Способ концентрирования препаратов антител - RU2390524C2
Код документа: RU2390524C2
Чертежи
Показать все 24 чертежа(ей)
Описание
Текст описания приведен в факсимильном виде.
Реферат
Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ концентрирования препаратов антител. Способ включает последовательные стадии ультрафильтрации первого препарата антитела с получением второго препарата антитела, диафильтрации второго препарата антитела с получением промежуточного препарата антитела и второй ультрафильтрации промежуточного препарата антитела с получением третьего препарата антитела. Все стадии процесса осуществляют при температуре от примерно 30°С до примерно 50°С. 51 з.п. ф-лы, 25 ил., 25 табл.
Формула
1. Способ приготовления высоко сконцентрированного состава антитела, содержащий:
(a) первую ультрафильтрацию первого препарата антитела для получения второго препарата антитела;
(b) диафильтрацию второго препарата антитела для получения промежуточного диафильтрованного препарата антитела; и
(c) вторую ультрафильтрацию промежуточного препарата антитела для получения третьего препарата антитела, в котором вышеуказанные стадии процесса выполняют при температуре от примерно 30°С до примерно 50°С.
(a) первую ультрафильтрацию первого препарата антитела для получения второго препарата антитела;
(b) диафильтрацию второго препарата антитела для получения промежуточного диафильтрованного препарата антитела; и
(c) вторую ультрафильтрацию промежуточного препарата антитела для получения третьего препарата антитела, в котором вышеуказанные стадии процесса выполняют при температуре от примерно 30°С до примерно 50°С.
2. Способ по п.1, в котором антителом является анти-IgE антитело.
3. Способ по п.1, в котором одну или несколько стадий первой ультрафильтрации, второй ультрафильтрации и диафильтрации выполняют при температуре от примерно 35°С до примерно 50°С.
4. Способ по п.1, в котором одну или несколько стадий первой ультрафильтрации, второй ультрафильтрации и диафильтрации выполняют при температуре от примерно 45±5°С.
5. Способ по п.1, в котором одну или несколько стадий первой ультрафильтрации, второй ультрафильтрации и диафильтрации выполняют при температуре примерно 45°С.
6. Способ по п.1, в котором стадии (а), (b) и (с) выполняют при температуре от примерно 40°C до примерно 50°С.
7. Способ по п.1, в котором первый препарат антитела имеет концентрацию от примерно 0,1 до примерно 10 г/л.
8. Способ по п.1, в котором первый препарат антитела имеет концентрацию от примерно 1 г/л до примерно 5 г/л.
9. Способ по п.1, в котором второй препарат антитела имеет концентрацию от примерно 10 г/л до примерно 50 г/л.
10. Способ по п.1, в котором второй препарат антитела имеет концентрацию от примерно 20 г/л до примерно 50 г/л.
11. Способ по п.1, в котором второй препарат антитела имеет концентрацию от примерно 20 г/л до примерно 40 г/л.
12. Способ по п.1, в котором третий препарат антитела имеет концентрацию от примерно 50 г/л до примерно 250 г/л.
13. Способ по п.1, в котором третий препарат антитела имеет концентрацию от примерно 100 г/л до примерно 230 г/л.
14. Способ по п.1, в котором третий препарат антитела имеет концентрацию от примерно 170 г/л до примерно 200 г/л.
15. Способ по п.1, в котором промежуточный препарат антитела и третий препарат антитела содержат ретентат ультрафильтрации.
16. Способ по п.1, в котором промежуточный препарат антитела имеет концентрацию от примерно 25 г/л до примерно 35 г/л, и третий препарат антитела имеет концентрацию от примерно 170 г/л до примерно 200 г/л.
17. Способ по п.1, в котором первая ультрафильтрация первого препарата антитела обеспечивает второй препарат антитела, имеющий концентрацию примерно 30 г/л, и вторая ультрафильтрация концентрирует промежуточный препарат антитела, чтобы обеспечить третий препарат антитела, имеющий концентрацию от примерно 170 до примерно 200 г/л.
18. Способ по п.1, в котором процесс выполняется в течение от примерно 1 ч до примерно 10 ч.
19. Способ по п.1, в котором процесс выполняется от примерно 2 ч до примерно 5 ч.
20. Способ по п.1, в котором процесс выполняется примерно в течение 3 ч.
21. Способ по п.1, в котором первую и вторую ультрафильтрацию выполняют с использованием мембраны ультрафильтрации, имеющей номинальный размер пор, соответствующий молекулярному весу от примерно 5 кДа до примерно 50 кДа.
22. Способ по п.1, в котором первую и вторую ультрафильтрацию выполняют с использованием мембраны ультрафильтрации, имеющей номинальный размер пор, соответствующий молекулярному весу от примерно 10 кДа до примерно 30 кДа.
