ((карбокси)алкил)арил; (((диалкил)амино)алкил)арил; (нитроалкил)арил; (((алкилсульфонил)амино)алкил)арил; ((гетероциклоалифатический)карбонил)арил; ((алкилсульфонил)алкил)арил; (цианоалкил)арил; (гидроксиалкил)арил; (алкилкарбонил)арил; алкиларил; (тригалогеналкил)арил; п-амино-м-алкоксикарбониларил; п-амино-м-цианоарил; п-галоген-м-аминоарил; или (м-(гетероциклоалифатический)-o-(алкил))арил.

[0045] В том смысле, как здесь использован, термин "аралифатический", такой как "аралкильная" группа, относится к алифатической группе (например, C_1-4 алкильной группе), которая замещена арильной группой. Термины "алифатический", "алкил" и "арил" определены в описании. Примером аралифатической группы, такой как аралкильная группа, является бензил.

[0046] В том смысле, как здесь использован, термин "аралкильная" группа, относится к алкильной группе (например, С_1-4 алкильной группе), которая замещена арильной группой. Как "алкил", так и "арил" определены выше. Примером аралкильной группы является бензил. Аралкил может быть необязательно замещен одним или более заместителями, такими как алифатический [например, алкил, алкенил или алкинил, включая карбоксиалкил, гидроксиалкил, или галогеналкил, такой как трифторметил], циклоалифатический [например, циклоалкил или циклоалкенил], (циклоалкил)алкил, гетероциклоалкил, (гетероциклоалкил)алкил, арил, гетероарил, алкокси, циклоалкилокси, гетероциклоалкилокси, арилокси, гетероарилокси, аралкилокси, гетероаралкилокси, ароил, гетероароил, нитро, карбокси, алкоксикарбонил, алкилкарбонилокси, амидо [например, аминокарбонил, алкилкарбониламино, циклоалкилкарбониламино, (циклоалкилалкил)карбониламино, арилкарбониламино, аралкилкарбониламино, (гетероциклоалкил)карбониламино, (гетероциклоалкилалкил)карбониламино, гетероарилкарбониламино или гетероаралкилкарбониламино], циано, галоген, гидрокси, ацил, меркапто, алкилсульфанил, сульфокси, мочевина, тиомочевина, сульфамоил, сульфамид, оксо или карбамоил.

[0047] В том смысле, как здесь использован, термин "бициклическая кольцевая система" включает 8-12 (например, 9, 10 или 11) членные структуры, которые образуют два кольца, где два кольца имеют по меньшей мере один общий атом (например, 2 общих атома). Бициклические кольцевые системы включают бициклоалифатические (например, бициклоалкил или бициклоалкенил), бициклогетероалифатические, бициклические арилы и бициклические гетероарилы.

[0048] В том смысле, как здесь использован, термин "карбоциклическая" или "циклоалифатическая" группа включает "циклоалкильную" группу и "циклоалкенильную" группу, каждая из которых необязательно замещена, как раскрыто далее.

[0049] В том смысле, как здесь использован, термин "циклоалкильная" группа относится к насыщенному карбоциклическому моно- или бициклическому (конденсированному или мостиковому) кольцу, содержащему 3-10 (например, 5-10) атомов углерода. Примеры циклоалкильных групп включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, адамантил, норборнил, кубил, октагидро-инденил, декагидро-нафтил, бицикло[3.2.1]октил, бицикло[2.2.2]октил, бицикло[3.3.1]нонил, бицикло[3.3.2.]децил, бицикло[2.2.2]октил, адамантил или ((аминокарбонил)циклоалкил)циклоалкил.

[0050] В том смысле, как здесь использован, термин "циклоалкенильная" группа относится к неароматическому карбоциклическому кольцу, содержащему 3-10 (например, 4-8) атомов углерода и имеющему одну или более двойных связей. Примеры циклоалкенильных групп включают циклопентенил, 1,4-циклогексадиенил, циклогептенил, циклооктенил, гексагидроинденил, октагидро-нафтил, циклогексенил, циклопентенил, бицикло[2.2.2]октенил или бицикло[3.3.1]ноненил.

[0051] Циклоалкильныеая или циклоалкенильная группы может быть необязательно замещена одним или более заместителями, такими как фосфор, алифатический [например, алкил, алкенил или алкинил], циклоалифатический, (циклоалифатический)алифатический, гетероциклоалифатический, (гетероциклоалифатический)алифатический, арил, гетероарил, алкокси, (циклоалифатический)окси, (гетероциклоалифатический)окси, арилокси, гетероарилокси, (аралифатический)окси, (гетероаралифатический)окси, ароил, гетероароил, амино, амидо [например, (алифатический)карбониламино, (циклоалифатический)карбониламино, ((циклоалифатический)алифатический)карбониламино, (арил)карбониламино, (аралифатический)карбониламино, (гетероциклоалифатический)карбониламино, ((гетероциклоалифатический)алифатический)карбониламино, (гетероарил)карбониламино или (гетероаралифатический)карбониламино], нитро, карбокси [например, HOOC-, алкоксикарбонил или алкилкарбонилокси], ацил [например, (циклоалифатический)карбонил, ((циклоалифатический)алифатический)карбонил, (аралифатический)карбонил, (гетероциклоалифатический)карбонил, ((гетероциклоалифатический)алифатический)карбонил или (гетероаралифатический)карбонил], циано, галоген, гидрокси, меркапто, сульфонил [например, алкил-SO₂- и арил-SO₂-], сульфинил [например, алкил-S(O)-], сульфанил [например, алкил-S-], сульфокси, мочевина, тиомочевина, сульфамоил, сульфамид, оксо или карбамоил.

[0052] В том смысле, как здесь использован, термин "гетероцикл" или "гетероциклоалифатический" включает гетероциклоалкильную группу и гетероциклоалкенильную группу, каждая из которых необязательно замещена, как раскрыто далее.

[0053] В том смысле, как здесь использован, термин "гетероциклоалкильная" группа относится к 3-10-членным моно- или бициклическим (конденсированным или мостиковым) (например, 5- до 10-членным моно- или бициклическим) насыщенным кольцевым структурам, в которых один или более кольцевых атомов являются гетероатомами (например, N, O, S или их комбинацией). Примеры гетероциклоалкильной группы включают пиперидил, пиперазил, тетрагидропиранил, тетрагидрофурил, 1,4-диоксоланил, 1,4-дитианил, 1,3-диоксоланил, оксазолидил, изоксазолидил, морфолинил, тиоморфолил, октагидробензофурил, октагидрохроменил, октагидротиохроменил, октагидроиндолил, октагидропиримидинил, декагидрохинолинил, октагидробензо[b]тиофенил, 2-окса-бицикло[2.2.2]октил, 1-аза-бицикло[2.2.2]октил, 3-аза-бицикло[3.2.1]октил и 2,6-диокса-трицикло[3.3.1.0^3,7]нонил. Моноциклическая гетероциклоалкильная группа может быть конденсирована с фенильным фрагментом с образованием структур, таких как тетрагидроизохинолин, которые можно характеризовать как гетероарилы.

[0054] Термин "гетероциклоалкенильная" группа, в том смысле, как здесь использован, относится к моно- или бициклической (например, 5-10-членной моно- или бициклической) неароматической кольцевой структуре, содержащей одну или более двойных связей, и в которой один или более кольцевых атомов представляет собой гетероатом (например, N, O или S). Нумерацию атомов в моноциклических и бициклических гетероциклоалифатических структурах осуществляют в соответствии со стандартной химической номенклатурой.

[0055] Гетероциклоалкильная или гетероциклоалкенильная группа может быть необязательно замещена одним или более заместителями, такими как фосфор, алифатический [например, алкил, алкенил или алкинил], циклоалифатический, (циклоалифатический)алифатический, гетероциклоалифатический, (гетероциклоалифатический)алифатический, арил, гетероарил, алкокси, (циклоалифатический)окси, (гетероциклоалифатический)окси, арилокси, гетероарилокси, (аралифатический)окси, (гетероаралифатический)окси, ароил, гетероароил, амино, амидо [например, (алифатический)карбониламино, (циклоалифатический)карбониламино, ((циклоалифатический)алифатический)карбониламино, (арил)карбониламино, (аралифатический)карбониламино, (гетероциклоалифатический)карбониламино, ((гетероциклоалифатический)алифатический)карбониламино, (гетероарил)карбониламино или (гетероаралифатический)карбониламино], нитро, карбокси [например, HOOC-, алкоксикарбонил или алкилкарбонилокси], ацил [например, (циклоалифатический)карбонил, ((циклоалифатический)алифатический)карбонил, (аралифатический)карбонил, (гетероциклоалифатический)карбонил, ((гетероциклоалифатический)алифатический)карбонил или (гетероаралифатический)карбонил], нитро, циано, галоген, гидрокси, меркапто, сульфонил [например, алкилсульфонил или арилсульфонил], сульфинил [например, алкилсульфинил], сульфанил [например, алкилсульфанил], сульфокси, мочевина, тиомочевина, сульфамоил, сульфамид, оксо или карбамоил.

[0056] Термин "гетероарильная" группа, в том смысле, как здесь использован, относится к моноциклической, бициклической или трициклической кольцевой системе, содержащей 4-15 кольцевых атомов, в которой один или более из кольцевых атомов представляет собой гетероатом (например, N, O, S или их комбинации), и в которой моноциклическая кольцевая система является ароматической, или по меньшей мере одно из колец в бициклической или трициклической кольцевой системе является ароматическим. Гетероарильные группы включают бензоконденсированную кольцевую систему, содержащую 2-3 кольца. Например, бензоконденсированная группа включает бензол, конденсированный с одним или двумя 4-8-членными гетероциклоалифатическими фрагментами (например, индолизил, индолил, изоиндолил, 3H-индолил, индолинил, бензо[b]фурил, бензо[b]тиофенил, хинолинил или изохинолинил). Некоторыми примерами гетероарилов являются азетидинил, пиридил, 1H-индазолил, фурил, пирролил, тиенил, тиазолил, оксазолил, имидазолил, тетразолил, бензофурил, изохинолинил, бензтиазолил, ксантен, тиоксантен, фенотиазин, дигидроиндол, бензо[1,3]диоксол, бензо[b]фурил, бензо[b]тиофенил, индазолил, бензимидазолил, бензтиазолил, пурил, циннолил, хинолил, хиназолил, циннолил, фталазил, хиназолил, хиноксалил, изохинолил, 4H-хинолизил, бензо-1,2,5-тиадиазолил или 1,8-нафтиридил.

[0057] Без ограничений, моноциклические гетероарилы включают фурил, тиофенил, 2H-пирролил, пирролил, оксазолил, тиазолил, имидазолил, пиразолил, изоксазолил, изотиазолил, 1,3,4-тиадиазолил, 2H-пиранил, 4-H-пиранил, пиридил, пиридазил, пиримидил, пиразолил, пиразил или 1,3,5-триазил. Нумерацию атомов в моноциклических гетероарилах осуществляют в соответствии со стандартной химической номенклатурой.

[0058] Без ограничений, бициклические гетероарилы включают индолизил, индолил, изоиндолил, 3H-индолил, индолинил, бензо[b]фурил, бензо[b]тиофенил, хинолинил, изохинолинил, индолизинил, изоиндолил, индолил, бензо[b]фурил, бензо[b]тиофенил, индазолил, бензимидазил, бензтиазолил, пуринил, 4H-хинолизил, хинолил, изохинолил, циннолил, фталазил, хиназолил, хиноксалил, 1,8-нафтиридил или птеридил. Нумерацию атомов в бициклических гетероарилах осуществляют в соответствии со стандартной химической номенклатурой.

[0059] Гетероарил необязательно может быть замещен одним или более заместителями, такими как алифатический [например, алкил, алкенил или алкинил]; циклоалифатический; (циклоалифатический)алифатический; гетероциклоалифатический; (гетероциклоалифатический)алифатический; арил; гетероарил; алкокси; (циклоалифатический)окси; (гетероциклоалифатический)окси; арилокси; гетероарилокси; (аралифатический)окси; (гетероаралифатический)окси; ароил; гетероароил; амино; оксо (в неароматических карбоциклических или гетероциклических кольцах бициклического или трициклического гетероарила); карбокси; амидо; ацил [например, алифатический карбонил; (циклоалифатический)карбонил; ((циклоалифатический)алифатический)карбонил; (аралифатический)карбонил; (гетероциклоалифатический)карбонил; ((гетероциклоалифатический)алифатический)карбонил; или (гетероаралифатический)карбонил]; сульфонил [например, алифатический сульфонил или аминосульфонил]; сульфинил [например, алифатический сульфинил]; сульфанил [например, алифатический сульфанил]; нитро; циано; галоген; гидрокси; меркапто; сульфокси; мочевина; тиомочевина; сульфамоил; сульфамид; или карбамоил. Альтернативно, гетероарил может быть незамещенным.

[0060] Неограничивающие примеры замещенных гетероарилов включают (галоген)гетероарил [например, моно- и ди-(галоген)гетероарил]; (карбокси)гетероарил [например, (алкоксикарбонил)гетероарил]; цианогетероарил; аминогетероарил [например, ((алкилсульфонил)амино)гетероарил и ((диалкил)амино)гетероарил]; (амидо)гетероарил [например, аминокарбонилгетероарил, ((алкилкарбонил)амино)гетероарил, ((((алкил)амино)алкил)аминокарбонил)гетероарил, (((гетероарил)амино)карбонил)гетероарил, ((гетероциклоалифатический)карбонил)гетероарил и ((алкилкарбонил)амино)гетероарил]; (цианоалкил)гетероарил; (алкокси)гетероарил; (сульфамоил)гетероарил [например, (аминосульфонил)гетероарил]; (сульфонил)гетероарил [например, (алкилсульфонил)гетероарил]; (гидроксиалкил)гетероарил; (алкоксиалкил)гетероарил; (гидрокси)гетероарил; ((карбокси)алкил)гетероарил; (((диалкил)амино)алкил]гетероарил; (гетероциклоалифатический)гетероарил; (циклоалифатический)гетероарил; (нитроалкил)гетероарил; (((алкилсульфонил)амино)алкил)гетероарил; ((алкилсульфонил)алкил)гетероарил; (цианоалкил)гетероарил; (ацил)гетероарил [например, (алкилкарбонил)гетероарил]; (алкил)гетероарил и (галогеналкил)гетероарил [например, тригалогеналкилгетероарил].

[0061] Термин "гетероаралифатический" (такой как гетероаралкильная группа) в том смысле, как здесь использован, относится к алифатической группе (например, C_1-4 алкильная группа), которая замещена гетероарильной группой. Термины "алифатический", "алкил" и "гетероарил" определены выше.

[0062] Термин "гетероаралкильная" группа, в том смысле, как здесь использован, относится к алкильной группе (например, C_1-4 алкильная группа), которая замещена гетероарильной группой. Как "алкил", так и "гетероарил" определены выше. Гетероаралкил необязательно замещен одним или более заместителями, такими как алкил (включая карбоксиалкил, гидроксиалкил и галогеналкил, такой как трифторметил), алкенил, алкинил, циклоалкил, (циклоалкил)алкил, гетероциклоалкил, (гетероциклоалкил)алкил, арил, гетероарил, алкокси, циклоалкилокси, гетероциклоалкилокси, арилокси, гетероарилокси, аралкилокси, гетероаралкилокси, ароил, гетероароил, нитро, карбокси, алкоксикарбонил, алкилкарбонилокси, аминокарбонил, алкилкарбониламино, циклоалкилкарбониламино, (циклоалкилалкил)карбониламино, арилкарбониламино, аралкилкарбониламино, (гетероциклоалкил)карбониламино, (гетероциклоалкилалкил)карбониламино, гетероарилкарбониламино, гетероаралкилкарбониламино, циано, галоген, гидрокси, ацил, меркапто, алкилсульфанил, сульфокси, мочевина, тиомочевина, сульфамоил, сульфамид, оксо или карбамоил.

[0063] В том смысле, как здесь использован, термины "циклический фрагмент" и "циклическая группа" относятся к моно-, би- и трициклическим кольцевым системам, включая циклоалифатическую, гетероциклоалифатическую, арил или гетероарил, каждый из которых определен раньше.

[0064] В том смысле, как здесь использован, термин "мостиковая бициклическая кольцевая система" относится к бициклической гетероциклической алифатической кольцевой системе или бициклической циклоалифатической кольцевой системе, в которой кольца соединены мостиком. Примеры мостиковых бициклических кольцевых систем включают, но ими не ограничиваются, адамантанил, норборнанил, бицикло[3.2.1]октил, бицикло[2.2.2]октил, бицикло[3.3.1]нонил, бицикло[3.2.3]нонил, 2-оксабицикло[2.2.2]октил, 1-азабицикло[2.2.2]октил, 3-азабицикло[3.2.1]октил и 2,6-диокса-трицикло[3.3.1.0^3,7]нонил. Мостиковая бициклическая кольцевая система может быть необязательно замещена одним или более заместителями, такими как алкил (включая карбоксиалкил, гидроксиалкил и галогеналкил, такой как трифторметил), алкенил, алкинил, циклоалкил, (циклоалкил)алкил, гетероциклоалкил, (гетероциклоалкил)алкил, арил, гетероарил, алкокси, циклоалкилокси, гетероциклоалкилокси, арилокси, гетероарилокси, аралкилокси, гетероаралкилокси, ароил, гетероароил, нитро, карбокси, алкоксикарбонил, алкилкарбонилокси, аминокарбонил, алкилкарбониламино, циклоалкилкарбониламино, (циклоалкилалкил)карбониламино, арилкарбониламино, аралкилкарбониламино, (гетероциклоалкил)карбониламино, (гетероциклоалкилалкил)карбониламино, гетероарилкарбониламино, гетероаралкилкарбониламино, циано, галоген, гидрокси, ацил, меркапто, алкилсульфанил, сульфокси, мочевина, тиомочевина, сульфамоил, сульфамид, оксо или карбамоил.

[0065] В том смысле, как здесь использован, термин "ацильная" группа относится к группе формила или R^X-C(O)- (такой как алкил-C(O)-, именуемой также как "алкилкарбонил"), где R^X и "алкил" определены ранее. Примерами ацильных групп являются ацетил и пивалоил.

[0066] В том смысле, как здесь использованы, термины "ароил" или "гетероароил" относятся к группам арил-C(O)- или гетероарил-C(O)-. Арильная и гетероарильная части ароила или гетероароила могут быть необязательно замещены, как определено ранее.

[0067] В том смысле, как здесь использован, термин "алкокси" группа относится к алкил-O- группе, где "алкил" определен ранее.

[0068] В том смысле, как здесь использован, термин "карбамоильная" группа относится к группе, имеющей структуру -O-CO-NR^XR^Y или -NR^X-CO-O-R^Z, где R^X и R^Y определены выше, и R^Z может быть алифатическим, арилом, аралифатическим, гетероциклоалифатическим, гетероарилом или гетероаралифатическим.

[0069] В том смысле, как здесь использован, термин "карбокси" группа относится к -COOH, -COOR^X, -OC(O)H, -OC(O)R^X, если это концевая группа; или -OC(O)- или -C(O)O-. если это группа внутри структуры.

[0070] В том смысле, как здесь использован, термин "галогеналифатическая" группа относится к алифатической группе, замещенной 1-3 галогенами. Например, термин "галогеналкил" включает группу -CF₃.

[0071] В том смысле, как здесь использован, термин "меркапто" группа относится к -SH.

[0072] В том смысле, как здесь использован, термин "сульфо" группа относится к -SO₃H или -SO₃R, если это концевая группа, или к -S(O)₃- если группа находится внутри структуры.

[0073] В том смысле, как здесь использован, термин "сульфамидная" группа относится к структуре -NR^X-S(O)₂-NR^YR^Z, если это концевая группа, и к -NR^X-S(O)₂-NR^Y-, если эта группа находится внутри структуры, где R^X, R^Y и R^Z определены выше.

[0074] В том смысле, как здесь использован, термин "сульфонамидная" группа относится к структуре -S(O)₂-NR^XR^Y или -NR^X-S(O)₂-R^Z, если это концевая группа; или к -S(O)₂-NR^X- или -NR^X-S(O)₂-, если эта группа находится внутри структуры, где R^X, R^Y и R^Z определены выше.

[0075] В том смысле, как здесь использован, термин "сульфанильная" группа относится к -S-R^X, если это концевая группа, и -S-, если эта группа находится внутри структуры, где R^X имеет определенные выше значения. Примеры сульфанилов включают алифатический-S-, циклоалифатический-S-, арил-S- или т.п.

[0076] В том смысле, как здесь использован, термин "сульфинильная" группа относится к -S(O)-R^X, если это концевая группа, и к -S(O)-, если эта группа находится внутри структуры, где R^X имеет определенные выше значения. Примеры сульфинильных групп включают алифатический-S(O)-, арил-S(O)-, (циклоалифатический(алифатический))-S(O)-, циклоалкил-S(O)-, гетероциклоалифатический-S(O)-, гетероарил-S(O)- или т.п.

[0077] В том смысле, как здесь использован, термин "сульфонильная" группа относится к -S(O)₂-R^X, если это концевая группа, и к -S(O)₂-, если эта группа находится внутри структуры, где R^X имеет определенные выше значения. Примеры сульфонильных групп включают алифатический-S(O₂)-, арил-S(O)₂-, (циклоалифатический(алифатический))-S(O)₂-, циклоалифатический-S(O)₂-, гетероциклоалифатический-S(O)₂-, гетероарил-S(O)₂-, (циклоалифатический(амидо(алифатический)))-S(O)₂- или т.п.

[0078] В том смысле, как здесь использован, термин "сульфокси" группа относится к -O-SO-R^X или -SO-O-R^X, если это концевая группа, и к -O-S(O)- или -S(O)-O-, если эта группа находится внутри структуры, где R^X имеет определенные выше значения.

