Ротиготина бегенат, его способ получения и применение - RU2717542C9

Чертежи

Описание

Область техники

Настоящее изобретение относится к производному ротиготина, способу его получения и применения, в частности к длинноцепочечному сложному эфиру ротиготина, способу его получения и применения.

Уровень техники

Ротиготин является неэрголиновым селективным агонистом дофаминовых рецепторов, который действует против болезни Паркинсона путем активации D3/D2/D1-дофаминовых рецепторов. Вследствие эффекта первого прохождения через печень пероральная биодоступность ротиготина очень мала (примерно 1%-5%), что делает его непригодным для перорального введения. В настоящее время болезнь Паркинсона неизлечима. Таким образом, пациентам требуется длительное лечение или медикаментозная коррекция. Поэтому с клинической точки очень важно зрения разработать лекарственное средство, характеризующееся кратким процессом получения, низкой стоимостью и долговременным устойчивым высвобождением для улучшения доступности лекарственного средства.

В WO 2012/068783 раскрыто получение микросфер ротиготина, способных поддерживать эффективную концентрацию данного лекарственного средства в крови в течение более чем двух недель. Хотя получение микросфер и могло бы решить задачу непрерывного стабильного высвобождения, процесс получения является сложным и сопровождается высокими производственными затратами.

В WO 2016/014242 раскрыт ряд структурно-модифицированных производных ротиготина, включая ротиготин и его сложные эфиры с насыщенной длинной цепью, содержащей до 16 атомов углерода, которые преодолевают проблему, связанную с низкой концентрацией в крови лекарственного средства ротиготина в случае перорального введения. Тем не менее, такие пероральные лекарственные формы не могут решить задачу замедленного стабильного высвобождения в течение более чем двух недель. Эксперименты, проведенные авторами настоящего изобретения, показали, что введение насыщенных длинноцепочечных сложных эфиров ротиготина, раскрытых в WO 2016014242, таких как ротиготина каприлат и ротиготина пальмитат, может вызывать значительное колебание концентрации лекарственного средства в крови. По существу, эффективная концентрация лекарственного средства в крови поддерживается только в течение короткого периода времени, и долговременное устойчивое высвобождение лекарственного средства не может быть достигнуто.

Авторы настоящего изобретения провели интенсивные исследования на других насыщенных и ненасыщенных длинноцепочечных сложных эфирах ротиготина, и неожиданно обнаружили, что только насыщенный длинноцепочечный сложный эфир ротиготина с двадцатью двумя атомами углерода обеспечивает долговременное поддержание эффективной концентрацией лекарственного средства в крови, а также обладает высокой биодоступностью и долговременным устойчивым высвобождением, в то время как насыщенные или ненасыщенные длинноцепочечные сложные эфиры ротиготина с более или менее чем двадцатью двумя атомами углерода не обладают вышеуказанными превосходными эффектами.

Краткое описание изобретения

Согласно настоящему изобретению предложен ротиготина бегенат и способ его получения и применения.

Ротиготина бегенат согласно настоящему изобретению имеет следующую структурную формулу:

Согласно настоящему изобретению предложен способ получения ротиготина бегената, включающий: проведение реакции бегеноилхлорида с ротиготином с получением ротиготина бегената; или в качестве альтернативы: проведение реакции бегеновой кислоты с ротиготином с получением ротиготина бегената; или в качестве альтернативы: проведение реакции бегенового ангидрида с ротиготином с получением ротиготина бегената.

Согласно настоящему изобретению предложен способ получения ротиготина бегената: добавление ротиготина к смеси триэтиламина и дихлорметана (ДХМ) в атмосфере азота при комнатной температуре и затем добавление бегеноилхлорида, промывание после завершения реакции, упаривание растворителей при пониженном давлении и очистка с получением ротиготина бегената; или в качестве альтернативы: растворение бегеновой кислоты, ротиготина и 4-(диметиламино)пиридиния п-толуолсульфоната (ДПТС) в дихлорметане (ДХМ) в атмосфере азота при комнатной температуре, добавление N,N'-дициклогексилкарбодиимида (ДЦК) по каплям к вышеуказанной смеси, фильтрование смеси после завершения реакции, упаривание растворителя при пониженном давлении и очистка с получением ротиготина бегената; или в качестве альтернативы: растворение бегенового ангидрида и ротиготина в безводном тетрагидрофуране (ТГФ) в атмосфере азота, добавление каталитического количества триэтиламина, нагревание смеси на масляной бане, упаривание растворителя при пониженном давлении после завершения реакции и затем добавление дихлорметана (ДХМ) с последующим промыванием раствором гидрокарбоната натрия, упаривание растворителя при пониженном давлении и очистка с получением ротиготина бегената.

