Бензиламиновые производные как ингибиторы калликреина плазмы - RU2607045C2
Код документа: RU2607045C2
Чертежи
Описание
Настоящее изобретение относится к бензиламиновым производным и к фармацевтическим композициям, содержащим их, и к применению таких производных.
Уровень техники
Бензиламиновые производные по настоящему изобретению представляют собой ингибиторы калликреина плазмы и имеют ряд терапевтических применений, в частности, при лечении повышенной проницаемости ретинальных сосудов, связанной с диабетической ретинопатией и диабетическим макулярным отеком.
Калликреин плазмы представляет собой трипсиноподобную серинпротеазу, которая может высвобождать кинины из кининогенов (смотри K. D. Bhoola et al., "Kallikrein-Kinin Cascade", Encyclopedia of Respiratory Medicine, p483-493; J. W. Bryant et al., "Human plasma kallikrein-kinin system: physiological and biochemical parameters" Cardiovascular and haematological agents in medicinal chemistry, 7, p. 234-250, 2009; K. D. Bhoola et al., Pharmacological Rev., 1992, 44, 1; и D. J. Campbell, "Towards understanding the kallikrein-kinin system: insights from the measurement of kinin peptides", Brazilian Journal of Medical and Biological Research 2000, 33, 665-677). Она представляет собой главный элемент внутреннего каскада коагуляции крови, хотя ее роль в этом каскаде не включает высвобождения брадикинина или ферментативного расщепления. Прекалликреин плазмы кодируется отдельным геном и синтезируется в печени. Он секретируется гепатоцитами как неактивный прекалликреин плазмы, который циркулирует в плазме как гетеродимерный комплекс, связанный с высокомолекулярным кининогеном, который активируется с получением активного калликреина плазмы. Кинины являются сильнодействующими медиаторами воспаления, которые действуют посредством рецепторов, связанных с белком G, и антагонисты кининов (такие как антагонисты брадикинина) изучались ранее в качестве сильнодействующих терапевтических агентов для лечения ряда расстройств (F. Marceau and D. Regoli, Nature Rev., Drug Discovery, 2004, 3, 845-852).
Калликреин плазмы, как считается, играет роль при ряде воспалительных расстройств. Главный ингибитор калликреина плазмы представляет собой ингибитор эстеразы C1 серпин. Пациенты, которые имеют генетический дефицит ингибитора эстеразы C1, страдают наследственным ангионевротическим отеком (HAE), который приводит к перемежающемуся отеку лица, рук, гортани, желудочно-кишечного тракта и гениталий. Волдыри, образующиеся во время обострений, содержат высокие уровни калликреина плазмы, который расщепляет высокомолекулярный кининоген, высвобождая брадикинин, приводящий к увеличению проницаемости сосудов. Лечение с помощью ингибитора калликреина плазмы в виде большого белка, как показано, эффективно излечивает HAE, предотвращая высвобождение брадикинина, который вызывает увеличение проницаемости сосудов (A. Lehmann "Ecallantide (DX-88), a plasma kallikrein inhibitor for the treatment of hereditary angioedema and the prevention of blood loss in on-pump cardiothoracic surgery" Expert Opin. Biol. Ther. 8, p 1187-99).
Система калликреин плазмы - кинин присутствует при аномально высоких уровнях у пациентов с запущенным диабетическим макулярным отеком. Недавно опубликовано, что калликреин плазмы вносит вклад в дисфункции ретинальных сосудов у диабетических крыс (A. Clermont et al. "Plasma kallikrein mediates retinal vascular dysfunction and induces retinal thickening in diabetic rats" Diabetes, 2011, 60, p. 1590-98). Кроме того, введение ингибитора калликреина плазмы ASP-440 облегчает как повышенную проницаемость ретинальных сосудов, так и аномалии ретинального кровотока у диабетических крыс. По этой причине ингибитор калликреина плазмы должен найти применение в качестве лечения для уменьшения повышенной проницаемости ретинальных сосудов, связанной с диабетической ретинопатией и диабетическим макулярным отеком.
Синтетические и низкомолекулярные ингибиторы калликреина плазмы описаны ранее, например, Garrett et al. ("Peptide aldehyde...." J. Peptide Res. 52, p62-71 (1998)), T. Gricsbacher et al. ("Involvement of tissue kallikrein but not plasma kallikrein in the development of symptoms mediated by endogenous kinins in acute pancreatitus in rats" British Journal of Pharmacology 137, p692-700 (2002)), Evans ("Selective dipeptide inhibitors of kallikrein" WO 03/076458), Szelke et al. ("Kininogenase inhibitors" WO92/04371), D.M. Evans et al. (Immune pharmacology, 32, p 115-116 (1996)), Szelke et al. ("Kininogen inhibitors" WO 95/07921), Antonsson et al. ("New peptides derivatives" WO94/29335), J. Stiirzbecher et al. (Brazilian J. Med. Biol. Res 27, pl929-34 (1994)), Kettner et al. (US 5,187,157), N. Teno et al. (Chem. Pharm. Bull. 41, pl079-1090 (1993)), W.B. Young et al ("Small molecule inhibitors of plasma kallikrein" Bioorg. Med. Chem. Letts. 16, p2034-2036 (2006)), Okada et al. ("Development of potent and selective plasmin and plasma kallikrein inhibitors and studies on the structure-activity relationship" Chem. Pharm. Bull. 48, p 1964-72 (2000)), Steinmetzer et al. ("Trypsin-like serine protease inhibitors and their preparation and use" WO 08/049595), Zhang et al. ("Discovery of highly potent small molecule kallikrein inhibitors" Medicinal Chemistry 2, p545-553 (2006)), Sinha et al. ("Inhibitors of plasma kallikrein" WO 08/016883) и Brandl et al. ("N-((6-amino-pyridin-3-yl)methyl)-heteroaryl-carboxamides as inhibitors of plasma kallikrein" WO 2012/017020). Также, Steinmetzer et al. ("Serine protease inhibitors" WO 2012/004678) описывают циклизованные пептидные аналоги, которые представляют собой ингибиторы плазмина и калликреина плазмы человека.
К настоящему времени никаких низкомолекулярных синтетических ингибиторов калликреина плазмы не одобрено для медицинских применений. Молекулы, описанные в литературе, страдают от таких ограничений как плохая селективность по отношению к родственным ферментам, таким как KLK1, тромбин и другие серинпротеазы, и плохой пероральной доступностью. Ингибиторы калликреина плазмы в виде больших белков дают риски анафилактических реакций, как сообщалось относительно экаллантида. Таким образом, продолжает существовать необходимость в соединениях, которые селективно ингибируют калликреин плазмы, которые не вызывают анафилактического воздействия и которые являются перорально доступными. Кроме того, молекулы, известные из литературы, отличаются сильно полярными и ионизуемыми гуанидиновыми или амидиновыми функциональными группами. Хорошо известно, что такие функциональные группы могут накладывать ограничения на кишечную проницаемость и, по этой причине, на пероральную доступность.
Другие осложнения диабета, такие как кровоизлияние в мозг, нефропатия, кардиомиопатия и невропатия, все они связываются с калликреином плазмы, также могут рассматриваться в качестве мишеней для ингибитора калликреина плазмы.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к ряду бензиламинов, которые представляют собой ингибиторы калликреина плазмы. Эти соединения демонстрируют хорошую селективность относительно калликреина плазмы и являются потенциально пригодными для использования при лечении ослабления остроты зрения, диабетической ретинопатии, макулярного отека, наследственного ангионевротического отека, диабета, панкреатита, кровоизлияния в мозг, нефропатии, кардиомиопатии, невропатии, воспалительного заболевания желудка, артрита, воспаления, септического шока, пониженного кровяного давления, рака, синдрома расстройства дыхания у взрослых, генерализованного тромбогеморрагического синдрома, операции в условиях искусственного кровообращения и кровотечения после хирургической операции. Кроме того, настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям ингибиторов, к применению композиций в качестве терапевтических агентов и к способам лечения с использованием этих композиций.
В одном из аспектов, настоящее изобретение предлагает соединения формулы I
где:
R1 выбирают из H, алкила, -COалкила, -COарила, -COгетероарила, -CO2алкила, -(CH2)aOH, -(CH2)bCOOR10, -(CH2)cCONH2, -SO2алкила, -SO2арила, -SO2(CH2)hR13, -CO(CH2)iR14, -COциклоалкила, -COCH=CHR15, -CO(CH2)jNHCO(CH2)kR16 и -CONR17R18;
R2 выбирают из H и алкила;
R3 выбирают из H, алкила, -(CH2)dарила, -(CH2)eгетероарила, -(CH2)fциклоалкила, -(CH2)gгетероциклоалкила, -CH(циклоалкила)2, -CH(гетероциклоалкила)2 и -(CH2)lарил-O-(CH2)m-арила;
R4 и R6 независимо выбирают из H и алкила;
R5 выбирают из H, алкила, алкокси и OH;
или R4 и R5, вместе с атомами, к которым они присоединены, могут связываться с образованием 5- или 6-членной азациклоалкильной структуры;
R7 и R8 независимо выбирают из H, алкила, алкокси, CN, галогена и CF3;
R9 представляет собой арил или гетероарил;
R10 представляет собой H или алкил;
a, b, c, d, e, f, g, h, i, j, l и m независимо представляют собой 1, 2 или 3;
k представляет собой 0, 1, 2 или 3;
*1 и *2 обозначает хиральные центры;
алкил представляет собой линейный насыщенный углеводород, имеющий самое большее 10 атомов углерода (C1-C10) или разветвленный насыщенный углеводород, имеющий в пределах между 3 и 10 атомами углерода (C3-C10); алкил может быть необязательно замещенным 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из (C3-C10)циклоалкила, (C1-C6)алкокси, OH, CN, CF3, COOR11, фтора и NR11R12;
циклоалкил представляет собой моно- или бициклический насыщенный углеводород, имеющий в пределах между 3 и 10 атомами углерода; циклоалкил может необязательно быть конденсированным с арильной группой; или циклоалкил представляет собой адамантил;
гетероциклоалкил представляет собой C-связанное или N-связанное 3- 10-членное насыщенное моно- или бициклическое кольцо, где указанное гетероциклоалкильное кольцо содержит, когда это возможно, 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из N, NR11 и O;
алкокси представляет собой линейный O-связанный углеводород, содержащий в пределах между 1 и 6 атомами углерода (C1-C6), или разветвленный O-связанный углеводород, содержащий в пределах между 3 и 6 атомами углерода (C3-C6); алкокси может необязательно быть замещенной 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из (C3-C10)циклоалкила, OH, CN, CF3, COOR11, фтора и NR11R12;
арил представляет собой фенил, бифенил или нафтил; арил может быть необязательно замещенным самое большее 5 заместителями, независимо выбранными из алкила, алкокси, OH, галогена, CN, COOR11, CF3 и NR11R12;
гетероарил представляет собой 5-, 6-, 9- или 10-членное моно- или бициклическое ароматическое кольцо, содержащее, когда это возможно, 1, 2 или 3 элемента кольца, независимо выбранных из N, NR11, S и O; гетероарил может быть необязательно замещенным 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из алкила, алкокси, OH, галогена, CN, COOR11, CF3, NR11R12 и NHR19;
R11 и R12 независимо выбирают из H и алкила;
R13 представляет собой арил или гетероарил;
R14 представляет собой арил, гетероарил, циклоалкил или гетероциклоалкил;
R15 представляет собой H, алкил, арил, гетероарил, циклоалкил или гетероциклоалкил;
R16 представляет собой H, арил или гетероарил;
R17 представляет собой H, алкил, арил, гетероарил или гетероциклоалкил;
R18 представляет собой -(CH2)mR21, где m равно 0, 1, 2 или 3, и R21 представляет собой H, арил или гетероарил;
R19 представляет собой -COалкил, -COарил или -COгетероарил;
и их таутомеры, изомеры, стереоизомеры (включая энантиомеры, диастереоизомеры и их рацемические и скалемические смеси), фармацевтически приемлемые соли и сольваты.
В другом аспекте настоящее изобретение предлагает пролекарство соединения формулы (I), как определено в настоящем документе, или его фармацевтически приемлемой соли.
Еще в одном аспекте настоящее изобретение предлагает N-оксид соединения формулы (I), как определено в настоящем документе, или его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли.
Будет понятно, что определенные соединения по настоящему изобретению могут существовать в сольватированной, например, гидратированной форме, а также в виде несольватированных форм. Необходимо понять, что настоящее изобретение охватывает все такие сольватированные формы.
В одном из аспектов настоящее изобретение включает подгруппу соединений формулы (I), где:
R1 выбирают из H, алкила, -COалкила, -COарила, -COгетероарила, -CO2алкила, -(CH2)aOH, -(CH2)bCOOR10, -(CH2)cCONH2, -SO2алкила и -SO2арила;
R2 выбирают из H и алкила;
R3 выбирают из H, алкила, -(CH2)dарила, -(CH2)eгетероарила, -(CH2)fциклоалкила, -(CH2)gгетероциклоалкила, -CH(циклоалкила)2 и -CH(гетероциклоалкила)2;
R4 и R6 независимо выбирают из H и алкила;
R5 выбирают из H, алкила, алкокси и OH;
или R4 и R5, вместе с атомами, к которым они присоединены, могут связываться с образованием 5- или 6-членной азациклоалкильной структуры;
R7 и R8 независимо выбирают из H, алкила, алкокси, CN и галогена;
R9 представляет собой арил или гетероарил;
R10 представляет собой H или алкил;
a, b, c, d, e, f и g независимо представляют собой 1, 2 или 3;
*1 и *2 обозначает хиральные центры;
алкил представляет собой линейный насыщенный углеводород, имеющий самое большее 10 атомов углерода (C1-C10) или разветвленный насыщенный углеводород, имеющий в пределах между 3 и 10 атомами углерода (C3-C10); алкил может необязательно быть замещенным 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из (C3-C10)циклоалкила, (C1-C6)алкокси, OH, CN, CF3, COOR11, фтора и NR11R12;
циклоалкил представляет собой моно- или бициклический насыщенный углеводород, имеющий в пределах между 3 и 10 атомами углерода; циклоалкил может необязательно быть конденсированным с арильной группой;
гетероциклоалкил представляет собой C-связанное или N-связанное 3- 10-членное насыщенное моно- или бициклическое кольцо, где указанное гетероциклоалкильное кольцо содержит, когда это возможно, 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из N, NR11 и O;
алкокси представляет собой линейный O-связанный углеводород, содержащий в пределах между 1 и 6 атомами углерода (C1-C6), или разветвленный O-связанный углеводород, содержащий в пределах между 3 и 6 атомами углерода (C3-C6); алкокси может необязательно быть замещенной 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из (C3-C10)циклоалкила, OH, CN, CF3, COOR11, фтора и NR11R12;
арил представляет собой фенил, бифенил или нафтил; арил может быть необязательно замещенным самое большее 5 заместителями, независимо выбранными из алкила, алкокси, OH, галогена, CN, COOR11, CF3 и NR11R12;
гетероарил представляет собой 5-, 6-, 9- или 10-членное моно- или бициклическое ароматическое кольцо, содержащее, когда это возможно, 1, 2 или 3 элемента кольца, независимо выбранных из N, NR11, S и O;
гетероарил может быть необязательно замещенным 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из алкила, алкокси, OH, галогена, CN, COOR11, CF3 и NR11R12;
R11 и R12 независимо выбирают из H и алкила;
и их таутомеры, изомеры, стереоизомеры (включая энантиомеры, диастереоизомеры и их рацемические и скалемические смеси), фармацевтически приемлемые соли и сольваты.
