Способы сохранения биологической активности рибонуклеиновых кислот - RU2019112812A
Код документа: RU2019112812A
Формула
1. Способ, по существу, поддержания или обеспечиваемого иным образом сохранения биологической активности dsRNA, присутствующей в клетке, для осуществления посттранскрипционного сайленсинга экспрессии гена в целевом организме, включающий стадию добавления к композиции, содержащей указанную клетку, соединения, имеющего функцию средства, сшивающего белок или амин, и/или кислоты.
2. Способ по предыдущему пункту, где белок или полиамин добавляют к композиции с клеткой перед добавлением средства, сшивающего белок или амин, и где указанные белок или полиамин связываются с клеточной поверхностью.
3. Способ по любому из предыдущих пунктов, где сшивающее средство и/или кислоту добавляют к композиции, содержащей клетку, перед введением композиции в участок.
4. Способ по п. 3, где участок представляет собой почву.
5. Способ по любому из предыдущих пунктов, где сшивающее средство выбрано из группы, состоящей из полиальдегидов, диальдегидов, диэпоксидов, полиэпоксидов, пиридилдисульфидов, полифункциональных карбодиимидов, полифункциональных малеимидов, полифункциональных сложных имидоэфиров, полифункциональных сложных н-гидроксисукцинимидных эфиров и полифункциональных галогенацеталей.
6. Способ по любому из предыдущих пунктов, где сшивающее средство представляет собой глутаральдегид.
7. Способ по любому из предыдущих пунктов, где кислота представляет собой молочную кислоту или муравьиную кислоту.
8. Способ по любому из пп. 1-7, где клетка представляет собой бактериальную клетку, необязательно предварительно инактивированную.
9. Способ по предыдущему пункту, где бактериальные клетки сконструированы так, чтобы содержать последовательность ДНК, которая при транскрибировании дает двухнитевую РНК, по меньшей мере часть которой содержит последовательность, которая по существу идентична последовательности мРНК гена вредителя растений.
10. Способ по предыдущему пункту, где вредитель растений выбран из группы, состоящей из Diabrotica virgifera virgifera (западный кукурузный жук), Diabrotica barberi (северный кукурузный жук), Diabrotica undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук), Diabrotica virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук), Diabrotica speciosa (тыквенный жук), нематод, проволочных червей и червовидных личинок, а также соответствующих почвенных патогенов, таких как бактерии и грибы.
11. Способ по п. 1, где клетка представляет собой бактериальную клетку, средство представляет собой глутаральдегид, при этом глутаральдегид применяют по отношению к почве в количестве от 1 до 0,01% в пересчете на объем композиции с клеткой, и указанная биологическая активность, по существу, поддерживается в течение по меньшей мере 21 дня.
12. Способ по п. 1, где клетка представляет собой бактериальную клетку, кислота представляет собой молочную кислоту или муравьиную кислоту, при этом кислоту применяют по отношению к композиции в количестве от 1 М до 0,1 М в композиции с клеткой, и указанная биологическая активность, по существу, поддерживается в течение по меньшей мере 21 дня.
13. Композиция, содержащая клетку и средство, сшивающее белок или амин, и/или кислоту, отличающаяся тем, что композиция содержит почву, клетка содержит dsRNA, и сшивающее средство представляет собой глутаральдегид, и кислота представляет собой молочную кислоту или муравьиную кислоту.
14. Композиция с клеткой, содержащая средство, сшивающее белок или амин, и/или кислоту, добавленные с целью поддержания биологической активности dsRNA, гетерологично экспрессируемой в клетке.
15. Применение средства, сшивающего белок или амин, и/или кислоты для, по существу, стабилизации или обеспечиваемого иным образом сохранения биологической активности dsRNA, присутствующей в клетке.
