Гетероциклические соединения для возрастных и диабетических сосудистых осложнений - RU2291154C2

Описание

Область изобретения

Настоящее изобретение относится к новому классу пятичленных гетероциклических соединений и к их применению для лечения диабета и родственных заболеваний. Более конкретно, изобретение относится к соединениям данного ряда, к способам их получения, фармацевтическим композициям, содержащим данные соединения, и их применению для лечения сахарного диабета. Соединения данного ряда обладают разрушающей и ингибирующей AGE (конечные продукты повышенного гликозилирования) активностью, что существенно для лечения диабетических и возрастных сосудистых и нейрососудистых осложнений, включая заболевание почек, нервные заболевания, атеросклероз, ретинопатию, воспалительные заболевания, иммунологические нарушения, окислительный стресс и дерматологические и косметические показания.

Изобретение также относится к способу восстановления изменения цвета зубов, являющегося результатом неферментативного потемнения полости рта, посредством введения эффективного количества данных соединений для уничтожения ранее образованного структурирования в результате повышенного гликозилирования.

Данные соединения также обладают активностью удаления свободных радикалов и, следовательно, помимо их косметических применений, могут использоваться при лечении заболеваний, вызванных свободными радикалами.

Тройная функция данных соединений как поглотителя свободных радикалов, AGE разрушающего агента и AGE ингибитора может эффективно использоваться в косметических композициях, которые способны останавливать и направлять в обратную сторону процессы старения кожи в результате накопления конечных продуктов повышенного гликозилирования (AGE) белков кожи и светового повреждения за счет действия свободных радикалов. Изобретение дополнительно относится к композиции и способу удаления свободных радикалов из клеток тела.

Предпосылки создания изобретения

В 1912 году Maillard установил, что восстанавливающиеся сахара, такие как глюкоза и рибоза, реагируют с белками с образованием коричневых пигментов. Дополнительные исследования показали, что это необратимое неферментативное взаимодействие, которое происходит в ряде природных систем, включая продукты питания при хранении. Существует две фазы реакции Майлларда (Maillard), ранняя и развитая. Первоначально белки реагируют с глюкозой с образованием стабильных продуктов Амадори (Amadori), которые впоследствии перекрестно сшиваются с образованием конечных продуктов повышенного гликозилирования (AGE). В большинстве случаев образование AGE также сопровождается потемнением белков и ростом флуоресценции.

При диабете, когда уровень глюкозы в крови существенно выше нормального, реакцию глюкозы с несколькими белками, такими как гемоглобин, кристаллин хрусталика глаза и коллаген, вызывает образование AGE, которые, в свою очередь, являются ответственными за осложнения, связанные с диабетом, такие как нефропатия, микроангиопатия, эндотелиальная дисфункция и дисфункция других органов. Кроме того, активность ряда факторов роста, таких как основной фактор роста фибробластов, также ухудшается. Продукты AGE, в отличие от обычных белков тканей, обладают более низкой скоростью оборота и пополнения. Сообщалось, что продукты AGE действительно могут вызывать комплексную иммунологическую реакцию, включающую RAGE рецепторы (рецептор для конечных продуктов повышенного гликозилирования) и активацию нескольких не полностью определенных иммунологических процессов. Подтверждено документально, что при диабете с признаками микроангиопатии и макроангиопатии также проявляются симптомы окислительного стресса, механизм которого не выяснен.

In vitro образование AGE может быть исследовано лабораторно путем инкубирования восстанавливающих сахаров, таких как рибоза и глюкоза, с бычьим сывороточным альбумином. Образование AGE может обнаруживаться по увеличению флуоресценции или повышению реакционной способности к сшиванию с анти-AGE антителами. Оказывается, что увеличение флуоресценции предшествует образованию AGE-специфических антигенных эпитопов. Такое увеличение флуоресценции используется для контролирования повышенного образования AGE in vitro (Brownlee М. et al, Science 1986; 232: 1629-1632). В дополнение к возрастанию флуоресценции, одной из наиболее отличительных характеристик AGE образования in vitro, является образование антигенных эпитопов, которые являются специфическими к AGE и не являются специфическими к природным белкам. Следовательно, возможно сформировать антитела против конечных продуктов повышенного гликозилирования и использовать их для обнаружения образования AGE в других белках. Это послужило важным аналитическим инструментом при исследовании AGE.

Вследствие клинической важности образования AGE использовались многие подходы для диагностики, профилактики или возвращения в прежнее состояние образования AGE в теле. Образование AGE можно было бы ингибировать за счет взаимодействия с продуктом раннего гликозилирования, который возникает при первоначальной реакции целевого белка и глюкозы. Предполагается, что ингибирование происходит как взаимодействие между ингибитором и продуктом раннего гликозилирования, что, по-видимому, прерывает последующую реакцию гликозилированного белка с дополнительными белковыми веществами, приводящую к сшитому продукту последней стадии. Соединения, такие как аминогуанидин, ингибируют образование AGE, действуя по такому механизму.

Образование AGE на долгоживущих белках также связано со структурированием (поперечным сшиванием) данных белков. Было показано, что полученные из AGE структурированные белки разрушаются такими соединениями как бромид N-фенилтиазолия (PTB), который взаимодействует с ними и расщепляет ковалентные полученные из AGE структурированные белки (Vasan et al. Nature 1996; 382: 275-278; US 5853703, дата выдачи патента: Dec. 29,1998). Предполагается, что механизм снижения содержания AGE в тканях работает относительно быстро, в противоположность аминогуанидину, который действует медленно в силу самой природы механизма его действия.

Наибольшую важность в терапевтических применениях имеют соединения, которые являются AGE разрушающими агентами или AGE ингибиторами, как отмечено ниже:

Агенты, разрушающие AGE:

Соединения, которые могут расщеплять накопленный AGE, могут использоваться в качестве лекарственного средства при лечении диабетических осложнений и возрастных заболеваний, вызванных накоплением AGE.

Соединения, которые могут ингибировать накопление AGE посредством разрушения AGE, могут использоваться в качестве лекарственного средства для приостановления ухудшения при заболеваниях, таких как диабет и возрастные осложнения, вызванные накоплением AGE.

Ингибиторы AGE:

Соединения, которые могут ингибировать накопление AGE путем ингибирования образования AGE, могут использоваться в качестве лекарственного средства для заболеваний, таких как диабет и возрастные осложнения, вызванные накоплением AGE.

Неконтролируемое образование AGE in vivo, такое как при связанных с диабетом заболеваниях, может привести к серьезным физиологическим ухудшениям. Например, при диабетической невропатии и ретинопатии повреждаются функциональная целостность барьера стенки капилляра и внутренний кровяной барьер сетчатки, соответственно, что подтверждается аномальным присоединением эндотелия к базисной мембране. Этот дефект является прямым следствием поперечного сшивания структурных белков за счет гликозилирования. Этиологией диабетических нейрососудистых заболеваний, а также иммунологических нарушений является образование AGE. В настоящее время предполагается, что ингибирование AGE образования или разрушение существующих AGE будет выигрышным при множестве заболеваний, включая нефропатию, невропатию, атеросклероз и дерматологические заболевания.

Исследования продемонстрировали положительное действие агентов, которые разрушают AGE, например, при изучении сердечно-сосудистых осложнений, связанных с возрастом, болезненное состояние, которое ускоряется в экспериментальных диабетических условиях (Wolffenbuttel et al., 1998).

В другом фармакологическом подходе для контролирования уровней AGE в тканях, особенно в тех тканях, в которых AGE уже накоплено до уровня, который является ответственным за субклиническую или клиническую патологию, оказалось успешным введение агента, который уничтожает или разрушает AGE. В патентах США 5656261 и 5853703 описаны агенты и способы, которые уничтожают (или расщепляют, или разрушают) образование AGE in vitro и in vivo.

Также достигнуто несколько успешных терапевтических подходов, основанных на блокировании накопления AGE in vivo. Один из подходов, проиллюстрированный в патенте США 4758583, касается ингибирования образования AGE из его предшественников путем введения таких агентов как аминогуанидин и родственные соединения.

Как было показано в процитированных выше ссылках, соединения, которые блокируют образование AGE или разрушают AGE, логично коррелируют с лечением AGE-родственных заболеваний, таких как диабетическая нефропатия, невропатия, ретинопатия и атеросклероз, дерматологические заболевания, неферментативное потемнение полости рта, эндотелиальная дисфункция или дисфункция других органов и ухудшение роста.

В различных литературных источниках, обсуждаемых ниже, также была описана корреляция между началом AGE и различными заболеваниями.

Корреляция между образованием конечных продуктов повышенного гликозилирования (AGE) и нефропатией хорошо подкреплена несколькими исследовательскими публикациями. Beisswenger (1995) показал, что концентрация AGE у людей, страдающих диабетом, коррелирует с ранним проявлением почечных заболеваний. Makita et al. (1991) показал, что возрастание содержания AGE пептидов протекает параллельно с тяжестью почечной дисфункции. Вышеуказанные ссылки четко показывают, что AGE является принципиальной причиной диабетической нефропатии. Yamauchi (1997) показал, что предотвращение образования AGE с помощью аминогуанидина ингибирует развитие диабетической нефропатии. Показано также, что введение аминогуанидина улучшает утолщение базисной мембраны клубочков у диабетических крыс (Ellis, 1991). Показано также, что аминогуанидин ослабляет возрастание альбуминурии у экспериментальных диабетических крыс (Soulis-Liparota, 1991).

Также показано, что AGE индуцирует экспрессию эндотелиального фактора роста в маллерных клетках сетчатки (Hirata, 1997, Murata, 1997) и, следовательно, может промотировать внутриглазную неоваскуляризацию (образование новых кровеносных сосудов) при диабетической ретинопатии. На крысиной модели показано, что лечение аминогуанидином задерживает развитие диабетической ретинопатии (Hammes, 1991, Hammes, 1994, Roufail, 1998).

Также показано, что лечение аминогуанидином улучшает скоростью нервной проводимости у диабетических крыс (Kihara, 1991, Miyauchi, 1996 and Yagihashi, 1992).

Bucala (1996) провел интенсивный обзор различных аспектов развития атеросклероза и установил, что накопление AGE может инициировать ряд клеточных событий, таких как клеточный окислительный стресс, экспрессия адгезионных молекул, эндотелиальная трансмиграция моноцитов и т.д., и такие события могут вести к атеросклерозу. Kirstein (1990) продемонстрировал, что (i) in vitro и in vivo-образованные AGE белки являются хемотаксичными для моноцитов крови человека, (ii) субэндотелиальные AGE могут индуцировать миграцию моноцита через неповрежденный эндотелий, и (iii) взаимодействие моноцита с AGE-содержащим матриксом приводит к индукции тромбоцитарного фактора роста.

Таким образом, можно сделать вывод, что AGE при взаимодействии с эндотелиальными клетками через рецептор RAGE активирует ядерный фактор Kappa B и индуцирует различные гены, экспрессирующие адгезионные молекулы. Взаимодействия AGE-эндотелий также увеличивают окислительный стресс, инициируют миграцию моноцитов, блокируют эндотелиальный оксид азота и стимулируют ангиогенез. Все эти условия приводят к такому состоянию как атеросклероз.

Другие дисфункции, зависящие от понижения нагрузки AGE в тканях, включают гипертензию, рестеноз, аномальное препятствие ткани при перитонеальном диализе, эректильную дисфункцию и болезнь Альцгеймера. Аналогично, с одной стороны, неферментативное сшивание структурированных белков, таких как коллаген, приводит к повышенной жесткости артерий и снижает податливость и растяжимость артерий. Действительно, показано, что лечение ALT-711-агентом, разрушающим AGE, устраняет индуцированную диабетом жесткость артерий и улучшает артериальную податливость (Wolffenbutel, 1998). Aronson et al. (1996) опубликовали обзор о роли AGE в промотировании увеличения численности воспалительных клеток и пролиферации гладких мышц и предположили, что это является вероятной причиной большего рестеноза, аномального препятствия ткани при перитонеальном диализе у диабетических пациентов.

Seftel (1997) показал значительное возрастание пентозидина в ткани мужского полового члена у пациентов-диабетиков по сравнению с пациентами, не страдающими диабетом. Он обсуждает механизм AGE опосредованной эректильной дисфункции путем повышенного регулирования стимулируемого оксида азота и пониженного регулирования эндотелиального оксида азота в ткани мужского полового члена.

Vitek et al. (1994) сообщили, что бета-амилоидные пептиды (βAP) медленно группируются при нормальных физиологических условиях, тогда как AGE модифицированный (βAP) проявляет намного более быструю агрегацию. Число тромбоцитов увеличивается в связи с дегенерацией нейронов, и при болезни Альцгеймера угасает познание. Агрегированные, но не мономерные βAP являются активно нейротоксичными. Поэтому вмешательство в процесс, посредством которого образование AGE увеличивает агрегацию βAP, или ингибирование AGE образования, или терапия с разрушением AGE предоставляет новые терапевтические возможности для уменьшения патофизиологических изменений, связанных с болезнью Альцгеймера.

Поэтому AGE ингибиторы/разрушающие агенты были бы благоприятными для снижения агрегации (βAP), обеспечивая профилактику/лечение болезни Альцгеймера.

Li et al. (1996) подтвердили внутренние взаимоотношения между двумя ключевыми проявлениями физиологического старения на крысиной модели сердечно-сосудистого и почечного угасания, и предположили, что непосредственно связанные с возрастом биохимические процессы, оканчивающиеся повышенным гликозилированием, вносят вклад в прогрессирующее повреждение тканей и несостоятельность органов. В их исследовании было установлено, что аминогуанидин (ингибитор AGE) в значительной степени предотвращает повреждение тканей в результате ингибирования AGE образования. Было найдено, что более низкая нагрузка AGE в тканях у крыс в результате введения аминогуанидина сохраняет в целом более удовлетворительный уровень сердечно-сосудистой и почечной функции, что подтверждено более здоровым общим видом старых крыс, подвергавшихся лечению аминогуанидином, по сравнению с не получавшими лечения крысами из подобранной по возрасту и весу контрольной группы. Следовательно, ингибиторы AGE могли бы найти применение для профилактики возрастных заболеваний.

Реакция неферментативного потемнения (появление коричневой окраски), которая происходит в полости рта, приводит к изменению цвета зубов. Сообщалось, что агенты против образования налета, такие как хлоргексидин, ускоряют реакцию неферментативного потемнения и последующее окрашивание зубов (Nordbo, J. Dent. Res., 58, p. 1429 (1979)). Nordbo предположил, что хлоргексидин приводит к окрашиванию зубов двумя путями: во-первых, за счет увеличения образования налета, который содержит больше аминогрупп, и, во-вторых, за счет катализа реакции Майлларда, приводящей к окрашенным продуктам.

Способность ингибиторов неферментативной реакции потемнения предотвращать изменение цвета белка на поверхности, такое, которое происходит на поверхности зубов, было продемонстрировано в экспериментах in vitro в патентах США 5137916 и 5272176.

Было заявлено, что соединения, которые обладают способностью ингибировать или устранять AGE, могут использоваться для ингибирования или устранения изменения цвета зубов в результате неферментативного потемнения полости рта (Патент США 5272176; Патент США 5853703).

Все эти факты указывают на общий основной механизм для патофизиологических состояний, связанных с диабетом, и на то, что он представляет собой образование конечных продуктов повышенного гликозилирования. Поскольку общая AGE нагрузка ткани увеличивается, тяжесть патологических симптомов также возрастает. С другой стороны, если количество AGE контролируется с помощью таких соединений как аминогуанидин, прогрессирование заболевания также замедляется. В настоящем изобретении описано ингибирование конечных продуктов повышенного гликозилирования. Почечное заболевание представляет собой ведущую причину смерти и источник неприятностей при диабете. Хронический диализ и трансплантация почки являются абсолютно обычными для пациентов с почечной недостаточностью в результате диабета. Перитонеальный диализ (ПД) работает на тех же принципах, что и гемодиализ, но кровь очищают, когда она находится внутри тела, а не посредством аппарата. Основное различие в препаратах для перитонеального диализа по сравнению с гемодиализом заключается в количестве более высоких концентраций глюкозы, используемой в качестве осмотического агента (1,5, 2,5 или 4,25 г/дл). Высокое образование глюкозы у людей связано с прогрессирующим образованием конечных продуктов повышенного гликозилирования (AGE), которые повреждают функции органа. AGE вносит вклад в развитие аномальной фиброзной ткани и снижает способность брюшины фильтровать жидкости, приводя к несостоятельности ПД процедуры.

Соединения, которые могут изменять содержание AGE в ткани, могли бы использоваться для предотвращения данного процесса и других медицинских осложнений, возникающих из-за образования AGE. Применение агента, разрушающего AGE, или ингибитора в жидкости для диализа могло бы ингибировать образование аномальной фиброзной ткани и облегчить, таким образом, процедуру диализа. Соответственно, соединения изобретения могут использоваться для получения жидкости для диализа для перитонеального диализа пациентов диабетиков.

Ожидается, что уменьшение нагрузки AGE в ткани устранит данные болезненные состояния, принимая во внимание, что предотвращение накопления до критической массы могло бы предотвратить возникновение болезненного состояния. Данные болезненные состояния перечислены ниже:

1) сосудистые и нейрососудистые осложнения,

2) нефрологическое заболевание,

3) неврологическое заболевание,

4) атеросклероз,

5) заболевание сетчатки,

6) дерматологическое заболевание,

7) неферментативное потемнение полости рта,

8) эндотелиальная дисфункция или дисфункция другого органа,

9) ухудшение роста,

10) воспалительное заболевание,

11) иммунологическое нарушение,

12) окислительный стресс,

13) возрастные и диабетические осложнения,

14) болезнь Альцгеймера,

15) рестеноз, аномальное препятствие ткани при перитонеальном диализе,

16) аномальная проницаемость ткани при перитонеальном диализе, и

17) эректильная дисфункция.

Соединения, проявляющие AGE разрушающую/ингибирующую активность, также можно использовать в косметических целях.

Здоровье, упругость и молодость кожи зависят, помимо прочего, от некоторых ключевых классов биологических молекул. Ключевыми молекулами кожи являются коллаген и эластин. Коллаген представляет собой белок, образующий структурную сетку, которая несет другие структуры кожи. Он придает коже ее прочность и долговечность. Как и любой другой белок, коллаген состоит из аминокислот. Однако он необычно богат несколькими специфическими аминокислотами: пролином, гидроксипролином, лизином и глицином. Эластин также представляет собой белок, более гибкий, чем коллаген, и помогает поддерживать упругость и эластичность кожи. Он содержит две специфические аминокислоты: десмозин и изодесмозин. Когда как эластин, так и коллаген имеются в недостаточном количестве и повреждены, кожа теряет свою форму после растягивания или сгибания, приводя к морщинам и легкому провисанию, что происходит во время процесса старения.

Наиболее современные теории старения сфокусированы вокруг идеи, что возрастные повреждения в первую очередь происходят вследствие структурных и функциональных модификаций клеточных компонентов. В настоящее время популярными гипотезами являются такие теории старения как свободнорадикальная, гликозилирования или теория Майлларда. В первой гипотезе предполагается, что возрастные эффекты происходят за счет реакций свободных радикалов, которые повреждают компоненты клеток. Термин «свободный радикал» относится к нестабильной молекуле, которая имеет неспаренный или лишний электрон на внешней орбите, который особенным образом взаимодействует с другими молекулами, вызывая повреждение жиров, ДНК и белка. Последняя гипотеза предполагает, что первичной причиной старения является клеточное повреждение, возникающее из-за модификации макромолекул, вызываемой неферментативным гликозилированием и реакциями Майлларда с образованием конечных продуктов повышенного гликозилирования (AGE). Неферментативное гликозирование представляет собой химическое присоединение сахаров к белку, которое, в конечном счете, вызывает сшивание белков, являющееся необратимым. Хотя данные гипотезы были сформулированы независимо, это позволяет предположить, что свободные радикалы, гилкозилирование и реакции Майлларда могут в действительности представлять собой частично воздействующие друг на друга элементы единственного, более сложного биохимического пути, и что возрастное ухудшение качества происходит в результате суммы повреждений, индуцируемых всеми тремя гипотетическими путями и за счет их взаимодействия.

Кожа, высокодифференцированный и сложноструктурированный орган, особенно подвержена повреждению свободными радикалами при действии ультрафиолетового излучения, приводящего к повышенному накоплению AGE на коже, а также к повышенному продуцированию синглетного кислорода и пероксидных радикалов, которые повреждают важные молекулы кожи, такие как коллаген и эластин. При таких ситуациях антиоксидантные условия удаления свободных радикалов могли бы, безусловно, дать возможность коже поддерживать ее нормальную упругость и целостность против повреждений.

Таким образом, настоящее изобретение относится к косметическому применению активной молекулы, способной уничтожать AGE поперечные сшивания и создавать антиоксидантную окружающую среду в тканях с помощью AGE разрушающего и гасящего свободные радикалы действия, вследствие этого значительно замедляя проявления старения.