[0079] В том смысле, как здесь использован, термин "галоген" или "гало" группа относится к фтору, хлору, брому или йоду.

[0080] В том смысле, как здесь использован, термин "алкоксикарбонил", который включен в термин карбокси, если использован отдельно или в связи с другой группой, относится к группе, такой как алкил-O-C(O)-.

[0081] В том смысле, как здесь использован, термин "алкоксиалкил" относится к алкильной группе, такой как алкил-O-алкил-, где алкил имеет определенные выше значения.

[0082] В том смысле, как здесь использован, термин "карбонил" относится к -C(O)-.

[0083] В том смысле, как здесь использован, тремин "оксо" относится к =O.

[0084] В том смысле, как здесь использован, термин "фосфо" относится к фосфинатам и фосфонатам. Примеры фосфинатов и фосфонатов включают -P(O)(R^P)₂, где R^P представляет собой алифатический, алкокси, арилокси, гетероарилокси, (циклоалифатический)окси, (гетероциклоалифатический)оксиарил, гетероарил, циклоалифатический или амино.

[0085] В том смысле, как здесь использован, термин "аминоалкил" относится к структуре (R^X)₂N-алкил-.

[0086] В том смысле, как здесь использован, термин "цианоалкил" относится к структуре (NC)-алкил-.

[0087] В том смысле, как здесь использован, термин группа "мочевины" относится к структуре -NR^X-CO-NR^YR^Z, и группа "тиомочевины" относится к структуре -NR^X-CS-NR^YR^Z, если это концевая группа, и к -NR^X-CO-NR^Y- или -NR^X-CS-NR^Y-, если эта группа находится внутри структуры, где R^X, R^Y и R^Z определены выше.

[0088] В том смысле, как здесь использован, термин группа "гуанидина" относится к структуре -N=C(N(R^XR^Y))N(R^XR^Y) или -NR^X-C(=NR^X)NR^XR^Y, где R^X и R^Y определены выше.

[0089] В том смысле, как здесь использован, термин "амидиногруппа" относится к структуре -C=(NR^X)N(R^XR^Y), где R^X и R^Y определены выше.

[0090] Обычно термин "вицинальный" относится к расположению заместителей на группе, которая включает два или более атомов углерода, где заместители присоединены к соседним атомам углерода.

[0091] Обычно термин "геминальный" относится к расположению заместителей на группе, которая включает два или более атомов углерода, где заместители присоединены к одному и тому же атому углерода.

[0092] Термины "концевой" и "внутренний" относятся к положению группы внутри заместителя. Группа является концевой, когда она находится на конце заместителя и далее не связана с остальной частью химической структуры. Карбоксиалкил, т.е., R^XO(O)C-алкил является примером концевой карбоксигруппы. Группа является внутренней, если она находится в середине заместителя химической структуры. Алкилкарбокси (например, алкил-C(O)O- или алкил-OC(O)-) и алкилкарбоксиарил (например, алкил-C(O)O-арил- или алкил-O(CO)-арил-) являются примерами внутренних карбоксигрупп.

[0093] В том смысле, как здесь использован, термин "алифатическая цепь" относится к разветвленным или неразветвленным алифатическим группам (например, алкильным группам, алкенильным группам или алкинильным группам). Неразветвленная алифатическая цепь имеет структуру -[CH₂]_v-, где v представляет собой 1-12. Разветвленная алифатическая цепь представляет собой неразветвленную алифатическую цепь, которая замещена одной или более алифатическими группами. Разветвленная алифатическая цепь имеет структуру -[CQQ]_v-, где каждый Q независимо представляет собой водород или алифатическую группу; однако, Q должен быть алифатической группой в по меньшей мере одном случае. Термин алифатическая цепь включает алкильные цепи, алкенильные цепи и алкинильные цепи, где алкил, алкенил и алкинил определены выше.

[0094] Выражение "необязательно замещенный" используют взаимозаменяемо с выражением "замещенный или незамещенный". Как указано в описании, соединения настоящего изобретения могут быть необязательно замещены одним или более заместителями, такими как в общем проиллюстрированы выше, или такими, которые представлены конкретными классами, подклассами и типами в соответствии с настоящим изобретением. Как раскрыто в описании, переменные R₁, R₂ и R₃, и другие переменные, содержащиеся в раскрытых в описании формулах, охватывают конкретные группы, такие как алкил. Если не указано иное, каждая из конкретных групп для переменных R₁, R₂ и R₃, и других переменных, встречающихся в описании, может быть необязательно замещена одним или более заместителями, раскрытыми в описании. Каждый заместитель конкретной группы может быть далее замещен одним-тремя галогеном, циано, оксо, алкокси, гидрокси, амино, нитро, арилом, циклоалифатическим, гетероциклоалифатическим, гетероарилом, галогеналкилом и алкилом. Так, например, алкильная группа может быть замещена алкилсульфанилом, и алкилсульфанил может быть необязательно замещен одним-тремя галогеном, циано, оксо, алкокси, гидрокси, амино, нитро, арилами, галогеналкилом и алкилом. В качестве дополнительного примера, циклоалкильная часть (циклоалкил)карбониламино может быть необязательно замещена одним-тремя галогеном, циано, алкокси, гидрокси, нитро, галогеналкилом и алкилом. Если две алкоксигруппы связаны с одним и тем же атомом или соседними атомами, две алкоксигруппы могут образовывать кольцо вместе с атомом(-ами), с которыми они связаны.

[0095] Обычно, термин "замещенный," независимо от того, предшествует ли ему термин "необязательно" или нет, относится к замене водородного радикала в данной структуре радикалом конкретного заместителя. Конкретные заместители раскрыты выше в разделе "Определения", и ниже при описании соединений и их примеров. Если не указано иное, необязательно замещенная группа может иметь заместитель в каждом из замещаемых положений группы, и если более одного положения в любой конкретной структуре может быть замещено более чем одним заместителем, выбранным из определенной группы, заместители могут быть или одинаковыми или различными в каждом положении. Кольцевой заместитель, такой как гетероциклоалкил, может быть связан с другим кольцом, таким как циклоалкил, с образованием спиро-бициклической кольцевой системы, например, когда оба кольца имеют один общий атом. Как должно быть понятно специалистам в данной области, комбинации заместителей, представленных в настоящем изобретении, представляют собой такие комбинации, которые приводят к образованию стабильных или химически осуществимых соединений.

[0096] Выражение "стабильный или химически осуществимый," в том смысле, как здесь использовано, относится к соединениям, которые по существу не изменяются, когда попадают в условия, необходимые для их получения, детектирования и предпочтительно их выделения, очистки и использования для одной или более из раскрытых в описании целей. В некоторых вариантах стабильные соединения или химически реализуемые соединения представляют собой соединения, которые по существу не изменяются при хранении при температуре 40°С или меньше, в отсутствие влаги или других химически реакционных условий в течение по меньшей мере недели.

[0097] В том смысле, как здесь использован, термин "эффективное количество" определен как количество, необходимое для создания терапевтического эффекта у пациента, которого лечат, и обычно его определяют с учетом возраста, площади поверхности, массы и состояния пациента. Взаимосвязь дозировок для животных и людей (в расчете на миллиграмм на квадратный метр поверхности тела) раскрыта у Freireich et al., Cancer Chemother. Rep., 50: 219 (1966). Поверхность тела можно приблизительно определить исходя из роста и массы пациента. См., например, Scientific Tables, Geigy Pharmaceuticals, Ardsley, New York, 537 (1970). В том смысле, как здесь использован, термин "пациент" относится к млекопитающим, включая человека.

[0098] Если не указано иное, подразумевается, что изображенные в описании структуры также включают все изомерные (например, энантиомерные, диастереоизомерные и геометрические (или конформационные)) формы структуры; например, R и S конфигурации для каждого асимметрического центра, (Z) и (E) изомеры двойных связей, и (Z) и (E) конформационные изомеры. Поэтому, отдельные стереохимические изомеры, а также смеси энантиомерных, диастереоизомерных и геометрических (конформационных) форм соединений настоящего изобретения включены в объем настоящего изобретения. Если не указано иное, все таутомерные формы соединений настоящего изобретения включены в объем настоящего изобретения. Кроме того, если не указано иное, подразумевают, что изображенные в описании структуры включают соединения, которые отличаются только присутствием одного или более из изотопически обогащенных атомов. Например, соединения, имеющие представленные структуры, за исключением замены водорода на дейтерий или тритий, или замены углерода¹²С-на¹³C- или¹⁴C-, включены в объем настоящего изобретения. Такие соединения можно использовать, например, в качестве аналитических инструментов или зондов в биологических анализах, или в качестве терапевтических агентов.

[0099] Соединения настоящего изобретения можно использовать в качестве модуляторов ABC-транспортеров и можно использовать при лечении заболеваний, опосредованных ABC-транспортерами.

[00100] В другом варианте осуществления настоящее изобретение характеризуется соединением формулы I, где два R, взятые вместе, образуют -OCF₂O-, R₁ представляет собой H, и R₂ представляет собой F. В другом варианте осуществления два R, взятые вместе, -OCF₂O-, R₁ представляет собой H, R₂ представляет собой F, и R₃ представляет собой CH₃. В другом варианте осуществления два R, взятые вместе, образуют -OCF₂O-, R₁ представляет собой H, R₂ представляет собой F, R₃ представляет собой CH₃, и X представляет собой CO₂H. В другом варианте осуществления два R, взятые вместе, образуют -OCF₂O-, R₁ представляет собой H, R₂ представляет собой F, R₃ представляет собой CH₃, X представляет собой CO₂H, и Y представляет собой OH.

[00101] В другом варианте осуществления настоящее изобретение характеризуется соединением формулы II, где два R, взятые вместе, образуют -OCF₂O-, R₁ представляет собой H, и R₂ представляет собой F. В другом варианте осуществления два R, взятые вместе, образуют -OCF₂O-, R₁ представляет собой H, R₂ представляет собой F, и R₃ представляет собой CH₃.

[00102] В другом варианте осуществления настоящее изобретение характеризуется соединением формулы Ia:

или его фармацевтически приемлемой солью, где:

R₂ представляет собой H или галоген.

[00103] В другом варианте осуществления R₂ представляет собой F.

[00104] В другом варианте осуществления настоящее изобретение характеризуется соединением формулы IIa:

или его фармацевтически приемлемой солью, где:

R₂ представляет собой H или галоген.

[00105] В другом варианте осуществления R₂ представляет собой F.

[00106] В другом варианте осуществления настоящее изобретение характеризуется соединением

[00107] В другом варианте осуществления настоящее изобретение характеризуется соединением

[00108] В другом аспекте настоящее изобретение характеризуется фармацевтической композицией, содержащей (i) соединение по любому одному из пп.1-12; и (ii) фармацевтически приемлемый носитель. В другом варианте осуществления композиция дополнительно содержит дополнительный агент, выбранный из муколитического агента, бронходилататора, антибиотика, противоинфекционного агента, противовоспалительного агента, CFTR корректора, CFTR потенциатора или пищевого агента.

[00109] В другом аспекте настоящее изобретение характеризуется способом увеличения количества функциональных ABC-транспортеров в мембране клетки, включающим стадию приведения клетки в контакт с соединением настоящего изобретения. В другом варианте осуществления ABC-транспортером является CFTR.

[00110] В другом аспекте настоящее изобретение характеризуется способом лечения состояния, заболевания или нарушения у субъекта, вызванного активностью ABC-транспортера, включающим стадию введения субъекту соединения или композиции настоящего изобретения.

[00111] В другом варианте осуществления состояние, заболевание или нарушение выбирают из муковисцидоза, эмфиземы, наследственного гемохроматоза, дефицита коагуляции-фибринолиза, дефицита C белка, наследственной ангиоэдемы типа 1, дефицита процессинга липидов, семейной гиперхолестеринемии, хиломикронемии типа 1, абеталипопротеинемии, болезни лизосомного накопления, болезни I-клеточных включений/псевдосиндрома Гурлера, мукополисахароидоза, болезни Сандхоффа/Тея-Сакса, болезни Криглера-Найяра типа II, полиэндокринопатии/гиперинсулемии, сахарного диабета, карликовости Ларона, миелопероксидазной недостаточности, первичного гипопаратироидизма, меланомы, гликаноза CDG типа 1, наследственного гипертироидоза, остеопсатироза, наследственной гипофибриногенемии, дефицита ACT, несахарного диабета (DI), нейрофизеального DI, нефрогенного DI, синдрома Чаркот-Мари-Туута, болезни Пелицеуса-Мерцбахера, нейродегенеративных заболеваний, болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, амиотрофического латерального склероза, синдрома прогрессирующего супрануклеарного паралича, болезни Пика, полиглутаминных неврологический нарушений, болезни Хантингтона, спиноцеребуллярной атаксии типа I, спинальной и бульбарной мышечной атрофии, дентаторубального паллидолуизиана, миотонической дистрофии, губчатой энцефалопатии, наследственной болезни Крейтцфельдта-Джекоба, болезни Фабри, синдрома Страусслера-Шейнкера, COPD, сухости глаз или болезни Сьогрена. В другом варианте осуществления состояние, заболевание, или нарушение выбирают из муковисцидоза, эмфиземы, COPD или болезни сухого глаза.

[00112] В другом аспекте настоящее изобретение характеризуется набором, используемым для измерения активности ABC-транспортеров или их фрагментов в биологическом образце in vitro или in vivo, включающим: (i) соединение настоящего изобретения; и (ii) инструкцию для: a) приведение соединения в контакт с биологическим образцом; и b) измерения активности указанных ABC-транспортеров или их фрагментов.

[00113] В другом варианте осуществления набор дополнительно включает инструкции для a) приведения дополнительного соединения в контакт с биологическим образцом, b) измерения активности указанных ABC-транспортеров или их фрагментов в присутствии указанного дополнительного соединения, и c) сравнения активности ABC-транспортеров в присутствии дополнительного соединения с плотностью ABC-транспортеров в присутствии первого соединения.

[00114] В другом аспекте настоящее изобретение включает способ получения соединения формулы Ia

где переменные раскрыты выше, включающий обработку соединения формулы I-2 основанием.

[00115] В одном варианте осуществления указанного аспекта, R₂ представляет собой H или F.

[00116] В другом варианте осуществления обработка включает приведения соединения формулы I-2 в контакт с основанием в присутствии растворителя. В одном варианте осуществления основание представляет собой щелочь или гидроксид или карбонат щелочного металла. В одном варианте осуществления основание выбирают из Na₂CO₃, NaHCO₃, NaOH и LiOH. Обычно используют стехиометрический избыток основания. Обычно используют от примерно 2 до примерно 10 эквивалентов основания на моль указанного соединения формулы I-2. Более обычно используют от примерно 4 до примерно 6 молярных эквивалентов основания.

[00117] В одном варианте осуществления растворитель представляет собой полярный растворитель, такой как спирт или эфир, который используют отдельно или в смеси с другой жидкостью. В одном варианте осуществления растворитель представляет собой метанол. В другом варианте осуществления растворитель представляет собой метанол в смеси с ацетонитрилом. В другом варианте осуществления растворитель представляет собой метанол в смеси с изопропанолом. Обычно используют от примерно 4 до примерно 8 объемов растворителя. Более обычно используют от примерно 5 до примерно 7 объемов растворителя.

[00118] Превращение указанного соединения формулы I-2 в соединение Ia обычно осуществляют при достаточной температуре в течение достаточного промежутка времени, чтобы обеспечить превращение исходного материала в продукт. Обычно используют приблизительно комнатную температуру.

[00119] В другом варианте осуществления способ получения соединения формулы Ia из соединения формулы I-2 включает приведение соединения формулы I-2 в контакт с основанием щелочного или щелочноземельного металла, которое представляет собой гидроксид или карбонат, в присутствии растворителя. В одном варианте осуществления основанием щелочного или щелочноземельного металла является Na₂CO₃, и растворитель представляет собой метанол.

[00120] В другом аспекте настоящее изобретение включает способ получения соединения формулы I-2 из соединения формулы I-3

включающий приведение соединения формулы I-3 в контакт с окислителем в присутствии растворителя до получения соединения формулы I-2; где переменные имеют раскрытые выше значения.

[00121] В одном варианте осуществления указанного аспекта, R₂ представляет собой H или F.

[00122] В одном варианте окислитель выбирают из группы, состоящей из KMnO₄ и NaMnO₄. В одном варианте осуществления окислитель представляет собой NaMnO₄. Обычно используют молярный избыток окислителя относительно молей соединения формулы I-3. Обычно используют от 1,01 до 1,2 молярных эквивалентов окислителя. Более обычно используют 1,05 эквивалента окислителя.

[00123] В одном варианте осуществления растворитель представляет собой полярный апротонный растворитель, который используют отдельно или в смеси с другой жидкостью. В одном варианте осуществления растворитель представляет собой ацетон. Обычно используют от примерно 5 до примерно 15 объемов растворителя. Более обычно используют от примерно 7 до примерно 13 объемов растворителя, и еще более обычно используют от примерно 9 до примерно 11 объемов растворителя.

[00124] Превращение соединения формулы I-3 в I-2 обычно осуществляют при достаточной температуре в течение достаточного промежутка времени, чтобы обеспечить превращение исходного материала в продукт. Обычно используют температуру ниже комнатной температуры. Например, температура составляет от приблизительно -10 до примерно 10°С. Более обычно температура составляет от приблизительно -5 до примерно 5°C.

[00125] В другом варианте осуществления способ получения соединения формулы I-2 из соединения формулы I-3 включает приведение соединения формулы I-3 в контакт с окислителем в присутствии растворителя. В одном варианте осуществления окислитель представляет собой NaMnO₄, и растворитель представляет собой ацетон.

[00126] В другом аспекте настоящее изобретение включает способ получения соединения формулы I-3 из соединения формулы I-4

включающий приведение соединения формулы I-4 в контакт с окислителем в присутствии растворителя до получения соединения формулы I-3; где значения переменных раскрыты выше.

[00127] В одном варианте осуществления указанного аспекта, R₂ представляет собой H или F.

[00128] В одном варианте осуществления окислитель выбирают из группы, состоящей из комплекса триоксид серы и пиридина, пиридиний дихромата (PDC), N-хлорсукцинимида (NCS)/бензолсульфенамида (PhSNHtBu) необязательно в присутствии 2-метил-2-бутена в качестве акцептора хлора, RuCl₃/NaIO₄, тетраметилпиперидина N-оксида (TEMPO)/бисацетоксииодобензола (BIAB)/NaHCO₃ и 2-иодоксибензойной кислоты (IBX). В одном варианте осуществления окислитель представляет собой N-хлорсукцинимид (NCS)/бензолсульфенамид (PhSNHtBu) в присутствии основания третичного амина и 2-метил-2-бутена в качестве акцептора хлора. Основания, третичные амины, которые можно использовать в рассматриваемом способе, хорошо известны практикующим специалистам в данной области, и включают, например, триэтиламин, диизопропилэтиламин, DBU, DBN и коллидин. В одном варианте осуществления основание, третичный амин, представляет собой коллидин. Обычно используют каталитическое количество PhSNHtBu, относительно количества молей соединения формулы I-4, и NCS, основание третичного амина, и 2-метил-2-бутен используют в молярном избытке. Например, используют от 0,1 до 0,3 молярных эквивалентов PhSNHtBu, относительно количества молей соединения формулы I-4, и от 1,1 до 1,5 эквивалентов NCS, 1-3 эквивалента основания третичного амина и 1-3 молярных эквивалента 2-метил-2-бутена. Более обычно, например, используют от 0,15 до 0,25 молярных эквивалентов PhSNHtBu, относительно количества молей соединения формулы 1-4, и используют от 1,1 до 1,3 эквивалентов NCS, 1,5-2,5 эквивалентов основания третичного амина и 1,5-2,5 молярных эквивалента 2-метил-2-бутена.

[00129] В одном варианте осуществления растворитель представляет собой полярный апротонный растворитель, который используют отдельно или в смеси с другой жидкостью. В одном варианте осуществления растворитель представляет собой дихлорметан. Обычно используют от примерно 5 до примерно 10 объемов растворителя. Более обычно используют от примерно 6 до примерно 8 объемов растворителя.

[00130] Превращение соединения формулы I-4 в I-3 обычно осуществляют при достаточной температуре в течение достаточного промежутка времени, чтобы обеспечить превращение исходного материала в продукт. Обычно используют температуру ниже комнатной температуры. Например, температура составляет от приблизительно -10 до примерно 10°С. Более обычно, температура составляет от приблизительно -5 до примерно 5°С.

[00131] В другом варианте осуществления способ получения соединения формулы I-3 из соединения формулы I-4 включает приведение соединения формулы I-3 в контакт с N-хлорсукцинимидом (NCS)/бензолсульфенамидом (PhSNHtBu) в присутствии основания, третичного амина и 2-метил-2-бутена в качестве акцептора хлора в присутствии растворителя. В одном варианте осуществления основанием служит третичный амин, и растворителем является дихлорметан.

[00132] В другом аспекте настоящее изобретение включает способ получения соединения формулы I-4 из соединения формулы I-5

включающий приведение соединения формулы I-4 в контакт с карбонилдиимидазолом (CDI) в присутствии растворителя до получения соединения формулы I-4; где значения переменных раскрыты выше.

[00133] В одном варианте осуществления указанного аспекта, R₂ представляет собой H или F.

[00134] В одном варианте осуществления используют молярный избыток CDI относительно молей соединения формулы I-5. Обычно используют от 1,1 до 3 молярных эквивалентов CDI. Более обычно используют от 1,5 до 2,5 молярных эквивалентов CDI.

