Код документа: RU2620375C9
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к соединениям, которые являются лигандами эстрогеновых рецепторов и которые преимущественно селективны в отношении β-изоформы эстрогеновых рецепторов, к способам получения таких соединений и к способам применения таких соединений для лечения заболеваний, связанных с эстрогеновым рецептором, таких как депрессивные расстройства, тревожные расстройства, болезнь Альцгеймера, когнитивные расстройства, остеопороз, повышенный уровень триглицеридов в крови, атеросклероз, эндометриоз, недержание мочи, аутоиммунные заболевания и рак легких, толстой кишки, молочной железы, матки и предстательной железы.
Уровень техники
Эстрогеновый рецептор (ЭР) - это лиганд-активируемый фактор транскрипции млекопитающих, вовлеченный в регуляцию экспрессии генов по типу положительной и отрицательной обратной связи. Естественным гормоном эстрогенового рецептора является β-17-эстрадиол (Е2) и близкородственные метаболиты. Связывание эстрадиола с эстрогеновым рецептором приводит к димеризации рецептора, а димер, в свою очередь, связывается с эстрогеновыми ответными элементами («ERE») в ДНК. Комплекс ЭР/ДНК рекрутирует другие факторы транскрипции, ответственные за транскрипцию ДНК ниже по потоку от ERE к мРНК, которая в конечном итоге транслируется в белок. Кроме того, взаимодействие ЭР с ДНК может быть косвенным и происходить посредством других транскрипционных факторов, в первую очередь фруктоолигосахаридов и jun-киназы. Поскольку экспрессия большого числа генов регулируется эстрогеновым рецептором, а эстрогеновый рецептор экспрессируется во многих типах клеток, модуляция эстрогенового рецептора посредством связывания естественных гормонов или синтетических ЭР-лигандов может обладать сильным эффектом на физиологию и патофизиологию организма.
Исторически считалось, что существует только один эстрогеновый рецептор. Однако, был выявлен второй подвид рецептора (ЭР-β). Хотя и «классический» ЭР-α и недавно открытый ЭР-β широко распространены в различных тканях, они все же показывают заметно разное распространение по типам клеток и тканей. Потому синтетические лиганды, селективные в отношении ЭР-α или ЭР-β, могут сохранять полезное воздействие эстрогена, снижая риск нежелательных побочных эффектов.
Эстрогены критически важны для сексуального развития женщин. Кроме того, эстрогены играют важную роль в поддержании плотности костной ткани, регуляции уровня липидов в крови, и, вероятно, оказывают нейропротекторное действие. Следовательно, сокращение выработки эстрогена в период после менопаузы у женщины связано с рядом заболеваний, таких как остеопороз, атеросклероз, депрессия и когнитивные расстройства. И наоборот, некоторые виды пролиферативных заболеваний, таких как рак молочной железы и матки и эндометриоз стимулируются эстрогенами, и поэтому в профилактике и лечении этих видов заболеваний применяются антиэстрогены (т.е. антагонисты эстрогенов).
Была также продемонстрирована эффективность естественного эстрогена, 17β-эстрадиола, в лечении различных форм депрессивных расстройств, было высказано предположение о том, что действие эстрогена как антидепрессанта может быть опосредовано через регуляцию активности триптофана гидроксилазы и последующий синтез серотонина (См., например, Lu Ν. Ζ., Shlaes Т.A., Cundlah С., Dziennis S.Ε., Lyle R.Ε., Bethea С.L., Ovarian steroid action on tryptophan hydroxylase protein и serotonin compared to localization of ovarian steroid receptors in midbrain of guinea pigs («Действие овариальных стероидов на белок триптофана гидроксилазы и серотонин по сравнению с локализацией овариальных стероидных рецепторов в среднем мозге морских свинок»), издание «Endocrine» 11: 257-267, 1999). Плейотропная природа естественного эстрогена препятствует его широкому, более длительному использованию в связи с повышенным риском развития пролиферативных эффектов в тканях молочной железы, матки и яичников. Выявление эстрогенового рецептора, ЭР-β, предоставило средство, с помощью которого можно определить большее количество селективных агентов эстрогена, которые имеют нужное антидепрессантное действие в отсутствие пролиферативных эффектов, которые опосредуются ЭР-α. Таким образом, было доказано, что обладающие ЭРβ-селективностью лечебные средства потенциально эффективны в лечении депрессии.
В данном случае необходимы соединения, которые могут обеспечивать ту же положительную реакцию, что и эстроген-заместительная терапия, но без ее негативных побочных эффектов. Также необходимы эстроген-подобные соединения, которые оказывают селективное воздействие на различные ткани организма.
Синтез ряда полизамещенных бифенильных соединений и их связывающая способность в отношении рекомбинантного эстрогенового альфа-рецептора человека раскрыты в работе Д. Лесюиссе и соавт. (D. Lesuisse et al, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2001, 11, 1709-1712). Ряд производных соединений 4-гидрокси-бифенил-карбальдегидного оксима и их связывающая способность в отношении подтипов эстрогенового рецептора (ЭР) ЭР-α и ЭР-β описаны в работе С. Янга и соавт. (С. Yang et al, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2004, 12, 2553-2570 и в WO 2004/099122).
Дополнительные производные соединения арил-карбальдегидного оксима и их использование в качестве эстрогеновых препаратов описано в WO 2004/103941. Некоторые бифенильные соединения и их применение в терапии рассеянного склероза раскрыты в WO 2006/105442.
Соединения настоящего изобретения представляют собой лиганды эстрогеновых рецепторов, и в качестве таковых могут применяться при лечении и профилактике ряда заболеваний, связанных с функционированием эстрогена.
Раскрытие изобретения
Настоящее изобретение представляет соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемые эфир, амид, карбамат или соль, в том числе соль такого эфира, амида или карбамата,
где
R1 выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного 5-10-членного гетероциклила, необязательно замещенного фенила, необязательно замещенного нафтила, необязательно замещенного С3-8циклоалкила, необязательно замещенного С5-6циклоалкенила, необязательно замещенного фенил-С2-4алкенила, С2-8алкенила, галоген-С2-8алкенила, дигалоген-С2-8алкенила, тригалоген-С2-8алкенила и С3-8циклоалкил-С2-4алкенила. При замещении указанной гетероциклильной, фенильной или нафтильной группы или части группы она замещается от одного до пяти заместителями, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из ORA, N(RB)2, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, -С(O)С1-4алкила, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-C1-6алкила, а при замещении указанной группы С3-8циклоалкила или С5-6циклоалкенила она замещается 1, 2 или 3 замещающими группами, каждая из которых выбрана из С1-5алкила, С1-5алкенила, С1-5алкинила, C1-5алкила с замещением до 3 атомов галогена, -СО-С1-5алкила и галогена;
R2 выбран из группы, состоящей из -C(NH2)=N-OH, -C(O)N(RC)2, циано, -СНО, -CH=N-OH, -C(O)NH-OH, -C(CO2H)=N-OH, -C(O-C1-4алкила)=NH, -C(NH2)=N-NH2, -C(O)-C(O)-NH2, -C(O)CO2H, -CO2H, -СН2-CO2H, -СН(ОН)CO2H, -CH2NH-CONH2, С1-6алкил-NH2, С1-6алкил-ОН, -CH2SO3H, -NH-C(NH2)=NH, -NH-C(O)NH2, -N=C(-NH-CH2CH2-NH-), N(RB)2, N(OH)2, NHSO2RD, -S-CN, -S-C(NH2)=NH, -S-C(NH2)=N-OH, SO2N(RE)2, SO3H, циан-С1-6алкила, а также необязательно замещенного 5-10-членного гетероциклила, содержащего 1-3 атома азота, причем при замещении указанной гетероциклильной группы она замещается 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из ORA, N(RB)2, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, - С(O)С1-4алкила, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила;
R3 выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, цианогруппы, C1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, С3-8циклоалкила, С3-8циклоалкил-С1-6алкила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила, тригалоген-С1-6алкила, необязательно замещенного фенила, необязательно замещенного фенил-С1-4алкила, необязательно замещенного 5-10-членного гетероциклила и необязательно замещенного 5-10-членного гетероциклил-С1-4алкила, причем при замещении указанных фенильной или гетероциклильной группы или части группы она замещается 1-5 заместителями, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из ORA, N(RB)2, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила;
R4 выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, цианогруппы, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила;
каждый из R5, R6, R8 и R9 независимо выбран из группы, состоящей из водорода, ORA, N(RB)2, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, -С(O)С1-4алкила, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила;
R7 - представляет собой ORA;
или R6 и R7 могут вместе с атомами, с которыми они соединены, формировать 5-, 6- или 7-членную циклическую группу, необязательно содержащую 1-3 гетероатома, выбранных из О, N и S, причем указанная 5-, 6- или 7-членную циклическая группа необязательно замещена одной и более группами, выбранными из ORA, цианогруппы, нитрогруппы, C1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила; и
каждый RA, каждый RB, каждый RC, каждый RD и каждый RE независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, С3-8циклоалкила и С3-8циклоалкил-С1-6алкила, каждый необязательно замещенный 1-3 атомами галогена.
Неожиданно было обнаружено, что соединения по изобретению являются лигандами эстрогенового рецептора. Соответственно, соединения находят применение при лечении и профилактике состояний, ассоциированных с активностью эстрогеновых рецепторов.
Осуществление изобретения
Соединения по изобретению могут содержать хиральные (ассиметричные) центры, или молекула в целом может быть хиральной. Отдельные стереоизомеры (энантиомеры и диастереоизомеры) и их смеси подпадают под объем настоящего изобретения.
Некоторые соединения по изобретению содержат оксимовую группу, которая может быть представлена в виде (Е) или (Ζ) изомера оксима. Отдельные (Е) или (Ζ) изомеры оксима и их смеси подпадают под объем настоящего изобретения. Во всей спецификации, где оксимовая структура показана соединением с волнообразными линиями, это означает, что имеется один изомер, но стереохимия неизвестна, либо что присутствует смесь обоих изомеров.
Настоящее изобретение относится к соединениям, которые являются лигандами эстрогеновых рецепторов. Понятие «лиганд эстрогенового рецептора» в настоящем документе применяется для обозначения любого фрагмента, который связывается с эстрогеновым рецептором. Лиганд может действовать как агонист, частичный агонист, антагонист или частичный антагонист. Лиганд может быть ЭΡ-β-селективным или показывать смешанное действие ЭР-α и ЭР-β. Например, лиганд может действовать как агонист или частичный агонист ЭР-β и как антагонист или частичный антагонист ЭР-α. Соединения по настоящему изобретению преимущественно являются лигандами эстрогенового рецептора, которые проявляют селективный агонизм к ЭР-β.
В одном варианте осуществления изобретения, далее по тексту обозначенном «вариант R1(А)», R1 представляет собой необязательно замещенный 5-10-членный гетероциклил, причем при замещении указанной гетероциклильной группы она замещается 1-5 заместителями, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из ORA, N(RB)2, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, -C(O)C1-4алкила, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила.
В другом варианте осуществления изобретения, далее по тексту обозначенном «вариант R1(B)», R1 представляет собой необязательно замещенную фенильную или нафтильную группу, причем при замещении указанной фенильной или нафтильной группы она замещается 1-5 заместителями, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из ORA, N(RB)2, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, - С(O)С1-4алкила, C1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила. В рамках варианта R1(B), R1 предпочтительно представляет собой необязательно замещенную фенильную группу.
В другом варианте осуществлении изобретения, далее по тексту обозначенном «вариант R1(C)», R1 представляет собой необязательно замещенную С3-8циклоалкильную или необязательно замещенную С5-6циклоалкенильную группу, причем при замещении указанной С3-8циклоалкильной или С5-6циклоалкенильной группы она замещается 1, 2 или 3 заместителями, каждый из которых выбран из С1-5алкила, С1-5алкенила, С1-5алкинила, С1-5алкила, замещенных максимум 3 атомами галогена, -СО-С1-5алкила и галогена.
В другом варианте осуществлении изобретения, далее по тексту обозначенном «вариант R1(D)», R1 представляет собой необязательно замещенный фенил-С2-4алкенил, С2-8алкенил, галоген-С2-8алкенил, дигалоген-С2-8алкенил, тригалоген-С2-8алкенил или С3-8циклоалкил-С2-4алкенил, причем при замещении указанной фенильной части группы она замещается 1-5 заместителями, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из ORA, N(RB)2, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, -С(O)С1-4алкила, C1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила.
Когда R1 представляет собой группу С2-8алкенила, галоген-С2-8алкенила, дигалоген-С2-8алкенила или тригалоген-С2-8алкенила, это может быть, например, группа С2-6алкенила, галоген-С2-6алкенила, дигалоген-С2-6алкенила или тригалоген-С2-6алкенила. Когда R1 представляет собой С3-8циклоалкильную группу, это может быть, например, С3-6циклоалкильная группа. Когда R1 представляет собой С3-8циклоалкил-С1-4алкенильную группу, это может быть, например, С3-6циклоалкил-С1-4алкенильная группа. Когда R1 представляет собой С5-6циклоалкильную группу, это может быть, например, циклопентенильная группа.
Когда R1 представляет собой гетероциклильную группу, гетероциклильная группа может быть насыщенной и ненасыщенной и содержать один и более атомов О, N и/или S. Подходящие гетероциклильные группы включают в себя фурил, тиенил, пироллил, пирролинил, пирролидинил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, имидазолил, имидазолинил, имидазолидин, пиразолил, пиразолинил, пиразолидинил, пиридил, морфолинил, бензофурил, хинолинил, диоксазолил, бензимидазолил и пиперидил. В одном из предпочтительных вариантов осуществления изобретения гетероциклильная группа является 6-членной, или в частном случае -5-членной; она может быть ненасыщенной, в частности представлять собой соединение ароматического ряда, или насыщенной. Фурил, пироллил, тиенил, изоксазолил, изотиазолил, пиразолил и пиридил являются предпочтительными гетероциклильными группами, при этом изоксазолил, изотиазолил, пиридил и пирролидинил являются наиболее предпочтительными. В другом варианте осуществлении изобретения гетероциклильная группа может быть 9- или 10-членной, например, это может быть группа бензофурила, диоксазолила или бензимидазолила. Гетероциклильная группа R1 может включать в себя 1-5, например, 1-3, в частности 1 или 2 заместителя. Предпочтительные заместители выбраны из ORA, N(RB)2, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, -C(O)C1-4алкила, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила. Более предпочтительно заместители выбирают из галогенного и цианистого элементов, С1-4алкила (в частности, метила или этила), тригалоген-С1-4алкила (в частности, трифторметила), -С(O)С1-4алкила и ORA, где RA предпочтительно представляет собой атом водорода или С1-4алкильную группу. Еще более предпочтительно заместители выбирают из галогена, цианогруппы, С1-4алкила (в частности, метила или этила) и тригалоген-С1-4алкила (в частности, трифторметила). В частности, предпочтительно заместители выбирают из галогена, цианогруппц и С1-4алкила (в частности, метила или этила), в частности, галогена и С1-4алкила (в частности, метила или этила). В одном из предпочтительных вариантов осуществлений изобретения R1 представляет собой изоксазолил, изотиазолил, пиридил или пирролидинил, необязательно замещенный максимум 3, например, 1 или 2, заместителями, независимо выбранными из атомов галогена и метиловой и этиловой групп. В другом варианте осуществлении изобретения R1 - это 5-членная ароматическая гетероциклильная группа, замещенная двумя метиловыми группами. Когда указанная группа содержит только один циклический гетероатом, может присутствовать дополнительный заместитель, например, атом галогена.
Фенильная, нафтильная или фенил-С2-4алкенильная группа R1 может включать в себя 1-5, например, 1-3, в частности 1 или 2, заместителя. Предпочтительными заместителями для фенильной, нафтильной или фенил-С2-4алкенильной группы R1 являются указанные выше для гетероциклильной группы R1 соединения.
Более предпочтительно, заместители для фенильной, нафтильной или фенил-С2-4алкенильной группы R1 выбраны из ORA, галогена, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила. Наиболее предпочтительно, заместители выбраны из галогена (в частности, фтора или хлора), С1-4алкила (в частности, метила или этила), С2-4алкенила (в частности, винила), С2-4алкинила (в частности, этинила), тригалоген-C1-4алкила (в частности, трифторметила) и ORA, где RA предпочтительно является атомом водорода, С1-4алкильной группой или тригалоген-С1-4алкильной группой. Еще более предпочтительно, заместители выбраны из галогена (в частности, фтора или хлора), С1-4алкила (в частности, метила или этила), С2-4алкенила (в частности, винила), С2-4алкинила (в частности, этинила), трифторметила и ORA, где RA представляет собой водород, метил, этил или трифторметил. Особенно предпочтительно заместители выбраны из галогена (в частности, фтора или хлора), метила, метокси- и трифторметила.
Предпочтительно R1 выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного 5-10-членного гетероциклила, необязательно замещенного фенила, необязательно замещенного нафтила, необязательно замещенного С5-6циклоалкенила, необязательно замещенного фенил-С2-4алкенила, С2-8алкенила, С2галоген-С2-8алкенила, дигалоген-С2-8алкенила, тригалоген-С2-8алкенила и С3-8Циклоалкил-С2-4алкенила, причем при замещении указанных гетероциклильной, фенильной или нафтильной групп или части групп она замещается 1-5 заместителями, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из ORA, N(RB)2, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, C1-6алкила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила, а при замещении указанной С5-6циклоалкенильной группы она замещается 1 или 2 заместителями, которые выбраны из атомов галогена и метиловых групп (далее по тексту обозначен как «вариант R1(E)»). Более предпочтительно R1 выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного 5-10-членного гетероциклила, необязательно замещенного фенила, необязательно замещенного фенил-С2-4алкенила, циклопентенила, С2-8алкенила и С3-8циклоалкил-С2-4алкенила, причем при замещении указанных фенильной или гетероциклильной группы или части группы она замещается 1-5 заместителями, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из ORA, галогена, С1-6алкила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила. Еще более предпочтительно R1 выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного 5-10-членного гетероциклила, необязательно замещенного фенила, необязательно замещенного фенил-С2-4алкенила, циклопентенила и С2-6алкенила, причем при замещении указанных фенильной или гетероциклильной группы или части группы она замещается 1-5 заместителями, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из ORA, галогена, С1-4алкила и тригалоген-С1-4алкила (далее по тексту обозначен как «вариант R1(F)»).
В одном из предпочтительных вариантов осуществления изобретения, далее по тексту обозначенном «вариант R1(G)»), R1 представляет собой необязательно замещенную 5-10-членную гетероциклильную группу (например, необязательно замещенный 5- или 6-членный гетероциклил, например, группа пиридила, пирролидинила, изоксазолила, изотиазолила, пироллила, тиенила или фурила, в частности, изоксазолил, изотиазолил, пиридил или пирролидинил, либо необязательно замещенный 9- или 10-членный гетероциклил, такой как группа бензолфурила, диоксазолила или бензимидазолила), причем при замещении указанной гетероциклильной группы она замещается 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из ORA, галогена, С1-4алкила, С2-4алкенила, С2-4алкинила и тригалоген-С1-4алкила, где каждый RA представляет собой водород или С1-4алкил. В таком варианте осуществления изобретения R1 может, например, представлять собой 5-членную ароматическую гетероциклильную группу (например, группу изоксазолила, изотиазолила, пироллила, тиенила или фурила), которая замещена двумя метиловыми группами. В одном из предпочтительных вариантов осуществления изобретения R1 представляет собой изоксазолил, изотиазолил, пиридил или пирролидинил, необязательно замещенный максимум 3, например, 1 или 2, заместителями, которые независимо выбраны из атомов галогена и метиловой и этиловой групп (далее по тексту обозначенном «вариант R1(Н)»). В качестве альтернативного варианта осуществления изобретения R1 может представлять собой 3,5-диметилизоксазол-4-ил, 3,5-диметилизотиазол-4-ил, 2-фтор-3,5-диметил-фур-4-ил, 3,5-диметил-фур-4-ил или 3,5-диметил-тиофен-4-ил.
В качестве альтернативного предпочтительного варианта осуществления изобретения R1 представляет собой необязательно замещенную фенильную группу, причем при замещении указанной фенильной группы она замещается 1-5 заместителями, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из ORA, галогена, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, галоген-С1-6алкил, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила. В данном варианте осуществления изобретения более предпочтительно R1 представляет собой необязательно замещенную фенильную группу, причем при замещении указанной фенильной группы она замещается 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из галогена (в частности, фтора или хлора), С1-4алкила (в частности, метила или этила), С2-4алкенила (в частности, винила), С2-4алкинила (в частности, этинила), тригалоген-С1-4алкила (в частности, трифторметила) и ORA, где RA предпочтительно представляет собой атом водорода, С1-4алкильную группу или тригалоген-С1-4алкильную группу. Более предпочтительно R1 представляет собой необязательно замещенную фенильную группу, причем при замещении указанной фенильной группы она замещается 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из галогена (в частности, фтора или хлора), С1-4алкила (в частности, метила или этила), С2-4алкенила (в частности, винила) С2-4алкинила (в частности, этинила), тригалоген-С1-4алкила (в частности, трифторметила) и ORA, где RA предпочтительно представляет собой атом водорода, С1-4алкильную группу или тригалоген-С1-4алкильную группу (далее по тексту обозначен как «вариант R1(I)»).
