Способ экспрессии гена у трансгенных птиц с использованием ретровирусного вектора и трансгенные птицы, полученные соответствующим способом - RU2005106867A

Реферат

1. Трансгенная химерная птица G0, которой вводят экзогенный ген антитела с использованием ретровирусного вектора с дефектом репликации, и которая продуцирует антитело, кодируемое трансгеном, по меньшей мере, в одной из сред, выбранных из крови, яичного белка и яичного желтка.

2. Трансгенная химерная птица G0 по п.1, где константная область антитела принадлежит к классу человеческих IgG.

3. Трансгенная химерная птица G0 по п.1, где константная область антитела принадлежит к подклассу человеческих IgG1.

4. Трансгенная химерная птица G0 по п.1, где константная область антитела принадлежит к IgG куропатки, IgG курицы или IgG мыши.

5. Трансгенная химерная птица G0 по любому из пп.1-4, где ген антитела контролируется конститутивным промотором.

6. Трансгенная химерная птица G0 по п.5, где конститутивным промотором является промотор куриного β-актина.

7. Трансгенная химерная птица G0 по любому из пп.1-4, где ретровирусным вектором является вектор, полученный из вируса мышиного лейкоза Молони.

8. Трансгенная химерная птица G0 по любому из пп.1-4, где ретровирусный вектор принадлежит к псевдотипу VSV-G.

9. Трансгенная химерная птица G0 по любому из пп.1-4, где птица представляет собой курицу или куропатку.

10. Трансгенная химерная птица G0 по любому из пп.1-4, где антитело представляет собой химерное антитело.

11. Трансгенная химерная птица G0 по п.10, у которой количество антитела в крови составляет не менее 0,5 мкг/мл.

12. Трансгенная химерная птица G0 по п.11, у которой количество антитела в крови составляет не менее 5 мкг/мл.

13. Трансгенная химерная птица G0 по п.10, у которой количество антитела в яичном белке составляет не менее 0,1 мкг/мл.

14. Трансгенная химерная птица G0 по п.13, у которой количество антитела в яичном белке составляет не менее 1 мкг/мл.

15. Трансгенная химерная птица G0 по п.10, у которой количество антитела в яичном желтке составляет не менее 0,1 мкг/мл.

16. Трансгенная химерная птица G0 по п.13, у которой количество антитела в яичном желтке составляет не менее 1 мкг/мл.

17. Трансгенная химерная птица G0 по любому из пп.1-4, где антитело представляет собой антитело scFv-Fc.

18. Трансгенная химерная птица G0 по п.17, у которой количество антитела в крови составляет не менее 20 мкг/мл.

19. Трансгенная химерная птица G0 по п.18, у которой количество антитела в крови составляет не менее 2000 мкг/мл.

20. Трансгенная химерная птица G0 по п.17, у которой количество антитела в яичном белке составляет не менее 5 мкг/мл.

21. Трансгенная химерная птица G0 по п.20, у которой количество антитела в яичном белке составляет не менее 500 мкг/мл.

22. Трансгенная химерная птица G0 по п.17, у которой количество антитела в яичном желтке составляет не менее 5 мкг/мл.

23. Трансгенная химерная птица G0 по п.22, у которой количество антитела в яичном желтке составляет не менее 500 мкг/мл.

24. Способ получения антитела, который предусматривает получение трансгенной химерной птицы G0 по любому из пп.1-23 и извлечение антитела из крови и/или яйца указанной трансгенной химерной птицы G0.

25. Способ получения трансгенной химерной птицы G0, который предусматривает инкубацию оплодотворенного яйца птицы, инфицирование раннего эмбриона после бластодермального периода (исключая его), сразу после откладывания яиц, ретровирусным вектором с дефектом репликации, и затем выведение эмбриона.

26. Способ получения трансгенной химерной птицы G0 по п.25, который предусматривает инкубацию оплодотворенного яйца птицы, инфицирование раннего эмбриона по истечении 24 ч или более после начала инкубации с использованием ретровирусного вектора с дефектом репликации и затем выведение эмбриона.

27. Способ получения трансгенной химерной птицы G0 по п.25 или 26, который предусматривает инкубацию оплодотворенного яйца птицы и микроинъекцию ретровирусного вектора с дефектом репликации в сердце или кровеносный сосуд, образовавшиеся в раннем эмбрионе.

28. Способ получения трансгенной химерной птицы G0 по п.25 или 26, который предусматривает инкубацию оплодотворенного яйца птицы и микроинъекцию ретровирусного вектора с дефектом репликации в сердце или кровеносный сосуд, образовавшиеся в раннем эмбрионе, по истечении 24 ч или более после начала инкубации.

29. Способ получения трансгенной химерной птицы G0 по п.25 или 26, который предусматривает микроинъекцию ретровирусного вектора с дефектом репликации, титр которого составляет не менее 1·10⁷ кое/мл.