В другом аспекте, настоящее изобретение включает подгруппу соединений формулы (I), где:
R1 выбирают из H, алкила, -COалкила, -COарила, -CO2алкила, -CH2CH2OH, -CH2COOR10, -CH2CONH2, -SO2алкила и -SO2арила;
R2 выбирают из H и алкила;
R3 выбирают из алкила, -CH2арила, -CH2циклоалкила и -CH(циклоалкила)2;
R4 и R6 независимо выбирают из H и алкила;
R5 выбирают из H, алкила и OH;
или R4 и R5, вместе с атомами, к которым они присоединены, могут связываться с образованием 5- или 6-членной азациклоалкильной структуры;
R7 и R8 независимо выбирают из H, F и Cl;
R9 представляет собой арил;
R10 представляет собой H или алкил;
*1 и *2 обозначает хиральные центры;
алкил представляет собой линейный насыщенный углеводород, имеющий самое большее 6 атомов углерода (C1-C6) или разветвленный насыщенный углеводород, содержащий в пределах между 3 и 6 атомами углерода (C3-C6); алкил может необязательно быть замещенным 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из (C3-C10)циклоалкила, (C1-C6)алкокси, OH, CN, CF3, COOR11, фтора и NR11R12;
циклоалкил представляет собой моно- или бициклический насыщенный углеводород, имеющий в пределах между 3 и 10 атомами углерода;
алкокси представляет собой линейный O-связанный углеводород, содержащий в пределах между 1 и 6 атомами углерода (C1-C6), или разветвленный O-связанный углеводород, содержащий в пределах между 3 и 6 атомами углерода (C3-C6); алкокси может необязательно быть замещенной 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из (C3-C10)циклоалкила, OH, CN, CF3, COOR11, фтора и NR11R12;
арил представляет собой фенил, бифенил или нафтил; арил может быть необязательно замещенным самое большее 5 заместителями, независимо выбранными из алкила, алкокси, OH, галогена, CN, COOR11, CF3 и NR11R12;
R11 и R12 независимо выбирают из H и алкила;
и их таутомеры, изомеры, стереоизомеры (включая энантиомеры, диастереоизомеры и их рацемические и скалемические смеси), фармацевтически приемлемые соли и сольваты.
Настоящее изобретение также включает следующие аспекты и их сочетания:
В одном из аспектов настоящего изобретения, R1 выбирают из H, алкила, -COалкила, -COарила, -(CH2)aOH, -(CH2)bCOOR10, -(CH2)cCONH2, -SO2алкил и -SO2арила.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R1 выбирают из H, алкила, -COалкила, -COарила, -(CH2)aOH, -CH2COOR10, -CH2CONH2, -SO2алкила и -SO2арила; где a равно 1 или 2.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R1 выбирают из H, -COарила, -COалкила, -CH2COOH, -SO2Ph и -SO2R9.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R1 выбирают из H, -COэтила, метила, метилсульфонила, -COфенила, фенилсульфона, -CH2COOH, -CO-изопропила, пропила, -CH2COOR9, -CH2CONH2, -CH2CH2OH и -COнафтила.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R1 выбирают из -COалкила и -COфенила.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R1 выбирают из H, -COарила, COгетероарила, -COалкила, -CH2COOH, -SO2Ph и -SO2R9.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R1 выбирают из -COалкила, COгетероарила и -COарила.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R2 выбирают из H и метила.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R2 представляет собой H.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R3 выбирают из алкила, -(CH2)dарила, -(CH2)fциклоалкила и -CH(циклоалкила)2; где d и f независимо представляют собой 1 или 2.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R3 выбирают из алкила, -CH2арила, -CH2циклоалкила и -CH(циклоалкила)2.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R3 выбирают из -CH2арила, -CH2циклоалкила и -CH(циклоалкила)2.
В одном из аспектов настоящего изобретения R3 выбирают из:
В одном из аспектов настоящего изобретения, R4 выбирают из H и метила.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R4 представляет собой H.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R5 выбирают из H, алкила и OH.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R5 выбирают из H и OH.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R5 представляет собой H.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R4 и R5, вместе с атомами, к которым они присоединены, связываются с образованием пирролидинового остатка.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R4 и R5, вместе с атомами, к которым они присоединены, связываются с образованием пиперидинового остатка.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R6 выбирают из H и метила.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R6 представляет собой H.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R7 выбирают из H, метила и галогена.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R7 выбирают из H, F и Cl.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R7 представляет собой H.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R8 выбирают из H, метила и галогена.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R8 выбирают из H, F и Cl.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R8 выбирают из H и F.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R8 представляет собой H.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R9 представляет собой арил.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R9 выбирают из фенила и нафтила, где фенил может быть необязательно замещенным самое большее 3 заместителями, независимо выбранными из алкила, алкокси, OH, галогена, CN, COOR11, CF3 и NR11R12,
В одном из аспектов настоящего изобретения, R9 представляет собой фенил, где фенил может быть необязательно замещенным самое большее 2 заместителями, независимо выбранными из алкила, галогена и CF3.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R9 выбирают из фенила, 1-нафталина, 2,4-дихлорфенила, 3,4-дихлорфенила, 3,4-дифторфенила, 4-хлорфенила, 4-трифторметилфенила и 4-этоксифенила.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R9 выбирают из фенила, гетероарила и нафтила, где фенил может быть необязательно замещенным самое большее 3 заместителями, независимо выбранными из алкила, алкокси, OH, галогена, CN, COOR11, CF3 и NR11R12.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R9 выбирают из фенила, 1-нафталина, 3,4-дихлорфенила, 3,4-дифторфенила, 4-хлорфенила, 4-фторфенила, 3-фторфенила, 4-трифторметилфенила, пирид-3-ила, пирид-2-ила, пирид-4-ила, бензотиофен-3-ила, тиофен-2-ила, тиофен-3-ила, индол-3-ила и тиазол-4-ила.
В одном из аспектов настоящего изобретения, R10 представляет собой H или метил.
В одном из аспектов настоящего изобретения, стереохимическая конфигурация вокруг хирального центра *1 представляет собой R.
В одном из аспектов настоящего изобретения, стереохимическая конфигурация вокруг хирального центра *2 представляет собой S.
В одном из аспектов настоящего изобретения, a равно 2 и b, c, d, e, f и g равны 1.
В одном из аспектов настоящего изобретения, a равно 2 и b, c, d, e, f, g, h, j, l и m равны 1.
В одном из аспектов настоящего изобретения, k равно 0 или 1.
В одном из аспектов настоящее изобретение включает соединение, выбранное из:
(S)-N-(4-Аминометил-бензил)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропиониламино]-3-фенил-пропионамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
{(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-циклогексил-этиламино}уксусной кислоты;
(S)-N-(4-Аминометил-3-фтор-бензил)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропиониламино]-3-фенил-пропионамида;
(S)-N-(4-Аминометил-2-хлор-бензил)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропиониламино]-3-фенил-пропионамида;
(S)-N-(4-Аминометил-бензил)-3-(3,4-дихлор-фенил)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропиониламино]пропионамида;
(S)-N-(4-Аминометил-3-хлор-бензил)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропиониламино]-3-фенил-пропионамида;
(S)-N-(4-Аминометил-бензил)-2-{[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропионил]метил-амино}-3-фенил-пропионамида;
({(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-циклогексил-этил}метил-амино)уксусной кислоты;
(S)-N-(4-Аминометил-3-фтор-бензил)-2-{[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропионил]метил-амино}-3-фенил-пропионамида;
N-[(R)-1-{[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]метил-карбамоил}-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-{[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]метил-карбамоил}-2-(4-этокси-фенил)этил]изобутирамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида нафталин-1-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-хлор-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-2,4-дихлор-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-3,4-дифтор-бензамида;
(R)-2-Амино-N-[(1S,2S)-1-(4-аминометил-бензилкарбамоил)-2-гидрокси-2-фенил-этил]-3-(4-этокси-фенил)пропионамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]никотинамида;
(2S,3S)-N-(4-Аминометил-бензил)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропиониламино]-3-гидрокси-3-фенил-пропионамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]изоникотинамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида тиофен-3-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида тиофен-2-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида циклогексанкарбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида изоксазол-5-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида пиридин-2-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида бензо[b]тиофен-2-карбоновой кислоты;
(R)-N-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]-2-(4-хлор-бензолсульфониламино)-3-(4-этокси-фенил)пропионамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-3-хлор-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-2-хлор-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-3-трифторметил-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-метил-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-3,4-дихлор-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-метокси-бензамида;
(S)-N-(4-Аминометил-бензил)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-(2-фенилацетиламино-ацетиламино)пропиониламино]-3-фенил-пропионамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-фтор-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-6-метил-никотинамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-2-метил-никотинамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-2,6-дихлор-никотинамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-5,6-дихлор-никотинамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-2,3,6-трифтор-изоникотинамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-3,3,3-трифтор-пропионамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 2,4-диметил-тиазол-5-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 2-метил-тиазол-5-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-хлор-тиофен-2-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 4-метил-тиазол-5-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида фуран-2-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-метил-тиофен-2-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-2-метокси-изоникотинамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-метил-1H-пиррол-2-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-амино-тиофен-2-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-пропокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-2-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-(3,4-дихлор-фенил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-(4-хлор-фенил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-(4-фтор-фенил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-(4-метокси-фенил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-4-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-(3-фтор-фенил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-тиофен-2-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-тиофен-3-ил-этилкарбамоил-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-тиазол-4-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-бензо[b]тиофен-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-3-фтор-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-3-хлор-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-тиофен-2-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида пиридин-2-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-2-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-метокси-бензамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-3-хлор-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида пиридин-2-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-метокси-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-(3,4-дифтор-фенил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-изоникотинамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида тиофен-2-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-2-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-хлор-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-2-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-метил-бензамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-(3,4-дихлор-фенил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида пиридин-2-карбоновой кислоты;
(R)-N-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-2-ил-этил]-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропионамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-3-фтор-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]изоникотинамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-3-фтор-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида пиридин-2-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-(3,4-дихлор-фенил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида тиофен-2-карбоновой кислоты;
(R)-N-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этил]-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропионамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-(3,4-дихлор-фенил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-изоникотинамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-(3,4-дихлор-фенил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-3,3,3-трифтор-пропионамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-хлор-бензамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида изоксазол-5-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-метил-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-(3,4-дифтор-фенил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-хлор-тиофен-2-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-(1H-индол-3-ил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-бензо[b]тиофен-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-изоникотинамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-ацетиламино-тиофен-2-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-(2-фтор-фенил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-метил-тиофен-2-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-3-метил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-тиазол-4-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-амино-тиофен-2-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-тиазол-4-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-хлор-тиофен-2-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-тиазол-4-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-метил-бензамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-бензо[b]тиофен-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-метил-1H-пиррол-2-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-тиазол-4-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-амино-тиофен-2-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-бензо[b]тиофен-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-ацетиламино-тиофен-2-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-3-метил-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-2-метил-бензамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3,5-диметил-1H-пиррол-2-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-3-метил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-тиофен-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-ацетиламино-тиофен-2-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-бензо[b]тиофен-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-амино-тиофен-2-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-бензо[b]тиофен-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-ацетиламино-тиофен-2-карбоновой кислоты;
[(R)-1-{[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]метилкарбамоил}-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-хлор-тиофен-2-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(1S,2R)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-гидрокси-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
[(R)-1-[(1S,2R)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-гидрокси-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-хлор-тиофен-2-карбоновой кислоты;
N-{(R,S)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-[4-(2,2,2-трифтор-этокси)-фенил]этил}-бензамида;
и их фармацевтически приемлемых солей и их сольватов.
В одном из аспектов настоящее изобретение включает соединение, выбранное из:
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида нафталин-1-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-хлор-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-2,4-дихлор-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-3,4-дифтор-бензамида;
и их фармацевтически приемлемых солей и их сольватов.
В одном из аспектов настоящее изобретение включает соединение, выбранное из:
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида нафталин-1-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-хлор-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-2,4-дихлор-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]никотинамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-3,4-дифтор-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]изоникотинамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида тиофен-3-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида тиофен-2-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида циклогексанкарбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-l-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида изоксазол-5-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида пиридин-2-карбоновой кислоты;
(R)-N-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]-2-(4-хлор-бензолсульфониламино)-3-(4-этокси-фенил)пропионамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-метил-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-3,4-дихлор-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-3-хлор-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-метокси-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-фтор-бензамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-метил-тиофен-2-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-метил-1H-пиррол-2-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-амино-тиофен-2-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-пропокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-2-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-(3,4-дихлор-фенил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-(4-фтор-фенил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-тиофен-2-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-тиофен-3-ил-этилкарбамоил-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-бензо[b]тиофен-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-3-фтор-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-3-хлор-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-тиофен-2-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида пиридин-2-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-2-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-метокси-бензамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-3-хлор-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида пиридин-2-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-метокси-бензамида;
[(R)-1-[(S)-l-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида тиофен-2-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-метил-бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-(3,4-дифтор-фенил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-хлор-тиофен-2-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-хлор-тиофен-2-карбоновой кислоты;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-(1H-индол-3-ил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида;
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-бензо[b]тиофен-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-изоникотинамида;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-ацетиламино-тиофен-2-карбоновой кислоты;
[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]амида 3-метил-тиофен-2-карбоновой кислоты;
и их фармацевтически приемлемых солей и их сольватов.
Терапевтические применения
Как рассмотрено ранее, соединения по настоящему изобретению являются сильнодействующими и селективными ингибиторами калликреина плазмы. По этой причине они являются пригодными для использования при лечении болезненных состояний, для которых фактором, их вызывающим, является сверхактивность калликреина плазмы.
Соответственно, настоящее изобретение предлагает соединение формулы (I) для использования в медицине.
Настоящее изобретение также предлагает использование соединения формулы (I) при приготовлении лекарственного средства для лечения или предотвращения заболевания или состояния, при котором предполагается активность калликреина плазмы.
Настоящее изобретение также предлагает соединение формулы (I) для использования при лечении или предотвращении заболевания или состояния, при котором предполагается активность калликреина плазмы.
Настоящее изобретение также предлагает способ лечения заболевания или состояния, при котором предполагается активность калликреина плазмы, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I).
В одном из аспектов, заболевание или состояние, при котором предполагается активность калликреина плазмы, выбирают из «Заболеваний или состояний, при которых предполагается активность калликреина плазмы», они включают ослабление остроты зрения, диабетическую ретинопатию, диабетический макулярный отек, наследственный ангионевротический отек, диабет, панкреатит, кровоизлияние в мозг, нефропатию, кардиомиопатию, невропатию, воспалительное заболевание желудка, артрит, воспаление, септический шок, пониженное кровяное давление, рак, синдром расстройства дыхания у взрослых, генерализованный тромбогеморрагический синдром, операцию в условиях искусственного кровообращения и кровотечение после хирургической операции.
В другом аспекте заболевание или состояние, при котором предполагается активность калликреина плазмы, представляет собой повышенную проницаемость ретинальных сосудов, связанную с диабетической ретинопатией и диабетическим макулярным отеком.