В особенно предпочтительном варианте осуществления изобретения, далее по тексту обозначенном «вариант R1(J)», R1 представляет собой необязательно замещенную фенильную группу, причем при замещении указанной фенильной группы она замещается 1 или 2 заместителями, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из галогена (в частности, фтора или хлора), С1-4алкила (в частности, метила или этила), С2-4алкенила (в частности, винила), С2-4алкинила (в частности, этинила), трифторметила и ORA, где RA представляет собой водород, метил, этил или трифторметил.
В одном из вариантов осуществления изобретения R1 представляет собой необязательно замещенную нафтильную группу, в которой необязательные и предпочтительные заместители, представлены выше для необязательно замещенной фенильной группы (далее по тексту обозначен как «вариант R1(K)»).
В одном из вариантов осуществления изобретения R1 представляет собой необязательно замещенную фенил-С2-4алкенильную группу, в которой необязательные и предпочтительные заместители представлены выше для необязательно замещенной фенильной группы (далее по тексту обозначен как «вариант R1(L)»).
В одном из вариантов осуществления изобретения R1 представляет собой группу С2-8алкенила, галоген-С2-8алкенила, дигалоген-С2-8алкенила, тригалоген-С2-8алкенила или С3-8циклоалкил-С2-4алкенила (далее по тексту обозначен как «вариант R1(М)»).
В одном из вариантов осуществления изобретения R1 представляет собой циклопентенильную группу (далее по тексту обозначенном «вариант R1(N)»).
В одном из вариантов осуществления изобретения, далее по тексту обозначенном «вариант R2(А)», R2 выбран из группы, состоящей из - C(NH2)=N-OH, - C(O)N(RC)2, цианогруппы, -СНО, -CH=N-OH, -C(O)NH-OH, -C(CO2H)=N-OH, -С(O-С1-4алкила)=NH, -C(NH2)=N-NH2, -C(O)-C(O)-NH2, -CH2NH-CONH2, С1-6алкил-NH2, -NH-C(NH2)=NH, -NH-C(O)NH2, -N=C(-NH-CH2CH2-NH-), N(OH)2, -S-CN, -S-C(NH2)=NH, -S-C(NH2)=N-OH, циано-С1-6алкила, и необязательно замещенного 5-6-членного гетероциклила, содержащего 1-3 атома азота; при замещении указанной гетероциклильной группы она замещается 1-3 заместителями, каждую из которых независимо выбраны из группы, состоящей из ОН, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, С1-4алкила, галоген-С1-4алкила, дигалоген-С1-4алкила и тригалоген-С1-4алкила. Более предпочтительно R2 представляет собой -C(NH2)=N-OH, -C(O)NH2, цианогруппу, -СНО, -CH=N-OH, С1-6алкил-NH2 или необязательно замещенный 5-6-членный гетероциклил, содержащий 1-3 атома азота (далее по тексту обозначен как «вариант R2(В)»). Еще более предпочтительно R2 представляет собой C(NH2)=N-OH, -C(O)NH2, цианистый элемент, -CH=N-OH или необязательно замещенный пятичленный гетероциклил, содержащий 1-2 атома азота, такие как необязательно замещенная группа пироллила или пиразолила, в частности, незамещенный пиразолил (далее по тексту обозначенном «вариант R2(С)». В наиболее предпочтительном варианте R2 представляет собой -C(NH2)=N-OH, -C(O)NH2, -CH=N-OH или цианогруппу (далее по тексту обозначено как «вариант R2(D)».
Указанные выше предпочтительные варианты составов R2, в частности, варианты R2A, R2B, R2C и R2D, могут сосуществовать с любым из конкретных вариантов, например, с одним из вариантов R1A-R1N, и, в частности, с любым из вариантов R1A, R1B, R1C и R1D, описанным для R1 выше.
В одном из вариантов осуществления изобретения, далее по тексту обозначенном «вариант R3(A)», R3 предпочтительно выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, цианогруппы, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, С3-8циклоалкила, С3-8циклоалкил-С1-6алкила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила, тригалоген-С1-6алкила, необязательно замещенного фенила и необязательно замещенного фенил-С1-4алкила, причем при замещении указанных фенильной группы или части группы она замещается 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из ORA, N(RB)2, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, С1-4алкила и тригалоген-C1-4алкила. В данном варианте более предпочтительно R3 выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, С3-8циклоалкила, С3-8циклоалкил-С1-6алкила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила, тригалоген-С1-6алкила, фенила и фенил-С1-4алкила (далее по тексту обозначен как «вариант R3(В)». В данном варианте R3 наиболее предпочтительно представляет собой водород, галоген (в частности, хлор или бром), С1-6алкил, С2-6алкенил, тригалоген-С1-4алкил (в частности, трифторметил), фенил или фенил-С1-2алкил (далее по тексту обозначен как «вариант R3(С)». Например, R3 может представлять собой водород, хлор, бром, С1-4алкил, С2-4алкенил, трифторметил, фенил или фенил-С1-2алкил; в частности, водород, хлор, бром, С1-4алкил, С2-4алкенил или трифторметил (далее по тексту обозначен как «вариант R3(D)»).
В качестве альтернативного варианта осуществления изобретения R3 выбран из группы, состоящей из галогена, цианогруппы, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, С3-8циклоалкила, С3-8циклоалкил-С1-6алкила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила, тригалоген-С1-6алкила, необязательно замещенного фенила, необязательно замещенного фенил-С1-4алкила, необязательно замещенного 5-10-членного гетероциклила и необязательно замещенного 5-10-членного гетероциклил-С1-4алкила, причем при замещении указанных фенильной или гетероциклильной группы или части группы она замещается 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из ORA, N(RB)2, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила. В данном варианте R3 предпочтительно выбран из группы, состоящей из галогена, цианогруппы, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, С3-8циклоалкила, С3-8циклоалкил-С1-6алкила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила, тригалоген-С1-6алкила, необязательно замещенного фенила и необязательно замещенного фенил-С1-4алкила, причем при замещении указанных фенильной группы или части группы она замещается 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из ORA, N(RB)2, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, С1-4алкила и тригалоген-С1-4алкила. В данном варианте R3 более предпочтительно выбран из группы, состоящей из галогена, цианогруппы, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, С3-8циклоалкила, С3-8циклоалкил-С1-6алкила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила, тригалоген-С1-6алкила, фенила и фенил-С1-4алкила. Наиболее предпочтительно R3 представляет собой галоген (в частности, хлор или бром), цианогруппу, С1-6алкил, С2-6алкенил, тригалоген-С1-4алкил (в частности, трифторметил), фенил или фенил-С1-2алкил. Например, R3 может представлять собой хлор, бром, цианогруппу, С1-4алкил, С2-4алкенил, трифторметил, фенил или фенил-С1-2алкил; в частности, хлор, бром, С1-4алкил, С2-4алкенил или трифторметил.
Указанные выше предпочтительные варианты R3, в частности, варианты R3A, R3B, R3C и R3D, могут сосуществовать с любым из конкретных вариантов, представленных выше для R1 и/или R2.
Предпочтительным образом R4 выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, цианогруппы, С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила (далее по тексту обозначен как «вариант R4(A)»). Более предпочтительно R4 выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, цианогруппы, С1-4алкила и тригалоген-С1-4алкила (в частности, трифторметила) (далее по тексту обозначен как «вариант R4(B)»). Наиболее предпочтительно R4 выбран из группы, состоящей из водорода, галогена и С1-4алкила (далее по тексту обозначен как «вариант R4(C)»).
Указанные выше предпочтительные варианты R4, в частности, варианты R4A, R4B и R4C могут сосуществовать с любым из конкретных вариантов, представленных выше для R1 и/или R2 и/или R3.
В одном из вариантов осуществления изобретения, когда R3 представляет собой водород, R4 выбран из группы, состоящей из галогена, цианогруппы, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила.
Предпочтительно R7 представляет собой ORA, где RA представляет собой водород или С1-4алкил, например, этил или метил (далее по тексту обозначен как «вариант R7(А)»). Наиболее предпочтительно R7 представляет собой ОН (далее по тексту обозначен как «вариант R7(В)»). В вариантах R7(A) и R7(B), каждый из R5, R6, R8 и R9 предпочтительно независимо выбран из группы, состоящей из водорода, ORA, N(RB)2, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, галоген-С1-6-алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила. Наиболее предпочтительно каждый из R5, R6, R8 и R9 независимо выбран из группы, состоящей из водорода, ORA, N(RB)2, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, C1-6алкила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила. Еще более предпочтительно каждый из R5, R6, R8 и R9 независимо выбран из группы, состоящей из водорода, ОН, ΝΗ2, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, С1-4алкила, например, метила, галоген-С1-4алкила, например, хлор- или фторметила, дигалоген-С1-4алкила, например, дихлор- или дифторметила, и тригалоген-С1-4алкила, например, трихлор- или трифторметила. Еще более предпочтительно каждый из R5, R6, R8 и R9 независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, С1-4алкила, например, метила или этила, и тригалоген-С1-4алкила, например, трихлор- или трифторметила. В одном из вариантов осуществления изобретения каждый из R5, R6, R8 и R9 независимо представляет собой метил, трифторметил или, в частности, водород или галоген, например, фтор. И еще более предпочтительно каждый из R5, R6, R8 и R9 независимо выбран из водорода и галогена. В одном из предпочтительных вариантов осуществления изобретений каждый из R5, R6, R8 и R9 представляет собой водород. В альтернативном предпочтительном варианте осуществления изобретения R5 и R6 представляют собой фтор, а остальные R5, R6, R8 и R9 представляют собой водород. Указанные выше предпочтительные варианты R6 и R5, R6, R8 и R9 могут сосуществовать вместе с любым из конкретных вариантов, представленных выше для R1 и/или R2 R3 и/или R4.
В другом аспекте изобретения (далее по тексту обозначен как «вариант R6/7(A)») R6 и R7 вместе с атомами, с которыми они соединены, предпочтительно формируют 5-, 6- или 7-членную циклическую группу, необязательно содержащую 1-3 гетероатома, выбранных из О, N и S; указанная 5-, 6- или 7-членная циклическая группа необязательно замещена одной и более группами, выбранными из ORA, цианогруппы, нитрогруппы, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила. Более предпочтительно R6 и R7 вместе с атомами, в которыми они соединены, формируют 5-, 6- или 7-членную циклическую группу, необязательно содержащую 1-3 гетероатома, выбранных из О и Ν; указанная 5-, 6- или 7-членная циклическая группа необязательно замещена одной и более группами, выбранными из ОН, цианогруппы, нитрогруппы, С1-4алкила, галоген-С1-4алкила, дигалоген-С1-4алкила и тригалоген-С1-4алкила (далее по тексту обозначен как «вариант R6/7(В)»). Наиболее предпочтительным вариантом является вариант, когда R6 и R7 вместе с атомами, в которыми они соединены, предпочтительно формируют 5-членную циклическую группу, необязательно содержащую 1-2 гетероатома, выбранных из О и N; указанная 5-членная циклическая группа необязательно замещена одной и более группами, выбранными из ОН, цианогруппы, метила и трифторметила (далее по тексту обозначен как «вариант R6/7(С)»). В данном аспекте предпочтительно каждый из R5, R8 и R9 независимо выбран из группы, состоящей из водорода, ORA, N(RB)2, галогенных, цианистых и азотных элементов, С1-6алкила, галоген-С1-6алкила, дигалоген-С1-6алкила и тригалоген-С1-6алкила. Еще более предпочтительно каждый из R5, R8 и R9 независимо выбран из группы, состоящей из водорода, ОН, NH2, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, С1-4алкила, например, метила, галоген-С1-4алкила, например, хлор- или фторметила, дигалоген-С1-4алкила, например, дихлор- или дифторметила, и тригалоген-С1-4алкила, например, трихлор- или трифторметила. Наиболее предпочтительным является вариант, когда каждый из R5, R8 и R9 независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, метила и трифторметила, в частности, водорода и галогена (далее по тексту обозначен как «вариант R6/7(D)»).
Указанные выше предпочтительные варианты R6/7 и R5, R8 и R9 могут сосуществовать вместе с любым из конкретных вариантов, представленных выше для R1 и/или R2, R3 и/или R4.
Каждый из RA предпочтительно независимо выбран из группы, состоящей из водорода, С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила и С3-6циклоалкила. Более предпочтительно каждый RA предпочтительно независимо выбран из группы, состоящей из водорода, С1-4алкила, С2-4алкенила, С2-4алкинила и С3-6циклоалкила. Наиболее предпочтительным является вариант, когда каждый RA независимо представляет собой водород или С1-4алкил, а еще более предпочтительно - водород, метил или этил, в частности, водород или метил.
Каждый RB предпочтительно независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С1-6алкила. В одном из предпочтительных вариантов осуществления изобретения RB является С1-4алкилом. В другом варианте осуществления изобретения каждый RB предпочтительно независимо выбран из водорода или С1-4алкила, более предпочтительно - из водорода и С1-3алкила, в частности, метила или этила. В одном из предпочтительных вариантов осуществления изобретения каждый RB - это водород.
Каждый RC предпочтительно независимо выбран из водорода и С1-4алкила, в частности, метила.
Каждый RD предпочтительно независимо выбран из водорода и С1-4алкила, в частности, метила.
Каждый RE предпочтительно независимо выбран из водорода и С1-4алкила, в частности, метила.
В частности, предпочтительные подгруппы соединений это такие подгруппы, где R1 является одним из R1A, R1B, R1C и R1D, вместе с одним из R2A, R2B, R2C и R2D, в частности, R2D, и одним из R6A и R7B, в частности, R7B. Таким образом, предпочтительные подгруппы соединений - это такие подгруппы, где R1 является одним из R1A, R1B, R1C и R1D, вместе с R2D и R7B.
Соединения формулы (I) включают в себя, но без ограничения этим, соединения, конкретно описанные в Примерах в данном документе, в том числе фармацевтически приемлемые эфиры, амиды, карбаматы или их соли, включая соли таких эфиров, амидов или карбаматов.
Для приведенных в Примерах соединений названия образованы в соответствии с номенклатурой ИЮПАК, разработанной компанией ACD Labs, версия 8.0, версия 8.05 и/или с использованием ISIS DRAW Autonom 2000 и/или ChemBioDraw Ultra, версия 12.02.
В зависимости от заместителей, присутствующих в соединениях формулы (I), соединения могут формировать эфиры, амиды, карбаматы и/или соли. Соли соединений формулы (I), которые подходят для использования в медицине, это такие соли, где противоион является фармацевтически приемлемым. Однако соли с фармацевтически неприемлемыми противоионами находятся в пределах объема настоящего изобретения, например, для использования в качестве промежуточных продуктов при получении соединений формулы (I) и их фармацевтически приемлемых солей, а также физиологически функциональных производных. Понятие «физиологически функциональное производное» означает химическое производное вещество соединения формулы (I), обладающее той же физиологической функцией, что и свободное соединение формулы (I), например, будучи перерабатываемым организмом в такое свободное соединение. Примерами физиологически функциональных производных являются эфиры, амиды и карбаматы.
Приемлемыми солями в соответствии с изобретением являются соли, образованные с органическими или неорганическими кислотами и основаниями. В частности, приемлемые соли, образованные с кислотами в соответствии с изобретением включают в себя соли, образованные с минеральными кислотами, сильными органическими карбоновыми кислотами, такими как алканкарбоновые кислоты с 1-4 атомами углерода (незамещенными или замещенными), например, галогенами - насыщенные или ненасыщенные дикарбоновые кислоты, такие как гидроксикарбоновые кислоты, т.е. аминокислоты, или органическими сульфокислотами, например, (С1-С4-алкильными или арилсульфоновыми кислотами, незамещенными или замещенными, например галогеном. Фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли включают в себя соли, полученные из соляной, бромистоводородной, серной, азотной, лимонной, винной, уксусной, фосфорной, молочной, пировиноградной, трифторуксусной, янтарной, хлорной, фумаровой, малеиновой, гликолевой, салициловой, щавелевоуксусной, метансульфоновой, этансульфоновой, п-толуолсульфоновой, муравьиной, бензойной, малоновой, нафтален-2-сульфоновой, бензолсульфоновой, изэтиновой, аскорбиновой, яблочной, фталевой, аспарагиновой и глутаминовой кислот, а также лизина и аргинина. Другие кислоты, такие как щавелевая кислота, хотя сами не являются фармацевтически приемлемыми, могут быть полезны в качестве промежуточных продуктов при получении соединений по изобретению и их фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей.
Фармацевтически приемлемые соли оснований включают в себя соли аммония, соли щелочных металлов, например, соли калия и натрия, щелочно-земельных металлов, например, кальция и магния, и соли, образованные с органическими основаниями, например, с дициклогексиламином, Ν-метил-D-глюкамином, морфолином, тиоморфолином, пиперидином, пирролидином, моно-, ди- или три-(низший алкил)амином, например, с этилом, третбутилом, диэтилом, диизопропилом, триэтилом, трибутилом или диметил-пропиламином, или с моно-, ди- или три-гидрокси (низший алкил)амином, например, с моно-, ди- или три-этаноламином. Более того, могут образовываться внутренние соли.
Соединения формулы (I) могут содержать подходящую группу, преобразованную в сложный эфир, амид или карбамат. Таким образом, типичные сложноэфирные и амидные группы, образованные из кислотной группы, в соединении формулы I включают в себя -COORG, -CONRG2, -SO2ORG или -SO2N(RG)2, а типичные сложноэфирные, амидные и карбаминатные группы, образованные из -ОН или -NHRG группы в соединении формулы (I), включают в себя -OC(O)RG, -NRGC(O)RG, -NRGCO2RG, -OSO2RG и -NRGSO2RG, где RG выбран из группы, состоящей из С1-8алкила, С2-8алкенила, С2-8алкинила, С3-8циклоалкила и С3-8циклоалкил-С1-8алкила, галоген-С1-8алкила, дигалоген-С1-8алкила, тригалоген-С1-8алкила, фенила и фенил-C1-4алкила; более предпочтительно RG выбран из группы, состоящей из С1-6алкила, С2-6алкенила, С2-6алкинила, С3-8циклоалкила и С3-8циклоалкил-С1-6алкила.
Специалисты в сфере органической химии понимают, что многие органические соединения могут образовывать комплексы с растворителями, в которых они взаимодействуют или из которых они осаждаются или кристаллизуются. Эти комплексы известны как «сольваты». Например, комплекс с водой называется «гидрат». Сольваты, такие как гидраты, существуют, когда лекарственное вещество включает в себя растворитель, такой как вода, в кристаллической решетке в любом стехиометрическом или не стехиометрическом количестве. Лекарственные вещества обычно экранируются на наличие гидратов, поскольку последние могут возникнуть на любом этапе процесса производства препарата или при хранении лекарственного вещества или лекарственной формы. Сольваты описаны в следующих источниках: S. Byrn et al, Pharmaceutical Research 12(7), 1995, 954-954, и Water-Insoluble Drug Formulation («Нерастворимые в воде лекарственные формы»), 2nd ed. R. Liu, CRC Press, стр. 553, которые упоминаются ссылкой в настоящем документе. Соответственно, специалисту в данной области будет понятно, что соединения формулы (I), а также эфиры, амиды, карбаматы и/или их соли могут поэтому существовать в форме сольватов. Сольваты соединений формулы (I), которые подходят для использования в медицине, это такие сольваты, где растворитель (сольвент) является фармацевтически приемлемым. Например, гидрат является примером фармакологически приемлемого сольвата. Однако сольваты, имеющие фармацевтически неприемлемые соответствующие растворители, могут применяться в качестве промежуточных веществ при получении соединений формулы (I) и их фармацевтически приемлемых эфиров, амидов, карбаматов и/или их солей.
Соединение, которое при введении реципиенту способно преобразоваться в соединение формулы (I), как описано выше, в его активный метаболит или остаточную группу, называется «пролекарство». Например, пролекарство может преобразоваться в организме, в частности, путем гидролиза в крови, в активную форму лекарственного вещества, обладающую биологическим действием. Фармацевтически приемлемые пролекарства описаны в следующих источниках: Т. Higuchi and V. Stella, Prodrugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14 of the A. C. S. Symposium Series (1976); "Design of Prodrugs" ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985; и Edward B. Roche, ed., Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987, которые упоминаются ссылкой в настоящем документе.
Следующие определения применимы к терминам, которые используются в настоящем описании, если иное ограничение не оговорено особо в конкретных случаях.
При использовании в настоящем документе термин «алкил» означает насыщенное соединение углеводородной группы с неразветвленной и разветвленной цепью атомов. Примеры алкильных групп включают в себя метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, изобутил, втор-бутил, пентил и гексил. Среди алкильных групп с неразветвленной цепью атомов можно назвать метил, этил, n-пропил, изопропил, n-бутил. Среди алкильных групп с разветвленной цепью атомов можно выделить трет-бутил, изобутил, 1-этилпропил и 1-этилбутил.
При использовании в настоящем документе термин «алкокси» означает группу О-алкил, где понятие «алкил» применяется в соответствии с данным выше определением. Примеры алкокси групп включают в себя метокси- и этокси- группы. Другие примеры включают в себя пропокси- и бутокси- группы.