Кожа является наибольшим органом тела, составляя примерно 15% веса тела. В терминах химического состава кожа состоит примерно на 70% из воды, 25% белка и 2% жиров. Остаток включает следы минералов, нуклеиновых кислот, глюкозаминогликанов, протеогликанов и многочисленных других химических соединений.

Кожа состоит из 3 основных слоев: эпидермиса, дермиса и подкожной ткани. Эпидермис представляет собой первый барьер между нами и внешним миром. Этот слой состоит из клеток 3 типов: кератиноцитов, меланоцитов и клеток Лангханса. Дермис представляет собой средний слой кожи, наиболее толстый из слоев кожи, и включает плотно прилегающую прочную сеть коллагена (тип-I и III) и волокна эластина, которые являются решающе важными белками кожи. Дермис также состоит из фибробластов, капилляров, лимфатических узлов, сальных желез и волосяных фолликулов. Подкожная ткань представляет собой самый внутренний слой кожи, включающий множество адипоцитов и действующий как амортизатор и теплоизоляционный материал, защищающий низлежащие ткани от холода и механических травм.

Старение представляет собой биологическое явление, которое выражается в морщинах и провисании кожи. По мере старения человека клетки кожи делятся более медленно, и внутренняя кожа, или дермис, начинает утоньшаться. Жировые клетки, лежащие ниже дермиса, начинают атрофироваться, и нижележащая сеть эластиновых и коллагеновых волокон, которая обеспечивает поддержку для поверхностных слоев, утрачивается и распутывается. Кожа теряет свою эластичность; при надавливании она больше не пружинит, возвращаясь к своему первоначальному положению, но вместо этого провисает и образует глубокие морщины. Способность кожи сохранять влагу снижается; потовые железы и жиросекретирующие железы атрофируются, лишая кожу ее защитных эмульсий вода - жир. Как следствие, кожа становится сухой и слоистой. Кроме того, способность кожи восстанавливаться уменьшается с возрастом, поэтому раны заживают медленнее. Линии около бровей (между бровями) и гусиные лапки (линии, которые расходятся от уголков глаз) начинают развиваться благодаря постоянным небольшим мышечным сокращениям. Обычное выражение лица также формирует характеристические линии, и сила тяжести усугубляет ситуацию, внося свой вклад в образование второго подбородка и полуопущенных век. Поскольку кожа представляет собой наиболее видимый орган при старении, существует повышенный интерес к физиологии и удалению морщин, эластоза и старческого ксероза. Старение кожи представляет собой сложное явление, определяемое факторами генетически определенного внутреннего старения и факторами внешнего старения (Boni R., Burg G.: Schweiz Med Wochenschr (2000) Sept 9; 130 (36): 1272-8).

Главным образом, существует два биологически независимых процесса старения, которые происходят одновременно и отвечают за основные изменения, проявляющиеся на коже с течение времени.

1. Внешнее старение или фотостарение/внешние факторы и

2. Свойственное от природы старение или внутреннее старение/внутренние факторы.

Внешнее старение или фотостарение, которое происходит в том случае, когда кожа подвергается действию таких факторов как ультрафиолетовое облучение, химические загрязнения, аллергены, механическое повреждение и т.д. В первую очередь внешнее старение вызывается действием ультрафиолетового излучения солнца.

Внутреннее старение воздействует на кожу, вызывая медленную необратимую дегенерацию ткани. Факторы, вызывающие внутреннее старение, являются генными, нервными (стресс), иммунными, результатом гормональных нарушений и другие. Внутреннее старение можно наблюдать по всей поверхности тела, включая кожу, защищенную от ультрафиолетового излучения солнца. Явление гликозилирования, как обсуждалось выше, играет серьезную роль во внутреннем старении. Белки дермиса, эластин и коллаген, взаимодействуют с сахарами тела, особенно с глюкозой, приводя к связыванию коллагеновых волокон и синтезу свободных радикалов. Это модифицирует структуру кожи, заставляя ее терять свою эластичность, и она становится более жесткой. Таким образом, наиболее заметные изменения на коже лица возникают за счет комбинации процессов внутреннего и внешнего старения.

В основном два фактора - свободные радикалы и образование AGE, являются заметными ускорителями образования морщин на коже. Теория Майлларда старения кожи относится к 1912 году, когда Майллард обнаружил, что восстанавливающие сахара, такие как глюкоза и рибоза, взаимодействуют с белками с образованием коричневых пигментов. Реакция Майлларда представляет собой серию сложных взаимодействий, которые вызывают поперечное сшивание белка в результате взаимодействия восстанавливающего сахара с аминогруппами белков с образованием стабильных продуктов Амадори (Amadori), которые впоследствии сшиваются с образованием конечных продуктов повышенного гликозилирования (AGE). Другим свойством, имеющим решающую биологическую значимость, является наблюдение, что продукты Амадори продолжают сшиваться и полимеризоваться даже в отсутствие свободной глюкозы. Поперечное сшивание белка является важным, поскольку оно ответственно за образование глубоких морщин дермиса. Образование AGE сшивания также является естественной частью старения, и все процессы, в которых происходит старение белка, наносят серьезный вред. Во время процесса старения восстанавливающий сахар химически присоединяется к поддерживающим кожу белкам, таким как эластин и коллаген, заставляя из постепенно становиться жесткими и замедляя их обновление. Такое неспецифическое и неферментативное присоединение сахара к коллагену и эластину приводит к образованию AGE, которые продолжают сшиваться и полимеризоваться даже в отсутствие свободной глюкозы. Исследование роли AGE в старении коллагена с использованием сканирующего силового микроскопа выявило, что в присутствии повышенной концентрации AGE наблюдаются значительные структурные изменения в фибриллах коллагена старых крыс (Odetti P., Aragno I., et al. Gerontology (1998); 44 (4); 187-91). В результате такого процесса старения коллаген теряет свою эластичность, и на коже развиваются морщины.

Ковалентное связывание глюкозы с аминогруппой самого белка является недостаточным для того, чтобы быть ответственным за структурные изменения, наблюдаемые в коллагене. Кислородные радикалы, образованные во время окисления глюкозы, и окисление гликозилированного белка могут быть непосредственно вовлечены в образование AGE и сшивание коллагена. Исследования in vitro продемонстрировали, что присутствие кислорода является необходимым для повышенного гликозилирования и сшивания коллагена. Было подтверждено, что антиокислительные условия и поглотители свободных радикалов ингибируют или замедляют образование AGE и сшивание коллагена. Также известно, что поглотители свободных радикалов являются важнейшими при защите эпидермиса от повреждения свободными радикалами, генерированными как в окружающей среде, так и эндогенными факторами (Pugliese P.T., Dermatol. Nurs (1998) Dec: 10 (6): 401-16; quiz 41718).

Кожа, которая имеет высоко дифференцированную и несомненно сложную организационную структуру, является особенно подверженной повреждению свободными радикалами, поскольку она контактирует с кислородом и другими стимулами окружающей среды (Calabrese V., Scapagnini G. et. al., Drugs Exp.Clin. Res. (1999); 25 (6): 281-7). Исследования подтвердили, что ультрафиолетовое излучение увеличивает образование AGE на коллагене, эластине и других белках кожи. При этом образуется порочный цикл за счет возрастания накопления AGE на коже, а также увеличения продуцирования синглетного кислорода и пероксидных радикалов, которые повреждают белок кожи.

В последние годы был достигнут значительный прогресс в прояснении механизмов, лежащих в основе фотостарения. Недавно были выявлены индуцирование матриксных металлопротеиназ в результате активации активаторного белка (AP)-1 и ядерного фактора (NF)-kB, а также мутации митохондриальной ДНК (Berneburg М., et. al. Photodermatol Photoimmunol. Photomed (2000) Dec: 16 (6): 238-44). На ранней стадии гликозилирования конденсация восстанавливающих сахаров, таких как глюкоза, с аминогруппами белков генерирует под действием ультрафиолета фотогенерированные свободные радикалы синглетного кислорода. Сообщается, что AGE представляет собой важный фактор, промотирующий фотостарение в коже посредством генерирования активных разновидностей кислорода, включая О₂^-, Н₂О₂ и -ОН (Masaki H. et. al., Biochem Biophys. Res. Commun (1997) Jun 18: 235). На основе in vitro исследования фибробластов предлагается возможный механизм, в котором AGE под действием ультрафиолетового излучения А генерирует активные разновидности кислорода, включая О₂^-, Н₂О₂ и -ОН, при этом -ОН-частица играет опасную роль в промотировании повреждения клетки (Hitoshi Masaki et. al. Biochemica et Biophysica Acta 1428 (1999), 45-56). Такие радикалы прерывают природный баланс кожи, стимулируя клетки кожи синтезировать металлопротеиназы. Металлопротеиназные ферменты разрушают коллаген, не синтезируя анти-металлопротеиназы, которые сдерживают разрушение белка кожи, что является нормальной биологической ответной реакцией. Несбалансированное продуцирование металопротеиназы относительно анти-металлопротеиназы, индуцированное синглетными кислородными свободными радикалами, ведет к разрушению коллагена и эластина кожи. За этим следует неполное заживление ран поврежденного коллагенового матрикса и накопление упругодеформируемого материала, и, как следствие, провисание кожи и образование морщин.

Благодаря воздействию на AGE ультрафиолетового А излучения генерирование пероксидного аниона становится повышенным. Это осуществляется через клеточную цепь переноса электрона, в которой УФ А-AGE энергия увеличивает прохождение электронов на кислород в основном состоянии. Это ведет к повышенному образованию пероксидного аниона во время синтеза аденозинтрифосфата (АТФ). Фермент пероксид-дисмутаза превращает пероксидный анион в перекись водорода и кислород. Наконец, каталитическое действие железа и меди превращает перекись водорода в токсичные гидроксильные радикалы, вызывая повреждение коллагена и эластина кожи с последующим дефектным заживлением ран и развитием солнечных шрамов, которые вызывают фотостарение кожи.

Полки косметического рынка заполнены продуктами лечения внешнего старения, но все еще сохраняется необходимость в продуктах, целью которых является лечение внутреннего старения путем AGE ингибирования в поддерживающих кожу белках.

Способность ингибировать образование конечных продуктов повышенного гликозилирования (в поддерживающих кожу белках, таких как коллаген) наряду с AGE разрушающей активностью и активностью удаления свободных радикалов обеспечивает значимые результаты при лечении старения кожи и морщин и т.д.

Таким образом, используя молекулы, которые могут изменить присутствие AGE, можно предотвратить появление признаков старения кожи и образования морщин и т.д., и их можно использовать для косметических применений.

Опыт показывает, что старение кожи и образование морщин происходят несмотря на хороший уход за кожей. Следовательно, существует необходимость в разработке агента для профилактики или лечения старения кожи, вызванного образованием AGE. Соединения настоящего изобретения представляют собой не-пептиды, способные модифицировать AGE структурирование, происходящее в коллагене и эластине. Соединения настоящего изобретения могут быть введены в состав косметического препарата вместе с другими агентами.

Для предотвращения или замедления образования морщин на коже является важным ингибировать образование AGE, уничтожить уже образованный AGE, а также снизить окислительный стресс с помощью антиоксиданта или поглотителя свободных радикалов. По существу, молекула, которая ингибирует AGE, разрушает и замедляет образование AGE и предотвращает разрушение коллагена, была бы идеальным кандидатом для косметических целей. Молекулы по настоящему изобретению проявляют свойства ингибитора AGE и эффективного разрушителя AGE, а также поглотителя свободных радикалов, что делает их наиболее подходящими для косметических применений.

Свободные радикалы представляют собой атомы или молекулы, которые имеют в атомной структуре один или несколько неспаренных электронов и являются высоко реакционноспособными. Свободные радикалы - реакционноспособные разновидности кислорода (ROS), продуцируются непрерывно в системе млекопитающего как следствие нормальных процессов метаболизма. Экзогенные источники ROS включают физические упражнения, загрязнение (особенно сигаретным дымом и выхлопами автомобилей), алкоголь, солнечный свет и лекарственные средства (такие как анестетики). Хотя свободные радикалы играют важную роль в нормальных физиологических механизмах, избыточное продуцирование ROS приводит к окислительному стрессу - термин, обычно используемый для обозначения результата окислительного повреждения биологически важных молекул, таких как белки, жиры и нуклеиновые кислоты. Давно известно, что белки восприимчивы к окислению под действием ROS. Особенно уязвимы ароматические аминокислоты, такие как цистеин, и дисульфидные связи. Все биологические вещества содержат множество полиненасыщенных жирных кислот, которые расположены главным образом в мембранных липидах. Они высокоуязвимы к повреждению под действием ROS.

Группа соединений, известных как антиоксиданты (также упоминаемые как «поглотители свободных радикалов»), является основной защитой от окислительного стресса. Такие соединения функционируют как защита мембраны и цитозольных компонентов от повреждения ROS. Важнейшие антиоксиданты, которые предотвращают образование новых разновидностей радикалов, включают ферментные системы, такие как супероксид дисмутаза (SOD) и глутатион пероксидаза (GSH Px). Второстепенные антиоксиданты улавливают разновидности радикалов, предотвращая таким образом цепные реакции, и представляют собой пищевые добавки, такие как витамин Е, витамин С, таурин и В-каротин. Конечная линия антиоксидантной защиты обеспечивается системами восстановления, такими как фермент метионин сульфоксид редуктаза, который генерирует метиониновые остатки в окисленных белках и восстанавливает их функции.

Предполагается, что эндогенное окислительное повреждение клеточных компонентов, в первую очередь белков, липидов и ДНК, вносит вклад в патогенез многих хронических заболеваний. В настоящее время хорошо подтверждена связь между нарушенным антиоксидантным статусом, индексами окислительного повреждения и клиническими болезненными состояниями, такими как сахарный диабет, астма, хроническая почечная недостаточность, гепатит, колит, атопический дерматит, артрит, и различными дегенеративными нарушениями. Имеется существенно зависящее от обстоятельств подтверждение, связывающее пониженный антиоксидантный статус, включая ферментативные и неферментативные поглотители, с повышенным окислительным повреждением и тяжестью заболевания.

Существует необходимость в молекулах, обладающих способностью разрушать/ингибировать образование структурированных белков в дополнение к наличию антиоксидантной активности, так что, помимо их применения при ряде заболеваний, в патогенезе которых окислительный стресс играет основополагающую роль, они могут оказаться эффективными для косметических применений, которые отмечены ниже:

a) разглаживание и предотвращение образования морщин,

b) разглаживание и предотвращение образования мимических морщин,

c) промотирование роста эпидермиса,

d) фотозащита кожи,

e) восстановление и профилактика изменения цвета кожи,

f) удаление и профилактика образования возрастных пятен,

g) кондиционирование и профилактика сухих участков кожи,

h) удаление и профилактика следов подтяжек,

i) удаление и профилактика дефектов кожи,

j) уход за кожей и поддержание ее здорового состояния,

k) восстановление и профилактика старческого ксероза,

l) уход за кожей и предотвращение солнечных ожогов,

m) профилактика и восстановление потери коллагена,

n) улучшение текстуры кожи,

o) улучшение тонуса кожи,

p) увеличение толщины кожи,

q) уменьшение размера пор,

r) восстановление блеска кожи,

s) минимизация признаков усталости,

t) уменьшение углевой сыпи,

w) лечение телеангиэктазии и

v) улучшение эстетического внешнего вида волос и ногтей.

Фармацевтическое применение свойства поглощения свободных радикалов (антиоксидантного свойства) молекул

Помимо использования соединений для косметических применений на основании их AGE-разрушающей/AGE-ингибирующей и удаляющей свободные радикалы активности последний вид активности таких соединений можно использовать в стратегии, направленной на борьбу с окислительным стрессом для эффективного регулирования обсуждающихся далее заболеваний.

Нейродегенеративные заболевания, такие как болезнь Альцгеймера (A. D.), болезнь Паркинсона (P. D.), болезнь Хантингтона (H. D.), заболевание двигательного нейрона (М. N. D.), заболевание приона

По мере старения людей у них снижаются уровни антиоксидантов, и такие низкие уровни непосредственно связаны со многими заболеваниями, ассоциирующимися со старением, такими как болезнь Альцгеймера и болезнь Паркинсона. Одна из ведущих гипотез заключается в том, что окислительный стресс, индуцируемый родственными кислороду особыми разновидностями радикалов (ROS), повреждает существенные компоненты нейронов, приводя в конечном счете к гибели нейрона. Окислительный стресс включен во множество различных событий, ведущих к повреждению нейронов, включая увеличение жесткости мембраны, расщепление цепи ДНК и ухудшение поглощения глюкозы. Хорошо идентифицировано несколько потенциальных источников окислительного стресса в различных нейродегенеративных нарушениях [Munch G., et al., 1998].

При болезни Альцгеймера за нарушение окислительно-восстановительного баланса ответственными являются митохондриальная дисфункция, опосредованные бета-амилоидами процессы, накопление переходных металлов и генетические факторы [Smith M.A., et al. 2000].

Известно, что точечные мутации в супероксиддисмутазных ферментах являются наследственной формой заболевания двигательного нейрона.

Нарушения энергетического метаболизма нейронов вовлечены в механизм болезни Хантингтона [Browne S.E., et al., 1999].

Диабет и диабетические сосудистые осложнения (DVCs)

Случай окислительного стресса при диабете пока еще понят не полностью, но предполагается, что он возникает из-за митохондриальной дисфункции, непосредственного ингибирования фермента путем гипергликемии, автооксиления глюкозы и активации никотинамид-аденин-динуклеотидфосфат(NADPH)-оксидазы. Окислительный стресс при диабете также возрастает из-за ослабленной защиты за счет снижения эндогенных антиоксидантов. Окислительный стресс проявляется в виде повышенных концентраций продуктов перокисления жиров, недолговечности эритроцитов и уменьшения антиоксидантных ферментных систем (CAT, GSH Px, SOD). Недавние исследования также показали положительную корреляцию между концентрацией глюкозы в крови и индуцированным окислителем повреждением ДНК лимфоцитов [E. J. Harper. The 24th Annual WALTHAM®/OSU SYMPOSIUM].

ROS генерируются во время окисления глюкозы и образования конечных продуктов повышенного гликозилирования (AGE). Накоплены данные, указывающие, что генерирование ROS играет важную роль при развитии (DVCs). Многие биохимические пути, связанные с гипергликемией, такие как повышенное гликозилирование, автоокисление глюкозы и полиольный путь, могут повышать продуцирование свободных радикалов.

Гипергликемия у диабетических пациентов приводит к избыточному автоокислению глюкозы и следовательно к восстановлению молекулярного кислорода и образованию окисленных промежуточных соединений, таких как пероксид-ионы (О₂^-), гидроксильные радикалы (^•OH) и перекись водорода (Н₂О₂). Свободные радикалы ускоряют образование конечных продуктов повышенного гликозилирования (AGE), поскольку во время гликозилирования происходят фрагментационные и конформационные изменения, и показано, что окисление глюкозы зависит от свободных радикалов. В свою очередь, AGE поставляет еще больше свободных радикалов; данный процесс заканчивается как окислительное гликозилирование или гликоокисление. Такие свободные радикалы вмешиваются в сосудистую релаксацию посредством дезактивирования или гашения оксида азота (NO) и также орицательно воздействуют на эндотелиальную функцию. Также предложено подтверждение того, что реакция Майлларда (Maillard) действует как усилитель окислительного повреждения при старении и диабете [D. Guigliano et al., 1996].

Кишечные заболевания

Окислительный стресс представляет собой важный случай повреждения тканей, который происходит при воспалении и ишемии. Кишечная ишемия, лучевой энтерит, воспалительное заболевание кишечника и промотирование рака желудка и прямой и ободочной кишки представляют собой некоторые желудочно-кишечные болезненные состояния, в патогенез которых вовлечен окислительный стресс.

Заболевания печени

Алкогольное заболевание печени. Этанол индуцирует увеличение перокисление жиров либо посредством усиления ROS или снижения уровня эндогенных антиоксидантов. Этанол также индуцирует множество ферментов цитохром P450 в микросомах и ксантиноксидазы в цитозоле. Роль данных ферментов в генерации окислительного стресса хорошо установлена в различных исследованиях [Ishii H., et al., 1997].

Хронический гепатит С

Повышенный окислительный стресс инициирует фиброгенез в печени пациентов с хроническим гепатитом С. Появляются доказательства, подтверждающие путь окислительного стресса, ведущий к активному фиброгенезу при хроническом гепатите С. Такой фиброгенный каскад, характерный для тяжелого гепатита С (например, окислительный стресс, индуцирование c-myb, активация звездчатых нейронов и экспрессия коллагенового гена), стимулируется ROS.