[00135] В одном варианте осуществления растворитель представляет собой полярный растворитель, который используют отдельно или в смеси с другой жидкостью. В одном варианте осуществления растворитель представляет собой эфир или дихлорметан. В одном варианте осуществления растворитель представляет собой дихлорметан. Обычно используют от примерно 12 до примерно 16 объемов растворителя. Более обычно используют от примерно 13 до примерно 15 объемов растворителя.

[00136] Превращение соединения формулы I-5 в I-4 обычно осуществляют при достаточной температуре в течение достаточного промежутка времени, чтобы обеспечить превращение исходного материала в продукт. Обычно используют температуру ниже комнатной температуры. Например, температура составляет от приблизительно -20 до примерно 10°С. Более обычно температура составляет от приблизительно -15 до примерно 5°С.

[00137] В другом варианте осуществления способ получения соединения формулы I-4 из соединения формулы I-5 включает приведение соединения формулы I-5 в контакт с CDI в присутствии растворителя. В одном варианте осуществления растворитель представляет собой дихлорметан.

[00138] В другом аспекте в настоящем изобретении предложен способ получения соединения формулы Ia

включающий превращение сложного эфира формулы I-1 в соединение формулы Ia:

где независимо для каждого случая:

R₂ представляет собой H или галоген; и

R₄ представляет собой С₁-C₆ алкил или бензил.

[00139] В одном варианте осуществления указанного аспекта, R₂ представляет собой H или F, и R₄ представляет собой метил, этил, изопропил, бутил или бензил.

[00140] В другом варианте осуществления R₂ представляет собой H или F, и R₄ представляет собой изопропил или бензил.

[00141] В другом варианте осуществления превращение включает приведение соединения формулы I-1 в контакт с основанием в присутствии растворителя. В одном варианте осуществления основание представляет собой щелочь или гидроксид щелочного металла. В одном варианте осуществления основание представляет собой NaOH или LiOH.

[00142] В одном варианте осуществления растворитель представляет собой полярный растворитель, такой как спирт или эфир, который используют отдельно или в смеси с другой жидкостью. В одном варианте осуществления растворитель представляет собой метанол. В другом варианте осуществления растворитель представляет собой метанол в смеси с водой. В другом варианте осуществления растворитель представляет собой тетрагидрофуран. В другом варианте осуществления растворитель представляет собой тетрагидрофуран в смеси с водой.

[00143] Превращение соединения формулы I-1 в Ia обычно осуществляют при достаточной температуре в течение достаточного промежутка времени, чтобы обеспечить превращение исходного материала в продукт. Обычно используют температуру выше комнатной температуры. Более обычно температура составляет приблизительно 50°С. Обычно время реакций составляет от примерно 1 часа до примерно 24 часов.

[00144] В другом варианте осуществления способ получения соединения формулы Ia из соединения формулы I-1 включает приведение соединения формулы I-1 в контакт с гидроксидом щелочного или щелочноземельного металла в присутствии растворителя. В одном варианте осуществления гидроксид щелочного или щелочноземельного металла представляет собой LiOH или NaOH, и растворитель представляет собой метанол отдельно или в смеси с водой, или ТГФ отдельно или в смеси с водой.

[00145] В другом аспекте настоящее изобретение включает способ получения соединения формулы IIa:

или его фармацевтически приемлемой соли, где R₂ представляет собой H или галоген; включающий:

превращение соединения формулы I-3 в соединение формулы IIa.

[00146] В одном варианте осуществления указанного аспекта R₂ представляет собой H или F.

[00147] В одном варианте осуществления обработка включает приведение соединения формулы I-3 в контакт с основанием в присутствии растворителя. В одном варианте осуществления основание представляет собой щелочь или гидроксид или карбонат щелочного металла. В одном варианте осуществления основание выбирают из NaOH, KOH и LiOH. В одном варианте осуществления основание представляет собой NaOH. Обычно используют стехиометрический избыток основания. Обычно используют от примерно 2 до примерно 10 эквивалентов основания относительно молей соединения формулы I-3. Более обычно используют от примерно 4 до примерно 6 молярных эквивалентов основания. Обычно основание используют в виде раствора в воде.

[00148] В одном варианте осуществления растворитель представляет собой полярный растворитель, такой как спирт или эфир, который используют отдельно или в смеси с другой жидкостью. В одном варианте осуществления растворитель представляет собой метанол. В другом варианте осуществления растворитель представляет собой метанол в смеси с ацетонитрилом. В другом варианте осуществления растворитель представляет собой метанол в смеси с изопропанолом. Обычно используют от примерно 4 до примерно 8 объемов растворителя. Более обычно используют от примерно 5 до примерно 7 объемов растворителя.

[00149] Превращение соединения формулы I-2 в Ia обычно осуществляют при достаточной температуре и в течение достаточного промежутка времени, чтобы обеспечить превращение исходного материала в продукт. Обычно температура соответствует приблизительно комнатной температуре.

[00150] В другом варианте осуществления способ получения соединения формулы Ia из соединения формулы I-2 включает приведение соединения формулы I-2 в контакт с основанием щелочного или щелочноземельного металла, которое представляет собой гидроксид или карбонат, в присутствии растворителя. В одном варианте осуществления основание щелочного или щелочноземельного металла представляет собой Na₂CO₃, и растворитель представляет собой метанол.

[00151] В другом аспекте настоящее изобретение включает способ получения соединения формулы Ia

где значения переменных раскрыты выше, включающий:

(a) приведение соединения формулы I-3 в контакт с окислителем в присутствии растворителя, как представлено выше, с получением соединения формулы I-2;

и

(b) приведение соединения формулы I-1 в контакт с основанием в присутствии растворителя, как представлено выше, с получением соединения формулы Ia.

[00152] В одном варианте осуществления указанного аспекта, R₂ представляет собой H или F.

[00153] В другом аспекте настоящее изобретение включает способ получения соединения формулы Ia

где значения переменных раскрыты выше, включающий:

(a) приведение соединения формулы I-4 в контакт с окислителем в присутствии растворителя, как представлено выше, с получением соединения формулы I-3

(b) приведение соединения формулы I-3 в контакт с окислителем в присутствии растворителя, как представлено выше, с получением соединения формулы I-2;

и

(c) приведение соединения формулы I-2 в контакт с основанием в присутствии растворителя, как представлено выше, с получением соединения формулы Ia.

[00154] В одном варианте осуществления указанного аспекта, R₂ представляет собой H или F.

[00155] В другом аспекте настоящее изобретение включает способ получения соединения формулы Ia

где значения переменных раскрыты выше, включающий:

(a) приведение соединения формулы I-5 в контакт с карбонилдиимидазолом (CDI) в присутствии растворителя, как представлено выше, с получением соединения формулы I-4

(b) приведение соединения формулы I-4 в контакт с окислителем в присутствии растворителя, как представлено выше, с получением соединения формулы I-3

(c) приведение соединения формулы I-3 в контакт с окислителем в присутствии растворителя, как представлено выше, с получением соединения формулы I-2;

и

(d) приведение соединения формулы I-2 в контакт с основанием в присутствии растворителя, как представлено выше, с получением соединения формулы Ia.

[00156] В одном варианте осуществления указанного аспекта, R₂ представляет собой H или F.

[00157] В другом аспекте настоящее изобретение включает способ получения соединения формулы IIa

где значения переменных раскрыты выше, включающий:

(a) привеление соединения формулы I-4 в контакт с окислителем в присутствии растворителя, как представлено выше, с получением соединения формулы I-3

и

(b) приведение соединения формулы I-3 в контакт с основанием в присутствии растворителя, как представлено выше, с получением соединения формулы IIa

[00158] В одном варианте осуществления указанного аспекта, R₂ представляет собой H или F.

[00159] В другом аспекте настоящее изобретение включает способ получения соединения формулы IIa

где значения переменных раскрыты выше, включающий:

(a) приведение соединения формулы I-5 в контакт с карбонилдиимидазолом (CDI) в присутствии растворителя, как представлено выше, с получением соединения формулы I-4;

(b) приведение соединения формулы I-4 в контакт с окислителем в присутствии растворителя, как представлено выше, с получением соединения формулы I-3

и

(c) приведение соединения формулы I-3 в контакт с основанием в присутствии растворителя, как представлено выше, с получением соединения формулы IIa

[00160] В одном варианте осуществления указанного аспекта, R₂ представляет собой H или F.

[00161] В другом аспекте настоящее изобретение включает соединения, которые представляют собой:

где R₂ и R₄ имеют указанные выше значения.

[00162] В другом аспекте настоящее изобретение включает соединения, которые представляют собой:

где R₂ и R₄ имеют указанные выше значения.

[00163] В другом аспекте настоящее изобретение включает соединения, которые представляют собой:

где R₄ представляет собой iPr или бензил.

[00164] В другом аспекте настоящее изобретение включает соединения, которые представляют собой:

где R₄ представляет собой iPr или бензил.

Общая схема синтеза соединений формулы I и формулы II

[00165] Соединения формулы I могут быть получены, осуществляя реакцию сочетания фрагмента хлорангидрида с фрагментом амина с последующим замыканием кольца в соответствии со схемами 1-5.

Схема 1: Синтез фрагмента хлорангидрида

R = H, OH, OCH₃, или 2 R, взятые вместе, образуют -OCH₂O- или -OCF₂O-; R₁ = H или вплоть до двух R₁ = C₁-C₆ алкил.

[00166] Схема 1 изображает получение R и R₁ замещенного бензо-циклопропанкарбонилхлорида, который используют на Схеме 3 для создания амидной связи в соединениях формулы I.

Схема 2: Альтернативный синтез фрагмента хлорангидрида

R = H, OH, OCH₃, или 2 R, взятые вместе, образуют -OCH₂O- или -OCF₂O-; R₁ = H или вплоть до двух R₁ = C₁-C₆ алкил.

[00167] На схеме 2 представлен альтернативный синтез нужного хлорангидрида. R-замещенный 5-бромбензол сочетают с этилцианоацетатом в присутствии палладиевого катализатора с образованием соответствующего альфа-цианоэтилового сложного эфира. Омыление сложноэфирного фрагмента до карбоновой кислоты дает соединение цианоэтила. Алкилирование соединения цианоэтила R₁-замещенным 1-бром-2-хлорэтаном в присутствии основания дает соединение цианоциклопропила. Обработка соединения цианоциклопропила основанием дает карбоксилатную соль, которую превращают в карбоновую кислоту путем обработки кислотой. Затем осуществляют превращение карбоновой кислоты в хлорангидрид, используя хлорирующий агент, такой как тионилхлорид или т.п.

Схема 3: Синтез аминного фрагмента

R₂ = H или галоген; R₃ = H или C₁-C₆ алкил.

[00168] На схеме 3 представлена общая схема синтеза аминного фрагмента соединений формулы I по протоколу циклизации Сонагашира. Превращение силил-защищенного пропаргилового спирта в пропаргилхлорид с последующим образованием реагента Гриньяра и последующим нуклеофильным замещением приводит к получению ((R₃-замещенного-бут-3-инилокси)метил)бензола, который используют на другой стадии синтеза. Для завершения получения аминного фрагмента, 4-нитро-3-R₂-анилин вначале бромируют, и затем превращают в соль толуолсульфоновой кислоты (R)-1-(4-амино-2-бром-5-R₂-замещенный-фениламино)-3-(бензилокси)пропан-2-ола в двухстадийном процессе, начиная с алкилирования анилинаминогруппы (R)-2-(бензилоксиметил)оксираном, с последующим восстановлением нитрогруппы до соответствующего амина. Использование палладиевого катализатора в реакции сочетания продукта с ((R₃-замещенный-бут-3-инилокси)метил)бензолом (обсуждалось выше) приводит к получению промежуточного алкинильного соединения, которое затем циклизуют до индольного фрагмента, получая бензил-защищенный аминный фрагмент.

Схема 4: Сочетание хлорангидрида и аминного фрагмента

R = H, OH, OCH₃, или 2 R, взятые вместе, образуют -OCH₂O- или -OCF₂O-; R₁ = H или вплоть до двух R₁ = C₁-C₆ алкил; R₂ = H или галоген; R₃ = H или С₁-C₆ алкил.

[00169] На схеме 4 представлено сочетание кислотного и аминного фрагментов. На первой стадии (R)-1-(5-амино-2-(1-(бензилокси)-2-метилпропан-2-ил)-6-R₂-1H-индол-1-ил)-3-(бензилокси)пропан-2-ол сочетают с 1-(R-замещенный-5-ил)циклопропанкарбонилхлоридом с получением бензил-защищенных предшественников соединений формулы I. Указанную стадию можно осуществить в присутствии основания и растворителя. Основанием может быть органическое основание, такое как триэтиламин, и растворителем может быть органический растворитель, такой как DCM или смесь DCM и толуола.

[00170] На последней стадии у бензилированного промежуточного соединения удаляют защитные группы, получая предшественники соединений формулы I. Стадию удаления защитных групп можно осуществить, используя условия восстановления, достаточные для удаления бензильных групп. Условиями восстановления могут быть условия гидрирования, такие как газообразный водород в присутствии палладиевого катализатора с получением спирта. Полученное вещество можно превратить непосредственно в соединение формулы I путем микробного окисления.

Схема 5: Замыкание кольца с получением соединения формулы II

R = H, OH, OCH₃, или 2 R, взятые вместе, образуют -OCH₂O- или -OCF₂O-; R₁ = H или вплоть до двух R₁ = C₁-C₆ алкил; R₂ = H или галоген; R₃ = H или С₁-C₆ алкил.

[00171] На схеме 5 представлено получение соединения формулы II. Продукт, изображенный на схеме 4, окисляют, используя пиридинийдихромат в дихлорметане, с получением соединения формулы II.

Схема 6: Окисление и гидролиз с получением соединения формулы I

R = H, OH, OCH₃, или 2 R, взятые вместе, образуют -OCH₂O- или -OCF₂O-; R₁ = H или вплоть до двух R₁ = C₁-C₆ алкил; R₂ = H или галоген; R₃ = H или C₁-C₆ алкил; X = CO₂J, где J = H или C₁-С₆ алкил.

[00172] На схеме 6 представлено получение соединения формулы I из соединения формулы II. Окисление соединения формулы II, изображенного на схеме 5, карбонатом серебра в присутствии целита вначале дает циклический лактон, который гидролизуют в присутствии 2 N гидроксида натрия с получением соединения формулы I.

Схема 7: Альтернативный способ получения соединения формулы I:

[00173] На схеме 7 представлен альтернативный процесс получения соединения формулы I. Продукт схемы 5 обрабатывают карбонилдиимидазолом в дихлорметане с последующей обработкой кислотой с получением карбонатного эфира. Последующие стадии включают окисление первичного спирта до альдегида и затем в карбоновую кислоту с последующим удалением защитных групп с получением соединения формулы I. Условия окисления для превращения спирта в альдегид включают окисление Парик-Доеринга фрагмента первичного спирта, используя комплекс триоксида серы и пиридина, с получением соответствующего альдегида. Агенты альтернативного окисления для превращения первичного спирта в альдегид включают пиридинийдихромат (PDC), N-хлорсукцинимид (NCS)/бензолсульфенамид (PhSNHtBu) необязательно в присутствии 2-метил-2-бутена в качестве акцептора хлора, RuCl₃/NaIO₄, тетраметилпиперидин N-оксид (TEMPO)/бисацетоксииодобензол (BIAB)/NaHCO₃, или 2-иодоксибензойную кислоту (IBX). Условия окисления для превращения альдегида в карбоновую кислоту включают перманганат натрия или калия. В результате опосредованного карбонатом натрия удаления защитных групп в метаноле получают соединение формулы I.

Схема 8: Окисление до карбоновой кислоты в одном реакторе

[00174] Альтернативно, синтез карбоновой кислоты в одном реакторе можно осуществить, используя тетрапропиламмонийперрутенат (TPAP)/N-метилморфолин N-оксид (NMO) моногидрат, как изображено на схеме 8. Другие окислители, которые можно использовать для указанной трансформации, включают оксон/TPAP/NMO/TBAB и KMnO₄.

Схема 9: Гидролиз с получением соединения формулы I

[00175] У защищенной карбоновой кислоты можно удалить защитные группы, используя основание с получением соединения формулы I, как изображено на схеме 9. Основания, которые можно использовать для указанной трансформации, включают NaOH, Na₂CO₃, NaHCO₃ или Na₂CO₃/NaHCO₃.

Схема 10: Альтернативный синтез соединения формулы I

[00176] На схеме 10 представлен альтернативный процесс получения соединения формулы I по способу циклизации Сонагашира, аналогично способам, раскрытым на схемах 3 и 4. Из силил-защищенного пропаргилового спирта в результате превращения в пропаргилхлорид с последующим образованием реагента Гриньяра и последующим нуклеофильным замещением получают ((R₃-замещенный изопропиловый сложный эфир, который используют на другой стадии синтеза. Для завершения аминного фрагмента 4-нитро-3-R₂-анилин вначале бромируют и затем превращают в соль толуолсульфоновой кислоты (R)-1-(4-амино-2-бром-5-R₂-замещенный-фениламино)-3-(бензилокси)пропан-2-ола в двухстадийном процессе, начиная с алкилирования анилинаминогруппы (R)-2-(бензилоксиметил)оксираном, с последующим восстановлением нитрогруппы до соответствующего амина. Используя палладиевый катализатор, осуществляют реакцию сочетания продукта с R₃-замещенным изопропиловым сложным эфиром (обсуждалось выше), что приводит к получению промежуточного алкинильного соединения, которое затем циклизуют до индольного фрагмента, получая бензил-защищенный аминный фрагмент. Тот же самый процесс можно использовать, исходя из силил-пропаргилового спирта с получением бензилового эфира. Последующее сочетание с 1-(R-замещенным-5-ил)циклопропанкарбонилхлоридом в соответствии со схемой 4 приводит к получению изопропилового эфира соединения формулы I.

Схема 11: Гидролиз изопропилового эфира

[00177] Гидролиз изопропилового эфира со схемы 11 приводит к получению соединения формулы Ia. Основания, которые можно использовать для указанной трансформации, включают щелочь и гидроксиды щелочных металлов; так например, можно использовать NaOH или LiOH.

Схема 12: Синтез соединений формул Ia и IIa, где R₂ представляет собой F

[00178] На схеме 12 представлен синтез соединений формул Ia или IIa, где R₂ представляет собой F. На первой стадии диол обрабатывают карбонилдиимидазолом для защиты диольного фрагмента в виде карбонатного эфира и затем используют окислитель, N-хлорсукцинимид (NCS)/бензолсульфенамид (PhSNHtBu), необязательно в присутствии 2-метил-2-бутена в качестве акцептора хлора, получая промежуточное соединение - альдегид. Промежуточный альдегид превращают в соединение формулы Ia, где R₂ представляет собой F, за счет обработки перманганатом, с последующим удалением защитных групп в присутствии основания, такого как Na₂CO₃, получая требуемую карбоновую кислоту в виде натриевой соли. Альтернативно промежуточный альдегид превращают в соединение формулы IIa, где R₂ представляет собой F, используя обработку основанием, таким как Na₂CO₃.

Композиции, способы введения и применение

[00179] Соответственно, в другом аспекте настоящего изобретения предложены фармацевтически приемлемые композиции, где указанные композиции включают любые из соединений, как раскрыто в описании, и необязательно включают фармацевтически приемлемый носитель, адъювант или средство доставки. В некоторых вариантах указанные композиции необязательно дополнительно содержат один или более дополнительных терапевтических агентов.

[00180] Также следует понимать, что некоторые из соединений настоящего изобретения могут существовать в свободной форме для обработки, или при необходимости, в качестве их фармацевтически приемлемых производных или пролекарств. В соответствии с настоящим изобретением фармацевтически приемлемые производные или пролекарства включают, но ими не ограничиваются, фармацевтически приемлемые соли, сложные эфиры, соли таких сложных эфиров, или любые другие аддукты или производные, которые, после введения нуждающемуся в этом пациенту, способны обеспечить непосредственно или опосредованно, соединение, как раскрыто в описании, или его метаболиты или остатки.

[00181] В том смысле, как здесь использован, термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к таким солям, которые в объеме суждений медиков, пригодны для использования в контакте с человеческими тканями и тканями низших животных без вредной токсичности, раздражения, аллергических реакций и т.п., и которые соответствуют разумному соотношению польза/риск. Термин "фармацевтически приемлемая соль" означает любую нетоксичную соль или соль сложного эфира соединения настоящего изобретения, которая, после введения реципиенту, способна обеспечить, или непосредственно, или опосредованно, соединение настоящего изобретения или его ингибирующе активный метаболит или остаток.

[00182] Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны специалистам. Например, S. M. Berge, et al. подробно раскрывает фармацевтически приемлемые соли в J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19, что включено в настоящее описание посредством ссылки. Фармацевтически приемлемые соли соединений настоящего изобретения включают такие, которые получены из подходящих неорганических и органических кислот и оснований. Примерами фармацевтически приемлемых нетоксичных солей присоединения кислот являются соли аминогруппы, образованные с неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота и перхлоркислота, или с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, щавелевая кислота, малеиновая кислота, винная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота или малоновая кислота, или используя другие способы, известные специалистам, такие как ионообмен. Другие фармацевтически приемлемые соли включают адипат, альгинат, аскорбат, аспартат, бензолсульфонат, бензоат, бисульфат, борат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, цитрат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, формиат, фумарат, глюкогептонат, глицерофосфат, глюконат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гидроиодид, 2-гидроксиэтансульфонат, лактобионат, лактат, лаурат, лаурилсульфат, малат, малеат, малонат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, фосфат, пикрат, пивалат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, п-толуолсульфонат, ундеканоат, валерат и т.п. Соли, полученные с соответствующими основаниями, включают соли щелочных металлов, щелочноземельных металлов, соли аммония и соли N⁺(C_1-4алкил)₄. Настоящее изобретение также рассматривает кватернизацию любых основных азотсодержащих групп соединений, раскрытых в описании. В результате такой кватернизации можно получить водо- или масло-растворимые или диспергируемые продукты. Репрезентативные соли щелочных или щелочноземельных металлов включают соли натрия, лития, калия, кальция, магния и т.п. Кроме того, фармацевтически приемлемые соли включают, при необходимости, катионы нетоксичного аммония, четвертичного аммония и амина, образованные с противоионами, такими как галогенид, гидроксид, карбоксилат, сульфат, фосфат, нитрат, (низший алкил)сульфонат и арилсульфонат.

