Антитело против рецептора igf-i - RU2019138617A
Код документа: RU2019138617A
Формула
1. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное, которое специфически связывается с рецептором IGF-I позвоночных и проявляет активность усиления роста клеток от позвоночных.
2. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по п. 1, при этом активность антитела, фрагмента или производного в усилении роста клеток от позвоночных равна или выше, чем соответствующая активность IGF-I дикого типа.
3. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по п. 1 или 2, при этом значение EC50 антитела, фрагмента или производного для усиления роста клеток от позвоночных in vitro составляет 1/20 или меньше от соответствующего значения IGF-I дикого типа.
4. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 1-3, при этом при контактировании антитела, фрагмента или производного с культивируемыми клетками от позвоночных продолжительность действия антитела, фрагмента или производного по усилению роста культивируемых клеток относительно продолжительности контакта лучше, чем у IGF-I дикого типа.
5. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 2-4, при этом IGF-I дикого типа представляет собой IGF-I человека, имеющий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO:1.
6. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 1-5, при этом значение EC50 антитела, фрагмента или производного для усиления роста клеток от позвоночных in vitro составляет 0,1 нМ или меньше.
7. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 1-6, которое проявляет активность, индуцирующую увеличение мышечной массы и/или длины тела позвоночных при парентеральном введении позвоночным.
8. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 1-7, которое вводится позвоночным с частотой раз в неделю или реже.
9. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 1-8, при этом позвоночные представлены человеком; другими животными, включая морских свинок, обезьян, кроликов, коров, свиней, лошадей, овец, собак или птиц; или же животными, отличными от человека, подвергнутыми инженерии для экспрессии рецептора IGF-I человека.
10. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 1-9, которое не индуцирует поглощения глюкозы дифференцированными мышечными клетками при введении в дозе, достаточной для индуцирования роста клеток от позвоночных.
11. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по п. 10, которое не индуцирует поглощения глюкозы дифференцированными мышечными клетками при введении в дозе, в 100 или больше раз превышающей значение EC50 для индуцирования роста клеток от позвоночных in vitro.
12. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по п. 10 или 11, при этом клетки от позвоночных представляют собой миобласты, полученные от человека или другого млекопитающего.
13. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 7-12, которое не снижает уровень глюкозы в крови позвоночных при парентеральном введении позвоночным в дозе, достаточной для индуцирования увеличения мышечной массы и/или длины тела у позвоночных.
14. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по п. 13, которое не изменяет уровень глюкозы в крови позвоночных при парентеральном введении позвоночным в дозе, которая в 10 или больше раз превышает эффективную дозу, достаточную для индуцирования увеличения мышечной массы и/или длины тела у позвоночных.
15. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 1-14, которое связывается с доменом CR рецептора IGF-I.
16. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное, которое связывается с доменом CR рецептора IGF-I и ингибирует связывание IGF-I или IGF-II с рецептором IGF-I.
17. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по п. 16, которое связывается с эпитопом, содержащим ProSerGlyPheIleArg AsnX1X2GlnSerMet (где X1 означает Gly или Ser, а X2 означает Ser или Thr) или его часть по соседству в последовательности домена CR рецептора IGF-I.
18. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по п. 17, которое связывается с эпитопом, содержащим ProSerGlyPheIleArg AsnGlySerGlnSerMet или его часть по соседству в последовательности домена CR рецептора IGF-I.
19. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 1-18, которое обладает перекрестной реактивностью с рецептором IGF-I человека или других животных, включая морских свинок, обезьян, кроликов, коров, свиней, лошадей, овец, собак или птиц.
20. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 1-19, которое вызывает реакцию антиген-антитело со сродством по равновесной константе диссоциации (KD) 1×10-8 M или меньше.
21. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 16-20, которое обладает по меньшей мере одним из следующих признаков:
1) проявляет активность, вызывающую рост клеток от позвоночных;
2) проявляет активность, вызывающую увеличение мышечной массы и/или длины тела позвоночных при парентеральном введении позвоночным;
3) не вызывает поглощения глюкозы дифференцированными мышечными клетками при введении в дозе, достаточной для того, чтобы вызвать рост клеток от позвоночных; и
4) не изменяет уровень глюкозы в крови позвоночных при парентеральном введении позвоночным в дозе, достаточной для того, чтобы вызвать увеличение мышечной массы и/или длины тела у позвоночных.
22. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 16-21, которое обладает по меньшей мере одним из следующих признаков:
1) ингибирует рост клеток от позвоночных, вызванный IGF-I;
2) ингибирует индуцированную IGF-I пролиферацию клеток у позвоночных, страдающих связанным с пролиферацией клеток заболеванием, при парентеральном введении позвоночным;
3) не влияет на поглощение глюкозы дифференцированными мышечными клетками в дозе, достаточной для ингибирования роста клеток от позвоночных, индуцированного IGF-I; и
4) не изменяет уровень глюкозы в крови позвоночных, страдающих связанным с пролиферацией клеток заболеванием, при парентеральном введении позвоночным в дозе, достаточной для ингибирования индуцированной IGF-I пролиферации клеток у позвоночных.
23. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 1-22, которое представляет собой Fab, scFv, диатело или биспецифичное антитело либо его производное.
24. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 1-23, состоящее из аминокислотной последовательности, включающей
в качестве последовательности CDR-1 вариабельной области тяжелой цепи (CDR-H1) - аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, или аминокислотную последовательность, полученную из SEQ ID NO: 3 путем замены, делеции или вставки любого аминокислотного остатка;
в качестве последовательности CDR-2 вариабельной области тяжелой цепи (CDR-H2) - аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 4, или аминокислотную последовательность, полученную из SEQ ID NO: 4 путем замены, делеции или вставки одного или двух аминокислотных остатков;
в качестве последовательности CDR-3 вариабельной области тяжелой цепи (CDR-Н2) - аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 4, или аминокислотную последовательность, полученную из SEQ ID NO: 4 путем замены, делеции или вставки одного или двух аминокислотных остатков;
в качестве последовательности CDR-3 вариабельной области тяжелой цепи (CDR-Н3) - аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5, или аминокислотную последовательность, полученную из SEQ ID NO: 5 путем замены, делеции или вставки одного или двух аминокислотных остатков;
в качестве последовательности CDR-1 вариабельной области легкой цепи (CDR-L1) - аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6, или аминокислотную последовательность, полученную из SEQ ID NO: 6 путем замены, делеции или вставки одного или двух аминокислотных остатков;
в качестве последовательности CDR-2 вариабельной области легкой цепи (CDR-L2) - аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, или аминокислотную последовательность, полученную из SEQ ID NO: 7 путем замены, делеции или вставки любого аминокислотного остатка;
в качестве последовательности CDR-3 вариабельной области легкой цепи (CDR-L3) - аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, или аминокислотную последовательность, полученную из SEQ ID NO: 8 путем замены, делеции или вставки одного или двух аминокислотных остатков.
25. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по п. 24, дополнительно содержащее каркасную последовательность иммуноглобулина.
26. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по п. 25, при этом каркасная последовательность иммуноглобулина представляет собой каркасную последовательность каждого класса иммуноглобулина человека или других животных, включая морских свинок, обезьян, кроликов, коров, свиней, лошадей, овец, собак, птиц, мышей или крыс.
27. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 1-26, состоящее из аминокислотной последовательности, включающей:
в качестве вариабельной области тяжелой цепи - аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9, или аминокислотную последовательность, имеющую сходство на 90% или больше с SEQ ID NO: 9; и
в качестве вариабельной области легкой цепи - аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10, или аминокислотную последовательность, имеющую сходство на 90% или больше с SEQ ID NO: 10.
28. Антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 1-27, дополнительно содержащее константную область каждого класса иммуноглобулина человека или других животных, включая морских свинок, обезьян, кроликов, коров, свиней, лошадей, овец, собак, птиц, мышей или крыс.
29. Молекула нуклеиновой кислоты, состоящая из последовательности полинуклеотида, кодирующего антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 1-28.
30. Клонирующий вектор или экспрессирующий вектор, содержащий по меньшей мере одну молекулу нуклеиновой кислоты по п. 29.
31. Рекомбинантная клетка, полученная из клетки хозяина путем трансфекции вектором по п. 30.
