Антитела против il-6, композиции, способы и применение - RU2004114882A

Реферат

1. Химерное, гуманизированное или CDR-привитое антитело, способное ингибировать человеческий IL-6, имеющее по меньшей мере одну определяющую комплементарность область (CDR) тяжелой или легкой цепи, происходящую из мышиного моноклонального анти-IL-6-антитела CLB-8, и константную область, происходящую из одного или нескольких человеческих антител.

2. Антитело против IL-6 по п.1, содержащее по меньшей мере одну вариабельную область тяжелой или легкой цепи, имеющую последовательность SEQ ID NO:7 или 8.

3. Антитело по п.1, которое конкурентно ингибирует in vivo связывание человеческого IL-6 с мышиным анти-IL-6-антителом CLB-8 или с антителом, обладающим в основном аналогичными связывающими свойствами.

4. Анти-IL-6-антитело или его определенная часть или вариант по п.1, где указанное антитело или его определенная часть или вариант связываются с IL-6 с аффинностью (Kd), составляющей по меньшей мере 10^-9М.

5. Анти-IL-6-антитело или его определенная часть или вариант по п.1, где указанное антитело или его определенная часть или вариант связываются с аффинностью (Kd), составляющей по меньшей мере 10^-11М.

6. Анти-IL-6-антитело или его определенная часть или вариант по п.1, где указанное антитело или его определенная часть или вариант связываются с IL-6 с аффинностью (Kd), составляющей по меньшей мере 10^-12М.

7. Анти-IL-6-антитело или его определенная часть или вариант по п.1, где указанным антителом является химерное антитело, содержащее по меньшей мере одну вариабельную область тяжелой или легкой цепи, происходящую из мышиного моноклонального анти-IL-6-антитела CLB-8, и константную область, происходящую из одного или нескольких человеческих антител.

8. Анти-IL-6-антитело или его определенная часть или вариант по п.7, где указанное антитело или его определенная часть или вариант, в основном, нейтрализует по меньшей мере одну активность по меньшей мере одного IL-6.

9. Анти-IL-6-антитело или его определенная часть или вариант по п.8, где указанная активность составляет по меньшей мере одну, выбранную из группы, состоящей из ингибирования секреции IgM-мю клетками SKW6.4; ингибирования IL-6-опосредованного продуцирования МСР-1; ингибирования передачи IL-6-сигнала в человеческих моноцитарных клетках лейкоза ТНР-1; ингибирования IL-6-индуцированного продуцирования сывороточного амилоида А клетками HepG2 и ингибирования rhIL-6-индуцированной пролиферации клеток.

10. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая анти-IL-6-антитело и содержащая нуклеиновую кислоту, которая гибридизуется в наиболее жестких условиях с нуклеиновой кислотой, кодирующей химерное, гуманизированное или CDR-привитое антитело или его определенную часть или вариант, или по меньшей мере на 95% ей идентична, и содержащей последовательность, кодирующую по меньшей мере одну определяющую комплементарность область (CDR), соответствующую комплементарную по меньшей мере 90-100% смежных нуклеотидов по меньшей мере одной из SEQ ID NO:1, 2, 3, 4, 5, 6.

11. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая анти-IL-6-антитело по п.10, где указанная нуклеиновая кислота содержит по меньшей мере одну последовательность, кодирующую определяющую комплементарность область (CDR), соответствующую комплементарную по меньшей мере 90-100% смежных нуклеотидов по меньшей мере одной из SEQ ID NO:1, 2, 3, 4, 5, 6.

12. Выделенная нуклеиновая кислота по п.10, кодирующая по меньшей мере одно анти-IL-6-антитело, имеющее по меньшей мере одну вариабельную область, содержащую SEQ ID NO:7 или 8.

13. Выделенное анти-IL-6-антитело или его определенная часть или вариант, содержащие выделенное антитело или его определенную часть или вариант, кодируемые нуклеиновой кислотой по п.11 или 12.

14. Композиция нуклеиновых кислот, кодирующих анти-IL-6-антитело, содержащая выделенную нуклеиновую кислоту по п.10 и носитель или разбавитель.

15. Вектор для антитела, содержащий нуклеиновую кислоту по п.10.

16. Вектор для антитела по п.15, где указанный вектор содержит по меньшей мере один промотор, выбранный из группы, состоящей из позднего или раннего промотора SV490, промотора CMV, промотора tk HSV, промотора pgk (фосфоглицераткиназы), промотора человеческого иммуноглобулина или промотора EF-1-альфа.

17. Вектор для антитела по п.15, где указанный вектор содержит по меньшей мере один селективный ген или его часть, выбранный из группы, состоящей по меньшей мере из одного гена метотрексата (МТХ), зеленого флуоресцирующего белка (GFP), дигидрофолатредуктазы (DHFR), неомицина (G418) или глутаминсинтетазы (GS).

18. Клетка-хозяин, содержащая выделенную нуклеиновую кислоту по п.10.

19. Клетка-хозяин по п.18, где указанной клеткой-хозяином является по меньшей мере одна клетка, выбранная из COS-1, COS-7, НЕК293, ВНК21, СНО, BSC-1, Нер G2, 653, Sp2/0, 293, HeLa, миеломных клеток или клеток лимфомы, или их любых производных, иммортализованных или трансформированных клеток.

20. Способ продуцирования по меньшей мере одного анти-IL-6-антитела или его определенной части или варианта, предусматривающий трансляцию нуклеиновой кислоты по п.10 или эндогенной нуклеиновой кислоты, которая гибридизуется с ней в жестких условиях, в условиях in vitro, in vivo или in situ, так, что указанное анти-IL-6-антитело или его определенная часть или вариант экспрессируется в детектируемых или возместимых количествах.