При использовании в настоящем документе термин «алкенил» означает ненасыщенные углеводородные группы с неразветвленной и разветвленной цепью атомов и, по меньшей мере, одной двойной углерод-углеродную связью. Примеры алкенильных групп включают в себя винил, пропенил, бутенил, пентенил и гексенил. Предпочтительные алкенильные группы включают в себя винил, 1-пропенил, 2-пропенил и бут-2-енил.
При использовании в настоящем документе термин «алкинил» означает ненасыщенные углеводородные группы с неразветвленной и разветвленной цепью атомов и, по меньшей мере, одной тройной углерод-углеродной связью. Примеры алкинильных групп включают в себя этинил, пропинил, бутинил, пентинил и гексинил. Предпочтительные алкинильные группы включают в себя этинил, 1-пропинил и 2-пропинил.
При использовании в настоящем документе термин «циклоалкил» означает насыщенную группу в кольцевой системе. Циклоалкильная группа может быть моноциклической и бициклической. Бициклическая группа может быть конденсированной или связанной мостиковой связью. Примеры моноциклических циклоалкильных групп включают в себя циклопропил, циклобутил и циклопентил. Другими примерами моноциклических циклоалкильных групп являются циклогексил, циклогептил и циклооктил. Примеры бициклических циклоалкильных групп включают в себя бицикло-[2.2.1]гепт-2-ил. Предпочтительно циклоалкильная группа является моноциклической.
При использовании в настоящем документе термин «галоген» означает фтор, хлор, бром или йод. Особенно предпочтительными являются атом фтора, хлора и брома.
При использовании в настоящем документе термин «галогеноалкил» означает алкильную группу, содержащую галогеновый заместитель, термины «алкил» и «галоген» понимаются в соответствии с представленными выше значениями. Сходным образом, термин «дигалогеноалкил» означает алкильную группу, содержащую два галогеновых заместителя, а термин «тригалогеноалкил» - алкильную группу, содержащую три галогеновых заместителя. Примеры галогеноалкильных групп включают в себя фторметил, хлорметил, бромметил, фторметил, фторопропил и фторобутил; примеры дигалогеноалкильных групп включают в себя дифторметил и дифтороэтил; примеры тригалогеноалкильных групп включают в себя трифторметил и трифторэтил.
При использовании в настоящем документе термин «гетероциклил» означает ароматическую и неароматическую циклическую группу атомов углерода, отличающуюся тем, что в ней 1-3 атома углерода замещены одним и более гетероатомами независимо выбранными из азота, кислорода и серы. Гетероциклильная группа может быть, например, моноциклической и бициклической. В бициклической гетероциклильной группе может быть по одному и более гетероатому в каждой циклической структуре или же только в одной циклической структуре. Гетероатом может представлять собой S, О или N и предпочтительно является О или N. Гетероциклильные группы, содержащие подходящий атом азота, включают в себя соответствующие Ν-оксиды.
Примеры моноциклических неароматических гетероциклильных групп (также называемых моноциклическими гетероциклоалкильными циклическими структурами) включают в себя азиридинил, азетидинил, пирролидинил, имидазолидинил, пиразолидинил, пиперидинил, пиперазинил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, морфолинил, тиоморфолинил и азепанил.
Примеры бициклических гетероциклильных групп, где одна из циклических структур является неароматической, включают в себя дигидробензофуранил, инданил, индолинил, изоиндолинил, тетрагидроизохинолинил, тетрагидрохинолил и бензоазепанил.
Примеры моноциклических ароматических гетероциклильных групп (также называемых моноциклическими гетероарильными группами) включают в себя фуранил, тиенил, пироллил, оксазолил, тиазолил, имидазолил, оксадиазолил, тиадиазолил, пиридил, триазолил, триазинил, пиридазил, изотиазолил, изоксазолил, пиразинил, пиразолил и пиримидинил; при этом предпочтительными моноциклическими ароматическими гетероциклильными группами являются фуранил, тиенил, пироллил, оксазолил, имидазолил, оксадиазолил, тиадиазолил, пиридил, триазолил, триазинил, пиридазил, изотиазолил, изоксазолил, пиразинил, пиразолил и пиримидинил.
Примеры бициклических ароматических гетероциклильных групп (также называемых бициклическими гетероарильными группами) включают в себя хиноксалинил, хиназолинил, пиридопиразинил, бензоксазолил, бензотиофенил, бензимидазолил, нафтиридинил, хинолинил, бензофуранил, индолил, бензотиазолил, оксазолил[4,5-b]пиридил, пиридопиридиминил, изохинолинил и бензодроксазол.
Примеры предпочтительных гетероциклильных групп включают в себя пиперидинил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, пиридил, пиримидинил и индолил. Предпочтительные гетероциклильные группы также включают в себя тиенил, тиазолил, фуранил, пиразолил, пироллил, изоксазолил и имидазолил.
При использовании в настоящем документе термин «циклоалкилалкил» означает циклоалкил-алкильную группу, присоединенную через алкильную группу, термины «циклоалкил» и «алкил» понимаются в соответствии с представленными выше значениями.
Как было указано выше, соединения изобретения обладают активностью в качестве лигандов эстрогеновых рецепторов. Соединения изобретения обладают активностью в качестве модуляторов эстрогеновых рецепторов и могут действовать как агонист или частичный агонист, антагонист или частичный антагонист эстрогеновых рецепторов. Особенно предпочтительные соединения изобретения обладают активностью агониста или частичного агониста ЭР-β. Предпочтительные соединения этого типа являются селективными агонистами эстрогенового бета-рецептора (ЭР-β).
Изобретение также представляет соединение в соответствии с изобретением, или композицию, содержащую соединение в соответствии с изобретением вместе с фармацевтически приемлемым носителем для применения в качестве лекарственного средства.
Соединение по настоящему изобретению или композиция, содержащая соединение по настоящему изобретению, таким образом, могут быть использованы в лечении заболеваний или расстройств, связанных с активностью эстрогенового рецептора. В частности, соединения по настоящему изобретению, которые являются агонистами или частичными агонистами эстрогенового рецептора, могут быть использованы в лечении заболеваний или расстройств, при которых показано применение селективных агонистов или частичных агонистов эстрогенового рецептора. Соединения по настоящему изобретению, которые являются антагонистами или частичными антагонистами эстрогенового рецептора, могут быть использованы в лечении заболеваний или расстройств, при которых показано применение селективных антагонистов или частичных антагонистов эстрогенового рецептора.
Клинические состояния, при которых показано применение агониста или частичного агониста включают в себя, среди прочего, потерю костной массы, переломы костей, остеопороз, дистрофию хряща, эндометриоз, фибромы матки, приступообразные ощущения жара (приливы), повышенные уровни хлорэфирола липопротеинов низкой плотности (ЛНП), сердечно-сосудистые заболевания, ухудшение когнитивных функций, церебральные дегенеративные расстройства, рестеноз, гинекомастию, пролиферацию клеток сосудов гладких мышц, ожирение, недержание мочи, тревогу, депрессию, аутоиммунные заболевания, воспаления, воспалительное заболевание кишечника (IBD), синдром раздраженного кишечника (IBS), сексуальную дисфункцию, артериальную гипертензию, дистрофию сетчатки глаза, рак легких, толстой кишки, молочной железы, матки и предстательной железы, лимфому и/или расстройства, связанные с действием эстрогена.
Соединения по настоящему изобретению, в частности, применяются при лечении и профилактике следующих заболеваний: потеря костной массы, переломы костей, остеопороз, дистрофия хряща, эндометриоз, фиброзное заболевание матки, приливы, повышение уровня хлорэфирола ЛНП, сердечно-сосудистые заболевания, нарушение когнитивных функций, связанные с возрастом умеренные когнитивные нарушения, церебральные дегенеративные расстройства, рестеноз, гинекомастия, пролиферация клеток сосудов гладких мышц, ожирение, недержание мочи, тревога, депрессия, перименопаузальная депрессия, послеродовая депрессия, предменструальный синдром, маниакально-депрессивный психоз, деменция, обсессивно-компульсивное поведение, синдром дефицита внимания, синдром дефицита внимания и гиперактивности, расстройства сна, раздражительность, импульсивность, управление гневом, расстройства слуха, рассеянный склероз, болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, болезнь Гентингтона, боковой амиотрофический склероз, повреждения спинного мозга, инсульт, аутоиммунные заболевания, воспаление, воспалительные заболевания кишечника, СРК, сексуальная дисфункция, гипертензия, дегенерация сетчатки глаза, рак легких, толстой кишки, молочной железы, матки, предстательной железы, а также рак желчного протока, называемый холангиокарциномой. Соединения по настоящему изобретению также активно применяются при лечении и профилактике следующих заболеваний: доброкачественная гиперплазия предстательной железы, симптомы со стороны нижних мочевых путей, гиперактивность мочевого пузыря, интерстициальный цистит, болезненные симптомы мочевого пузыря, вагинальная атрофия, заживление ран, хроническая боль, сепсис, воспалительные и невропатические боли, рак яичников, меланома, лимфома (В-клеточная лимфома, Т-клеточная лимфома), атеросклероз, гипертрофия левого желудочка сердца, острая сердечная недостаточность, мезотелиома, рак желчного пузыря и экстра-печеночная холангиокарцинома.
Предпочтительно соединения по настоящему изобретению применяются при лечении и профилактике следующих заболеваний: потеря костной массы, переломы костей, остеопороз, дистрофия хряща, эндометриоз, фиброзное заболевание матки, приливы, повышение уровня хлорэфирола ЛНП, сердечно-сосудистые заболевания, рестеноз, гинекомастия, пролиферация клеток сосудов гладких мышц, ожирение, недержание мочи, тревога, депрессия, перименопаузальная депрессия, послеродовая депрессия, предменструальный синдром, маниакально-депрессивный психоз, деменция, обсессивно-компульсивное поведение, синдром дефицита внимания, синдром дефицита внимания и гиперактивности, расстройства сна, раздражительность, импульсивность, управление гневом, расстройства слуха, повреждения спинного мозга, инсульт, аутоиммунные заболевания, воспаление, воспалительные заболевания кишечника, СРК, сексуальная дисфункция, артериальная гипертензия, дистрофия сетчатки глаза, рак легких, рак толстой кишки, рак молочной железы, рак матки, рак предстательной железы, рак желчного протока (холангиокарцинома), доброкачественная гиперплазия предстательной железы, симптомы со стороны нижних мочевых путей, гиперактивный желчный пузырь, интерстициальный цистит, болезненные симптомы желчного пузыря, атрофия влагалища, заживление ран, хроническая боль, сепсис, воспалительные и невропатические боли, рак яичников, меланома, лимфома, атеросклероз, гипертрофия левого желудочка сердца, острая сердечная недостаточность, мезотелиома, рак желчного пузыря и экстра-печеночная холангиокарцинома.
В сочетании с препаратами, известными как индуцирующие сосудодвигательные симптомы, соединения по изобретению находят применение следующим образом: в сочетании с селективными модуляторами эстрогеновых рецепторов (SERM), такими как тамоксифен, при использовании для лечения рака молочной железы, и ралоксифен при использовании для лечения и/или профилактики остеопороза, чтобы облегчить SERM-индуцированные вазомоторные симптомы; в сочетании с ингибитором ароматазы, используемым для лечения рака молочной железы или эндометриоза, чтобы облегчить вазомоторные симптомы, вызванные ингибитором ароматазы; при лечении рака простаты у пациентов-мужчин, которые прошли безандрогенную терапию.
В одном из вариантов осуществления изобретения, настоящие соединения на практике применяются в лечении или профилактике депрессии, перименопаузальной депрессии, послеродовой депрессии, предменструального синдрома и маниакально-депрессивного психоза.
Лечение и профилактика приступообразного ощущения жара (приливов) у мужчин предпочтительно для пациентов, которые перенесли андрогенную абляцию при лечении рака предстательной железы.
Термин «депрессия» включает в себя, среди прочего, большое депрессивное расстройство, дистимическое расстройство, биполярное расстройство, циклотимическое расстройство, аффективное расстройство, вызванное общим клиническим заболеванием, аффективное расстройство, вызванное приемом лекарственных средств, сезонное аффективное расстройство (SAD), послеродовую депрессию и предменструальное дисфорическое расстройство.
Изобретение также предлагает способ лечения или профилактики состояния, связанного с заболеванием или расстройством из-за активности эстрогенового рецептора у млекопитающего, которое включает в себя введение указанному млекопитающему терапевтически эффективной дозы соединения по изобретению или композиции, содержащей соединение по изобретению вместе с фармацевтически приемлемым носителем. Клинические заболевания, опосредованные эстрогеновым рецептором, которые можно лечить по способу изобретения, предпочтительно описаны выше.
Настоящее изобретение также относится к способу применения соединения в соответствии с изобретением для производства лекарственного средства для лечения или профилактики состояния, связанного с заболеванием или расстройством ввиду действия эстрогенового рецептора. Клинические состояния, опосредованные эстрогеновым рецептором, которые могут подвергаться лечению способом по настоящему изобретению, предпочтительно представляют собой состояния, описанные выше.
Количество активного ингредиента, которое необходимо для достижения терапевтического эффекта, будет, несомненно, варьировать в зависимости от конкретно используемого элемента, пути введения, подвергаемого лечению субъекта, в том числе его типа, вида, возраста, веса, пола и состояния здоровья, функции почек и печени пациента, и, в частности, конкретного подвергаемого лечению расстройства или заболевания, а также их тяжести. Обычный опытный врач, ветеринар или клиницист может легко определить и прописать эффективную дозу лекарственного средства, необходимого для предупреждения, противодействия или подавления прогрессирования заболевания.
Пероральные дозировки по настоящему изобретению, в случае применения для достижения указанных эффектов, будут варьироваться от примерно 0,01 мг на кг массы тела в сутки (мг/кг/сутки) до 100 мг/кг/сутки, предпочтительно - от 0,01 мг на кг тела вес в сутки (мг/кг/сутки) до 10 мг/кг/сутки, и наиболее предпочтительно - от 0,1 до 5,0 мг/кг/сутки для взрослого человека. Для перорального приема композиции предпочтительно представлены в виде таблеток или других лекарственных форм, представленных в виде дискретных элементов, содержащих 0,01, 0,05, 0,1, 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 10,0, 15,0, 25,0, 50,0, 100 и 500 миллиграмм активного ингредиента для симптоматической корректировки дозы для подлежащего лечению пациента. Лекарственное средство обычно содержит от приблизительно 0,01 мг до 500 мг активного ингредиента, предпочтительно от приблизительно 1 мг до 100 мг активного ингредиента. При внутривенном введении наиболее предпочтительные дозы варьируют от примерно 0,1 до 10 мг/кг/минуту с постоянной скоростью вливания. Предпочтительно, соединения по настоящему изобретению могут вводиться в виде однократной суточной дозы, или общая суточная доза может вводиться дробными дозами по два, три или четыре раза в сутки. Кроме того, предпочтительные соединения по настоящему изобретению могут вводиться в интраназальной форме посредством местного применения подходящих интраназальных носителей или трансдермальным способом, используя те формы трансдермальных кожных пластырей, которые хорошо известных специалистам в данной области техники. При введении в форме трансдермального средства доставки, принимаемая доза будет, без сомнения, скорее постоянной, а не прерывистой, на протяжении всей схемы приема лекарственного средства.
Хотя и возможно введение только активного ингредиента, является предпочтительным, чтобы он был включен в фармацевтический препарат или композицию. Соответственно, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый разбавитель, эксципиент или носитель (собирательно называемые в этом документе «носителями»). Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут принимать форму фармацевтического препарата, описанного ниже.
Фармацевтические препараты по настоящему изобретению включают препараты, подходящие для перорального, парентерального (включая подкожное, внутрикожное, внутримышечное, внутривенное [болюс или инфузия] и внутрисуставное), ингаляционного (включая мелкодисперсные порошки или аэрозоли, которые могут генерироваться посредством применения различных типов дозирующих ингаляторов по давлением), введения с применением небулайзеров или инсуффляторов, ректального, интраперитонеального и местного (включая дермальное, буккальное, подъязычное и внутриглазное) введения, хотя наиболее подходящий путь может зависеть, например, от состояния пациента и имеющегося у него нарушения.
Препараты могут быть подходящим образом представлены в виде единичной дозированной формы и могут быть приготовлены любыми из способов, хорошо известных в области фармации. Все способы включают стадию смешивания активного ингредиента с носителем, который содержит один или несколько дополнительных ингредиентов. В целом препараты получают путем однородного и тщательного смешивания активного ингредиента с жидкими носителями или мелкодисперсными твердыми носителями, или с обоими, а затем, при необходимости, формования продукта в виде желаемого препарата.
Препараты по настоящему изобретению, подходящие для перорального введения, могут быть представлены в виде дискретных единиц, таких как капсулы, облатки, пилюли или таблетки, каждая из которых содержит заранее определенное количество активного ингредиента; в виде порошка или гранул; в виде раствора или суспензии в водной жидкости или в неводной жидкости, например, в виде эликсиров, настоек, суспензий или сиропов; или в виде жидкой эмульсии типа «масло в воде» или жидкой эмульсии типа «вода в масле». Активный ингредиент может быть также представлен в виде болюса, электуария или пасты.
Таблетка может быть изготовлена путем прессования или формования, необязательно с одним или несколькими дополнительными ингредиентами. Спрессованные таблетки могут быть получены путем прессования в подходящем механизме активного ингредиента в свободнотекучем состоянии, таком как порошок или гранулы, необязательно смешанного со связующим веществом, лубрикантом, инертным разбавителем, поверхностно-активным или диспергирующим веществом. Формованные таблетки могут быть получены путем формования в подходящем механизме смеси измельченного соединения, увлажненного инертным жидким разбавителем. На таблетки необязательно могут быть нанесены покрытие и риски, и таблетки могут быть приготовлены таким образом, чтобы обеспечить медленное или контролируемое высвобождение содержащегося в них активного ингредиента. Соединения по настоящему изобретению, например, могут вводиться в форме, подходящей для немедленного высвобождения или длительного высвобождения. Немедленное высвобождение или длительное высвобождение могут достигаться путем применения подходящих фармацевтических композиций, содержащих соединения по настоящему изобретению, или, особенно в случае длительного высвобождения, путем использования устройств, таких как подкожные имплантаты или осмотические наносы. Соединения по настоящему изобретению могут также вводиться внутри липосом.
Типичные композиции для перорального введения включают суспензии, которые могут содержать, например, микрокристаллическую целлюлозу для придания сыпучести, альгиновую кислоту или альгинат натрия в качестве суспендирующего агента, метилцеллюлозу в качестве усилителя вязкости, и подсластители или ароматизаторы, такие как известные в данной области техники; таблетки с немедленным высвобождением, которые могут содержать, например, микрокристаллическую целлюлозу, дикальций фосфат, крахмал, стеарат магния, сульфат кальция, сорбитол, глюкозу и/или лактозу, и/или другие эксципиенты, связующие вещества, средства увеличения объема, дезинтегранты, разбавители и лубриканты, такие как известные в данной области техники. Подходящие связующие вещества включают крахмал, желатин, натуральные сахара, такие как глюкоза или β-лактоза, подсластители из кукурузы, натуральные или синтетические камеди, такие как акация, трагакант или альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлозу, полиэтиленгликоль, воски, и тому подобное. Дезинтегранты включают без ограничения крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановую камедь, и тому подобное. Соединения формулы (I) также могут быть доставлены в ротовую полость путем подъязычного и/или буккального введения. Типичными формами, которые могут быть использованы, являются формованные таблетки, спрессованные таблетки или лиофилизированные таблетки. Типичные композиции включают препараты, содержащие соединение(я) по настоящему изобретению, и быстрорастворимые разбавители, такие как манит, лактоза, сахароза и/или циклодекстрины. В такие препараты также могут быть включены высокомолекулярные эксципиенты, такие как целлюлозы (авицел) или полиэтиленгликоли (PEG). Такие препараты могут также содержать эксципиент для улучшения адгезии к слизистым оболочкам, такой как гидроксипропилцеллюлозу (НРС), гидроксипропилметилцеллюлозу (НРМС), натрия карбоксиметилцеллюлозу (SCMC), сополимер малеинового ангидрида (например, Gantrez) и регуляторы высвобождения, такие как полиакриловый сополимер (например, Carbopol 934). Для простоты производства и использования также могут быть добавлены лубриканты, глиданты, ароматизаторы, красители и стабилизаторы. Лубриканты, используемые в таких дозированных формах, включают олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия, и тому подобное. Для перорального введения в жидкой форме компоненты перорального лекарства могут быть объединены с любым пероральным, нетоксичным, фармацевтически приемлемым инертным носителем, таким как этанол, глицерин, вода, и тому подобное.
Соединения по настоящему изобретению также могут вводиться в форме липосомальных систем доставки, таких как небольшие моноламеллярные везикулы, большие моноламеллярные везикулы и мультиламеллярные везикулы. Липосомы могут быть сформированы целым рядом фосфолипидов, 1,2-дипальмитоилфосфатидилхолином, фосфатидилэтаноламином (цефалином) или фосфатидилхолином (лецитином).
