Белки на основе антитела с привитым цитокином и способы их применения при иммунных нарушениях - RU2019142660A
Код документа: RU2019142660A
Формула
1. Белок на основе антитела с привитым цитокином, содержащий:
(a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую области, определяющие комплементарность (CDR), HCDR1, HCDR2, HCDR3; и
(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую LCDR1, LCDR2, LCDR3; и
(c) молекулу интерлейкина 2 (IL2), привитую на CDR VH или VL.
2. Белок на основе антитела с привитым цитокином по п. 1, где молекула IL2 привита на CDR тяжелой цепи.
3. Белок на основе антитела с привитым цитокином по п. 2, где CDR тяжелой цепи выбрана из области 1, определяющей комплементарность (HCDR1), области 2, определяющей комплементарность (HCDR2), и области 3, определяющей комплементарность (HCDR3).
4. Белок на основе антитела с привитым цитокином по п. 3, где молекула IL2 привита на HCDR1.
5. Белок на основе антитела с привитым цитокином по п. 1, где молекула IL2 привита на CDR легкой цепи.
6. Белок на основе антитела с привитым цитокином по п. 5, где CDR легкой цепи выбрана из области 1, определяющей комплементарность (LCDR1), области 2, определяющей комплементарность (LCDR2), и области 3, определяющей комплементарность (LCDR3).
7. Белок на основе антитела с привитым цитокином по любому из пп. 1-6, где молекула IL2 содержит мутацию, которая обеспечивает снижение аффинности молекулы IL2 в отношении низкоаффинного рецептора IL2.
8. Белок на основе антитела с привитым цитокином по любому из пп. 1-7, где белок на основе антитела с привитым цитокином стимулирует пролиферацию Treg-клеток в большей степени, чем нативный IL2 или Proleukin®.
9. Белок на основе антитела с привитым цитокином по любому из пп. 1-8, где белок на основе антитела с привитым цитокином стимулирует пролиферацию CD8 эффекторных T-клеток в меньшей степени, чем нативный IL2 или Proleukin®.
10. Белок на основе антитела с привитым цитокином по любому из пп. 1-9, где белок на основе антитела с привитым цитокином характеризуется более длительным периодом полужизни, чем нативный IL2 или Proleukin®.
11. Белок на основе антитела с привитым цитокином по любому из пп. 1-10, где молекула IL2 состоит из SEQ ID NO:4.
12. Белок на основе антитела с привитым цитокином по любому из пп. 1-10, где молекула IL2 состоит из SEQ ID NO:6.
13. Белок на основе антитела с привитым цитокином по любому из пп. 1-12, дополнительно содержащий тяжелую цепь антитела класса IgG.
14. Белок на основе антитела с привитым цитокином по п. 13, где тяжелая цепь антитела класса IgG выбрана из IgG1, IgG2 или IgG4.
15. Белок на основе антитела с привитым цитокином по любому из пп. 1-14, где специфичность связывания CDR с мишенью снижена на 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 98%, 99% или 100% благодаря привитой молекуле IL2.
16. Белок на основе антитела с привитым цитокином по любому из пп. 1-15, где специфичность связывания CDR с мишенью сохраняется на 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 98%, 99% или 100% в присутствии привитой молекулы IL2.
17. Белок на основе антитела с привитым цитокином по любому из пп. 1-16, где специфичность связывания CDR отличается от специфичности связывания молекулы IL2.
18. Белок на основе антитела с привитым цитокином по любому из пп. 1-17, где специфичность связывания CDR направлена на антиген, отличный от человеческого.
19. Белок на основе антитела с привитым цитокином по п. 18, где антиген, отличный от человеческого, представляет собой вирус.
20. Белок на основе антитела с привитым цитокином по п. 19, где вирус представляет собой респираторно-синцитиальный вирус (RSV).
21. Белок на основе антитела с привитым цитокином по п. 20, где RSV выбран из RSV подгруппы А и RSV подгруппы B.
22. Белок на основе антитела с привитым цитокином по любому из пп. 1-21, где часть белка на основе антитела с привитым цитокином, представляющая собой остов антитела, является гуманизированной или человеческой.