Согласно настоящему изобретению предложена кристаллическая форма (типа I) ротиготина бегената, которая имеет характеристические пики при 2θ (2θ (градусах)) = 21,563, 21,156, 23,295, 21,955 и 20,838 (±0,2 градуса 2θ) на рентгеновской порошковой дифрактограмме, полученной с излучением Cu-Kα.

В другом варианте реализации кристаллическая форма (типа I) ротиготина бегената имеет характеристические пики при 2θ (2θ (градусах)) = 21,563, 21,156, 23,295, 21,955, 20,838, 16,154, 19,403, 11,749, 14,518 и 17,875 (±0,2 градуса 2θ) на рентгеновской порошковой дифрактограмме, полученной с излучением Cu-Kα.

В другом варианте реализации кристаллическая форма (типа I) ротиготина бегената имеет характеристические пики при 2θ (2θ (градусах)) = 21,563, 21,156, 23,295, 21,955, 20,838, 16,154, 19,403, 11,749, 14,518, 17,875, 19,729, 20,299, 13,583, 11,962, 22,949, 23,772, 16,424, 15,749, 12,586 и 22,430 (±0,2 градуса 2θ) на рентгеновской порошковой дифрактограмме, полученной с излучением Cu-Kα.

В другом варианте реализации кристаллическая форма (типа I) ротиготина бегената имеет характеристические пики при 2θ (2θ (градусах)) = 21,563, 21,156, 23,295, 21,955, 20,838, 16,154, 19,403, 11,749, 14,518, 17,875, 19,729, 20,299, 13,583, 11,962, 22,949, 23,772, 16,424, 15,749, 12,586, 22,430, 12,238, 23,995, 18,626, 16,614, 28,574, 24,530, 25,169, 27,044, 36,329, 27,764, 29,127 и 31,490 (±0,2 градуса 2θ) на рентгеновской порошковой дифрактограмме, полученной с излучением Cu-Kα.

Кристаллическая форма (типа I) ротиготина бегената характеризуется рентгеновской порошковой дифрактограммой, по существу такой, как показано на фиг. 4.

Кристаллическая форма (типа I) ротиготина бегената характеризуется кривыми ТГА/ДСК, по существу такими, как показано на фиг. 6.

Согласно настоящему изобретению так же предложен способ получения кристаллической формы (типа I) ротиготина бегената: растворение ротиготина бегената в органическом растворителе, охлаждение и кристаллизация, фильтрование, промывание с получением кристаллической формы (типа I) ротиготина бегената, при этом органический растворитель выбран из одного или более: из этилацетата, этанола, метанола, циклогексана, н-гексана, петролейного эфира, тетрагидрофурана, ацетона, н-гептана. Предпочтительно после термического растворения ротиготина бегената в этилацетате добавление метанола, охлаждение и кристаллизация с последующим фильтрованием и промыванием соответствующим количеством метанола.

Согласно настоящему изобретению так же предложена кристаллическая форма (типа II) ротиготина бегената, которая имеет характеристические пики при 2θ (2θ (градусах)) = 21,481, 23,887 (±0,2 градуса 2θ) на рентгеновской порошковой дифрактограмме, полученной с излучением Cu-Kα.

В другом варианте реализации предложена кристаллическая форма (типа II) ротиготина бегената, имеющая характеристические пики при 2θ (2θ (градусах)) = 3,274, 21,481, 23,887 (±0,2 градуса 2θ) на рентгеновской порошковой дифрактограмме, полученной с излучением Cu-Kα.

В этом варианте реализации предложена кристаллическая форма (Форма II) ротиготина бегената, характеризующаяся рентгеновской порошковой дифрактограммой, по существу такой, как показано на фигуре 5.

В этом варианте реализации предложена кристаллическая форма (Форма II) ротиготина бегената, характеризующаяся кривыми ТГА/ДСК, по существу такими, как показано на фигуре 7.

Согласно настоящему изобретению предложен способ получения кристаллической формы (типа II) ротиготина бегената, включающий: помещение ротиготина бегената в смешанный растворитель тетрагидрофурана и метанола с получением суспензии и перемешивание суспензии при 40°С с получением кристаллической формы (типа II) ротиготина бегената.

В настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция, содержащая ротиготина бегенат. В частности, фармацевтические композиции, предложенные в настоящем описании, вводят в парентеральной форме, предпочтительно путем инъекции, более предпочтительно путем внутримышечной или подкожной инъекции.

Фармацевтическая композиция ротиготина бегената, предложенная в настоящем изобретении, может обеспечивать интервал дозирования, составляющий по меньшей мере примерно две недели.

В другом аспекте предложен ротиготина бегенат для применения для лечения заболевания, связанного с дофаминовым рецептором. В частности, ротиготина бегенат, который определен выше, используют для лечения болезни Паркинсона.

Ротиготина бегенат, предложенный в настоящем изобретении, можно вводить в суточной дозе от 1 мг до 1000 мг при лечении вышеупомянутых соответствующих заболеваний.