Комбинированная терапия
Соединения по настоящему изобретению могут вводиться в комбинации с другими терапевтическими агентами. Пригодная для использования комбинированная терапия включает соединение формулы (I), комбинированное с одним или несколькими агентами, выбранными из агентов, которые ингибируют фактор роста тромбоцитов (PDGF), эндотелиального фактора роста (VEGF), интегрина альфа5бета1, стероидов, других агентов, которые ингибируют калликреин плазмы, и других ингибиторов воспаления. Конкретные примеры терапевтических агентов, которые могут комбинироваться с соединениями по настоящему изобретению, включают агенты, описанные в EP2281885A и S. Patel, Retina, 2009 Jun 29 (6 Suppl):S45-8.
Когда используют комбинированную терапию, соединения по настоящему изобретению и указанные комбинированные агенты могут существовать в одной или в различных фармацевтических композициях и могут вводиться по отдельности, последовательно или одновременно.
Определения
Термин "алкил" включает насыщенные углеводородные остатки, включая:
- линейные группы, содержащие самое большее 10 атомов углерода (C1-C10) или самое большее 6 атомов углерода (C1-C6), или самое большее 4 атома углерода (C1-C4). Примеры таких алкильных групп включают, но, не ограничиваясь этим, C1-метил, C2-этил, C3-пропил и C4-н-бутил,
- разветвленные группы, имеющие в пределах между 3 и 10 атомами углерода (C3-C10) или самое большее 7 атомов углерода (C3-C7), или самое большее 4 атома углерода (C3-C4). Примеры таких алкильных групп включают, но, не ограничиваясь этим, C3-изо-пропил, C4-втор-бутил, C4-изо-бутил, C4-трет-бутил и C5-нео-пентил,
каждый из них является необязательно замещенным, как сформулировано выше.
Термин "алкокси" включает O-связанные углеводородные остатки, включая:
- линейные группы, содержащие в пределах между 1 и 6 атомами углерода (C1-C6) или в пределах между 1 и 4 атомами углерода (C1-C4). Примеры таких алкокси групп включают, но, не ограничиваясь этим, C1-метокси, C2-этокси, C3-н-пропокси и C4-н-бутокси.
- разветвленные группы, содержащие в пределах между 3 и 6 атомами углерода (C3-C6) или в пределах между 3 и 4 атомами углерода (C3-C4). Примеры таких алкокси групп включают, но, не ограничиваясь этим, C3-изо-пропокси, и C4-втор-бутокси и трет-бутокси.
Каждая из них является необязательно замещенной, как сформулировано выше.
Если не указано иного, галоген выбирают из Cl, F, Br и I.
Циклоалкил является таким, как определено выше. Циклоалкильные группы могут содержать от 3 до 10 атомов углерода или от 4 до 10 атомов углерода или от 5 до 10 атомов углерода или от 4 до 6 атомов углерода.
Примеры пригодных для использования моноциклических циклоалкильных групп включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил. Примеры пригодных для использования бициклических циклоалкильных групп включают декагидронафталин и октагидро-1H-инден. Примеры пригодных для использования циклоалкильных групп, когда они являются конденсированными с арилом, включают инданил и 1,2,3,4-тетрагидронафтил.
Гетероциклоалкил является таким, как определено выше. Примеры пригодных для использования гетероциклоалкильных групп включают оксиранил, азиридинил, азетидинил, тетрагидрофуранил, пирролидинил, тетрагидропиранил, пиперидинил, N-метилпиперидинил, морфолинил, N-метилморфолинил, пиперазинил, N-метилпиперазинил, азепанил, оксазепанил и диазепанил.
Арил является таким, как определено выше. Как правило, арил будет необязательно замещенным 1, 2 или 3 заместителями. Необязательные заместители выбирают из тех, которые указаны выше. Примеры пригодных для использования арильных групп включают фенил и нафтил (каждый из них является необязательно замещенным, как указано выше).
Гетероарил является таким, как определено выше. Примеры пригодных для использования гетероарильных групп включают тиенил, фуранил, пирролил, пиразолил, имидазолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, триазолил, оксадиазолил, тиадиазолил, тетразолил, пиридинил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, индолил, бензимидазолил, бензотриазолил, хинолинил и изохинолинил (необязательно замещенный, как указано выше).
Термин "C-связанный", например, как в "C-связанном гетероциклоалкиле", означает, что гетероциклоалкильная группа соединена с остальной частью молекулы посредством кольцевого атома углерода.
Термин "N-связанный", например, как в "N-связанном гетероциклоалкиле", означает, что гетероциклоалкильная группа соединена с остальной частью молекулы посредством кольцевого атома азота.
Термин "O-связанный", например, как в "O-связанном углеводородном остатке", означает, что углеводородный остаток соединен с остальной частью молекулы посредством атома кислорода.
В группах, таких как -COалкил и -(CH2)bCOOR10, "-" означает точку присоединения группы заместителя к остальной части молекулы.
"Фармацевтически приемлемая соль" означает физиологически или токсикологически переносимую соль и включает, по необходимости, фармацевтически приемлемые основно-аддитивные соли и фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли. Например (i), когда соединение по настоящему изобретению содержит одну или несколько кислотных групп, например, карбокси групп, фармацевтически приемлемые основно-аддитивные соли, которые могут быть образованы, включают соли натрия, калия, кальция, магния и аммония или соли с органическими аминами, такими как, диэтиламин, N-метил-глюкамин, диэтаноламин, или с аминокислотами (например, с лизином), и тому подобное; (ii) когда соединение по настоящему изобретению содержит основную группу, такую как аминогруппа, фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли, которые могут быть образованы, включают гидрохлориды, гидробромиды, сульфаты, фосфаты, ацетаты, цитраты, лактаты, тартраты, мезилаты, сукцинаты, оксалаты, фосфаты, мезилаты, тозилаты, бензолсульфонаты, нафталиндисульфонаты, малеаты, адипинаты, фумараты, гиппураты, камфораты, ксинафоаты, п-ацетамидобензоаты, дигидроксибензоаты, гидроксинафтоаты, сукцинаты, аскорбаты, олеаты, бисульфаты и тому подобное.
Также могут быть образованы гемисоли кислот и оснований, например, соли гемисульфата и гемикальция.
Относительно обзора пригодных для использования солей, смотри "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use", by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002).
"Пролекарство" относится к соединению, которое может быть преобразовано in vivo посредством метаболизма (например, с помощью гидролиза, восстановления или окисления) в соединение по настоящему изобретению. Пригодные для использования группы при получении пролекарств описаны в 'The Practice of Medicinal Chemistry, 2nd Ed. pp561-585 (2003) и в F. J. Leinweber, Drug Metab. Res., 1987, 18, 379.
Соединения по настоящему изобретению могут существовать как в несольватированной, так и в сольватированной форме. Термин 'сольват' используется в настоящем документе для описания молекулярного комплекса, содержащего соединение по настоящему изобретению и стехиометрическое количество одной или нескольких молекул фармацевтически приемлемого растворителя, например, этанола. Термин 'гидрат' используется, когда растворитель представляет собой воду.
Когда соединения по настоящему изобретению существуют в виде одной или нескольких геометрических, оптических, энантиомерных, диастереомерных и таутомерных форм, они включают, но, не ограничиваясь этим цис- и транс-формы, E- и Z-формы, R-, S- и мезо-формы, кето- и енольные формы. Если не сформулировано иного, упоминание конкретного соединения включает все такие изомерные формы, включая рацемические и другие их смеси. При необходимости, такие изомеры могут быть выделены из их смесей с помощью применения или адаптации известных способов (например, хроматографических методик и методик перекристаллизации). При необходимости, такие изомеры могут быть получены с помощью применения или адаптации известных способов (например, асимметричного синтеза).
В контексте настоящего изобретения, в настоящем документе ссылки на "лечение" включают ссылки на излечивающее, паллиативное и профилактическое лечение.
Общие способы
Соединения формулы (I) должны оцениваться относительно их биофармацевтических свойств, таких как растворимость и стабильность, в растворе (в некотором диапазоне pH), проницаемость и тому подобное, чтобы выбрать наиболее подходящую дозированную форму и способ введения для лечения указанного показания. Они могут вводиться сами по себе или в комбинации с одним или несколькими другими соединениями по настоящему изобретению или в комбинации с одним или несколькими другими лекарственными средствами (или в виде любой их комбинации). Как правило, они будут вводиться в виде препарата в ассоциации с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми наполнителями. Термин 'наполнитель' используют в настоящем документе для описания любого ингредиента иного, чем соединение (соединения) по настоящему изобретению, который может придавать препаратам либо функциональную (то есть, контроль скорости высвобождения лекарственного средства) и/либо нефункциональную (то есть, технологическая добавка или разбавитель) характеристику. Выбор наполнителя будет до большой степени зависеть от таких факторов, как конкретный способ введения, воздействие наполнителя на растворимость и стабильность и природа дозированной формы.
Соединения по настоящему изобретению, предназначенные для фармацевтического использования, могут вводиться в виде твердого продукта или жидкости, например, как таблетка, капсула или раствор. Фармацевтические композиции, пригодные для использования при доставке соединений по настоящему изобретению, и способы их приготовления будут очевидными для специалистов в данной области. Такие композиции и способы их приготовления можно найти, например, в Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th Edition (Mack Publishing Company, 1995).
Соответственно, настоящее изобретение представляет фармацевтическую композицию, содержащую соединение формулы (I) и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель.
Для лечения таких состояний, как повышенная проницаемость ретинальных сосудов, ассоциируемая с диабетической ретинопатией и диабетическим макулярным отеком, соединения по настоящему изобретению могут вводиться в форме, пригодной для инъекции в область глаза пациента, в частности, в форме, пригодной для интравитреальной инъекции. Предусматривается, что составы, пригодные для такого использования, будут принимать форму стерильных растворов соединений по настоящему изобретению в соответствующем водном носителе. Композиции могут вводиться пациенту под наблюдением лечащего врача.
Соединения по настоящему изобретению могут также вводиться непосредственно в кровоток, в подкожную ткань, в мышцы или во внутренний орган. Пригодные для использования средства для парентерального введения включают внутривенное, внутриартериальное, внутрибрюшинное, интратекальное, интравентрикулярное, интрауретральное, интрастернальное, интракраниальное, внутримышечное, внутрисуставное и подкожное. Пригодные для использования устройства для парентерального введения включают игольные устройства для инъекции (включая микроиглу), безигольные устройства для инъекции и методики вливания.
Парентеральные составы, как правило, представляют собой водные или масляные растворы. Когда раствор является водным, включаются наполнители, такие как сахара (включая, но, не ограничиваясь этим, глюкозу, манитол, сорбитол и тому подобное), соли, углеводы и буферные агенты (предпочтительно, с pH от 3 до 9), но для некоторых применений, они могут приготавливаться более подходящим образом как стерильный неводный раствор или как сухая форма, которая должна использоваться в комбинации с соответствующим носителем, таким как стерильная, не содержащая пирогенов вода.
Парентеральные составы могут включать импланты, изготовленные из деградируемых полимеров, таких как полиэстры (то есть полимолочная кислота, полилактид, сополимер полилактид-гликолид, поликапро-лактон, полигидроксибутират), сложные полиортоэфиры и полиангидриды. Эти составы могут вводиться с помощью хирургического разреза в подкожную ткань, мышечную ткань или непосредственно в конкретные органы.
Приготовление парентеральных составов при стерильных условиях, например, посредством лиофилизации, может легко осуществляться с использованием стандартных фармацевтических технологий, хорошо известных специалистам в данной области.
Растворимость соединений формулы (I), используемых при приготовлении парентеральных растворов, может быть увеличена при использовании соответствующих методик приготовления, таких как введение сорастворителей и/или агентов, повышающих растворимость, таких как поверхностно-активные вещества, мицеллярные структуры и циклодекстрины.
В одном из вариантов осуществления, соединения по настоящему изобретению могут вводиться перорально. Пероральное введение может включать заглатывание, так что соединение поступает в желудочно-кишечный тракт и/или буккальное, лингвальное или сублингвальное введение, с помощью которого соединение попадает в кровоток непосредственно изо рта.
Составы, пригодные для перорального введения, включают твердые тампоны, твердые микрочастицы, полутвердые продукты и жидкости (включая многофазные или дисперсные системы), такие как таблетки; мягкие или твердые капсулы, содержащие множество частиц или наночастицы, жидкости, эмульсии или порошки; лепешки (включая лепешки, наполненные жидкостью); жевательные резинки; гели; быстро диспергируемые дозированные формы; пленки; суппозитории; спреи и буккальные/мукоадгезивные пластыри.
Составы, пригодные для перорального введения, могут также конструироваться для доставки соединений по настоящему изобретению с непосредственным высвобождением или способом с задержкой высвобождения, где профиль высвобождения может быть отложенным по времени, импульсным, контролируемым, замедленным, или задержанным по времени и замедленным или он может модифицироваться таким способом, который оптимизирует терапевтическую эффективность указанных соединений. Средства для доставки соединений способом с задержкой высвобождения известны в данной области и включают полимеры с медленным высвобождением, которые могут приготавливаться вместе с указанными соединениями для контроля их высвобождения.
Примеры полимеров с задержкой высвобождения включают деградируемые и недеградируемые полимеры, которые можно использовать для высвобождения указанных соединений посредством диффузии или комбинирования диффузии и эрозии полимера. Примеры полимеров с задержкой высвобождения включают гидроксипропилметилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, метилцеллюлозу, этилцеллюлозу, натрий карбоксиметилцеллюлозу, поливиниловый спирт, поливинилпирролидон, ксантановую смолу, полиметакрилаты, полиэтиленоксид и полиэтиленгликоль.
Жидкие (включая многофазные и дисперсные системы) составы включают эмульсии, растворы, сиропы и эликсиры. Такие препараты могут быть представлены как наполнители в мягких или твердых капсулах (изготовленных, например, из желатина или гидроксипропилметилцеллюлозы) и, как правило, содержат носитель, например, воду, этанол, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль, метилцеллюлозу или соответствующее масло и один или несколько эмульгирующих агентов и/или суспендирующих агентов.
Жидкие составы могут также быть получены посредством разбавления твердого продукта, например, из порошка.
Соединения по настоящему изобретению могут также использоваться в быстрорастворимых, быстро разрыхляемых дозированных формах, таких как те, которые описаны в Liang and Chen, Expert Opinion in Therapeutic Patents, 2001, 11 (6), 981-986.
Приготовление таблеток обсуждается в Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol. 1, by H. Lieberman and L. Lachman (Marcel Dekker, New York, 1980).
Для введения пациентам людям, общая ежедневная доза соединений по настоящему изобретению, как правило, находится в диапазоне 0,01 мг и 1000 мг или в пределах между 0,1 мг и 250 мг, или между 1 мг и 50 мг, в зависимости, разумеется, от способа введения. Например, если их вводят с помощью интравитреальной инъекции, предусматривается, что соединение по настоящему изобретению будет вводиться редко, например, раз в месяц. При таких обстоятельствах предусматривается доза в пределах между 0,5 мг и 20 мг, например, между 1 мг и 10 мг. Если дозировать чаще, например, раз в день, предусматривается гораздо меньшая доза в пределах между 0,005 мг и 0,02 мг.