23. Белок на основе антитела с привитым цитокином, содержащий:
(i) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит (a) HCDR1 под SEQ ID NO: 17, (b) HCDR2 под SEQ ID NO:18, (c) HCDR3 под SEQ ID NO:19, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит: (d) LCDR1 под SEQ ID NO:30, (e) LCDR2 под SEQ ID NO:31 и (f) LCDR3 под SEQ ID NO:32;
(ii) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит (a) HCDR1 под SEQ ID NO:43, (b) HCDR2 под SEQ ID NO:44, (c) HCDR3 под SEQ ID NO:45; и вариабельную область легкой цепи, которая содержит: (d) LCDR1 под SEQ ID NO:56, (e) LCDR2 под SEQ ID NO:57 и (f) LCDR3 под SEQ ID NO:58;
(iii) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит (a) HCDR1 под SEQ ID NO:69, (b) HCDR2 под SEQ ID NO:70, (c) HCDR3 под SEQ ID NO:71; и вариабельную область легкой цепи, которая содержит: (d) LCDR1 под SEQ ID NO:82, (e) LCDR2 под SEQ ID NO:83 и (f) LCDR3 под SEQ ID NO:84; или
(iv) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит (a) HCDR1 под SEQ ID NO:95, (b) HCDR2 под SEQ ID NO:96, (c) HCDR3 под SEQ ID NO:97; и вариабельную область легкой цепи, которая содержит: (d) LCDR1 под SEQ ID NO:108, (e) LCDR2 под SEQ ID NO:109 и (f) LCDR3 под SEQ ID NO:110.
24. Белок на основе антитела с привитым цитокином, содержащий:
(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), которая содержит SEQ ID NO:20, и вариабельную область легкой цепи (VL), которая содержит SEQ ID NO: 33;
(ii) вариабельную область тяжелой цепи (VH), которая содержит SEQ ID NO: 46, и вариабельную область легкой цепи (VL), которая содержит SEQ ID NO: 59;
(iii) вариабельную область тяжелой цепи (VH), которая содержит SEQ ID NO:72, и вариабельную область легкой цепи (VL), которая содержит SEQ ID NO:85; или
(iv) вариабельную область тяжелой цепи (VH), которая содержит SEQ ID NO:98, и вариабельную область легкой цепи (VL), которая содержит SEQ ID NO:111.
25. Белок на основе антитела с привитым цитокином по любому из пп. 1-24, дополнительно содержащий модифицированную Fc-область, соответствующую сниженной эффекторной функции.
26. Белок на основе антитела с привитым цитокином по п. 25, где модифицированная Fc-область содержит мутацию, выбранную из одной или нескольких из D265A, P329A, P329G, N297A, L234A и L235A.
27. Белок на основе антитела с привитым цитокином по п. 26, где модифицированная Fc-область содержит комбинацию мутаций, выбранную из одной или нескольких из D265A/P329A, D265A/N297A, L234/L235A, P329A/L234A/L235A и P329G/L234A/L235A.
28. Белок на основе антитела с привитым цитокином, содержащий HCDR1 под SEQ ID NO: 17, HCDR2 под SEQ ID NO:18, HCDR3 под SEQ ID NO:19, LCDR1 под SEQ ID NO:30, LCDR2 под SEQ ID NO:31, LCDR3 под SEQ ID NO:32, модифицированную Fc-область, содержащую мутацию D265A/P329A, где белок на основе антитела с привитым цитокином стимулирует размножение NK-клеток в меньшей степени по сравнению с Proleukin®.
29. Белок на основе антитела с привитым цитокином, содержащий HCDR1 под SEQ ID NO:43, HCDR2 под SEQ ID NO:44, HCDR3 под SEQ ID NO:45, LCDR1 под SEQ ID NO:56, LCDR2 под SEQ ID NO:57, LCDR3 под SEQ ID NO:58, модифицированную Fc-область, содержащую мутацию D265A/P329A, где белок на основе антитела с привитым цитокином стимулирует размножение NK-клеток в меньшей степени по сравнению с Proleukin®.
30. Белок на основе антитела с привитым цитокином, содержащий HCDR1 под SEQ ID NO:69, HCDR2 под SEQ ID NO:70, HCDR3 под SEQ ID NO:71, LCDR1 под SEQ ID NO:82, LCDR2 под SEQ ID NO:83, LCDR3 под SEQ ID NO:84, модифицированную Fc-область, содержащую мутацию D265A/P329A, где белок на основе антитела с привитым цитокином стимулирует размножение NK-клеток в меньшей степени по сравнению с Proleukin®.