Рак

Окислительное повреждение ДНК является результатом взаимодействия ДНК с ROS, в частности с гидроксильными радикалами. Гидроксильные радикалы продуцируют множество модификаций ДНК. Окислительная атака ОН радикала по диоксирибозному фрагменту приводит к высвобождению свободных оснований из ДНК, генерируя расщепление цепей с различными модификациями сахаров и простыми неосновными (АР) сайтами.

ROS также взаимодействуют и модифицируют клеточный белок, липиды и ДНК, что приводит к изменению функций целевых клеток. Накопление окислительного повреждения вовлекается как в острое, так и в хроническое повреждение клетки, включая возможное участие в образовании рака. Острое окислительное повреждение может привести к смерти избранной клетки и компенсаторному возрастанию пролиферации клеток. Такой стимул может привести к образованию вновь инициированных предопухолевых клеток и/или усилить селективную экспансию клона латентных инициированных предопухолевых клеток. Аналогично, сублетальное острое окислительное повреждение может продуцировать неустраненное повреждение ДНК и приводить к образованию новых мутаций и, потенциально, к вновь инициированным клеткам. Следовательно, ROS могут оказывать множественное действие на инициирование стадии карциногенеза путем опосредования активации карциногена, вызывая повреждение ДНК и мешая восстановлению повреждения ДНК.

Интенсивно исследуется польза различных антиоксидантов для профилактики и лечения следующих видов рака.

1. Рак легких.

2. Рак ободочной и прямой кишки.

3. Рак шейки матки.

4. Рак молочной железы.

5. Злокачественная меланома.

Окислительный стресс при заболеваниях сердца

Предполагается, что высокие уровни питательных веществ-антиоксидантов на протяжении жизни являются защитой от развития заболеваний сердца. Показано, что высокие дозы антиоксидантов в течение месяца после острого сердечного приступа существенно снижают число смертей, а также степень повреждения сердца в несмертельных случаях.

В настоящее время полагают, что возрастание окислительного стресса вовлечено в патофизиологию эндотелиальной дисфункции, которая сопровождает ряд сердечно-сосудистых факторов риска, включая гиперхолистеринемию, гипертензию и курение сигарет. Она также играет основную роль в развитии клинических болезненных состояний, таких как атеросклероз и сердечная недостаточность. Окислительный стресс может активировать редокс-чувствительный киназный каскад и факторы транскрипции, такие как NFKB и AP-1, с появлением возрастания факторов экспрессии, связанных с воспалительной ответной реакцией и пролиферацией клеток. Существует три ферментативные системы, продуцирующие реакционноспособные разновидности кислорода в стенке сосуда: NADH/NADPH (никотинамид-аденин-динуклеотид восстановленный/никотинамид-аденин-динуклеотидфосфат восстановленный) оксидаза, ксантин оксидоредуктаза и эндотелиальная оксидазотная синтаза (Zalba G. et. al., 2000, Rosenfeld M.E., 1998).

Атерогенез рассматривается как результат взаимодействий между множеством стимулов. Эндотелиальная дисфункция играет ключевую роль в развитии атеросклероза. Повышенные концентрации гомоцистеина связаны с быстрым началом эндотелиальной дисфункции, что представляет собой другой механизм, по которому повышенный окислительный стресс вносит свой вклад в атеросклероз. Окисление липопротеина низкой плотности играет важную роль в нескольких стадиях атерогенеза. Окислительный стресс также дезактивирует NFKB, который индуцирует экспрессию генов, контролирующих экспрессию цитокина и адгезию лейкоцитов к стенке сосуда (Maxwell, et al., 1997).

Исследования на животных подтвердили предположение, что свободные радикалы могут промотировать тромбоз, непосредственно повреждать клетки сосудов и другие ткани и вмешиваться в вазомоторную регуляцию с клиническим последствием в виде инфаркта миокарда и ишемического удара.

В тканях, где ресурсы кислорода используются после ишемии, как при ишемии миокарда, фермент ксантиноксидаза изменяется в форму, которая способна восстанавливать кислород до надперекисей. При повторном использовании кислорода, например при реперфузии, происходит вспышка генерирования свободных радикалов. ROS образуются с повышенной скоростью при пост-ишемическом миокарде. Таким образом, биологическое повреждение благодаря действию свободных радикалов вносит вклад в ишемическое повреждение.

По-видимому, окислительный стресс является одним из механизмов, по которым могут возникать дефекты мембран и которые приводят к межклеточному кальциевому перенапряжению и дисфункции сердечных сокращений в пораженном миокарде.

Дегенерация желтого пятна и катаракта

Окислительное повреждение хрусталика глаза с возрастом вносит основной вклад в образование катаракты. Дегенерация желтого пятна также признана следствием окислительного повреждения.

ВИЧ-заболевание

Нарушение антиоксидантной системы защиты наблюдалось в различных тканях ВИЧ-пациентов. Окислительный стресс может вносить свой вклад в ряд аспектов патогенеза ВИЧ-заболевания, таких как репликация вируса, воспалительная ответная реакция и пониженная пролиферация иммунных клеток, потеря функция иммунитета, апоптоз, хроническая потеря веса. Антиоксиданты могут быть предложены в качестве обещающего способа лечения ВИЧ-пациентов.

Хронические обструктивные заболевания легких (COPD)

Изменение метаболизма глутатиона в легких и альвиолах широко признано как центральная отличительная особенность многих воспалительных заболеваний легких, включая (COPD). Такие изменения являются результатом изменения генной экспрессии гамма-глутамилцистеинсинтазы (Гамма-GCS), скорость определяющего фермента в синтезе глутатиона. Окислительный стресс вовлекается в патогенез COPD, поскольку он приводит к дезактивации антипротеиназ, повреждению эпителия дыхательных путей, гиперсекреции слизистой, повышенному выделению нейтрофилов в легкие, активации фактора транскрипции и генной экспрессии провоспалительных медиаторов [MacNee W., et al. 2001].

Почечные заболевания

ROS вовлечены не только в возникновение различных форм почечных заболеваний, главным образом в экспериментально индуцированный гломерулонефрит, но также и в различные формы острой почечной недостаточности.

Астма

Хотя патогенез астмы полностью не определен, ее типичной отличительной особенностью является увеличение числа воспаленных клеток в легких. Такие клетки генерируют ROS, которые включены в патофизиологию астмы, включая сокращение гладкой мускулатуры дыхательных путей, повышенную реактивность дыхтельных путей и повышенную проницаемость сосудов.

Влияние антиоксидантного статуса на иммунологическую функцию.

Иммунная система особенно чувствительна к окислительному стрессу, в первую очередь, поскольку иммунные клетки сильно зависят от средства сообщения клетка-к-клетке для эффективного функционирования. Образованием пероксидных соединений нарушает целостность мембраны и прерывает внутриклеточную передачу сигнала.

Катаракта

Окислительное повреждение хрусталика глаза с увеличением возраста вносит основной вклад в образование катаракты.

Таким образом, с помощью удаления свободных радикалов можно регулировать следующие заболевания:

1) Нейродегенеративные заболевания

(a) Болезнь Альцгеймера

(b) Болезнь Паркинсона

(c) Болезнь Хантингтона

(d) Заболевание двигательного нейрона

(e) Заболевание приона

2) Диабет и сосудистые осложнения при диабете

3) Кишечные заболевания

(a) Ишемия кишечника

(b) Лучевой энтерит

(c) Воспалительное заболевание кишечника

(d) Рак желудка и ободочной и прямой кишки

4) Заболевания печени

(a) Алкогольное заболевание печени

(b) Хронический гепатит C

5) Рак

(a) Рак легких

(b) Рак ободочной и прямой кишки

(c) Рак шейки матки

(d) Рак молочной железы

(e) Злокачественная меланома

6) Сердечные заболевания

(a) Атеросклероз

(b) Инфаркт миокарда

(c) Ишемический удар

(d) Эндотелиальная дисфункция

7) Офтальмологические заболевания

(a) Образование катаракты

(b) Дегенерация желтого пятна

8) ВИЧ-заболевание

9) Заболевания дыхательных путей

(a) Хроническое обструктивное заболевание легких (COPD)

(b) Астма

10) Заболевания почек

(a) Гломелуронефрит

(b) Острая почечная недостаточность

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Первой задачей настоящего изобретения является создание нового класса пятичленных гетероциклических соединений, которые можно использовать для лечения диабета и возрастных сосудистых осложнений и, в частности, для лечения осложнений при сахарном диабете и других возрастных заболеваний, таких как сосудистые и нейрососудистые осложнения, включая заболевание почек, повреждение нерва, атеросклероз, ретинопатию, воспалительные заболевания, иммунологические нарушения, окислительный стресс и дерматологические и косметические показания. В объем изобретения также входит способ уничтожения изменения цвета зубов, являющегося результатом неферментативного появления коричневого цвета в ротовой полости, способ включает введение количества, эффективного для уничтожения ранее образованных продуктов сшивания при развитом гликозилировании.

Второй задачей настоящего изобретения является создание пятичленных гетероциклических соединений, которые обладают AGE разрушающей и ингибирующей активностями.

Третьей задачей настоящего изобретения является разработка способа получения пятичленных гетероциклических соединений, которые обладают AGE разрушающей и ингибирующей активностями.

Четвертой задачей изобретения является разработка фармацевтических композиций нового класса пятичленных гетероциклических соединений по изобретению и их фармацевтически приемлемых солей в сочетании с подходящими носителями, растворителями, эксципиентами и другими средами, обычно используемыми при получении таких композиций.

Пятой задачей изобретения является разработка способа лечения пациента диабетика путем введения соединений по изобретению либо самих по себе, либо в сочетании в лекарственными средствами для противодиабетической терапии, или их солей, в смеси с фармацевтически приемлемым носителем, растворителем, эксципиентами, носителями или другими средами, которые могут быть подходящими для этих целей.

Шестой задачей изобретения является разработка нового класса соединений, одна и та же молекула которых обладает а) активностью удаления свободных радикалов, b) активностью разрушения AGE и с) AGE ингибирующей активностью.

Седьмой задачей изобретения является разработка косметической композиции, включающей данные соединения в качестве активных ингредиентов.

Восьмой задачей изобретения является создание способа получения косметической композиции.

Девятой задачей изобретения является разработка способа косметического применения путем нанесения косметической композиции по изобретению.

Десятая задача изобретения заключается в создании фармацевтической композиции, полезной для удаления свободных радикалов из клеток тела.

Одиннадцатой задачей изобретения является разработка способа удаления свободных радикалов из клеток тела млекопитающего.

Двенадцатой задачей изобретения является разработка способа лечения заболеваний, вызванных накоплением свободных радикалов в клетках тела млекопитающего.

Тринадцатой задачей изобретения является создание способа ингибирования AGE, а также композиции для ингибирования AGE у млекопитающего.

Другой задачей изобретения является создание жидкости для диализа, полезной для перитонеального диализа пациента диабетика.

Изобретение также относится к способу косметического лечения путем нанесения вышеуказанной композиции. Изобретение дополнительно относится к фармацевтической композиции, полезной для удаления свободных радикалов из клеток тела млекопитающего, которая включает определенное выше соединение или его фармацевтически приемлемые соли в смеси с фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем, эксципиентом или растворителем.

Кроме того, изобретение относится к способу удаления свободных радикалов из клеток тела млекопитающего путем введения фармацевтической композиции, как отмечено выше, или к способу лечения заболеваний, вызванных накоплением свободных радикалов, путем введения указанной композиции.

Дополнительно изобретение относится к способу ингибирования AGE и к композиции для ингибирования AGE с использованием соединений изобретения.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к новому классу соединений, прекращающих AGE, формулы I

R₁ представляет собой алкильную или арильную группу;

Y выбран из группы, включающей серу, кислород, азот и алкил;

A и B независимо выбраны из группы, включающей азот, серу, кислород или углерод с образованием гетероароматической кольцевой системы;

R₂, R₃ и R₄ независимо выбраны из группы, включающей F, Cl, Br, I, OR₇, NO₂, алкил, арил, включая гетероарил, формил, ацил, C(O)NR₆R₇, C(O)OR₆, NR₆R₇, N=C(R₆)(R₇), SR₆, SO₂NH₂, SO₂алкил и SO₂арил; R₂, R₃ и R₄ необязательно могут быть связаны вместе с образованием кольцевой системы;

Если соединение кватернизовано, R₅ независимо выбран из группы, включающей алкил и арил; если соединение не кватернизовано, R₅ отсутствует, и Х отсутствует;

R₆ независимо выбран из группы, включающей H, алкил и арил, включая гетероарил, при условии, что R₆ может различаться для R₂, R₃ и R₄ в одном и том же соединении;

R₇ независимо выбран из группы, включающей H, алкил и арил, включая гетероарил, и в каждом случае необязательного отличается от заместителя R₆, при условии, что R₇ может различаться для R₂, R₃ и R₄ в одном и том же соединении,

Если соединение кватернизовано, X выбран из группы, включающей галогенид-ион, ацетат-ион, перхлорат-ион, сульфонат-ион, оксалат-ион, цитрат-ион, тозилат-ион, малеат-ион, мезилат-ион, карбонат-ион, сульфит-ион, гидрофосфорный ион, фосфонат-ион, фосфат-ион, BF₄^- и PF₆^-,

При условии, что когда две алкильные группы присутствуют у одних и тех же атомов углерода или азота, они необязательно связаны вместе с образованием циклической структуры.

Как использовано в данном описании, термин «алкил» относится к необязательно замещенной углеводородной группе, связанной простыми углерод-углеродными связями и имеющей от 1 до 8 атомов углерода, связанных вместе. Алкильная углеводородная группа может быть линейной, разветвленной или циклической, насыщенной или ненасыщенной. Заместители выбраны из F, Cl, Br, I, N, S, O и арила. Предпочтительно присутствует не более трех заместителей.

Как использовано в данном описании, термин «арил» относится к необязательно замещенной ароматической группе, имеющей по крайней мере одно кольцо, имеющее сопряженную пи-электронную систему, и содержащей вплоть до двух сопряженных или конденсированных кольцевых систем. Арил включает карбоциклический арил, гетероциклический арил и бисарильные группы, все из которых необязательно могут быть замещены. Заместители выбраны из F, Cl, Br, I, N, S, O и линейного или разветвленного С₁-С₆ углеводорода.

В предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к новому классу соединений формулы (1), разрушающих AGE, ингибирующих AGE и удаляющих свободные радикалы, и их фармацевтически или косметически приемлемым солям

где

R₁ выбран из линейного или разветвленного (C₁-C₁₂) алкила, (C₂-C₁₂) алкенила, (C₃-C₇) циклоалкила, (C₅-C₇) циклоалкенила, бициклоалкила, бициклоалкенила, гетероциклоалкила, арила, аралкила, гетероарила, гетероаралкила, и где один или несколько гетероатомов, когда они присутствуют, независимо выбраны из O, N или S, и необязательно замещен, где заместители выбраны из первой группы, включающей галоген, гидрокси, нитро, циано, амино, оксо и оксим, или из второй группы, включающей линейный или разветвленный (C₁-C₈)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил, алкилциклоалкил, пергалогеналкил, пергалогенциклоалкил, арил, аралкил, алкиларил, алкилгетероарил, аралкоксиалкил, пергалогенарил, алкилгетероциклоалкил, гетероциклилалкил, пергалогенгетероциклилалкил, гетероарил, гетероаралкил, алкиларил, пергалогенгетероарил, ацил, алкоксиалкил, тиоалкил и тиоарил, где заместители из указанной второй группы необязательно замещены R₁₀ и необязательно и независимо связаны с помощью -(CO)O-, -(CO)NH-, -NH-, -NR₈-, -O-, -S-, -(SO)-, -(SO₂), -(SO₂)NH-, или -NH(CO)-;

Y отсутствует или выбран из группы, включающей (C₁-C₁₂)алкил-Z или (C₂-C₁₂)алкил, где Z выбран из серы, кислорода или азота;

A и B независимо выбраны из NH, NR₆, серы, кислорода или углерода с образованием гетероароматической кольцевой системы;

R₂, R₃ и R₄ независимо выбраны из первой группы, включащей водород, галоген, NO₂, N=C(R₈)(R₉), -NR₈R₉, -OR₈, пергалогеналкил, -(CO)NR₈R₉, -(CO)R₈, -(CO)OR₈, -O(CO)R₈, -NH(CO)R₈, или из второй группы, включающей линейный или разветвленный (C₁-C₁₂)алкил, (C₂-C₁₂)алкенил, (C₃-C₇)циклоалкил, (C₅-C₇)циклоалкенил, бициклоалкил, бициклоалкенил, гетероциклоалкил, арил, аралкил, гетероарил, гетероаралкил, где один или несколько членов указанной второй группы, когда они присутствуют, необязательно замещены R₁₀, и где один или несколько гетероатомов, когда они присутствуют, независимо выбраны из O, N, или S;

R₅ отсутствует или выбран из группы, включающей линейный или разветвленный (C₁-C₁₂)алкил, (C₂-C₁₂)алкенил, (C₃-C₇)циклоалкил, (C₅-C₇ )циклоалкенил, бициклоалкил; CH₂(CO)R₇, CH₂(CO)NHR₈, CH₂(CO)NR₈R₉ и CH₂(CO)OR₇, которые необязательно замещены R₁₀;

R₆ и R₇ независимо выбраны из группы, включающей линейный или разветвленный (C₁-C₈)алкил, (C₃-C₇)циклоалкил, алкилциклоалкил, пергалогеналкил, пергалогенциклоалкил, арил, аралкил, алкиларила, алкилгетероарила, аралкоксиалкила, пергалогенарила, алкилгетероциклоалкил, гетероциклилалкил, пергалогенгетероциклилалкил, гетероарил, гетероаралкил, алкиларил, пергалогенгетероарил, ацил, бензоил, алкоксиалкил, тиоалкил и тиоарил, где члены указанной группы необязательно замещены R₁₀;

R₈ и R₉ независимо выбраны из группы, включающей линейный или разветвленный (C₁-C₁₂)алкил, алкоксиарил, алкоксиалкил, алкоксициклоалкил, алкоксиарил, пергалогеналкил, (C₂-C₁₂)алкенил, (C₃-C₇)циклоалкил, пергалогенциклоалкил, галогенгетероциклоалкил, цианогетероциклоалкил, пергалогенгетероциклоалкил, (C₅-C₇)циклоалкенил, бициклоалкил, бициклоалкенил, гетероциклоалкил, арил, аралкил, гетероарил, гетероаралкил, пергалогенарил, пергалогенгетероарил, где заместители указанной группы необязательно замещены R₁₀;

R₁₀ выбран из галогена, гидрокси, нитро, циано, амино, оксо, пергалогеналкила (C₁-C₆) или оксима;

X выбран из группы, включающей галогенид-ион, ацетат-ион, перхлорат-ион, сульфонат-ион, оксалат-ион, цитрат-ион, тозилат-ион, малеат-ион, мезилат-ион, карбонат-ион, сульфит-ион, гидрофосфорный ион, фосфонат-ион, фосфат-ион, BF₄^- и PF₆^-,

при условии, что, когда группы/заместители присутствуют у одного и того же или у смежных атомов углерода или азота, они необязательно вместе могут образовывать пяти, или шести, или семичленное кольцо, необязательно содержащее одну или несколько двойных связей и необязательно содержащее один или несколько гетероатомов, выбранных из O, N, или S.

Следует понимать, что соединения формулы (1), как определено выше, включают их аналоги, их таутомерные формы, их стереоизомеры, их полиморфы, их фармацевтически приемлмые сольваты и их косметически приемлемые сольваты.

Неограничивающие примеры фармацевтически/косметически приемлемых солей соединений по изобретению включают, но не граничиваются этим, соли фрагмента карбоновой кислоты, такие как соли щелочных металлов, такие как соли Li, Na и K; соли щелочно-земельных металлов, такие как соли Са и Mg; соли органических оснований, например, лизина, аргинина, гуанидина, диэтаноламина, холина и тому подобных; соли аммония или замещенного аммония и соли алюминия; соли могут представлять собой кислотно-аддитивные соли, например сульфаты, нитраты, фосфаты, перхлораты, бораты, гидрогалогениды, ацетаты, тартраты, малеаты, цитраты, сукцинаты, палмоаты, метансульфонаты, бензоаты, салицилаты, гидроксинафтоаты, бензолсульфонаты, аскорбаты, глицерофосфаты, кетоглутараты и тому подобные.