Общая доза может вводиться в одной или разделенных дозах и может, под ответственность лечащего врача, выпадать из типичного диапазона, приведенного в настоящем документе. Эти дозы относятся к среднему субъекту человеку, имеющему массу примерно от 60 кг до 70 кг. Врач может легко определить дозы для субъектов, у которых масса выпадает из этого диапазона, таких как дети и пожилые люди.
Способы синтеза
Соединения по настоящему изобретению могут быть приготовлены в соответствии с процедурами следующих далее схем и примеров, с использованием соответствующих материалов, и дополнительно иллюстрируются с помощью конкретных примеров, приведенных в настоящем документе, ниже. Кроме того, используя процедуры, описанные в настоящем документе, специалист в данной области может легко получить дополнительные соединения, которые попадают в объем настоящего изобретения, заявляемого в настоящем документе. Соединения, иллюстрируемые в примерах, не должны, однако, рассматриваться как единственное семейство, которое рассматривается как изобретение. Кроме того, примеры иллюстрируют детали получения соединений по настоящему изобретению. Специалисты в данной области легко поймут, что для получения этих соединений можно использовать известные варианты условий и способов следующих далее препаративных процедур.
Соединения по настоящему изобретению могут быть выделены в форме их фармацевтически приемлемых солей, таких как те, которые описаны ранее в настоящем документе, выше.
Может быть необходимым защитить химически активные функциональные группы (например, гидрокси, амино, тио или карбокси) в промежуточных соединениях, используемых при приготовлении соединений по настоящему изобретению, чтобы исключить их нежелательное участие в реакции, приводящей к образованию соединений. Можно использовать обычные защитные группы, например те, которые описаны T. W. Greene and P. G. M. Wuts, "Protective groups in organic chemistry" John Wiley and Sons, 4th Edition, 2006. Например, обычная защищающая амин группа, пригодная для использования в настоящем документе, представляют собой трет-бутоксикарбонил (Boc), которая легко удаляется посредством обработки кислотой, такой как трифторуксусная кислота или хлористый водород, в органическом растворителе, таком как дихлорметан. Альтернативно, защищающая амин группа может представлять собой бензилоксикарбонильную (Z) группу, которая может удаляться посредством гидрирования с помощью палладиевого катализатора в атмосфере водорода или 9-флуоренилметилоксикарбонильную (Fmoc) группу, которая может удаляться с помощью растворов вторичных органических аминов, таких как диэтиламин или пиперидин, в органических растворителях. Карбоксильные группы, как правило, защищают как сложные эфиры, такие как сложный метиловый, этиловый, бензиловый или трет-бутиловый эфир, все они могут удаляться посредством гидролиза в присутствии оснований, таких как гидроксид лития или натрия. Бензильные защитные группы могут также удаляться посредством гидрирования с помощью палладиевого катализатора в атмосфере водорода, в то время как трет-бутильные группы могут также удаляться с помощью трифторуксусной кислоты. Альтернативно, защитная группа сложного трихлорэтилового эфира удаляется с помощью цинка в уксусной кислоте. Обычная защищающая гидроксил группа, пригодная для использования в настоящем документе, представляет собой простой метиловый эфир, условия снятия защиты включают кипячение с обратным холодильником в 48% водном растворе HBr в течение 1-24 часов или при перемешивании вместе с бораном трибромидом в дихлорметане в течение 1-24 часов. Альтернативно, когда гидрокси-группа защищена как простой бензиловый эфир, условия снятия защиты включают гидрирование с помощью палладиевого катализатора в атмосфере водорода.
Соединения в соответствии с общей формулой I могут быть получены с использованием обычных способов синтеза, например, но, не ограничиваясь этим, способа, показанного на Схеме 1. На типичной первой стадии амин (2) сочетается с использованием стандартных условий пептидного сочетания с активированной альфа аминокислотой (1), соответствующим образом амин-защищенной с помощью стандартной защитной группы, такой как трет-бутилоксикарбонил (Boc), бензилоксикарбонил (Z) или 9-флуоренилметилоксикарбонил (Fmoc). Активирующая группа (X) может представлять собой N-гидроксисукцинимид. Использование таких групп хорошо известно в данной области. Когда R5 или R9 (показанный как 'Арил' на Схеме 1) имеет химически активную функциональную группу, такую как амин или карбоновая кислота, эта группа будет также защищена. Другие стандартные способы пептидного сочетания включают взаимодействие кислот с аминами в присутствии гидроксибензотриазола и карбодиимида, такого как водорастворимый карбодиимид или 2-(1H-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметиламиний гексафторфосфат, или бензотриазол-1-ил-окси-трис-пирролидинo-фосфоний гексафторфосфат, или бром-трипиролидино-фосфоний гексафторфосфат, в присутствии органических оснований, таких как триэтиламин, диизопропилэтиламин или N-метилморфолин. На типичной второй стадии защитную группу удаляют с использованием стандартных способов, как описано ранее.
Способ, иллюстрируемый на Схеме 1, затем осуществляют на третьей стадии посредством дополнительного стандартного пептидного сочетания и на четвертой стадии посредством удаления Boc защитной группы с использованием стандартных условий, как описано ранее. Амин, показанный как 7, на пятой стадии, может затем, как правило, алкилироваться или ацилироваться с помощью группы R1. Ацилирование можно осуществлять посредством обработки ацилирующим агентом, таким как ацилхлорид, например, ацетилхлорид или бензоилхлорид, в присутствии основания, как правило, основания третичного амина, такого как триэтиламин или диизопропилэтиламин. Алкилирование, как правило, можно осуществлять посредством обработки алкилгалогенидом или посредством восстановительного алкилирования. Как правило, при процедуре восстановительного алкилирования амину дают возможность для взаимодействия с альдегидом или кетоном в присутствии соответствующего восстанавливающего агента, такого как натрий цианоборгидрид или натрий ацетоксиборгидрид, в соответствующем растворителе, таком как метанол, при комнатной температуре. Полученное в результате нитрильное соединение 8 может затем восстанавливаться посредством гидрирования. Преобразование из 8 в 10 может быть достигнуто на одной стадии либо посредством прямого восстановления нитрила посредством гидрирования в соответствующем растворителе, таком как метанол, в присутствии соответствующего катализатора, такого как палладий на активированном угле, в присутствии кислоты, такой как хлористоводородная кислота, либо посредством восстановления с помощью соответствующего боргидрида в присутствии соединения соответствующего переходного металла, такого как хлорид кобальта или никеля, в соответствующем растворителе, таком как метанол при комнатной температуре. Альтернативно, трет-бутоксикарбонил (Boc)-защищенный амин 9 может выделяться (например, с использованием способа, как описано S. Caddick et al., Tetrahedron Lett., 2000, 41, 3513), а затем с него может сниматься защита с помощью стандартных средств, описанных ранее, с получением амина 10.
Схема 1
Краткое описание чертежей
Фигура 1 показывает ингибирующее воздействие Примера 3 и CH-3457 (положительный контроль; ингибитор калликреина плазмы) при RVP, стимулируемом CA-I, у крыс Sprague Dawley.
Фигура 2 показывает концентрации Примера 3 в тканях глаза после IVT (интравитреального) введения 4,2 мкг/мл (210 нг/глаз).
Примеры
Настоящее изобретение иллюстрируется с помощью следующих далее неограничивающих примеров, в которых используются следующие далее сокращенные наименования и определения:
Все реакции осуществляют в атмосфере азота, если не указано иного. Спектры1H ЯМР регистрируют на спектрометре Brucker Avance III (400M Гц) со стандартом в виде дейтерированного растворителя и при комнатной температуре.
Молекулярные ионы получают с использованием LCMS, которую осуществляют с использованием колонки Chromolith Speedrod RP-18e, 50×4,6 мм, с линейным градиентом от 10%-90% от 0,1% HCO2H/MeCN до 0,1% HCO2H/H2O в течение 11 мин, скорость потока 1,5 мл/мин. Данные собирают с использованием масс-спектрометра Thermofinnigan Surveyor MSQ с электрораспылительной ионизацией в сочетании с LC системой Thermofinnigan Surveyor.
Химические наименования генерируют с использованием программного обеспечения Autonom, поставляемого как часть пакета для получения изображений ISIS от MDL Information Systems.
Когда продукты очищают с помощью флэш-хроматографии, 'диоксид кремния' относится к силикагелю для хроматографии, 0,035-0,070 мм (220-440 меш) (например, силикагель 60 от Merck), и при приложении давления азота до 10 фунт/кв. дюйм (0,62 кг/кв. см) для ускоренного элюирования колонки. Очистку с помощью препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой осуществляют с использованием системы прокачки Waters 2525 с бинарным градиентом при скоростях потока, как правило, 20 мл/мин с использованием детектора в виде фотодиодной матрицы Waters 2996.
Все растворители и коммерческие реагенты используют, как получено.
Пример 1
(S)-N-(4-Аминометил-бензил)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропиониламино]-3-фенил-пропионамид
A. Сложный метиловый эфир (S)-2-[(R)-2-трет-бутоксикарбониламино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-фенил-пропионовой кислоты
H-Phe-OMe.HCl (2,3 г, 10,7 ммоль) растворяют в CH2Cl2 (100 мл) и DMF (10 мл). Этот раствор охлаждают до 0°C. Добавляют (R)-2-бутоксилоксикарбониламино-3-(4-этокси-фенил)пропионовую кислоту (3,0 г, 9,7 ммоль), а затем HOBt (1,57 г, 11,6 ммоль) и триэтиламин (2,9 г, 29, ммоль). Затем добавляют водорастворимый карбодиимид (2,04 г, 10,6 ммоль). Через 18 час при 0°C - комнатной температуре реакционную смесь разбавляют хлороформом (100 мл) и промывают NaHCO3 (1×30 мл), водой (1×30 мл), раствором соли (1×30 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением желтого масла. Остаток очищают с помощью флэш-хроматографии (диоксид кремния), элюент: 20% петролейного эфира (60-80°C), 80% EtOAc, фракции объединяют и выпаривают в вакууме с получением бесцветного масла, идентифицируемого как сложный метиловый эфир (S)-2-[(R)-2-трет-бутоксикарбониламино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-фенил-пропионовой кислоты (4,25 г, 9,03 ммоль, 93%).
[M+H]+=471,27.
B. (S)-2-[(R)-2-трет-Бутоксикарбониламино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-фенил-пропионовая кислота
Сложный метиловый эфир (S)-2-[(R)-2-трет-бутоксикарбониламино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-фенил-пропионовой кислоты (2,5 г, 5,3 ммоль) растворяют в THF (100 мл). Добавляют моногидрат гидроксид лития (668 мг, 15,9 ммоль) в воде (10 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов, по прохождении этого времени реакционную смесь разбавляют EtOAc (150 мл). Этот раствор промывают 0,3M KHSO4 (1×50 мл), водой (1×30 мл), раствором соли (1×30 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как (S)-2-[(R)-2-трет-бутоксикарбониламино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-фенил-пропионовая кислота (2,095 г, 4,58 ммоль, 86%).
[M+H]+=457,25.
C. Сложный трет-бутиловый эфир [(R)-1-[(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-карбаминовой кислоты
Гидрохлорид 4-(аминометил)бензонитрил (303 мг, 1,80 ммоль) растворяют в CH2Cl2 (50 мл) и DMF (5 мл). Этот раствор охлаждают до 0°C. Добавляют (S)-2-[(R)-2-трет-бутоксикарбониламино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-фенил-пропионовую кислоту (745 мг, 1,63 ммоль), а затем HOBt (265 мг, 1,96 ммоль) и триэтиламин (495 мг, 4,9 ммоль). Затем добавляют водорастворимый карбодиимид (344 мг, 1,8 ммоль). После 18 часов при 0°C - комнатной температуре реакционную смесь разбавляют хлороформом (100 мл) и промывают NaHCO3 (1×30 мл), водой (1×30 мл), раствором соли (1×30 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением желтого масла. Остаток очищают с помощью флэш-хроматографии (диоксид кремния), элюент: 20% петролейного эфира (60-80°C), 80% EtOAc, фракции объединяют и выпаривают в вакууме с получением бесцветного масла, идентифицируемого как сложный трет-бутиловый эфир [(R)-1-[(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]карбаминовой кислоты (493 мг, 0,86 ммоль, 53%).
[M+H]+=571,29.
D. Гидрохлорид (R)-2-амино-N-[(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]-3-(4-этокси-фенил)-пропионамида
Сложный трет-бутиловый эфир [(R)-1-[(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]карбаминовой кислоты (225 мг, 0,39 ммоль) обрабатывают с помощью смеси 4M HCl/диоксан (50 мл). После одного часа при комнатной температуре растворитель удаляют с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как гидрохлорид (R)-2-амино-N-[(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]-3-(4-этокси-фенил)пропионамида (200 мг, 0,39 моль, 100%).
[M+H]+=471,26.
E. (S)-N-(4-Циано-бензил)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропиониламино]-3-фенил-пропионамид
Гидрохлорид (R)-2-амино-N-[(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]-3-(4-этокси-фенил)пропионамида (200 мг, 0,37 моль) растворяют в дихлорметане (50 мл), этот раствор охлаждают до 0°C. Добавляют триэтиламин (111 мг, 1,1 ммоль), а затем пропионилхлорид (39 мг, 0,40 ммоль). После 18 часов при 0°C - комнатной температуре реакционную смесь разбавляют CHCl3 (50 мл), этот раствор промывают насыщенным раствором NaHCO3 (1×20 мл), водой (1×20 мл), раствором соли (1×20 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме. Остаток очищают с помощью флэш-хроматографии (диоксид кремния), элюент: 2% MeOH, 98% CHCl3, фракции объединяют и выпаривают в вакууме с получением бесцветного масла, идентифицируемого как (S)-N-(4-циано-бензил)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропиониламино]-3-фенил-пропионамид (189 мг, 0,36 ммоль, 98%).
[M+H]+=527,27.
F. Сложный трет-бутиловый эфир [4-({(S)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропиониламино]-3-фенил-пропиониламино}метил)-бензил]карбаминовой кислоты
(S)-N-(4-Циано-бензил)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропиониламино]-3-фенил-пропионамид (100 мг, 0,19 ммоль) растворяют в метаноле (50 мл). Этот раствор охлаждают до 0°C. Добавляют гексагидрат хлорида никеля (II) (4,5 мг, 0,0192 ммоль) и ди-третбутилдикарбонат (83 мг, 0,38 ммоль), а затем боргидрид натрия (50 мг, 1,33 ммоль) порциями. Реакционную смесь перемешивают при 0°C - комнатной температуре в течение 18 часов. Метанол удаляют посредством выпаривания. Остаток растворяют в CHCl3 (70 мл), промывают насыщенным раствором NaHCO3 (1×30 мл), водой (1×30 мл), раствором соли (1×30 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением желтого масла. Очищают с помощью флэш-хроматографии, элюент: 1% MeOH, 99% CHCl3, с получением бесцветного масла, идентифицируемого как сложный трет-бутиловый эфир [4-({(S)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропиониламино]-3-фенил-пропиониламино}метил)бензил]карбаминовой кислоты (89 мг, 0,14 ммоль, 74%).
[M+H]+=631,39.