Препараты для парентерального введения включают водные и неводные стерильные инъецируемые растворы, которые могут содержать антиоксиданты, буферные вещества, бактериостаты и растворимые вещества, наделяющие препарат свойством изотоничности с кровью предполагаемого реципиента; и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут содержать суспендирующие агенты и загустители. Препараты могут быть представлены в виде контейнеров с единичными или многократными дозами, например, герметичные ампулы или сосуды, и могут храниться в высушенном сублимацией (лиофилизированном) состоянии, требующем лишь добавления стерильного жидкого носителя, например, солевого раствора или воды для инъекций, непосредственно перед использованием. Спонтанно приготовленные для немедленного введения инъецируемые растворы и суспензии могут быть приготовлены из стерильных порошков, гранул или таблеток ранее описанных видов. Типичные композиции для парентерального введения включают инъецируемые растворы или суспензии, которые могут содержать, например, подходящие нетоксичные приемлемые для парентерального введение разбавители или растворители, такие как маннит, 1,3-бутандиол, вода, раствор Рингера, изотоничный раствор хлорида натрия, или другие подходящие диспергирующие, увлажняющие или суспендирующие агенты, включая синтетические моно- или диглицериды, и жирные кислоты, включая олеиновую кислоту, или Cremaphor.
Типичные композиции для назального, аэрозольного или ингаляционного введения включают растворы в солевом растворе, которые могут содержать, например, бензиловый спирт или другие подходящие консерванты, усилители всасывания для улучшения биодоступности и/или другие солюбилизирующие или диспергирующие средства, известные в данной области техники.
Препараты для ректального введения могут быть представлены в виде суппозиториев с обычными носителями, такими как какао-масло, синтетические сложные эфиры триглицеридов или полиэтиленгликоль. Такие носители обычно твердые при обыкновенных температурах, но становятся жидкими и/или растворяются в полости прямой кишки с высвобождением лекарства.
Препараты для местного введения в ротовую полость, например, буккального или подъязычного, включают таблетки для рассасывания, содержащие активный ингредиент в ароматизированной основе, такой как сахароза, акация или трагакант, и пастилки, содержащие активный ингредиент в основе, такой как желатин и глицерин, или сахарозу и акацию. Типичные композиции для местного введения включают местный носитель, такой как Plastibase (минеральное масло, желированное с полиэтиленом).
Предпочтительными единичными дозированными препаратами являются такие препараты, в которых содержится определенная ранее в этом документе эффективная доза активного ингредиента или ее соответствующая часть.
Следует понимать, что в дополнение к ингредиентам, конкретно упомянутым выше, препараты по настоящему изобретению могут содержать другие традиционные в данной области техники агенты, принимая во внимание тип обсуждаемого препарата, например, препараты для перорального введения могут содержать ароматизаторы.
Хотя соединение по настоящему изобретению может быть использовано в качестве единственного активного ингредиента в лекарственном средстве, соединение также может использоваться в сочетании с одним или несколькими дополнительными терапевтическими средствами. Таким образом, изобретение также представляет соединение по настоящему изобретению вместе с другим терапевтическим средством для одновременного, последовательного или раздельного приема. Такие дополнительные терапевтические средства могут представлять собой другие соединения по настоящему изобретению либо представлять собой отличные терапевтические средства, например, антидепрессант, анксиолитическое и антипсихотическое средства, вещество, полезное при профилактике или лечении остеопороза, при профилактике или лечении рака или другой фармацевтически активный материал. Например, соединения по настоящему изобретению могут эффективно вводиться в комбинации с эффективными дозами других веществ, таких как антидепрессанты, седативные и антипсихотические средства, органическим бисфосфонатом или ингибитором К-катепсина. В одном предпочтительном варианте осуществления изобретения соединения по настоящему изобретению могут эффективно вводиться в комбинации с эффективной дозой антидепрессанта. Многие примеры антидепрессантов включают в себя ингибиторы норадреналина обратного захвата (NRI), селективные ингибиторы серотонина обратного захвата, ингибиторы моноамин оксидазы, трициклические антидепрессанты (ТСА), ингибиторы допамина обратного захвата (DRI), опиоиды, селективные серотонические усилители обратного захвата, тетрациклические антидепрессанты, обратимо действующие ингибиторы моноамин оксидазы, агонисты мелатонина, ингибиторы серотонина и норадреналина обратного захвата (SNRI), антагонисты кортикотропин-рилизинг фактора, антагонисты α-адренорецепторов, агонисты и антагонисты 5ΗΤ1α рецепторов, литий и нетипичные антипсихотические средства. Примеры антидепрессантов класса SSRI включают флуоксетин и сертралин; примеры антидепрессантов класса SNRI включают венлафаксин, циталопрам, пароксетин, эсциталопрам, флувоксамин; примеры антидепрессантов класса SNRI включают в себя дулоксетин; примеры антидепрессантов DRI и NRI классов включают бупропион; примеры антидепрессантов класса ТСА включают амитриптилин и дотиепин (досулепин). Примеры атипичных антипсихолитических средств включают: клозапин, оланзапин, рисперидон, кветиапин, зипразидон и частичных агонистов допамина. Несколько примеров анксиолитических средств включают бензодиазепины и не-бензодиазипины. Примеры бензодиазипинов включают в себя лоразепам, алпразолам и диазепам. Примеры не-бензрдиазипинов включают буспирон ((Buspar)®), барбитураты и мепробамат. Один или несколько таких дополнительных антидепрессантов могут использоваться в комбинации.
Примеры противораковых веществ включают тамоксифен и ингибитор ароматазы, используемый при лечении рака молочной железы.
Если приливы индуцированы конкретным лечением, соединение по настоящему изобретению может использоваться в комбинированной терапии вместе с агентом для лечения такого заболевания. Некоторые примеры такого комбинированного лечения включают: соединение по настоящему изобретению в комбинации с тамоксифеном при лечении рака молочной железы, соединение по настоящему изобретению в комбинации с ингибитором ароматазы при лечении рака молочной железы или соединение по настоящему изобретению в комбинации с ралоксифеном при лечении остеопороза.
Некоторые примеры вышеуказанных бисфосфонатов включают адендронат, клодронат, этидронат, ибандронат, инкадронат, минодронат, неридронат, ризедронат, пиридронат, памидронат, тилудронат, золедронат, фармацевтически приемлемые соли и эфиры данных веществ и их смеси. Предпочтительные органические бифосфонаты включают алендронат, его фармацевтически приемлемые соли и смеси. Наиболее предпочтительным является алендроната натрия однозамещенного тригидрат.
Точная дозировка бисфосфоната будет варьировать в зависимости от режима дозирования, эффективностью при пероральном приеме конкретного бисфосфоната, возраста, размера, пола и состояния млекопитающего или человека, характера и тяжести подлежащего лечению расстройства и других значимых медицинских и физических факторов. Таким образом, точную фармацевтически эффективную дозировку нельзя определить заранее, она легко определяется ухаживающим лицом или врачом. Соответствующая доза может быть определена с помощью обычных опытов на животных моделях и клинических исследований человека. Как правило, соответствующую дозу бисфосфоната выбирают для получения эффекта ингибирования резорбции кости, т.е. принимается доза бифосфоната, ингибирующая резорбцию кости. У людей эффективная пероральная доза бисфосфоната обычно составляет приблизительно от 1,5 до 6000 мкг/кг массы тела, предпочтительно от 10 до 2000 мкг/кг массы тела.
В предназначенных для человека пероральных композициях, содержащих алендронат, его фармацевтически приемлемые соли или его фармацевтически приемлемые производные, единичная дозированная форма обычно содержит приблизительно от 8,75 мг приблизительно до 140 мг алендронатного соединения, в пересчете на активный вес алендроновой кислоты, т.е. в пересчете на соответствующую кислоту.
Соединения по настоящему изобретению могут использоваться в комбинации с другими агентами, пригодными для лечения эстроген опосредованных состояний. Отдельные компоненты таких комбинаций могут приниматься во время терапии независимо в разное время или одновременно в виде смешанных или отдельных комбинированных форм. Поэтому настоящее изобретение следует понимать как охватывающее все такие схему одновременного или альтернативного лечения, и термин «прием» следует толковать соответственным образом. Следует понимать, что объем комбинаций соединений по настоящему изобретению с другими агентами, пригодными для лечения эстроген-опосредованных состояний, в принципе включает любые комбинации с любыми фармацевтическими композициями, пригодными для лечения расстройств, связанных с действием эстрогенов.
Указанные выше другие лекарственные средства при использовании в комбинации с соединениями по настоящему изобретению могут быть использованы, например, в дозах, указанных в Настольном справочнике врача (Physicians' Desk Reference (PDR)) или иным образом определенным специалистом в данной области техники.
Когда соединения по настоящему изобретению используются в комбинации с одним или несколькими другими лекарственными средствами одновременно или последовательно, следующие соотношения комбинаций и диапазоны доз являются предпочтительными:
Когда соединение по настоящему изобретению комбинируется с антидепрессантом, седативным средством, антипсихотическим веществом, органическим бисфосфонатом или ингибитором К-катепсина, соединения формулы (I) могут быть использованы в весовом соотношении к дополнительному веществу в пределах приблизительно от 10:1 до 1:10.
Соединения по настоящему изобретению, как описано выше, также применяются (необязательно - в маркированной форме) в качестве диагностического средства для диагностики состояний, связанных с болезнью или расстройством, вызываемыми активностью эстрогенового рецептора. Например, такое соединение может быть меченым радиоактивным изотопом.
Соединения по настоящему изобретению, как описано выше, также применяются (необязательно - в маркированной форме) в качестве эталонного соединения при осуществлении способов идентификации лигандов эстрогенового рецептора (например, при выявлении других агонистов, частичных агонистов, антагонистов или частичных антагонистов эстрогенового рецептора). Таким образом, настоящее изобретение обеспечивает способ идентификации лиганда эстрогенового рецептора, который подразумевает применение соединения по настоящему изобретению или соединение по настоящему изобретению в маркированной форме в качестве эталонного вещества. Например, такой способ может включать в себя эксперимент по конкурентному связыванию, в котором связывание соединения по настоящему изобретению с эстрогеновым рецептором снижается в присутствии другого соединения, которое обладает рецепторсвязывающими свойствами в отношении эстрогенового рецептора, допустим, более сильными рецепторсвязывающими свойствами в отношении эстрогенового рецептора, чем рассматриваемое соединение по настоящему изобретению.
Многочисленные синтетические подходы к соединениям по настоящему изобретению могут быть разработаны специалистами в данной области техники, возможные синтетические подходы, описанные ниже, не ограничивают настоящее изобретение. В литературе представлено много способов синтеза бифенилов, например: Metal-catalyzed Cross-coupling reactions («Катализируемые металлом реакции кросс-сочетания»), A. Meijere, F. Diederich, 2004; N. Miyaura et al. Chem. Rev., 1995, 7, 2457-2483; D. Lesuisse et al, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2001, 11, 1709-1712; С.Yang et al, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2004, 12, 2553-2570; WO 2009/130434 и WO 2006/105442. Ряд возможных синтетических подходов схематически представлен далее. В случае необходимости, любое первоначально полученное соединение по настоящему изобретению может быть преобразовано известными способами в другое соединение по настоящему изобретению.
Общий способ I
(а) Ν-бромсукцинимид (БСИ), дихлорметан (ДХМ); (b) PdOAc2, K2CO3, RuPhos, толуол/H2O или PdCl2(PPh3)2, K2CO3, диметилэтаноламин/этиловый спирт/вода (ДМЭА/EtOH/H2O); (с) БСИ, АсОН; (d) I2, AgSO4, EtOH
Общий способ I, показанный выше на схеме реакции, использовался для синтеза промежуточных продуктов, применяемых в Общих способах II-VI. Подробности экспериментов отдельных этапов Общего способа, применимого для синтеза промежуточных продуктов, представлены в пункте «Промежуточные продукты А и В».
Общий способ II
(a) Связывание Сузуки I или II;
(b) CuBr2 или CH2I2, трет-бутил нитрит, MeCN;
(c) BBr3, ДХМ;
(d) Связывание Сузуки I или II;
(e) NH2OH (водный раствор), МеОН или диметилсульфоксид (ДМСО), или МеОН/ДМСО;
Связывания Сузуки:
I) PdOAc2, K2CO3, RuPhos, толуол/H2O;
II) PdCl2(PPh3)2, K2CO3, диметилэтаноламин/этиловый спирт/вода (ДМЭА/EtOH/H2O);
Общий способ II, показанный выше на схеме реакции, использовался для синтеза следующих примеров: 1-14, 85 и -103-105, 297, 298, 300-303, 312-318, 320, 321, 328, 343, 344, 346 и 352-360. Подробности экспериментов отдельных этапов Общего способа, применимого для синтеза итоговых соединений в данных примерах, представлены в Примерах 1 и 328.
Общий способ III
(a) Связывание Сузуки I или II;
(b) CuBr2 или CH2I2, трет-бутил нитрит, MeCN;
(c) Связывание Сузуки I или II;
(d) R1-станнан, PdCl2(PPh3)2; диоксан или тетрагидрофолевая кислота (THF);
(e) R1-MgCl, ZnCl2, THF; (f) NH2OH (водный раствор), MeOH или диметилсульфоксид (ДМСО), или МеОН/ДМСО;
Связывания Сузуки:
I) PdOAc2, K2CO3, RuPhos или SPhos, толуол/H2O;
II) PdCl2(PPh3)2, K2CO3, диметилэтаноламин/этиловый спирт/вода (ДМЭА/EtOH/H2O);
Общий способ III, показанный выше на схеме реакции, использовался для синтеза следующих примеров: 15-49, 59-66, 72, 75-84, 86-91, 93-102, 106-116, 122-296, 304-309 и 322-327. Подробности экспериментов отдельных этапов Общего способа, применимого для синтеза итоговых соединений в данных примерах, представлены в Примерах 15-18, 59, 61,72, 277, 284, 287-289, 322, 326 и 327.
Общий способ IV
(a) CH2I2, трет-бутил нитрит, MeCN;
(b) PdCl2(PPh3)2,K2CO3 диметилэтаноламин/этиловый спирт/вода (ДМЭА/EtOH/H2O);
(c) PdCl2(PPh3)2, K2CO3 диметилэтаноламин/этиловый спирт/вода (ДМЭА/EtOH/H2O);
(d) BBr3, ДХМ;
(e) NH2OH (водный раствор), МеОН или диметилсульфоксид (ДМСО), или МеОН/ДМСО;
Общий способ IV, показанный выше на схеме реакции, использовался для синтеза следующих примеров: 50-58, 299, 310, 329-342, 345, 347, 348 и 350. Подробности экспериментов отдельных этапов Общего способа, применимого для синтеза итоговых соединений в данных примерах, представлены в Примерах 50 и 51.
Общий способ V
(a) PdOAc2, K2CO3, RuPhos, толуол/H2O или PdCl2(PPh3)2) K2CO3 диметилэтаноламин/этиловый спирт/вода (ДМЭА/EtOH/H2O);
(b) NH2OH (водный раствор), МеОН или диметилсульфоксид (ДМСО), или МеОН/ДМСО;
Общий способ V, показанный выше на схеме реакции, использовался для синтеза следующих примеров: 67-71 и 119-121. Подробности экспериментов отдельных этапов Общего способа, применимого для синтеза итоговых соединений в данных примерах, представлены в Примере 67.
Общий способ VI
(a) Диизобутилалюминия хлорид (DIBAL-H), ДХМ;
(b) NH2OH (водный раствор), i-PrOH/ДМСО
Общий способ VI, показанный выше на схеме реакции, использовался для синтеза следующих примеров: 73 и 92. Подробности экспериментов отдельных этапов Общего способа, применимого для синтеза итоговых соединений в данных примерах, представлены в Примере 73.
Общий способ VII
(a) I2, NaHCO3, H2O;
(b) Pd(PPh3)4, K2CO3, ДМЭА/H2O;
(c) БСИ, ДМФА;
(d) R2-B(OH)2, Pd(PPh3)4, K2CO3, ДМЭА/H2O, трет-бутил нитрит, MeCN;
(f) R1-В(ОН)2, K2CO3, Pd(PPh3)4, ДМЭА/H2O;
(g) BBr3, ДХМ.
Общий способ VII, показанный выше на схеме реакции, использовался для синтеза следующих примеров: 74, 117 и 118. Подробности экспериментов отдельных этапов Общего способа, применимого для синтеза итоговых соединений в данных примерах, представлены в Примере 74.
Синтез промежуточного продукта А
Этап (а): 2-амино-5-бромбензонитрил (25 мг, 0,13 ммоль), пропилбороновую кислоту (78,08 мг, 0,89 ммоль), Pd(OAc)2 (5,70 мг, 0,03 ммоль), RuPhos (23,68 мг, 0,05 ммоль) и K2CO3 (87,68 мг, 0,63 ммоль) смешали в толуоле/воде (2 мл, 10:1) в азотной среде. Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 140°C в течение 20 минут, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через алюмоферрит кальция. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (10-20% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 17,1 мг 2-амино-5-пропилбензонитрила в виде желтоватой маслянистой субстанции.
Этап (b): 2-амино-5-пропилбензонитрил (71,4 мг, 0,45 ммоль) был растворен в этиловом спирте (EtOH)(3 мл). Добавляли йод (113,11 мг, 0,45 ммоль) и AgSO4 (138,95 мг, 0,45 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, а затем фильтровали через алюмоферрит кальция. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (5:95) в качестве подвижной фазы. Было получено 99,7 мг 2-амино-3-йод-5-пропилбензонитрила в виде бледно-желтых твердых частиц.
Синтез промежуточного продукта В
Этап (а): 2-амино-4-хлорбензонитрил (765 мг, 5,01 ммоль) был растворен в дихлорметане (ДХМ) (10 мл), при температуре 0°C был добавлен Ν-бромсукцинимид (БСИ) (1160 мг, 6,52 ммоль). Охлаждающую ванну убрали, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи ДХМ в качестве подвижной фазы. Было получено 750 мг 2-амино-5-бром-4-хлорбензонитрила.
Этап (b): 2-амино-5-бром-4-хлорбензонитрил (212 мг, 0,92 ммоль), пропилбороновую кислоту (80,5 мг, 0,92 ммоль), Pd(OAc)2 (10,3 мг, 0,05 ммоль), RuPhos (42,7 мг, 0,09 ммоль) и K2CO3 (633 мг, 4,6 ммоль) смешали в толуоле/воде (3 мл, 10:1) в азотной среде. Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 120°C в течение 20 минут. Добавили H2O, и водную смесь проэкстрагировали при помощи ДХМ и EtOAc. Соединенные органические фазы профильтровали через фазовый разделитель, растворитель выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт был очищен на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ). Было получено 100 мг 2-амино-4-хлор-5-пропилбензонитрила.
Этап (с): 2-амино-4-хлор-5-пропилбензонитрил (100 мг, 0,51 ммоль) растворили в НОАс (3,6 мл), затем добавили Ν-бромсукцинимид (БСИ) (91,4 мг, 0,51 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (20% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 117 мг 2-амино-3-бром-4-хлор-5-пропилбензонитрила.
Синтез промежуточного продукта С
Этап (а): 2-бром-6-йод-4-(трифторметокси)анилин (300 мг, 0,79 ммоль), 4-метоксифенилбороновую кислоту (131 мг, 0,86 ммоль), PdCl2(PPh3)2 (27,6 мг, 0,04 ммоль) и K2CO3 (434 мг, 3,14 ммоль) смешали в смеси диметилэтаноламина/этилового спирта/воды (ДМЭА/EtOH/Н2О)(10 мл, 4:1:1) в азотной среде. Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 130°C в течение 20 минут. Растворитель выпарили, оставшийся осадок растворили в EtOAc и профильтровали через подушку из силикагеля. Неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (2,5-5% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 199 мг 3-бром-4'-метокси-5-(трифторметокси)-[1,1'-бифенил]-2-амина в виде белых твердых частиц.
Этап (b): 3-бром-4'-метокси-5-(трифторметокси)-[1,1'-бифенил]-2-амин (199 мг, 0,55 ммоль) и CuCN (54,1 мг, 0,60 ммоль) смешали в N-метил-2 нитро-1-пропаноле (NMP) (1 мл) в азотной среде. Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 175°C в течение 30 минут, а затем при температуре 180°C в течение 75 минут. Добавляли EtOAc (10 мл), и смесь промывали NH3OH (25%, водный раствор) и соляным раствором. Соединенные водные слои проэкстрагировали при помощи EtOAc (3х), а объединенные органические слои были обезвожены соляным раствором, а затем - пропусканием через Na2SO4. Растворитель выпарили, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (5-20% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 138 мг 2-амино-4'-метокси-5-(трифторметокси)-[1,1'-бифенил]-3-карбонитрила в виде желтой маслянистой субстанции.
Последующие примеры иллюстрируют настоящее изобретение.
Пример 1. N',4'-дигидрокси-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропил-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимидамид (Е1)
Этап (а): 2-амино-3-йод-5-пропилбензонитрил (99,7 мг, 0,35 ммоль), 4-метоксифенилбороновую кислоту (158,8 мг, 1,05 ммоль), Pd(OAc)2 (7,82 мг, 0,03 ммоль), RuPhos (32,5 мг, 0,0 ммоль) и K2CO3 (240,8 мг, 1,74 ммоль) смешивали в толуоле/воде (5 мл, 10:1) в азотной среде. Реакционную смесь нагревали микроволнами при температуре 140°C в течение 20 минут, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через алюмоферрит кальция. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (5-10% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 17,1 мг 2-амино-4'-метокси-5-пропилбифенил-3-карбонитрила в виде бледно-желтой маслянистой субстанции.