Следующие новые соединения предлагаются только в качестве примера иллюстративных соединений общей формулы I, как определено выше, и никоим образом не ограничивают изобретение:

a) бромид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 1);

b) бромид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(3-фенилметил)оксазол-5-ил]пиридиния (Соединение 2);

c) дибромид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[3-{1-(2-тиен-2'-ил)-2-оксоэтил)пиридиний-4-тио}метил-пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 3);

d) бромид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[3-{1-(3,5-диметилпиразол-1-ил)метил}пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 4);

e) бромид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[3-фенилметил}-1-{2-пиридил}пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 5);

f) бромид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[3-{(3, 5-диметилпиразол-1-ил)метил-1-пиридил}пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 6);

g) бромид 1-[2-(циклопропиламино)-2-оксоэтил]-3-[3-{(3,5-диметилпиразол-1-ил)метил}пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 7);

h) бромид 1-{2-(4-нитро-2-тиенил)-2-оксоэтил}-3-[3{(3,5-диметилпиразол-1-ил)метил}пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 8);

i) хлорид 1-(2-циклопропиламино-2-оксоэтил)-3-[(3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 9);

j) дибромид 3,5-бис-[1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)пиридиний-3-ил]пиразола (Соединение 10);

k) хлорид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(1-фенил-3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 11);

l) хлорид 1-(2-(5'-метил-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[(3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 12);

m) хлорид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[1-фенил-3-{(3,5-диметил пиразол-1-ил)метил)}пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 13);

n) бромид 1-(2-фенил-2-оксоэтил)-3-[(3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 14);

o) хлорид 1-(2-циклопропиламино-2-оксоэтил)-3-[(1-фенил-3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 15);

p) бромид 1-(2-(4-бензил-l-пиперидинил)-2-оксоэтил)-3-[(3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 16);

q) хлорид 1-(2-фенил-2-оксоэтил)-3-[(3-(3, 5-диметилпиразол-1-ил)метил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 17);

r) хлорид 1-(2-(5-метил-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[(3-(3,5-диметилпиразол-1-ил)метил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 18);

с) хлорид 1-(2-фенил-2-оксоэтил)-3-[(1-фенил-3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 19);

t) хлорид 1-(2-(5-метил-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[(3-(2-циклогексилэтил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 20);

u) хлорид 1-(2-циклопропиламино-2-оксоэтил)-3-[(3-(2-циклогексилэтил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 21);

v) хлорид 1-(2-фенил-2-оксоэтил)-3-[(3-(2-циклогексилэтил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 22);

w) хлорид 1-(2-циклопропиламино-2-оксоэтил)-3-[(1-циклогексил-3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 23);

x) хлорид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 24);

y) хлорид 1-[2-(l-адамантиламино)-2-оксоэтил]-3-[(3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 25);

z) бромид 1-(2-фенил-2-оксоэтил)-3-[{3-(3,5-диметилпиразол-1-ил)метил)}-1-фенилпиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 26);

aa) бромид 1-(2-(4-нитро-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[(1-циклогексил-3-(3,5-диметилпиразол-1-ил)метил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 27);

bb) бромид 1-(2-(4-нитро-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[(3-(2-циклогексилэтил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 28);

cc) хлорид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(1-фенил-3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 29);

dd) бромид 1-(2-(4-нитро-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[(1-фенил-3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 30);

ee) хлорид пиразол-1-(2-циклопропиламино-2-оксоэтил)-3-[(3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 31);

ff) хлорид 1-(2-циклопропиламино-2-оксоэтил)-3-[(1-циклогексил-3-(3, 5-диметилпиразол)-1-ил)-5-ил]пиридиния (Соединение 32);

gg) бромид 1-(2-(5-хлор-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[(3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 33);

hh) хлорид 1-(2-фенил-2-оксоэтил)-3-[(1-фенил-3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 34);

ii) хлорид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(1-циклогексил-3-(3, 5-диметилпиразол-1-ил-метил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 35);

jj) бромид 1-(2-циклопропиламино-2-оксоэтил)-3-[(1-фенил-3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 36);

kk) бромид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(1-фенил-3-(2-циклогексилэтил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 37);

ll) хлорид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(1-циклогексил-3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 38);

mm) гидрохлорид 3-[(3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридина (Соединение 39);

nn) гидрохлорид 3-[(3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридина (Соединение 40);

oo) 3-[(3,5-диметилпиразол-1-ил-метил)пиразол-5-ил]пиридин (Соединение 41);

pp) 3-[3-(2-циклогексилэтил)-пиразол-5-ил]пиридин (Соединение 42);

qq) бромид 1-(2-нафтил-2-оксоэтил)-3-[(3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 43);

rr) хлорид 1-(фенилметил)-3-[(3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 44);

ss) хлорид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(3-(1-нафтил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 45);

tt) хлорид 1-(2-фенил-2-оксоэтил)-3-[3-(тиенил-2-ил-метил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 46);

uu) хлорид 1-(2-(5-метил-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[3 (2-фенилэтил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 47);

vv) хлорид 1-(2-(5-метил-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[3-(3-феноксипропил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 48);

ww) бромид 1-(изопропил)-3-[(3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 49);

xx) хлорид 1-(2-(5-метил-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[(3-тиофенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 50);

yy) хлорид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(3-(N-метилиндол-3-илметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 51);

zz) бромид 1-(2-нафтил-2-оксоэтил)-3-[(3-метил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 52);

aaa) хлорид 1-(2-(1,4-бензодиоксан-6-иламино-2-оксоэтил)-3-[(3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 53);

bbb) хлорид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(3-фенил)пиразол-5-ил]-5-бромпиридиния (Соединение 54);

ccc) хлорид 1-(2-тиен-2'-ил)-2-оксоэтил)-3-[(3-фенил)пиразол-5-ил]хинолиния (Соединение 55) и

ddd) 3-[(3-фенил)пиразол-5-ил)]хинолин (Соединение 56).

Разумный перечень заместителей вышеуказанных соединений, касающийся содинений общей формулы (I), как определено выше, представлен далее в таблице.

* выделено в форме HCl соли

В соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения соединения по настоящему изобретения могут использоваться для лечения диабетических осложнений и возрастных сосудистых и нейрососудистых осложнений, включая заболевание почек, поражение нерва, атеросклероз, ретинопатию, воспалительные заболевания, иммунологические нарушения, окислительный стресс, дерматологические и косметические показания и изменение окраски зубов, возникающее за счет повышенного уровня ранее образованного AGE. Повышенные уровни ранее образованного AGE можно контролировать путем разрушения/ингибирования продуктов AGE с использованием соединений, указанных в изобретении.

Новые соединения по изобретения общей формулы I могут быть синтезированы. Один способ получения соединений заключается во взаимодействии замещенных/незамещенных ацетилпиридинов с алкилариловыми сложными эфирами в присутствии подходящего основания. Далее их подвергают циклизации с использованием различных синтетических способов. При необходимости, может быть проведена кватернизация с помощью подходящего реагента в спиртовом растворителе, таком как метанол, этанол, пропанол и т.д., и в высококипящих растворителях, таких как толуол, ксилол или ДМФ, в течение 6-48 часов с получением целевых соединений.

Ниже приведены примеры замещенных производных пиридина, которые можно использовать для получения конкретных соединений изобретения:

1. N,N'-бис(никотинил)гидразин

2. 3-[(2-пиридил)гидразинокарбонил]пиридин

3. 3-[2-метансульфонил)гидразинокарбонил]пиридин

4. 3-[(2-бензоилокси)этиламинокарбонил]пиридин

5. 3-[(2-фенилсульфонил)гидразинокарбонил]пиридин

6. 3-[(2-ацетокси)этилоксикарбонил]пиридин

7. 3-[(2-бензоилокси)этилоксикарбонил]пиридин

8. 3-[(2-метокси)этилоксикарбонил]пиридин

9. 3-[(2-фениламинокарбонил)гидразинокарбонил]пиридин

10. 3-[(2-ацетокси)этиламинокарбонил]пиридин

11. 3-[(2-(4-метилфенилсульфонилгидразинокарбонил))]пиридин

12. 3-[(2-бензоил)гидразинокарбонил]пиридин

13. 3-[(2-фенилметансульфонил)гидразинокарбонил]пиридин

14. 3-[(2-(3-циклогексилпропаноил)гидразинокарбонил]пиридин

15. 3-[(2-метокси)этиламинокарбонил]пиридин

16. 3-[1-оксо-1-(2-метоксикарбонил)пиридил]гидразинопиридин

Ниже приведены примеры агентов кватернизации, которые можно использовать в реакции:

1. 2-бромацетилтиофен

2. 2-хлорацетилтиофен

3. фенацилбромид

4. фенацилхлорид

5. 2,4-дихлорфенацилбромид

6. N-фенилхлорацетамид

7. N-циклопропилхлорацетамид

8. этилбромацетат

9. бромацетилфуран

10. N-изопропилхлорацетамид

11. N-хлорацетил-2-пирролидинон

12. хлоруксусная кислота

Скрининг in-vitro на активность разрушения AGE

Пример 1A

Образование AGE in vitro, исследованное в лаборатории путем инкубирования восстанавливающего сахара глюкозы с белком - бычьим сывороточным альбумином, приводит к коричневому окрашиванию раствора и увеличению флуоресценции. Флуоресценцию использовали в качестве критерия для контролирования возрастания AGE образования.

Материалы:

Бычий сывороточный альбумин (фракция V) (БСА)

Глюкоза, аналитического качества

Забуференный фосфатом физиологический раствор (PBS)

Оборудование:

Микропланшет ELISA, Ридер-Spectramax Plus (Molecular Devices, USA)

Аппарат для промывания микропланшетов (Bio-Tec Instruments, USA)

PH-метр

Методы эксперимента: Elisa (Твердофазный иммуноферментный анализ)

160 мг/мл белка, бычий сывороточный альбумин, БСА и 1,6 M глюкозный сахар растворяли в забуференном фосфатом физиологическом растворе, PBS. В качестве консерванта добавляли азид натрия в концентрации 0,02%. Раствор асептически фильтровали через фильтр 0,22 мкм и выдерживали для старения при 37°С в течение 16 недель. Через 16 недель проводили диализ раствора относительно PBS, разделяли на аликвоты и хранили при -20°C.

Для определения активности разрушения AGE 10 мкг/мл 16 недельного раствора AGE-БСА инкубировали с различными концентрациями тестируемых соединений при 37°С в течение 24 часов, и активность разрушения AGE для тестируемых соединений определяли с помощью ELISA (твердофазный иммуноферментный анализ).

ELISA проводили следующим образом:

1. Планшет для микротитрования покрывали в качестве стандарта различными концентрациями 16-недельного раствора AGE-БСА. Каждую концентрацию наносили в трехкратной последовательности.

2. Тестируемыми образцами покрывали планшет для микротитрования в концентрации от 5 нг до 20 нг на лунку в трехкратной последовательности.

3. Планшет инкубировали при 37°С в течение одного часа.

4. После инкубирования планшет промывали PBST (PBS с 0,05% Tween 20).

5. Проводили блокирование с использованием 5% снятого молока при 37°С в течение одного часа.

6. Планшет промывали PBST.

7. Добавляли первичное антитело против AGE-БСА и планшет инкубировали при 37°С в течение одного часа.

8. Планшет промывали PBST.

9. Добавляли вторичный конъюгат антикроличий-HRPO (пероксидаза хрена) и планшет инкубировали при 37°С в течение одного часа.

10. Планшет промывали PBST.

11. Проводили улучшение окраски с помощью OPD (дигидрохлорид ортофенилендиамина) и перекиси водорода.

12. Измеряли ОП (оптическую плотность) при (450 нм считывание-620 нм считывание) после инкубирования при 37°С в течение 15 минут с использованием микропланшетного ридера Microplate ELISA.

Активность разрушения AGE для соединений определяли по следующей формуле:

ОП_450-620 Контроль- ОП_450-620 Тест

% активности разрушения = -------------------------- x 100

ОП_450-620 Контроль

ОП_450-620 Контроль = Поглощение 20 нг AGE-БСА после инкубирования при 37°С в течение 24 часов без тестируемого соединения.

ОП_450-620 Тест = Поглощение 20 нг AGE-БСА после инкубирования при 37°С в течение 24 часов с требуемой концентрацией тестируемого соединения.

Пример 1B

Метод на основе гельпроникающей хроматографии.

Метод на основе гельпроникающей хроматографии использовали для определения активности разрушения AGE для соединений.

Принцип:

Разделение методом гельпроникающей хроматографии (GPC) зависит от различия в размере, более точно, в гидродинамическом объеме, белков в образце. Молекулы большего размера не проникают в поры частиц колонки и элюируются в свободном объеме колонки (V_o). Поры частиц колонки дифференциально доступны для меньших частиц, в зависимости от их размера. Данный объем колонки называют (V_i). Общий доступный объем (V_t) представляет собой сумму объема вне частиц (V_o) и объема, доступного внутри частиц (V_i)

V_t = V_o + V_i

Следовательно, в обычном опыте гельпроникающей хроматографии (GPC), высокомолекулярные молекулы элюируются с меньшими временами удерживания, тогда как молекулы с меньшим молекулярным весом удерживаются более продолжительное время. С целью количественной оценки регистрируется площадь под кривой для соответствующих молекул. Тот же принцип применяется при in vitro скрининге молекул настоящего изобретения.

Высокосшитые конечные продукты повышенного гликозилирования (AGE) получали инкубированием in vitro бычьего сывороточного альбумина (БСА) с глюкозой в течение 16 недель. Молекулярный вес БСА и AGE-БСА значительно различался на GPC колонке, и, следовательно, происходило их хорошее разделение. Уменьшение площади AGE-БСА, инкубированного в присутствии разрушителя AGE, по сравнению с контрольным AGE-БСА (инкубированным в отсутствие разрушителя AGE), позволяло оценивать AGE разрушающую активность лекарственного средства. Для проверки неспецифической активности молекулы аналогичный эксперимент был повторен также с БСА.

Методология:

Известную концентрация 16-недельного AGE-БСА инкубировали в присутствии и в отсутствие предварительно определенной концентрации лекарственного средства при 37°С в течение 24 часов в чистых прозрачных стеклянных пробирках. Раствор без лекарственного средства служил в качестве контроля и раствор, содержащий лекарственное средство, обрабатывали в качестве тестируемого образца.

Гельпроникающую хроматографию проводили на равных объемах контрольного препарата AGE-БСА и раствора AGE-БСА, обработанного лекарственным средством. Рассчитывали средние площади на двух хроматограммах.

В хроматограмме контрольного и обработанных AGE-БСА образцов наблюдали два основных пика.

Пик I = высокомолекулярный пик

Пик II = низкомолекулярный пик

Пик I + Пик II = Суммарный AGE-BSA

Расчеты:

(Средняя площадь пика I в обработанном образце)

% разрушения в пике I = 100- ---------------- x 100

(Средняя площадь пика I в контрольном образце)

(Средняя площадь пика II в обработанном образце)

% разрушения в пике II = 100- ---------------- x 100

(Средняя площадь пика II в контрольном образце)

(Средняя площадь пика I+ пика II в обработанном образце)

% Общего разрушения = 100----------------------------------X 100

(Средняя площадь пика I+ пика II в контрольном образце)

С использованием иллюстративных соединений был рассчитан % разрушения AGE, и полученные результаты приведены ниже в таблице 2.

Таким образом, соединения 7, 8, 11-19, 21-25, 27, 34, 35, 37 и 40 обладают очень хорошей AGE разрушающей активностью, среди которых эффективность соединений 8, 11-13, 15, 16, 19, 21, 22, 24, 25, 27, 34 и 37 имеет значительно более высокий порядок.

AGE ингибирующая активность соединений

Далее, принимая во внимание способность соединений настоящего изобретения предотвращать начало образования AGE за счет описанного ингибирующего действия, может быть предотвращено или снижено развитие патологического состояния, вызванного AGE. Двойная активность соединений в качестве агентов, разрушающих AGE, а также в качестве AGE ингибитора, делает их еще более полезными для заболеваний, связанных с возрастом и диабетических осложнений, заболеваний почек, повреждений нервов, ретинопатии, невропатии, эндотелиальной дисфункции, атеросклероза, микроангиопатии, потемнения, которое возникает в полости рта аналогично потемнению зубов, болезни Альцгеймера, артериальной податливости и растяжимости, рестенозе, аномального препятствия ткани при перитонеальном диализе, эректильной дисфункции и других видов дисфункции, где нагрузка AGE на клетку является очень решающей. В действительности, тройное действие соединений (а) в качестве AGE разрушающего агента, (b) AGE ингибитора, (с) поглотителя свободных радикалов может эффективно использоваться для уничтожения или профилактики ряда патологических состояний, а также для уничтожения и профилактики косметических аспектов старения.

Пример 1C

Исследование AGE ингибирующей активности

Следующий способ был использован для определения ингибирующего действия исследуемых соединений.

Следующий способ был использован для определения ингибирующего действия исследуемых соединений в реакции Майлларда in vitro. Данный способ представляет собой метод, взятый из патента США 5514676 и Европейского патента 0339496A2.

Готовили раствор бычьего сывороточного альбумина (БСА), рибозы и исследуемого соединения в забуференном фосфатом физиологическом растворе (PBS, pH 7,4) таким образом, чтобы конечная концентрация БСА и рибозы составляли 10 мг/мл и 500 мМ, соответственно. Добавление соединения проводили в асептических условиях. Также в данному раствору добавляли азид натрия (0,02%) для предотвращения роста микробов. Также в качестве положительного контроля инкубировали отдельную пробирку, содержащую БСА, рибозу и азид натрия в тех же концентрациях и буфер, как указано выше, но без какого-либо исследуемого соединения. После инкубирования при 37°С в течение 7 дней из каждого образца удаляли 40 микролитров и разводили PBS до конечной концентрации БСА 1 мг/мл. Флуоресценцию всех образцов измеряли при максимуме возбуждения 355 нМ и максимуме испускания 460 нм с использованием флуориметра f-MAX Fluorimeter (Molecular Device, USA). Для исследования влияния тестируемого соединения на флуоресценцию свежеприготовленные растворы соединений смешивали с предварительно инкубированным положительным контролем (т.е. БСА+рибоза), таким образом, чтобы достигалась та же концентрация всех компонентов, что и в исследуемом образце.

Процент ингибирования тестируемых соединений измеряли следующим образом:

F4-F3

% Ингибирования = ------------- X 100

F4

Где F3 = Флуоресценция БСА + рибоза + Соединение,

F4 представляет собой флуоресценцию инкубированного образца (БСА+рибоза) + свежедобавленное тестируемое соединение

Иллюстративные соединения общей формулы (I) были протестированы на их активность в качестве AGE ингибитора, и результаты представлены ниже в таблице 3.

Агенты, разрушающие AGE:

Как показано в таблице 2, соединения настоящего изобретения могут использоваться для разрушения AGE. Следовательно, соединения настоящего изобретения могут использоваться в качестве лекарственного средства для лечения диабетических осложнений и возрастных заболеваний, вызванных накоплением AGE. Кроме того, данные соединения могут ингибировать накопление AGE посредством разрушения AGE, они могут использоваться в качестве лекарственного средства для контролирования и снижения обострения болезненных состояний, таких как диабет и возрастные осложнения, вызванные накоплением AGE.

Повышенная нагрузка AGE в любой ткани, вероятно, приводит к патологическому состоянию и по различным механизмам затем может приводить к различным заболеваниям. Таким образом, уменьшая AGE нагрузку ткани, соединения настоящего изобретения могут уничтожать данные состояния, а предотвращение накопления AGE до критической массы может служить профилактикой первоначального появления заболевания.

Действительно, при хроническом диабете и в пожилом возрасте с годами происходит постепенное накопление AGE (Yong Ming Li et al., 1996 ; Brownlee, 1995). Осложнения в случае таких млекопитающих возникают за счет AGE нагрузки ткани, увеличивающейся со временем. Повышение AGE нагрузки ткани со временем можно предотвратить у вновь диагностированных пациентов посредством достаточно раннего введения соединений, разрушающих AGE, или ингибиторов AGE. Такой способ будет предотвращать и/или замедлять развитие перечисленных выше осложнений у таких пациентов.

AGE ингибиторы:

Как показано в таблице 3, соединения настоящего изобретения также можно использовать для ингибирования AGE.

Таким образом, можно использовать лекарственное средство для лечения диабетических осложнений и возрастных заболеваний, вызванных накоплением AGE, поскольку данные соединения могут ингибировать накопление AGE посредством ингибирования образования AGE, и их можно использовать в качестве лекарственного средства для профилактики заболеваний, таких как диабет и возрастные осложнения, вызванные накоплением AGE.

Таким образом, перечисленные ниже болезненные состояния, возникающие вследствие образования AGE, могут быть предотвращены или их можно лечить с помощью соединений общей формулы (I) по двум причинам: во-первых, благодаря их AGE разрушающей активности, и, во-вторых, благодаря их AGE ингибирующей активности. Действительно, оба вида биологической активности вносят свой вклад в борьбу со следующими заболеваниями:

1) сосудистые и нейрососудистые осложнения,

2) нефрологическое заболевание,

3) неврологическое заболевание,

4) атеросклероз,

5) заболевание сетчатки,

6) дерматологическое заболевание

7) неферментативное потемнение полости рта,

8) эндотелиальная дисфункция или дисфункция другого органа,

9) ухудшение роста,

10) воспалительное заболевание,

11) иммунологическое нарушение,

12) окислительный стресс,

13) возрастные и диабетические осложнения,

14) болезнь Альцгеймера,

15) рестеноз, аномальное препятствие ткани при перитонеальном диализе,

16) аномальное препятствие ткани при перитонеальном диализе, и

17) эректильная дисфункция.