G. Трифторацетат (S)-N-(4-аминометил-бензил)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропиониламино]-3-фенил-пропионамида
Сложный трет-бутиловый эфир [4-({(S)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропиониламино]-3-фенил-пропиониламино}метил)бензил]карбаминовой кислоты (89 мг, 0,13 ммоль) растворяют в трифторуксусной кислоте (20 мл). Этот раствор перемешивают при комнатной температуре в течение одного часа, по прохождении этого времени растворитель удаляют в вакууме с получением желтого масла. Остаток очищают с помощью препаративной ВЭЖХ (препаративная колонка Sunfire C18 OBD 19×250 мм, 10 мкм), 10-90% от 0,1% TFA/MeCN до 0,1%TFA/H2O в течение 35 мин при 20 мл/мин. Фракции объединяют и лиофилизуют с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как трифторацетат (S)-N-(4-аминометил-бензил)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-пропиониламино-пропиониламино]-3-фенил-пропионамида (38 мг, 0,056 ммоль, 42%).
[M+H]+=531,31.
1H ЯМР: (CD3OD) 1,02 (3H, т, J=7,7 Гц), 1,42 (3H, т, J=7,0 Гц), 2,13-2,21 (2H, м), 2,71-2,77 (1H, м), 2,81-2,92 (2H, м), 3,12-3,16 (1H, м), 4,05 (2H, кв., J=6,9 Гц), 4,13 (2H, с), 4,37-4,50 (3H, м), 4,57-4,69 (1H, м), 6,82 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,05 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,17-7,19 (2H, м), 7,24-7,31 (5H, м), 7,41 (2H, д, J=8,1 Гц).
Пример 2
(R)-N-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилl-3-(4-этокси-фенил)-2-метансульфониламино-пропионамид
A. (R)-N-[(S)-1-(4-Циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]-3-(4-этокси-фенил)-2-метансульфониламино-пропионамид
Гидрохлорид (R)-2-амино-N-[(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]-3-(4-этокси-фенил)пропионамида (150 мг, 0,30 ммоль) растворяют в CH2Cl2 (20 мл). Этот раствор охлаждают до 0°C. Добавляют метансульфонилхлорид (37 мг, 0,33 ммоль), а затем триэтиламин (90 мг, 0,89 ммоль). После 18 часов при 0°C - комнатной температуре реакционную смесь разбавляют хлороформом (50 мл) и промывают NaHCO3 (1×20 мл), водой (1×20 мл), раствором соли (1×20 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением желтого масла. Остаток очищают с помощью флэш-хроматографии (диоксид кремния), элюент: 2% MeOH, 98% CHCl3, фракции объединяют и выпаривают в вакууме с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как (R)-N-[(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]-3-(4-этокси-фенил)-2-метансульфониламино-пропионамид (110 мг, 0,20 ммоль, 68%).
[M+H]+=549,11.
B. Сложный трет-бутиловый эфир [4-({(S)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-метансульфониламино-пропиониламино]-3-фенил-пропиониламино}метил)бензил]карбаминовой кислоты
(R)-N-[(S)-1-(4-Циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]-3-(4-этокси-фенил)-2-метансульфониламино-пропионамид (110 мг, 0,20 ммоль) растворяют в метаноле (50 мл). Этот раствор охлаждают до 0°C. Добавляют гексагидрат хлорида никеля (II) (4,8 мг, 0,02 ммоль) и ди-третбутилдикарбонат (88 мг, 0,4 ммоль), а затем боргидрид натрия (53 мг, 1,4 ммоль) порциями. Реакционную смесь перемешивают при 0°C - комнатной температуре в течение 18 час. MeOH удаляют посредством выпаривания. Остаток растворяют в CHCl3 (70 мл), промывают насыщенным раствором NaHCO3 (1×30 мл), водой (1×30 мл), раствором соли (1×30 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением желтого масла. Очищают с помощью флэш-хроматографии, элюент: 2% MeOH, 98% CHCl3, с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный трет-бутиловый эфир [4-({(S)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-метансульфониламино-пропиониламино]-3-фенил-пропиониламино}-метил)бензил]карбаминовой кислоты (86 мг, 0,13 ммоль, 66%).
[M+H]+=653,23, 675,19 (M+Na).
C. Трифторацетат (R)-N-[(S)-1-(4-аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]-3-(4-этокси-фенил)-2-метансульфониламино-пропионамида
Сложный трет-бутиловый эфир [4-({(S)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-метансульфониламино-пропиониламино]-3-фенил-пропиониламино}метил)бензил]карбаминовой кислоты (86 мг, 0,13 ммоль) обрабатывают трифторуксусной кислотой (20 мл). После одного часа при комнатной температуре растворитель выпаривают в вакууме. Остаток очищают с помощью препаративной ВЭЖХ (препаративная колонка Sunfire C18 OBD. 19×250 мм, 10 мкм), 10-90% от 0,1% TFA/MeCN до 0,1% TFA/H2O в течение 35 мин при 20 мл/мин. Фракции объединяют и лиофилизуют с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как трифторацетат (R)-N-[(S)-1-(4-аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]-3-(4-этокси-фенил)-2-метансульфониламино-пропионамида (28 мг, 0,042 ммоль, 32%).
[M+H]+=553,08.
1H ЯМР: (CD3OD) 1,41 (3H, т, J=7,0 Гц), 2,60 (3H, с), 2,69-2,75 (1H, м), 2,81-2,91 (2H, м), 3,09 (1H, дд, J=13,7, 6,5 Гц), 4,04 (2H, кв., J=7,0 Гц), 4,13 (3H, м), 4,39 (2H, с), 4,62 (1H, дд, J=8,1, 6,6 Гц), 6,87 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,13 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,23 (2H, т, J=6,6 Гц), 7,25-7,32 (5H, м), 7,41 (2H, д, J=8,1 Гц).
Пример 3
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоилl-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамид
A. Сложный бензиловый эфир {(S)-1-[4-(трет-бутоксикарбониламинометил)бензилкарбамоил]-2-фенил-этил}карбаминовой кислоты
Сложный 2,5-диоксо-пирролидин-1-иловый эфир (S)-2-бензилоксикарбониламино-3-фенил-пропионовой кислоты (4,25 г, 10,72 ммоль) растворяют в CH2Cl2 (100 мл). Этот раствор охлаждают до 0°C. Добавляют 1-(N-Boc-Аминометил)-4-(аминометил)бензол (2,79 г, 11,79 ммоль), а затем триэтиламин (3,25 г, 32,16 ммоль). После 18 часов при 0°C - комнатной температуре реакционную смесь разбавляют хлороформом (100 мл) и промывают NaHCO3 (1×30 мл), водой (1×30 мл), раствором соли (1×30 мл), сушат (Na2SO4) выпаривают в вакууме с получением желтого масла. Остаток затирают петролейным эфиром (60-80°C) и EtOAc с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный бензиловый эфир {(S)-1-[4-(трет-бутоксикарбониламинометил)бензилкарбамоил]-2-фенил-этил}карбаминовой кислоты (3,88 г, 7,49 ммоль, 70%).
[M+H]+=518,28, 540,32 (M+Na).
B. Сложный трет-бутиловый эфир {4-[((S)-2-амино-3-фенил-пропиониламино)метил]бензил}карбаминовой кислоты
Сложный бензиловый эфир {(S)-1-[4-(трет-бутоксикарбониламинометил)бензилкарбамоил]-2-фенил-этил}карбаминовой кислоты (3,66 г, 7,08 ммоль) растворяют в метаноле (200 мл). Этот раствор гидрируют над 10% Pd/C (500 мг) при атмосферном давлении и при комнатной температуре в течение одного часа, по прохождении этого времени катализатор отфильтровывают через целит и остаток промывают метанолом (30 мл), объединенные фильтраты выпаривают в вакууме с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный трет-бутиловый эфир {4-[((S)-2-амино-3-фенил-пропиониламино)метил]бензил}карбаминовой кислоты (2,627 г, 6,85 ммоль, 97%).
[M+H]+=384,37.
C. (R)-2-Амино-3-(4-этокси-фенил)пропионовая кислота
(R)-2-Бутоксикарбониламино-3-(4-этокси-фенил)пропионовую кислоту (4,0 г, 12,93 ммоль) растворяют в 4M HCl в диоксане (150 мл). После одного часа при комнатной температуре растворитель удаляют в вакууме с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как гидрохлорид (R)-2-амино-3-(4-этокси-фенил)пропионовой кислоты (3,18 г, 12,9 ммоль, 100%).
[M+H]+=210,18.
D. (R)-2-Бензилоксикарбониламино-3-(4-этокси-фенил)пропионовая кислота
Гидрохлорид (R)-2-амино-3-(4-этокси-фенил)пропионовой кислоты (3,17 г, 12,9 ммоль) растворяют в растворе гидроксида натрия (1,14 г, 28,38 ммоль) в воде (100 мл). Добавляют бензил хлорформиат (2,64 г, 15,48 ммоль) в диоксане (100 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов, по прохождении этого времени диоксан удаляют в вакууме. Водный остаток промывают диэтиловым эфиром (1×100 мл), подкисляют до pH 2 с помощью 1M HCl и экстрагируют хлороформом (2×200 мл). Объединенные экстракты промывают водой (1×50 мл), раствором соли (1×50 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как (R)-2-бензилоксикарбониламино-3-(4-этокси-фенил)пропионовая кислота (4,0 г, 11,65 ммоль, 90%).
[M+H]+=344,20.
E. Сложный бензиловый эфир [(R)-1-{(S)-1-[4-(трет-бутоксикарбониламинометил)бензилкарбамоил]-2-фенил-этилкарбамоил}-2-(4-этокси-фенил)этил]карбаминовой кислоты
Сложный трет-бутиловый эфир {4-[((S)-2-Амино-3-фенил-пропиониламино)метил]бензил}карбаминовой кислоты (2,63 г, 6,86 ммоль) растворяют в CH2Cl2 (100 мл) и DMF (5 мл). Этот раствор охлаждают до 0°C. Добавляют (R)-2-бензилоксикарбониламино-3-(4-этокси-фенил)пропионовую кислоту (2,59 г, 7,54 ммоль), а затем HOBt (1,11 г, 8,23 ммоль) и триэтиламин (2,08 г, 20,57 ммоль). Затем добавляют водорастворимый карбодиимид (1,45 г, 7,54 ммоль). После 18 часов при 0°C - комнатной температуре реакционную смесь разбавляют хлороформом (200 мл) и промывают NaHCO3 (1×50 мл), водой (1×50 мл), раствором соли (1×50 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением желтого масла. Остаток затирают этилацетатом и петролейным эфиром (60-80°C) с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный бензиловый эфир [(R)-1-{(S)-1-[4-(трет-бутоксикарбониламинометил)бензилкарбамоил]-2-фенил-этилкарбамоил}-2-(4-этокси-фенил)этил]карбаминовой кислоты (3,55 г, 5,01 ммоль, 73%).
[M+H]+=709,34.
F. Сложный трет-бутиловый эфир [4-({(S)-2-[(R)-2-амино-3-(4-этокси-фенил)-пропиониламино]-3-фенил-пропиониламино}метил)бензил]карбаминовой кислоты
Сложный бензиловый эфир [(R)-1-{(S)-1-[4-(трет-бутоксикарбониламинометил)бензилкарбамоил]-2-фенил-этилкарбамоил}-2-(4-этокси-фенил)этил]карбаминовой кислоты (3,55 г, 5,00 ммоль) растворяют в метаноле (200 мл). Этот раствор гидрируют над 10% Pd/C (500 мг) при атмосферном давлении и комнатной температуре в течение одного часа, по прохождении этого времени катализатор отфильтровывают через целит и остаток промывают метанолом (30 мл), объединенные фильтраты выпаривают в вакууме с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный трет-бутиловый эфир [4-({(S)-2-[(R)-2-амино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-фенил-пропиониламино}метил)бензил]-карбаминовой кислоты (2,8 г, 4,87 ммоль, 97%).
[M+H]+=575,37.
G. Сложный трет-бутиловый эфир [4-({(S)-2-[(R)-2-бензоиламино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-фенил-пропиониламино}метил)бензил]карбаминовой кислоты
Сложный трет-бутиловый эфир [4-({(S)-2-[(R)-2-амино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-фенил-пропиониламино}метил)-бензил]карбаминовой кислоты (3,45 г, 5,99 ммоль) растворяют в дихлорметане (150 мл). Добавляют бензоилхлорид (1,01 г, 7,19 ммоль), а затем триэтиламин (1,82 г, 17,98 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов и разбавляют CHCl3 (150 мл), этот раствор промывают 0,3M KHSO4 (1×50 мл), насыщенным раствором NaHCO3 (1×50 мл), водой (1×50 мл), раствором соли (1×50 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме. Остаток затирают петролейным эфиром (60-80°C) и EtOAc с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный трет-бутиловый эфир [4-({(S)-2-[(R)-2-бензоиламино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-фенил-пропиониламино}метил)бензил]карбаминовой кислоты (3,06 г, 4,51 ммоль, 75%).
[M+H]+=679,34.
H. Гидрохлорид N-[(R)-1-[(S)-1-(4-аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамид
Сложный трет-бутиловый эфир [4-({(S)-2-[(R)-2-бензоиламино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-фенил-пропиониламино}метил)бензил]карбаминовой кислоты (2,86 г, 4,21 ммоль) растворяют в 4M HCl в диоксане (150 мл). После одного часа при комнатной температуре растворитель удаляют в вакууме. Остаток осаждают из этанола с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как гидрохлорид N-[(R)-1-[(S)-1-(4-аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамид (2,1 г, 3,41 ммоль, 81%).
[M+H]+=579,34.
1H ЯМР: (CD3OD), 1,40 (3H, т, J=6,9 Гц), 2,91-2,99 (3H, м), 3,14-3,19 (1H, м), 4,02 (2H, кв., J=6,9 Гц), 4,08 (2H, с), 4,41 (1H, д, J=15,5 Гц), 4,51 (1H, д, J=15,5 Гц), 4,66-4,69 (2H, м), 6,82 (2H, д, J=8,4 Гц), 7,10 (2H, д, J=8,2 Гц), 7,18-7,20 (2H, м), 7,25-7,38 (7H, м), 7,44-7,59 (3H, м), 7,72 (2H, д, J=7,8 Гц).
Пример 3b
Гидрохлорид N-[(R)-1-[(S)-1-(4-аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида
Сложный трет-бутиловый эфир [4-({(S)-2-[(R)-2-бензоиламино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-фенил-пропиониламино}-метил)бензил]карбаминовой кислоты (10,0 г, 14,7 ммоль) перемешивают в хлористом водороде/этилацетате (3,7M, 250 мл) при комнатной температуре. Через два часа смесь фильтруют, промывают этилацетатом (2×50 мл) и сушат с получением твердого продукта (7,9 г). Часть твердого продукта (0,106 г) суспендируют в смеси ацетонитрила (2,1 мл) и воды (0,32 мл), перемешивают и нагревают до 77°C. К смеси последовательно добавляют дополнительные аликвоты воды (0,05 мл) пока не наблюдается растворение. Затем перемешиваемую смесь охлаждают до комнатной температуры в течение ночи. Полученный твердый продукт выделяют посредством фильтрования и сушат в вакууме при 40°C с получением гидрохлорида N-[(R)-1-[(S)-1-(4-аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида (0,067 г, 3,41 ммоль, 81%).1H ЯМР (CD3OD) идентичен Примеру 3, Стадия H.