Этап (b): 2-амино-4'-метокси-5-пропилбифенил-3-карбонитрил (91,0 мг, 0,34 ммоль) и CuBr2 (152,6 мг, 0,68 ммоль) смешали в MeCN (3.5 мл). Добавили трет-бутил нитрит (35,23 мг, 0,34 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи ДХМ в качестве подвижной фазы. Было получено 113 мг 2-бром-4'-метокси-5-пропилбифенил-3-карбонитрила в виде желтоватой маслянистой субстанции.
Этап (с): 2-Бром-4'-метокси-5-пропилбифенил-3-карбонитрил (113 мг, 0,34 ммоль) растворили в дихлорметане (ДХМ) (2 мл) в азотной среде, раствор охладили до температуры -78°C. Добавили BBr3 (1,71 мл, 1 грамм-молекула). Реакционную смесь перемешивали при температуре 0°C в течение в течение 30 минут, а затем при комнатной температуре в течение 30 минут. Чтобы остановить реакцию при температуре 0°C добавили МеОН (415 мкл). Добавили NaHCO3 (25 мл, насыщ.) и EtOAc (25 мл), фазы разделили, водная фаза была дважды экстрагирована при помощи EtOAC. Соединенные органические фазы были промыты соляным раствором, обезвожены пропусканием через Na2SO4 и выпарены при пониженном давлении. Неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (0-20% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 102,1 мг 2-бром-4'-гидрокси-5-пропилбифенил-3-карбонитрила в виде бесцветных твердых частиц.
Этап (d): 2-Бром-4'-гидрокси-5-пропилбифенил-3-карбонитрил (25 мг, 0,08 ммоль), 3-метилтиофен-2-бороновую кислоту (22,45 мг, 0,16 ммоль), Pd(OAc)2 (3,55 мг, 0,02 ммоль), RuPhos (14,76 мг, 0,03 ммоль) и K2CO3 (54,63 мг, 0,40 ммоль) смешали в толуоле/воде (1 мл, 10:1) в азотной среде. Реакционную смесь нагревали микроволнами при температуре 140°C в течение 20 минут, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через алюмоферрит кальция. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (10-20% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 9,7 мг 4'-гидрокси-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропилбифенил-3-карбонитрила.
Этап (е): 4'-гидрокси-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропилбифенил-3-карбонитрил (9,7 мг, 0,03 ммоль) пропитали гидроксиламином (200 эквивалент, 16 грамм-молекул, водный раствор) в МеОН (1 мл). Реакционную смесь нагревали микроволнами при температуре 120°C в течение 15 минут в азотной среде. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт очищали на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) при помощи MeCN/кислой H2O (5-50% MeCN) в качестве подвижной фазы. Был получен N',4'-дигидрокси-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропил-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимидамид в виде твердых частиц. - (Е1) Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 367,4 (М+Н), 365,2 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (MeOD3, 500 МГц): химический сдвиг (δ) 7,33 (s, 1Н), 7,29 (s, 1H), 7,22 (d, 1H, J=4,8 Гц), 6,92 (m, 2H), 6.68 (d, 1H, J=4,8 Гц), 6,59 (m, 2H), 2,69 (t, 2H, J=7,5 Гц), 1,74 (s, 3H), 1,72 (m, 2H) и 1,00 (t, 3H, J=7,4 Гц). Титульное соединение определяли при помощи1Н-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Примеры 2-14
Примеры 2-14 были подготовлены с применением способа, аналогичного способу, использованному при синтезе Примера 1 выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов описаны в Примере 1 выше. В Примерах 2, 3 и 6-14 титульные соединения определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Ζ).
Пример 15
2-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-3'-фтор-N',4'-дигидрокси-5-пропил-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимидамид (Е15)
Этап (а): 2-амино-3-йод-5-пропилбензонитрил (150 мг, 0,52 ммоль), 3-фтор-4-гидроксифенилбороновую кислоту (122,61 мг, 0,79 ммоль), PdCl2(PPh3)2 (36,8 мг, 0,05 ммоль) и K2CO3 (144,9 мг, 1,05 ммоль) смешали в растворе диметилэтаноламина/этилового спирта/воды (ДМЭА/EtOH/H2O)(2 мл, 40:10:1) в азотной среде. Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 130°C в течение 20 минут, охлаждали до комнатной температуры, разводили ДХМ и промывали водным насыщенным раствором NH4Cl). Смесь профильтровывали через фазный разделитель, растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (20% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 122 мг 2-амино-3'-фтор-4'-гидрокси-5-пропилбифенил-3-карбонитрила.
Этап (b): 2-амино-3'-фтор-4'-гидрокси-5-пропилбифенил-3-карбонитрил (122,0 мг, 0,45 ммоль) и CuBr2 (201,6 мг, 0,90 ммоль) смешали в высушенном MeCN (5 мл). Добавили трет-бутил нитрит (46,54 мг, 0,45 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (20% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 71,6 мг 2-бром-3'-фтор-4'-гидрокси-5-пропилбифенил-3-карбонитрила.
Этап (с): 2-бром-3'-фтор-4'-гидрокси-5-пропилбифенил-3-карбонитрил (71,0 мг, 0,21 ммоль), 3,5-диметилизоксазол-4-бороновую кислоту (59,9 мг, 0,42 ммоль), Pd(OAc)2 (9,54 мг, 0,04 ммоль), RuPhos (39,7 мг, 0,08 ммоль) и K2CO3 (146 мг, 1,06 ммоль) смешали в толуоле/воде (2 мл, 10:1) в азотной среде. Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 140°C в течение 20 минут, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через алюмоферрит кальция. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (20% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 25 мг 2-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-3'-фтор-4'-гидрокси-5-пропилбифенил-3-карбонитрила.
Этап (d): 2-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-3'-фтор-4'-гидрокси-5-пропилбифенил-3-карбонитрил (25 мг, 0,07 ммоль) и гидроксиламин (0,5 мл, 16 грамм-молекул, водный раствор) смешали в растворителе диметилсульфоксид (ДМСО) (0,3 мл). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 140°C в течение 15 минут в азотной среде. Сырьевую смесь очистили на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (5-50% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 4,0 мг 2-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-3'-фтор-N',4'-дигидрокси-5-пропил-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимиднамида (Е15). Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 384,24 (М+Н), 382,24 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (MeOD, 500 МГц): химический сдвиг (δ) 7,66 (t, 1Н, J=1,5 Гц), 7,48-7,43 (m, 3Н), 7,25 (m, 1H), 2,68 (t, 2H, J=7,7 Гц), 2,35 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 1,70 (m, 2H) и 0,97 (t, 3H, J=7,2 Гц). Титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Примеры 16, 17 и 18
2-(2,4-диметилфуран-3-ил)-4'-гидрокси-5-пропил-[1,1'-бифенил]-3-карбонитрил (Е16)
2-(2,4-диметилфуран-3-ил)-N',4',-дигидрокси-5-пропил-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимидамид (Е17)
2-(2,4-диметилфуран-3-ил)-4'-гидрокси-5-пропил-[1,1'-бифенил]-3-карбоксамид (E18)
Этап (а): 2-амино-4'-гидрокси-5-пропилбифенил-3-карбонитрил (144,0 мг, 0,57 ммоль), полученный аналогично способу, примененному в Примере 15, Этап (а), и CH2I2 (3057 мг, 11,4 ммоль) смешали в высушенном MeCN (1 мл) при температуре 0°C в азотной среде. Добавили трет-бутил нитрит (64,74 мг, 0,63 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при температуре 0°C в течение 1 часа, а затем при температуре 50°C в течение 1 часа. После охлаждения до комнатной температуры добавили дихлорметан (ДХМ), смесь промывали NaHSO3 (водным раствором) и фильтровали через фазовый разделитель.
Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель с использованием ДХМ/изогексана (50-100% ДХМ) в качестве подвижной фазы. Было получено 101 мг 4'-гидрокси-2-йод-5-пропилбифенил-3-карбонитрила.
Этап (b): 4'-гидрокси-2-йод-5-пропилбифенил-3-карбонитрил (17,0 мг, 0,05 ммоль), метил 3,5-диметил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фуран-2-карбоксилат (19,7 мг, 0,07 ммоль), Pd(OAc)2 (2,10 мг, 0,01 ммоль), SPhos (4,37 мг, 0,01 ммоль) и K2CO3 (19,4 мг, 0,14 ммоль) смешали в толуоле/воде (0,7 мл, 5:2) в азотной среде. Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 140°C в течение 20 минут, охлаждали до комнатной температуры и разводили H2O. Водная смесь экстрагировали с использованием ДХМ, органическую фазу отфильтровывали через фазовый разделитель. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи ДХМ/МеОН (0-2.5% МеОН) в качестве подвижной фазы. Было получено 6,0 мг метил 4-(3-циано-4'-гидрокси-5-пропилбифенил-2-ил)-3,5-диметилфуран-2-карбоксилата.
Этап (с): 4-(3-циано-4'-гидрокси-5-пропилбифенил-2-ил)-3,5-диметилфуран-2-карбоксилат (6,0 мг, 0,02 ммоль) растворили в тетрагидрофолевой кислоте (THF) (0,5 мл), добавили NaOH (0,04 мл, 2 грамм-молекулы). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 130°C в течение 15 минут, охлаждали до комнатной температуры и окисляли за счет добавления HCl (2 грамм-молекулы, водный раствор). Водную смесь экстрагировали с использованием ДХМ, органическую фазу фильтровали через фазовый разделитель, растворитель выпаривали при пониженном давлении. Остаточное вещество смешали с Cu2O (2,20 мг, 0,02 ммоль) в хинолоне (0,5 мл). Смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 195°C в течение 30 минут. После охлаждения до комнатной температуры добавили дихлорметан, смесь промывали HCl (2 грамм-молекулы, водный раствор) и фильтровали через фазовый разделитель. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт был профильтрован через подушку из силикагеля с использованием ДХМ в качестве подвижной фазы. Был получен 2-(2,4-диметилфуран-3-ил)-4'-гидрокси-5-пропил-[1,1'-бифенил]-3-карбонитрил (Е16). Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 332,23 (М+Н), 330,2 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (Ацетон-Д6, 500 МГц): химический сдвиг (δ) 7,64 (d, 1Н, J=1,8 Гц), 7,57 (d, 1Н, J=1,8 Гц), 7,18 (q, 1Н, J=1,1 Гц), 7,04 (m, 2Н), 6,77 (m, 2Н), 2,74, (t, 2Н, J=7,5 Гц), 1,95 (s, 3Н), 1,75 (m, 2Н), 1,61 (d, 3Н, J=1,1 Гц) и 0,99 (t, 3Н, J=7,3 Гц).
Этап (d): 2-(2,4-диметилфуран-3-ил)-4'-гидрокси-5-пропил-[1,1'-бифенил]-3-карбонитрил и гидроксиламин (0,11 мл, 16 грамм-молекул, водный раствор) смешали в МеОН (0,5 мл). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 120°C в течение 30 минут в азотной среде. Сырьевую смесь очистили на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (20-60% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 1,1 мг 2-(2,4-диметилфуран-3-ил)-N',4'-дигидрокси-5-пропил-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимиднамида (Ε17). Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 365,27 (М+Н), 363,36 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (Ацетон-Д6, 500 МГц): химический сдвиг (δ) 7,30 (d, 1Н, J=2,0 Гц), 7,25 (d, 1Н, J=2,0 Гц), 7,05 (q, 1Н, J=1,2 Гц), 6,97 (m, 2Н), 6,71 (m, 2Н), 2,67, (t, 2Н, J=7,7 Гц), 1,86 (s, 3Н), 1,71 (m, 2Н), 1,60 (d, 3Н, J=1,2 Гц) и 0,99 (t, 3Н, J=7,3 Гц). Был также получен 2-(2,4-диметилфуран-3-ил)-4'-гидрокси-5-пропил-[1,1'-бифенил]-3-карбоксамид (Е18). Масс спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 350,25 (М+Н), 348,28 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (Ацетон-Д6, 500 МГц): химический сдвиг (δ) 7,41 (d, 1Н, J=1,8 Гц), 7,28 (d, 1Н, J=1,8 Гц), 7,07 (q, 1Н, J=1,3 Гц), 6,97 (m, 2Н), 6,72 (m, 2Н), 2,68, (t, 2Н, J=7,6 Гц), 1,87 (s, 3Н), 1,72 (m, 2Н), 1,63 (d, 3Н, J=1,3 Гц) и 0,99 (t, 3Н, J=7,5 Гц). Для Примера 17 титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Примеры - 19-49
Примеры 19-49 были подготовлены с применением способа, аналогичного способу, использованному при синтезе Примеров - 15-18 выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов описаны в Примерах - 15-18 выше. Для Примеров 19-49 титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Пример 50
3'-хлор-5'-фтор-N',4'-дигидрокси-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропилбифенил-3-карбоксимидамид (E50)
Этап (а): 2-амино-3-бром-5-пропилбензонитрил (296,0 мг, 1,24 ммоль) и CH2I2 (1657 мг, 6,19 ммоль) смешали в высушенном MeCN (3 мл) при температуре 0°C в азотной среде. Добавили трет-бутил нитрит (255,3 мг, 2,48 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при температуре 0°C в течение в течение 30 минут, а затем при температуре 50°C в течение 1 часа. После охлаждения до комнатной температуры добавили дихлорметан, смесь промывали NaHSO3 (водным раствором) и фильтровали через фазовый разделитель. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель с использованием ДХМ/изогексана (25% ДХМ) в качестве подвижной фазы. Было получено 320 мг 3-бром-2-йод-5-пропилбензонитрила.
Этап (b): 2-амино-3-йод-5-пропилбензонитрил (63 мг, 0,18 ммоль), 3-метилтиофен-2-илбороновую кислоту (30,67 мг, 0,22 ммоль), PdCl2(PPh3)2 (12,63 мг, 0,02 ммоль) и K2CO3 (74,63 мг, 0,54 ммоль) смешали в растворе диметилэтаноламина/этилового спирта/ воды (ДМЭА/EtOH/Н2О)(0,51 мл, 40:10:1) в азотной среде. Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 125°C в течение 20 минут, охлаждали до комнатной температуры, разводили ДХМ и промывали H2O. Смесь профильтровывали через фазный разделитель. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель с использованием ДХМ/изогексана (10-50% изогексан) в качестве подвижной фазы. Было получено 32 мг 3-бром-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропилбензонитрила.
Этап (с): 3-бром-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропилбензонитрил (20 мг, 0,06 ммоль), 2-(3-хлор-5-фтор-4-метоксифенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (35,8 мг, 0,12 ммоль), PdCl2(PPh3)2 (4,38 мг, 0,01 ммоль) и K2CO3 (25,9 мг, 0,19 ммоль) смешали в растворе диметилэтаноламина/этилового спирта/ воды (ДМЭА/EtOH/H2O)(1 мл, 40:10:1) в азотной среде. Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 140°C в течение 20 минут, охлаждали до комнатной температуры, разводили ДХМ и промывали NH4Cl (водным раствором). Смесь профильтровывали через фазный разделитель. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (15% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Был получен 21 мг 3'-хлор-5'-фтор-4'-метокси-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропилбифенил-3-карбонитрила.
Этап (d): 3'-хлор-5'-фтор-4'-метокси-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропилбифенил-3-карбонитрил (17 мг, 0,04 ммоль) растворили в дихлорметане (ДХМ) (5 мл) в азотной среде, раствор охладили до температуры 0°C. Добавили BBr3 (0,26 мл, 1 грамм-молекула). Реакционную смесь перемешивали при температуре 0°C в течение в течение 30 минут, при комнатной температуре в течение 2 часов, а затем при температуре 4°C в течение 16 часов. Добавили HCl (1 грамм-молекула) и H2O, чтобы остановить реакцию, водная смесь была экстрагирована с использованием ДХМ. Органическая фаза была отфильтрована через фазовый разделитель, растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (20% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 15,0 мг 3'-хлор-5'-фтор-4'-гидрокси-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропилбифенил-3-карбонитрила.
Этап (е): 3'-хлор-5'-фтор-4'-гидрокси-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропилбифенил-3-карбонитрил (15 мг, 0,04 ммоль) и гидроксиламин (0,5 мл, 16 грамм-молекул, водный раствор) смешали в растворителе диметилсульфоксид (ДМСО) (0,3 мл). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 140°C в течение 15 минут в азотной среде. Сырьевую смесь очистили на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (5-60% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 4,0 мг 3'-хлор-5'-фтор-N',4'-дигидрокси-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропил-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимиднамида (Е50). Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 419,1 (М+Н), 417,14 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (MeOD, 500 МГц): химический сдвиг (δ) 7,34 (d, 1H, J=1,7 Гц), 7,33 (d, 1H, J=1,7 Гц), 7,26 (d, 1H, J=5,2 Гц), 6,88 (t, 1H, J=1,8 Гц), 6,74-6,72 (m, 2H), 2,70 (t, 2H, J=7,4 Гц), 1,80 (s, 3H), 1,73 (m, 2H) и 1,00 (t, 3H, J=7,3 Гц). Титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Пример 51
N'-гидрокси-3-(1H-индазол-5-ил)-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропилбензимидамид (Е51)
Этап (а): 3-бром-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропилбензонитрил (20 мг, 0,06 ммоль), трет-бутил 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индазол-1-карбоксилат (43,0 мг, 0,12 ммоль), PdCl2(PPh3)2 (4,38 мг, 0,01 ммоль) и K2CO3 (25,9 мг, 0,19 ммоль) смешали в растворе диметилэтаноламина/этилового спирта/воды (ДМЭА/EtOH/H2O)(1 мл, 40:10:1) в азотной среде. Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 140°C в течение 20 минут, охлаждали до комнатной температуры, разводили ДХМ и промывали NH4Cl (водным раствором). Смесь профильтровывали через фазный разделитель, растворитель выпаривали при пониженном давлении. Было получено 12 мг неочищенного трет-бутил-5-(3-циано-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропилфенил)-1Н-индазол-1-карбоксилата.
Этап (b): трет-бутил-5-(3-циано-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропилфенил)-1Н-индазол-1-карбоксилат растворили в дихлорметане (ДХМ) (2 мл) и трифторуксусной кислоте (TFA) (2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Добавили NaHCO3 (водный насыщенный раствор), и водную смесь экстрагировали с использованием ДХМ. Органическую фазу выпаривали при пониженном давлении, и в качестве сырьевой смеси было получено 9,0 мг 3-(1Н-индазол-5-ил)-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропилбензонитрила.
Этап (с): 3-(1Н-индазол-5-ил)-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропилбензонитрил и гидроксиламин (0,3 мл, 16 грамм-молекул, водный раствор) смешали в растворителе диметилсульфоксид (ДМСО) (0,3 мл). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 140°C в течение 15 минут в азотной среде. Сырьевую смесь очистили на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (5-60% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 2,5 мг N'-гидрокси-3-(1Н-индазол-5-ил)-2-(3-метилтиофен-2-ил)-5-пропилбензимидамида (Е51). Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 391,25 (М+Н); Титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Ζ).
Примеры 52-58
Примеры 52-58 были подготовлены с применением способа, аналогичного способу, использованному при синтезе Примера 50 выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов описаны в Примере 50 выше. Для Примеров 52-58 титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Ζ).
Пример 59
N',4'-дигидрокси-2-(2-метилаллил)-5-пропил-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимидамид (E59)
Этап (а): 2-амино-4'-гидрокси-5-пропилбифенил-3-карбонитрил (30,0 мг, 0,12 ммоль), полученный аналогично способу, примененному в Примере 15, Этап (а), растворили в высушенном MeCN в азотной среде. Добавили 3-бром-2-метилпропен (80,3 мг, 0,59 ммоль) и трет-бутил нитрит (14,7 мг, 0,14 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при температуре 60°C в течение 1 часа. После охлаждения до комнатной температуры добавили дихлорметан, смесь промывали H2O и фильтровали через фазовый разделитель. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт очистили на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (20-100% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 4,0 мг 4'-гидрокси-2-(2-метилаллил)-5-пропилбифенил-3-карбонитрила.