Ротиготина бегенат, предложенный в настоящем изобретении, способен к снижению колебания концентраций лекарственного средства в крови, улучшению биодоступности лекарственного средства in vivo и достижению равномерного высвобождения ротиготина в течение более чем двух недель.

Краткое описание чертежей

На фигуре 1 показан спектр ЯМР¹Н ротиготина бегената согласно примеру 1.

На фигуре 2 показан спектр ЯМР¹³С ротиготина бегената согласно примеру 1.

На фигуре 3 показан ИК-спектр ротиготина бегената согласно примеру 1.

На фигуре 4 показана рентгеновская порошковая дифрактограмма кристаллической формы (типа I) ротиготина бегената согласно примеру 3.

На фигуре 5 показана рентгеновская порошковая дифрактограмма кристаллической формы (типа II) ротиготина бегената согласно примеру 4.

На фигуре 6 показаны кривые ТГА/ДСК кристаллической формы (типа I) ротиготина бегената согласно примеру 3.

На фигуре 7 показаны кривые ТГА/ДСК кристаллической формы (типа II) ротиготина бегената согласно примеру 4.

На фигуре 8 показана зависимость концентрации ротиготина в крови от времени после инъекции крысам согласно тестовому примеру 1.

На фигуре 9 показана зависимость концентрации ротиготина в крови от времени после инъекции крысам согласно тестовому примеру 2.

На фигуре 10 показана зависимость концентрации ротиготина в крови от времени после инъекции крысам согласно тестовому примеру 3.

Подробное описание вариантов реализации изобретения

Следующие примеры предназначены для более подробной демонстрации настоящего изобретения, но не предназначены для ограничения настоящего изобретения каким-либо образом.

Пример 1: Ротиготина бегенат

34,1 г (0,1 моль) бегеновой кислоты растворяли в 300 мл дихлорметана (ДХМ) в атмосфере азота при комнатной температуре, и к полученному смешанному раствору по каплям добавляли 12,7 г (0,1 моль) оксалилхлорида, полученный раствор после завершения реакции называли раствором I. 31,5 г (0,1 моль) ротиготина растворяли в смешанном растворе, содержащем 15,2 г (0,15 моль) триэтиламина и 300 мл дихлорметана (ДХМ), который называли раствором II. Раствор I по каплям добавляли к раствору II с получением реакционного раствора, после завершения реакции реакционный раствор промывали равным объемом воды, и растворитель органической фазы выпаривали при пониженном давлении. Осадок очищали колоночной хроматографией с системой 1:3 (об./об.) этилацетат-петролейный эфир в качестве элюента с получением белого твердого вещества (44,2 г), имеющего температуру плавления 48-52°С, с выходом 69,0%. На фигурах 1 и 2 представлены спектры¹Н ЯМР и¹³С ЯМР указанного в заголовке соединения, соответственно, и на фигуре 3 представлен ИК-спектр указанного в заголовке соединения.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ_H: 7,12 (m, 2Н, Н-7 и Н-14), 6,98 (d, J=7,40 Гц, 1Н, Н-6), 6,92 (q, J=3,44, 5,04 Гц, 1Н, Н-15), 6,82 (d, J=7,28 Гц, 2Н, Н-8 и Н-13), 3,01 (m 4Н, Н-1 и Н-4), 2,81 (m, 4Н, Н-19 и Н-20), 2,54 (m, 5Н, Н-2,Н-16 и Н-22), 2,08 (m, 1Н, Н-3), 1,76 (m, 2Н, Н-23), 1,58 (m, 1Н, Н-3), 1,39 (m, 2Н, Н-41), 1,26 (m, 36Н, Н-17, Н-24~Н-40), 0,88 (m, 6Н, Н-18 и Н-42);

¹³С ЯМР (CDCl₃, 100 МГц) δ_C: 172,0 (С-21), 148,9 (С-5), 143,1 (С-12), 138,8 (С-9), 128,7 (С-10), 127,1 (С-15), 126,5 (С-7), 126,2 (С-13), 124,5 (С-14), 123,1 (С-8), 119,0 (С-6), 56,4 (С-2), 52,6 (2С, С-19 и С-16), 34,2 (С-22), 32,1 (С-40), 31,9 (С-20), 30,1 (С-1), 29,2-29,7(С-24~С-39), 25,3 (С-3), 25,1 (С-23), 24,1 (С-4), 22,7 (С-41), 22,3 (С-17), 14,1 (С-42), 11,9 (С-18).

Пример 2: Ротиготина бегенат

Пример 3: Кристаллическая форма (типа I) ротиготина бегената

Ротиготина бегенат, полученный в примере 1, растворяли в этилацетате путем термического растворения, и затем добавляли метанол с последующим охлаждением и кристаллизацией. После фильтрования осадок на фильтре промывали соответствующим количеством метанола с получением белого твердого вещества, структура которого была определена следующими методами:

Прибор для анализа: рентгеновский порошковый дифрактометр PANalytical Empyrean.

