Средства улучшения сайленсинга генов или его характеристик - RU2019112810A
Код документа: RU2019112810A
Формула
1. Способ подавления или, по существу, уменьшения степени связывания композиции, содержащей комплекс, образованный между катионным полимером и полинуклеотидом, с отрицательно заряженными молекулами, присутствующими в почве, предусматривающий включение в композицию гасящего средства, способного, по существу, нейтрализовать положительные заряды наружной поверхности комплекса.
2. Способ по предыдущему пункту, где полинуклеотид представляет собой dsRNA, полимер представляет собой полиамин, и гасящее средство представляет собой моноальдегид.
3. Способ по любому из предыдущих пунктов, где полимер представляет собой линейный или разветвленный полиэтиленимин, полипептид или катионный полисахарид.
4. Способ по любому из предыдущих пунктов, где отрицательно заряженные частицы предусматривают гуминовую кислоту.
5. Способ контроля заражения подземными вредителями растений, предусматривающий обеспечение
a) композиции, содержащей комплекс, образованный между катионным полимером и dsRNA,
b) по существу, нейтрализации положительных зарядов наружной поверхности комплекса из а) с помощью гасящего средства и
c) применения композиции из b) по отношению к почве,
где указанная dsRNA обеспечивает посттранскрипционный сайленсинг гена-мишени в указанном подземном вредителе растений.
6. Способ по предыдущему пункту, где подземный вредитель растений выбран из группы, состоящей из Diabrotica virgifera virgifera (западный кукурузный жук), Diabrotica barberi (северный кукурузный жук), Diabrotica undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук), Diabrotica virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук), Diabrotica speciosa (тыквенный жук), нематод, проволочников, и червовидных личинок, и соответствующих почвенных патогенов, таких как бактерии и грибы.
7. Способ по предыдущему пункту, где указанный подземный вредитель растений является насекомым рода Diabrotica.
8. Применение гасящего средства для, по существу, нейтрализации остаточных положительно заряженных групп в комплексе, содержащем полинуклеотид и катионный полимер.
9. Композиция, содержащая комплекс, образованный между катионным полимером и полинуклеотидом, и гасящее средство, способное, по существу, нейтрализовать остаточные положительно заряженные группы наружной поверхности комплекса, где полимер выбран из группы, состоящей из разветвленного или линейного полиэтиленимина, имидазолсодержащих полимеров, хитозанов, катионных полисахаридов, полиамидоаминов, полимеров и сополимеров аминокислот, таких как лизин, гистидин и аргинин, которые содержат аминогруппы, и полиаминов, где в ином случае положительно заряженные группы наружной поверхности будут приводить к адсорбции комплекса почвой.
10. Композиция по п. 9, где полимер представляет собой разветвленный или линейный полиэтиленимин.
11. Композиция по пп. 9-10, где полинуклеотид представляет собой dsRNA.
12. Композиция по пп. 9-11, где полимер представляет собой полиамин.
13. Композиция по предыдущему пункту, где полиамин выбран из группы, состоящей из линейных и разветвленных полиаминов, содержащих по меньшей мере 5 аминогрупп.
14. Композиция по пп. 9-13, где указанный комплекс содержится в клеточном лизате или образуется внутри интактных клеток, и к нему добавляется гасящее средство.
15. Композиция по пп. 9-14, где средство выбрано из группы, состоящей из изоцианатов, моноальдегидов, моноэпоксидов, сложных моноэфиров, монокарбоновых кислот, моноангидридов и других молекул, содержащих одну группу, которая вступает в реакцию с аминами.
16. Композиция по предыдущему пункту, где моноальдегид является водорастворимым.
17. Композиция по предыдущему пункту, где моноальдегид выбран из группы, состоящей из метаналя, этаналя, пропаналя, бутаналя, пентаналя и гексаналя.
18. Композиция по любому из п. 15, где моноальдегид является, по существу, нерастворимым в воде.
19. Композиция по предыдущему пункту, где моноальдегид выбран из группы, состоящей из гептаналя, октаналя и деканаля.
20. Композиция по любому из пп. 15-19, которая содержит моноальдегид в количестве, достаточном для обеспечения достаточной степени гашения остаточных положительно заряженных групп в комплексе, так что комплекс, по существу, не связывается с отрицательно заряженными частицами, такими как присутствующие в почве.
21. Композиция по любому из пп. 9-20, где полинуклеотид представляет собой dsRNA, содержащую последовательность, которая, по существу, идентична последовательности mRNA гена в эукариотической клетке.
22. Композиция по предыдущему пункту, где эукариотом является насекомое, выбранное из группы, состоящей из Diabrotica virgifera virgifera (западный кукурузный жук), Diabrotica barberi (северный кукурузный жук), Diabrotica undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук), Diabrotica virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук), Diabrotica speciosa (тыквенный жук), нематод, проволочников, и червовидных личинок, и соответствующих почвенных патогенов, таких как бактерии и грибы.
23. Способ получения композиции по любому из пп. 9-22, предусматривающий образование комплекса полинуклеотида и катионного полимера и гашение остаточного положительного заряда в комплексе с помощью добавления гасящего средства.