32. Способ получения антитела против рецептора IGF-I либо его фрагмента или производного по любому из пп. 1-28, включающий
культивирование рекомбинантной клетки по п. 31; и
очистку антитела против рецептора IGF-I, его фрагмента или производного, полученного из рекомбинантной клетки.
33. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 1-28, молекулы нуклеиновой кислоты по п. 29, вектор по п. 30 или рекомбинантные клетки по п. 31.
34. Фармацевтическая композиция по п. 33, также содержащая дополнительный активный ингредиент, отличный от антитела, его фрагмента или производного по любому из пп. 1-28, молекул нуклеиновой кислоты по п. 29, вектора по п. 30 или рекомбинантных клеток по п. 31.
35. Фармацевтическая композиция по п. 34, при этом активным ингредиентом является одно или несколько из числа гормона роста или его аналогов, инсулина или его аналогов, IGF-II или его аналогов, антител против миостатина, антагонистов миостатина, антител против рецептора активина типа IIB, антагонистов рецептора активина типа IIB, растворимого рецептора активина типа IIB или его аналогов, грелина или его аналогов, фоллистатина или его аналогов, β2-агонистов и селективных модуляторов андрогеновых рецепторов.
36. Фармацевтическая композиция по п. 34 или 35, при этом активный ингредиент включает ингредиент, выбранный из группы, состоящей из: кортикостероидов, противорвотных средств, ондансетрона гидрохлорида, гранисетрона гидрохлорида, метоклопрамида, домперидона, галоперидола, циклизина, лоразепама, прохлорперазина, дексаметазона, левомепромазина, трописетрона, противораковой вакцины, ингибиторов GM-CSF, ДНК-вакцины против GM-CSF, клеточной вакцины, вакцины против дендритных клеток, рекомбинантной вирусной вакцины, вакцины против белка теплового шока (HSP), гомологичной противоопухолевой вакцины, аутологичной противоопухолевой вакцины, анальгетиков, ибупрофена, напроксена, трисалицилат холина магния, оксикодона гидрохлорида, антиангиогенных, антитромботических средств, антител против PD-1, ниволумаба, пембролизумаба, антител против PD-L1, атезолизумаба, антител против CTLA4, ипилимумаба, антител против CD20, ритуксимаба, антител против HER2, трастузумаба, антител против CCR4, могамулизумаба, антител против VEGF, бевацизумаба, антител против рецептора VEGF, растворимого фрагмента рецептора VEGF, антител против TWEAK, антител против рецептора TWEAK, растворимого фрагмента рецептора TWEAK, AMG 706, AMG 386, антипролиферативных средств, ингибиторов фарнезил-протеинтрансферазы, ингибиторов αVβ3, ингибиторов αVβ5, ингибиторов р53, ингибиторов Kit-рецептора, ингибиторов RET-рецептора, ингибиторов PDGFR, ингибиторов секреции гормона роста, ингибиторов ангиопоэтина, ингибиторов инфильтрирующих опухоли макрофагов, ингибиторов c-FMS, антител против c-FMS, ингибиторов CSF-1, антител против CSF-1, растворимого фрагмента c-FMS, пегвисоманта, гемцитабина, панитумумаба, иринотекана и SN-38.
37. Лекарственный препарат для применения при лечении или профилактике состояния, связанного с IGF-I или IGF-II, содержащий антитело против рецептора IGF-I либо его фрагмент или производное по любому из пп. 1-28, молекулы нуклеиновой кислоты по п. 29, вектор по п. 30 или рекомбинантные клетки по п. 31.
38. Лекарственный препарат по п. 37, при этом состояние, связанное с IGF-I, выбрано из числа мышечной атрофии от бездействия, карликовости, диабетической нефропатии, хронической почечной недостаточности, синдрома Ларона, цирроза печени, фиброза печени, старения, ограничения внутриутробного развития (IUGR), неврологических заболеваний, инсульта, травмы спинного мозга, защиты сердечно-сосудистой системы, инсулинорезистентного диабета, метаболического синдрома, остеопороза, муковисцидоза, заживления ран, миотонической дистрофии, связанной со СПИД саркопении, связанного с ВИЧ синдрома перераспределения жира, ожогов, болезни Крона, синдрома Вернера, сцепленного с Х-хромосомой комбинированного иммунодефицита, потери слуха, нервной анорексии и ретинопатии недоношенных, синдрома Тернера, синдрома Прадера-Вилли, синдрома Сильвера-Рассела, идиопатической карликовости, ожирения, рассеянного склероза, фибромиалгии, язвенного колита, низкой мышечной массы, ишемии миокарда и снижения плотности костей.
