Варианты химозина с улучшенными молокосвертывающими свойствами - RU2019108268A
Код документа: RU2019108268A
Формула
1. Способ получения выделенного варианта полипептида химозина, включающий стадии
(a) осуществления изменений в одном или нескольких положениях исходного полипептида, имеющего активность химозина, где изменение включает замещение, делецию или инсерцию в положении по меньшей мере одной аминокислоты, соответствующем положению 280 или 311; и
(b) продуцирования и выделения измененного полипептида со стадии (a) с получением при этом выделенного варианта полипептида химозина, где вариант имеет активность химозина;
и где
(i) положение аминокислоты исходного полипептида определяют посредством выравнивания последовательностей исходного полипептида с полипептидом SEQ ID NO:1 (бычьим химозином), то есть полипептид SEQ ID NO:1 используют для определения соответствующей последовательности аминокислот в исходном полипептиде, и
(ii) исходный полипептид имеет по меньшей мере 90% идентичность последовательностей со зрелым полипептидом SEQ ID NO:2 (верблюжьим химозином), который содержит аминокислоты от положения аминокислоты 59 до положения аминокислоты 381 SEQ ID NO:2; и
где выделенный вариант полипептида химозина имеет:
активность химозина, дающую более высокое отношение C/P по сравнению с отношением C/P верблюжьего химозина, содержащего зрелый полипептид SEQ ID NO:2.
2. Способ получения выделенного варианта полипептида химозина по любому из предыдущих пунктов, где изменением является замещение в положении по меньшей мере одной аминокислоты, соответствующем положению 280 или 311.
3. Способ получения выделенного варианта полипептида химозина по п. 2, где замещение представляет 280I или 311I.
4. Способ получения выделенного варианта полипептида химозина по п.2, где замещение представляет собой L280I или L311I.
5. Выделенный вариант полипептида химозина, включающий
(a) изменение в одном или нескольких положениях исходного полипептида, имеющего активность химозина, где изменение включает замещение, делецию или инсерцию в положении по меньшей мере одной аминокислоты, соответствующем положению 280 или 311; и
(b) где вариант имеет активность химозина;
и где
(i) положение аминокислоты исходного полипептида определяют посредством выравнивания последовательностей исходного полипептида с полипептидом SEQ ID NO:1 (бычьим химозином), то есть полипептид SEQ ID NO:1 используют для определения соответствующей последовательности аминокислот в исходном полипептиде; и
(ii) исходный полипептид имеет по меньшей мере 90% идентичность последовательностей со зрелым полипептидом SEQ ID NO:2 (верблюжьим химозином), который содержит аминокислоты от положения аминокислоты 59 до положения аминокислоты 381 SEQ ID NO:2; и
(iii) выделенный вариант полипептида имеет менее чем 100% идентичность последовательностей со зрелым полипептидом SEQ ID NO:2 (верблюжьим химозином); и
где выделенный вариант имеет активность химозина, дающую более высокое отношение C/P по сравнению с отношением C/P верблюжьего химозина, содержащего зрелый полипептид SEQ ID NO:2.
6. Выделенный вариант полипептида химозина по п. 5, где выделенный вариант верблюжьего химозина содержит менее 10 аминокислотных изменений (например, замещений) по сравнению со зрелым полипептидом SEQ ID NO: 2 (верблюжьим химозином).
7. Выделенный вариант полипептида химозина по любому из пп.5-6, где изменением является замещение в положении по меньшей мере одной аминокислоты, соответствующем положению 280 или 311.
8. Выделенный вариант полипептида химозина по п.7, в котором замещением является 280I или 311I.
9. Выделенный вариант полипептида химозина по п.8, в котором замещением является L280I или L311I.
10. Способ приготовления пищевого продукта, включающий добавление эффективного количества выделенного варианта полипептида химозина по любому из пп. 5-9 в пищевой ингредиент (ингредиенты) и осуществление дополнительных стадий приготовления с получением пищевого продукта.
11. Способ приготовления кормового продукта, включающий добавление эффективного количества выделенного варианта полипептида химозина по любому из пп. 5-9 в кормовой ингредиент (ингредиенты) и осуществление дополнительных стадий приготовления с получением кормового продукта.