Условия анализа: излучение Cu-Kα radiation, Kα1 (

Дифференциальная сканирующая калориметрия (ДСК)

Прибор: Дифференциальный сканирующий калориметр ТА Q200/Q2000, предоставленный ТА Instruments:

Способ: Образец помещали в алюминиевый тигль, закрывали и нагревали от комнатной температуры до установленной температуры со скоростью 10°С/мин в атмосфере азота.

Термогравиметрический анализ (ТГА)

Прибор: Термогравиметрический анализатор ТА Q500/Q5000, предоставленный ТА Instruments. Способ: Образец помещали в тигль из сплава и нагревали от комнатной температуры до установленной температуры со скоростью 10°С/мин в атмосфере азота.

Результат: Данные РПД (рентгеновской порошковой дифракции) ротиготина бегената кристаллической формы (тип I) представлены в таблице 1, рентгеновская порошковая дифрактограмма представлена на фигуре 4, и ТГА/ДСК представлена на фиг. 6.

Пример 4: Кристаллическая форма (типа II) ротиготина бегената

Ротиготина бегенат, в избытке полученный в примере 1, суспендировали в смеси растворителей тетрагидрофурана и метанола в соотношении 1:19 (об./об.), и полученную суспензию перемешивали при 40°С в течение 5 дней с получением кристаллической формы (типа II) ротиготина бегената.

Измерения проводили в соответствии со способами, описанными в Примере 3.

Результаты ТГА показали, что потеря массы составляла 3,1%, когда образец нагревали до 100°С, и на кривой ДСК наблюдались три эндотермических пика, соответственно, при 30,9°С, 41,7°С и 46,7°С (пиковые значения).

Данные РПД ротиготина бегената кристаллической формы (тип II) представлены в таблице 2, рентгеновская порошковая дифрактограмма представлена на фигуре 5, и ТГА/ДСК-кривые представлены на фигуре 7.

Сравнительный пример 1: Ротиготина каприлат

14,4 г (0,1 моль) октановой кислоты растворяли в 300 мл дихлорметана (ДХМ) в атмосфере азота при комнатной температуре, и к полученному смешанному раствору по каплям добавляли 12,7 г (0,1 моль) оксалилхлорида в течение 30 мин, полученный раствор после завершения реакции при комнатной температуре называли раствором I; 31,5 г (0,1 моль) ротиготина растворяли в смешанном растворе, содержащем 15,2 г (0,15 моль) триэтиламина и 300 мл дихлорметана (ДХМ), который называли раствором II; раствор I добавляли по каплям к раствору II. Полученный выше реакционный раствор промывали равным объемом воды после завершения реакции, и растворитель органической фазы выпаривали при пониженном давлении. Осадок очищали колоночной хроматографией, элюируя системой этилацетат-петролейный эфир 1:3 (об./об.) в качестве элюента, с получением светло-желтого масла (31,8 г) с выходом 72,1%.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ_H: 7,01 (m, 2Н, Н-7 и Н-14), 6,88 (d, J=7,56 Гц, 1Н, Н-6), 6,81 (t, J=3,46 Гц, 1Н,Н-15), 6,72 (t, J=2,78 Гц, 2Н, Н-8 и Н-13), 2,92 (m 4Н, Н-1 и Н-4), 2,78 (m, 4Н, Н-19 и Н-20), 2,49 (m, 5Н, Н-2, Н-22 и Н-16), 2,04 (m, 1H, Н-3), 1,77 (m, 2Н, Н-23), 1,58 (m, 1Н, Н-3), 1,39 (m, 2Н, Н-17), 1,23 (m, 8Н, Н-24~Н-27), 0,96 (m, 6Н, Н-18 и Н-28).

