Растворимые антитела, содержащие только тяжелые цепи - RU2011142759A

Реферат

1. Способ получения нуклеиновой кислоты, которая кодирует цепь антитела, содержащего только тяжелые цепи, или растворимый домен VH, который включает:(a) получение долгоживущих плазматических клеток или В-клеток памяти у трансгенного млекопитающего, которые содержат локус, содержащий только тяжелую цепь, где указанное млекопитающее сенсибилизировали антигеном;(b) выделение популяции мРНК из клеток и получение популяции кДНК, кодирующих антитела, содержащие только тяжелые цепи или растворимые домены VH, из указанной популяции мРНК;(c) клонирование популяции кДНК в экспрессионный вектор;(d) трансфицирование бактерий экспрессионным вектором;(e) селекцию, амплификцию и сбор колоний бактерий и очистку ДНК рекомбинантного вектора;(f) трансформирование клеточной линии, способной экспрессировать, накапливать, секретировать или представлять белок, кодируемый экспрессионным вектором, с помощью экспрессионного вектора; и(g) селекция клеточной линии, которая экспрессирует, накапливает, секретирует или представляет цепь антитела, содержащего только тяжелые цепи, которое распознает антиген.2. Способ по п.1, где долгоживущие плазматические клетки или В-клетки памяти выделяют из вторичных лимфатических желез, костного мозга или селезенки сенсибилизированного антигеном трансгенного млекопитающего, не относящегося к человеку.3. Способ по п.1 или 2, где долгоживущие плазматические клетки или В-клетки памяти очищают с использованием поверхностных клеточных маркеров на клетках.4. Способ по п.3, где поверхностный клеточный маркер представляет собой маркер CD138.5. Способ по п.1, где клеточная линия представляет собой микробную клеточн