Пример 1D

Активность удаления свободных радикалов:

Данный способ измеряет относительную способность веществ, удаляющих свободные радикалы, поглощать ABTS^•+ т.e. радикал-катион 2, 2-азино-бис(3-этилбензотиазолин-6-сульфоната), по сравнению со стандартными количествами стандартных антиоксидантов-поглотителей свободных радикалов. Инкубирование ABTS с пероксидазой (метмиоглобин) и перекисью водорода приводит к продуцированию радикал-катиона ABTS^•+. Такой вид радикала имеет сине-зеленое окрашивание и может быть обнаружен при 730 нм. Антиоксиданты или поглотители свободных радикалов в добавленном образце вызывают подавление окраски в степени, пропорциональной их концентрации.

Протокол:

Получение буферных растворов:

a. Фосфат-цитратный буфер (pH 5,0): 48,5 мл 0,1M лимонной кислоты с достаточным количеством 0,2M динатрийгидрофосфата с получением 100 мл.

b. Забуференный фосфатом физиологический раствор (PBS): Растворяют 40,0 г NaCl, 1,0 г KCl, 1,0 г KH₂PO₄ и 3,05 г Na₂HPO₄ в 1 литре воды milli-Q. Разводят 200мл вышеуказанного раствора до 1 литра с использованием воды milli-Q (pH 7,4-7,6).

Получение ABTS исходного раствора (2мМ):

1 таблетку (10 мг) растворяли в фосфат-цитратном буфере (pH 5,0), получая 2 мМ раствор.

Получение рабочего раствора пероксидазы хрена:

0,1 мг растворяли в 10 мл забуференного фосфатом физиологического раствора, 1 мл данного раствора разводили до 100 мл с использованием PBS.

Получение раствора перекиси водорода (1,08 мМ):

12 мкл перекиси водорода (30% вес./об.) разводили PBS до 100 мл.

Получение растворов лекарственных средств:

Готовили 0,1 мМ исходные растворы лекарственного средства, которые серийно разводили в PBS с получением растворов с концентрацией 0,05 мМ, 0,025 мМ и 0,0125 мМ.

Получение исходного раствора ABTS-радикала:

К 2 мл исходного раствора ABTS добавляли 1 мл рабочего раствора пероксидазы хрена.

Поскольку 2 мл раствора перекиси водорода добавляли к вышеуказанному раствору, появлялась сине-зеленая окраска ABTS-радикалов. Данный раствор инкубировали при 30°С в течение 30 минут для того, чтобы гарантировать полное протекание реакции. Объем доводили до 10 мл PBS.

Получение контрольного раствора:

900 мкл исходного раствора ABTS-радикалов добавляли в пробирку-эппендорф. К этому добавляли 100 мкл PBS раствора.

Получение тестируемого раствора:

900 мкл исходного раствора ABTS-радикалов добавляли в различные пробирки-эппендорфы. В пробирки добавляли по 100 мкл раствора лекарственного средства различной концентрации.

Измерение поглощения (ОП):

Поглощение контрольного и тестируемого образцов регистрировали немедленно при 730 нм, принимая PBS за «пустой» образец.

Расчет:

Процент антиоксидантной активности был рассчитан по формуле:

% Антиоксидантной активности = 100- [ОП тест-образца/ОП контроля x 100]

Результаты представлены ниже в таблице 4.

Таким образом, установлено, что соединения общей формулы (I), определенные выше, способны удалять свободные радикалы, не считая того, что они обладают AGE-ингибирующей и AGE-разрушающей активностью.

Обсуждение результатов испытаний на активность удаления свободных радикалов:

(i) Для косметического применения

Помимо AGE разрушающей и удаляющей свободные радикалы активности соединений по изобретению, они способны ингибировать AGE, что делает их идеальными для различных косметических применений, как обсуждалось выше.

Соединения по настоящему изобретению таким образом продемонстрировали способность разрушения AGE поперечных связей, образованных в белках. Соединения также продемонстрировали способность удаления свободных радикалов, которые могут вызывать необратимые повреждения белков, нуклеиновых кислот и т.д. Способность прекращать образование конечных продуктов повышенного гликозилирования (в поддерживающем кожу белке, таком как коллаген, и в белках волос, таких как кератин) в сочетании со способностью удаления свободных радикалов имеет важное следствие и делает их полезными в косметических применениях.

Соединения настоящего изобретения улучшают эстетический внешний вил кожи, останавливая осложнения, связанные с кожей, на ряде решающих стадий. Они разрушают ранее образованные конечные продукты повышенного гликозилирования (AGE), образовавшиеся в поддерживающих кожу белках, и замедляют внутреннее старение (C. Jeanmaire et. al., British Journal of Dermatology, 2001: 145: 10-18). Соединения настоящего изобретения также удаляют свободные радикалы, генерируемые при действии ультрафиолетового света, загрязнений и т.д. в коже, таким образом предотвращая внешнее старение или фотостарение. Удаление свободных радикалов также будет предотвращать необратимые повреждения, вызываемые в белках и нуклеиновых кислотах. Кроме того, посредством удаления свободных радикалов данные соединения будут снижать нагрузку свободных радикалов, генерированных ранее образованными AGE. Восстановление при окислительном стрессе, в свою очередь, будет уменьшать образование реакционноспособных промежуточных соединений, вовлеченных в образование продукта Амадори (Amadori).

Гликозилирование белков является всеобщим явлением, хорошо известным на уровне кожи. Однако данное явление также может происходить в других близкорасположенных частях, таких как ногти или волосы, в особенности в кератине (EP1068864 A1 и EP 1110539 A1).

Гликозилирование белков кожи, в частности коллагена, приводит к неблагоприятным косметическим эффектам, например к последствиям, которые повреждают кожу, те же последствия можно ожидать в качестве результата гликозилирования белков в участках, близких к коже, таких как ногти и/или волосы, и во всей белковой системе.

В настоящем изобретении описаны молекулы, обладающие способностью расщеплять структурированные белки. Кроме того, показано, что данные молекулы обладают активность удаления свободных радикалов (антиоксиданты), и таким образом, помимо обсуждавшихся выше косметических применений, они могут использоваться при ряде заболеваний, в патогенезе которых окислительный стресс играет существенную роль.

Таким образом, соединения настоящего изобретения эффективны для по крайней мере одного из следующих применений:

a) разглаживания и предотвращения образования морщин,

b) разглаживания и предотвращения образования мимических морщин,

c) промотирования роста эпидермиса,

d) фотозащиты кожи,

e) восстановления и профилактики изменения цвета кожи,

f) восстановления и профилактики возрастных пятен,

g) ухода и профилактики сухих участков кожи,

h) восстановления и профилактики следов подтяжек,

i) восстановления и профилактики дефектов кожи,

j) ухода за кожей и поддержания ее здорового состояния,

k) восстановления и профилактики старческого ксероза,

l) ухода за кожей и предотвращения солнечных ожогов,

m) профилактики и восстановления потери коллагена,

n) улучшения текстуры кожи,

o) улучшения тонуса кожи,

p) увеличения толщины кожи,

q) уменьшения размера пор,

r) восстановления блеска кожи,

s) минимизации признаков усталости,

t) уменьшения углевой сыпи,

w) лечения телеангиэктазии и

v) улучшения эстетического внешнего вида волос и ногтей.

i) Для некосметических применений

Помимо применения соединений общей формулы (I) для косметических применений, основанных на их AGE-разрушающей/AGE-ингибирующей и удаляющей свободные радикалы активности, последний тип активности данных соединений можно использовать для борьбы с окислительным стрессом для эффективного управления болезненными состояниями.

Перечисленные выше в таблице соединения обладают in vitro активностью удаления свободных радикалов (антиоксиданты). Чрезмерное продуцирование реакционноспособных окисляющих разновидностей свободных радикалов (ROS) приводит к окислительному стрессу. Следовательно, данные молекулы были бы очень эффективными для уменьшения окислительного стресса благодаря их способности улавливать ROS. Сообщается, что антиоксиданты (поглотители свободных радикалов) являются эффективными при регулировании различных заболеваний, связанных с окислительным стрессом, выбранных из группы, включающей:

1) Нейродегенеративные заболевания

(a) Болезнь Альцгеймера

(b) Болезнь Паркинсона

(c) Болезнь Хантингтона

(d) Заболевание двигательного нейрона

(e) Заболевание приона

2) Диабет и сосудистые осложнения при диабете

3) Кишечные заболевания

(a) Ишемия кишечника

(b) Лучевой энтерит

(c) Воспалительное заболевание кишечника

(d) Рак желудка и ободочной и прямой кишки

4) Заболевания печени

(a) Алкогольное заболевание печени

(b) Хронический гепатит C

5) Рак

(a) Рак легких

(b) Рак ободочной и прямой кишки

(c) Рак шейки матки

(d) Рак молочной железы

(e) Злокачественная меланома

6) Заболевания сердца

(a) Атеросклероз

(b) Инфаркт миокарда

(c) Ишемический удар

(d) Эндотелиальная дисфункция

7) Офтальмологические заболевания

(a) Образование катаракты

(b) Дегенерация желтого пятна

8) ВИЧ-заболевание

9) Заболевания дыхательных путей

(a) Хроническое обструктивное заболевание легких (COPD)

(b) Астма

10) Заболевания почек

(a) Гломелуронефрит

(b) Острая почечная недостаточность

Получение соединений по настоящему изобретению

Ниже приведен одни возможный неограничивающий способ получения соединений настоящего изобретения.

Соединения настоящего изобретения могут быть получены в соответствии со следующими стадиями:

Стадия-1: Образование 1,3-дикетосоединения.

Стадия-2: Реакция циклизации.

Стадия-3: Реакция кватернизации.

В следующих примерах дается способ получения конкретных соединений изобретения, перечисленных выше в таблице 1.

Стадия-1: Образование 1,3-дикетосоединения

Способ 1

1,3-Дикетосоединение может быть получено взаимодействием незамещенных/замещенных ацетилпиридинов с алкилариловыми сложными эфирами в подходящем основании

4-(3,5-диметил-пиразол-1-ил)-1-пиридин-3-ил-бутан-1,3-дион

К суспензии трет-бутоксида калия (16, 5 г, 0,147 моля) в сухом ТГФ, т.e. тетрагидрофуране (150 мл), при 5-10°C в атмосфере азота добавляли смесь 3-ацетилпиридина (18 г, 0,148 моля) и этил 3,5-диметилпиразолилацетата, разбавленную ТГФ (100 мл). Затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (30°C) в течение 6 часов. Затем реакционную смесь выливали в ледяную воду и рН доводили до ˜ 4,0 уксусной кислотой и эстрагировали этилацетатом (4 × 250 мл). Объединенный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия и наконец органический слой промывали водой и сушили над сульфатом натрия. Этилацетат концентрировали в вакууме при 50°C, получая неочищенный продукт. Последующее растирание шпателем в диэтиловом эфире давало твердый продукт. Отделившееся твердое вещество отфильтровывали и сушили, получая целевой продукт.

Выход: 12,0 г.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 8,95 (1H, с), 8,75-8,73 (1H, д), 8, 11-8,08 (1H, м), 7,42-7,39 ( 1H, м), 5,95 ( 1H, с ), 5,78 (1H, с), 4,89 (2H, с), 2,28 (3H, с), 2,19 (3H, с).

Масс-спектр (m/z): 258, 259.

ИК (KBr см^-1): 2924, 1621, 1557, 1455.

Способ 2

Альтернативно, 1,3-дикетосоединение может быть получено взаимодействием незамещенных/замещенных ариловых сложных эфиров с незамещенными/замещенными арилметилкетонами в подходящем основании.

Получение 1-фенил-3-хинолин-3-ил-пропан-1,3-диона

Раствор этил-3-хинолята (0,50 г, 0,0025 моля) и ацетофенона (0,30 г, 0,0025 моля) доабвляли к охлаждаемой льдом суспензии трет-бутоксида калия в ТГФ (5,0 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, подкисляли разбавленной уксусной кислотой (10%). Полученное твердое вещество отфильтровывали, сушили на воздухе, перекристаллизовывали из кипящего этилацетат, получая требуемый продукт в виде окрашенного бледно-желтого твердого вещества.

Выход: 0,20 г.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,58 (1H, с), 9,23 (1H, с), 8,25-8,13 (4H, м), 7,94 (1H, т), 7,77-7,62 (5H, м).

Масс-спектр (m/z): 272.

Стадия-2: Реакция циклизации

3-[3-{(3,5-Диметилпиразол-1-илметил)-1-фенил}пиразол-5-ил]пиридин

К перемешиваемому охлажденному раствору 4-(3,5-диметилпиразол-1-ил)-l-пиридин-3-ил-бутан-1,3-диона (0,8 г, 0,003 моля) в метаноле (30 мл) медленно добавляли фенилгидразин (0,6 г, 0,005 моля) в метаноле (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (30°C) в течение 3 часов и конденсировали при пониженном давлении, получая неочищенный маслянистый продукт. Сырой продукт очищали на колонке с силикагелем с использованием смеси этилацетат:гексан (1:1) в качестве элюента, получая требуемый продукт в виде желтого твердого вещества.

Выход: 0,6 г.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 8,52-8,50 (1H, д), 8,42 (1H, с), 7,59-7,56 (1H, м), 7,45-7,34 (4H, м), 7,28-7,26 (2H, м), 6,57 (1H, с), 5,83 (1H, с), 5,23 (2H, с), 2,31 (3H, с), 2,09 (3H, с).

Масс-спектр (m/z): 330, 331, 332.

3-[3-(3,5-Диметил-пиразол-1-ил-метил)пиразоле-5-ил]пиридин

К перемешиваемому охлажденному раствору 4-(3,5-диметилпиразол-1-ил)-1-пиридин-3-илбутан-1,3-диона (2,5 г, 0,0097 моля) в метаноле (70 мл) медленно добавляли гидразингидрат (3,0 мл, 0,06 моля). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (30°C) в течение 3 часов и концентрировали при пониженном давлении, получая маслянистое вещество. Добавляли охлажденную воду и реакционную смесь затирали шпателем, получая твердое вещество. Отделившееся твердое вещество отфильтровывали и перекристаллизовывали из метанола, получая целевой продукт.

Выход: 1, 35г.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 8,98-8,95 (1H, д), 8,50-8,48 (1H, д), 8,11 (1H, с), 7,45-7,40 (1H, д), 6,66-6,61 (1H, д), 5,81 (1H, с), 5,21-5,14 (2H, д), 2,28 (3H, с), 2,07 (3H, с).

Масс-спектр (m/z): 254, 255.

3-[3-{(3,5-Диметил-пиразол-1-илметил)-1-циклогексил}пиразол-5-ил]пиридин

К охлажденному раствору трифторуксусной кислоты (22,2 г, 0,20 моля) добавляли 1-(трет-бутоксикарбонил)циклогексилгидразин (5,0 г, 0,0236 моля) и перемешивали при комнатной температуре (30°C) в течение 30 минут. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный маслянистый продукт. К неочищенному продукту добавляли воду (10 мл) и нейтрализовали насыщенным раствором бикарбоната натрия. Нейтрализованный раствор экстрагировали этилацетатом (3×75 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали в вакууме, получая неочищенный маслянистый продукт (2,50 г).

Далее маслянистый продукт (2,50 г, 0,022 моля), растворенный в метаноле (10 мл), медленно добавляли к раствору 4-(3,5-диметил-пиразол-1-ил)-1-пиридин-3-ил-бутан-1,3-диона (2, 0 г, 0,0078 моля) в метаноле (20 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (30°C) в течение 7 часов, после чего концентрировали при пониженном давлении, получая маслянистый продукт коричневого цвета. Очистку сырого продукта проводили колоночной хроматографией на силикагеле с использованием 25% этилацетата в гексане в качестве элюента, получая требуемый продукт в виде белого твердого вещества.

Выход: 0,96 г.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 8,65-8,63 (1H, м), 7,85-7,82 (1H, м), 7,54-7,51 (1H, м), 6,15 (1H, с), 5,8 (IH, с), 5,13 (2H, с), 3,98 (1H, м), 2,27 (3H, с), 2,07 (3H, с), 1,91-1,85 (4H, м), 1,78-1,75 (2H, м), 1,62-1,559, (1H, м), 1,27-1,16 (3H, м).

Масс-спектр (m/z): 336, 337, 338.

Синтез 3-[3-(фенилметил)изоксазол-5-ил]пиридина.

Смесь фенилникотиноилацетона 0,500 г (0,0021 моль), изопропилового спирта (IPA) (5 мл) и гидроксиламина в виде свободного основания (в 7 мл метанола) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней (72 часа.). Реакционную смесь концентрировали досуха и очищали колоночной хроматографией с использованием смеси этилацетата и гексана (3:1). Очищенное соединение (оксим) растворяли в IPA (10 мл) добавляли к нему 2 н. HCl (4 капли). Реакционную смесь нагревали при кипении с обратным холодильником в течение 8 часов. Наконец, реакционную смесь концентрировали досуха, получая целевое соединение в виде бледно-желтого твердого вещества.

Выход: 0,216 г.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,01 (1H, с), 8,69 (1H, д), 8,20 (1H, д), 7,56 (м, 1H), 7,36-7,30 (м, 5H), 6,46 (1H, с), 4,11 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 237 (М⁺ +1).

Стадия-3: Реакция кватернизации

Кватернизацию замещенного пиридина можно проводить с использованием реагента кватернизации в спирте и/или высококипящем растворителе при кипении с обратным холодильником в течение 6-48 часов с получением, при необходимости, целевого соединения.

Пример 2.

Бромид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[3-{1-(3,5-диметилпиразол-1-ил)метил}пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 4).

К суспензии 3-[3-(3,5-диметилпиразол-1-ил-метил)пиразол-5-ил]пиридина (0,5 г, 0,002 моля) в IPA (35 мл) добавляли α-бром-2-ацетилтиофен (0,46 г, 0,0026 моля). Реакционную смесь нагревали при кипении с обратным холодильником в течение 6 часов. Затем охладили смесь до комнатной температуры (30°C). Отделившееся твердое вещество отфильтровывали и прекристаллизовывали с использованием смеси метанола и этилацетата, получая требуемое соединение в виде белого твердого вещества.

Выход: 0,51 г.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,66 (1H, с), 9,49 (1H, с), 9,03-9,01 (1H, д), 8,89-8,88 (1H, д), 8,26-8,21 (3H, м), 7,43-7,41 (1H, т), 6,77 (1H, с), 6,39 (2H, с), 5,84 (1H, с), 5,27 (2H, с), 2,27 (3H, с), 2,08 (3H, с).

Масс-спектр (m/z): 378, 379, 380.

ИК (KBr, см^-1): 1676, 1638, 1591.

Соединения изобретения, идентифицированные по их физико-химическим данным, приведенным ниже в примерах 3-57, были получены в соответствии с вышеуказанным способом синтеза.

Пример 3.

Бромид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 1).

Выход: 51 %.

ИК (KBr, см^-1): 1656, 1637, 1572.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,44 (1H, с), 9,46 (1H, с), 8,98 (1H, д), 8,86 (1H, д), 8,24 (3H, м), 7,41 (1H, т), 7,34-7,30 (5H, м), 6,69 (1H, с), 6,38 (2H, с), 4,06 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 360, 361, 362, 363.

Пример 4.

Бромид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(5-фенилметил)оксазол-3-ил]пиридиния (Соединение 2).

Выход: 36%.

ИК (KBr, см^-1): 1747, 1671, 1456.

¹ H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,65 (1H, с), 9,12-9,08 (2H, м) 8,39 (1H, т) 8,26-8,23 (2H, м), 7,42 (1H, м) 7,38-7,33 (5H, м), 7,23 (1H, с) 6,40 (2H, с), 4,15 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 361, 362, 363.

Пример 5.

Дибромид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[3-{1-(2-тиен-2'-ил)-2-оксоэтилпиридиний-4-тио}метилпиразол-5-ил]пиридиния. (Соединение 3).

Выход: 71%.

ИК (KBr, см^-1): 1666, 1500, 1451.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,81 (1H, с), 9,54 (1H, с), 9,03-9,01 (1H, д), 8,93-8,91 (1H, д), 8,71-8,69 (2H, д), 8,30-8,13 (7H, м), 7,44-7,39 (2H, м), 7,09 (1H, с), 6,42 (2H, с), 6,21 (2H, с), 4,84 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 517, 518, 519, 520.

Пример 6.

Бромид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[{3-фенилметил}-1-{2-пиридил}пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 5).

Выход: 22%.