Сравнительный пример 2: Ротиготина олеат

28,3 г (0,1 моль) олеиновой кислоты растворяли в 300 мл дихлорметана (ДХМ) в атмосфере азота при комнатной температуре, и к полученному смешанному раствору по каплям добавляли 12,7 г (0,1 моль) оксалилхлорида в течение 30 мин, полученный раствор после завершения реакции при комнатной температуре называли раствором I; 31,5 г (0,1 моль) ротиготина растворяли в смешанном растворе, содержащем 15,2 г (0,15 моль) триэтиламина и 300 мл дихлорметана (ДХМ), который называли раствором II; раствор I добавляли по каплям к раствору II с получением реакционной смеси. После завершения реакции реакционную смесь промывали равным объемом воды, и растворитель органической фазы выпаривали при пониженном давлении. Осадок очищали колоночной хроматографией, элюируя системой этилацетат-петролейный эфир 1:3 (об./об.) в качестве элюента, с получением светло-желтого масла (40,1 г) с выходом 69,1%.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ_H: 7,10 (m, 2Н, Н-7 и Н-14), 6,98 (d, J=7,58 Гц, 1Н, Н-6), 6,91 (t, J=3,48 Гц, 1Н,Н-15), 6,81 (t, J=2,80 Гц, 2Н, Н-8 и Н-13), 5,42 (m 4Н, Н-29 и Н-30), 2,94 (m 4Н, Н-1 и Н-4), 2,80 (m, 4Н, Н-19 и Н-20), 2,53 (m, 5Н, Н-2,Н-22 и Н-16), 2,04 (m, 5Н, Н-3, Н-28и Н-31), 1,77 (m, 2Н, Н-23), 1,58 (m, 1Н, Н-3), 1,51 (m, 2Н, Н-37), 1,39 (m, 2Н, Н-17), 1,28 (m, 18Н, Н-24~Н-27 и Н-32~Н-36), 0,89 (m, 6Н, Н-18 и Н-38).

Сравнительный пример 3: Ротиготина пальмитат

31,5 г (0,1 моль) ротиготина растворяли в смешанном растворе, содержащем 15,2 г (0,15 моль) триэтиламина и 300 мл дихлорметана (ДХМ) в атмосфере азота при комнатной температуре, и по каплям добавляли смешанный раствор, содержащий 27,49 г (0,1 моль) пальмитоилхлорида и 200 мл дихлорметана (ДХМ). Вышеупомянутый реакционный раствор промывали равным объемом воды после завершения реакции, и выпаривали растворитель органической фазы при пониженном давлении. Осадок очищали колоночной хроматографией, элюируя системой этилацетат-петролейный эфир 1:3 (об./об.) в качестве элюента, с получением белесого твердого вещества (36,2 г), имеющего температуру плавления 27-30°С, с выходом 65,3%.

¹Н ЯМР (СDСl₃, 400 МГц) δ_H: 7,11 (m, 2Н, Н-7 и Н-14), 6,97 (d, J=7,64 Гц, 1Н, Н-6), 6,91 (t, J=3,52 Гц, 1 Н,Н-15), 6,80 (t, J=2,84 Гц, 2Н, Н-8 и Н-13), 2,92 (m 4Н, Н-1 и Н-4), 2,79 (m, 4Н, Н-19 и Н-20), 2,53 (m, 5Н, Н-2, Н-22 и Н-16), 2,03 (m, 1Н, Н-3), 1,76 (m, 2Н, Н-23), 1,55 (m, 1Н, Н-3), 1,49 (m, 2Н, Н-35), 1,38 (m, 2Н, Н-17), 1,26 (m, 22Н, Н-24~Н-34), 0,88 (m, 6Н, Н-18 и Н-36).

Сравнительный пример 4: Ротиготина стеарат

31,5 г (0,1 моль) ротиготина растворяли в смешанном растворе, содержащем 15,2 г (0,15 моль) триэтиламина и 300 мл дихлорметана (ДХМ) в атмосфере азота при комнатной температуре, и по каплям добавляли смешанный раствор, содержащий 30,29 г (0,1 моль) стеарилхлорида и 200 мл дихлорметана (ДХМ). Вышеупомянутый реакционный раствор промывали равным объемом воды после завершения реакции, и растворитель органической фазы выпаривали при пониженном давлении. Осадок очищали колоночной хроматографией, элюируя системой этилацетат-петролейный эфир 1:3 (об./об.) в качестве элюента, с получением белесого твердого вещества (38,4 г), имеющего температуру плавления 24-26°С, с выходом 66,0%.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ_H:7,10 (m, 2Н, Н-7 и Н-14), 6,98 (d, J=7,58 Гц, 1Н, Н-6), 6,91 (t, J=3,48 Гц, 1 Н, Н-15), 6,81 (t, J=2,80 Гц, 2Н, Н-8 и Н-13), 2,94 (m 4Н, Н-1 и Н-4), 2,80 (m, 4Н, Н-19 и Н-20), 2,53 (m, 5Н, Н-2, Н-22 и Н-16), 2,04 (m, 1Н, Н-3), 1,77 (m, 2Н, Н-23), 1,58 (m, 1Н, Н-3), 1,51 (m, 2Н, Н-37), 1,39 (m, 2Н, Н-17), 1,28 (m, 26Н, Н-24~Н-36), 0,89 (m, 6Н, Н-18 и Н-38).