Пример 4
{(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-циклогексил-этиламино}уксусная кислота
A. Сложный трет-бутиловый эфир [(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]карбаминовой кислоты
Гидрохлорид 4-аминометилбензонитрила (1,53 г, 9,1 ммоль) растворяют в CH2Cl2 (100 мл). Этот раствор охлаждают до 0°C. Добавляют сложный 2,5-диоксо-пирролидин-1-иловый эфир (S)-2-трет-бутоксикарбониламино-3-фенилпропионовой кислоты (3,00 г, 8,3 ммоль), а затем триэтиламин (2,51 г, 25 ммоль). После 18 часов при 0°C - комнатной температуре реакционную смесь разбавляют хлороформом (100 мл) и промывают NaHCO3 (1×30 мл), водой (1×30 мл), раствором соли (1×30 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением желтого масла. Остаток кристаллизуют из смеси EtOAc/петролейный эфир при 60-80°C с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный трет-бутиловый эфир [(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]карбаминовой кислоты (2,71 г, 7,1 ммоль, 86%).
[M+H]+=380,13.
B. Гидрохлорид (S)-2-амино-N-(4-циано-бензил)-3-фенил-пропионамида
Сложный трет-бутиловый эфир [(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]карбаминовой кислоты (2,71 г, 7,1 ммоль) обрабатывают с помощью смеси 4M HCl/диоксан (150 мл). После одного часа при комнатной температуре растворитель удаляют с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как гидрохлорид (S)-2-амино-N-(4-циано-бензил)-3-фенил-пропионамида (2,24 г, 7,1 ммоль, 99%).
[M+H]+=280,14.
C. Сложный трет-бутиловый эфир {(R)-1-[(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-циклогексил-этил}карбаминовой кислоты
Гидрохлорид (S)-2-Амино-N-(4-циано-бензил)-3-фенил-пропионамида (500 мг, 1,58 ммоль) растворяют в CH2Cl2 (30 мл) и DMF (3 мл). Этот раствор охлаждают до 0°C. Добавляют Boc-DCha-OH (473 мг, 1,74 ммоль), а затем HOBt (257 мг, 1,74 ммоль) и триэтиламин (481 мг, 4,75 ммоль). Затем добавляют водорастворимый карбодиимид (339 мг, 1,74 ммоль). После 18 часов при 0°C - комнатной температуре реакционную смесь разбавляют хлороформом (100 мл) и промывают NaHCO3 (1×30 мл), водой (1×30 мл), раствором соли (1×30 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением желтого масла. Остаток очищают с помощью флэш-хроматографии (диоксид кремния), элюент: 60% циклогексан, 40% EtOAc, фракции объединяют и выпаривают в вакууме с получением пенистого белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный трет-бутиловый эфир {(R)-1-[(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-циклогексил-этил}карбаминовой кислоты (799 мг, 1,50 ммоль, 95%). [M+H]+=533,18
D. Гидрохлорид (R)-2-амино-N-[(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]-3-циклогексил-пропионамида
Сложный трет-бутиловый эфир {(R)-1-[(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-циклогексил-этил}карбаминовой кислоты (799 мг, 1,5 ммоль) обрабатывают с помощью смеси 4M HCl/диоксан (50 мл). После одного часа при комнатной температуре растворитель удаляют с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как гидрохлорид (R)-2-амино-N-[(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]-3-циклогексил-пропионамида (703 мг, 1,5 ммоль, 100%).
[M+H]+=433,06.
E. Сложный трет-бутиловый эфир {(R)-1-[(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-циклогексил-этиламино}уксусной кислоты
Гидрохлорид (R)-2-амино-N-[(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этил]-3-циклогексил-пропионамида (290 мг, 0,62 ммоль) растворяют в ацетонитриле (10 мл). Добавляют трет-бутилбромацетат (144 мг, 0,74 ммоль), а затем диизопропилэтиламин (160 мг, 1,24 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 60°C в течение 2 дней, по прохождении этого времени ее разбавляют хлороформом (100 мл), промывают водой (1×30 мл), раствором соли (1×30 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением желтого масла. Остаток очищают с помощью флэш-хроматографии (диоксид кремния), элюент: 25% петролейного эфира (60-80°C), 75% EtOAc, фракции объединяют и выпаривают в вакууме с получением бесцветного масла, идентифицируемого как сложный трет-бутиловый эфир {(R)-1-[(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-циклогексил-этиламино}уксусной кислоты (240 мг, 0,44 ммоль, 71%).
[M+H]+=547,30.
F. Сложный трет-бутиловый эфир ((R)-1-{(S)-1-[4-(трет-бутоксикарбониламинометил)бензилкарбамоил]-2-фенил-этилкарбамоил}-2-циклогексил-этиламино)уксусной кислоты
Сложный трет-бутиловый эфир {(R)-1-[(S)-1-(4-циано-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-циклогексил-этиламино}уксусной кислоты (240 мг, 0,44 ммоль) растворяют в метаноле (25 мл). Этот раствор охлаждают до 0°C. Добавляют гексагидрат хлорида никеля (II) (10,4 мг, 0,44 ммоль) и ди-трет-бутил дикарбонат (192 мг, 0,88 ммоль), а затем боргидрид натрия (116 мг, 3,1 ммоль) порциями. Реакционную смесь перемешивают при 0°C - комнатной температуре в течение 3 дней. MeOH удаляют посредством выпаривания. Остаток растворяют в CHCl3 (70 мл), промывают насыщенным раствором NaHCO3 (1×30 мл), водой (1×30 мл), раствором соли (1×30 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением желтого масла. Очищают с помощью флэш-хроматографии, элюент: 40% петролейного эфира (60-80°C), 60% EtOAc с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный трет-бутиловый эфир ((R)-1-{(S)-1-[4-(трет-бутоксикарбониламинометил)бензилкарбамоил]-2-фенил-этилкарбамоил}-2-циклогексил-этиламино)уксусной кислоты (65 мг, 0,10 ммоль, 23%).
[M+H]+=651,44.
G. Дитрифторацетат {(R)-1-[(S)-1-(4-аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-циклогексил-этиламино}уксусной кислоты
Сложный трет-бутиловый эфир ((R)-1-{(S)-1-[4-(трет-бутоксикарбониламинометил)бензилкарбамоил]-2-фенил-этилкарбамоил}-2-циклогексил-этиламино)уксусной кислоты (65 мг, 0,1 ммоль) обрабатывают трифторуксусной кислотой (4 мл) и CH2Cl2 (2 мл). После одного часа при комнатной температуре растворитель выпаривают в вакууме. Остаток очищают с помощью препаративной ВЭЖХ (препаративная колонка Sunfire C18 OBD 19×250 мм, 10 мкм), 10-90% 0,1% от TFA/MeCN до 0,1% TFA/H2O в течение 35 мин при 20 мл/мин. Фракции объединяют и лиофилизуют с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как дитрифторацетат {(R)-1-[(S)-1-(4-аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-циклогексил-этиламино}уксусной кислоты (46 мг, 0,064 ммоль, 64%).
[M+H]+=495,28.
1H ЯМР: (CD3OD) 0,78-0,98 (2H, м), 1,10-1,25 (4H, м), 1,53-1,70 (7H, м), 2,97 (1H, дд, J=14,0, 10,5 Гц), 3,25 (1H, дд, J=14,1, 5,2 Гц), 3,74 (2H, с), 4,01 (1H, дд, J=8,1, 6,1 Гц), 4,15 (2H, с), 4,47 (2H, с), 4,76 (1H, дд, J=10,5, 5,2 Гц), 7,28-7,38 (7H, м), 7,45 (2H, д, J=8,2 Гц), 8,83 (1H, т, J=5,9 Гц).
Соединения в Таблицах 1-5 синтезируют, как описано в Примерах 1-4 (выше) и 199-201 (ниже).
Пример 199
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-метил-бензамид
A. Сложный бензиловый эфир [4-(трет-бутоксикарбониламинометил)бензил]карбаминовой кислоты
трет-Бутил 4-(аминометил)бензилкарбамат (7,5 г, 31,74 ммоль) растворяют в дихлорметане (250 мл). Этот раствор охлаждают до 0°C и добавляют триэтиламин (9,63 г, 93,2 ммоль), а затем сложный 2,5-диоксо-пирролидин-1-иловый эфир сложного бензилового эфира угольной кислоты (9,5 г, 38,09 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 0°C - комнатной температуре в течение 18 часов и разбавляют с CHCl3 (200 мл), фильтрат промывают 0,3M KHSO4 (1×50 мл), насыщенным раствором NaHCO3 (1×50 мл), водой (1×50 мл), раствором соли (1×50 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением белого твердого продукта. Твердый продукт затирают смесью EtOAc/петролейный эфир при 60-80°C с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный бензиловый эфир [4-(трет-бутоксикарбониламинометил)бензил]карбаминовой кислоты (11,3 г, 30,5 ммоль, 96%).
[M+H]+=392,98 (M+Na).
B. Гидрохлорид сложного бензилового эфира (4-аминометил-бензил)карбаминовой кислоты
Сложный бензиловый эфир [4-(трет-бутоксикарбониламинометил)бензил]карбаминовой кислоты (10,8 г, 29,15 ммоль) растворяют в 4M HCl в диоксане (400 мл). После одного часа при комнатной температуре растворитель удаляют в вакууме. Остаток суспендируют с помощью ацетона и твердый продукт отфильтровывают с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как гидрохлорид сложного бензилового эфира (4-аминометил-бензил)карбаминовой кислоты (11,9 г, 30,135 ммоль, 99%).
[M+H]+=359,15.
C. Сложный трет-бутиловый эфир {(S)-1-[4-(бензилоксикарбониламинометил)бензилкарбамоил]-2-пиридин-3-ил-этил}карбаминовой кислоты
(S)-2-трет-Бутоксикарбониламино-3-пиридин-3-ил-пропионовую кислоту (2,12 г, 7,96 ммоль) растворяют в CH2Cl2 (100 мл), добавляют HBTU (3,29 г, 8,68 ммоль) и триэтиламин (2,20 г, 21,71 ммоль). После 20 мин при комнатной температуре реакционную смесь охлаждают до 0°C и добавляют гидрохлорид сложного бензилового эфира (4-аминометил-бензил)карбаминовой кислоты (1,96 г, 7,24 ммоль). После 2 часов при 0°C реакционную смесь разбавляют CHCl3 (200 мл), этот раствор промывают 0,3M KHSO4 (1×50 мл), насыщенным раствором NaHCO3 (1×50 мл), водой (1×50 мл), раствором соли (1×50 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением белого твердого продукта. Твердый продукт затирают смесью EtOAc/петролейный эфир при 60-80°C с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный трет-бутиловый эфир {(S)-1-[4-(бензилоксикарбониламинометил)бензилкарбамоил]-2-пиридин-3-ил-этил}-карбаминовой кислоты (2,53 г, 4,88 ммоль, 67%).
[M+H]+=519,16.
D. Дигидрохлорид сложного бензилового эфира {4-[((S)-2-амино-3-пиридин-3-ил-пропиониламино)метил]бензил}карбаминовой кислоты
Сложный трет-бутиловый эфир {(S)-1-[4-(бензилоксикарбониламинометил)бензилкарбамоил]-2-пиридин-3-ил-этил}карбаминовой кислоты (2,52 г, 4,89 ммоль) обрабатывают с помощью смеси 4M HCl/диоксан (50 мл). После одного часа при комнатной температуре растворитель удаляют с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как дигидрохлорид сложного бензилового эфира {4-[((S)-2-амино-3-пиридин-3-ил-пропиониламино)метил]бензил}карбаминовой кислоты (2,31 г, 4,71 ммоль, 97%).
[M+H]+=419,18.
1H ЯМР: (d6-DMSO) δ: 9,38 (1H, т, J=5,7 Гц), 8,87 (1H, с), 8,81 (1H, д, J=5,4 Гц), 8,42-8,49 (2H, ушир. с), 8,41 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,93 (1H, дд, J=7,9, 5,8 Гц), 7,87 (1H, т, J=6,2 Гц), 7,28-7,38 (4H, м), 7,16-7,25 (4H, м), 5,03 (2H, с), 4,22-4,43 (4H, м), 4,18 (2H, д, J=6,1 Гц), 3,39 (1H, дд, J=14, 5,6 Гц), 3,26 (1H, дд, J=14,0, 8,2 Гц).
E. Сложный трет-бутиловый эфир [(R)-1-{(S)-1-[4-(бензилоксикарбониламинометил)бензилкарбамоил]-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил}-2-(4-этокси-фенил)этил]карбаминовой кислоты
(R)-2-Бензилоксикарбониламино-3-(4-этокси-фенил)пропионовую кислоту (870 мг, 2,80 ммоль) растворяют в CH2Cl2 (100 мл), добавляют HBTU (1,21 г, 3,20 ммоль) и триэтиламин (1,35 г, 13,33 ммоль). После 20 мин при комнатной температуре реакционную смесь охлаждают до 0°C и добавляют дигидрохлорид сложного бензилового эфира {4-[((S)-2-амино-3-пиридин-3-ил-пропиониламино)метил]бензил}карбаминовой кислоты (1,31 г, 2,67 ммоль). После 2 часов при 0°C реакционную смесь разбавляют CHCl3 (200 мл), этот раствор промывают 0,3M KHSO4 (1×50 мл), насыщенным раствором NaHCO3 (1×50 мл), водой (1×50 мл), раствором соли (1×50 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением белого твердого продукта. Твердый продукт затирают смесью EtOAc/петролейный эфир при 60-80°C с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный трет-бутиловый эфир [(R)-1-{(S)-1-[4-(бензилоксикарбониламинометил)-бензилкарбамоил]-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил}-2-(4-этокси-фенил)этил]карбаминовой кислоты (2,40 г, 1,70 ммоль, 90%).
[M+H]+=710,18.
F. Дигидрохлорид сложного бензилового эфира [4-({(S)-2-[(R)-2-амино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-пиридин-3-ил-пропиониламино}метил)бензил]карбаминовой кислоты
Сложный трет-бутиловый эфир [(R)-1-{(S)-1-[4-(бензилоксикарбониламинометил)бензилкарбамоил]-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил}-2-(4-этокси-фенил)этил]карбаминовой кислоты (1,70, 2,42 ммоль) обрабатывают с помощью смеси 4M HCl/диоксан (100 мл). После одного часа при комнатной температуре растворитель удаляют с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как дигидрохлорид сложного бензилового эфира [4-({(S)-2-[(R)-2-амино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-пиридин-3-ил-пропиониламино}метил)бензил]карбаминовой кислоты (1,50 г, 2,32 ммоль, 97%).
[M+H]+=609,99.
1H ЯМР: (d6-DMSO) δ: 9,29 (1H, д, J=8,4 Гц), 8,96 (1H, т, J=5,8 Гц), 8,83 (1H, с), 8,77 (1H, д, J=5,4 Гц), 8,39 (1H, д, J=8,2 Гц), 8,28-7,98 (2H, ушир. с), 7,92 (1H, дд, J=8,0, 5,7 Гц), 7,86 (1H, т, J=6,2 Гц), 7,28-7,38 (4H, м), 7,11-7,20 (4H, м), 6,95 (2H, д, J=8,6 Гц), 6,79 (2H, д, J=8,6 Гц), 5,02 (2H, с), 4,68-4,75 (1H, м), 4,23-4,25 (2H, м), 4,16 (2H, д, J=6,1 Гц), 3,83-4,13 (4H, м), 3,22 (1H, дд, J=14,0, 4,4 Гц), 3,03 (1H, дд, J=13,7, 9,7 Гц), 2,84 (1H, дд, J=14,0, 5,9 Гц), 2,63 (1H, дд, J=13,8, 6,1 Гц), 1,29 (3H, т, J=7,0 Гц).