ИК (KBr, см^-1): 1671, 1585, 1550.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,24 (1H, с), 8,96-8,95 (1H, д), 8,24-8,21 (2H, м), 8,19-8,18 (1H, д), 8,15-8,14 (1H, д), 8,07-8,02 (1H, м), 7,97-7,95 (1H, д), 7,41-7,31 (6H, м), 7,25-7,22 (1H, м), 6,76 (1H, с), 6,32 (2H, с), 4,08 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 437, 438, 440.

Пример 7.

Бромид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[3{(3,5-диметилпиразол-1-ил)метил-1-(2-пиридил)}пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 6).

Выход: 31%.

ИК (KBr, см^-1): 3418, 3069, 2929, 1670, 1507, 1470.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,25 (1H, с), 8,97-8,95 (1H, д), 8,61-8,59 (1H, д), 8, 24-8,16 (4H, м), 8,09-8,05 (1H, м), 7,94-7,92 (1H, д), 7,42-7,39 (2H, м), 6,72 (1H, с), 6,33 (2H, с), 5,85 (1H, с), 5,31 (2H, с), 2,33 (3H, с), 2,08 (3H, с).

Масс-спектр (m/z): 455, 456, 457, 458.

Пример 8.

Бромид 1-[2-(циклопропиламино)-2-оксоэтил]-3-[3-(3,5-диметилпиразол-1-ил)метил}пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 7).

Выход: 59%.

ИК (KBr, см^-1): 3373, 3064, 1667, 1577.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,69 (1H, с), 9,41 (1H, с), 8,95 (1H, д), 8,55 (1H, д), 8,54 (1H, д), 8,16 (1H, т), 6,80 (1H, с), 5,84 (1H, с), 5,39 (2H, с), 5,26 (2H, с), 3,89-3,82 (1H, м), 2,27 (3H, с), 2,08 (3H, с), 1,12 (4H, д).

Масс-спектр (m/z): 353, 354, 355.

Пример 9.

Бромид 1-{2-(4-нитро-2-тиенил)-2-оксоэтил}-3-[3-{(3,5-диметилпиразол-1-ил)метил}пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 8).

Выход: 24%.

ИК (KBr, см^-1):

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,70 (1H, с), 9,47 (1H, с), 9,30 (1H, с), 9,03 (1H, д), 8,87-8,85 (2H, м), 8,26 (1H, т), 6,77 (1H, с), 6,42 (2H, с), 5,84 (1H, с), 5,27 (2H, с), 2,27 (3H, с), 2,07 (3H, с).

Масс-спектр (m/z): 423, 424.

Пример 10.

Хлорид 1-(2-циклопропиламино-2-оксоэтил)-3-[(3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 9).

Выход: 36%.

ИК (KBr, см^-1): 3653, 3436, 3061, 1674, 1567, 1479.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,46 (1H, с), 9,37 (1H, с), 8,93 (1H, д), 8,82 (1H, д), 8,72-8,71 (1H, д), 8,19-8,14 (1H, т), 7,36-7,23 (5H, м), 6,72 (1H, с), 5, 38 (2H, с), 4,06 (2H, с), 2,71-2,66 (1H, м), 0,70-0,66 (2H, м), 0,50-0,46 (2H, м).

Масс-спектр (m/z): 333, 334, 335.

Пример 11.

Дибромид 3, 5-бис-[1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)пиридиний-3-ил]пиразола (Соединение 10).

Выход: 34%.

ИК (KBr, см^-1): 3425, 3088, 2927, 1673, 1505, 1407.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,09-9,02 (4H, м), 8,41 (2H, ушир.с), 8,27-8,26 (4H, м), 7,66 (1H, с), 7,45-7,43 (2H, т), 6,47 (4H, с).

Масс-спектр (m/z): 471, 472, 473, 474.

Пример 12.

Хлорид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(l-фенил-3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 11).

Выход: 42%.

ИК (KBr, см^-1): 3302, 3029, 1672, 1503.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,20 (1H, с), 8,94-8,93 (1H, д), 8,24-8,20 (3H, м), 8,16-8,13 (1H, м), 7,50-7,31 (10H, м), 7,25-7,23 (1H, м), 6,73 (1H, с), 6,32 (2H, с), 4,06 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 436, 437, 438, 439, 440.

Пример 13.

Хлорид 1-(2-(5-метил-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[(3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 12).

Выход: 44%.

ИК (KBr, см^-1): 3745, 1654, 1518, 1455.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,52 (1H, с), 9,48 (1H, с), 8,99-8,97 (1H, д), 8,90-8,88 (1H, д), 8,24-8,21 (1H, т), 8,04-8,03 (1H, д), 7,35-7,22 (5H, м), 7,14-7, 13 (1H, д), 6,70 (1H, с), 6,36 (2H, с), 4,07 (2H, с), 2,59 (3H, с).

Масс-спектр (m/z): 374, 375, 376, 377.

Пример 14.

Хлорид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[1-фенил-3-{(3,5-диметилпиразол-1-ил)метил)}пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 13).

Выход: 27%.

ИК (KBr, см^-1):

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,22 (1H, с), 8,95-8,93 (1H, д), 8,25-8,21 (3H, м), 8,16-8,12 (1H, м), 7,64-7,60 (1H, м), 7,50-7,46 (2H, м), 7,42-7,36 (3H, м), 6,71 (1H, с), 6,33 (2H, с), 5,84 (1H, с), 5,28 (2H, с), 2,29 (3H, с), 2,08 (3H, с).

Масс-спектр (m/z): 454, 455, 456, 457, 458.

Пример 15.

Бромид 1-(2-фенил-2-оксоэтил)-3-[(3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 14).

Выход: 14%.

ИК (KBr, см^-1): 3746, 3099, 1691, 1518.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,44 (1H, с), 9,45 (1H, с), 9,01-8,99 (1H, д), 8,85-8,84 (1H, д), 8,26-8,23 (1H, т), 8,07-8,06 (2H, д), 7,82-7,78 (1H, т), 7,69-7,65 (2H, т), 7, 36-7,21(5H, м), 6,68 (1H, с), 6,45 (2H, с), 4,07 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 354, 355.

Пример 16.

Хлорид 1-(2-циклопропиламино-2-оксоэтил)-3-[(1-фенил-3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 15).

Выход: 7%.

ИК (KBr, см^-1): 3395, 3026, 1689, 1503.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,15 (1H, с), 8,86 (1H, с), 8,71 (1H, с), 8,14-8,05 (2H, м), 7,44-7,23 (10H, м), 6,74 (1H, с), 5,31 (2H, с), 4,05 (2H, с), 2,66 (1H, с), 0,68-0,67 (2H, с), 0,46 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 409, 410, 411, 412.

Пример 17.

Бромид 1-(2-(4-бензил-1-пиперидинил)-2-оксоэтил)-3-[(3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 16).

Выход:

ИК (KBr, см^-1): 3060, 1656, 1594.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,84 (1H, с), 9,45 (1H, с), 8,98 (1H, д), 8,83 (1H, д), 8,21 (1H, т), 7,35-7,27 (4H, м), 7,23-7,19 (3H, м), 7,09-7,04 (3H, м), 6,98 (1H, т), 5,83-5,73 (2H, м), 5,21 (2H, с), 4,29 (1H, д), 3,75 (1H, д), 3,17-3,0 (1H, м), 2,69-2,63 (1H, м), 2,56 (2H, д), 1,99-1,84 (1H, м), 1,72-1,60 (2H, м), 1,36-1,28 (1H, м), 1,10-1,04 (1H, м).

Масс-спектр (m/z): 467, 468, 469.

Пример 18.

Хлорид 1-(2-фенил-2-оксоэтил)-3-[(3-(3,5-диметилпиразол-1-ил)метил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 17).

Выход: 24%.

ИК (KBr, см^-1); 3049, 2994, 1692, 1552.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,76 (1H, с), 9,50 (1H, с), 9,03-9, 02 (1H, д), 8,90-8,88 (1H, д), 8,26 (1H, ушир.с), 8,08-8,06 (2H, д), 7,81-7,78 (1H, м), 7,68-7,65 (2H, м), 6,75 (1H, с), 6,49 (2H, с), 5,83 (1H, с), 5,26 (2H, с), 2,26 (3H, с), 2,06 (3H, с).

Масс-спектр (m/z): 372, 373, 374.

Пример 19.

Хлорид 1-(2-(5-метил-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[(3-(3,5-диметилпиразол-1-ил)метил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 18).

Выход: 34%.

ИК (KBr, см^-1): 3322, 2923, 1659, 1552.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,71 (1H, с), 9,48 (1H, с), 9,01-8,99 (1H, д), 8,89-8,87 (1H, д), 8,23 (1H, ушир.с), 8,04-8,03 (1H, д), 7,13 (1H, с), 6,76 (1H, с), 6,33 (2H, с), 5,83 (1H, с), 5,26 (2H, с), 2,58 (3H, с), 2,26 (3H, с), 2,07 (3H, с).

Масс-спектр (m/z): 392, 393, 394, 395.

Пример 20.

Хлорид 1-(2-фенил-2-оксоэтил)-3-[(1-фенил-3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 19).

Выход: 63%.

ИК (KBr, см^-1): 3351, 3235, 3030, 1694, 1504.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,17 (1H, с), 8,93-8,91 (1H, д), 8,25-8,23 (1H, д), 8,17-8,14 (1H, т), 8,06-8,04 (2H, д), 7,81-7,78 (1H, т), 7,68-7,64 (2H, т), 7,49-7,44 (3H, м), 7,38-7,30 (6H, м), 7,24-7,20 (1H, м), 6,72 (1H, с), 6,40 (2H, с), 4,05 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 430, 431, 432.

Пример 21.

Хлорид 1-(2-(5-метил-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[(3-(2-циклогексилэтил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 20).

Выход: 30%.

ИК (KBr, см^-1): 3072, 2920, 1658, 1519, 1450.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,33 (1H, с), 9,52 (1H, с), 8,99-8,97 (1H, д), 8,92-8,90 (1H, д), 8,26-8,22 (1H, т), 8,06-8,05 (1H, д), 7,14 (1H, с), 6,76 (1H, с), 6,40 (2H, с), 2,71-2,67 (2H, т), 2,59 (3H, с), 1,75-1,63 (5H, м), 1,57-1,52 (2H, кв), 1,24-1,16 (4H, м), 0,95-0,90 (2H, м).

Масс-спектр (m/z): 394, 395, 396.

Пример 22.

Хлорид 1-(2-циклопропиламино-2-оксоэтил)-3-[(3-(2-циклогексилэтил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 21).

Выход: 39%.

ИК (KBr, см^-1): 3174, 2923, 1682, 1548.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,25 (1H, с), 9,40 (1H, с), 8,94-8,91 (1H, д), 8,85-8,84 (1H, д), 8,60-8,58 (1H, д), 8,18-8,15 (1H, м), 6,79 (1H, с), 5,43 (2H, с), 3,90-3,85 (1H, м), 2,71-2,67 (2H, т), 1,75-1,63 (5H, м), 1,58-1,52 (2H, кв), 1,24-1,12 (8H, м), 0,96-0,88 (2H, м).

Масс-спектр (m/z): 355, 356, 357.

Пример 23.

Хлорид 1-(2-фенил-2-оксоэтил)-3-[(3-(2-циклогексилэтил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 22).

Выход: 65%.

ИК (KBr, см^-1): 3059, 2924, 1698, 1519.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,26 (1H, с), 9,49 (1H, с), 9,00-8,98 (1H, д), 8,88-8,86 (1H, д), 8,28-8,24 (1H, м), 8,09-8,07 (2H, д), 7,83-7,79 (1H, т), 7,70-7,66 (2H, т), 6,75 (1H, с), 6,50 (2H, с), 2,69 (2H, т), 1,75-1,61 (5H, м), 1,58-1,52 (2H, кв), 1,27-1,08 (4H, м), 0,96-0,88 (2H, м).

Масс-спектр (m/z): 374, 375, 376.

Пример 24

Хлорид 1-(2-циклопропиламино-2-оксоэтил)-3-[(1-циклогексил-3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 23).

Выход: 9%.

ИК (KBr, см^-1): 3165, 2994, 1662, 1500, 1452.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,11 (1H, с), 9,01-9,00 (1H, д), 8,69-8,67 (1H, д), 8,60-8,58 (1H, д), 8,27-8, 24 (1H, м), 7,33-7,29 (4H, м), 7,22-7,19 (1H, м), 6,38(1H,с), 5,42 (2H, с), 4,08-4,02 (1H, м), 3,96 (2H, с), 3,91-3,85 (1H, м), 1,89 (4H, ушир.с), 1,78-1,75 (2H, д), 1,64-1,61 (1H, д), 1,41 (2H, ушир.с), 1,21-1,16 (1H, м), 1,13-1,12 (4H, д).

Масс-спектр (m/z): 417, 418, 419.

Пример 25

Хлорид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 24).

Выход: 18%.

ИК (KBr, см^-1): 3060, 2957, 1665, 1595, 1491.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,82 (1H, с), 9, 55 (1H, с), 9,06-9,04 (1H, д), 8,93-8,91 (1H, д), 8,30-8,22 (3H, м), 7,44-7,43 (1H, м), 7,35-7,31 (2H, м), 7,08-7, 05 (3H, м), 7,01-6,97 (1H, м), 6,43 (2H, с), 5,22 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 376, 377, 378.

Пример 26

Хлорид 1-{2-(1-адамантиламино-2-оксоэтил)}-3-[(3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 25).

Выход: 27%.

ИК (KBr, см^-1): 3060, 2908, 1679, 1554.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,45 (1H, с), 9,35 (1H, с), 8,91 (1H, д), 8,80 (1H, д), 8,20 (1H, с), 8,14 (1H, т), 7,35-7,31 (5H, м), 6,74 (1H, с), 5,36 (2H, с), 4, 07 (2H, с), 2,02-1,95 (9H, м), 1, 62 (6H, с).

Масс-спектр (m/z): 427, 428, 429.

Пример 27

Бромид 1-(2-фенил-2-оксоэтил)-3-[{3-(3, 5-диметилпиразол-1-ил)метил)}1-фенилпиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 26).

Выход: 47%.

ИК (KBr, см^-1): 3410, 3035, 2943, 1693, 1500.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,19 (1H, с), 8,93-8,91 (1H, д), 8,25-8,23 (1H, д), 8,18-8,14 (1H, м), 8,07-8,05 (2H, м), 7,82-7,79 (1H, м), 7,69-7,64 (2H, м), 7,53-7,47 (3H, м), 7,40-7,37 (2H, м), 6,71 (1H, с), 6,40 (2H, с), 5,84-5,83 (1H, с), 5,28 (2H, с), 2,29 (3H, с), 2,08 (3H, с).

Масс-спектр (m/z): 448, 449.

Пример 28

Бромид 1-(2-(4-нитро-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[(1-циклогексил-3-(3,5-диметилпиразол-1-ил)метил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 27).

Выход: 56%.

ИК (KBr, см^-1): 3421, 3032, 2935, 1688, 1541.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,30 (1H, д), 9,14 (1H, с), 9,04-9,02 (1H, д), 8,87-8,86 (1H, д), 8,79-8,77 (1H, д), 8,38-8,35 (1H, м), 6,46 (2H, с), 6,36 (1H, с), 5,82 (1H, с), 5,18 (2H, с), 4,15-4,10 (1H, м), 2,25 (3H, с), 2,07 (3H, с), 1,90-1,84 (4H, м), 1,81-1,77 (2H, д), 1,66-1,63 (1H, д), 1,38-1,19 (3H, м).

Масс-спектр (m/z): 505, 506, 507.

Пример 29

Бромид 1-(2-(4-нитро-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3 [(3-(2-циклогексилэтил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 28).

Выход: 48%.

ИК (KBr, см^-1): 3078, 3005, 1695, 1541, 1339.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,24 (1H, с), 9,48 (1H, с), 9,30 (1H, с), 9,0 (1H, д), 8,87-8,84 (2H, м), 8,27 (1H, т), 6,76 (1H, с), 6,46 (2H, с), 2,69 (2H, т), 1,99-1,61 (5H, м), 1,58-1,52 (2H, кв), 1,26-1,12 (4H, м), 0,96-0,87 (2H, м).

Масс-спектр (m/z): 425.

Пример 30

Хлорид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(1-фенил-3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 29).

Выход: 16%.

ИК (KBr, см^-1): 3347, 3022, 2906, 1682, 1503.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,3 (1H, с), 9,0 (1H, с), 8,29-8,24 (4H, м), 7,6-7,3 (8H, м), 7,0 (3H, с), 6,97 (1H, с), 6,38 (2H, с), 5,2 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 452, 453, 454.

Пример 31

Бромид 1-(2-(4-нитро-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[(1-фенил-3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 30).

Выход: 23%.

ИК (KBr, см^-1): 3092, 3003, 2932, 1687, 1509.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,298 (1H, с), 9,16 (1H, с), 8,917 (1H, д), 8,85-8,84 (1H, м), 8,54 (1H, д), 8,17-8,14 (1H, м), 7,50-7,45 (3H, м), 7, 39-7,31 (6H, м), 7,25-7,22 (1H, м), 6,7 (IH, с), 6,357 (2H, с), 4,0 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 481, 482.

Пример 32

Хлорид 1-(2-циклопропиламино-2-оксоэтил)-3-[(3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 31).

Выход: 34%.

ИК (KBr, см^-1): 3647, 3420, 3227, 2958, 1675.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,82 (1H, с), 9,46 (1H, с), 8,98 (1H, с), 8,87 (1H, д), 8,77 (1H, м) (1H, д), 8,207 (1H, т), 7,33 (2H, т), 7,1 (1H, с), 7,059 (2H, д), 6,98 (1H, т), 5,4 (2H, с), 5,21 (2H, с), 2,7-2,68 (1H, м), 0,715-0,685 (2H, м), 0,55-0,50 (2H, м).

Масс-спектр (m/z): 349, 350, 351.

Пример 33

Хлорид 1-(2-циклопропиламино-2-оксоэтил)-3-[(1-циклогексил-3-(3,5-диметилпиразол-1-ил)метил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 32).

Выход: 41%.

ИК (KBr, см^-1 ): 3425, 3174, 2938, 1658, 1500.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,1 (1H, с), 9,02 (1H, д), 8,88 (1H, д), 8,86 (1H, д), 8,273 (1H, т), 6,36-6,34(1H,с), 5,8 (1H,с), 5,4 (2H,с), 5,18 (2H, с), 4,13-4,079 (1H, м), 2,7-2,68 (1H, м), 2,26 (3H, с), 2,074 (3H, с), 1,99-1,75 (6H, м), 1,64-1,61 (1H, м), 1,34-1,31 (2H, м), 1,24-1,17 (1H, м), 0,70-0,69 (2H, м), 0, 50-0,49 (2H, м).

Масс-спектр (m/z): 433, 434, 435.

Пример 34

Бромид 1-(2-(5-хлор-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[(3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 33).

Выход: 74%.

ИК (KBr, см^-1): 2853, 2682, 1674, 1594.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,8 (1H, с), 9,53 (1H, с), 9,03 (1H, д), 8,89 (1H, д), 8,3-8,26 (1H, м), 8,16(1H, д), 7,5 (1H, д), 7,33 (2H, т), 7,08 (3H, т), 6,98 (1H, т), 6,38 (2H, с), 5,2 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 410, 412, 413.

Пример 35

Хлорид 1-(2-фенил-2-оксоэтил)-3-[(1-фенил-3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 34).

Выход: 25%.

ИК (KBr, см^-1): 3020, 2905, 1701, 1634, 1595.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,23 (1H, с), 8,96 (1H, д), 8,33 (1H, д), 8,21 (1H, т), 8,07 (2H, д), 7,81 (1H, т), 7,68 (2H, т), 7,51-7,50 (3H, м), 7, 41 (2H, д), 7,32 (2H, т), 7,08-7,06 (3H, м), 6,97 (1H, т), 6,42 (2H, с), 5,21 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 446, 447.

Пример 36

Хлорид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(1-циклогексил-3-(3,5-диметилпиразол-1-ил) метил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 35).

Выход: 26%.

ИК (KBr, см^-1): 3422, 2937, 1678, 1505, 1251.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,17 (1H, с), 9,05 (1H, д), 8,76 (1H, д), 8,35 (1H, т), 8,25-8,24 (2H, м), 7, 42 (1H, т), 6,41 (2H, с), 6,36 (1H, с), 5,85 (1H, с), 5,18 (2H, с), 4,13-4,10 (1H, м), 2,25 (3H, с), 2,06 (3H, с), 1,99-1,86 (4H, м), 1,83-1,76 (2H, м), 1,66-1,63 (1H, м), 1,35-1,25 (2H, м), 1,22-1,16 (1H, м).

Масс-спектр (m/z): 460, 461, 462.

Пример 37

Бромид 1-(2-циклопропиламино-2-оксоэтил)-3-[(1-фенил-3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 36).