Этап (b): 4'-гидрокси-2-(2-метилаллил)-5-пропилбифенил-3-карбонитрил (4,0 мг, 0,01 ммоль) и гидроксиламин (0,1 мл, 16 грамм-молекул, водный раствор) смешали в растворителе диметилсульфоксид (ДМСО) (0,4 мл). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 140°C в течение 15 минут в азотной среде. Сырьевую смесь очистили на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (5-60% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 1,05 мг N',4'-дигидрокси-2-(2-метилаллил)-5-пропил-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимиднамида (Е59). Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 325,28 (М+Н), 323,36 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (Ацетон-Д6, 500 МГц): химический сдвиг (δ) 7,19 (d, 2Н, J=2,1 Гц), 7,13 (m, 2Н), 7,03 (d, 1Н, J=2,1 Гц), 6,84 (m, 2Н), 4,67 (m, 1Н), 4,23 (m, 1Н), 3,44 (s, 2Н), 2,60 (t, 2Н, J=7,5 Гц), 1,66 (m, 2Н), 1,56 (s, 3Н) и 0,94 (t, 3Н, J=7,3 Гц). Титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Пример 60
2-аллил-N',4'-дигидрокси-5-пропил-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимидамид (Е60)
Пример 60 был подготовлен с применением способа, аналогичного способу, использованному при синтезе Примера 60 выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов, описанных в Примере 60 выше. Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 311,28 (М+Н), 309,29 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (Ацетон-Д6, 500 МГц): химический сдвиг (δ) 7,16 (d, 1Н, J=1,9 Гц), 7,11 (m, 2Н), 7,01 (d, 1Н, J=1,9 Гц), 6,87 (m, 2Н), 5,83 (m, 1H), 4,76 (m, 1H), 4,64 (m, 1H), 3,51 (m, 2Н), 2,58 (t, 2Н, J=7,4 Гц), 1,64 (m, 2Н) и 0,94 (t, 3Н, J=7,2 Гц). Титульное соединение определяли при помощи1Н-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Пример 61
N',4'-дигидрокси-5-пропил-2-винил-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимидамид (E61)
Этап (а): 4'-гидрокси-2-йод-5-пропилбифенил-3-карбонитрил (20 мг, 0,06 ммоль), полученный аналогично способу, примененному в Примере 16, Этап (а), трибутилэтенилстаннан (34,9 мг, 0,11 ммоль), PdCl2(PPh3)2 (3,87 мг, 0,01 ммоль) смешали в диоксане (1,5 мл) в азотной среде. Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 130°C в течение 20 минут, охлаждали до комнатной температуры, разводили ДХМ и промывали H2O. Смесь профильтровывали через фазный разделитель, растворитель выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт был очищен на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (20-100% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 9,0 мг 4'-гидрокси-5-пропил-2-винил бифенил-3-карбонитрила.
Этап (b): 4'-гидрокси-5-пропил-2-винилбифенил-3-карбонитрил (7,0 мг, 0,03 ммоль) пропитали гидроксиламином (0,1 мл, 16 грамм-молекул, водный раствор) в растворителе диметилсульфоксид (ДМСО) (0,4 мл). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 140°C в течение 15 минут в азотной среде. Сырьевую смесь очистили на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (5-50% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 1,05 мг N',4'-дигидрокси-5-пропил-2-винил-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимиднамида (Е61) Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 297,23 (М+Н), 295,29 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (Ацетон-Д6, 500 МГц): химический сдвиг (δ) 7,16-7,13 (m, 3Н), 7,08 (d, 1Н, J=1,9 Гц), 6,87 (m, 2H), 6,69 (dd, 1H, J=17,9, 11,6 Гц), 5,31 (dd, 1H, J=17,9, 2,1 Гц), 5,14 (dd, 1H, J=11,6, 2,1 Гц), 2,60 (t, 2H, J=7,6 Гц), 1,66 (m, 2H) и 0,95 (t, 3H, J=7,3 Гц). Титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Примеры 62-66
Примеры 62-66 были подготовлены с применением способа, аналогичного способу, использованному при синтезе Примера 61 выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов описаны в Примере 61 выше. Для Примеров 62-66 титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Ζ).
Пример 67
5'-этил-N',4-дигидрокси-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбоксимидамид (Е67)
Этап (а): 5'-бром-4-гидрокси-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбонитрил (14,0 мг, 0,04 ммоль), полученный аналогично способу, примененному в Примере 1, Этапы (a-d), этилбороновую кислоту (11,8 мг, 0,16 ммоль), Pd(OAc)2 (0,90 мг, 0,004 ммоль), RuPhos (3,73 мг, 0,008 ммоль) и K2CO3 (27,6 мг, 0,20 ммоль) смешали в толуоле/воде (0,55 мл, 10:1) в азотной среде. Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 140°C в течение 20 минут, охлаждали до комнатной температуры и разводили NH4Cl. Водную смесь экстрагировали с использованием ДХМ, органическую фазу фильтровали через фазовый разделитель. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт был очищен на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (20-100% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 6,30 мг 5'-этил-4-гидрокси-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбонитрила.
Этап (b): 5'-этил-4-гидрокси-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбонитрил (5,70 мг, 0,02 ммоль) и гидроксиламин (0,23 мл, 16 грамм-молекул, водный раствор) смешали в растворителе диметилсульфоксид (ДМСО) (0,7 мл). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 130°C в течение 30 минут в азотной среде. Сырьевую смесь очистили на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (5-50% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 5,30 мг 5'-этил-N',4-дигидрокси-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбоксимиднамида (Е67). Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 333,28 (М+Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (Ацетон-Д6, 500 МГц): химический сдвиг (δ) 7,28 (d, 1Н, J=2,0 Гц), 7,24 (d, 1H, J=2,0 Гц), 7,15-7,09 (m, 5H), 6,85 (m, 2H), 6,61 (m, 2H), 2,72 (q, 2H, J=7,6 Гц) и 1,28 (t, 3Н, J=7,6 Гц). Титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Примеры 68-71
Примеры 68-71 были подготовлены с применением способа, аналогичного способу, использованному при синтезе Примера 67 выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов описаны в Примере 67 выше. Для Примеров 68-71 титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Пример 72
2-(2,5-диметил-1Н-пиррол-1-ил)-N',4'-дигидрокси-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимидамид (Е72)
Этап (а): 2-амино-4'-гидрокси-5-(трифторметил)бифенил-3-карбонитрил (39 мг, 0,14 ммоль) и гексан-2,5-дион (160 мг, 1,40 ммоль) смешали в АсОН (1 мл). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 200°C в течение 60 минут. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, и неочищенный продукт рафинировали через силикагель с использованием ДХМ/изогексана (25-75% ДХМ) в качестве подвижной фазы. Было получено 17 мг 2-(2,5-диметил-1Η-пиррол-1-ил)-4'-гидрокси-5-(трифторметил)бифенил-3-карбонитрила.
Этап (b): 2-(2,5-диметил-1Н-пиррол-1-ил)-4'-гидрокси-5-(трифторметил)бифенил-3-карбонитрил (11 мг, 0,03 ммоль) и гидроксиламин (0,38 мл, 16 грамм-молекул, водный раствор) смешали в растворителе диметилсульфоксид (ДМСО)/МеОН (0,4 мл 1:1). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 120°C в течение 45 минут в азотной среде. Сырьевую смесь очистили на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (25-55% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 6,30 мг 2-(2,5-диметил-1Н-пиррол-1-ил)-N',4'-дигидрокси-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимиднамида (Е72). Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 390,27 (М+Н), 388,34 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (Ацетон-Д6, 500 МГц): химический сдвиг (δ) 7,98 (m, 1Н), 7,86 (m, 1H), 6,96 (m, 2H), 6,76 (m, 2H), 5,77 (s, 2H) и 1,85 (s, 6H).
Пример 73
4-гидрокси-5'-пропил-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбальдегид-оксим (E73)
Этап (а): 4-гидрокси-5'-пропил-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбонитрил (20 мг, 0,06 ммоль) растворили в дихлорметане (ДХМ) (2 мл). Ди-изобутилалюминия гидрид (90,7 мг, 0,64 ммоль) добавляли по каплям при температуре -78°C. Реакционную смесь перемешивали при температуре -78°C в течение 2 часов. Добавили HCl (2 грамм-молекулы, водный раствор), дождались нагрева смеси до комнатной температуры, а затем отфильтровали через фазовый разделитель. Растворитель выпаривали при пониженном давлении. Было получено 18 мг 4-гидрокси-5'-пропил-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбоксамида.
Этап (b): 4-гидрокси-5'-пропил-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбоксамид (18 мг, 0,06 ммоль) и гидроксиламин (0,35 мл, 16 грамм-молекул, водный раствор) смешали в растворителе диметилсульфоксид (ДМСО)/i-PrOH (0,4 мл 1:1). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 130°C в течение 20 минут в азотной среде. Сырьевую смесь очистили на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (30-50% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 15 мг 4-гидрокси-5'-пропил-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбальдегид оксима (Е73). Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 332,27 (М+Н), 330,33 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (Ацетон-Д6, 500 МГц): химический сдвиг (δ) 7,75 (d, 1Н, J=1,8 Гц), 7,31-7,23 (m, 4H), 7,06 (m, 2H), 6,89 (m, 2H), 6,63 (m, 2H), 2,69 (m, 2H), 1,73 (m, 2H) и 1,00 (t, 3Н, J=7,3 Гц).
Пример 74
5'-пропил-3'-(1Н-пиразол-4-ил)-[1,1':2',1"-терфенил]-4-ол (Ε74)
Этап (а): Смесь 4-пропиланилина (2200 мг, 16,3 ммоль) и NaHCO3 (2050 мг, 24,4 ммоль) с H2O (30 мл) охладили на ледяной бане. В течение 20 минут с незначительным охлаждением по частям добавляли йод (4130 мг, 16,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов, а затем экстрагировали с использованием EtOAC (3X). Соединенные органические экстракты были обезвожены пропусканием через Na2SO4, затем растворитель выпарили при пониженном давлении. Было получено 4100 мг 2-йод-4-пропиланилина в виде коричневатых твердых частиц.
Этап (b): 2-Йод-4-пропиланилин (2000 мг, 7,66 ммоль), 4-метоксифенилбороновую кислоту (1164 мг, 7,66 ммоль), Pd(PPh3)4 (443 мг, 0,38 ммоль) и K2CO3 (4234 мг, 30,64 ммоль) смешали в растворе диметилэтаноламина/воды (ДМЭА/H2O) (30 мл, 1:1). Реакционную смесь дегазировали с использованием N2 в течение 5 минут, а затем нагревали в микроволновой печи при температуре 110°C в течение 40 минут. Добавили H2O, и водную смесь проэкстрагировали при помощи EtOAc (3 X). Соединенные органические экстракты были промыты водой и обезвожены пропусканием через Na2SO4. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (0-10% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 1,17 мг 4'-метокси-5-пропилбифенил-2-амина в виде желтой маслянистой субстанции.
Этап (с): 4'-Метокси-5-пропилбифенил-2-амин (1170 мг, 4,85 ммоль) растворили в растворе диметил фумарата (DMF) (12 мл), а затем по частям добавили Ν-бромсукцинимид (БСИ) (863 мг, 4,85 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов, а затем разделили между H2O и ДХМ. Водный слой был экстрагирован с использованием ДХМ, и соединенные органические экстракты были выпарены при пониженном давлении. Неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (0-5% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 840 мг 3-бром-4'-метокси-5-пропилбифенил-2-амина в виде оранжевой маслянистой субстанции.
Этап (d): 3-бром-4'-метокси-5-пропилбифенил-2-амин (261 мг, 0,82 ммоль), 1-бензил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол (301 мг, 1,06 ммоль), Pd(PPh3)4 (94,2 мг, 0,08 ммоль) и K2CO3 (451 мг, 3,26 ммоль) смешали в растворе диметил этаноламина/воды (ДМЭА/H2O) (12 мл, 1:1). Реакционную смесь промывали N2 в течение 10 минут, а затем нагревали микроволнами при температуре 110°C в течение 2 часов. Добавили H2O, и водная смесь была проэкстрагирована при помощи ДХМ (3 X). Соединенные органические экстракты были выпарены при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (0-40% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 294 мг 3-(1-бензил-1Н-пиразол-4-ил)-4'-метокси-5-пропилбифенил-2-амина в виде желтовато-коричневой маслянистой субстанции.
Этап (е): 3-(1-бензил-1Н-пиразол-4-ил)-4'-метокси-5-пропилбифенил-2-амин (290 мг, 0,73 ммоль) растворили в MeCN (4 мл). Сначала добавили CH2I2 (821 мг, 3,06 ммоль), затем - трет-бутил нитрит (188 мг, 1,82 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при температуре 50°C в течение 48 часов. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (0-10% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 178 мг 1-бензил-4-(2-йод-4'-метокси-5-пропилбифенил-3-ил)-1Н-пиразола в виде желтоватого полужидкого вещества.
Этап (f): 1-бензил-4-(2-йод-4'-метокси-5-пропилбифенил-3-ил)-1Н-пиразол (25 мг, 0,05 ммоль), фенилбороновую кислоту (7,79 мг, 0,06 ммоль), Pd(PPh3)4 (5,68 мг, 0,005 ммоль) и K2CO3 (27,2 мг, 0,20 ммоль) смешали в растворе диметил этаноламина/воды (ДМЭА/H2O) (2.5 мл, 1:1). Реакционную смесь промыли N2 в течение 10 минут, а затем нагревали в микроволновой печи при температуре 130°C в течение 30 минут. Добавили H2O, и водная смесь была проэкстрагирована при помощи ДХМ (3X). Соединенные органические экстракты были выпарены при пониженном давлении. Было получен 1-бензил-4-(4-метокси-5'-пропил-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-ил)-1Η-пиразол в качестве сырьевой смеси.
Этап (g): 1-бензил-4-(4-метокси-5'-пропил-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-ил)-1Н-пиразол (22,6 мг, 0,05 ммоль) растворили в дихлорметане (ДХМ) (4 мл) в азотной среде, раствор охладили до температуры 0°C. Добавили BBr3 (0,25 мл, 1 грамм-молекула). Реакционную смесь перемешивали при температуре 0°C в течение 16 часов. Чтобы остановить реакцию, добавили лед, а затем - ДХМ. Слои были разделены, и органический слой выпарили при пониженном давлении. Неочищенный продукт был очищен на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (20-100% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 13 мг 3'-(1-бензил-1Н-пиразол-4-ил)-5'-пропил-[1,1':2',1"-терфенил]-4-ола в виде грязно-белых твердых частиц.
Этап (h): 3'-(1-бензил-1Н-пиразол-4-ил)-5'-пропил-[1,1':2',1"-терфенил]-4-ол (7,0 мг, 0,02 ммоль) растворили в этиловом спирте (EtOH) (2 мл). Сначала добавили циклогексен (1 мл), затем - Pd(OH)2 (20% весовой процент от массы карбона, 15 мг). Реакционную смесь подогревали при температуре 80°C в течение 27 часов, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение 48 часов. Катализатор удалили с использованием политетрафторэтиленового фильтра (ПТФЭ-фильтра), растворитель выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (0-60% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 3,2 мг 5'-пропил-3'-(1Н-пиразол-4-ил)-[1,1':2',1"-терфенил]-4-ол (Е74) в виде белых твердых частиц. Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 355,28 (М+Н), 353,32 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (Ацетон-Д6, 500 МГц): химический сдвиг (δ) 7,40 (d, 1H, J=1,9 Гц), 7,17-7,14 (m, 3Н), 7,10-7,08 (m, 3Н), 6,99-6,96 (m, 2Н), 6,90 (m, 2Н), 6,61 (m, 2Н), 2,68 (t, 2Н, J=7,6 Гц), 1,75 (m, 2H) и 1,01 (t, 3Н, J=7,4 Гц).
Пример 75
Пример 75 был подготовлен с применением способа, аналогичного способу, использованному при синтезе Примера 15 выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов описаны в Примере 15 выше. Титульное соединение определяли с использованием1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Примеры 76-116
Примеры 76-116 были подготовлены с применением способов, аналогичных способам, использованным при синтезе Примеров 1 и 15-18 выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов описаны в Примерах 1 и 15-18 выше. Для Примеров 76-90, 92, 93, 96, 97, 100 и 102-116 титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Ζ).
Примеры 117 и 118
Примеры 117 и 118 были подготовлены с применением способа, аналогичного способу, использованному при синтезе Примера 74 выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов описаны в Примере 74 выше.
Примеры 119-121
Примеры 119-121 были подготовлены с применением способа, аналогичного способу, использованному при синтезе Примера 67 выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов описаны в Примере 67 выше. Для Примеров 119-121 титульное соединение определяли при помощи1Н-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Ζ).
Примеры 122-276
Примеры 122-276 были подготовлены с применением способов, аналогичных способам, использованным при синтезе Примеров 1 и 15 выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов описаны в Примере 1 и 15 выше. Для Примеров 122-129, 132, 134-138, 140-159, 162-172, 174-178, 182-184, 186, 188, 190-198, 200-224, 226, 228-257, 259, 261, 263-267, 269-273 и 275 титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Ζ).
Пример 277
5'-бром-5"-фтор-N',4-дигидрокси-2"-метокси-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбоксимидамид (Е277)
Этап (а): 5'-хлор-5"-фтор-4-гидрокси-2"-метокси-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбонитрил (15,0 мг, 0,04 ммоль), полученный аналогично способу, примененному в Примере 15 на этапах (а)-(с), и NiBr2 (18,4 мг, 0,08 ммоль) смешали в высушенном диметилфумарате (DMF) в азотной среде. Реакционную смесь подогревали при температуре 170°C в течение 25 минут в микроволновой печи. После охлаждения до комнатной температуры добавили HCl (1 грамм-молекула), смесь проэкстрагировали с использованием EtOAc и ДХМ и отфильтровали через фазовый разделитель. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт был очищен на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (20-100% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 8,0 мг 5'-бром-5"-фтор-4-гидрокси-2"-метокси-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбонитрила.
Этап (b): 5'-бром-5"-фтор-4-гидрокси-2"-метокси-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбонитрил (8,0 мг, 0,02 ммоль) и гидроксиламин (0.25 мл, 16 грамм-молекул, водный раствор) смешали в МеОН (1 мл). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 130°C в течение 15 минут в азотной среде. Сырьевую смесь очистили на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (5-50% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 2,0 мг 5'-бром-5"-фтор-N',4-дигидрокси-2"-метокси-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбоксимиднамида (Е277). Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 431,16 (М+Н), 431,21 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (Ацетон-Д6, 500 МГц): 7,57 (d, 1Н, J=2,3 Гц), 7,51 (d, 1H, J=2,3 Гц), 6,95-6,90 (m, 3Н), 6,81-6,77 (m, 2Н), 6,65 (m, 2Н) и 3,53 (s, 3Н). Титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Примеры 278-283
Примеры 278-283 были подготовлены с применением способа, аналогичного способу, использованному при синтезе Примера 277 выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов описаны в Примерах 15 и 277 выше. Для Примеров 278-283 титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z)
Пример 284
5"-фтор-N',4-дигидрокси-5'-(трифторметил)-2"-винил-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбоксимидамид (Е284)
Этап (а): Метилтрифенилфосфония бромид (125 мг, 0,35 ммоль) и литий 2-метилпропан-2-олат (25,6 мг, 0,35 ммоль) смешали в тетрагидрофолевой кислоте (THF) (4 мл) в среде Ν2 при температуре 0°C. Смесь перемешивали в течение 30 минут. При температуре 0°C добавили 5"-фтор-2"-формил-4-гидрокси-5'-(трифторметил)-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбонитрил (15,0 мг, 0,04 ммоль), полученный аналогично способу, примененному в Примере 15 на этапах (а)-(с). Реакционную смесь затем нагревали при температуре 50°C в течение 16 часов. После охлаждения до комнатной температуры добавили H2O и HCl (2 грамм-молекулы). Смесь проэкстрагировали с использованием EtOAc и отфильтровали через фазовый разделитель. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель с использованием МеОН/ДХМ (1-2% МеОН) в качестве подвижной фазы. Было получено 4,0 мг 5"-фтор-4-гидрокси-5'-(трифторметил)-2"-винил-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбонитрила.
Этап (b): 5"-фтор-4-гидрокси-5'-(трифторметил)-2"-винил-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбонитрил (4,0 мг, 0,01 ммоль) и гидроксиламин (0,15 мл, 16 грамм-молекул, водный раствор) смешали в растворителе диметилсульфоксид (ДМСО) (0,4 мл). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 120°C в течение 20 минут в азотной среде. Сырьевую смесь очистили на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (15-40% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 2,3 мг 5"-фтор-N',4-дигидрокси-5'-(трифторметил)-2"-винил-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбоксимидамида (Е284). Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 417,21 (М+Н), 415,28 (М-Н);1H спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (Ацетон-Д6, 500 МГц): 7,56 (d, 1Н, J=2,2 Гц), 7,48 (d, 1, J=2,2 Гц), 6,98 (dd, 1Н, J=8,5, 2,1 Гц), 6,90 (m, 2Н), 6,79 (d, 1Н, J=2,1 Гц), 6,71 (d, 1Н, J=8,5 Гц), 6,62 (m, 2Н), 3,52 (s, 3Н) и 2,13 (s, 3Н). Титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Примеры 285 и 286
Примеры 285 и 286 были подготовлены с применением способа, аналогичного способу, использованному при синтезе Примера 284 выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов описаны в Примерах 15 и 284 выше. Для Примеров 285 и 286 титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Пример 287
2"-этинил-5"-фтор-N',4-дигидрокси-5'-(трифторметил)-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбоксимидамид (E287)
Этап (а): 5"-фтор-2"-формил-4-гидрокси-5'-(трифторметил)-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбонитрил (8,0 мг, 0,02 ммоль), полученный аналогично способу, примененному в Примере 15 на этапах (а)-(с), и диметил (1-диазо-2-оксопропил)фосфонат (99,7 мг, 0,52 ммоль) смешали в МеОН (1 мл). Добавили K2CO3 (66,0 мг, 0,48 ммоль), и получившуюся смесь перемешивали в течение 16 часов. Добавили NH4Cl (водный раствор), смесь проэкстрагировали с использованием EtOAc и отфильтровали через фазовый разделитель. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт был очищен на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (20-80% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 5,0 мг 2"-этинил-5-фтор-4-гидрокси-5'-(трифторметил)-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбонитрила.