[00183] Как раскрыто выше, фармацевтически приемлемые композиции настоящего изобретения дополнительно содержат фармацевтически приемлемый носитель, адъювант или средство доставки, которые, в том смысле, как здесь использованы, включают любой и все растворители, разбавители, или другие жидкие средства доставки, агенты, способствующие образованию дисперсий или суспензий, поверхностно-активные агенты, изотонические агенты, загустители или эмульгаторы, консерванты, твердые связующие, смазывающие агенты и т.п., которые соответствуют необходимой конкретной дозированной форме. В Remington's Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition, E. W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980) раскрыты различные носители, которые используют при составлении фармацевтически приемлемых композиций, и известные способы их получения. За исключением таких случаев, когда любая обычная среда носителя несовместима с соединениями настоящего изобретения, например, вызывая любые нежелательные биологические эффекты или каким либо другим образом взаимодействуя нежелательным образом с любым другим компонентом(-ами) фармацевтически приемлемой композиции, рассматривается, что ее использование включено в объем настоящего изобретения. Некоторые примеры веществ, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают, но ими не ограничиваются, ионообменники, окись алюминия, стеарат алюминия, лецитин, сывороточные белки, такие как альбумин человеческой сыворотки, буферные вещества, такие как фосфаты, глицин, сорбиновая кислота или сорбат калия, частичные глицеридные смеси насыщенных растительных жирных кислот, воду, соли или электролиты, такие как протаминсульфат, динатрийгидрофосфат, калийгидрофосфат, хлорид натрия, соли цинка, коллоидная двуокись кремния, трисиликат магния, поливинилпирролидон, полиакрилаты, воски, блок-сополимеры полиэтилен-полиоксипропилена, шерстяной жир, сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлозу и ее производные, такие как натрийкарбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; порошок трагаканта; мальт; желатин; тальк; эксципиенты, такие как масло какао и воски для суппозиториев; масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло; саффлоровое масло; кунжутное масло; оливковое масло; кукурузное масло и соевое масло; гликоли, такие как пропиленгликоль или полиэтиленгликоль; сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; агар; буферирующие агенты, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; альгиновую кислоту; не содержащую пирогенов воду; изотонический солевой раствор; раствор Рингера; этиловый спирт, и фосфатные буферные растворы, а также другие нетоксичные совместимые смазывающие агенты, такие как натрийлаурилсульфат и стеарат магния, а также красящие агенты, способствующие высвобождению агенты, кроющие агенты, подсластители, вкусовые агенты и отдушки, консерванты и антиокислители также могут присутствовать в композициях, в соответствии с суждениями изготовителей.

[00184] В еще одном аспекте, в настоящем изобретении предложен способ лечения состояния, заболевания или нарушения, связанного с активностью ABC-транспортеров. В некоторых вариантах осуществления в настоящем изобретении предложен способ лечения, состояния, заболевания или нарушения, связанного с дефицитом активности ABC-транспортеров, причем способ включает введение композиции, включающей соединение формулы I или Ia, нуждающемуся в этом субъекту, предпочтительно млекопитающему.

[00185] В некоторых предпочтительных вариантах осуществления в настоящем изобретении предложен способ лечения муковисцидоза, эмфиземы, наследственного гемохроматоза, дефицита коагуляции-фибринолиза, такого как дефицит С белка, наследственной ангиоэдемы типа 1, дефицита процессинга липидов, такого как семейная гиперхолестеринемия, хиломикронемии типа 1, абеталипопротеинемии, болезни лизосомых накоплений, такой как болезнь I-клеточных включений/псевдосиндрома Гурлера, мукополисахаридоза, болезни Сандхоффа/Тея-Сакса, болезни Криглера/Найяра типа II, полиэндокринопатии/гиперинсулемии, сахарного диабета, карликовости Ларона, миелопероксидазной недостаточности, первичного гипопаратироидизма, меланомы, гликаноза CDG типа 1, эмфиземы, наследственного гипертироидоза, остеопсатироза, наследственной гипофибриногенемии, дефицита ACT, несахарного диабета (DI), нейрофизиологического DI, нефрогенного DI, синдрома Чаркот-Мари-Туута, болезни Пелицеуса-Мерцбахера, нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, амиотрофический латеральный склероз, синдром прогрессирующего супрануклеарного паралича, болезнь Пика, некоторых полиглутаминных неврологических нарушений, таких как болезнь Хантингтона, спиноцеребуллярной атаксии типа I, спинальной и бульбарной мышечной атрофии, дентаторубального паллидолуизиана и миотонической дистрофии, а также губчатой энцефалопатии, такой как наследственная болезнь Крейтцфельдта-Джекоба (вызванная дефектом процессинга прионового белка), болезни Фабри, болезни Сраусслер-Шейнкера, секреторной диареи, полицистозного заболевания почек, хронической обструктивной болезни легких (COPD), болезни сухого глаза и синдрома Сьегрена, включающий стадию введения указанному млекопитающему эффективного количества композиции, включающий соединение формулы I или Ia, или его предпочтительного варианта осуществления, как указано выше.

[00186] В соответствии с альтернативным предпочтительным вариантом осуществления, в настоящем изобретении предложен способ лечения муковисцидоза, включающий стадию введения указанному млекопитающему композиции, содержащей эффективное количество композиции, содержащей соединение формулы I или Ia, или ее предпочтительного варианта осуществления, как указано выше.

[00187] В соответствии с настоящим изобретением "эффективное количество" соединения или фармацевтически приемлемой композиции представляет собой такое количество, которое эффективно для лечения или облегчения тяжести одного или более из муковисцидоза, эмфиземы, наследственного гемохроматоза, дефицита коагуляции-фибринолиза, такого как дефицит С белка, наследственной ангиоэдемы типа 1, дефицита процессинга липидов, такого как семейная гиперхолестеринемия, хиломикронемии типа 1, абеталипопротеинемии, болезни лизосомых накоплений, такой как болезнь I-клеточных включений/псевдосиндрома Гурлера, мукополисахаридоза, болезни Сандхоффа/Тея-Сакса, болезни Криглера/Найяра типа II, полиэндокринопатии/гиперинсулемии, сахарного диабета, карликовости Ларона, миелопероксидазной недостаточности, первичного гипопаратироидизма, меланомы, гликаноза CDG типа 1, эмфиземы, наследственного гипертироидоза, остеопсатироза, наследственной гипофибриногенемии, дефицита ACT, несахарного диабета (DI), нейрофизиологического DI, нефрогенного DI, синдрома Чаркот-Мари-Туута, болезни Пелицеуса-Мерцбахера, нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, амиотрофический латеральный склероз, синдром прогрессирующего супрануклеарного паралича, болезнь Пика, некоторых полиглутаминных неврологических нарушений, таких как болезнь Хантингтона, спиноцеребуллярной атаксии типа I, спинальной и бульбарной мышечной атрофии, дентаторубального паллидолуизиана и миотонической дистрофии, в также губчатой энцефалопатии, такой как наследственная болезнь Крейтцфельдта-Джекоба (вызванная дефектом процессинга прионового белка), болезни Фабри, болезни Сраусслер-Шейнкера, секреторной диареи, полицистозного заболевания почек, хронической обструктивной болезни легких (COPD), болезни сухого глаза и синдрома Сьегрена.

[00188] Соединения и композиции в соответствии со способом настоящего изобретения можно вводить, используя любое количество и любой путь введения, эффективные для лечения или облегчения тяжести одного или более из муковисцидоза, эмфиземы, наследственного гемохроматоза, дефицита коагуляции-фибринолиза, такого как дефицит С белка, наследственной ангиоэдемы типа 1, дефицита процессинга липидов, такого как семейная гиперхолестеринемия, хиломикронемии типа 1, абеталипопротеинемии, болезни лизосомых накоплений, такой как болезнь I-клеточных включений/псевдосиндрома Гурлера, мукополисахаридоза, болезни Сандхоффа/Тея-Сакса, болезни Криглера/Найяра типа II, полиэндокринопатии/гиперинсулемии, сахарного диабета, карликовости Ларона, миелопероксидазной недостаточности, первичного гипопаратироидизма, меланомы, гликаноза CDG типа 1, эмфиземы, наследственного гипертироидоза, остеопсатироза, наследственной гипофибриногенемии, дефицита ACT, несахарного диабета (DI), нейрофизиологического DI, нефрогенного DI, синдрома Чаркот-Мари-Туута, болезни Пелицеуса-Мерцбахера, нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, амиотрофический латеральный склероз, синдром прогрессирующего супрануклеарного паралича, болезнь Пика, некоторых полиглутаминных неврологических нарушений, таких как болезнь Хантингтона, спиноцеребуллярной атаксии типа I, спинальной и бульбарной мышечной атрофии, дентаторубального паллидолуизиана и миотонической дистрофии, а также губчатой энцефалопатии, такой как наследственная болезнь Крейтцфельдта-Джекоба (вызванная дефектом процессинга прионового белка), болезни Фабри, болезни Сраусслер-Шейнкера, секреторной диареи, полицистозного заболевания почек, хронической обструктивной болезни легких (COPD), болезни сухого глаза и синдрома Сьегрена.

[00189] Необходимое точное количество будет меняться от субъекта к субъекту, в зависимости от вида, возраста и общего состояния субъекта, тяжести инфекции, конкретного агента, способа введения и т.п. Соединения настоящего изобретения предпочтительно составляют в стандартной дозированной форме для простоты введения и однородности доз. Выражение "стандартная дозированная форма" в том смысле, как здесь использован, относится к физически дискретной единице агента, подходящего для лечения пациента. Следует понимать, однако, что полная дневная доза соединений и композиций настоящего изобретения будет определяться лечащим врачом в объеме его медицинских знаний и суждений. Конкретный эффективный уровень доз для каждого из пациентов или организмов будет зависеть от множества факторов, включая подлежащее лечению нарушение и тяжесть нарушения; активность конкретно используемого соединения; конкретно используемую композицию; возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол и режим питания пациента; время введения, путь введения, скорость выведения конкретного используемого соединения; длительность лечения; лекарственные средства, используемые в комбинации или совместно с конкретным используемым соединением, и аналогичные факторы, хорошо известные специалистам в данной области медицины. Термин "пациент", в том смысле, как здесь использован, означает животное, предпочтительно, млекопитающее, и наиболее предпочтительно, человека.

[00190] Фармацевтически приемлемые композиции настоящего изобретения можно вводить людям и другим животным перорально, ректально, парентерально, интрацистернально, интравагинально, внутрибрюшинно, местно (в виде порошков, мазей или капель), буккально, в виде пероральных или назальных спреев или т.п., в зависимости от тяжести подлежащей лечению инфекции. В некоторых вариантах осуществления соединения настоящего изобретения можно вводить перорально или парентерально при уровнях доз от примерно 0,01 мг/кг до примерно 50 мг/кг и предпочтительно от примерно 1 мг/кг до примерно 25 мг/кг массы тела субъекта в день, один или более раз в день, для достижения требуемого терапевтического эффекта.

[00191] Жидкие дозированные формы для перорального введения включают, но ими не ограничиваются, фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. В дополнении к активным соединениям жидкие дозированные формы могут содержать инертные разбавители, обычно используемые в данной области химии, такие как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие агенты и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла (в частности, хлопковое, арахисовое, кукурузное, зародышей пшеницы, оливковое, касторовое и кунжутное масла), глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот сорбитана и их смеси. Кроме инертных разбавителей, композиции для перорального введения могут также включать адъюванты, такие как смачивающие агенты, эмульгаторы и суспендирующие агенты, подсластители, вкусовые агенты и отдушки.

[00192] Препараты для инъекций, например, стерильные водные или масляные суспензии для инъекций могут быть составлены в соответствии с известными специалистам способами, используя подходящие диспергирующие или смачивающие агенты и суспендирующие агенты. Стерильные препараты для инъекций могут также быть стерильными растворами, суспензиями или эмульсиями для инъекций в нетоксичных парентерально приемлемых разбавителях или растворителях, например, в виде растворов в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых средств доставки и растворителей, которые можно использовать, находятся вода, раствор Рингера, U.S.P. и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные, нелетучие масла обычно используют в качестве растворителей или суспендирующей среды. Для этой цели можно использовать любую смесь нелетучих масел, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, жирные кислоты, такие как олеиновая кислота, используют при получении препаратов для инъекций.

[00193] Композиции для инъекций можно стерилизовать, например, путем фильтрации через удерживающий бактерии фильтр, или путем включения стерилизующих агентов в формы стерильных твердых композиций, которые можно растворять или диспергировать в стерильной воде или других стерильных средах для инъекций непосредственно перед использованием.

[00194] Для пролонгирования действия соединений настоящего изобретения часто оказывается желательным замедлить абсорбцию соединения из подкожной или внутримышечной инъекции. Это можно осуществить, используя жидкие суспензии кристаллического или аморфного вещества, которое плохо растворяется в воде. Тогда скорость абсорбции соединения будет зависеть от скорости его растворения, что, в свою очередь, может зависеть от размеров кристаллов и кристаллической формы. Альтернативно, замедленную абсорбцию введенной парентерально формы соединения обеспечивают, растворяя или суспендируя соединение в масляном средстве доставки. Депо-формы для инъекций получают, формируя микрокапсулированные матрицы соединения в биоразлагаемых полимерах, таких как полилактид-полигликолид. В зависимости от отношения соединения к полимеру и природы конкретно используемого полимера скорость высвобождения соединения можно регулировать. Примеры других биоразлагаемых полимеров включают поли(орто(сложные эфиры)) и поли(ангидриды). Депо-композиции для инъекций также получают путем включения соединения в липосомы или микроэмульсии, которые совместимы с тканями организма.

[00195] Композиции для ректального или вагинального введения предпочтительно представляют собой суппозитории, которые можно получить, смешивая соединения настоящего изобретения с подходящими нераздражающими эксципиентами или носителями, такими как масло какао, полиэтиленгликоль или воски для суппозиториев, которые являются тведыми при комнатной температуре, но становятся жидкими при температуре тела и поэтому плавятся в ректуме или в вагинальной полости и высвобождают активное соединение.

[00196] Твердые дозированные формы для перорального введения включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых дозированных формах активное соединение смешано с по меньшей мере одним инертным, фармацевтически приемлемым эксципиентом или носителем, таким как цитрат натрия или дикальцийфосфат и/или a) наполнителями или увеличивающими объем средствами, такими как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и кремниевая кислота, b) связующими, такими как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и аравийская камедь, c) увлажнителями, такими как глицерин, d) разрыхлителями, такими как агар-агар, карбонат кальция, картофельный крахмал или крахмал тапиоки, альгиновая кислота, некоторые силикаты, и карбонат натрия, e) замедляющими растворение агентами, таким как парафин, f) ускорителями абсорбции, такими как соединения четвертичного аммония, g) смачивающими агентами, такими как, например, цетиловый спирт и глицеринмоностеарат,H) абсорбентами, такими как каолин и бентонитовая глина, и i) смазывающими агентами, такими как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, натрийлаурилсульфат и их смеси. В случае капсул, таблеток и пилюль, дозированные формы могут также включать буферирующие агенты.

[00197] Твердые композиции аналогичного типа можно также использовать в качестве наполнителей мягких и твердых желатиновых капсул, используя такие эксципиенты, как лактоза или молочный сахар, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и т.п. Твердые дозированные формы в виде таблеток, драже, капсул, пилюль и гранул можно получить с покрытиями и в оболочках, таких как желудочные покрытия и другие покрытия, хорошо известные специалистам в области получения фармацевтических композиций. Они могут необязательно содержать опалесцирующие агенты и могут также представлять собой композиции, которые высвобождают активный ингредиент(-ы) только, или предпочтительно, в определенной части кишечного тракта, необязательно, с задержкой. Примеры композиций включения, которые можно использовать, включают полимерные вещества и воски. Твердые композиции аналогичного типа можно также использовать в качестве наполнителей мягких и твердых желатиновых капсул, используя такие эксципиенты, как лактоза или молочный сахар, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и т.п.

[00198] Активные соединения также могут быть в микроинкапсулированной форме с одним или несколькими эксципиентами, как указано выше. Твердые дозированные формы в виде таблеток, драже, капсул, пилюль и гранул могут быть получены с нанесенными покрытиями и в оболочках, таких как энтеропокрытия, покрытия с контролируемым высвобождением и другие покрытия, хорошо известные специалистам в области получения фармацевтических композиций. В таких твердых дозированных формах активное соединение может быть смешано с по меньшей мере одним инертным разбавителем, таким как сахароза, лактоза или крахмал. Такие дозированные формы также могут содержать, как обычно практикуется, дополнительные вещества, отличающиеся от инертных разбавителей, например, смазывающие вещества для таблетирования и другие вспомогательные вещества для таблетирования, такие как стеарат магния и микрокристаллическая целлюлоза. В случае капсул, таблеток и пилюль дозированные формы также могут содержать буферирующие агенты. Они могут необязательно содержать опалесцирующие компоненты и также могут иметь такой состав, что происходит высвобождение активного ингредиента(-ов) только или предпочтительно в определенной части желудочно-кишечного тракта необязательно отсроченным образом. Примеры вводимых композиций, которые могут быть использованы, включают полимерные вещества и воски.

[00199] Дозированные формы для местного или трансдермального введения соединения настоящего изобретения включают мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, порошки, растворы, спреи, дозированные формы для ингаляции или пластыри. Активный компонент смешивают в стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и любыми необходимыми консервантами или буферами, какие могут потребоваться. Глазные композиции, ушные капли и глазные капли также рассматриваются как входящие в объем настоящего изобретения. Дополнительно в настоящем изобретении предложено использование трансдермальных пластырей, которые имеют дополнительное преимущество в отношении осуществления контролируемой доставки соединения в организм. Такие дозированные формы получают путем растворения или распределения соединения в подходящей среде. Можно также использовать усилители абсорбции с целью увеличения потока соединения через кожу. Скорость можно контролировать или с использованием контролирующих скорость мембран, или путем диспергирования соединения в полимерной матрице или геле.

[00200] Как было раскрыто выше, соединения настоящего изобретения можно использовать в качестве модуляторов ABC-транспортеров. Так, не желая быть связанными с какой-либо конкретной теорией, соединения и композиции в особенности полезны при лечении или облегчении тяжести заболеваний, состояний или нарушений, которые связаны с гиперактивностью или неактивностью АВС-транспортеров, вовлеченных в заболевания, состояния или нарушения. Если гиперактивность или неактивность АВС-транспортеров имеет отношение к конкретному заболеванию, состоянию или нарушению, тогда заболевание, состояние или нарушение можно называть как “опосредованное АВС-транспортерами заболевание, состояние или нарушение”. Соответственно, в другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения или облегчения тяжести заболевания, состояния или нарушения, при которых гиперактивность или неактивность АВС-транспортеров имеет отношение к болезненному состоянию.

[00201] Активность соединений, используемых в настоящем изобретении в качестве модуляторов ABC-транспортеров можно оценить в соответствии со способами, описанными в известном уровне техники и в предлагаемых в описании примерах.

[00202] Следует также понимать, что соединения и фармацевтически приемлемые композиции настоящего изобретения можно использовать в комбинированной терапии, то есть соединения и фармацевтически приемлемые композиции можно вводить одновременно с, до или после одного или более из других терапевтических средств или медицинских процедур. Конкретную комбинацию терапий (терапевтические средства или процедуры) для применения в комбинированных режимах выбирают в расчете на совместимость требуемых терапевтических средств и/или процедур и достижение требуемого терапевтического эффекта. Также следует принять во внимание, что в случае используемых терапий можно обеспечить требуемый эффект для одного и того же нарушения (например, предлагаемое в изобретении соединение может быть введено одновременно с другим агентом, используемым для лечения того же самого нарушения), или можно обеспечить различные эффекты (например, контроль любых побочных эффектов). Как использовано в рассматриваемом описании, дополнительные терапевтические агенты, которые обычно вводят для лечения или предотвращения конкретного заболевания или состояния, известны как “подходящие для подлежащего лечению заболевания или состояния”.

[00203] В одном варианте осуществления дополнительный терапевтический агент выбирают из муколитического агента, бронходилататора, антибиотика, противоинфекционного агента, противовоспалительного агента, модулятора CFTR, отличающегося от соединения формулы I настоящего изобретения, или пищевого агента.

[00204] В одном варианте осуществления дополнительный терапевтический агент представляет собой антибиотик. Примеры подходящих для целей настоящего изобретения антибиотиков включают тобрамицин, включая тобрамициновый порошок для ингаляций (TIP), азитромицин, азтреонам, включая аэрозольные формы азтреонама, амикацин, включая его лизосомальные композиции, ципрофлоксацин, включая его композиции для введения путем ингаляций, левофлаксацин, включая его аэрозольные композиципи, и комбинации двух антибиотиков, например, фосфомицина и тобрамицина.

[00205] В другом варианте осуществления дополнительный агент представляет собой муколит. Примеры муколитов, которые можно использовать в настоящем изобретении, включают Pulmozyme®.

[00206] В другом варианте осуществления дополнительный агент представляет собой бронходилататор. Примеры бронходилататоров включают албутерол, метапротенеролсульфат, пирбутеролацетат, салметерол или тетрубулинсульфат.

