Животные с гуманизированными il-4 и il-4rα - RU2019131253A
Код документа: RU2019131253A
Формула
1. Грызун для экспрессии гуманизированного белка IL-4,
где геном грызуна содержит замену геномной ДНК гена IL-4 грызуна в эндогенном локусе IL-4 грызуна последовательностью нуклеиновой кислоты человеческого гена IL-4 с образованием гуманизированного гена IL-4,
где гуманизированный ген IL-4 кодирует человеческий белок IL-4 и содержит участок от экзона 1, начинающегося со стартового кодона ATG, до экзона 4 человеческого гена IL-4,
где экспрессия гуманизированного гена IL-4 находится под контролем регуляторных элементов грызуна в эндогенном локусе IL-4 грызуна, и
где грызун представляет собой мышь или крысу.
2. Грызун по п.1, где грызун не способен экспрессировать белок IL-4 грызуна.
3. Грызун по п.1 или 2, где грызун представляет собой мышь, и где замена представляет собой замену геномной ДНК, содержащей участок от экзона 1, начинающегося со стартового кодона ATG, до экзона 4 гена IL-4 мыши, на геномную ДНК, содержащую участок от экзона 1, начинающегося со стартового кодона ATG, до экзона 4 человеческого гена IL-4.
4. Грызун по любому из пп.1-3, где у грызуна экспрессируется гуманизированный белок IL-4Rα, содержащий эктодомен человеческого белка IL-4Rα.
5. Грызун по п.5, где гуманизированный белок IL-4Rα содержит трансмембранный домен и цитоплазматический домен эндогенного белка IL-4Rα грызуна.
6. Эмбриональная стволовая (ES) клетка грызуна для получения грызуна с гуманизированным IL-4, содержащая
замену геномной ДНК гена IL-4 грызуна в эндогенном локусе IL-4 грызуна последовательностью нуклеиновой кислоты человеческого гена IL-4 с образованием гуманизированного гена IL-4,
где гуманизированный ген IL-4 кодирует человеческий белок IL-4 и содержит участок от экзона 1, начинающегося со стартового кодона ATG, до экзона 4 человеческого гена IL-4,
где экспрессия гуманизированного гена IL-4 находится под контролем регуляторных элементов грызуна в эндогенном локусе IL-4 грызуна, и
где ES-клетка грызуна представляет собой ES-клетку мыши или ES-клетку крысы.
7. ES-клетка грызуна по п.6, где ES-клетка грызуна представляет собой ES-клетку мыши.
8. ES-клетка грызуна по п.7, где замена представляет собой замену геномной ДНК, содержащей участок от экзона 1, начинающегося со стартового кодона ATG, до экзона 4 гена IL-4 мыши, на геномную ДНК, содержащую участок от экзона 1, начинающегося со стартового кодона ATG, до экзона 4 человеческого гена IL-4.
9. Эмбрион грызуна для получения грызуна с гуманизированным IL-4, содержащий ES-клетку грызуна по п.6, где эмбрион грызуна представляет собой эмбрион мыши или эмбрион крысы.
10. Способ получения грызуна с гуманизированным IL-4, включающий
(а) замену геномной ДНК гена IL-4 грызуна в эндогенном локусе IL-4 грызуна в ES-клетке грызуна последовательностью нуклеиновой кислоты человеческого гена IL-4 с образованием гуманизированного гена IL-4, тем самым получая генетически модифицированную ES-клетку грызуна,
где гуманизированный ген IL-4 кодирует человеческий белок IL-4 и содержит участок от экзона 1, начинающегося со стартового кодона ATG, до экзона 4 человеческого гена IL-4,
где экспрессия гуманизированного гена IL-4 находится под контролем регуляторных элементов грызуна в эндогенном локусе IL-4 грызуна, и
где ES-клетка грызуна представляет собой ES-клетку мыши или ES-клетку крысы; и (b) получение грызуна с гуманизированным IL-4 с применением генетически модифицированной ES-клетки со стадии (а), где грызун с гуманизированным IL-4 представляет собой мышь или крысу.
12. Способ по п.11, где грызун представляет собой мышь, и где замена представляет собой замену геномной ДНК, содержащей участок от экзона 1, начинающегося со стартового кодона ATG, до экзона 4 гена IL-4 мыши, на геномную ДНК, содержащую участок от экзона 1, начинающегося со стартового кодона ATG, до экзона 4 человеческого гена IL-4.
13. Целенаправленно воздействующий вектор для гуманизации эндогенного гена IL-4 у грызуна, где грызун представляет собой мышь или крысу, содержащий
последовательность нуклеиновой кислоты человеческого гена IL-4, фланкированную последовательностями нуклеиновой кислоты, которые гомологичны последовательностям нуклеиновой кислоты в локусе IL-4 грызуна и опосредуют встраивание последовательности нуклеиновой кислоты человеческого гена IL-4 в локус IL-4 грызуна,
где последовательность нуклеиновой кислоты человеческого гена IL-4 содержит участок от стартового кодона ATG экзона 1 до экзона 4 человеческого гена IL-4;
где встраивание последовательности нуклеиновой кислоты человеческого гена IL-4 в локус IL-4 грызуна приводит к замене геномного фрагмента гена IL-4 грызуна с образованием гуманизированного гена IL-4,
где геномный фрагмент гена IL-4 грызуна, в котором производят замену, содержит участок от стартового кодона ATG экзона 1 до экзона 4 гена IL-4 грызуна, и
где экспрессия гуманизированного гена IL-4 находится под контролем регуляторных элементов IL-4 грызуна в эндогенном локусе IL-4 грызуна.
14. Целенаправленно воздействующий вектор по п.13, где грызун представляет собой мышь.