Этап (b): 2"-этинил-5"-фтор-4-гидрокси-5'-(трифторметил)-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбонитрил (5,0 мг, 0,01 ммоль) и гидроксиламин (0,15 мл, 16 грамм-молекул, водный раствор) смешали в растворителе диметилсульфоксид (ДМСО) (0,45 мл). Реакционную смесь подогревали при температуре 70°C в течение 2 часов в азотной среде. Сырьевую смесь очистили на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (15-50% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 5,21 мг 2"-этинил-5"-фтор-N',4-дигидрокси-5'-(трифторметил)-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбоксимидамида (Е287). Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 415,23 (М+Н), 413,29 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (Ацетон-Д6, 500 МГц): 7,78 (d, 1Н, J=1,6 Гц), 7,68 (d, 1Н, J=1,6 Гц), 7,38 (m, 1Н), 7,03-6,99 (m, 4Н), 6,68 (m, 2Н) и 3,44 (s, 1Н). Титульное соединение определяли при помощи 'Н-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Пример 288
4-гидрокси-2"-метокси-5"-метил-5'-(трифторметил)-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбоксамид (Е288)
Этап (а): 4'-гидрокси-2-йод-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонитрил (100 мг, 0,26 ммоль), полученный аналогично способу, примененному в Примере 15 на этапах (а) и (b), NaOH (1 грамм-молекула, 5,14 мл) и пероксид водорода (12 грамм-молекулы, 0,43 мл) смешали в МеОН (3 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Добавили HCl (1 грамм-молекула), и водную смесь проэкстрагировали с использованием ДХМ. Соединенные органические экстракты выпаривалась при пониженном давлении. Было получено 407 мг 4'-гидрокси-2-йод-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбоксамида.
Этап (b): 4'-гидрокси-2-йод-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбоксамид (20 мг, 0,05 ммоль), (2-метокси-5-метилфенил)бороновую кислоту (16,3 мг, 0,10 ммоль), PdCl2(PPh3)2 (3,45 мг, 0,005 ммоль) и K2CO3 (20,3 мг, 0,15 ммоль) смешали в растворе диметилэтаноламина/этилового спирта/воды (ДМЭА/EtOH/H2O)(1 мл, 4:1:1) в азотной среде. Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 130°C в течение 30 минут, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через алюмоферрит кальция и выпаривали при пониженном давлении. Сырьевую смесь очистили на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (0-20% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 7,6 мг 4-гидрокси-2"-метокси-5"-метил-5'-(трифторметил)-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбоксамида (Е288). Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 402,2 (М+Н), 400,4 (М-Н);1H спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (MeOD, 500 МГц): 7,73 (d, 1H, J=1,6 Гц), 7,64 (d, 1Н, J=1,6 Гц), 7,03 (m, 1Н), 6,88 (m, 2Н), 6,80 (d, 1Н, J=2,0 Гц), 6,74 (d, 1Н, J=8,4 Гц), 6,57 (m, 2Н), 3,54 (s, 3Н) и 2,15 (s, 3Н).
Пример 289
5'-бром-5"-хлор-N',4-дигидрокси-2"-метил-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбоксимидамид (Пример 289)
Этап (а): 5"-хлор-4-метокси-2"-метил-5'-нитро-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбонитрил (50,0 мг, 0,13 ммоль), полученный аналогично способу, примененному в Примере 1 на этапах (a), (b), (d) и SnCl2* (H2O)2 (149 мг, 0,66 ммоль) смешали в EtOH (6.6 мл). Реакционную смесь подогревали в колбе с обратным холодильником в течение 5 часов. Добавили силикагель, и растворитель был выпарен. Сырьевую смесь очистили с использованием силикагеля при помощи EtOAc/n-гептана (1:1) в качестве подвижной фазы. Было получено 40 мг 5'-амино-5"-хлор-4-метокси-2"-метил-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбонитрила.
Этап (b): 5'-амино-5"-хлор-4-метокси-2"-метил-[1,1':2',1'-терфенил]-3'-карбонитрил (48,0 мг, 0,14 ммоль) и CuBr2 (61,5 мг, 0,28 ммоль) смешали в MeCN (1,7 мл). Добавили трет-бутил нитрит (21,3 мг, 0,21 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт отфильтровали через подушку из силикагеля при помощи EtOAc/n-гептана (1:1) в качестве подвижной фазы. Было получено 5'-бром-5"-хлор-4-метокси-2"-метил-[1,1':2',1'-терфенил]-3'-карбонитрила в количественном выходе.
Этап (с): 5'-бром-5"-хлор-4-метокси-2"-метил-[1,1':2',1'-терфенил]-3'-карбонитрил (56,8 мг, 0,14 ммоль) растворили в дихлорметане (ДХМ) (1,7 мл) в азотной среде. Добавили BBr3 (0,69 мл, 1 грамм-молекула). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Добавили ДХМ и HCl (1 грамм-молекула), затем фазы были разделены с использованием фазового разделителя. Органическую фазу выпаривали при пониженном давлении. Было получено 50 мг 5'-бром-5"-хлор-4-гидрокси-2"-метил-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбонитрила.
Этап (d): 5'-бром-5"-хлор-4-гидрокси-2"-метил-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбонитрил (50 мг, 0,12 ммоль) и гидроксиламин (0,4 мл, 16 грамм-молекул, водный раствор) смешали в МеОН (0,8 мл). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 130°C в течение 15 минут в азотной среде. Сырьевую смесь очистили на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (5-40% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 15,8 мг 5'-бром-5"-хлор-N',4-дигидрокси-2"-метил-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбоксимидамида (Е289). Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 433,16; 435,19 (М+Н), 431,06 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (Ацетон-Д6, 500 МГц): 7,61 (d, 1Н, J=2,2 Гц), 7,56 (d, 1Н, J=2,2 Гц), 7,20 (d, 1Н, J=2,2 Гц), 7,10 (dd, 1Н, J=8,3, 2,2 Гц), 6,99 (d, 1Н, J=8,3 Гц), 6,92 (m, 2Н), 6,66 (m, 2Н) и 1,85 (s, 3Н). Титульное соединение определяли при помощи1Н-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Ζ).
Примеры 290-296
Примеры 290-296 были подготовлены с применением способа, аналогичного способу, использованному при синтезе Примера 289 выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов описаны в Примерах 1 и 289 выше. Для Примеров 290-296 титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Ζ).
Примеры 297-303
Примеры 297-303 были подготовлены с применением способа, аналогичного способу, использованному при синтезе Примеров 1 и 50 выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов описаны в Примерах 1 и 50 выше. Для Примеров 297 и 299-303 титульное соединение определяли при помощи1Н-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Ζ).
Примеры 304-310
Примеры 304-310 были подготовлены с применением способов, аналогичных способам, использованным при синтезе Примеров 1, 15 и 50 выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов описаны в Примерах 1, 15 и 50 выше. Для Примеров 304-308 и 310 титульное соединение определяли при помощи1Н-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Ζ).
Пример 311
2'-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-3'-(1Н-1,2,3-триазол-4-ил)-5'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ол (Е311)
Этап (а): 2-йод-4-(трифторметил)анилин (2,0 г, 6,97 ммоль), 4-метоксифенилбороновую кислоту (2,12 г, 13,9 ммоль), PdCl2(PPh3)2 (244 мг, 0,35 ммоль) и K2CO3 (3,85 г, 27,8 ммоль) смешали в растворе диметилэтаноламина/этилового спирта/воды (ДМЭА/EtOH/H2O)(24 мл, 4:1:1) в азотной среде. Реакционную смесь подогревали при температуре 100°C в течение 1 часа, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение 66 часов. Смесь промыли соляным раствором (насыщенный, 30 мл) и H2O (30 мл). Водные слои были экстрагированы с использованием ДХМ (30 мл), объединенные органические слои были пропущены через фазовый разделитель. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (0-20% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 1,38 г 4'-метокси-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-2-амина в виде красной маслянистой субстанции.
Этап (b): 4'-метокси-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-2-амин (1,38 г, 5,14 ммоль) растворили в МеОН (40 мл). Добавили йод (1,37 г, 5,40 ммоль) и AgSO4 (1,68 г, 5,40 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 45 минут, а затем фильтровали через алюмоферрит кальция. Растворитель выпарили при пониженном давлении. К оставшемуся продукту добавили ДХМ (50 мл), H2O (20 мл) и NaHCO3 (1,4 г), получившуюся смесь перемешивали в течение 16 часов. Смесь профильтровывали через фазный разделитель. Органический слой выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (2,5-5% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 1,63 г 3-йод-4'-метокси-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-2-амина в виде желтоватой маслянистой субстанции.
Этап (с): 3-йод-4'-метокси-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-2-амин (1,63 г, 4,14 ммоль) и CuBr2 (1,85 г, 8,28 ммоль) смешали в MeCN (50 мл). Добавили трет-бутил нитрит (0,64 г, 6,21 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 40 минут. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (0-5% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 1,66 г 2'-бром-3'-йод-5'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ола в виде белых твердых частиц.
Этап (d): Полученный 2'-бром-3'-йод-5'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ол (1,66 г, 3,65 ммоль) растворили в дихлорметане (ДХМ) (30 мл) в азотной среде, раствор охладили до температуры 0°C. По каплям добавили BBr3 (18,2 мл, 1 грамм-молекула) при температуре 0°C. Через 10 минут охлаждающую ванну убрали, и реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа 45 минут. Добавили NaHCO3 (насыщенный), смесь перемешивали в течение 2 минут. Смесь профильтровывали через фазный разделитель, водный слой был проэкстрагирован с использованием ДХМ. Соединенные органические слои были выпарены, неочищенный продукт рафинировали через силикагель с использованием ДХМс/n-гептана (0-75% ДХМ) в качестве подвижной фазы. Было получено 1,48 г 2'-бром-3'-йод-5'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ола в виде белых твердых частиц.
Этап (е): 2'-бром-3'-йод-5'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ол (200 мг, 0,45 ммоль), этинилтриметилсилан (66,5 мг, 0,68 ммоль), CuI (8,60 мг, 0,045 ммоль), PdCl2(PPh3)2 (15,84 мг, 0,02 ммоль) и Et3N (0,188 мл, 1,35 ммоль) смешали в тетрагидрофолевой кислоте (THF) (1,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Растворитель выпарили, сырьевую смесь рафинировали через силикагель с использованием ДХМс/n-гептана (0-50% ДХМ) в качестве подвижной фазы. Было получено 136 мг 2'-бром-5'-(трифторметил)-3'-((триметилсилил)этинил)-[1,1'-бифенил]-4-ола в виде бесцветной маслянистой субстанции.
Этап (f): 2'-бром-5'-(трифторметил)-3'-((триметилсилил)этинил)-[1,1'-бифенил]-4-ол (136 мг, 0,33 ммоль), 3,5-диметилизоксазол-4-бороновая кислота (185 мг, 1,32 ммоль), Pd(OAc)2 (7,39 мг, 0,03 ммоль), RuPhos (30,71 мг, 0,07 ммоль) и K2CO3 (273 мг, 1,97 ммоль) смешали в толуоле/воде (0,8 мл, 1:1) в азотной среде. Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 120°C в течение 30 минут и охлаждали до комнатной температуры. Добавили NH4Cl (2 мл, насыщенный), затем водную смесь экстрагировали с использованием ДХМ. Соединенные экстракты выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель с использованием ДХМ/n-гептана (50-100% ДХМ) в качестве подвижной фазы. Было получено 82 мг 2'-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-5'-(трифторметил)-3'-((триметилсилил)этинил)-[1,1'-бифенил]-4-ола в виде желтой маслянистой субстанции.
Этап (g): 2'-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-5'-(трифторметил)-3'-((триметилсилил)этинил)-[1,1'-бифенил]-4-ол (82 мг, 0,19 ммоль) растворили в тетрагидрофолевой кислоте (THF) (1 мл), затем добавили Bu3NF (250 мг, 0,95 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре. Через 1 час добавили еще Bu3NF (250 мг, 0,95 ммоль) и продолжили перемешивание еще в течение 1 часа. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель с использованием ДХМ/n-гептана (0-100% ДХМ) в качестве подвижной фазы. Было получено 47 мг 2'-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-3'-этинил-5'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ола в виде красного полужидкого вещества.
Этап (h): 2'-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-3'-этинил-5'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ол (37 мг, 0,10 ммоль), CuI (19,7 мг, 0,10 ммоль) и N3SiMe3 (59,6 мг, 0,52 ммоль) смешали в растворе диметил фумарата (DMF)/MeOH (0,5 мл, 9:1). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 140°C в течение 30 минут в азотной среде. Добавили EtOAc, затем смесь фильтровали через алюмоферрит кальция. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, и сырьевая смесь, растворенная в растворителе диметилсульфоксид (ДМСО), была очищена на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (20-100% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 2,9 мг 2'-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-3'-(1Η-1,2,3-триазол-4-ил)-5'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ола (Е311). Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 401,25 (М+Н), 399,3 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (Ацетон-Д6, 500 МГц): 7,73 (s, 1Н), 7,28 (s, 1Н), 7,06 (m, 2Н), 6,82 (m, 2Н), 1,91 (s, 3Н), 1,72 (s, 3Н).
Примеры 312-321
Примеры 312-321 были подготовлены с применением способов, аналогичных способам, использованным при синтезе Примера 1 выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов описаны в Примере 1. Промежуточный продукт С использовался для синтезирования Примеров 312-316. Использованный для синтезирования Примеров 318-321 промежуточный продукт был получен аналогичным способом. Для Примеров 312-314 и 317-319 титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Пример 322
2-(3-цианофуран-2-ил)-N',4'-дигидрокси-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимидамид (E322)
Этап (а): 4'-гидрокси-2-йод-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонитрил (250 мг, 0,64 ммоль), полученный аналогично способу, примененному в Примере 15, и гидроксиламин (1,0 мл, 16 грамм-молекул, водный раствор) смешали в МеОН (3,0 мл). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 120°C в течение 20 минут в азотной среде. Добавили HCl (1 грамм-молекула) и ДХМ. Фазы были разделены, органическую фазу выпаривали при пониженном давлении. Было получено 140 мг N',4'-дигидрокси-2-йод-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимидамида.
Этап (b): N',4'-дигидрокси-2-йод-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимидамид (140 мг, 0,33 ммоль) растворили в АсОН (5 мл), затем добавили ацетон (1,18 мл, 16,06 ммоль). Реакционную смесь подогревали при температуре 70°C в течение 20 часов, а затем выпаривали до степени высушивания. Добавили ДХМ и NaOH (0,5 грамм-молекул). Фазы были разделены, органическую фазу выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (10-50% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 117 мг 3'-(5,5-диметил-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2'-йод-5'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ола в виде белых твердых частиц.
Этап (с): 3'-(5,5-диметил-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2'-йод-5'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ол (10,0 мг, 0,02 ммоль), 2-(трибутилстаннил)фуран-3-карбонитрил (16,5 мг, 0,04 ммоль), Pd(ОАс)2 (0,49 мг, 0,002 ммоль), три(фуран-2-ил)фосфин (0,93 мг, 0,004 ммоль) и CuI (0,41 мг, 0,004 ммоль) смешали в тетрагидрофолевой кислоте (THF) (0,5 мл). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 100°C в течение 30 минут в азотной среде. Сырьевую смесь очистили на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (35-45% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 3,0 мг 2-(3-(5,5-диметил-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-4'-гидрокси-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)фуран-3-карбонитрила в виде белых твердых частиц.
Этап (d): 2-(3-(5,5-диметил-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-4'-гидрокси-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-2-ил)фуран-3-карбонитрил (3,0 мг, 0,01 ммоль) растворили в этиловом спирте (EtOH)(0,5 мл), затем добавили HCl (концентрированная, 0,05 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Добавили ДХМ/EtOAc и NH4Cl (насыщенный). Фазы были разделены, органическую фазу выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт был очищен на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (20-100% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 2,0 мг 2-(3-цианофуран-2-ил)-N',4'-дигидрокси-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимидамида (Е322) в виде бесцветной маслянистой субстанции. Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 388,4 (М+Н), 386,2 (ΜΗ);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (Ацетон-Д6, 500 МГц): 7,92 (d, J=1,3 Гц, 1Н), 7,82 (d, J=1,1 Гц, 1Н), 7,69 (d, J=2,0 Гц, 1Н), 7,02 (m, 2Н), 6,80 (m, 2Н), 6,68 (d, J=2,1 Гц, 1Н). Титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Примеры 323-325
Примеры 323-325 были подготовлены с применением способа, аналогичного способу, использованному при синтезе Примеров 15 и 322 выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов описаны в Примерах 15 и 289 выше. Для Примеров 323-325 титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Ζ).
Пример 326
2'-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-3'-(гидроксиметил)-5'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ол (Е326)
Этап (а): 2-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-4'-гидрокси-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонитрил (250 мг, 0,64 ммоль), полученный аналогично способу, примененному в Примере 15, растворили в дихлорметане (ДХМ) (6 мл), раствор охладили до температуры -78°C. По каплям добавили диизобутил алюминий гидрид (DIBAL-H) (4,19 мл, 1 грамм-молекула). Реакционную смесь перемешивали при температуре -78°C в течение 1,5 часов. При температуре -78°C добавили HCl (5 мл, 2 грамм-молекулы), затем дождались нагрева смеси до комнатной температуры. Добавили воду, и водная смесь была экстрагирована с использованием ДХМ. Соединенные органические экстракты были обезвожены соляным раствором и пропусканием через Na2SO4. Растворитель выпарили, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc в качестве подвижной фазы. Было получено 147 мг 2-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-4'-гидрокси-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбальдегида в виде желтых стеклообразных твердых частиц.
Этап (b): 2-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-4'-гидрокси-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбальдегид (147 мг, 0,41 ммоль) и трет-бутилдиметилхлорсилан (TBDMSCl) (91,7 мг, 0,61 ммоль) смешали в ДХМ (2,5 мл). Добавили Et3N (0,17 мл, 1,22 ммоль), затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Растворитель выпарили, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (5-20% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 162 мг 4'-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбальдегида в виде желтых стеклообразных твердых частиц.
Этап (с): Безводный ZnCl2(18,5 мг, 0,14 ммоль) обезвоживали при температуре 100°C в течение 16 часов, а затем охлаждали до комнатной температуры. Затем последовательно добавили обезвоженную тетрагидрофолевую кислоту (THF) (3,5 мл) и (триметилсилил)метил магний хлорид (40 мг, 0,27 ммоль). Получившуюся смесь перемешивали в течение 15 минут при комнатной температуре. Добавили комплекс «изопропилмагний хлорид литий хлорид» (123 мг, 0,85 ммоль). Смесь перемешивали в течение 45 минут при комнатной температуре, а затем охлаждали до 0°C. 4'-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбальдегид (162 мг, 0,34 ммоль), растворенный в тетрагидрофолевой кислоте (THF) (2,5 мл), добавили по каплям при температуре 0°C, затем реакционную смесь перемешивали при температуре 0°C в течение 1,5 часов. Добавили NH4Cl (насыщенный), и водная смесь была экстрагирована с использованием EtOAc. Соединенные экстракты были обезвожены соляным раствором и пропусканием через Na2SO4. Растворитель выпарили, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (10-30% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 33 мг (4'-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-ил)метанола.
Этап (d): (4'-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-ил)метанол (33 мг, 0,07 ммоль) растворили в тетрагидрофолевой кислоте (THF) (2 мл), затем добавили HCl (1 мл, 2 грамм-молекулы). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 часов. Добавили NaHCO3 (1 грамм-молекула), растворитель выпарили. Оставшуюся водную смесь экстрагировали с использованием EtOAc, соединенные экстракты были обезвожены соляным раствором и пропусканием через Na2SO4. Растворитель выпарили при пониженном давлении, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (30-50% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 8,7 мг 2'-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-3'-(гидроксиметил)-5'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ола (Пример 326) в виде белых твердых частиц. Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 364,4 (М+Н), 362,5 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (CDCl3, 500 МГц): химический сдвиг (δ) 7,89 (s, 1Н), 7,62 (s, 1H), 6,90 (m, 2H), 6,73 (m, 2H), 4,51 (s, 2H), 2,04 (s, 3H), 1,92 (s, 3H). Титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Пример 327
5'-циано-3",5"-дифтор-N',4-дигидрокси-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбоксимидамид (Е327)
Этап (а): 5'-хлор-3",5"-дифтор-N',4-дигидрокси-[1,1':2',1"-терфенил]-3'-карбоксимидамид (57 мг, 0,15 ммоль), полученный аналогично способу, примененному в Примере 15, растворили в ацетоне (15 мл), затем добавили трифторуксусную кислоту (TFA) (0,3 мл). Реакционную смесь подогревали при температуре 80°C в течение ПО минут, а затем выпарили до степени высушивания. Неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (10-50% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 63 мг 5'-хлор-3'-(5,5-диметил-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-3",5"-дифтор-[1,1':2',1"-терфенил]-4-ола в виде стеклообразных твердых частиц.