[00207] В другом варианте осуществления дополнительный агент оказывается эффективным для сохранения жидкости на поверхности дыхательных путей и легких. Такие агенты улучшают перемещение солей внутрь и вне клеток, обеспечивая таким образом большую гидратацию слизи в легких, и поэтому более легкое их очищение. Примеры таких агентов включают гипертонический солевой раствор, денуфосолтетранатрий ([[(3S,5R)-5-(4-амино-2-оксопиримидин-1-ил)-3-гидроксиоксолан-2-ил]метоксигидроксифосфорил][[[(2R,3S,4R,5R)-5-(2,4-диоксопиримидин-1-ил)-3,4-дигидроксиоксолан-2-ил]метокси-гидроксифосфорил]оксигидроксифосфорил]гидрофосфат) или бронхитол (композиция для ингаляций с маннитом).

[00208] В другом варианте осуществления дополнительный агент представляет собой противовоспалительный агент, т.е., агент, который уменьшает воспаление в легких. Примеры таких агентов, которые можно использовать в настоящем изобретении, включают ибупрофен, докозагексановую кислоту (DHA), силденафил, глутатион для ингаляций, пиоглитазон, гидроксихлорохин или симавастатин.

[00209] В другом варианте осуществления дополнительный агент представляет собой модулятор CFTR, отличающийся от соединений формулы I, т.е., агент, обладает эффектом модулирования активности CFTR. Примеры таких агентов включают аталурен ("PTC 124®"; 3-[5-(2-фторфенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил]бензойная кислота), синапултид, ланковутид, депелестат (ингибитор человеческой рекомбинантной нейтрофилэластазы), и кобипростон (7-{(2R,4aR,5R,7aR)-2-[(3S)-1,1-дифтор-3-метилпентил]-2-гидрокси-6-оксооктагидроциклопента [b]пиран-5-ил}гептановая кислота).

[00210] В другом варианте осуществления дополнительный агент представляет собой пищевой агент. Примеры пищевых агентов включают панкрелипазу (замена фермента поджелудочной железы), включая Pancrease®, Pancreacarb®, Ultrase® или Creon®, Liprotomase® (предыдущее название Trizytek®), Aquadeks®, или глутатион для ингаляций. В одном варианте осуществления дополнительный пищевой агент представляет собой панкрелипазу.

[00211] В другом варианте осуществления, дополнительный агент представляет собой соединение, выбранное из гентамицина, куркумина, циклофосфамида, 4-фенилбутирата, миглустата, фелодипина, нимодипина, филоксина B, генистеина, апигенина, модуляторов cAMP/cGMP, таких как ролипрам, силденафил, милринон, тадалафил, амринон, изопротеренол, албутерол и алметерол, деоксиспергуалин, ингибиторы HSP 90, ингибиторы HSP 70, ингибиторы протеосом, такие как эпоксомицин, лактацистин, и т.д.

[00212] В других вариантах осуществления дополнительный агент представляет собой соединения, раскрытые в WO 2004028480, WO 2004110352, WO 2005094374, WO 2005120497, или WO 2006101740. В другом варианте осуществления дополнительный агент представляет собой производное бензо[c]хинолизиния, которое обладает активностью модулирования CFTR, или производное бензопирана, которое проявляет активность модулирования CFTR. В другом варианте осуществления дополнительный агент представляет собой соединение, раскрытое в патентах США 7202262, 6992096, US 20060148864, US 20060148863, US 20060035943, US 20050164973, WO 2006110483, WO 2006044456, WO 2006044682, WO 2006044505, WO 2006044503, WO 2006044502 или WO 2004091502. В другом варианте осуществления дополнительный агент представляет собой соединение, раскрытое в WO 2004080972, WO 2004111014, WO 2005035514, WO 2005049018, WO 2006099256, WO 2006127588, или WO 2007044560. В другом варианте осуществления дополнительный агент представляет собой N-(5-гидрокси-2,4-дитрет-бутилфенил)-4-оксо-1H-хинолин-3-карбоксамид.

[00213] В одном варианте осуществления 100 мг соединения формулы I можно вводить нуждающемуся в этом субъекту с последующим совместным введением 150 мг N-(5-гидрокси-2,4-дитрет-бутилфенил)-4-оксо-1H-хинолин-3-карбоксамида (Соединение 2). В другом варианте осуществления 100 мг соединения формулы I можно вводить нуждающемуся в этом субъекту с последующим совместным введением 250 мг соединения 2. В указанных вариантах осуществления дозовое количество можно обеспечить путем введения одной или более таблеток настоящего изобретения. Соединение 2 можно вводить в виде фармацевтической композиции, содержащей соединение 2 и фармацевтически приемлемый носитель. Длительность введения может продолжаться до достижения облегчения заболевания или до тех пор, пока не предпишет лечащий врач субъекта, например, длительность введение может быть меньше недели, 1 неделю, 2 недели, 3 недели, или месяц или дольше. Периоду совместного введения может предшествовать период введения только соединения формулы I. Например, можно осуществлять введение 100 мг соединения 1 в течение 2 недель с последующим совместным введением 150 мг или 250 мг соединения 2 в течение дополнительной недели.

[00214] В одном варианте осуществления 100 мг соединения формулы I можно вводить один раз в день нуждающемуся в этом субъекту с последующим совместным введением 150 мг соединения 2 один раз в день. В другом варианте осуществления 100 мг соединения формулы I можно вводить один раз в день нуждающемуся в этом субъекту с последующим совместным введением 250 мг соединения 2 один раз в день. В указанных вариантах осуществления дозовые количества можно обеспечить введением одной или более таблеток настоящего изобретения. Соединение 2 можно вводить в виде фармацевтической композиции, включающий соединение 2 и фармацевтически приемлемый носитель. Введение может продолжаться до достижения облегчения заболевания или до тех пор, пока не предпишет лечащий врач субъекта, например, длительность введения может быть менее недели, 1 неделю, 2 недели, 3 недели или месяц или дольше. Периоду совместного введения может предшествовать период введения только соединения формулы I. Например, можно вводить 100 мг соединения 1 в течение 2 недель с последующим совместным введением 150 мг или 250 мг соединения 2 в течение 1 дополнительной недели.

[00215] В одном варианте осуществления 100 мг соединения формулы I можно вводить один раз в день нуждающемуся в этом субъекту с последующим совместным введением 150 мг соединения 2 каждые 12 часов. В другом варианте осуществления 100 мг соединения формулы I можно вводить один раз в день нуждающемуся в этом субъекту с последующим совместным введением 250 мг соединения 2 каждые 12 часов. В указанных вариантах осуществления дозовые количества можно обеспечить путем введения одной или более таблеток настоящего изобретения. Соединение 2 можно вводить в виде фармацевтической композиции, содержащей соединение 2 и фармацевтически приемлемый носитель. Введение может продолжаться до достижения облегчения заболевания или до предписания лечащего врача субъекта, например, длительность введения может составлять менее недели, 1 неделю, 2 недели, 3 недели, или месяц или дольше. Периоду совместного введения может предшествовать период введения только соединения формулы I. Например, можно осуществлять введение 100 мг соединения формулы I в течение 2 недель с последующим совместным введением 150 мг или 250 мг соединения 2 в течение 1 дополнительной недели.

[00216] Указанные комбинации можно использовать для лечения раскрытых в описании заболеваний, включая муковисцидоз. Указанные комбинации можно также использовать в раскрытых в описании наборах.

[00217] Количество дополнительного терапевтического агента, присутствующего в композиции настоящего изобретения, должно быть не более такого количества, которое обычно вводят в композиции, содержащей указанный терапевтический агент в качестве единственного активного агента. Предпочтительно, чтобы количество дополнительного терапевтического агента в обсуждаемой композиции было в интервале от примерно 50% до 100% количества, которое обычно присутствует в композиции, содержащей указанный агент в качестве единственного терапевтически активного агента.

[00218] Соединения настоящего изобретения или их фармацевтически приемлемые композиции могут также быть включены в композиции для покрытия имплантируемых медицинских устройств, таких как протезы, искусственные клапаны, сосудистые имплантаты, стенты и катетеры. Соответственно, в другом аспекте настоящее изобретение относится к композиции для покрытия имплантируемого устройства, содержащей соединение настоящего изобретения, как в общем раскрыто выше, и в классах и подклассах, указанных в описании, и носитель, пригодный для нанесения покрытия на указанное имплантируемое устройство. В другом аспекте настоящее изобретение относится к имплантируемому устройству, покрытому композицией, содержащей соединение настоящего изобретения, как раскрыто выше, и согласно классам и подклассам, указанным в данном описании, и носитель, который пригоден для нанесения покрытия на указанное имплантируемое устройство. Подходящие покрытия и общий способ получение имплантируемых устройств с нанесенным покрытием описаны в патентах США 6099562, 5886026 и 5304121. Покрытиями обычно являются биосовместимые полимерные материалы, такие как гидрогелевый полимер, полиметилдисилоксан, поликапролактон, полиэтиленгликоль, полимолочная кислота, этиленвинилацетат, и их смеси. Покрытия необязательно могут быть дополнительно покрыты подходящим, нанесенным поверх покрытием из фторсиликона, полисахаридов, полиэтиленгликоля, фосфолипидов или их комбинаций для придания характеристик контролируемого высвобождения композиции.

[00219] Следующий аспект настоящего изобретения относится к модулированию активности АВС-транспортеров в биологическом образце или в организме пациента (например, in vitro или in vivo), причем способ включает введение пациенту или приведение указанного биологического образца в контакт с соединением формулы I или композицией, содержащей указанное соединение. Термин “биологический образец”, в том смысле, как использован в описании, включает, без ограничения, клеточные культуры или экстракты из них; биопсийный материал, полученный от млекопитающих, или экстракты из него; и кровь, слюну, мочу, экскременты, сперму, слезную жидкость или другие жидкости организма, или экстракты из них.

[00220] Модуляция активности ABC-транспортеров в биологических образцах применима для множества целей, известных специалистам в данной области. Примеры таких целей включают, но не ограничиваясь ими, исследование ABC-транспортеров в биологических или патологических событиях; и сравнительная оценка новых модуляторов ABC-транспортеров.

[00221] В еще одном варианте осуществления предложен способ модулирования активности анионных каналов in vitro или in vivo, включающий стадию приведения каналов в контакт с соединением формулы I или Ia. В предпочтительных вариантах осуществления анионные каналы представляют собой хлоридные каналы или бикарбонатные каналы. В других предпочтительных вариантах осуществления анионными каналами являются хлоридные каналы.

[00222] В соответствии с альтернативным вариантом осуществления в настоящем изобретении предложен способ повышения количества функциональных АВС-транспортеров в мембране клетки, включающий стадию приведения клетки в контакт с соединением формулы (I или Ia). Термин “функциональный АВС-транспортер”, в том смысле, как использован в описании, означает АВС-транспортеры, которые обладают транспортной активностью. В предпочтительных вариантах указанные функциональные АВС-транспортеры представляют собой CFTR.

[00223] В соответствии с другим предпочтительным вариантом активность ABC-транспортеров определяют, измеряя трансмембранный потенциал напряжения. Для измерения потенциала напряжения через мембрану в биологическом образце можно использовать любой из известных в данной области способов, такой как оптический анализ трансмембранного потенциала или другие электрофизиологические способы.

[00224] Для анализа оптического мембранного потенциала используют потенциал-чувствительные FRET сенсоры, описанные Gonzalez и Tsien (См., Gonzalez, J. E. and R. Y. Tsien (1995) "Voltage sensing by fluorescence resonance energy transfer in single cells" Biophys J 69(4): 1272-80, и Gonzalez, J. E. and R. Y. Tsien (1997) "Improved indicators of cell membrane potential that use fluorescence resonance energy transfer" Chem Biol 4(4): 269-77) в комбинации с приборами для измерения изменения флуоресценции, такими как Voltage/Ion Probe Reader (VIPR) (См., Gonzalez, J. E., K. Oades, et al. (1999) "Cell-based assays and instrumentation for screening ion-channel targets" Drug Discov Today 4(9): 431-439).

[00225] Приведенные потенциал-чувствительные анализы основаны на изменении флуоресценции при резонансном переносе энергии (FRET) между мембранорастворимым потенциал-чувствительным красителем, DiSBAC₂(3), и флуоресцирующим фосфолипидом, CC2-DMPE, который связан с наружным “листком” плазменной мембраны и действует как донор FRET. Изменения трансмембранного потенциала (V_m) вызывают перераспределение отрицательно заряженного DiSBAC₂(3) в плазменной мембране, и соответственное изменение количества энергии, передаваемой от СС2-DMPE. Изменения флуоресцентной эмиссии можно контролировать, используя устройство VIPR^TM II, которое представляет собой интегрированный жидкостный манипулятор и флуоресцентный детектор, сконструированные для проведения основанного на клетке скрининга в 96- или 384-луночных микротитровальных планшетах.

[00226] В другом аспекте в настоящем изобретении предложен набор для измерения активности ABC-транспортеров или их фрагментов в биологическом образце in vitro или in vivo, включающий (i) композицию, содержащую соединение формулы I или Ia или любой из вышеперечисленных вариантов осуществления; и (ii) инструкции для a) приведения композиции в контакт с биологическим образцом и b) измерения активности ABC-транспортера или его фрагмента. В одном варианте осуществления набор включает дополнительно инструкции для a) приведение дополнительной композиции в контакт с биологическим образцом; b) измерения активности указанного ABC-транспортера или его фрагмента в присутствии указанного дополнительного соединения, и c) сравнения активности ABC-транспортера в присутствии дополнительного соединения с плотностью ABC-транспортера в присутствии композиции формулы I или Ia. В предпочтительных вариантах осуществления набор используют для измерения плотности CFTR.

[00227] В целях более полного понимания раскрытого настоящего изобретения далее приводятся примеры. Следует понимать, что указанные примеры служат лишь целям иилюстрации, и никоим образом не ограничивают настоящее изобретение.

ПРИМЕРЫ

Реагенты и соединения

[00228] Vitride® (натрий бис(2-метоксиэтокси)алюминийгидрид [или NaAlH₂(OCH₂CH₂OCH₃)₂], 65 масс.% раствор в толуоле) закупают в Aldrich Chemicals. 3-Фтор-4-нитроанилин закупают в Capot Chemicals. 5-Бром-2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол закупают в Alfa Aesar. 2,2-Дифтор-1,3-бензодиоксол-5-карбоновую кислоту закупают в Saltigo (отделение Lanxess Corporation).

[00229] В любом месте настоящего описания, где название соединения может неправильно описывать структуру соединения, у структуры изменяют название и исправляют.

Фрагмент хлорангидрида

[00230] Синтез (2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)метанола

[00231] Коммерчески доступную 2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-карбоновую кислоту (1,0 экв.) суспендируют в толуоле (10 об). Vitride® (2 экв.) добавляют через капельную воронку с такой скоростью, чтобы поддерживать температуру при 15-25°С. К концу добавления температура повышается до 40°С в течение 2 часов, затем осторожно добавляют 10% (масс./масс.) водн. NaOH (4,0 экв.) через капельную воронку, поддерживая температуру при 40-50°С. После перемешивания в течение дополнительно 30 минут, слои разделяются при 40°С. Органическую фазу охлаждают до 20°С, затем промывают водой (2×1,5 об.), сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют, получая сырой (2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)метанол, который используют непосредственно на следующей стадии.

Синтез 5-хлорметил-2,2-дифтор-1,3-бензодиоксола

[00232] (2,2-Дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)метанол (1,0 экв.) растворяют в MTBE (5 об.). Добавляют каталитическое количество DMAP (1 моль%) и SOCl₂ (1,2 экв.) через капельную воронку. SOCl₂ добавляют с такой скоростью, чтобы поддерживать температуру в реакторе при 15-25°С. Температуру повышают до 30°С в течение 1 часа, затем охлаждают до 20°С, затем добавляют воду (4 об.) через капельную воронку, поддерживая температуру менее чем 30°С. После перемешивания в течение дополнительных 30 минут слои разделяются. Органический слой перемешивают, и добавляют 10% (масс./об.) водн. NaOH (4,4 об.). После перемешивания в течение 15-20 минут, слои разделяются. Органическую фазу затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют, получая сырой 5-хлорметил-2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол, который используют непосредственно на следующей стадии.

Синтез (2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)ацетонитрила

Раствор 5-хлорметил-2,2-дифтор-1,3-бензодиоксола (1 экв.) в ДМСО (1,25 об.) добавляют к суспензии NaCN (1,4 экв.) в ДМСО (3 об.), поддерживая температуру в интервале 30-40°С. Полученную смесь перемешивают в течение 1 часа, затем добавляют воду (6 об.), затем MTBE (4 об.). После перемешивания в течение 30 минут, слои разделяются. Водный слой экстрагируют MTBE (1,8 об.). Объединенные органические слои промывают водой (1,8 об.), сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют, получая сырой (2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)ацетонитрил (95%), который используют непосредственно на следующей стадии.

Синтез (2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)циклопропанкарбонитрила

[00233] Исходный раствор 50% масс./масс. NaOH дегазируют, барботируя азот в течение не менее 16 часов. Соответствующее количество MTBE аналогичным образом дегазируют в течение нескольких часов. В реактор, через который продувают азот, загружают дегазированный MTBE (143 мл), затем (2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)ацетонитрил (40,95 г, 207,7 ммоль) и тетрабутиламмонийбромид (2,25 г, 10,38 ммоль). Измеряют объем полученной смеси, и смесь дегазируют, барботируя азот в течение 30 минут. Загружают достаточное количество дегазированного MTBE, чтобы восстановить исходный объем смеси до дегазирования. В перемешиваемую смесь при 23,0°С загружают дегазированный 50% масс./масс. NaOH (143 мл) в течение 10 минут, затем 1-бром-2-хлорэтан (44,7 г, 311,6 ммоль) в течение 30 минут. Реакционную смесь анализируют, испоьзуя ВЭЖХ с интервалами в 1 час для определения % превращения. Перед отбором образцов перемешивание прекращают, и фазам дают разделиться. Отбирают образец верхней органической фазы для анализа. Когда % превращения становится >99 % (обычно после 2,5-3 часов), реакционную смесь охлаждают до 10°С, и добавляют воду (461 мл) с такой скоростью, чтобы поддерживать температуру <25°С. Температуру доводят до 20-25°С, и фазы разделяются. Примечание: для завершения фазового разделения требуется достаточно времени. Водную фазу экстрагируют MTBE (123 мл), и объединенную органическую фазу промывают 1 N HCl (163 мл) и 5% NaCl (163 мл). Раствор (2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)циклопропанкарбонитрила в MTBE концентрируют до 164 мл в вакууме при 40-50°С. В полученный раствор загружают этанол (256 мл) и снова концентрируют до 164 мл в вакууме при 50-60°С. Этанол (256 мл) загружают, и смесь концентрируют до 164 мл в вакууме при 50-60°С. Полученную смесь охлаждают до 20-25°С и разбавляют этанолом до 266 мл, подготавливая для следующей стадии.

¹H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 7,43 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,40 (д, J=1,9 Гц, 1H), 7,30 (дд, J=8,4, 1,9 Гц, 1H), 1,75 (м, 2H), 1,53 (м, 2H).

Синтез 1-(2,2-дифтор-l,3-бензодиоксол-5-ил)циклопропанкарбоновой кислоты

[00234] В раствор (2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)циклопропанкарбонитрила в этаноле с предыдущей стадии загружают 6 N NaOH (277 мл) в течение 20 минут, и нагревают до внутренней температуры 77-78°С в течение 45 минут. Ход реакции контролируют по данным ВЭЖХ через 16 часов. Примечание: Контролируют расход как (2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)циклопропанкарбонитрила, так и первичного амида, образующегося в результате частичного гидролиза (2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)циклопропанкарбонитрила. Когда % превращения становится >99% (обычно наблюдается 100% превращение после 16 часов), реакционную смесь охлаждают до 25°С и в нее загружают этанол (41 мл) и DCM (164 мл). Раствор охлаждают до 10°С и загружают 6 N HCl (290 мл), с такой скоростью, чтобы поддерживать температуру <25°С. После нагревания до 20-25°С фазы разделяются. Нижнюю органическую фазу собирают, и осуществляют обратную экстракцию верхней водной фазы, используя DCM (164 мл). Примечание: водная фаза бывает несколько мутной до и после экстракции за счет высокой концентрации неорганической соли. Органические фракции объединяют и концентрируют в вакууме до 164 мл. Добавляют толуол (328 мл), и смесь конденсируют до 164 мл при 70-75°С. Смесь охлаждают до 45°С, добавляют MTBE (364 мл) и перемешивают при 60°С в течение 20 минут. Раствор охлаждают до 25°С и фильтруют для удаления остатков неорганических солей. MTBE (123 мл) используют для промывки реактора и сбора твердого вещества. Объединенные органические фракции переносят в чистый реактор для подготовки к следующей стадии.

Выделение 1-(2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)циклопропанкарбоновой кислоты

[00235] Раствор 1-(2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)циклопропанкарбоновой кислоты с предыдущей стадии концентрируют в вакууме до 164 мл, добавляют толуол (328 мл) и концентрируют до 164 мл при 70-75°С. Смесь затем нагревают до 100-105°С, получая гомогенный раствор. После перемешивания при указанной температуре в течение 30 минут, раствор охлаждают до 5°С в течение 2 часов, и поддерживают при температуре 5°С в течение 3 часов. Затем смесь фильтруют, и реактор и собранное твердое вещество промывают холодной смесью 1:1 толуол/н-гептан (2×123 мл). Вещество сушат в вакууме при 55°С в течение 17 часов с получением 1-(2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)циклопропанкарбоновой кислоты в виде не совсем белого кристаллического твердого вещества. 1-(2,2-Дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)циклопропанкарбоновую кислоту выделяют с 79% выходом из (2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)ацетонитрила (3 стадии, включая выделение) и со степенью чистоты по данным ВЭЖХ 99,0% AUC. ESI-МС m/z рассчитано 242,04, найдено 241,58 (M+1)⁺;

¹H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 12,40 (с, 1H), 7,40 (д, J=1,6 Гц, 1H), 7,30 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,17 (дд, J=8,3, 1,7 Гц, 1H), 1,46 (м, 2H), 1,17 (м, 2H).