Сравнительный пример 5: Ротиготина арахидат

31,2 г (0,1 моль) арахиновой кислоты растворяли в 300 мл дихлорметана (ДХМ) в атмосфере азота при комнатной температуре, и к полученному смешанному раствору по каплям добавляли 12,7 г (0,1 моль) оксалилхлорида, полученный раствор после завершения реакции называли раствором I; 31,5 г (0,1 моль) ротиготина растворяли в смешанном растворе, содержащем 15,2 г (0,15 моль) триэтиламина и 300 мл дихлорметана (ДХМ), который называли раствором II; раствор I по каплям добавляли к раствору II; вышеупомянутый реакционный раствор промывали равным объемом воды после завершения реакции, и растворитель органической фазы выпаривали при пониженном давлении с получением масла, которое подвергали последующему охлаждению с получением белого твердого вещества. Белое твердое вещество промывали соответствующим количеством этанола с получением белесого влажного твердого вещества; после этого вышеупомянутое влажное твердое вещество растворяли в этилацетате термическим растворением, добавляли метанол с получением прозрачного раствора с последующей полной кристаллизацией при охлаждении; смесь фильтровали, и осадок на фильтре промывали соответствующим количеством метанола с получением белесого твердого вещества (43,3 г), имеющего температуру плавления 30-33°С, с выходом 70,0%.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ_H: 7,10 (m, 2Н, Н-7 и Н-14), 6,96 (d, J=7,56 Гц, 1Н, Н-6), 6,91 (q, J=3,40, 5,08 Гц, 1Н, Н-15), 6,80 (t, J=3,92 Гц, 2Н, Н-8 и Н-13), 2,94 (m 4Н, Н-1 и Н-4), 2,81 (m, 4Н, Н-19 и Н-20), 2,53 (m, 5Н, Н-2, Н-16 и Н-22), 2,03 (m, 1Н, Н-3), 1,76 (m, 2Н, Н-23), 1,56 (m, 1Н, Н-3), 1,49 (m, 2Н, Н-39), 1,38 (m, 2Н, Н-17), 1,26 (m, 30Н, Н-24~Н-38), 0,88 (m, 6Н, Н-18 и Н-40).

Сравнительный пример 6: Ротиготина лигноцерат

36,8 г (0,1 моль) лигноцериновой кислоты растворяли в 300 мл дихлорметана (ДХМ) в атмосфере азота при комнатной температуре, и к полученному смешанному раствору по каплям добавляли 12,7 г (0,1 моль) оксалилхлорида, полученный раствор после завершения реакции называли раствором I; 31,5 г (0,1 моль) ротиготина растворяли в смешанном растворе, содержащем 15,2 г (0,15 моль) триэтиламина и 300 мл дихлорметана (ДХМ), который называли раствором II; раствор I добавляли по каплям к раствору II; вышеупомянутый реакционный раствор промывали равным объемом воды после завершения реакции, и растворитель органической фазы выпаривали при пониженном давлении с получением масла, которое подвергали последующему охлаждению с получением белого твердого вещества. Полученное белое твердое вещество промывали соответствующим количеством этанола с получением белесого влажного твердого вещества; после этого вышеупомянутое влажное твердое вещество растворяли в этилацетате термическим растворением, добавляли метанол с получением прозрачного раствора с последующей полной кристаллизацией при охлаждении; смесь фильтровали, и осадок на фильтре промывали соответствующим количеством метанола с получением белесого твердого вещества (46,6 г), имеющим температуру плавления 47-49°С, с выходом 70,0%.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ_H: 7,11 (m, 2Н, Н-7 и Н-14), 6,96 (d, J=7,36 Гц, 1Н, Н-6), 6,91 (q, J=3,42, 5,02 Гц, 1Н, Н-15), 6,81 (d, J=7,24 Гц, 2Н, Н-8 и Н-13), 2,98 (m 4Н, Н-1 и Н-4), 2,81 (m, 4Н, Н-19 и Н-20), 2,53 (m, 5Н, Н-2, Н-16 и Н-22), 2,03 (m, 1Н, Н-3), 1,77 (m, 2Н, Н-23), 1,58 (m, 1Н, Н-3), 1,38 (m, 2Н, Н-43), 1,28 (m, 40Н, Н-17, Н-24~Н-42), 0,89 (m, 6Н, Н-18 и Н-44).

Тестовый пример 1: Фармакокинетические характеристики инъекции ротиготина каприлата крысам

Образец:

Ротиготина каприлат: полученный в соответствии со сравнительным примером 1

ГПМЦ: Shanghai Ka Le Kang Coating Technology Co., Ltd., №по каталогу: PD341942

Экспериментальные животные:

Самцы крыс SD (предоставленные Shandong Luye Pharma Group Ltd.), массой 190-280 г, 3 крысы.

Тестирование и результаты:

Готовили носитель, содержащий 1% ГПМЦ, и добавляли к указанному носителю ротиготина каприлат с получением суспензии 10 мг/мл (в расчете на ротиготин). Указанное лекарственное средство вводили трем крысам путем внутримышечных инъекций 2 мл/кг. Брали образцы крови из век крыс перед введением (0 часов) и через 0,25 часа, 1 час, 6 часов, 1 день, 2 дня, 3 дня, 5 дней, 7 дней, 9 дней, 11 дней, 14 дней, 16 дней, 18 дней, 21 день, 24 дня, 28 дней после введения. Каждый образец крови помещали в гепаринизированную ЭП-пробирку и немедленно центрифугировали (3000 об/мин) в течение 10 минут. Плазму отделяли и хранили при -35°С для тестирования.