Этап (b): 5'-хлор-3'-(5,5-диметил-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-3",5"-дифтор-[1,1':2',1"-терфенил]-4-ол (15,0 мг, 0,04 ммоль), SPhos (1,47 мг, 0,004 ммоль), Pd2(dba)3 (1,65 мг, 0,002 ммоль) и Zn(CN)2 (3,87 мг, 0,041 ммоль) смешали в растворе диметил фумарата (DMF)/H2O (1,5 мл, 99:1) в азотной среде. Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 150°C в течение 60 минут. Добавили EtOAc, затем смесь фильтровали через алюмоферрит кальция. Растворитель выпарили, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (20-40% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 12,6 мг 6'-(5,5-диметил-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-3,5-дифтор-4"-гидрокси-[1,1':2',1"-терфенил]-4'-карбонитрила в виде стеклообразных твердых частиц.
Этап (с): 6'-(5,5-диметил-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-3,5-дифтор-4"-гидрокси-[1,1':2',1"-терфенил]-4'-карбонитрил (12,6 мг, 0,03 ммоль) растворили в этиловом спирте (EtOH)(1 мл), затем добавили HCl (0,1 мл, концентрированная). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Добавили NaHCO3 (насыщенный), затем смесь была отфильтрована. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, неочищенный продукт был очищен на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/H2O (10-50% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 8,9 мг 5'-циано-3",5"-дифтор-N',4-дигидрокси-[1,1':2,1"-терфенил]-3'-карбоксимиднамида (Е327) в виде белых твердых частиц. Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 366,2 (М+Н), 364,3 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (MeOD, 500 МГц): химический сдвиг (δ) 7,79 (d, J=1,7 Гц, 1H), 7,77 (d, J=1,7 Гц, 1Н), 6,89 (m, 2H), 6,79 (m, 1H), 6,72 (m, 2H), 6,65 (m, 2H). Титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Пример 328
N',4'-дигидрокси-2-(пирролидин-1-ил)-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимидамид (Е328)
Этап (а): 2-бром-4'-метокси-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонитрил (40,0 мг, 0,11 ммоль), полученный аналогично способу, примененному в Примере 1, пирролидин (15,98 мг, 0,22 ммоль), Pd(OAc)2 (2,52 мг, 0,01 ммоль), бис(дифенилфосфино)бинафтил (BINAP) (17,48 мг, 0,03 ммоль) и KOtBu (12,6 мг, 0,11 ммоль) смешали в толуоле (1 мл) в азотной среде. Реакционную смесь подогревали при температуре 100°C в течение 16,5 часов. Добавили воду (15 мл) и ДХМ (20 мл). Слои были разделены, водный слой экстрагировали с использованием ДХМ (5 мл). Соединенные органические слои были выпарены, неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (0-10% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Было получено 24 мг 4'-метокси-2-(пирролидин-1-ил)-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонитрила в виде коричневой маслянистой субстанции.
Этап (b): 4'-метокси-2-(пирролидин-1-ил)-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонитрил (20,0 мг, 0,06 ммоль) растворили в дихлорметане (ДХМ) (1 мл) в азотной среде. Добавили BBr3 (0,12 мл, 1 грамм-молекула). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Добавили несколько капель МеОН, воду и HCl (1 грамм-молекула), затем фазы были разделены. Водный слой экстрагировали с использованием ДХМ, соединенные органические слои были выпарены при пониженном давлении. Неочищенный продукт рафинировали через силикагель при помощи EtOAc/n-гептана (10-20% EtOAc) в качестве подвижной фазы. Был получен 4'-гидрокси-2-(пирролидин-1-ил)-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонитрил в количественном выходе.
Этап (с): 4'-гидрокси-2-(пирролидин-1-ил)-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбонитрил (6,0 мг, 0,02 ммоль) и гидроксиламин (0,06 мл, 16 грамм-молекул, водный раствор) смешали в растворе диметил фумарата (DMF) (0,5 мл). Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при температуре 100°C в течение 30 минут в азотной среде. Добавили H2O, смесь была проэкстрагирована с использованием ДХМ, затем соединенные органические слои были выпарены. Неочищенный продукт был очищен на препаративном высокопроизводительном жидкостном хроматографе (ВЭЖХ) с использованием MeCN/кислой H2O (10-50% MeCN) в качестве подвижной фазы. Рафинацию повторили с использованием MeCN/H2O (15-50% MeCN) в качестве подвижной фазы. Было получено 0,5 мг N',4'-дигидрокси-2-(пирролидин-1-ил)-5-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-3-карбоксимиднамида (Е328). Масс-спектрометрия с электрораспылением - отношение массы к заряду: 366,23 (М+Н), 364,27 (М-Н);1Н спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (MeOD, 500 МГц): химический сдвиг (δ) 7,39 (d, J=2,1 Гц, 1Н), 7,31 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7,15 (m, 2H), 6,82 (m, 2H), 3,03 (m, 4H), 1,69 (m, 4H). Титульное соединение определяли при помощи1Н-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Примеры 329-360
Примеры 329-360 были подготовлены с применением способов, аналогичных способам, использованным при синтезе Примеров 1, 50 и Примера 288 на этапе (а) выше. Подробности экспериментов по отдельным этапам общих способов описаны в Примерах 1, 50 и 288 выше. Для Примеров 329-331, 335-343 и 345-360 титульное соединение определяли при помощи1H-спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), которая показала, что оксим является отдельным изомером, но не показала, какой изомер оксима был получен - (Е) или (Z).
Тест на связывание 1: тест на связывание эстрогеновых рецепторов
Тест на связывание лигандов с эстрогеновыми рецепторами проводили в виде сцинтилляционного анализа сближения (SPA) с использованием меченого тритием эстрадиола (3Н-Е2) и рекомбинантно экспрессируемых биотинилированных связывающих доменов эстрогеновых рецепторов. Связывающие домены белков ЭРα человека (ERα-LBD, pETPET-N-AT #1, аминокислоты 301-595) и ЭΡβ человека (ERβ-LBD, pETPET-N-AT #1, аминокислоты 255-530) продуцировали в E.coli ((BL21, (DE3), pBirA)) при 22°C в 2×LB среде с добавлением 50 мкМ биотина. Спустя 3 ч после индукции изопропил-β-D-1-тиогалактопиранозидом (IPTG, 0,55 мМ) клетки собирали путем центрифугирования при 7300×g в течение 15 мин и хранили дебрис замороженным при -20°C. Экстракцию ЭРα и ЭРβ проводили с использованием 5 г клеток, суспендированных в 50 мл экстрагирующего буфера (50 мМ Tris, pH 8,0, 100 мМ KCl, 4 мМ EDTA, 4 мМ DDT и 0,1 мМ PMSF). Клеточную суспензию дважды прогоняли через Microfluidizer M-110L (Microfluidics) и центрифугировали при 15000×g в течение 60 мин. Супернатант делили на аликвоты и хранили при -70°C.
Экстракты ЭРα-LBD или ЭРβ-LBD разбавляли в аналитическом буфере (18 мМ K2HPO4, 2 мМ KH2PO4, 20 мМ Na2MoO4, 1 мМ EDTA, 1 мМ ТСЕР) в соотношениях 1:676 и 1:517 для ЭРα-LBD и ЭРβ-LBD, соответственно. Концентрации рецепторов должны. составлять 900 фмоль/л. Экстракты предварительно инкубировали с покрытыми стрептавидином бусами для SPA из поливинилтолуола (RPNQ0007, GE Healthcare) в концентрации 0,43 мг/мл в течение 1 часа при комнатной температуре.
Тестируемые соединения оценивали в диапазоне концентраций от 157 мкМ до 37,5 пМ. Для проведения теста приготавливали 5-кратные (относительно желаемых конечных концентраций) маточные растворы тестируемых соединений в 100% ДМСО. Количество ДМСО в лунках 384-луночного микропланшета должно составлять 20%. В аналитические микропланшеты добавляли 18 мкл аликвот тестируемых соединений, затем 35 мкл предварительно инкубированной смеси рецептор/бусы для SPA, и в завершение добавляли 35 мкл 3 нМ3Н-Е2. Микропланшеты покрывали герметизирующей пластиковой крышкой, центрифугировали в течение 1 мин при 1000 об/мин и уравновешивали в течение ночи на шейкере при комнатной температуре. На следующее утро микропланшеты центрифугировали в течение 5 мин при 2000 об/мин и проводили измерения на планшетном сцинтилляционном счетчике, например, на PerkinElmer Microbeta 1450 Trilux.
Для соединений, способных к замещению 3[Н]-Е2 в рецепторе, значение IC50 (концентрации, необходимой для ингибирования 50% связывания 3[Н]-Е2) определяют при помощи нелинейной логистической модели, состоящей из четырех параметров; b=((bмаксимум-bмининум)/(1+(I/IC50)S))+bминимум I - добавленная концентрация связывающего ингибитора, IC50 - это концентрация ингибитора при полумаксимальном связывании, S - коэффициент уклона. Прибор Microbeta генерирует среднее значение количества импульсов в минуту и корректирует индивидуальные вариации показаний датчиков, таким образом, генерируя скорректированные значения количества импульсов в минуту.
Тест на связывание 2: тест на связывание эстрогеновых рецепторов
В компании Invitrogen™ были закуплены конкурентный тест на связывание альфа-ЭР LanthaScreen® TR-FRET и конкурентный тест на связывание бета-ЭР LanthaScreen® TR-FRET.
GSTPET-маркированный лиганд-связывающий домен человеческого эстрогенового альфа-рецептора или человеческого эстрогенового бета-рецептора комбинируют с маркированным телатом тербия анти-GSTPET-антителом и флуоресцентным лигандом для эстрогенового рецептора.
Хелат тербия возбуждают импульсами света во флуоресцентном аппарате для считывания планшетов. Когда флуоресцентный лиганд находится в непосредственной близости, что происходит, когда он зафиксирован на домен связывания лиганда рецептора, часть энергии, излучаемой хелатом тербия при релаксации, будет передаваться в виде света и возбуждать лиганд. После успешной релаксации энергия флуоресцентного лиганда выпускается в виде света второй длины волны излучения.
Соотношение сигналов света, излучаемого хелатом тербия и флуоресцентным лигандом, вычисляют и используют в качестве меры взаимодействия маркированного лиганда и рецептора. По мере тестирования немаркированных лигандов это соотношение будет уменьшаться в зависимости от концентрации испытуемого лиганда, что при анализе может интерпретироваться как конкурентная кривая связывания. Все реагенты, кроме тестируемые соединений, приобретались в Invitrogen™. Использованные в настоящем тесте концентрации реагентов применялись в концентрациях, рекомендованных Invitrogen™. 200 нанолитров испытуемых соединений, последовательно разбавленных в диметилсульфоксиде (ДМСО), добавляли в пустые планшеты малого объема (Corning) при помощи роботизированного устройства подачи Mosquito (ТТР Labtech). Остальные реагенты подготовлены в соответствии с рекомендациями в инструкции Invitrogen™, осторожно перемешивали в сосуде, а затем добавляли на аналитический планшет при помощи устройства Multidrop 384 (Titertek). Аналитические планшеты закрывали и быстро смешивали на шюттель-аппарате. После 3 часов установления равновесия при комнатной температуре планшеты измеряли на мульти-индексном аппарате для чтения планшетов EnVision® (Perkin Elmer).
Тест на трансактивацию 1: Тест на трансактивацию, проведенный на 293 клетках почки человеческого эмбриона, стабильно трансфицированных pERE-ALP и эстрогеновым альфа-рецептором человека
Экспрессионный вектор pMThERα содержит вставку ДНК дикого типа человеческого эстрогенового альфа-рецептора с удаленной лидерной последовательностью. Репортерная конструкция pERE-ALP содержит ген секретированной формы плацентарной щелочной фосфатазы (ALP) и эстрогеновый ответный элемент (ERE) на вителлогенин. 293 клетки почки человеческого эмбриона трансфектировали в два этапа. Сначала стабильную смесь клонов трансфектировали с репортерной генетической конструкцией, в результате был получен pSV2-Neo для селекции. Затем стабильную смесь клонов трансфектировали с pMThERα и вектором резистенции pKSV-Hyg для селекции. Все трансфекции производили с использованием липофектамина (Invitrogen) в соответствии с рекомендациями поставщика. Селекционный клон с pERE-ALP и pMThERα использовали в анализе транзактивации.
Клетки высеяли в 384-луночные планшеты в соотношении 12500 клеток на лунку в среде Хэма модификации F12 Кун (без фенолового красного) с 10% обработкой нагруженной декстраном угольной пылью (DCC) эмбриональной бычьей сыворотки (FBS), 2 ммоль L-глутамина и 50 мкг/мл гентамицина. После 24 часов инкубации (37°C, 5% CO2) среду посева убрали и заменили 20 мкл среды Хэма модификации F12 Кун (без фенолового красного) с 1,5% нагруженной декстраном угольной пылью эмбриональной телячьей сыворотки (DCC-FCS), 2 ммоль L-глутамина, дополненной 100 ед/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина. Выбранные соединения добавляли в лунки в 12 различных концентрациях от 3,3 пмоль до 33 мкмоль. Соединения растворяли в 100% растворителе диметилсульфоксид (ДМСО), окончательная концентрация диметилсульфоксида в анализе составляла 0,1%. После 72 часов инкубации (37°C, 5% CO2) среду анализировали на предмет активности ALP посредством хемилюминесцентного анализа; 10 мкл аликвоты клеточной культуральной среды смешали с 100 мкл буферного раствора для анализа (0,1 грамм-молекула диэтаноламина, 1 ммоль MgCl2) и 0,5 ммоль двунатриевого 3-(4-метоксиспиро 1,2-диоксетан-3,2'-(5'-хлор)-трицикло[3.3.1.13,7]декан-4-ил)фенил фосфата (CSPD) (Tropix, Applied Biosystems) и инкубировали в течение 20 минут при температуре 37°C и 15 минут при комнатной температуре до измерения хемилюминесцентного светового сигнала (одна секунда на лунку) в гамма-счетчике Wallac Microbeta Trilux 1450-028 (PerkinElmer). Полумаксимальные эффективные концентрации (ЕС50) рассчитывали на основании кривых данных концентрации - ответа при помощи логистической модели, основанной на четырех параметрах, с использованием программного обеспечени XLfit версии 2.0 (IDBS) или более новой версии.
Тест на трансактивацию 2: Тест на трансактивацию, проведенный на 293 клетках почки человеческого эмбриона, стабильно трансфицированных pERE2-ALP и эстрогеновым бета-рецептором человека
Генерирование стабильных клеточных линий HEK293 (CRL-1573; Американская коллекция типовых культур), экспрессирующих репортерный вектор pERE 2-ALP человеческого эстрогенового бета-рецептора (hERβ 530), было описано в литературе (Mol Pharmacol 1998, 54,105-112; Endocrinology 2002, 143, 1558-1561).
Клетки высеяли в 384-луночные планшеты в соотношении 12500 клеток на лунку в среде Хэма модификации F12 Кун (без фенолового красного) с 10% обработкой нагруженной декстраном угольной пылью (DCC) эмбриональной бычьей сыворотки (FBS), 2 ммоль L-глутамина и 50 мкг/мл гентамицина. После 24 часов инкубации (37°C, 5% CO2) среду посева убрали и заменили 20 мкл среды Хэма модификации F12 Кун (без фенолового красного) с 1,5% нагруженной декстраном угольной пылью эмбриональной телячьей сыворотки (DCC-FCS), 2 ммоль L-глутамина, дополненной 100 ед/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина. Выбранные соединения добавляли в лунки в 12 различных концентрациях от 3,3 пмоль до 33 мкмоль. Соединения растворяли в 100% растворителе диметилсульфоксид (ДМСО), окончательная концентрация диметилсульфоксида в анализе составляла 0,1%. После 72 часов инкубации (37°C, 5% CO2) среду анализировали на предмет активности ALP посредством хемилюминесцентного анализа; 10 мкл аликвоты кондиционированной среды, смешали с 100 мкл буферного раствора для анализа (0,1 грамм-молекула диэтаноламина, 1 ммоль MgCl2) и 0,5 ммоль двунатриевого 3-(4-метоксиспиро 1,2-диоксетан-3,2'-(5'-хлор)-трицикло[3.3.1.13,7]декан-4-ил)фенил фосфата (CSPD) (Tropix, Applied Biosystems) и инкубировали в течение 20 минут при температуре 37°C и 15 минут при комнатной температуре до измерения хемилюминесцентного светового сигнала (одна секунда на лунку) в гамма-счетчике Wallac Microbeta Trilux 1450-028 (PerkinElmer). Активность ALP, экспрессированная в жидкокристаллических полимерах (LCPS), прямо пропорциональна уровню ALP, экспрессированному клетками. Полумаксимальные эффективные концентрации испытуемых соединений (ЕС50) рассчитывали на основании кривых данных концентрации - ответа при помощи логистической модели, основанной на четырех параметрах, с использованием программного обеспечении XLfit версии 2.0 (IDBS) или более новой версии.
Соединения-примеры были опробированы в рамках тестов на транзактивацию 1 и 2.
Соединения по Примерам иллюстрируют одно или несколько представленных ниже возможностей:
(i) активность в диапазоне ЕС50 1-10000 наномоль для α-подтипа эстрогенового рецептора в тесте на трансактивацию 1;
(ii) активность в диапазоне ЕС50 0,1-10000 наномоль для β-подтипа эстрогенового рецептора в тесте на трансактивацию 2.
Предпочтительные соединения по настоящему изобретению - это такие соединения, которые показывают свою активность для β-подтипа эстрогенового рецептора при более низких концентрациях в рамках указанного выше диапазона ЕС50. Например, соединения по Примерам 1-3, 6, 7, 8-11, 13, 17, 19, 21, 22, 24, 25-28, 30, 32, 33, 36, 37, 39-50, 52, 55-58, 67, 70, 71, 73, 78, 79, 81, 82, 85, 106-109, 111-117, 122-140, 142-159, 162-172, 174-178, 182-184, 186-196, 198-224, 226, 228-257, 259-261, 263-266, 269-275, 277-287, 289-299, 301-303, 305-308, 311-318, 322-329, 331, 335, 337, 339-341, 343, 346-358 и 360 демонстрируют активность в диапазоне ЕС50 0,1-100 наномоль для β-подтипа эстрогенового рецептора в тесте на трансактивацию 2.
Предпочтительные соединения по настоящему изобретению - это такие соединения, которые показывают свою селективность при выборе эстрогенового рецептора β-подтипа, а не эстрогенового рецептора α-подтипа в тестах на трансактивацию 1 и 2. Например, соединения по Примерам 2, 3, 6, 7, 8-11, 13, 14, 17, 19, 21, 25-27, 30, 31, 33, 37, 39-49, 52, 56, 57, 62, 79, 81, 82, 106-109, 111-115, 122-128, 130-132, 134, 135-137, 139-157, 159, 162-178, 181-186, 188-196, 198, 199, 204-224, 226-239, 241-261, 263, 265, 269-272, 275, 276, 279, 281, 284, 285, 290, 292-296, 298, 300, 302, 303, 306, 308, 311-319, 322-325, 327, 328, 340, 346-349, 351-354, 357, 359 и 360 демонстрируют в 20 и более раз высокую селективность эстрогенового рецептора β-подтипа в тестах на трансактивацию; при этом соединения по Примерам 2, 3, 8, 10, 11, 13, 14, 17, 37, 40-43, 45, 49, 106-109, 111-114, 123, 125, 126, 130, 132, 135-137, 142, 143, 145, 146-149, 151, 152-157, 159, 162-164, 166, 167, 169, 171, 172, 174, 175, 177, 178, 182, 184, 188, 189, 193-196, 198, 203-215, 217-220, 222, 223, 226-239, 241-248, 251-254, 256, 259, 261, 263, 269-272, 279, 281, 284, 290, 292, 294-296, 302, 303, 306, 314, 318, 322, 323, 325, 346-348, 352, 353, 357, 359 и 360 в 50 и более раз высокую селективность.
Некоторые из соединений по Примерам были также протестированы в рамках тестов на связывание 1 и 2. Все протестированные соединения показали IC50 связывания (наномоль) в диапазоне 0,1-5000 наномоль с эстрогеновым рецептором β-подтипа. Например, соединения по Примерам 10, 11, 13, 40-43, 72, 76, 77, 79, 82, 90, 96, 97, 100, 102-109, 111-115, 118, 123-132, 134, 135, 137, 156-159, 163, 175, 184, 228, 281, 286 и 296 показали IC50 связывания (наномоль) в диапазоне 0,1-10. Предпочтительные соединения по настоящему изобретению - это такие соединения, которые показывают свою селективность при выборе эстрогенового рецептора β-подтипа, а не эстрогенового рецептора α-подтипа в тестах на связывание 1 и 2. Например, соединения по Примерам 10, 11, 13, 40-43, 72, 76, 77, 79, 82, 86, 90, 91, 93, 95-98, 100-103, 106-116, 123, 126, 128, 130-132, 134, 137, 150, 159, 163, 175, 177, 184, 281 и 286 продемонстрировали в 20 и более раз высокую селективность эстрогенового рецептора β-подтипа.
Изобретение относится к соединениям формулы (I)или их фармацевтически приемлемым солям. Технический результат: получены новые, которые могут быть использованы в качестве лигандов эстрогеновых рецепторов. 24 схемы, 360 пр., 6 н. и 15 з.п. ф-лы.
Антагонист casr