Выход: 9%.

ИК (KBr, см^-1): 3200, 1682, 1595.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,29 (1H, с), 9,06 (1H, с), 8,97 (1H, д), 8,21 (1H, д), 8,10 (1H, т), 7,48 (3H, с), 7,39-7,18 (5H, м), 7,14-7,07 (2H, м), 6,97 (1H, т), 5,43 (2H, с), 5,20 (2H, с), 2,68-2,62 (1H, м), 0,70-0,62 (2H, м), 0,50-0,44 (2H, м).

Масс-спектр (m/z): 425, 426, 427.

Пример 38

Бромид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(1-фенил-3-(2-циклогексилэтил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 37).

Выход: 31%.

ИК (KBr, см^-1): 3423, 3324, 2922, 1674, 1506.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,25 (1H, с), 8, 90 (1H, д), 8,27-8,23 (3H, м), 8,19-8,15 (1H, м), 7,49-7,41 (4H, м), 7,35 (2H, д), 6,8 (1H, с), 6,37 (2H, с), 2,69 (2H, т), 1,77 (2H, д), 1,69-1,55 (5H, м), 1,32 (1H, м), 1,26-1,12 (3H, м), 0,97-0,89 (2H, м).

Масс-спектр (m/z): 456, 457, 458.

Пример 39

Хлорид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(1-циклогексил-3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 38).

Выход: 18%.

ИК (KBr, см^-1): 3396, 2934, 1670, 1638, 1594.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,25 (1H, с), 9,10 (1H, д), 8,82 (1H, д), 8,39 (1H, т), 8,26-8,25 (2H, м), 7,43 (1H, т), 7,30 (2H, т), 7,04 (2H, д), 6,95 (1H, т), 6,75 (1H, с), 6,46 (2H, с), 5,09 (2H, с), 4,20-4,15 (1H, м), 1,93-1,77 (6H, м), 1,67 (1H, д), 1,36-1,20 (3H, м).

Масс-спектр (m/z): 458, 459, 460.

Пример 40

Гидрохлорид 3-[(3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридина (Соединение 39).

Выход: 73%.

ИК (KBr, см^-1): 3056, 1611, 1559.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,18 (1H, с), 8,73 (2H, д), 7,93 (1H, т), 7,35-7,22 (5H, м), 6,77 (1H, с), 4,04 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 236, 237.

Пример 41

Гидрохлорид 3-[(3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридина (Соединение 40).

Выход: 65%.

ИК (KBr, см^-1): 3035, 1601, 1562.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,25 (1H, с), 8,77 (2H, с), 7,97 (1H, т), 7, 32 (2H, т), 7,12 (1H, с), 7,05 (2H, д), 6,97 (1H, т), 5,17 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 252, 253, 254.

Пример 42

3-[(3, 5-Диметилпиразол-1-ил-метил)пиразол-5-ил]пиридин (Соединение 41).

Выход: 93%.

ИК (KBr, см^-1): 3080, 1559.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,30 (1H, ушир.с), 8,96 (1H, с), 8,49 (1H, с), 8,11 (1H, д), 7,43 (1H, ушир.с), 6,63 (1H, с), 5,81 (1H, с), 5,17 (2H, с), 2,28 (3H, с), 2,07 (3H, с).

Масс-спектр (m/z): 254, 255, 256.

Пример 43

3-[3-(2-Циклогексилэтил)-пиразол-5-ил]пиридин (Соединение 42).

Выход: 76%.

ИК (KBr, см^-1):

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 12,73 (1H, с), 8,98 (1H, с), 8,46 (1H, с), 8,11 (1H, д), 7,46-7,38 (1H, д), 6,57 (1H, с), 2,63 (2H, т), 1,75-1,60 (5H, м), 1,56-1,50 (2H, м), 1,25-1,08 (4H, м), 0,95-0,87 (2H, м).

Масс-спектр (m/z): 256, 257, 258.

Пример 44

Бромид 1-(2-нафтил-2-оксоэтил)-3-[(3-феноксиметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 43).

Выход: 30%.

ИК (KBr, см^-1): 3417, 2340, 1638, 1536, 1144.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,8 (1H, с), 9,58 (1H, с), 9,08-9,06 (1H, д), 8,95-8,93 (1H, д), 8,85 (1H, с), 8,32 (1H, т), 8,25-8,23 (1H, д), 8,18-8,16 (1H, д), 8,10-8,05 (2H, м), 7,79-7,70 (2H, м), 7,33 (2H, т), 7,10 (1H, с), 7,06-7,04 (2H, д), 6,98 (1H, т), 6,63 (2H, с), 5,23 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 420, 421.

Пример 45

Хлорид 1-(фенилметил)-3-[(3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 44).

Выход: 31%.

ИК (KBr, см^-1): 3051, 1523, 1466.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,48 (1H, с), 9,63 (1H, с), 9,05-9,03 (1H, д), 8,91-8,90 (1H, д) 8,15 (1H, т) 7,55 (2H, м), 7,45-7,43 (3H, м), 7,34-7,25 (5H, м) 6,79 (1H, с), 5, 88 (2H, с), 4,06 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 326, 327, 328.

Пример 46.

Хлорид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(3-(-1-нафтил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 45).

Выход: 22%.

ИК (KBr, см^-1): 3057, 1671, 1517.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,60 (1H, с), 9,40 (1H, с) 8,97-8,95 (1H, д), 8,86-8,85 (1H, д), 8,23-8,18 (3H, м), 8,10-8,08 (1H, д), 7,87-7,86 (1H, д), 7,55-7,44 (4H, м), 7,40 (1H, т), 6,55-6,52 (1H, с), 6,40 (2H, с), 4,54 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 410, 411, 412.

Пример 47

Хлорид 1-(2-фенил-2оксоэтил)-3-[3-(тиенил-2-ил-метил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 46).

Выход: 22%.

ИК (KBr, см^-1): 3068, 1691, 1519.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,55 (1H, с), 9,50 (1H, с), 9,01 (1H, д), 8,87 (1H, д), 8,26 (1H, т) 8,07 (2H, м), 7,81 (1H, д), 7,68 (3H, т), 7,40 (2H, м), 6,78 (1H, с), 6,49 (2H, с), 4,30 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 360, 361.

Пример 48.

Хлорид 1-(2-(5-метил-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[3-(2-фенилэтил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 47).

Выход: 24%.

ИК (KBr, см^-1): 3068, 1661, 1450.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,33 (1H, с), 9,47 (1H, с), 8,97-8,95 (1H, д), 8,87-8,86 (1H, д), 8,26-8,22 (1H, т), 8,05-8,04 (1H, д), 7,31-7,14 (6H, м), 6,78 (1H, с), 6,34 (2H, с), 2,98 (4H, с), 2,59 (3H, с).

Масс-спектр (m/z): 388, 389, 390.

Пример 49.

Хлорид 1-(2-(5-метил-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[3-(3-феноксипропил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 48).

Выход: 30%.

ИК (KBr, см^-1): 3057, 1665, 1452.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,34 (1H, с), 9,48 (1H, с), 8,99-8,97 (1H, д), 8,23 (1H, т), 8,05-8,04 (1H, д), 7,28 (1H, т), 7,15-7,14 (1H, д), 6,94-6,92 (3H, д) 6,83 (1H, с), 6,35 (2H, с), 4,02 (2H, т), 2,86 (2H, т), 2,27 (2H, т).

Масс-спектр (m/z): 418, 419, 420.

Пример 50.

Бромид 1-(изопропил)-3-[(3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 49).

Выход: 15%.

ИК (KBr, см^-1): 3418, 2364, 1648.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,43 (1H, с), 9,09-9,07 (1H, д), 8,88-8,86 (1H, д), 8,16-8,13 (1H, м), 7,36-7,14 (5H, м), 6,84 (1H, с), 4,06 (2H, с), 1,65-1,63 (6H, д).

Масс-спектр (m/z): 278, 279, 280.

Пример 51.

Хлорид 1-(2-(5-метил-2-тиенил)-2-оксоэтил)-3-[(3-фенилтиометил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 50).

Выход: 31%.

ИК (KBr, см^-1): 3365, 1650, 1452.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,58 (1H, с), 9,46 (1H, с), 8,98-8,96 (1H, д), 8, 87-8,85 (1H, д), 8,25-8,21 (1H, м), 8,04-8,03 (1H, д), 7,37-7,30 (5H, м), 7,15-7,14 (1H, д), 6,88 (1H, с), 6,32 (2H, с), 4,36 (2H, с), 2,59 (3H, с).

Масс-спектр (m/z): 406, 407, 408, 409.

Пример 52.

Хлорид 1-(2-тиен-2'-ил-2-оксоэтил)-3-[(3-(N-метил-индол-3-илметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 51).

Выход: 20%.

ИК (KBr, см^-1): 3070, 1669, 1410.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,32-9,30 (1H, м), 9,00-8,92 (2H, м), 8,77-8,76 (1H, д), 8,19-8,15 (2H, м), 8,10-8, 07 (1H, м), 7,47-7,45 (1H, д), 7,39-7,35 (3H, м) 7,19-7,10 (2H, м) 7,03-7,00 (1H, т), 6,34 (2H, с), 4,22 (1H, с), 3,79 (3H, с)

Масс-спектр (m/z): 413.

Пример 53.

Бромид 1-(2-нафтил-2-оксоэтил)-3-[(3-метил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 52).

Выход: 38%.

ИК (KBr, см^-1): 3066, 1675, 1518.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,25 (1H, с), 9,533 (1H, с) 9,02-9,0 (1H, д), 8,92-8,91 (1H, д), 8,84 (1H, с), 8,32-8,04 (5H, м), 7,79-7,70 (2H, м), 6,75 (1H, с), 6,63 (2H, с), 2,33 (3H, с).

Масс-спектр (m/z): 328, 329, 330.

Пример 54.

Хлорид 1-(2-(1, 4-бензодиоксан-6-ил-амино-2-оксоэтил)-3-[(3-фенилметил)пиразол-5-ил]пиридиния (Соединение 53).

Выход: 32%.

ИК (KBr, см^-1): 3445, 3068, 1678.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 13,45 (1H, с), 10,61 (1H, с), 9,47 (1H, с), 8,97-8,95 (1H, д), 8,91-8,89 (1H, д), 8,2 (1H, т), 7,34-7,19 (6H, м), 6,99-6,97 (1H, д), 6,84-6,82 (1H, д), 6,72 (1H, с), 5,61 (2H, с), 4,21 (4H, с), 4,06 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 427, 428, 429.

Пример 55.

Хлорид 1-(2-тиен-2-ил-2-оксоэтил)-3[(3-фенил)пиразол-5-ил]-5-бромпиридиния (Соединение 54).

Выход: 31%.

ИК (KBr, см^-1)

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,63 (1H, с), 9,36 (1H, с), 9,33 (1H, с), 8,27-8,24 (2H, м), 7,81-7,79 (2H, д), 7,57-7,52 (3H, м), 7,46-7,42 (2H, м), 6,40 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 426, 427, 428.

Пример 56.

Хлорид 1-(2-тиен-2-ил)-2-оксоэтил)-3-[(3-фенил)пиразол-5-ил]хинолиния (Соединение 55).

Выход: 26%.

ИК (KBr, см^-1)

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 10,18 (1H, с), 9,81 (1H, с) 8,45-8,40 (3H, м), 8,29-8,28 (1H, д), 8,21 (1H, т), 8,08 (1H, т), 7,87-7,85 (2H, д), 7, 57-7,55 (3H, м), 7,50-7,45 (2H, м), 6,96 (2H, с).

Масс-спектр (m/z): 396, 397, 398.

Пример 57.

3-[(3-фенил)пиразол-5-ил)]хинолин (Соединение 56).

Выход: 70%.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ: 9,45 (1H, ушир.с), 8,75 (1H, с), 8,05 (2H, д), 7,87 (2H, ушир.с), 7,77 (1H, т), 7,65 (1H, т), 7,55-7,45 (3H, м), 7,39 (1H, ушир.с).

Масс-спектр (m/z): 272 (М⁺+1)

Косметический препарат

Препарат для использования при косметическом нанесении может содержать один или несколько концентратов соединения в косметически приемлемом носителе. Количество соединения по изобретению предпочтительно будет колебаться в диапазоне между 0,005 и 50% по весу (если не указано другого, количество всех фракций выражено в весовых процентах), более предпочтительно между 0,20% и 5,0% вес./вес. Композицию следует применять основываясь на требованиях для пораженной площади.

Подходящие системы переноса или носители для хранения и/или доставки нового соединения по данному изобретению могут быть разработаны в виде лосьона, жидкости, мази, гелей, кремов, спрея, припарки или других форм, и предпочтительно они будут иметь липофильный, гидрофильный или амфифильный характер.

Подходящие носители включают вазелин, триглицериды, различные сложные эфиры, жирные спирты, жирные кислоты, алкиленгликоли и этанол, среди которых полиэтиленглкиоль и полипропиленгликоль являются наиболее предпочтительными; при желании, также являются подходящими совместимые комбинации данных носителей.

Кроме того, средства переноса присутствуют, при необходимости, для желаемой системы доставки. Средства переноса или носители также могут содержать дополнительные агенты в соответствии с обычной практикой. Например, конечная композиция может содержать различные смягчающие средства, эмульгаторы, спирты, красители, парфюмерные отдушки, загустители (такие как ксантановая камедь), консерванты, увлажнители, поверхностно-активные вещества (анионные, катионные, неионогенные, амфотерные, по отдельности или в комбинации), агенты, модифицирующие дифференциацию, и/или пролиферацию, и/или пигментацию, антипаразитические агенты, диспергирующие агенты, глушители, желирующие агенты, гидратирующие агенты, дополнительные антиоксиданты, обычные ботанические экстракты, как, например, полученные из алоэ, цитрусовых, гамамелиса, ромашки и тому подобных, например, обладающие вяжущим, антисептическим, солнцезащитным действием или свойствами, придающими загар, красители для кожи, силиконы, отшелушивающие агенты, кератолитические агенты, ретиноиды, усилители проницаемости кожи, витамины, тромболитические агенты, противосвертывающие агенты, агенты для защиты капилляров, гормоны, противомикробные агенты, противовирусные агенты, стероидные противовоспалительные агенты, анестетики, противосерборейные агенты, агенты против перхоти, агенты против угревой сыпи, анти-свободнорадикальные агенты, анальгетики, липофильные соединения, антигистаминные агенты, репелленты от насекомых, охлаждающие кожу соединения, смазочные агенты, противогрибковые агенты или их смеси. Композиция помимо этого может включать усилители проницаемости, такие как, но не ограничиваясь этим, олеиновая кислота, ДМСО (диметилсульфоксид), спирты, N-метилпирролидон, диметилизосорбит. Она также может включать один или несколько дополнительных активных ингредиентов, таких как противовоспалительные агенты, антибиотики, вяжущие средства, факторы роста, токоферолы, ретинолы, поглотители свободных радикалов.

Далее приведены не ограничивающие примеры косметической композиции согласно настоящему изобретению

Пример 58

Пример 59

Независимо в композиции необязательно может присутствовать косметически приемлемая органическая жирная кислота в количестве, предпочтительно в биоактивном количестве, от 0,1% до 10,0%; добавляемая жирная кислота является предпочтительным ингредиентом.

Действие соединения изобретения синергетически улучшается при сочетании с увлажнителем, смягчающим средством, дополнительными антиоксидантами или противовоспалительными агентами.

Пример 60

Ожидается, что добавление увлажнителей и смягчающих агентов к антиоксидантной композиции будет способствовать восстановлению влагосодержания и поддержанию гидратации рассматриваемой кожи. Предполагается, что улучшенная гидратация кожи будет как увеличивать абсорбцию поглотителя свободных радикалов кожей, так и помогать доставке поглотителя свободных радикалов к активному сайту.

Примерами смягчающих средств, которые можно использовать, являются: минеральное масло, вазелин, парафин, церезин, озокерит, микрокристаллический воск, пергидроскваленовые диметилполиоксисиланы, метилфенилполиоксисиланы, силикон, сополимеры силикон-гликоль-триглицеридные сложные эфиры, ацетилированные моноглицериды, этоксилированные глицериды, алкиловые эфиры жирных кислот, жирные кислоты и спирты, ланолин и производные ланолина, полигидрированные сложные эфиры спиртов, стероды, производные пчелиного воска, полигидрированные спирты и полиэфиры и амиды жирных кислот. Хотя в данной области известны различные смягчающие средства, которые можно использовать в настоящем изобретении, предпочтительным смягчающим агентом является силикон.

Подходящими являются известные в данной области увлажнители, увеличивающие гидратацию кожи при местном применении, такие как полигидрированные спирты. Примерами подходящих увлажнителей являются глицерин, пропиленгликоль, бутиленгликоль, диглицерин или их сложноэфирные производные. Однако предпочтительным увлажнителем является глицерин.

Местные препараты по настоящему изобретению могут содержать отдельный антиоксидант, помимо соединения изобретения, или комбинацию антиоксидантов, такую как антиоксидантная смесь. Подразумевается, что термин «антиоксидант», как он использован в данном описании, включает как отдельный антиоксидант, так и смесь антиоксидантов. Антиоксидант также может быть введен в различные средства доставки для облегчения местного применения.

Для получения превосходной местной композиции в виде кремов, эмульсий, лосьонов или гелей такие композиции могут включать от примерно 0,001 вес.% до примерно 50 вес.% антиоксиданта.

Местные композиции по настоящему изобретению могут быть изготовлены в виде лосьонов и кремов.

Поглотитель свободных радикалов может быть объединен с большинством эмульгаторов, которые используются для получения лосьонов, кремов и других подходящих средств доставки. Эмульгаторы могут быть катионными, анионными, неионогенными, амфотерными или их комбинацией. Предпочтительными являются неионогенные эмульгаторы. Примерами коммерчески доступны неионогенных эмульгаторов являются сорбиты, алкоксилированные жирные спирты и алкилполигликозиды. Анионные эмульгаторы могут включать мыла, алкилсульфаты, моноалкил и диалкилфосфаты, алкильсульфонаты и ацилизоцианаты, амфотерный эмульгатор, который можно использовать, представляет собой хлорид лактамидопропилтриаммония.

Подходящие средства доставки для композиций по настоящему изобретению также могут включать загустители. Примеры подходящих загустителей включают производные целлюлозы, такие как гидроксиэтилцеллюлоза и гидроксипропилцеллюлоза, а также полимеры полиакриловой кислоты.

Примеры консервантов, которые являются подходящими для применения в композициях, включают алифатические спирты, особенно этанол и бензиловый спирт; парабены, сорбаты, производные мочевины и изотиазолидиноны.

Лосьоны или кремы по настоящему изобретения могут быть получены с использованием обычных способов гомогенизации, известных специалистам в данной области. Также возможно использованием способа микрофлюидизации, который включает совместное смешивание водной фазы и масляной фазы таких кремов и лосьонов в гомогенизаторе высокого давления, который резко уменьшает размер частиц эмульсии до примерно нескольких микрон по сравнению с таковым в кремах и лосьонах, полученных без использования высокого давления. Микрофлюидизация позволяет получать превосходные стабильные кремы и лосьоны, содержащие эффективные количества соединения, без использования традиционных эмульгаторов и поверхностно-активных веществ.

Композиции для местного применения по настоящему изобретению также могут быть получены в виде микроэмульсии, которая представляет собой подраздел эмульсий; масла, которые при этом можно использовать, представляют собой минеральное масло и силиконовое масло. Примерами спиртов, которые можно использовать, являются цетиловый спирт, изостеариловый спирт, стеариловый спирт, додеканол и додеценол. Неионогенные поверхностно-активные вещества могут представлять собой сложные эфиры жирных кислот, сложные эфиры жирных спиртов или этоксилированные спирты. Примерами неионогенных поверхностно-активных веществ являются полиэтиленгликоль, изопропилмиристат цетилизооктадеканоат, полипропиленгликоли, сорбиты и изопропилолеат.

Пример 61

Композиции для местного применения по изобретению могут быть получены в виде эмульсий масло-в-воде или вода-в-масле. Композиции также могут находиться в виде многофазной эмульсии, такой как эмульсия типа вода-в-масле-в-воде.

Композиции по изобретению также могут быть получены в виде липосомных препаратов. В таких композициях раствор соединения может быть находиться внутри липосомных везикул, где стенка липосомы представляет собой фосфолипид или другой подходящий жир (например, липиды кожи). Для получения композиции для местного применения липосомы могут быть добавлены к любой описанной выше системе носителя в соответствии с методами получения, применения и композициями местных липосом.

Пример 62

Растворы соединения и антиоксиданты также могут быть захвачены в полимерные везикулы, где стенка включает подходящий полимерный материал, такой как желатин, сшитый желатин, полиамид, полиакрилаты и тому подобные, с образованием везикулы, которую затем вводят в композиции для местного применения.