Средние концентрации ротиготина в крови крыс (нг/мл) в различные моменты времени приведены в таблице 3. Зависимость концентрации ротиготина в крови крыс от времени после инъекции показана на фигуре 8.

Вывод

Как видно из таблицы 3 и фигуры 8, внутримышечная инъекция ротиготина каприлата крысам обеспечивает пик концентрации в крови в течение 1 часа, концентрация в крови значительно отличается, эффективная концентрация в крови поддерживается только в течение короткого периода времени, и долговременное устойчивое высвобождение не достигается.

Тестовый пример 2: Фармакокинетические характеристики инъекции каждого лекарственного средства крысам

Образцы:

Ротиготина олеат: полученный в соответствии со сравнительным примером 2;

Ротиготина пальмитат: полученный в соответствии со сравнительным примером 3;

Ротиготина стеарат: полученный в соответствии со сравнительным примером 4;

Ротиготина гидрохлорид: чистотой 99,83%;

ГПМЦ: Shanghai Ka Le Kang Coating Technology Co., Ltd. Lot No.: PD341942.

Экспериментальные животные: самцы крыс SD (предоставленные Shandong Luye Pharma Group Ltd.), массой 190-280 г, 12 крыс всего, 3 крысы в каждой группе.

Тестирование и результаты:

Готовили носитель, содержащий 1% ГПМЦ, и к указанному носителю добавляли ротиготина олеат, ротиготина пальмитат и ротиготина стеарат, соответственно, с получением 10 мг/мл суспензии (в расчете на ротиготин). Ротиготина гидрохлорид готовили в виде 0,36 мг/мл инъекции (в расчете на ротиготин) в обычном физиологическом растворе.

Экспериментальных животных случайным образом распределяли по группам: группа ротиготина олетата (А), группа ротиготина пальмитата (В), группа ротиготина стеарата (С) и группа ротиготина гидрохлорида (D), по 3 крысы в каждой группе. Крысам в группах А, В и С внутримышечно вводили инъекции соответствующего лекарственного средства (2 мл/кг), а крысам в группе D внутривенно вводили инъекции соответствующего лекарственного средства (2 мл/кг).

Брали образцы крови из век крыс в группах А, В и С перед введением (0 часов) и через 0,25 часа, 1 час, 6 часов, 1 день, 2 дня, 3 дня, 5 дней, 7 дней, 9 дней, 11 дней, 14 дней, 16 дней, 18 дней, 21 день, 24 дня, 28 дней после введения. Каждый образец помещали в гепаринизированную ЭП-пробирку и немедленно центрифугировали (3000 об/мин) в течение 10 минут. Плазму отделяли и хранили при -35°С для тестирования.

Брали образцы крови из век крыс в группе D перед введением (0 часов) и через 3 минуты, 10 минут, 0,25 часа, 0,5 часа, 1 час, 1,5 часа, 2 часа, 4 часа, 6 часов, 8 часов и 12 часов после введения. Каждый образец крови помещали в гепаринизированную ЭП-пробирку и немедленно центрифугировали (3000 об/мин) в течение 10 минут. Плазму отделяли и хранили при -35°С для тестирования.

Концентрации ротиготина в крови крыс (нг/мл) в различные моменты времени приведены в таблицах 4 и 5. Зависимость концентрации ротиготина в крови крыс от времени после инъекции показана на фигуре 9.

Вывод

Как видно из таблицы 4, таблицы 5 и фигуры 9, после внутримышечной инъекции крысам соответствующих лекарственных средств, пиковое значение концентрации в крови лекарственных средств в различных группах достигалось раньше. Концентрации в крови значительно колебались, и эффективная концентрация в крови поддерживалась только в течение короткого периода времени, который не позволит обеспечить длительное устойчивое высвобождение в течение более двух недель. Кроме того, абсолютная биодоступность вышеуказанных лекарственных средств является низкой, при значениях абсолютной биодоступности ротиготина олеата, ротиготина пальмитата и ротиготина стеарата 54,3%, 51,3% и 38,2%, соответственно.

Тестовый пример 3: Фармакокинетические характеристики инъекции каждого лекарственного средства крысам

Образцы:

Ротиготина арахидат: полученный в соответствии со сравнительным примером 5;

Ротиготина бегенат: полученный в соответствии с примером 1;

Ротиготина лигноцерат: полученный в соответствии со сравнительным примером 6;

ГПМЦ: Shanghai Ka Le Kang Coating Technology Co., Ltd. Lot No.: PD341942.