G. Сложный бензиловый эфир [4-({(S)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-(4-метил-бензоиламино)пропиониламино]-3-пиридин-3-ил-пропиониламино}метил)бензил]карбаминовой кислоты
Дигидрохлорид сложного бензилового эфира [4-({(S)-2-[(R)-2-амино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-пиридин-3-ил-пропиониламино}метил)бензил]карбаминовой кислоты (150 мг, 0,23 моль) растворяют в дихлорметане (50 мл), этот раствор охлаждают до 0°C. Добавляют триэтиламин (70 мг, 0,70 ммоль), а затем п-толуоилхлорид (39 мг, 0,26 ммоль). После 18 часов при 0°C - комнатной температуре реакционную смесь разбавляют CHCl3 (50 мл), этот раствор промывают насыщенным раствором NaHCO3 (1×20 мл), водой (1×20 мл), раствором соли (1×20 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме. Остаток очищают с помощью флэш-хроматографии (диоксид кремния), элюент: 2% MeOH, 98% CHCl3, фракции объединяют и выпаривают в вакууме с получением бесцветного масла, идентифицируемого как сложный бензиловый эфир [4-({(S)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-(4-метил-бензоиламино)пропиониламино]-3-пиридин-3-ил-пропиониламино}метил)бензил]карбаминовой кислоты (130 мг, 0,18 ммоль, 77%).
[M+H]+=728,14.
H. Дигидрохлорид N-[(R)-1-[(S)-1-(4-аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-метил-бензамида
Сложный бензиловый эфир [4-({(S)-2-[(R)-3-(4-этокси-фенил)-2-(4-метил-бензоиламино)пропиониламино]-3-пиридин-3-ил-пропиониламино}метил)бензил]карбаминовой кислоты (98 мг, 0,13 ммоль) растворяют в метаноле (100 мл), добавляют 1M хлористоводородную кислоту (0,263 мл, 0,263 ммоль), и реакционную смесь гидрируют над 10% Pd/C (50 мг) при атмосферном давлении в течение 2 часов, по прохождении этого времени катализатор отфильтровывают и промывают метанолом (100 мл), объединенные фильтраты выпаривают в вакууме с получением белого твердого продукта, который перекристаллизуют из этанола с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как дигидрохлорид N-[(R)-1-[(S)-1-(4-аминометил-бензилкарбамоил)-2-пиридин-3-ил-этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]-4-метил-бензамида.
Выход=340 мг, 0,498 ммоль, 57%.
[M+H]+=593,99.
1H ЯМР: (d6-DMSO) δ: 1,28 (3H, т, J=7,05 Гц), 2,34 (3H, с), 2,72 (2H, д, J=8,16 Гц), 3,01-3,06 (1H, м), 3,25-3,28 (1H, м), 3,91-3,98 (4H, м), 4,32-4,38 (2H, м), 4,54-4,57 (1H, м), 4,70-4,73 (1H, м), 6,75 (2H, д, J=6,83 Гц), 7,18 (2H, д, J=8,56 Гц), 7,24 (2H, д, J=7,56 Гц), 7,25-7,27 (1H, м), 7,28 (2H, д, J=6,78 Гц), 7,39 (2H, д, J=7,51 Гц), 7,67 (1H, д, J=7,51 Гц), 7,76 (1H, с, ушир.), 8,22 (1H, д, J=7,56 Гц), 8,33 (3H, с, ушир.), 8,71-8,77 (4H, м).
Пример 200
N-[(R)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-(3,4-дифтор-фенил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамид
A. Сложный 9H-флуорен-9-илметиловый эфир [4-(трет-бутоксикарбониламинометил)бензил]карбаминовой кислоты
трет-Бутил 4-(аминометил)бензилкарбамат (7,5 г, 31,74 ммоль) растворяют в дихлорметане (250 мл). Этот раствор охлаждают до 0°C и добавляют триэтиламин (9,63 г, 93,2 ммоль), а затем 9H- сложный флуорен-9-илметиловый эфир сложного 2,5-диоксо-пирролидин-1-илового эфира угольной кислоты (12,85 г, 38,09 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 0°C - комнатной температуре в течение 3 часов и разбавляют CHCl3 (200 мл), фильтрат промывают 0,3M KHSO4 (1×50 мл), насыщенным раствором NaHCO3 (1×50 мл), водой (1×50 мл), раствором соли (1×50 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением белого твердого продукта. Твердый продукт затирают смесью EtOAc/петролейный эфир при 60-80°C с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный 9H-флуорен-9-илметиловый эфир [4-(трет-бутоксикарбониламинометил)бензил]карбаминовой кислоты (13,96 г, 30,44 ммоль, 96%).
[M+H]+=359,14 (M-Boc).
B. Гидрохлорид сложного 9H-флуорен-9-илметиловый эфир (4-аминометил-бензил)карбаминовой кислоты
Сложный 9H-флуорен-9-илметиловый эфир [4-(трет-бутоксикарбониламинометил)бензил]карбаминовой кислоты (13,9 г, 31,41 ммоль) растворяют в 4M HCl в диоксане (400 мл). После одного часа при комнатной температуре растворитель удаляют в вакууме. Остаток затирают ацетоном, твердый продукт отфильтровывают с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как гидрохлорид сложного 9H-флуорен-9-илметилового эфира (4-аминометил-бензил)карбаминовой кислоты (11,9 г, 30,135 ммоль, 99%)
[M+H]+=359,15.
C. Сложный трет-бутиловый эфир ((S)-2-(3,4-дифтор-фенил)-1-{4-[(9H-флуорен-9-илметоксикарбониламино)метил]- бензилкарбамоил}этил)карбаминовой кислоты
(S)-2-трет-Бутоксикарбониламино-3-(3,4-дифтор-фенил)-пропионовую кислоту (2,1 г, 6,96 ммоль) растворяют в CH2Cl2 (250 мл) и DMF (25 мл). Этот раствор охлаждают до 0°C. Добавляют гидрохлорид сложного 9H-флуорен-9-илметилового эфира (4-аминометил-бензил)карбаминовой кислоты (2,5 г, 6,33 ммоль), а затем HOBt (940 мг, 6,96 ммоль) и триэтиламин (1,92 г, 18,99 ммоль). Затем добавляют водорастворимый карбодиимид (1,45 г, 7,6 ммоль). После 18 часов при 0°C - комнатной температуре реакционную смесь разбавляют хлороформом (400 мл), промывают 0,3M KHSO4 (1×30 мл), NaHCO3 (1×30 мл), водой (1×30 мл), раствором соли (1×30 мл) и выпаривают в вакууме с получением белого твердого продукта. Остаток затирают смесью этилацетат/петролейный эфир при 60-80°C с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный трет-бутиловый эфир ((S)-2-(3,4-дифтор-фенил)-1-{4-[(9H-флуорен-9-илметоксикарбониламино)метил]бензилкарбамоил}этил)карбаминовой кислоты (2,60 г, 4,05 ммоль, 64%).
[M+H]+=641,9, 664,07 (M+Na).
D. Гидрохлорид сложного 9H-флуорен-9-илметилового эфира (4-{[(S)-2-амино-3-(3,4-дифтор-фенил)пропиониламино]метил}бензил)карбаминовой кислоты
Сложный трет-бутиловый эфир ((S)-2-(3,4-дифтор-фенил)-1-{4-[(9H-флуорен-9-илметоксикарбониламино)метил]бензилкарбамоил}этил)карбаминовой кислоты (2,5 г, 3,90 ммоль) растворяют в 4M HCl в диоксане (150 мл). После одного часа при комнатной температуре растворитель удаляют в вакууме с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как гидрохлорид сложного 9H-флуорен-9-илметилового эфира (4-{[(S)-2-амино-3-(3,4-дифтор-фенил)пропиониламино]метил}бензил)карбаминовой кислоты (2,25 г, 3,89 ммоль, 100%).
[M+H]+=542,12.
E. Сложный трет-бутиловый эфир [(R)-1-((S)-2-(3,4-дифтор-фенил)-1-{4-[(9H-флуорен-9-илметоксикарбониламино)метил]бензилкарбамоил}этилкарбамоил)-2-(4-этокси-фенил)этил]карбаминовой кислоты
(R)-2-трет-Бутоксикарбониламино-3-(4-этокси-фенил)пропионовую кислоту (895 мг, 2,90 ммоль) растворяют в CH2Cl2 (250 мл) и DMF (25 мл). Этот раствор охлаждают до 0°C. Добавляют гидрохлорид сложного 9H-флуорен-9-илметилового эфира (4-{[(S)-2-амино-3-(3,4-дифтор-фенил)пропиониламино]метил}бензил)карбаминовой кислоты (1,5 г, 2,63 ммоль), а затем HOBt (391 мг, 2,90 ммоль) и триэтиламин (800 мг, 7,89 ммоль). Затем добавляют водорастворимый карбодиимид (605 мг, 3,16 ммоль). После 18 часов при 0°C - комнатной температуре реакционную смесь разбавляют хлороформом (200 мл), промывают 0,3M KHSO4 (1×30 мл), NaHCO3 (1×30 мл), водой (1×30 мл), раствором соли (1×30 мл) и выпаривают в вакууме с получением белого твердого продукта. Остаток затирают смесью этилацетат/петролейный эфир при 60-80°C с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный трет-бутиловый эфир [(R)-1-((S)-2-(3,4-дифтор-фенил)-1-{4-[(9H-флуорен-9-илметоксикарбониламино)метил]бензилкарбамоил}этилкарбамоил)-2-(4-этокси-фенил)этил]карбаминовой кислоты (2,1 г, 2,52 ммоль, 96%).
[M+H]+=733,15 (M-Boc).
F. Гидрохлорид сложного 9H-флуорен-9-илметилового эфира (4-{[(S)-2-[(R)-2-амино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-(3,4-дифтор-фенил)пропиониламино]метил}бензил)карбаминовой кислоты
Сложный трет-бутиловый эфир [(R)-1-((S)-2-(3,4-дифтор-фенил)-1-{4-[(9H-флуорен-9-илметоксикарбониламино)метил]бензилкарбамоил}этилкарбамоил)-2-(4-этокси-фенил)этил]-карбаминовой кислоты (2,1 г, 2,52 ммоль) растворяют в 4M HCl в диоксане (150 мл). После одного часа при комнатной температуре растворитель удаляют в вакууме и остаток затирают ацетоном с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как гидрохлорид сложного 9H-флуорен-9-илметилового эфира (4-{[(S)-2-[(R)-2-амино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-(3,4-дифтор-фенил)пропиониламино]метил}бензил)карбаминовой кислоты (1,9 г, 2,47 ммоль, 98%).
[M+H]+=73,12.
G. Сложный 9H-флуорен-9-илметиловый эфир (4-{[(S)-2-[(R)-2-бензоиламино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-(3,4-дифтор-фенил)пропиониламино]метил}бензил)карбаминовой кислоты
Гидрохлорид сложного 9H-флуорен-9-илметилового эфира (4-{[(S)-2-[(R)-2-амино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-(3,4-дифтор-фенил)пропиониламино]метил}бензил)карбаминовой кислоты (410 мг, 0,53 ммоль) растворяют в дихлорметане (50 мл). Этот раствор охлаждают до 0°C и добавляют триэтиламин (162 мг, 1,60 ммоль), а затем бензоилхлорид (82 мг, 0,59 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 0°C - комнатной температуре в течение 3 часов и разбавляют CHCl3 (100 мл), фильтрат промывают 0,3M KHSO4 (1×30 мл), насыщенным раствором NaHCO3 (1×30 мл), водой (1×30 мл), раствором соли (1×30 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением белого твердого продукта. Твердый продукт затирают горячим этанолом, охлажденную суспензию фильтруют с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный 9H-флуорен-9-илметиловый эфир (4-{[(S)-2-[(R)-2-бензоиламино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-(3,4-дифтор-фенил)пропиониламино]метил}бензил)карбаминовой кислоты (240 мг, 0,34 ммоль, 99%).
[M+H]+=697,18.
H. Гидрохлорид N-[(R)-1-[(S)-1-(4-аминометил-бензилкарбамоил)-2-(3,4-дифтор-фенил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамида
Сложный 9H-флуорен-9-илметиловый эфир (4-{[(S)-2-[(R)-2-бензоиламино-3-(4-этокси-фенил)пропиониламино]-3-(3,4-дифтор-фенил)пропиониламино]метил}бензил)карбаминовой кислоты (180 мг, 0,215 ммоль) растворяют в диэтиламине/THF (1:1, 100 мл), реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов, по прохождении этого времени растворитель удаляют в вакууме и остаток затирают смесью этилацетат/петролейный эфир при 60-80°C с получением идентифицируемого белого твердого продукта, который обрабатывают 4M HCl в диоксане (20 мл), растворитель удаляют в вакууме и остаток перекристаллизуют из EtOH с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как гидрохлорид N-[(R)-1-[(S)-1-(4-аминометил-бензилкарбамоил)-2-(3,4-дифтор-фенил)этилкарбамоил]-2-(4-этокси-фенил)этил]бензамид (62 мг, 0,095 ммоль, 44%).
[M+H]+=614,68.
1H ЯМР: (d6-DMSO) δ: 1,26 (3H, т, J=6,79 Гц), 2,65-2,84 (3H, м), 3,03-3,08 (1H, м), 3,92 (2H, кв., J=6,11 Гц), 3,96 (2H, с), 4,27-4,35 (2H, м), 4,57-4,63 (2H, м), 6,75 (2H, д, J=8,03 Гц), 7,16 (2H, д, J=8,76 Гц), 7,23-7,25 (1H, м), 7,26-7,27 (2H, м), 7,37-7,51 (6H, м), 7,43 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,73-7,75 (2H, м), 8,24 (2H, с), 8,50 (1H, д, J=7,40 Гц), 8,67-8,71 (2H, м).
Пример 201
N-{(R,S)-1-[(S)-1-(4-Аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-[4-(2,2,2-трифтор-этокси)фенил]этил}бензамид
A. (R,S)-2-Бензилоксикарбониламино-3-[4-(2,2,2-трифтор-этокси)фенил]пропионовая кислота
(R)-2-Бензилоксикарбониламино-3-(4-гидрокси-фенил)пропионовую кислоту (1,0 г, 3,17 ммоль) растворяют в THF (70 мл), добавляют 2,2,2-трифторэтилтрифторметансульфонат (883 мг, 3,81 ммоль) и карбонат цезия (3,1 г, 9,51 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 65°C в течение 18 часов, по прохождении этого времени растворитель удаляют в вакууме и остаток извлекают в EtOAc (100 мл), этот раствор промывают 1M HCl (1×30 мл), водой (1×30 мл), раствором соли (1×30 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме. Остаток очищают с помощью флэш-хроматографии (диоксид кремния), элюент: 1% AcOH, 5% MeOH, 94% CHCl3, фракции объединяют и выпаривают в вакууме с получением бесцветного масла, идентифицируемого как (R,S)-2-бензилоксикарбониламино-3-[4-(2,2,2-трифтор-этокси)фенил]пропионовая кислота (380 мг, 0,96 ммоль, 30%).