Композиция согласно настоящему изобретению может использоваться для одного или нескольких из следующих косметических применений, а именно a) разглаживания и предотвращения образования морщин, b) разглаживания и предотвращения образования мимических морщин, c) промотирования роста эпидермиса, d) фотозащиты кожи, e) восстановления и профилактики изменения цвета кожи, f) удаления и профилактики образования возрастных пятен, g) кондиционирования и профилактики сухих участков кожи, h) удаления и профилактики следов подтяжек, i) удаления и профилактики образования дефектов кожи, j) ухода за кожей/поддержания здорового состояния кожи, k) удаления и профилактики старческого ксероза, l) ухода за кожей и предотвращения солнечных ожогов, m) профилактики и восстановления потери коллагена, n) улучшение текстуры кожи, o) улучшение тонуса кожи, p) увеличения толщины кожи, q) уменьшения размера пор, r) восстановления блеска кожи, s) минимизации признаков усталости, t) уменьшения углевой сыпи, w) лечения телеангиэктазии и v) улучшения эстетического внешнего вида волос и ногтей.

Фармацевтические композиции

Фармацевтические композиции, эффективные для удаления свободных радикалов и/или ингибирования AGE, могут быть получены с использованием фармацевтически эффективного количества соединений общей формулы I, по отдельности или в сочетании. Количество соединения по изобретению предпочтительно будет колебаться между 0,00001 и 90 % по весу. Следующие фармацевтические препараты предложены только в качестве примера и никоим образом не ограничивают объем изобретения.

Пероральные препараты

Пероральные препараты могут вводиться в виде твердых дозировочных препаративных лекарственных форм, например пилюль, порошков, саше, или дискретных единиц, таких как таблетки или капсулы и тому подобного. Другие перорально вводимые фармацевтические препараты включают однофазные и двухфазные жидкие препаративные лекарственные формы, либо в виде формы, готовой к употреблению, или в форме, подходящей для последующего восстановления влагосодержания, таких как смеси, сиропы, суспензии или эмульсии. Дополнительно препараты могут содержать разбавители, диспергирующие агенты, буферы, стабилизаторы, поверхностно-активные вещества, консерванты, хелатирующие агенты и/или другие применяемые фармацевтические добавки. Можно использовать водные или неводные носители или их комбинации, и, при желании, они могут содержать подходящий подсластитель, вкусовой агент или аналогичные вещества. В случае суспензии или эмульсии, кроме того, может присутствовать подходящий загуститель или суспендирующий агент. Альтернативно, соединения можно вводить как таковые, в чистом виде, не связанном с другими добавками, например, в виде капсул или саше. Также их можно вводить вместе с носителем. Фармацевтические препараты могут обладать замедленной, отставленной или контролируемой степенью высвобождения активных ингредиентов, что обеспечивается матричной или диффузной контролируемой системой.

Когда соединение настоящего изобретения, или его соли, или подходящие комплексы присутствуют в дискретной препаративной лекарственной форме, такой как таблетка, она дополнительно может содержать медицински инертные эксципиенты, используемые в данной области. Также могут использоваться разбавители, такие как крахмал, лактоза, дикальций фосфат, тальк, стеарат магния полимерные вещества, такие как метилцеллюлоза, жирные кислоты и их производные, крахмалгликолят натрия и т.д.

Пример 63

Получение пероральной препаративной лекарственной формы

Типичная таблетка может иметь следующий состав:

или

Парентеральные препараты

Для парентерального введения соединения, или их соли, или подходящие комплексы могут присутствовать в стерильном носителе, который может представлять собой водный или неводный носитель или их комбинацию. Примерами носителей являются вода, этилолеат, масла и производные многоатомных спиртов, гликоли и их производные. Они могут содержать общепринятые для инъекционных препаратов добавки, такие как стабилизаторы, солюбилизаторы, рН-модификаторы, буферы, антиоксиданты, сорастворители, комплексообразующие агенты, модификаторы тонуса раствора и т.д.

Некоторыми подходящими добавками являются, например, тартратный, цитратный или аналогичный буфер, спирт, хлорид натрия, декстроза и высокомолекулярные полимеры. Другой альтернативой является восстановление влагосодержания стерильного порошка. Соединение можно вводить в виде инъекции более одного раза в день, или в виде внутривенного вливания/капельницы, или в виде подходящего депо препарата.

Пример 64

Препарат для парентерального введения:

Другие препараты.

Для дерматологического применения и для изменения цвета зубов рекомендуемыми препаратами являются лосьоны, ополаскиватели для полости рта и зубные пасты, содержащие подходящее количество соединений общей формулы I.

Приведенные выше примеры представлены только в качестве иллюстрации и никоим образом не ограничивают объем изобретения.

Реферат

Изобретение относится к новому классу пятичленных гетероциклических соединений общей формулы (I) и их фармацевтически или косметически приемлемым солям. Описывается соединение, представленное формулой (I), и его фармацевтически или косметически приемлемые соли

где R₁ выбран из линейного или разветвленного (С₁-С₁₂)алкила, (С₃-С₇)циклоалкила, фенила, нафтила, С₃, C₄, C₅ или C₈ гетероарила, где один или несколько гетероатомов, когда они присутствуют, независимо выбраны из О, N, или S, и необязательно замещен, где заместители выбраны из первой группы, включающей галоген, гидрокси, нитро, циано, амино, оксо и оксим, или из второй группы, включающей линейный или разветвленный (С₁-С₈)алкил, где заместитель из указанной второй группы необязательно замещен R₁₀, или где гетероарил замещен -СН₂-С(O)-2-тиенилом; Y отсутствует или выбран из группы, состоящей из (C₁-С₁₂)алкил-2 или (С₂-С₈)алкила, где Z выбран из серы, кислорода или азота; А и В независимо выбраны из N, NH, NR₆, серы, кислорода с образованием гетероароматической кольцевой системы; R₂, R₃ и R₄ независимо выбраны из первой группы, включающей водород, галоген, или R₃ и R₄ в смежных позициях образуют фенильное кольцо; R₅ отсутствует или выбран из группы, включающей -CH₂-фенил, CH₂(CO)R₇, CH₂ (CO)NHR₈ и CH₂(CO)NR₈R₉, которые необязательно замещены R₁₀; R₆, R₇, R₈ и R₉ независимо выбраны из группы, включающей линейный или разветвленный (C₁-C₈)алкил, (С₃-С₇)циклоалкил, C₅ гетероциклоалкил, бензилпиперидинил, фенил, нафтил, гетероарил, алкилгетероарил, адамантил, или R₈ и R₉образуют пиперидин, или R₈ означает 3,4-этилендиоксифенил, где заместители указанной группы необязательно замещены R₁₀, и гетероарил означает С₃, C₄, C₅ или C₈ гетероарил, где один или несколько гетероатомов, когда они присутствуют, независимо выбраны из О, N, или S; R₁₀ выбран из галогена, гидрокси, нитро, циано, амино, оксо, пергалогеналкила (C₁-С₆) или оксима; и Х означает галогенид ион; при условии, что, когда группы/заместители присутствуют у одного и того же или у смежных атомов углерода или азота, они вместе необязательно могут образовывать пяти, или шести, или семичленное кольцо, необязательно содержащее одну или несколько двойных связей и необязательно содержащее один или несколько гетероатомов, выбранных из О, N или S. Также описываются способ получения таких соединений, их терапевтические и косметические применения, в частности, для регулирования возрастных и диабетических сосудистых осложнений. Соединения действуют за счет тройного действия как агенты, разрушающие AGE (конечные продукты повышенного гликозилирования), ингибиторы AGE и поглотители свободных радикалов, что делает их наиболее подходящими в различных терапевтических и косметических применениях. Изобретение также относится к фармацевтическим и косметическим композициям, содержащим данные соединения, и к способам лечения заболеваний, вызванных накоплением AGE и/или свободных радикалов в клетках тела. Технический результат - получены новые соединения, обладающие полезными биологическими свойствами. 22 н. и 51 з.п. ф-лы, 4 табл.

Формула

1. Соединение, представленное формулой (I), и его фармацевтически или косметически приемлемые соли

где R₁ выбран из линейного или разветвленного (С₁-С₁₂)алкила, (С₃-С₇)циклоалкила, фенила, нафтила, С₃, C₄, C₅ или C₈ гетероарила, где один или несколько гетероатомов, когда они присутствуют, независимо выбраны из О, N, или S, и необязательно замещен, где заместители выбраны из первой группы, включающей галоген, гидрокси, нитро, циано, амино, оксо и оксим, или из второй группы, включающей линейный или разветвленный (С₁-С₈)алкил, где заместитель из указанной второй группы необязательно замещен R₁₀, или где гетероарил замещен -СН₂-С(O)-2-тиенилом;

Y отсутствует или выбран из группы, состоящей из (C₁-C₈)алкил-Z или (С₂-С₈ )алкила, где Z выбран из серы, кислорода или азота;

А и В независимо выбраны из N, NH, NR₆, серы, кислорода с образованием гетероароматической кольцевой системы;

R₂, R₃ и R₄ независимо выбраны из первой группы, включающей водород, галоген, или R₃и R₄ в смежных позициях образуют фенильное кольцо;

R₅ отсутствует или выбран из группы, включающей -СН₂-фенил, -CH₂(CO)R₇, -CH₂(CO)NHR₈ и -CH₂(CO)NR₈R₉, которые необязательно замещены R₁₀;

R₆, R₇, R₈ и R₉ независимо выбраны из группы, включающей линейный или разветвленный (С₁-С₈)алкил, (С₃-С₇)циклоалкил, C₅ гетероциклоалкил, бензилпиперидинил, фенил, нафтил, гетероарил, алкилгетероарил, адамантил, или R₈ и R₉ образуют пиперидин, или R₈ означает 3,4-этилендиоксифенил, где заместители указанной группы необязательно замещены R₁₀, и гетероарил означает С₃, C₄, С₅ или C₈ гетероарил, где один или несколько гетероатомов, когда они присутствуют, независимо выбраны из О, N, или S;

R₁₀ выбран из галогена, гидрокси, нитро, циано, амино, оксо, пергалогеналкила (C₁-С₆) или оксима;

Х означает галогенид-ион;

при условии, что, когда группы/заместители присутствуют у одного и того же или у смежных атомов углерода или азота, они вместе необязательно могут образовывать пяти- или шести-, или семичленное кольцо, необязательно содержащее одну или несколько двойных связей и необязательно содержащее один или несколько гетероатомов, выбранных из О, N, или S.

16. Применение соединения, представленного формулой (I), или его фармацевтически приемлемой соли

для получения лекарственного средства, используемого для разрушения накопленного AGE при лечении диабетических заболеваний и возрастных заболеваний, вызванных накоплением AGE,

где R₁ выбран из линейного или разветвленного (C₁-C₁₂) алкила, (С₃-С₇) циклоалкила, фенила, нафтила, С₃, C₄, C₅ или C₈ гетероарила, где один или несколько гетероатомов, когда они присутствуют, независимо выбраны из О, N, или S, и необязательно являющегося замещенным, где заместители выбраны из первой группы, включающей галоген, гидрокси, нитро, циано, амино, оксо и оксим, или из второй группы, включающей линейный или разветвленный (C₁-С₈)алкил, где заместитель из указанной второй группы необязательно замещен R₁₀, и где гетероарил замещен -СН₂-С(O)2-тиенилом;

Y отсутствует или выбран из группы, включающей (С₁-С₈)алкил-Z или (С₂-С₈)алкил, где Z выбран из серы, кислорода или азота;

А и В независимо выбраны из N, NH, NRe, серы, кислорода с образованием гетероароматической кольцевой системы;

R₂, R₃ и R₄независимо выбраны из первой группы, включающей водород, галоген, или R₃ и R₄ в смежных позициях образуют фенильное кольцо;

R₅ отсутствует или выбран из группы, включающей -СН₂-фенил, -CH₂(CO)R₇, -CH₂(CO)NHR₈ или -CH₂(CO)NR₈R₉, которые необязательно замещены R₁₀;

R₆, R₇, R₈ и R₉ независимо выбраны из группы, включающей линейный или разветвленный (С₁-С₈)алкил, (С₃-С₇)циклоалкил, С₅ гетероциклоалкил, бензилпиперидинил, фенил, нафтил, гетероарил, алкилгетероарил, адамантил, или R₈ и R₉ образуют пиперидин, или R₈ означает 3,4-этилендиоксифенил, где заместители указанной группы необязательно замещены R₁₀, и гетероарил означает С₃, C₄, C₅ или C₈ гетероарил, где один или несколько гетероатомов, когда они присутствуют, независимо выбраны из О, N, или S;

R₁₀ выбран из галогена, гидрокси, нитро, циано, амино, оксо, пергалогеналкила (C₁-С₆) или оксима; и

Х означает галогенид-ион;

при условии, что когда группы/заместители присутствуют у одного и того же или у смежных атомов углерода или азота, они вместе необязательно могут образовывать пяти- или шести-, или семичленное кольцо, необязательно содержащее одну или несколько двойных связей и необязательно содержащее один или несколько гетероатомов, выбранных из О, N, или S.

30. Применение соединения, представленного формулой (I) или его фармацевтически приемлемой соли

для получения лекарственного средства, используемого для ингибирования образования AGE у млекопитающего,

где R₁ выбран из линейного или разветвленного (С₁-С₁₂)алкила, (С₃-С₇)циклоалкила, фенила, нафтила, С₃, C₄, C₅ или C₈ гетероарила, где один или несколько гетероатомов, когда они присутствуют, независимо выбраны из О, N, или S, и необязательно замещен, где заместители выбраны из первой группы, включающей галоген, гидрокси, нитро, циано, амино, оксо и оксим, или из второй группы, включающей линейный или разветвленный (С₁-С₈)алкил, где заместитель из указанной второй группы необязательно замещен R₁₀, или где гетероарил замещен -СН₂-С(O)-2-тиенилом;

Y отсутствует или выбран из группы, состоящей из (С₁-С₈)алкил-Z или (С₂-С₈)алкила, где Z выбран из серы, кислорода или азота;

А и В независимо выбраны из N, NH, NR₆, серы, кислорода с образованием гетероароматической кольцевой системы;

R₂, R₃ и R₄ независимо выбраны из первой группы, включающей водород, галоген, или R₃и R₄ в смежных позициях образуют фенильное кольцо;

R₅ отсутствует или выбран из группы, включающей -СН₂ -фенил, -CH₂(CO)R₇, -CH₂(CO)NHR₈ и -CH₂(CO)NR₈R₉, которые необязательно замещены R₁₀;

R₆, R₇, R₈ и R₉ независимо выбраны из группы, включающей линейный или разветвленный (С₁-С₈)алкил, (С₃-С₇ )циклоалкил, C₅ гетероциклоалкил, бензилпиперидинил, фенил, нафтил, гетероарил, алкилгетероарил, адамантил, или R₈ и R₉ образуют пиперидин, или R₈ означает 3,4-этилендиоксифенил, где заместители указанной группы необязательно замещены R₁₀, и гетероарил означает С₃, C₄, C₅ или C₈ гетероарил, где один или несколько гетероатомов, когда они присутствуют, независимо выбраны из О, N, или S;

R₁₀ выбран из галогена, гидрокси, нитро, циано, амино, оксо, пергалогеналкила (C₁-С₆) или оксима; и

Х означает галогенид-ион;

при условии, что, когда группы/заместители присутствуют у одного и того же или у смежных атомов углерода или азота, они вместе необязательно могут образовывать пяти- или шести-, или семичленное кольцо, необязательно содержащее одну или несколько двойных связей и необязательно содержащее один или несколько гетероатомов, выбранных из О, N, или S.

43. Применение соединения, представленного формулой (I) или его фармацевтически приемлемой соли

для получения лекарственного средства для удаления свободных радикалов из клеток тела млекопитающего,

где R₁ выбран из линейного или разветвленного (С₁-С₁₂)алкила, (С₃-С₇)циклоалкила, фенила, нафтила, С₃, C₄, C₅ или C₈ гетероарила, где один или несколько гетероатомов, когда они присутствуют, независимо выбраны из О, N, или S, и необязательно замещен, где заместители выбраны из первой группы, включающей галоген, гидрокси, нитро, циано, амино, оксо и оксим, или из второй группы, включающей линейный или разветвленный (С₁-С₈)алкил, где заместитель из указанной второй группы необязательно замещен R₁₀, или где гетероарил замещен -СН₂-С(O)-2-тиенилом;

Y отсутствует или выбран из группы, состоящей из (C₁-C₈)алкила-Z или (С₁-С₈)алкила, где Z выбран из серы, кислорода или азота;

А и В независимо выбраны из N, NH, NR₆, серы, кислорода с образованием гетероароматической кольцевой системы;

R₂, R₃ и R₄ независимо выбраны из первой группы, включающей водород, галоген, или R₃ и R₄ в смежных позициях образуют фенильное кольцо;

R₅ отсутствует или выбран из группы, включающей -СН₂ -фенил, -CH₂(CO)R₇, -CH₂(CO)NHR₈ и -CH₂(CO)NR₈R₉, которые необязательно замещены R₁₀;

R₆, R₇, R₈ и R₉ независимо выбраны из группы, включающей линейный или разветвленный (С₁-С₈)алкил, (С₃-С₇ )циклоалкил, C₅ гетероциклоалкил, бензилпиперидинил, фенил, нафтил, гетероарил, алкилгетероарил, адамантил, или R₈ и R₉ образуют пиперидин, или R₈ означает 3,4-этилендиоксифенил, где заместители указанной группы необязательно замещены R₁₀, и гетероарил означает С₃, С₄, C₅ или C₈ гетероарил, где один или несколько гетероатомов, когда они присутствуют, независимо выбраны из О, N, или S;

R₁₀ выбран из галогена, гидрокси, нитро, циано, амино, оксо, пергалогеналкила (C₁-С₆) или оксима; и

Х означает галогенид-ион;

при условии, что, когда группы/заместители присутствуют у одного и того же или у смежных атомов углерода или азота, они вместе необязательно могут образовывать пяти- или шести-, или семичленное кольцо, необязательно содержащее одну или несколько двойных связей и необязательно содержащее один или несколько гетероатомов, выбранных из О, N, или S.

52. Косметическая композиция, для ингибирования образования и накопления AGE, разрушения AGE или удаления свободных радикалов в клетках млекопитающих, включающая косметически эффективное количество соединения, представленное формулой (I)

или его косметически приемлемую соль в смеси с косметически

приемлемым разбавителем, носителем или эксципиентом,

где R₁ выбран из линейного или разветвленного (С₁-С₁₂)алкила, (С₃ -С₇)циклоалкила, фенила, нафтила, С₃, C₄, C₅ или C₈ гетероарила, где один или несколько гетероатомов, когда они присутствуют, независимо выбраны из О, N, или S, и необязательно замещен, где заместители выбраны из первой группы, включающей галоген, гидрокси, нитро, циано, амино, оксо и оксим, или из второй группы, включающей линейный или разветвленный (С₁-С₈)алкил, где заместитель из указанной второй группы необязательно замещен R₁₀, или где гетероарил замещен -СН₂-С(O)-2-тиенилом;

Y отсутствует или выбран из группы, состоящей из (C₁-C₈)алкил-Z или (С₂-С₈)алкила, где Z выбран из серы, кислорода или азота;

А и В независимо выбраны из N, NH, NR₆, серы, кислорода с образованием гетероароматической кольцевой системы;

R₂, R₃ и R₄ независимо выбраны из первой группы, включающей водород, галоген, или R₃ и R₄ в смежных позициях образуют фенильное кольцо;

R₅ отсутствует или выбран из группы, включающей -СН₂-фенил, -CH₂(CO)R₇, -CH₂(CO)NHR₈ и -CH₂(CO)NR₈R₉, которые необязательно замещены R₁₀;

R₆, R₇, R₈ и R₉ независимо выбраны из группы, включающей линейный или разветвленный (С₁-С₈)алкил, (С₃-С₇)циклоалкил, С₅ гетероциклоалкил, бензилпиперидинил, фенил, нафтил, гетероарил, алкилгетероарил, адамантил, или R₈ и R₉ образуют пиперидин, или R₈ означает 3,4-этилендиоксифенил, где заместители указанной группы необязательно замещены R₁₀, и гетероарил означает С₃, C₄, C₅ или C₈ гетероарил, где один или несколько гетероатомов, когда они присутствуют, независимо выбраны из О, N, или S;

R₁₀ выбран из галогена, гидрокси, нитро, циано, амино, оксо, пергалогеналкила (С₁-C₆) или оксима; и

Х означает галогенид-ион;

при условии, что, когда группы/заместители присутствуют у одного и того же или у смежных атомов углерода или азота, они вместе необязательно могут образовывать пяти- или шести-, или семичленное кольцо, необязательно содержащее одну или несколько двойных связей и необязательно содержащее один или несколько гетероатомов, выбранных из О, N, или S.