Альтернативный синтез фрагмента хлорангидрида

Синтез (2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)-1-этилацетатацетонитрила

[00236] Реактор продувают азотом, и в него загружают 900 мл толуола. Растворитель дегазируют, барботируя азот в течение не менее 16 часов. Затем в реактор загружают Na₃PO₄ (155,7 г, 949,5 ммоль), затем вводят бис(дибензилиденацетон)палладий(0) (7,28 г, 12,66 ммоль). 10% масс./масс. раствор трет-бутилфосфина в гексанах (51,23 г, 25,32 ммоль) вводят в течение 10 минут при 23°С через продутую азотом капельную воронку. Смесь оставляют при перемешивании в течение 50 минут, после чего добавляют 5-бром-2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол (75 г, 316,5 ммоль) в течение 1 минуты. После перемешивания в течение дополнительных 50 минут, в смесь вводят этилцианоацетат (71,6 г, 633,0 ммоль) в течение 5 минут, затем добавляют воду (4,5 мл) одной порцией. Смесь нагревают до 70°С в течение 40 минут, и анализируют, используя ВЭЖХ, каждые 1-2 часа, определяя процент превращения реагента в продукт. После того, как отмечается окончание превращения (обычно 100% превращение происходит после 5-8 часов), полученную смесь охлаждают до 20-25°С и фильтруют через слой целита. Целитный слой промывают толуолом (2×450 мл), и объединенные органические фракции концентрируют до 300 мл в вакууме при 60-65°С. В полученный концентрат добавляют 225 мл ДМСО и концентрируют в вакууме при 70-80°С до тех пор, пока не прекращается активная перегонка растворителя. Раствор охлаждают до 20-25°С и разбавляют до 900 мл ДМСО при подготовке к стадии 2.

¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃) δ 7,16-7,10 (м, 2H), 7,03 (д, J=8,2 Гц, 1H), 4,63 (с, 1H), 4,19 (м, 2H), 1,23 (т, J=7,1 Гц, 3H).

Синтез (дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)ацетонитрила

[00237] В полученный выше ДМСО раствор (2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)-1-этилацетатацетонитрила добавляют 3 N HCl (617,3 мл, 1,85 моль) в течение 20 минут, поддерживая при этом внутреннюю температуру <40°С. Полученную смесь затем нагревают до 75°С в течение 1 часа и анализируют, используя ВЭЖХ, каждые 1-2 часа, определяя % превращения. Когда наблюдается превращение >99% (обычно после 5-6 часов), реакционную смесь охлаждают до 20-25°С и экстрагируют MTBE (2×525 мл), в течение достаточного промежутка времени, чтобы произошло полное разделение фаз во время экстракций. Объединенные органические экстракты промывают 5% NaCl (2×375 мл). Раствор затем переносят в установку, обеспечивающую вакуумную перегонку при давлении 200-333 Па, (1,5-2,5 торр), снабженную охлаждаемой приемной колбой. Раствор концентрируют в вакууме при температуре <60°С для удаления растворителей. (2,2-Дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)ацетонитрил затем отгоняют из полученного масла при 125-130°С (температура термостата) и 200-266 Па (1,5-2,0 торр). (2,2-Дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)ацетонитрил выделяют в виде прозрачного масла с 66% выходом из 5-бром-2,2-дифтор-1,3-бензодиоксола (2 стадии) и со степенью чистоты по данным ВЭЖХ 91,5% AUC (соответствует анализу масс./масс. 95%).

¹H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 7,44 (ушир.с, 1H), 7,43 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,22 (дд, J=8,2, 1,8 Гц, 1H), 4,07 (с, 2H).

[00238] Остальные стадии такие же, что и для синтеза кислотного фрагмента.

Аминный фрагмент

Синтез 2-бром-5-фтор-4-нитроанилина

[00239] В колбу загружают 3-фтор-4-нитроанилин (1,0 экв.) с последующим добавлением этилацетата (10 об.) и перемешивают до растворения всей твердой части. Порциями добавляют N-бромсукцинимид (1,0 экв.), чтобы поддерживать внутреннюю температуру 22°С. В конце реакции реакционную смесь концентрируют в вакууме в роторном испарителе. Остаток суспендируют в дистиллированной воде (5 об.), чтобы растворить и удалить сукцинимид. (Сукцинимид можно также удалить, используя обработку водой). Воду декантируют, и твердое вещество суспендируют в 2-пропаноле (5 об.) в течение ночи. Полученную суспензию фильтруют, и влажную фильтровальную лепешку промывают 2-пропанолом, сушат в вакуумном термостате при 50°С в течение ночи с отводом N₂ до достижения постоянной массы. Выделяют твердое вещество желтовато-коричневого цвета (50% выход, 97,5% AUC). Другими примесями оказались бром- региоизомер (1,4% AUC) и ди-бром аддукт (1,1% AUC).

¹H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8,19 (1H, д, J=8,1 Гц), 7,06 (ушир.с, 2H), 6,64 (д, 1 H, J=14,3 Гц).

Синтез бензилгликолированной-4-аммоний-2-бром-5-фторанилинтозилатной соли

[00240] В тщательно высушенную колбу в атмосфере N₂ вводят следующее: активированный порошок молекулярных сит 4Å (50 масс.% в расчете на 2-бром-5-фтор-4-нитроанилин), 2-бром-5-фтор-4-нитроанилин (1,0 экв.), дигидрат перхлората цинка (20 моль%) и толуол (8 об.). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение не менее чем 30 минут. Позднее (R)-бензилглицидиловый эфир (2,0 экв.) в толуоле (2 об.) добавляют в постоянный поток. Реакционную смесь нагревают до 80°С (внутренняя температура) и перемешивают в течение приблизительно 7 часов или до тех пор, пока 2-бром-5-фтор-4-нитроанилин не составляет <5% AUC.

[00241] Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и добавляют целит (50 масс.%), с последующим добавлением этилацетата (10 об.). Полученную смесь фильтруют для удаления целита и сит, и промывают этилацетатом (2 об.). Фильтрат промывают раствором аммонийхлорида (4 об., 20% масс./об.). Органический слой промывают раствором бикарбоната натрия (4 об.×2,5% масс./об.). Органический слой концентрируют в вакууме в роторном испарителе. Полученную суспензию растворяют в изопропилацетате (10 об.), и этот раствор переносят в гидрогенизатор Buchi.

[00242] В гидрогенизатор загружают 5 масс.% Pt(S)/C (1,5 моль%), и смесь перемешивают в атмосфере N₂ при 30°С (внутренняя температура). Реакционную смесь продувают N₂, затем водородом. Давление в гидрогенизаторе доводят до 1 бар водорода, и полученную смесь интенсивно перемешивают (>1200 об/мин). В конце реакции катализатор отфильтровывают, используя слой целита, и промывают дихлорметаном (10 об.). Фильтрат концентрируют в вакууме. Любые остатки изопропилацетата удаляют дихлорметаном (2 об.) и концентрируют в роторном испарителе досуха.

[00243] Полученный остаток растворяют в дихлорметане (10 об.). Добавляют моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (1,2 экв.) и перемешивают в течение ночи. Продукт отфильтровывают и промывают дихлорметаном (2 об.) и сушат с подсосом. Влажную фильтровальную лепешку переносят на сушильный лоток, помещают в вакуумный термостат и сушат при 45°С, удаляя N₂ до достижения постоянной массы. Бензилгликолированную-4-аммоний-2-бром-5-фторанилинтозилатную соль выделяют в виде не совсем белого твердого вещества.

[00244] Определенная степень чистоты хиральности составляет >97%ee.

Синтез (3-хлор-3-метилбут-1-илил)триметилсилана

[00245] Пропаргиловый спирт (1,0 экв.) загружают в реактор. Добавляют водный раствор хлористоводородной кислоты (37%, 3,75 об.) и начинают перемешивание. Во время растворения твердого спирта наблюдается умеренная эндотермичность (5-6°С). Полученную смесь перемешивают в течение ночи (16 часов), причем смесь медленно становится темно-красной. В 30 л реактор с рубашкой загружают воду (5 об.), которую затем охлаждают до 10°С. Затем реакционную смесь медленно переносят в воду, используя вакуумирование, поддерживая внутреннюю температуру смеси ниже 25°С. Добавляют гексаны (3 об.), и полученную смесь перемешивают в течение 0,5 часа. Фазы разделяются, и водную фазу (pH <1) сливают и удаляют. Органическую фазу концентрируют в вакууме, используя роторный испаритель, получая продукт в виде масла красного цвета.

Синтез (4-(бензилокси)-3,3-диметилбут-1- инил)триметилсилана

[00246] Способ A

[00247] Все эквиваленты и объемы, указанные в рассматриваемой части, даны в расчете на масштаб реакции 250 г. Магниевые стружки (69,5 г, 2,86 моль, 2,0 экв.) помещают в 3 л 4-горлый реактор и перемешивают, используя магнитную мешалку, в атмосфере азота в течение 0,5 часа. Реактор погружают в баню с ледяной водой. Раствор пропаргилхлорида (250 г, 1,43 моль, 1,0 экв.) в ТГФ (1,8 л, 7,2 об.) медленно добавляют в реактор, при перемешивании, до наблюдения начала экзотермической реакции (~10°С). Образование реагента Гриньяра подтверждают данными IPC, используя¹H-ЯМР спектроскопию. После того как экзотермическая реакция прекращается, остаток раствора медленно добавляют, поддерживая температуру порции <15°С. Добавление занимает ~3,5 часа. Полученную смесь темно-зеленого цвета декантируют в 2 л флакон с крышкой.

[00248] Все эквиваленты и объемы, указанные в рассматриваемой части, даны в расчете на масштаб реакции 500 г. В 22 л реактор загружают раствор бензилхлорметилового эфира (95%, 375 г, 2,31 моль, 0,8 экв.) в ТГФ (1,5 л, 3 об.). Реактор охлаждают на бане со льдом. Приготовленные, как описано выше, две порции реагента Гриньяра, объединяют и затем медленно добавляют к раствору бензилхлорметилового эфира через капельную воронку, поддерживая температуру ниже 25°С. Добавление занимает 1,5 часа. Реакционную смесь перемешивают в течение ночи (16 часов).

[00249] Все эквиваленты и объемы, указанные в рассматриваемой части, даны в расчете на масштаб реакции 1 кг. 15% раствор аммонийхлорида приготавливают в 30 л реакторе с рубашкой (1,5 кг в 8,5 кг воды, 10 об.). Раствор охлаждают до 5°С. Две реакционные смеси Гриньяра, полученные, как раскрыто выше, объединяют и затем переносят в раствор аммонийхлорида через головку сосуда. В указанном роторном испарителе наблюдают экзотермический эффект, гашение которого осуществляют с такой скоростью, чтобы поддерживать внутреннюю температуру ниже 25°С. После завершения переноса, температуру рубашки сосуда устанавливают 25°С. Добавляют гексаны (8 л, 8 об.), и смесь перемешивают в течение 0,5 часа. После разделения фаз, водную фазу (pH 9) сливают и удаляют. Оставшуюся органическую фазу промывают водой (2 л, 2 об.). Органическую фазу концентрируют в вакууме, используя 22 л роторный испаритель, получая сырые продукты в виде масла оранжевого цвета.

[00250] Способ B

[00251] Магниевые стружки (106 г, 4,35 моль, 1,0 экв.) загружают в 22 л реактор и затем суспендируют в ТГФ (760 мл, 1 об.). Реактор охлаждают на бане со льдом, так что температура загрузки достигает 2°С. Раствор пропаргилхлорида (760 г, 4,35 моль, 1,0 экв.) в ТГФ (4,5 л, 6 об.) медленно добавляют в реактор. После добавления 100 мл, добавление прекращают, и смесь перемешивают до достижения экзотермической реакции (13°С), что указывает на инициирование реагента Гриньяра. После прекращения экзотермической реакции медленно добавляют еще 500 мл раствора пропаргилхлорида, поддерживая температуру загрузки <20°С. Образование реагента Гриньяра подтверждают с помощью IPC, используя¹H-ЯМР спектроскопию. Оставшийся раствор пропаргилхлорида медленно добавляют, поддерживая температуру загрузки <20°С. Процесс добавления занимает ~1,5 часа. Полученный раствор темно-зеленого цвета перемешивают в течение 0,5 часа. Образование реагента Гриньяра подтверждают IPC, используя¹H-ЯМР спектроскопию. Чистый бензилхлорметиловый эфир загружают в реактор через капельную воронку, поддерживая температуру загрузки ниже 25°С. Процесс добавления занимает 1,0 час. Реакционную смесь перемешивают в течение ночи. Обработку водой и концентрирование осуществляют, используя ту же процедуру и относительные количества веществ, что и в способе A, получая продукт в виде масла оранжевого цвета.

Синтез 4-бензилокси-3,3-диметилбут-1-ина

[00252] В 30 л реактор, снабженный рубашкой, загружают метанол (6 об.), и затем охлаждают до 5°С. В реактор добавляют гидроксид калия (85%, 1,3 экв.). Наблюдается экзотермический эффект (15-20°С) по мере растворения гидроксида калия. Температуру рубашки устанавливают 25°С. Добавляют раствор 4-бензилокси-3,3-диметил-1-триметилсилилбут-1-ина (1,0 экв.) в метаноле (2 об.), и полученную смесь перемешивают до завершения реакции, о чем свидетельствуют данные ВЭЖХ. Типичное время реакции при температуре 25°С составляет 3-4 часа. Реакционную смесь разбавляют водой (8 об.) и затем перемешивают в течение 0,5 часа. Добавляют гексаны (6 об.), и полученную смесь перемешивают в течение 0,5 часа. Фазам дают разделиться, и затем водную фазу (pH 10-11) сливают и удаляют. Органическую фазу промывают раствором KOH (85%, 0,4 экв.) в воде (8 об.), затем водой (8 об.). Органическую фазу затем концентрируют, используя роторный испаритель, получая указанный в заголовке материал в виде масла желто-оранжевого цвета. Обычно степень чистоты указанного материала оказывается примерно 80%, с присутствием в основном одной примеси.

¹H ЯМР (400 МГц, C₆D₆) δ 7,28 (д, 2H, J=7,4 Гц), 7,18 (т, 2H, J=7,2 Гц), 7,10 (д, 1H, J=7,2 Гц), 4,35 (с, 2H), 3,24 (с, 2H), 1,91 (с, 1H), 1,25 (с, 6H).

Синтез N-бензилгликолированного-5-амино-2-(2-бензилокси-1,1-диметилэтил)-6-фториндола

Способ A

Синтез бензилгликолированного 4-амино-2-(4-бензилокси-3,3-диметилбут-1-инил)-5-фторанилина

[00253] Соль бензилгликолированного 4-аммоний-2-бром-5-фторанилинтозилата переводят в свободное основание путем перемешивания твердого вещества в EtOAc (5 об.) и насыщенном растворе NaHCO₃ (5 об.) до тех пор, пока органический слой не становился позрачным. Слои разделяются, и органический слой промывают насыщенным раствором NaHCO₃ (5 об.), затем солевым раствором, и концентрируют в вакууме, получая соль бензилгликолированного 4-аммоний-2-бром-5-фторанилинтозилата в виде масла.

[00254] Затем в колбу загружают соль бензилгликолированного 4-аммоний-2-бром-5-фторанилинтозилата (свободное основание, 1,0 экв.), Pd(OAc) (4,0 моль%), dppb (6,0 моль%) и порошок K₂CO₃ (3,0 экв.), и перемешивают с ацетонитрилом (6 об.) при комнатной температуре. Полученную реакционную смесь дегазируют в течение приблизительно 30 минут, барботируя N₂ при вентиляции. Затем быстро добавляют 4-бензилокси-3,3-диметилбут-1-ин (1,1 экв.), растворенный в ацетонитриле (2 об.), нагревают до 80°С и перемешивают до завершения расходования соли 4-аммоний-2-бром-5-фторанилинтозилата. Реакционную суспензию охлаждают до комнатной температуры, фильтруют через слой целита и промывают ацетонитрилом (2 об.). Фильтрат концентрируют в вакууме, и остаток повторно растворяют в EtOAc (6 об.). Органический слой дважды промывают раствором NH₄C1 (20% масс./об., 4 об.) и солевым раствором (6 об.). Полученный органический слой концентрируют с получением масла коричневого цвета, которое используют как оно есть в следующей реакции.

Синтез N-бензилгликолированного-5-амино-2-(2-бензилокси-1,1-диметилэтил)-6-фториндола

[00255] Сырое масло бензилгликолированного 4-амино-2-(4-бензилокси-3,3-диметилбут-1-илил)-5-фторанилина растворяют в ацетонитриле (6 об.) и добавляют (MeCN)₂PdCl₂ (15 моль%) при комнатной температуре. Полученную смесь дегазируют, используя N₂ с вентилированием, в течение приблизительно 30 минут. Затем реакционную смесь перемешивают при 80°С в атмосфере N₂ в течение ночи. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, фильтруют через слой целлита, и лепешку промывают ацетонитрилом (1 об.). Полученный фильтрат концентрируют в вакууме и повторно растворяют в EtOAc (5 об.). Добавляют Deloxane-II THP (5 масс.% в расчете на теоретический выход N-бензилгликолированного-5-амино-2-(2-бензилокси-1,1-диметилэтил)-6-фториндола) и перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Смесь затем фильтруют через слой силикагеля (фильтр 2,5 дюйма (6,25 см) толщиной, 6 дюймов (15 см) в диаметре) и промывают EtOAc (4 об.). Полученный фильтрат концентрируют до темно-коричневого остатка, и используют, как он есть, в следующей реакции.

[00256] Повторная очистка сырого N-бензилгликолированного-5-амино-2-(2-бензилокси-1,1-диметилэтил)-6-фториндола:

[00257] Сырой N-бензилгликолированный-5-амино-2-(2-бензилокси-1,1-диметилэтил)-6-фториндол растворяют в дихлорметане (~1,5 об.) и фильтруют через слой силикагеля, вначале используя 30% EtOAc/гептан, удаляя примеси. Затем слой силикагеля промывают 50% смесью EtOAc/гептан, выделяя N-бензилгликолированный-5-амино-2-(2-бензилокси-1,1-диметилэтил)-6-фториндол, до тех пор пока слабая окраска наблюдается в фильтрате. Фильтрат концентрируют в вакууме, получая масло коричневого цвета, которое кристаллизуется при стоянии при комнатной температуре.

¹H ЯМР(400 МГц, ДМСО) δ 7,38-7,34 (м, 4H), 7,32-7,23 (м, 6H), 7,21 (д, 1 H, J=12,8 Гц), 6,77 (д, 1H, J=9,0 Гц), 6,06 (с, 1H), 5,13 (д, 1H, J=4,9 Гц), 4,54 (с, 2H), 4,46 (ушир.с, 2H), 4,45 (с, 2H), 4,33 (д, 1 H, J=12,4 Гц), 4,09-4,04 (м, 2H), 3,63 (д, 1H, J=9,2 Гц), 3,56 (д, 1H, J=9,2 Гц), 3,49 (дд, 1H, J=9,8, 4,4 Гц), 3,43 (дд, 1H, J=9,8, 5,7 Гц), 1,40 (с, 6H).

Синтез N-бензилгликолированного-5-амино-2-(2-бензилокси-1,1-диметилэтил)-6-фториндола

Способ B

[00258] В реактор загружают ацетат палладия (33 г, 0,04 eq), dppb (94 г, 0,06 экв.) и карбонат калия (1,5 кг, 3,0 экв.). Свободное основание, масло бензилгликолированного 4-аммоний-2-бром-5-фторанилина (1,5 кг, 1,0 экв.) растворяют в ацетонитриле (8,2 л, 4,1 об.) и затем загружают в реактор. Смесь продувают азотом в течение не менее 1 часа. К смеси добавляют раствор 4-бензилокси-3,3-диметилбут-1-ина (70%, 1,1 кг, 1,05 экв.) в ацетонитриле, затем продувают газообразным азотом в течение не менее 1 часа. Полученную смесь нагревают до 80°С и затем перемешивают в течение ночи. Осуществляют IPC, используя ВЭЖХ, и данные свидетельствуют о завершении реакции после 16 часов. Смесь охлаждают до комнатной температуры, и затем фильтруют через слой целита (228 г). Реактор и слой целита промывают ацетонитрилом (2×2 л, 2 об.). Объединенные фазы концентрируют в 22 л роторном испарителе до тех пор, пока не собирают 8 л растворителя, получая сырой продукт в 7 л (3,5 об.) ацетонитрила.

[00259] Бис-ацетонитрилдихлорпалладий (144 г, 0,15 экв.) загружают в реактор. Сырой раствор переносят обратно в реактор, и колбу роторного испарителя промывают ацетонитрилом (4 л, 2 об.). Объединенные растворы барботируют азотом в течение не менее чем 1 часа. Реакционную смесь нагревают до 80°С в течение не менее чем 16 часов. Процесс контролируют с помощью ВЭЖХ до полного расходования исходного материала. Реакционную смесь фильтруют через целит (300 г). Реактор и фильтровальную лепешку промывают ацетонитрилом (3 л, 1,5 об.). Объединенные фильтраты концентрируют до масла, используя роторный испаритель. Масло растворяют в этилацетате (8,8 л, 4,4 об.). Раствор промывают 20% аммонийхлоридом (5 л, 2,5 об.), затем 5% солевым раствором (5 л, 2,5 об.). Силикагель (3,5 кг, 1,8 масс. экв.) добавляют к органической фазе, и перемешивают в течение ночи. Добавляют акцептор металла Deloxan THP II (358 г), и гептан (17,6 л), и полученную смесь перемешивают в течение не менее чем 3 часов. Смесь фильтруют через воронку из спеченного стекла. Фильтровальную лепешку промывают 30% этилацетатом в гептане (25 л). Объединенные фильтраты концентрируют при пониженном давлении, получая N-бензилгликолированный-5-амино-2-(2-бензилокси-1,1-диметилэтил)-6-фториндол в виде пасты коричневого цвета (1,4 кг).