39. Лекарственный препарат по п. 37 или 38, который вводится парентерально.
40. Лекарственный препарат по любому из пп. 37-39, который представляет собой ветеринарный препарат для введения животным, а не людям.
41. Лекарственный препарат по п. 40, при этом ветеринарный препарат вводится с целью повышения мышечной массы и/или длины тела, усиления роста, повышения продукции молока, стимулирования размножения или предотвращения старения.
42. Лекарственный препарат по п. 40 или 41, при этом животные представляют собой морских свинок, обезьян, кроликов, коров, свиней, лошадей, овец, собак или птиц;
43. Лекарственный препарат по любому из пп. 37-42 для лечения или профилактики заболевания, вызванного действием IGF-I или IGF-II на рецептор IGF-I.
44. Лекарственный препарат по п. 43, при этом заболевание, вызванное действием IGF-I или IGF-II на рецептор IGF-I, выбрано из группы, состоящей из: рака печени, нейробластомы, саркомы поперечно-полосатых мышц, рака костей, детского рака, акромегалии, рака яичников, рака поджелудочной железы, доброкачественной гипертрофии предстательной железы, рака молочной железы, рака простаты, рака костей, рака легких, колоректального рака, рака шейки матки, синовиальной саркомы, рака мочевого пузыря, рака желудка, опухоли Вильмса, диареи, связанной с метастатическими карциноидными и секретирующими вазоактивный кишечный пептид опухолями, випомы, синдрома Вернера-Моррисона, синдрома Беквита-Видеманна, рака почек, почечно-клеточного рака, переходно-клеточного рака, саркомы Юинга, лейкемии, острой лимфобластной лейкемии, опухоли головного мозга, глиобластомы, неглиобластомной опухоли головного мозга, менингиомы, аденомы гипофиза, вестибулярной шванномы, примитивной нейроэктодермальной опухоли, медуллобластомы, астроцитомы, олигодендроглиомы, эпендимомы, папилломы хороидного сплетения, гигантизма, псориаза, атеросклероза, рестеноза гладких мышц сосудов, неадекватного роста микрососудов, диабетической ретинопатии, болезни Грейвса, рассеянного склероза, системной красной волчанки, хронического тиреоидита, миастении, аутоиммунного тиреоидита и болезни Бехчета.
45. Способ культивирования клеток от позвоночных in vitro, включающий контактирование клеток от позвоночных с антителом против рецептора IGF-I либо его фрагментом или производным по любому из пп. 1-28, молекулой нуклеиновой кислоты по п. 29, вектором по п. 30 или рекомбинантными клетками по п. 31 при культивировании клеток.
46. Способ по п. 45, при этом контактирование проводится с целью усиления роста или индуцирования дифференцировки клеток от позвоночных.
47. Способ по п. 45 или 46, при этом антитело против рецептора IGF-I, его фрагмент или производное адсорбировано или иммобилизовано на твердой фазе.
48. Трансгенное животное, содержащее ген рецептора IGF-I, который подвергался мутации в своем домене CR посредством генной инженерии с тем, чтобы домен CR включал в себя аминокислотную последовательность, представленную ProSerGlyPheIleArgAsnGlySerGlnSerMet.
49. Трансгенное животное, в которое был трансфецирован гетерологичный ген рецептора IGF-I, причем аминокислотная последовательность, кодируемая гетерологичным геном рецептора IGF-I, отличается от аминокислотной последовательности, кодируемой собственным геном рецептора IGF-I животного, по аминокислотным остаткам X1 и/или X2 в последовательности, представленной ProSerGlyPheIleArg AsnX1X2GlnSerMet в домене CR.