[M+H]+=395,11.
B. Сложный бензиловый эфир {(R,S)-1-{(S)-1-[4-(трет-бутоксикарбониламинометил)бензилкарбамоил]-2-фенил-этилкарбамоил}-2-[4-(2,2,2-трифтор-этокси)фенил]этил}карбаминовой кислоты
(R,S)-2-Бензилоксикарбониламино-3-[4-(2,2,2-трифтор-этокси)фенил]пропионовую кислоту (200 мг, 0,50 ммоль) растворяют в CH2Cl2 (50 мл) и DMF (2,5 мл). Этот раствор охлаждают до 0°C. Добавляют сложный трет-бутиловый эфир {4-[((S)-2-амино-3-фенил-пропиониламино)метил]бензил}карбаминовой кислоты (231 мг, 0,60 ммоль), а затем HOBt (75 мг, 0,55 ммоль) и триэтиламин (153 мг, 1,51 ммоль). Затем добавляют водорастворимый карбодиимид (116 мг, 0,60 ммоль). После 18 часов при 0°C - комнатной температуре реакционную смесь разбавляют хлороформом (400 мл), промывают 0,3M KHSO4 (1×30 мл), NaHCO3 (1×30 мл), водой (1×30 мл), раствором соли (1×30 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением желтого масла. Остаток очищают с помощью флэш-хроматографии (диоксид кремния), элюент: 3% MeOH, 97% CHCl3, фракции объединяют и выпаривают в вакууме с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный бензиловый эфир {(R,S)-1-{(S)-1-[4-(трет-бутоксикарбониламинометил)бензилкарбамоил]-2-фенил-этилкарбамоил}-2-[4-(2,2,2-трифтор-этокси)фенил]этил}карбаминовой кислоты (350 мг, 0,46 ммоль, 92%).
[M+H]+=663,43 (M-Boc), 785,44 (M+Na).
C. Сложный трет-бутиловый эфир {4-[((S)-2-{(R,S)-2-амино-3-[4-(2,2,2-трифтор-этокси)фенил]пропиониламино}-3-фенил-пропиониламино)метил]бензил}карбаминовой кислоты
Сложный бензиловый эфир {(R,S)-1-{(S)-1-[4-(трет-бутоксикарбониламинометил)бензилкарбамоил]-2-фенил-этилкарбамоил}-2-[4-(2,2,2-трифтор-этокси)фенил]этил}карбаминовой кислоты (350 мг, 0,46 ммоль) растворяют в метаноле (100 мл). Этот раствор гидрируют над 10% Pd/C (50 мг) при атмосферном давлении в течение 2 часов, по прохождении этого времени катализатор отфильтровывают и промывают метанолом (100 мл), объединенные фильтраты выпаривают в вакууме с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный трет-бутиловый эфир {4-[((S)-2-{(R,S)-2-амино-3-[4-(2,2,2-трифтор-этокси)фенил]пропиониламино}-3-фенил-пропиониламино)метил]бензил}карбаминовой кислоты (270 мг, 0,43 ммоль, 94%).
[M+H]+=629,40.
D. Сложный трет-бутиловый эфир {4-[((S)-2-{(R,S)-2-бензоиламино-3-[4-(2,2,2-трифтор-этокси)фенил]пропиониламино}-3-фенил-пропиониламино)метил]бензил}карбаминовой кислоты
Сложный трет-бутиловый эфир {4-[((S)-2-{(R,S)-2-амино-3-[4-(2,2,2-трифтор-этокси)фенил]пропиониламино}-3-фенил-пропиониламино)метил]бензил}карбаминовой кислоты (250 мг, 0,40 ммоль) растворяют в дихлорметане (50 мл). Этот раствор охлаждают до 0°C и добавляют триэтиламин (121 мг, 1,19 ммоль), а затем бензоилхлорид (61 мг, 0,44 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 0°C - комнатной температуре в течение 18 часов и разбавляют CHCl3 (100 мл), фильтрат промывают 0,3M KHSO4 (1×30 мл), насыщенным NaHCO3 (1×30 мл), водой (1×30 мл), раствором соли (1×30 мл), сушат (Na2SO4) и выпаривают в вакууме с получением белого твердого продукта. Твердый продукт затирают смесью этилацетат/петролейный эфир при 60-80°C с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как сложный трет-бутиловый эфир {4-[((S)-2-{(R,S)-2-бензоиламино-3-[4-(2,2,2-трифтор-этокси)фенил]пропиониламино}-3-фенил-пропиониламино)метил]бензил}карбаминовой кислоты (190 мг, 0,26 ммоль, 65%).
[M+H]+=733,357, 755,49 (M+Na).
E. Дитрифторацетат N-{(R,S)-1-[(S)-1-(4-аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-[4-(2,2,2-трифтор-этокси)фенил]этил}бензамида
Сложный трет-бутиловый эфир {4-[((S)-2-{(R,S)-2-бензоиламино-3-[4-(2,2,2-трифтор-этокси)фенил]пропиониламино}-3-фенил-пропиониламино)метил]бензил}карбаминовой кислоты (190 мг, 0,26 ммоль) обрабатывают с помощью смеси 4M HCl/диоксан (50 мл). После одного часа при комнатной температуре растворитель удаляют. Остаток очищают с помощью препаративной ВЭЖХ (препаративная колонка Sunfire C18 OBD. 19×250 мм, 10 мкм), 10 - 90% от 0,1% TFA/MeCN до 0,1 %TFA/H2O в течение 35 мин при 20 мл/мин. Фракции объединяют и лиофилизуют с получением белого твердого продукта, идентифицируемого как дитрифторацетат N-{(R,S)-1-[(S)-1-(4-аминометил-бензилкарбамоил)-2-фенил-этилкарбамоил]-2-[4-(2,2,2-трифтор-этокси)фенил]этил}бензамида (56 мг, 0,075 ммоль, 29%).
[M+H]+=632,51.
1H ЯМР (d6-DMSO) δ: 2,68 (1H, д, J=7,44 Гц), 2,82-3,08 (5H, м), 3,98 (2H, д, J=5,92 Гц), 4,31-4,34 (2H, м), 4,60-4,70 (4H, м), 6,90-6,94 (2H, м), 7,16-7,28 (6H, м), 7,34-7,37 (2H, м), 7,43-7,52 (3H, м), 7,74-7,79 (2H, м), 8,09 (3H, с, ушир.), 8,47 (1H, д, J=8,45 Гц), 8,58-8,62 (2H, м).
Определение кинетической растворимости в фосфатном буфере
Растворимость определяют турбидиметрически с использованием стандартных опубликованных методов (Lipinski et.al. Advanced Drug Delivery Reviews 23 (1997) 3-25). Приготавливают 10 мМ исходный раствор соединения в DMSO, его добавляют к 25 мМ натрий фосфатного буфера, pH 7,0, с получением концентраций, находящихся в пределах от 12 до 235 мкМ. После встряхивания в течение приблизительно 30 секунд измеряют уменьшение пропускания света этих образцов, на 650 нм, (спектрофотометр УФ/видимого света Molecular Devices Spectromax). Второе измерение осуществляют приблизительно через 30 секунд. Поглощение больше чем 0,005 принимается как показатель того, что происходит некоторая преципитация соединения и, следовательно, соединение не растворимо при этой концентрации.
Данные, полученные при этих определениях, показаны в Таблице 8, ниже:
Определение термодинамической растворимости в фосфатном буфере
Определяют термодинамическую растворимость соединения в аммоний-фосфатном буфере (pH 7,4, 290 мОсм). Соединения берут при номинальной концентрации 1 мг/мл, перемешивают, затем помещают на шейкер в течение 1 часа, при 37°C, приблизительно при 950 об/мин. После инкубирования образцы переносят в пробирки Eppendorf и центрифугируют при 15000 g (удельная сила центрифугирования) в течение 10 минут при 37°C. Концентрацию соединения в супернатанте определяют с помощью анализа LC-MS/MS с использованием калибровочной линии, полученной от исходного раствора в DMSO.
Данные, полученные при этих определениях, показаны в Таблице 9, ниже:
Биологические методы
Способность соединений формулы (I) к ингибированию калликреина плазмы может быть определена с использованием следующего биологического анализа:
Определение IC50 для калликреина плазмы
Ингибирующую активность по отношению к калликреину плазмы in vitro определяют с использованием стандартных опубликованных методов (смотри например Johansen et al., Int. J. Tiss. Reac. 1986, 8, 185; Shori et al., Biochem. Pharmacol, 1992, 43, 1209; Sturzebecher et al., Biol. Chem. Hoppe-Seyler, 1992, 373, 1025). Калликреин плазмы человека (Protogen) инкубируют при 37°C вместе с флюорогенным субстратом H-DPro-Phe-Arg-AFC и при различных концентрациях исследуемого соединения. Остаточную активность фермента (начальную скорость реакции) определяют посредством измерения изменения оптического поглощения при 410 нм и определяют значение IC50 для исследуемого соединения.
Данные, полученные при этом анализе, показаны в Таблицах 10 и 11, ниже:
Осуществляют дополнительный скрининг выбранных соединений относительно их ингибирующей активности против родственного фермента KLK1. Способность соединений формулы (I) к ингибированию KLK1 можно определить с использованием следующего биологического анализа:
Определение IC50 для KLK1
Ингибирующую активность по отношению к KLK1 in vitro определяют с использованием стандартных опубликованных методов (смотри например Johansen et al., Int. J. Tiss. Reac. 1986, 8, 185; Shori et al., Biochem. Pharmacol, 1992, 43, 1209; Sturzebecher et al., Biol. Chem. Hoppe-Seyler, 1992, 373, 1025). KLK1 человека (Callbiochem) инкубируют при 37°C с флюорогенным субстратом H-DVal-Leu-Arg-AFC при различных концентрациях исследуемого соединения. Остаточную активность фермента (начальную скорость реакции) определяют посредством измерения изменения оптического поглощения при 410 нм и определяют значение IC50 для исследуемого соединения.
Данные, полученные при этом анализе, показаны в Таблицах 12 и 13, ниже:
Осуществляют дополнительный скрининг выбранных соединений относительно их ингибирующей активности против родственных ферментов плазмина, тромбина, трипсина, Фактора Xa и Фактора XIIa. Способность соединений формулы (I) относительно ингибирования этих ферментов может определяться с использованием следующих биологических анализов:
Определение селективности ферментов
Ферменты - серинпротеазы человека плазмин, тромбин, трипсин, Фактор Xa и Фактор XIIa анализируют на ферментативную активность с использованием соответствующего флюорогенного субстрата. Активность протеазы измеряют посредством мониторинга накопления высвободившейся флуоресценции из субстрата в течение 5 минут. Линейную скорость повышения флуоресценции в минуту выражают как процент (%) активности. Значение Km для расщепления каждого субстрата определяют с помощью стандартного преобразования уравнения Михаэлиса-Метен. Анализы ингибирования соединения осуществляют при концентрации субстрата Km, и активности вычисляют как концентрацию ингибитора, дающую 50% ингибирования (IC50) от активности неингибируемого фермента (100%).
Данные, полученные при этих анализах, показаны в Таблице 14, ниже:
Модель повышенной проницаемости ретинальных сосудов, индуцируемой угольной ангидразой I
Активность Примера 3 устанавливают с использованием этой модели in vivo на крысах. Крысы получают интравитреальную инъекцию (5 мкл) фосфатного буферного раствора (PBS), CH-3457 (положительный контроль ингибитора калликреина плазмы) (10 мкМ) или Примера 3 (1 мкМ) в момент времени 0. Через 30 мин вводят вторую интравитреальную инъекцию (5 мкл) PBS или CA-I (200 нг/глаз). Через 15 минут вливают 10% натрий флюоресцеин и измеряют проницаемость ретинальных сосудов (RVP) посредством флюорофотометрии стекловидного тела через 75 минут после начальных инъекций IVT. Данные для Примера 3 представлены на Фигуре 1, на которой нижняя прерывистая линия показывает базальную RVP после PBS/PBS и верхняя прерывистая линия показывает максимальное стимулирование. Интравитреальная инъекция 1 мкМ Примера 3 самого по себе не оказывает влияния на базальную RVP по сравнению с PBS самим по себе (3,29±0,21 по сравнению с 3,64±0,48). Интравитреальная инъекция Примера 3 понижает RVP (стимулируемую с помощью инъекции CA-I) на 53±21%.
Фармакокинетика
Осуществляют фармакокинетическое исследование Примера 3 для оценки глазной и системной фармакокинетики после одной дозы IVT у пигментированных (Dutch-belted) кроликов. По шесть кроликов на каждый уровень дозы получают одну билатеральную инъекцию IVT из 50 мкл 4,2 мкг/мл (210 нг на глаз) Примера 3, приготовленного в фосфатном буферном растворе. Эвтаназируют по одному кролику в каждый момент времени (4, 8, 24, 48, 96 и 168 часов после введения IVT) и измеряют концентрации Примера 3 в глазных тканях, в стекловидном теле, сетчатке/хороиде и в глазной жидкости. Собирают последовательно образцы крови у выживших кроликов.
Данные по концентрации в глазных тканях представлены на Фигуре 2, на которой сплошная линия для каждой концентрации в глазной ткани представляет собой среднее значение для левого и правого глаза каждого кролика. Уменьшение концентрации в глазных тканях для Примера 3 является минимальным в течение 7 дней. Концентрации Примера 3 в плазме после введения IVT были ниже 1 нг/мл во всех временных точках.
Реферат
Настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I), композициям, содержащим такие соединения; применению таких соединений в терапии для лечения или предотвращения заболеваний или состояний, при которых предполагается активность калликреина плазмы; и способам лечения пациентов с помощью таких соединений; где Rвыбирают из Н, алкила, -СОалкила, -СОарила, -СОгетероарила, -(СН)ОН, -(СН)COOR, -(СН)CONH, -SOалкила, -SОарила, -SO(СН)R, -СО(СН)R, -СОциклоалкила, -COCH=CHR, -СО(СН)NHCO(СН)kRи -CONRR; Rвыбирают из Н и алкила; Rвыбирают из алкила, -(СН)арила, -(СН)гетероарила, (СН)циклоалкила, -СН(циклоалкила)и -(СН)арил-O-(СН)-арила; Rи Rнезависимо выбирают из Н и алкила; Rвыбирают из Н и ОН; или Rи R, вместе с атомами, к которым они присоединены, могут связываться с образованием 5- или 6-членной азациклоалкильной структуры; Rвыбран из Н и галогена; Rвыбран из Н, алкила, галогена и CF; Rпредставляет собой арил или гетероарил; Rпредставляет собой Н или алкил; а, b, с, d, е, f, g, h, i, j, l и m независимо представляют собой 1, 2 или 3; k равно 0, 1, 2 или 3; *1 и *2 обозначает хиральные центры. 8 н. и 11 з.п. ф-лы, 2 ил., 15 табл., 201 пр.
Формула
Документы, цитированные в отчёте о поиске
Селективные дипептидные ингибиторы калликреина, фармацевтическая композиция на их основе, их применение и способ лечения