23. Способ по п.1, в котором первый препарат антитела содержит антитело, имеющее средний молекулярный вес от примерно 100 кДа до примерно 200 кДа.
24. Способ по п.1, в котором первый препарат антитела содержит антитело, имеющее средний молекулярный вес примерно 150 кДа.
25. Способ по п.1, в котором на стадиях (а), (b) и (с) используется мембрана ультрафильтрации.
26. Способ по п.1, в котором первая ультрафильтрация и вторая ультрафильтрация выполняется с той же самой мембраной ультрафильтрации.
27. Способ по п.1, в котором мембрана ультрафильтрации, используемая на стадии фильтрации (а), используется на стадии (b) и на стадии (с).
28. Способ по п.1, в котором первую ультрафильтрацию, вторую ультрафильтрацию и диафильтрацию осуществляют в режиме тангенциального потока по отношению к мембране ультрафильтрации.
29. Способ по п.1, в котором первую ультрафильтрацию, вторую ультрафильтрацию и диафильтрацию осуществляют в режиме тангенциального потока по отношению к одной и той же мембране ультрафильтрации.
30. Способ по п.1, в котором первую ультрафильтрацию, вторую ультрафильтрацию осуществляют с мембраной ультрафильтрации с композитом регенерированной целлюлозы.
31. Способ по п.1, в котором диафильтрацию выполняют с заменой буфера при постоянном объеме или при постоянной концентрации, или же может использоваться сочетание обоих режимов.
32. Способ по п.1, в котором замену буферного раствора при диафильтрации осуществляют с кратностью от примерно 5 до примерно 15.
33. Способ по п.1, в котором замену объема буферного раствора при диафильтрации осуществляют примерно 8 раз.
34. Способ по п.1, в котором стадия (b) включает более одной стадии диафильтрации.
35. Способ по п.34, в котором первая стадия диафильтрации включает замену буферного раствора при диафильтрации примерно 4 раза, и вторая стадия диафильтрации включает замену буферного раствора при диафильтрации примерно 4 раза.
36. Способ по п.1, в котором при диафильтрации первый буферный раствор заменяют вторым буферным раствором.
37. Способ по п.1, в котором при диафильтрации используют буферный раствор, имеющий состав, который отличается от состава буферного раствора на стадии (а).
38. Способ по п.36, в котором первый буферный раствор содержит смесь водного хлористого натрия и трис-буфера.
39. Способ по п.36, в котором второй буферный раствор включает смесь водного раствора гистидина хлорида и аргинина хлорида.
40. Способ по п.1, в котором выход третьего препарата антитела превышает примерно 70 вес.% от веса антитела в первом препарате антитела.
41. Способ по п.1, в котором выход третьего препарата антитела составляет от примерно 80 до 100 вес.% от веса антитела в первом препарате антитела.
42. Способ по п.2, в котором выход третьего препарата антитела превышает примерно 98 вес.% от веса антитела в первом препарате антитела.
43. Способ по п.1, в котором первую ультрафильтрацию осуществляют при интенсивности рециркуляции от примерно 0,5 л/мин/фут2 до примерно 5 л/мин/фут2.
44. Способ по п.1, в котором ультрафильтрацию и диафильтрацию осуществляют при трансмембранном давлении от примерно 10 psi до примерно 50 psi.
45. Способ по п.1, в котором ультрафильтрацию и диафильтрацию осуществляют при трансмембранном давлении от примерно 10 psi до примерно 50 psi.
46. Способ по п.1, в котором пропускная способность для стадии (с) составляет примерно 80 г/фут2/ч, примерно 120 г/фут2 /ч, примерно 135 г/фут2/ч, примерно 145 г/фут2/ч, примерно 175 г/фут2/ч, примерно 180 г/фут2/ч, примерно 265 г/фут2/ч, примерно 285 г/фут2/ч или примерно 290 г/фут2/ч.
47. Способ по п.1, в котором уровень агрегированных загрязнителей составляет менее 2 вес.%.
48. Способ по п.1, в котором обеспечивается концентрация антитела с обнаруживаемым количеством биозагрязнителей менее чем примерно 100 КОЕ/мл.
49. Способ по п.1, в котором третий препарат антитела имеет количество обнаруживаемых биозагрязнителей порядка 18 КОЕ/мл.
50. Способ по п.1, в котором третий препарат антитела имеет количество обнаруживаемых биозагрязнителей порядка 0,13 КОЕ/мл.
51. Способ по п.1, в котором первый препарат антитела подвергается очистке до поступления на стадию (а).
52. Способ по п.2, в котором антитело, содержавшееся в первом препарате антитела, имеет чистоту примерно 99,8% до поступления на стадию (а).