30. Способ получения трансгенной химерной птицы G0 по п.29, который предусматривает микроинъекцию ретровирусного вектора с дефектом репликации, титр которого составляет не менее 1·10⁸ кое/мл.

31. Способ получения трансгенной химерной птицы G0 по п.30, который предусматривает микроинъекцию ретровирусного вектора с дефектом репликации, титр которого составляет не менее 1·10⁹ кое/мл.

32. Способ получения трансгенной химерной птицы G0 по п.25 или 26, где ретровирусным вектором является вектор, полученный из вируса мышиного лейкоза Молони.

33. Способ получения трансгенной химерной птицы G0 по п.25 или 26, где ретровирусный вектор принадлежит к псевдо-типу VSV-G.

34. Способ получения трансгенной химерной птицы G0 по п.25 или 26, где птица представляет собой курицу или куропатку.

35. Способ получения трансгенной химерной птицы G0 по п.25 или 26, где трансген, встроенный в ретровирусный вектор с дефектом репликации, содержит генную последовательность, происхождение которой отлично от ретровирусного.

36. Способ получения трансгенной химерной птицы G0 по п.35, где генная последовательность не ретровирусного происхождения представляет собой генную последовательность, контролируемую промотором куриного β-актина.

37. Способ получения трансгенной химерной птицы G0 по п.35, где генная последовательность не ретровирусного происхождения представляет собой генную последовательность, кодирующую ген антитела.

38. Способ получения трансгенной химерной птицы G0 по п.37, где ген антитела представляет собой ген химерного антитела.

39. Способ получения трансгенной химерной птицы G0 по п.37, где ген антитела представляет собой ген антитела scFv-Fc.

40. Способ получения трансгенной химерной птицы G0 по п.35, где генная последовательность не ретровирусного происхождения представляет собой генную последовательность, кодирующую ген гибридного белка.

41. Трансгенная химерная птица G0, которую получают по способу любого из пп.25-40.

42. Способ получения трансгенной птицы, который предусматривает спаривание трансгенной химерной птицы G0, полученной по способу любого из пп.25-40, с аллогенной птицей спаривающегося типа и затем выведение яйца.

43. Способ получения трансгенной птицы по п.42, где аллогенная птица спаривающегося типа представляет собой трансгенную птицу G0, полученную по способу любого из пп.25-40, или ее потомка.

44. Трансгенная птица G1, которую получают путем спаривания трансгенной птицы G0, полученной по способу любого из пп.25-40, с аллогенной птицей спаривающегося типа и затем выведение яйца.

45. Трансгенная птица G1 по п.44, где аллогенная птица спаривающегося типа представляет собой трансгенную птицу G0, полученную по способу любого из пп.25-40, или ее потомка.

46. Способ получения трансгенной птицы, который предусматривает дополнительно спаривание трансгенной птицы G1 по любому из пп.25-40 и затем выведение яйца.

47. Трансгенная птица G2 или ее потомок, которую получают путем дополнительного спаривания трансгенной птицы G1 по п.44 или 45 и затем выведения яйца.

48. Способ получения белка, который предусматривает выделение целевого белка из соматической клетки, крови или яйца трансгенной птицы, полученной по способу из пп.42, 43 или 46.

49. Яйцо, откладываемое трансгенной химерной птицей G0 по п.41, которое содержит не менее 1 мг гетерогенного белка, кодируемого трансгеном.

50. Яйцо, откладываемое трансгенной химерной птицей G0 по п.41, которое содержит не менее 20 мг гетерогенного белка, кодируемого трансгеном.

51. Яйцо, откладываемое трансгенной химерной птицей G0 по п.41, которое содержит не менее 100 мг гетерогенного белка, кодируемого трансгеном.

52. Яйцо, откладываемое трансгенной химерной птицей G0 по п.41, которое содержит не менее 200 мг гетерогенного белка, кодируемого трансгеном.

53. Яйцо, откладываемое трансгенной химерной птицей G1 по п.44 или 45, или ее потомком, которое содержит не менее 1 мг гетерогенного белка, кодируемого трансгеном.

54. Яйцо, откладываемое трансгенной химерной птицей G1 по п.44 или 45, или ее потомком, которое содержит не менее 20 мг гетерогенного белка, кодируемого трансгеном.

55. Яйцо, откладываемое трансгенной химерной птицей G1 по п.44 или 45, или ее потомком, которое содержит не менее 100 мг гетерогенного белка, кодируемого трансгеном.

56. Яйцо, откладываемое трансгенной химерной птицей G1 по п.44 или 45, или ее потомком, которое содержит не менее 200 мг гетерогенного белка, кодируемого трансгеном.

57. Способ селекции зародышевой линии трансгенной химерной птицы, который предусматривает подтверждение присутствия трансгена в сперме самца трансгенной птицы G0.

58. Способ селекции трансгенной птицы, который предусматривает подтверждение экспрессии в крови белка, кодируемого трансгеном.

59. Способ селекции трансгенной химерной птицы G0, который предусматривает подтверждение экспрессии в крови белка, кодируемого трансгеном.