Синтез бензилзащищенного (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамида

[00260] 1-(2,2-Дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)циклопропанкарбоновую кислоту (1,3 экв.) суспендируют в толуоле (2,5 об., в расчете на 1-(2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)циклопропанкарбоновую кислоту), и смесь нагревают до 60°С. Через капельную воронку добавляют SOCl₂ (1,7 экв.). Полученную смесь перемешивают в течение 2 часов. Толуол и избыток SOCl₂ отгоняют, используя роторный испаритель. Добавляют дополнительно толуол (2,5 об., в расчете на 1-(2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)циклопропанкарбоновую кислоту) и снова перегоняют. Сырой хлорангидрид растворяют в дихлорметане (2 об.) и добавляют через капельную воронку к смеси N-бензилгликолированного 5-амино-2-(2-бензилокси-1,1-диметилэтил)-6-фториндола (1,0 экв.) и триэтиламина (2,0 экв.) в дихлорметане (7 об.), поддерживая температуру 0-3°С (внутренняя температура). Полученную смесь перемешивают при 0°С в течение 4 часов, и затем нагревают до комнатной температуры в течение ночи. К реакционной смеси добавляют дистиллированную воду (5 об.) и перемешивают в течение не менее чем 30 минут, и слои разделяются. Органическую фазу промывают 20 масс.% K₂CO₃ (4 об.×2), затем солевым раствором (4 об.) и концентрируют, получая сырой бензилзащищенный (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамид в виде густого масла коричневого цвета, которое затем очищают, фильтруя через слой силикагеля.

[00261] Фильтрация через слой силикагеля: Сырой бензилзащищенный (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамид растворяют в этилацетате (3 об.) в присутствии активированного угля Darco-G (10 масс.%, в расчете на теоретический выход бензилзащищенного (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамида) и перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. К указанной смеси добавляют гептан (3 об.) и фильтруют через слой силикагеля (2×массу сырого бензилзащищенного (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамида). Слой силикагеля промывают смесью этилацетат/гептан (1:1, 6 об.) или до тех пор, пока фильтрат имеет слабую окраску. Полученный фильтрат концентрируют в вакууме, получая бензилзащищенный (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамид в виде вязкого красновато-коричневого масла, и используют непосредственно на следующей стадии.

[00262] Повторная очистка: Бензилзащищенный (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамид повторно растворяют в дихлорметане (1 об., в расчете на теоретический выход бензилзащищенного (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамида) и помещают на слой силикагеля (2×массу сырого бензилзащищенного (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамида). Слой силикагеля промывают дихлорметаном (2 об., в расчете на теоретический выход бензилзащищенного (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамида), и полученный фильтрат сливают. Слой силикагеля промывают смесью 30% этилацетат/гептан (5 об.), и полученный фильтрат концентрируют в вакууме, получая бензилзащищенный (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамид в виде вязкого красновато-оранжевого масла, которое используют непосредственно на следующей стадии.

Синтез (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамида

Способ A

[00263] 20 л автоклав трижды продувают азотом, и затем в него загружают палладий-на-угле (Evonik E 101 NN/W, 5% Pd, 60% масс., 200 г, 0,075 моль, 0,04 экв.). Затем автоклав трижды продувают азотом. Раствор сырого бензилзащищенного (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамида (1,3 кг, ~1,9 моль) в ТГФ (8 л, 6 об.) добавляют в автоклав с подсосом. Реактор закрывают и затем трижды продувают азотом. При осторожном перемешивании реактор трижды продувают водородом, доводя до атмосферного давления за счет разбавления азотом. Давление в автоклаве доводят до 3 бар водородом, скорость перемешивания увеличивают до 800 об/мин. Наблюдается быстрое расходование водорода (растворение). После того как расходование прекращается, реактор нагревают до 50°С.

[00264] В целях безопасности термостат отключают в конце каждого рабочего дня. Давление в реакторе доводят до 4 бар водородом, и затем отключают от резервуара с водородом.

[00265] После двух полных дней реакции к смеси добавляют еще Pd/C (60 г, 0,023 моль, 0,01 экв.). Это осуществляют, трижды продувая азотом, и после этого добавляют катализатор через впускное отверстие для ввода твердых веществ. Реакцию ведут по прежней схеме. После 4 полных дней реакция по данным ВЭЖХ завершается, о чем свидетельствует исчезновение не только исходного материала, но также и пика, соответствующего монобензилированному промежуточному соединению.

[00266] Реакционную смесь фильтруют через слой целита. Реактор и фильтровальную лепешку промывают ТГФ (2 л, 1,5 об.). Затем слой целита смачивают водой, и фильтровальную лепешку удаляют. Объединенный фильтрат и ТГФ промывки концентрируют, используя роторный испаритель, получая сырой продукт в виде масла черного цвета, 1 кг.

[00267] Эквиваленты и объемы следующей схемы очистки даны в расчете на 1 кг сырого материала. Сырое черное масло растворяют в смеси 1:1 этилацетат:гептан. Смесь переносят на слой силикагеля (1,5 кг, 1,5 масс. экв.) в воронке из спекшегося стекла, которое было насыщено смесью 1:1 этилацетат:гептан. Слой силикагеля вначале промывают смесью 1:1 этилацетат:гептан (6 л, 6 об.) и затем чистым этилацетатом (14 л, 14 об.). Элюент собирают 4 фракциями, которые анализируют, используя ВЭЖХ.

[00268] Эквиваленты и объемы для следующей схемы очистки даны в расчете на 0,6 кг сырого материала. Фракцию 3 концентрируют в роторном испарителе, получая пену коричневого цвета (600 г), и затем повторно растворяют в MTBE (1,8 л, 3 об.). Темно-коричневый раствор перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, причем за это время происходит кристаллизация. Добавляют гептан (55 мл, 0,1 об.), и полученную смесь перемешивают в течение ночи. Полученную смесь фильтруют, используя воронку Бюхнера, и фильтровальную лепешку промывают смесью 3:1 MTBE:гептан (900 мл, 1,5 об.). Фильтровальную лепешку сушат воздухом в течение 1 часа, и затем сушат в вакууме при комнатной температуре в течение 16 часов, получая 253 г (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамида в виде не совсем белого твердого вещества.

[00269] Эквиваленты и объемы следующей схемы очистки даны в расчете на 1,4 кг сырого материала. Фракции 2 и 3 из проведенной выше фильтрации на силикагеле, также как материал из предыдущей реакции, объединяют и концентрируют, получая 1,4 кг масла черного цвета. Смесь повторно очищают, используя фильтрацию через силикагель, (1,5 кг силикагеля, элюируя 3,5 л, 2,3 об. смесью 1:1 этилацетат:гептан, затем 9 л, 6 об. чистого этилацетата), как раскрыто выше, получая после концентрирования пенистое, желто-коричневое твердое вещество (390 г).

[00270] Эквиваленты и объемы для следующей схемы очистки даны в расчете на 390 г сырого материала. Желто-коричневое тведое вещество оказалось нерастворимым в MTBE, поэтому его растворяют в метаноле (1,2 л, 3 об.). Используя 4 л реактор Мортона, снабженный длинным дефлегатором, смесь перегоняют до 2 об., добавляют MTBE (1,2 л, 3 об.), и полученную смесь снова перегоняют до 2 об., добавляют вторую порцию MTBE (1,6 л, 4 об.), и полученную смесь снова перегоняют до 2 об. Добавляют третью порцию MTBE (1,2 л, 3 об.), и полученную смесь снова перегоняют до 3 объемов. Анализ дистиллята с использованием ГХ показал, что в дистилляте содержится ~6% метанола. Температуру в термостате устанавливают 48°С (ниже температуры кипения азеотропа MTBE-метанол, которая равна 52°С). Смесь охлаждают до 20°С в течение 2 часов, причем в течение этого времени происходит относительно быстрая кристаллизация. После перемешивания полученной смеси в течение 2 часов, добавляют гептан (20 мл, 0,05 об.), и полученную смесь перемешивают в течение ночи (16 часов). Смесь фильтруют, используя воронку Бюхнера, и фильтровальную лепешку промывают смесью 3:1 MTBE:гептан (800 мл, 2 об.). Фильтровальную лепешку сушат воздухом в течение 1 часа, затем сушат в вакууме при комнатной температуре в течение 16 часов, получая 130 г (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамида в виде не совсем белого твердого вещества.

Способ B

[00271] Бензилзащищенный (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамид растворяют в ТГФ (3 об.), и затем отпаривают досуха для удаления всех остатков растворителя. Бензилзащищенный (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5- ил)циклопропанкарбоксамид повторно растворяют в ТГФ (4 об.) и добавляют в гидрогенизатор, содержащий 5 масс.% Pd/C (2,5 моль%, 60% влажность, Degussa E5 E101 NN/W). Внутреннюю температуру реакционной смеси доводят до 50°С, и продувают N₂ (×5), затем водородом (×3). Давление в гидрогенизаторе устанавливают 3 бар водорода, и смесь быстро перемешивают (>1 100 об/мин). В конце реакции катализатор отфильтровывают через слой целита и промывают ТГФ (1 об.). Фильтрат концентрируют в вакууме, получая коричневый пенистый остаток. Полученный остаток растворяют в MTBE (5 об.) и добавляют 0,5 N раствор HCl (2 об.) и дистиллированную воду (1 об.). Смесь перемешивают в течение не менее чем 30 минут, и образовавшиеся слои разделяют. Органическую фазу промывают 10 масс.% раствором K₂CO₃ (2 об.×2), затем солевым раствором. Органический слой помещают в колбу, содержащую силикагель (25 масс.%), Deloxan-THP II (5 масс.%, 75% влажность) и Na₂SO₄ и перемешивают в течение ночи. Полученную смесь фильтруют через слой целита и промывают смесью 10% ТГФ/MTBE (3 об.). Фильтрат концентрируют в вакууме, получая сырой (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамид в виде пены бледно желто-коричневого цвета.

Выделение (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамида из маточного раствора: Вариант A

[00272] Фильтрация через слой силикагеля: Маточный раствор концентрируют в вакууме, получая пену коричневого цвета, растворяют в дихлорметане (2 об.) и фильтруют через слой силикагеля (3×массу сырого (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамида). Слой силикагеля промывают смесью этилацетат/гептан (1:1, 13 об.), и фильтрат сливают. Слой силикагеля промывают смесью 10% ТГФ/этилацетат (10 об.), и фильтрат концентрируют в вакууме, получая (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамид в виде пены бледного желто-коричневого цвета. После раскрытой выше процедуры кристаллизации выделяют оставшийся (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамид.

Выделение из маточного раствора (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамида: Вариант B

[00273] Хроматография на колонке с силикагелем: после хроматографической обработки на силикагеле (50% этилацетат/гексаны до 100% этилацетата), целевое соединение выделяют в виде пены бледного желто-коричневого цвета. После раскрытой выше процедуры кристаллизации выделяют оставшийся (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамид.

Дополнительная перекристаллизация (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамида

[00274] Твердый (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамид (1,35 кг) суспендируют в IPA (5,4 л, 4 об.) и затем нагревают до 82°С. После завершения растворения (визуально) медленно добавляют гептан (540 мл, 0,4 об.). Смесь охлаждают до 58°С. Затем смесь медленно охлаждают до 51°С, причем за это время происходит кристаллизация. Источник тепла выключают, и смеси после перекристаллизации дают остыть естественным образом в течение ночи. Смесь фильтруют, используя лабораторную воронку Бюхнера, и фильтровальную лепешку промывают IPA (2,7 л, 2 об.). Фильтровальную лепешку сушат в воронке потоком воздуха в течение 8 часов, и затем в термостате в вакууме сушат при 45-50°С в течение ночи, получая 1,02 кг перекристаллизованного (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамида. ЖХ/МС (M+1) 521,5. ЖХ/RT (мин) 1,69.

¹H ЯМР (400,0 МГц, CD₃CN) δ 7,69 (д, J=7,7 Гц, 1H), 7,44 (д, J=1,6 Гц, 1H), 7,39 (дд, J=1,7, 8,3 Гц, 1H), 7,31 (с, 1H), 7,27 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,20 (д, J=12,0 Гц, 1H), 6,34 (с, 1H), 4,32 (д, J=6,8 Гц, 2H), 4,15-4,09 (м, 1H), 3,89 (дд, J=6,0, 11,5 Гц, 1H), 3,63-3,52 (м, 3H), 3,42 (д, J=4,6 Гц, 1H), 3,21 (дд, J=6,2, 7,2 Гц, 1H), 3,04 (т, J=5,8 Гц, 1H), 1,59 (дд, J=3,8, 6,8 Гц, 2H), 1,44 (с, 3H), 1,33 (с, 3H) и 1,18 (дд, J=3,7, 6,8 Гц, 2H) м.д.

[00275] (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамид можно также получить одним из нескольких способов синтеза, раскрытых в патентной заявке США 20090131492, включенной в описание посредством ссылки.

Синтез 1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-((4R)-8-фтор-2-гидрокси-4-(гидроксиметил)-1,1-диметил-1,2,4,5-тетрагидро-[1,4]оксазепино[4,5-a]индол-9- ил)циклопропанкарбоксамида

Способ A

[00276] (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамид (11,5 ммоль, 1 экв.) суспендируют в DCM (51 мл, 8,5 об.). Раствор периодинана Десс-Мартина (0,3 M в DCM, 12,8 ммоль, 1,1 экв.) добавляют при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивают до тех пор, пока по данным ВЭЖХ реакция не завершается. Добавляют 5% водный раствор сульфита натрия, и смесь перемешивают в течение вплоть до 4 часов. Фазы разделяются, и затем органическую фазу промывают 1 N HCl, солевым раствором и затем концентрируют в роторном испарителе. Остаток очищают, используя хроматографию. Выход очищенного материала составляет 7 и 15%.

Способ В

[00277] (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамид (48,03 ммоль, 1 экв.) растворяют в этилацетате (1,25 л, 50 об.) и нагревают. Пиридинийдихромат на подложке силикагеля (Si-PDC, 48,03 ммоль, 1 экв.) загружают в перемешиваемый горячий раствор. Реакционную смесь перемешивают до тех пор, пока по данным ВЭЖХ реакция не завершается. Реакционную смесь фильтруют через слой силикагеля, и фильтровальную лепешку промывают этилацетатом (2×100 мл, 2×4 об.). Маточный раствор концентрируют в роторном испарителе, и остаток очищают, используя хроматографию. Выход очищенного материала составляет 13,5%.

Синтез (R)-2-(5-(1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)циклопропанкарбоксамидо)-1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-1H-индол-2-ил)-2-метилпропановой кислоты

[00278] 3,62 г 1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-((4R)-8-фтор-2-гидрокси-4-(гидроксиметил)-1,1-диметил-1,2,4,5-тетрагидро[1,4]оксазепино[4,5-α]индол-9-ил)циклопропанкарбоксамид загружают в 1 л колбу вместе с 600 мл толуола и перемешивают до растворения. 14,5 г Ag₂CO₃ в целите. Гетерогенную суспензию нагревают до 90°С и выдерживают в течение 7 часов при указанной температуре. Затем суспензию оставляют охлаждаться в естественных условиях до комнатной температуры и фильтруют через целит. Целит промывают этилацетатом до тех пор, пока по данным ВЭЖХ в этилацетате больше не наблюдается продукт, получая 1,24 г сырого лактона.

[00279] Очистку сырого лактона осуществляют, используя флэш-хроматографию. Во флэш-колонку загружают 22 г силикагеля. Используя смесь 35:65 (этилацетат:гексаны), собирают фракции по 15-20 мл. Объединяя обогащенные лактоном фракции, получают 860 мг сырого лактона. 860 мг сырого лактона растворяют в 6 мл этилацетата. Порциями добавляют 2 N NaOH, одновременно контролируя по данным ВЭЖХ завершение гидролиза (остается <5% лактона). Для завершения гидролиза требуется 1,3 мл 2 N NaOH (остается менее <5% лактона). pH водн. = 10-11. Величину pH снижают до 3-4, добавляя 0,5 мл 2 N HCl. Двухфазную смесь перемешивают в течение 15 минут, и слои оставляют разделяться. Органический слой, содержащий продукт (ВЭЖХ водного слоя не показывает продукта) промывают 3 мл H₂O, сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют, получая 435 мг (R)-2-(5-(1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)циклопропанкарбоксамидо)-1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-1H-индол-2-ил)-2-метилпропановой кислоты. ЖХ/МС M+1 = 535,14.

Альтернативный синтез (R)-2-(5-(1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)циклопропанкарбоксамидо)-1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-1H-индол-2-ил)-2-метилпропановой кислоты

Стадия 1. Получение

[00280] (R)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-2-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил)-1H-индол-5-ил)циклопропанкарбоксамид (50 г, 1,0 экв.) суспендируют в дихлорметане (700 мл, 14 об.), и затем охлаждают до -10°С. Добавляют твердый карбонилдиимидазол (CDI, 34,2 г, 2,2 экв). Для определения завершения реакции используют данные ВЭЖХ. К смеси добавляют воду (1 л, 20 об.), и фазы разделяют. Растворитель органической фазы меняют на ТГФ, и полный объем доводят до 500 мл (10 об.). К раствору ТГФ добавляют 2 M HCl (400 мл, 8 об.). Полученную смесь перемешивают до тех пор, пока все пики по данным ВЭЖХ не сливаются в один (приблизительно 4 часа). К смеси добавляют толуол (700 мл, 14 об.), что вызывает разделение фаз. Органическую фазу промывают водой (400 мл, 8 об.). Органическую фазу концентрируют при пониженном давлении, получая пену светлого желто-коричневого цвета. Пену суспендируют в изопропилацетате (IPA, 700 мл, 14 об.) и нагревают до 80°С. Добавляют н-гептан (236 мл, 4,7 об.) с такой скоростью, чтобы поддерживать температуру выше 75°С. Полученную смесь охлаждают до 20°С со скоростью 10-15°С в час. Кристаллизация происходит приблизительно при 65°С. Затем смесь фильтруют. Твердое вещество промывают смесью 1:1 IPA:гептан (120 мл, 2,4 об.) и сушат в вакууме при 55°С в течение 6 часов.

Стадия 2. Получение

[00281] Продукт со стадии 1 растворяют в дихлорметане (110 мл 20 об.), и затем охлаждают до 10°С. N,N-диизопропилэтиламин (7,0 мл, 4 экв.) добавляют к смеси. Затем в течение 20 минут добавляют раствор комплекса SO₃·пиридин (3,3 г, 2 экв.) в ДМСО (11 мл, 2 об.) с такой скоростью, чтобы поддерживать внутреннюю реакционную температуру между 0-10°С. Когда реакция завершается по данным ВЭЖХ анализа, к смеси добавляют воду (55 мл, 10 об.) с такой скоростью, чтобы поддерживать внутреннюю температуру между 0-10°С. Наблюдается некоторое выделение газа. Затем реакционную смесь нагревают до 25°С. Фазы разделяются, и органическую фазу промывают 1 M HCl (220 мл, 40 об.) и затем NaHCO₃ (220 мл, 40 об.). Смесь концентрируют при пониженном давлении, получая пену белого цвета, которую используют без дополнительной очистки.

[00282] В альтернативной процедуре продукт со стадии 1 (43,5 г, 79,1 ммоль) растворяют в толуоле (305 мл, 7 об.). Раствор концентрируют до удаления остатков IPA. Затем оставшееся твердое вещество растворяют в дихлорметане (305 мл, 7 об.). Добавляют 2-метил-2-бутен (11,2 г, 159 ммоль, 2,0 экв.), 2,4,6-коллидин (19,3 г, 159 ммоль, 2,0 экв.) и PhSNH-t-Bu (2,9 г, 16 ммоль, 0,20 экв.). Смесь охлаждают до температуры -5-0°С. Добавляют N-хлорсукцинимид (11,9 г, 89 ммоль, 1,12 экв.) порциями по 0,5-1 г, поддерживая внутреннюю температуру менее чем 2°С. После завершения реакции к смеси добавляют водный раствор HCl (2 M, 151 мл, 3,5 об.). Смесь перемешивают в течение 0,5 часа, нагревая при этом до комнатной температуры. Перемешивание прекращают, и фазы разделяют. Органическую фазу промывают 5% Na₂SO₃ (200 мл, 4,6 об.), и затем водой (200 мл, 4,6 об.). Органическую фазу затем концентрируют до масла оранжевого цвета, которое переносят в изопропанол (270 мл, 6,2 об.). Смесь нагревают до 71°С для растворения масла, и затем охлаждают до 40°С со скоростью приблизительно 10°С/час, и затем до 25°С со скоростью 5°С/час. Смесь фильтруют, используя воронку Бюхнера. Влажную фильтровальную лепешку промывают изопропанолом (131 мл, 3 об.). Тведый продукт сушат в вакууме при 65°С в течение ночи.

Стадия 3. Получение

[00283] Альдегид со стадии 2 растворяют в ацетоне (20 об.), и смесь охлаждают до 0°С. Медленно добавляют перманганат натрия (NaMnO₄, 40% раствор в воде, 1,1 экв.). За ходом реакции следят с помощью ВЭЖХ. Когда по данным анализа ВЭЖХ реакция завершается, медленно добавляют воду (10 об.), при этом из раствора выпадает твердый осадок. Смесь фильтруют. Твердое вещество промывают ацетоном. Объединенные слои ацетона концентрируют, получая продукт в виде натриевой соли в виде пены оранжевого цвета.