31. Белок на основе антитела с привитым цитокином, содержащий HCDR1 под SEQ ID NO:95, HCDR2 под SEQ ID NO:96, HCDR3 под SEQ ID NO:97, LCDR1 под SEQ ID NO:108, LCDR2 под SEQ ID NO:109, LCDR3 под SEQ ID NO:110, модифицированную Fc-область, содержащую мутацию D265A/P329A, где белок на основе антитела с привитым цитокином стимулирует размножение NK-клеток в меньшей степени по сравнению с Proleukin®.
32. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая белок на основе антитела с привитым цитокином, содержащий:
(i) тяжелую цепь под SEQ ID NO:23 и легкую цепь под SEQ ID NO:36;
(ii) тяжелую цепь под SEQ ID NO:49 и легкую цепь под SEQ ID NO:62;
(iii) тяжелую цепь под SEQ ID NO:75 и легкую цепь под SEQ ID NO:88; или
(iv) тяжелую цепь под SEQ ID NO:101 и легкую цепь под SEQ ID NO:114.
33. Рекомбинантная клетка-хозяин, подходящая для продуцирования белка на основе антитела с привитым цитокином, содержащая нуклеиновые кислоты по п. 32, кодирующие полипептидные тяжелые и легкие цепи белка и необязательно сигнал секреции.
34. Рекомбинантная клетка-хозяин по п. 33, которая относится к линии клеток млекопитающего.
35. Рекомбинантная клетка-хозяин по п. 34, где линия клеток млекопитающего представляет собой линию клеток СНО.
36. Фармацевтическая композиция, содержащая белок на основе антитела с привитым цитокином по любому из пп. 1-31 и фармацевтически приемлемый носитель.
37. Способ лечения иммунного нарушения у индивидуума, нуждающегося в этом, включающий введение индивидууму терапевтически эффективного количества белка на основе антитела с привитым цитокином по любому из пп. 1-31 или фармацевтической композиции по п. 36.
38. Способ по п. 37, где иммунное нарушение выбрано из группы, состоящей из: диабета 1 типа, системной красной волчанки, витилиго, хронической болезни "трансплантат против хозяина" (cGvHD), профилактики острой болезни "трансплантат против хозяина" (pGvHD), HIV-индуцированного васкулита, очаговой алопеции, системной склеродермии, очаговой склеродермии и первичного антифосфолипидного синдрома.
39. Способ по п. 37 или 38, где белок на основе антитела с привитым цитокином или фармацевтическую композицию вводят в комбинации с другим терапевтическим средством.
40. Способ по п. 39, где терапевтическое средство представляет собой другой белок на основе антитела с привитым цитокином.
41. Способ обеспечения размножения Treg-клеток в организме пациента, нуждающегося в этом, включающий введение пациенту белка на основе антитела с привитым цитокином по любому из пп. 1-31 или фармацевтической композиции по п. 36.
42. Способ по п. 41, где Treg-клетки размножаются, а CD8 эффекторные T-клетки не размножаются.
43. Способ по п. 41 или 42, где Treg-клетки размножаются, а NK-клетки не размножаются.
44. Применение белка на основе антитела с привитым цитокином в лечении иммунного нарушения, содержащего:
(i) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит: (a) HCDR1 под SEQ ID NO: 17, (b) HCDR2 под SEQ ID NO:18, (c) HCDR3 под SEQ ID NO:19, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит: (d) LCDR1 под SEQ ID NO:30, (e) LCDR2 под SEQ ID NO:31 и (f) LCDR3 под SEQ ID NO:32; или
(ii) вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит: (a) HCDR1 под SEQ ID NO:43, (b) HCDR2 под SEQ ID NO:44, (c) HCDR3 под SEQ ID NO:45; и вариабельную область легкой цепи, которая содержит: (d) LCDR1 под SEQ ID NO:56, (e) LCDR2 под SEQ ID NO:57 и (f) LCDR3 под SEQ ID NO:58,
в лечении иммунного нарушения.
45. Применение по п. 44, где иммунное нарушение выбрано из группы, состоящей из диабета 1 типа, системной красной волчанки, витилиго, хронической болезни "трансплантат против хозяина" (cGvHD), профилактики острой болезни "трансплантат против хозяина" (pGvHD), HIV-индуцированного васкулита, очаговой алопеции, системной склеродермии, очаговой склеродермии и первичного антифосфолипидного синдрома.
46. Применение по п. 44 или 45, где белок на основе антитела с привитым цитокином вводится в комбинации с другим терапевтическим средством.