Экспериментальные животные:

Самцы крыс SD (предоставленные Shandong Luye Pharma Group Ltd.), массой 190-280 г, 12 крыс, 3 крысы в каждой группе.

Тестирование и результаты:

Готовили носитель, содержащий 1% ГПМЦ, и к указанному носителю добавляли ротиготина арахидат, ротиготина бегенат и ротиготина лигноцерат, соответственно, с получением 10 мг/мл суспензии (в расчете на ротиготин).

Экспериментальных животных случайным образом разделили на группу ротиготина арахидата (А), группу ротиготина бегената (В) и ротиготина лигноцерата (С), по 3 крысы в каждой группе. Крысам в группах А, В и С внутримышечно вводили инъекции соответствующего лекарственного средства (2 мл/кг).

Брали образцы крови из век крыс в группах А, В и С перед введением (0 часов) и через 0,25 часа, 1 час, 6 часов, 1 день, 2 дня, 3 дня, 5 дней, 7 дней, 9 дней, 11 дней, 14дней, 16дней, 18дней, 21 день, 25дней, 28 дней, 30 дней, 35 дней, 39 дней, 42 дня после введения. Каждый образец крови помещали в гепаринизированную ЭП-пробирку и немедленно центрифугировали (3000 об/мин) в течение 10 минут. Плазму отделяли и хранили при -35°С для тестирования.

Концентрации ротиготина в крови крыс (нг/мл) в различные моменты времени представлены в таблице 6. Зависимость концентрации ротиготина в крови крыс от времени после инъекции показана на фигуре 10.

Вывод:

Как видно из таблицы 6, таблицы 5 и фигуры 10, после внутримышечной инъекции соответствующих лекарственных средств, высвобождение ротиготина арахидата было высоким на ранней стадии in vivo, концентрация в крови была низкой в течение периода высвобождения, и эффективная концентрация в крови поддерживалась только в течение короткого периода времени, абсолютная биодоступность арахидата ротиготина при внутримышечной инъекции составляет 33,1%. Для ротиготина лигноцерата высвобождение на ранней стадии было низким, и эффективная концентрация в крови не могла быть достигнута на ранней стадии. Абсолютная биодоступность ротиготина лигноцерата составляла 65,2%. Напротив, высвобождение ротиготина бегената in vivo не имеет периода задержки, эффективная концентрация в крови была постоянной, и период обеспечения может достигать более двух недель. Абсолютная биодоступность внутримышечной инъекции крысам составляет 91,1%. Результаты тестовых примеров 1-3 показывают, что сложный эфир ненасыщенной карбоновой кислоты ротиготина, такой как ротиготина олеат, достигает пика концентрации в крови в организме раньше, и концентрация в крови значительно колеблется, и эффективная концентрация в крови поддерживается только в течение короткого периода времени. Ротиготина октаноат, специфический сложный эфир насыщенной карбоновой кислоты ротиготина, достигает пика концентрации в крови в организме в течение 1 часа, и эффективная концентрация в крови поддерживается только в течение короткого периода времени. Другие насыщенные длинноцепочечные сложные эфиры, такие как ротиготина пальмитат и ротиготина стеарат, имеют концентрации в крови, которые значительно колеблются, и эффективные концентрации в крови поддерживаются только в течение короткого периода времени, который составляет не более двух недель. Хотя концентрации в крови ротиготина арахидата и ротиготина лигноцерата не меняются значительно, их эффективная концентрация в крови не может поддерживаться более двух недель. Ни один из вышеупомянутых насыщенных или ненасыщенных длинноцепочечных сложных эфиров карбоновых кислот ротиготина не обладает абсолютной биологической доступностью равной или выше 70%. Только ротиготина бегенат обладает абсолютной биологической доступностью более 90%. Его эффективная концентрация в крови показывает небольшое колебание и может поддерживаться более чем в течение двух недель. Таким образом показано, что ротиготина бегенат обладает эффектами уменьшения колебания концентрации в крови, улучшения биодоступности in vivo и поддержания равномерного и стабильного высвобождения более чем в течение двух недель.

Реферат

Изобретение относится к ротиготина бегенату, представленному формулой (I):,(I)и его кристаллическим формам (I) и (II), где указанные кристаллические формы имеют характеристические пики, выраженные в градусах 2θ(±0,2 2θ), при 21,563, 21,156, 23,295, 21,955 и 20,838 на рентгеновской порошковой дифрактограмме, полученной с излучением Cu-Kα - для формы (I) и при 3,274, 21,481, 23,887 для формы (II). Указанный ротиготина бегенат характеризуется возможностью поддержания его эффективной концентрации в плазме в течение длительного периода времени, обладает высокой биодоступностью и может обеспечивать эффект пролонгированного, эффективного и стабильного высвобождения. 8 н. и 11 з.п. ф-лы, 10 ил., 6 табл., 9 пр.

Формула