[00284] В альтернативной процедуре альдегид со стадии 2 (35 г, 64,3 ммоль) растворяют в ацетоне (210 мл, 6 об.). Полученную смесь концентрируют для удаления остатков IPA. Оставшуюся пену растворяют в ацетоне (350 мл, 10 об.), и полученный раствор охлаждают до температуры -5-0°С. Добавляют 10 равными порциями NaMnO₄ (40 масс.%, d=1,391 г/мл, 17,22 мл, 1,05 экв.), поддерживая температуру смеси менее чем 5°С. Реакционную смесь перемешивают до завершения реакции по данным ВЭЖХ (приблизительно 30 минут). Затем к смеси медленно добавляют воду (350 мл, 10 об.) и целит, контролируя температуру. Смесь перемешивают при 0°С в течение 1 часа, и затем фильтруют через целит. Влажную коричневую лепешку MnO₂ промывают смесью 1:1 ацетон:вода (150 мл, 4,3 об.). Ацетон удаляют из объединенных фильтратов перегонкой. NaCl (приблизительно 17,5 г, 0,5 масс. экв.) добавляют к водной фазе (приблизительно 5 масс.% в воде). Водную фазу экстрагируют 2-метилтетрагидрофураном (350 мл, 10 об.). Органическую фазу азеотропно сушат 2-метилтетрагидрофураном с получением суспензии. Полученную смесь концентрируют, получая сырое масло оранжевого цвета, которое суспендируют в этаноле (350 мл, 10 об.) и затем перемешивают в течение 1 часа. Затем полученную смесь фильтруют через слой целита. Лепешку промывают этанолом (70 мл, 2 об.). Растворитель заменяют ацетонитрилом, причем в это время происходит кристаллизация. Смесь фильтруют, используя воронку Бюхнера. Полученный продукт, твердое вещество белого цвета, промывают ацетонитрилом (70 мл, 2 об.), сушат в вакууме при 55°С в течение ночи.

Стадия 4. Получение (R)-2-(5-(1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)циклопропанкарбоксамидо)-1-(2,3-дигидроксипропил)-6-фтор-1H-индол-2-ил)-2-метилпропановой кислоты

[00285] Продукт со стадии 3 (5 г, 8,6 ммоль) растворяют в метаноле (200 мл) и добавляют карбонат натрия (Na₂CO₃, 15 г, 17 экв.). Смесь перемешивают до тех пор, пока реакция не завершается по данным ВЭЖХ, обычно приблизительно 24 часа. Реакционную смесь фильтруют, используя воронку Бюхнера. Растворитель заменяют на воду, и объем доводят до 50 мл (10 об.). Добавляют ацетонитрил (50 мл, 10 об.). Воду из смеси медленно азеотропно удаляют вакуумной перегонкой при 35°С. Ацетонитрил непрерывно заменяют в перегонном аппарате до тех пор, пока твердый материал не начинает осаждаться. Осадок отфильтровывают, используя воронку Бюхнера. Фильтрации повторяют до тех пор, пока по данным ВЭЖХ продукт не оказывается чистым. Смесь концентрируют, получая пену светло-коричневого цвета. Твердый материал суспендируют в IPA и затем нагревают до 60°С в течение 2 часов. Суспензию снова охлаждают до 25°С и затем перемешивают в течение 1 часа. Смесь фильтруют, используя воронку Бюхнера, и фильтровальную лепешку промывают IPA (10 мл, 2 об.). Твердое вещество сушат в вакууме при 60°С в течение по меньшей мере 24 часов или до тех пор, пока содержание IPA не становится меньше, чем 0,5 массовых процентов по данным¹H-ЯМР анализа.

[00286] В альтернативной процедуре Na соль продукта со стадии 3 (17,5 г, 28 ммоль, 1,0 экв.) растворяют в метаноле (105 мл, 6 об.) и добавляют безводный карбонат натрия (15,1 г, 142 ммоль, 5 экв.). Реакционную смесь фильтруют через слой целита. Фильтровальную лепешку промывают метанолом (35 мл, 2 об.). Смесь концентрируют до конечной массы 63 г. К смеси добавляют ацетонитрил 53 мл, 3 об.). Мутный раствор фильтруют, используя воронку Бюхнера, получая прозрачный раствор. Смесь перегоняют до половины объема. К смеси медленно добавляют ацетонитрил (70 мл, 4 об.), при этом продукт кристаллизуется за приблизительно 5 минут. Последние две стадии можно дополнительно повторить 1-2 раза при необходимости. Смесь затем перемешивают в течение не менее 2 часов. Белую суспензию фильтруют, используя воронку Бюхнера. Фильтровальную лепешку промывают ацетонитрилом (35 мл, 2 об.). Твердый продукт, натревую соль, сушат в вакууме при 55°С в течение ночи.

[00287] В приведенной ниже таблице 1 представлены аналитические данные для 1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-((4R)-8-фтор-2-гидрокси-4-(гидроксиметил)-1,1-диметил-1,2,4,5-тетрагидро[1,4]оксазепино[4,5-α]индол-9-ил)циклопропанкарбоксамида.

[00288] Анализы для определения и измерения характеристик коррекции ΔF508-CFTR соединениями

Оптические методы определения мембранного потенциала для оценки характеристик модуляции ΔF508-CFTR соединениями.

В анализе используют красители, восприимчивые к потенциалу флуоресценции для измерения изменений мембранного потенциала, используя флуоресцентный планшетный ридер (например, FLIPR III, Molecucular Devices, Inc.) в качестве устройства для считывания данных о повышении функциональности ΔF508-CFTR в NIH 3T3 клетках. Движущей силой реакции является создание градиента хлоридных ионов вместе с активацией каналов посредством одной стадии добавления жидкости после того, как клетки ранее были обработаны соединениями и затем нагружены восприимчивым к потенциалу красителем.

Идентификация корректирующих соединений

Для идентификации малых молекул, которые корректируют дефект трафика, связанный с ΔF508-CFTR; был разработан формат анализа HTS с однократным добавлением. Аналитические планшеты, содержащие клетки, инкубируют в течение ~2-4 часов в инкубаторе для тканевых культур при 37^oC, 5% CO₂, 90% влажности. Затем клетки готовы для экспонирования соединениям после прилипания ко дну аналитических планшетов.

Клетки инкубируют в не содержащей сыворотки среде в течение 16-24 часов в инкубаторе для культуры тканей при 37^oC, 5% CO₂, 90% влажности в присутствии или в отсутствие (негативный контроль) тестируемых соединений. Затем клетки трижды промывают раствором Кребса-Рингера и нагружают красителем, перераспределяющим восприимчивость к потенциалу. Для активации ΔF508-CFTR, 10 мкМ форсколина и CFTR потенциатора, генистеина (20 мкМ), добавляют в каждую лунку вместе с не содержащей Cl^- средой. Добавление не содержащей Cl^-среды промотирует Cl^-истечение в ответ на активацию ΔF508-CFTR, и результирующую мембранную деполяризацию оптически регистрируют, используя восприимчивые к потенциалу красители, содержащие датчики напряжения.

Идентификация потенциаторных соединений

Для идентификации потенциаторов ΔF508-CFTR был разработан формат анализа HTS с двойным добавлением. В указанном HTS анализе используют флуоресцентные красители восприимчивые к потенциалу для измерения изменений мембранного потенциала на FLIPR III, в качестве измерения повышения синхронизации (проводимости) ΔF508 CFTR в корректируемых температурой ΔF508 CFTR NIH 3T3 клетках. Движущей силой для реакции является градиент ионов Cl^- вместе с активацией каналом с форсколином в одной стадии добавления жидкости, используя флуоресцентный планшетный ридер, такой как FLIPR III, после того как клетки были заранее обработаны потенциаторными соединениями (или ДМСО как средством доставки в качестве контроля) и затем нагружены перераспределяющим красителем. Растворы:

Раствор в ванне № 1: (в мМ) NaCl 160, KC1 4,5, CaCl₂ 2, MgCl₂ 1, HEPES 10, pH 7,4 с NaOH.

Не содержащий хлорида раствор в ванне: Хлоридные соли в растворе в ванне № 1 заменены на глюконатные соли.

Клеточная культура

Мышиные фибробласты NIH3T3, стабильно экспрессирующие ΔF508-CFTR, используют для оптических измерений мембранных потенциалов. Клетки содержат при 37°С в 5% CO₂ и 90% влажности в модифицированной способом Дульбекко среде Игла, дополненной 2 мМ глутамина, 10% фетальной телячьей сывороткой, 1×NEAA, β-ΜΕ, 1×пенициллин/стрептамицин и 25 мМ HEPES в 175 см² культуральных флаконах. Для всех оптических анализов клетки высевают в количестве ~20000/лунку в покрытые матригелем 384-луночные планшеты и культивируют в течение 2 часов при 37°С перед тем, как культивируют при 27°С в течение 24 часов для потенциаторного анализа. Для коррекции анализов клетки культивируют при 27°С или 37°С с соединениями или без соединений в течение 16-24 часов. Электрофизиологические анализы для оценки характеристик модулирования ΔF508-CFTR соединениями.

1. Анализ в камере Уссинга

Эксперименты в камере Уссинга осуществляют на поляризованных эпителиальных клетках дыхательных путей, экспрессирующих ΔF508-CFTR для дальнейшей характеризации ΔF508-CFTR модуляторов, идентифицированных в оптических анализах. Не-CF и CF эпителий дыхательных путей выделяют из бронхиальных тканей, культивируют как было раскрыто выше (Galietta, L.J.V., Lantero, S., Gazzolo, A., Sacco, O., Romano, L., Rossi, G.A., & Zegarra-Moran, O. (1998) In Vitro Cell. Dev. Biol. 34, 478-481), и высевают на Costar® Snapwell™ фильтры, на которые предварительно была нанесена NIH3T3-кондиционная среда. После четырех дней апикальную среду удаляют, и клетки выращивают на границе раздела воздух-жидкость в течение >14 дней до использования. Это приводит к образованию монослоя полностью дифференцированных столбчатых эпителиальных клеток, которые были опушены ресничками, что является характеристичным для клеток эпителия дыхательных путей. Не-CF HBE были выделены у некурящих пациентов, у которых не было никаких заболеваний легких. CF-HBE были выделены у пациентов гомозиготных в отношении ΔF508-CFTR.

HBE, выращенные на вставках клеточной культуры Costar® Snapwell™, помещают в камеру Уссинга (Physiologic Instruments, Inc., San Diego, CA), и трансэпителиальное сопротивление и ток короткого замыкания в присутствии базолатерального к апикальному градиента Cl^- (I_SC) измеряют, используя систему фиксации напряжения (Department of Bioengineering, University of Iowa, I A). Кратко, HBE исследуют в условиях записи фиксации напряжения (V_{удержания} = 0 мВ) при 37°С. Базолатеральный раствор содержит (в мМ) 145 NaCl, 0,83 K₂HPO₄, 3,3 KH₂PO₄, 1,2 MgCl₂, 1,2 CaCl₂, 10 глюкоза, 10 HEPES (pH доводят до 7,35, используя NaOH) и апикальный раствор содержит (в мМ) 145 глюконата Na, 1,2 MgCl₂, 1,2 CaCl₂, 10 глюкозы, 10 HEPES (pH доводят до 7,35, используя NaOH).

Идентификация корректирующих соединений

Типичный протокол использует базолатеральный-апикальный мембранный градиент концентраций Cl^-. Для создания указанного градиента используют нормальный раствор Рингера на базолатеральной мембране, тогда как апикальный NaCl заменяют эквимолярным количеством глюконата натрия (титруют до pH 7,4 с использованием NaOH), получая значительный градиент концентраций Cl^- через эпителий. Все эксперименты осуществляют с интактными монослоями. Для полной активации ΔF508-CFTR с апикальной стороны добавляют форсколин (10 мкМ), ингибитор PDE, IBMX (100 мкМ) и потенциатор CFTR, генистеин (50 мкМ).

Как наблюдалось на других типах клеток, инкубирование при низких температурах FRT клеток и эпителиальных клеток бронхов человека, выделенных у больных CF пациентов (CF-HBE), экспрессирующих ΔF508-CFTR, повышает функциональную плотность CFTR в плазменной мембране. Для определения активности корректирующих соединений клетки инкубируют с тестируемым соединением в течение 24-48 часов при 37°С и затем промывают 3× перед регистрацией. цАМФ- и генистеин-опосредованные I_SC в клетках, обработанных соединениями, нормализуют до 37°С контролей и выражают как процент активности CFTR активности в wt-HBE (человеческий бронхиальный эпителий дикого типа). Предварительное инкубирование клеток с корректирующим соединением значительно повышает цАМФ- и генистеин-опосредованные I_sc по сравнению с 37°С контролями.

Идентификация потенциаторных соединений

В типичном протоколе используют базолатеральный-апикальный мембранный градиент концентраций Cl^-. Для создания указанного градиента используют нормальные растворы Рингера со стороны базолатеральной мембраны, тогда как апикальный NaCl заменяют эквимолярным количеством глюконата натрия (титрованного до pH 7,4 с использованием NaOH), получая существенный градиент концентрации Cl^- через эпителий. С апикальной стороны вставок клеточных культур добавляют форсколин (10 мкМ) и все тестируемые соединения. Эффективность предполагаемых потенциаторов ΔF508-CFTR сравнивают с эффективностью известного потенциатора, генистеина.

2. Результаты метода пэтч-кламп

Полный ток Cl^- в ΔF508-NIH3T3 клетках регистрируют, используя конфигурацию регистрации перфорированных пэтчей, как было раскрыто ранее (Rae, J., Cooper, K., Gates, P., & Watsky, M. (1991) J. Neurosci. Methods 37, 15-26). Значения фиксации напряжения определяют при 22°С, используя пэтч-кламп усилитель Axopatch 200B (Axon Instruments Inc., Foster City, CA). Вводимый пипеткой раствор содержит (в мМ) 150 N-метил-D-глюкамина (NMDG)-Cl, 2 MgCl₂, 2 CaCl₂, 10 EGTA, 10 HEPES и 240 мкг/мл амфотерицина-B (pH доводят до 7,35, используя HCl). Внеклеточная среда содержит (в мМ) 150 NMDG-Cl, 2 MgCl₂, 2 CaCl₂, 10 HEPES (pH доводят до 7,35, используя HCl). Генерацию импульсов, накопление данных и их анализ осуществляют, используя PC, снабженный интерфейсом Digidata 1320 A/D, соединенным с Clampex 8 (Axon Instruments Inc.). Для активации ΔF508-CFTR, 10 мкМ форсколина и 20 мкМ генистеина добавляют в ванну, и отношение ток-напряжение регистрируют каждые 30 секунд.

Идентификация корректирующих соединений

Для определения активности корректирующих соединений для повышения плотности функциональных ΔF508-CFTR в плазменной мембране, используют вышеописанную методику регистрации перфорированных пэтчей для измерения плотности тока с последующей 24-часовой обработкой корректирующими соединениями. Для осуществления полной активации ΔF508-CFTR, к клеткам добавляют 10 мкМ форсколина и 20 мкМ генистеина. В существующих условиях регистрации плотность тока после 24-часового инкубирования при 27°С оказалась выше, чем плотность, которую наблюдают после 24-часового инкубирования при 37°С. Указанные результаты согласуются с известными эффектами низкотемпературного инкубирования в отношении плотности ΔF508-CFTR в плазменной мембране. Для определения эффектов корректирующих соединений на CFTR плотность тока, клетки инкубируют с 10 мкМ тестируемого соединения в течение 24 часов при 37°С, и плотность тока сравнивают с плотностью при 27°С и при 37°С для контролей (% активности). Перед регистрацией клетки промывают 3× внеклеточной регистрационной средой для удаления любых остатков тестируемого соединения. Предварительное инкубирование с 10 мкМ корректирующих соединений значительно повышает цАМФ- и генистеин-зависимые токи по сравнению с токами при 37°С для контролей.

Идентификация потенциаторных соединений

Способность потенциаторов ΔF508-CFTR повышать макроскопический ΔF508-CFTR Cl^- ток (I_ΔF508) в NIH3T3 клетках, стабильно экспрессирующих ΔF508-CFTR, также исследуют, используя методики регистрации перфорированных-пэтчей. Потенциаторы, идентифицированные на основании оптических анализов, вызывают дозозависимое повышение Ι_ΔF508 с таким же потенциалом и эффективностью, что наблюдались в оптических анализах. Для всех исследованных клеток обратный потенциал до и во время использования потенциаторов составляет примерно -30 мВ, что является расчетным значением E_Cl (-28 мВ).

Клеточная культура

Фибробласты мышей NIH3T3, стабильно экспрессирующие ΔF508-CFTR, используют для получения данных для целых клеток. Клетки поддерживают при 37°С в 5% CO₂ и 90% влажности в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла, дополненной 2 мМ глутамина, 10% фетальной телячьей сыворотки, 1×NEAA, β-ΜΕ, 1×пенициллин/стрептомицин и 25 мМ HEPES в 175 см² культуральных флаконах. Для цельноклеточного анализа 2500-5000 клеток высевают на покрытые поли-L-лизином стеклянные покровные стекла и культивируют в течение 24-48 часов при 27°С, перед тем как используют для тестирования активности потенциаторов; и инкубируют в присутствии корректирующего соединения или без них при 37°С для измерения активности корректоров.

3. Одноканальная регистрация

Активность открытия wt-CFTR и корректируемых температурой ΔF508-CFTR, экспрессируемых в NIH3T3 клетках, наблюдают, используя данные мембранных пэтчей, вырезанных с обратной стороны мембраны, как было раскрыто выше (Dalemans, W., Barbry, P., Champigny, G., Jallat, S., Dott, K., Dreyer, D., Crystal, R.G., Pavirani, A., Lecocq, J-R, Lazdunski, M. (1991) Nature 354, 526-528), используя пэтч-кламп усилитель Axopatch 200B (Axon Instruments Inc.). Содержимое пипетки (в мМ): 150 NMDG, 150 аспарагиновой кислоты, 5 CaCl₂, 2 MgCl₂ и 10 HEPES (pH доводят до 7,35 используя Трис-основание). Ванна содержит (в мМ): 150 NMDG-Cl, 2 MgCl₂, 5 EGTA, 10 TES и 14 Трис-основания (pH доводят до 7,35, используя HCl). После иссечения, как wt-, так и ΔF508-CFTR активируют, добавляя 1 мМ Mg-ATP, 75 нМ каталитических субъединиц цАМФ-зависимой протеинкиназы (PKA; Promega Corp. Madison, WI), и 10 мМ NaF, для ингибирования протеинфосфатаз, что предотвращает снижение тока. Потенциал пипетки поддерживают при 80 мВ. Активность каналов анализируют из мембранных пэтчей, содержащих ≤2 активных каналов. Максимальное число одновременных открытий определяет число активных каналов во время эксперимента. Для определения амплитуды одноканального тока результаты, зарегистрированные после 120 сек активности ΔF508-CFTR, фильтруют как "off-line" при 100 Гц, и затем используют для построения гистограмм амплитуд по всем точкам, которые выравнивают по мультигауссовым функциям, используя программное обеспечение Bio-Patch Analysis software (Bio-Logic Comp. France). Полный микроскопический ток и вероятность открытия (P₀) определяют после 120 сек активности каналов. P₀ определяют, используя программное обеспечение Bio-Patch или из отношения P₀ = I/i(N), где I = средний ток, i = амплитуда одноканального тока, и N = число активных каналов в пэтче.

Клеточная культура

Фибробласты мышей NIH3T3, стабильно экспрессирующие ΔF508-CFTR, используют для мембранных пэтч-кламп результатов. Клетки поддерживают при 37°С в 5% CO₂ и 90% влажности в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла, дополненной 2 мМ глутамина, 10% фетальной телячьей сыворотки, 1×NEAA, β-ΜΕ, 1×пенициллин/стрептомицин и 25 мМ HEPES в 175 см² культуральных флаконах. Для получения одноканальных результатов 2500-5000 клеток высевают на покрытые поли-L-лизином стеклянные покровные стекла и культивируют в течение 24-48 часов при 27°С перед тем, как используют.

В таблице 2 использованы следующие обозначения:

EC50: "+++" означает <2 мкМ; "++" означает между 2 мкМ до 5 мкМ; "+" означает между 5 мкМ до 25 мкМ.

% эффективности: "+" означает <25%; "++" означает между 25% и 100%; "+++" означает >100%.

ДРУГИЕ ВАРИАНТЫ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ

[00289] Следует понимать, что, хотя настоящее изобретение было раскрыто в связи с его подробным описанием, указанное описание предназначено только для целей иллюстрации, и никоим образом не ограничивает объем изобретения, который определен объемом прилагаемой формулы изобретения. Другие аспекты, преимущества и модификации попадают в объем следующей формулы изобретения.

Реферат

Изобретение относится к соединениям формулы II, где R представляет собой Н, ОН, ОСН, или два R, взятые вместе, образуют -ОСНО- или -OCFO-; Rпредставляет собой Н или вплоть до двух C-Салкилов; Rпредставляет собой Н или галоген; и Rпредставляет собой Н или C-Салкил; Rпредставляет собой Н или C-Салкил; Y представляет собой О или NR; и Rпредставляет собой Н или C-Салкил, и их фармацевтическим композициям, которые пригодны в качестве модуляторов транспортеров АТФ-связывающей кассеты ("ABC"), или их фрагментов, включая регулятор трансмембранной проводимости ("CFTR") муковисцидоза. Настоящее изобретение также относится к способам лечения заболеваний, опосредованных ABC-транспортерами, используя соединения настоящего изобретения. 6 н. и 13 з.п. ф-лы, 2 таб., 1 пр.

Формула

или

.

.