21. Композиция анти-IL-6-антител или композиция его определенных частей или вариантов, содержащая выделенное анти-IL-6-антитело или его определенную часть или вариант по п.1 и носитель или разбавитель.

22. Композиция по п.21, которая дополнительно содержит по меньшей мере одно соединение или белок, выбранные по меньшей мере из одного из антагониста TNF, противоревматического средства, миорелаксанта, наркотического средства, нестероидного противовоспалительного лекарственного средства (НСПВС), аналгетика, анестезирующего средства, седативного средства, местного анестезирующего средства, нейромышечного блокатора, противомикробного средства, средства против псориаза, кортикостероида, анаболического стероида, ассоциированного с диабетом агента, минерала, микроэлемента, тиреоидного фактора, витамина, кальций-ассоциированного гормона, средства против диареи, средства против кашля, противорвотного средства, противоязвенного средства, слабительного средства, антикоагулянта, эритропоэтина, филграстима, сарграмостима, иммунизирующего средства, иммуноглобулина, иммунодепрессанта, гормона роста, гормон-заместительного лекарственного средства, модулятора рецептора эстрогена, мидриатического средства, средства против циклоплегии, алкилирующего агента, антиметаболита, митотического ингибитора, радиофармацевтического препарата, антидепрессанта, средства против маниакального психоза, антипсихотического средства, анксиолитика, гипнотического средства, симпатомиметика, стимулятора, донепецила, такрина, противоастматического средства, бета-агониста, стероида для ингаляции, ингибитора лейкотриена, метилксантина, кромолина, эпинефрина или его аналога, дорназы альфа, цитокина или антагониста цитокина.

23. Способ лечения иммунного расстройства или заболевания в клетках, тканях, органах или у животного, предусматривающий контактирование с указанной клеткой, тканью, органом или животным, либо введение в них по меньшей мере одного из выбранных эффективных иммуномодулирующих количеств по меньшей мере одного анти-IL-6-антитела или его определенной части или варианта по п.1.

24. Способ по п.23, где указанным животным является примат.

25. Способ по п.24, где указанным приматом является обезьяна или человек.

26. Способ по п.25, где указанным иммунным состоянием является по меньшей мере одно состояние, выбранное из ревматоидного артрита/серонегативной артропатии, остеоартрита, воспалительного заболевания кишечника, системной красной волчанки, иридоциклита/увеита/неврита зрительного нерва, идиопатического фиброза легких, системного васкулита/гранулематоза Вегенера, саркоидоза, орхита/операции по реверсивной вазоэктомии, аллергических/атопических заболеваний, астмы, аллергического ринита, экземы, аллергического контактного дерматита, аллергических конъюнктивитов, аллергического пневмонита, трансплантатов, отторжения трансплантированного органа, реакции “трансплантат против хозяина”, синдрома системного воспалительного ответа, септического синдрома, сепсиса, вызванного грам-положительными бактериями, сепсиса, вызванного грам-отрицательными бактериями, отрицательного по культуре сепсиса, грибкового сепсиса, нейропенической лихорадки, уросепсиса, менингококцемии, травмы/геморрагии, ожогов, облучения ионизирующим излучением, острого панкреатита, респираторного дистресс-синдрома взрослых, системной красной волчанки и ревматоидного артрита, алкогольного гепатита, хронических воспалительных патологий, саркоидоза, болезни Крона, серповидно-клеточной анемии, диабета, нефроза, атопических заболеваний, реакций гиперчувствительности, аллергического ринита, сенной лихорадки, хронического ринита, конъюктивита, астмы, крапивницы, системной анафилаксии, дерматита, пернициозной анемии, гемолитической болезни, тромбоцитопении, отторжения любого трансплантированного органа или ткани, отторжения трансплантированной почки, отторжения трансплантированного сердца, отторжения трансплантированной печени, отторжения трансплантированной поджелудочной железы, отторжения трансплантированного легкого, отторжения трансплантированного костного мозга (ВМТ), отторжения аллотрансплантата кожи, отторжения хрящевого трансплантата, отторжения костного трансплантата, отторжения трансплантата тонкого кишечника, отторжения имплантата тимуса плода, отторжения трансплантата паращитовидной железы, отторжения ксенотрансплантата любого органа или ткани, отторжения аллотрансплантата, анти-рецепторных реакций гиперчувствительности, болезни Грейвса, болезни Рейно, инсулинрезистентного диабета типа В, астмы, тяжелой миастении, опосредуемой антителом цитотоксичности, реакции гиперчувствительности типа III, системной красной волчанки, пузырчатки, склеродермии, смешанной соединительнотканной болезни, идиопатической болезни Аддисона, сахарного диабета, хронического активного гепатита, первичного билиарного цирроза, витилиго, васкулита, синдрома пост-MI-кардиотомии, гиперчувствительности типа IV, контактного дерматита, аллергического пневмонита, отторжения аллотрансплантата, гранулем, вызываемых внутриклеточными микроорганизмами, чувствительности к лекарственным средствам, метаболической/идиопатической болезни, болезни Вильсона, гемахроматоза, дефицита альфа-1-антитрипсина, диабета, тиреоидита Хашимото, остеопороза, нарушения в системе гипоталамус-гипофиз-надпочечники, первичного билиарного цирроза, тиреоидита, энцефаломиелита, кахексии, кистозного фиброза, наследственного гемофагоцитарного лимфогистиоцитоза, кожных заболеваний, псориаза, алопеции, нефротического синдрома, нефрита, гемодиализа, уремии, токсикоза, okt3-терапии, анти-cd3-терапии, цитокиновой терапии, химиотерапии, терапии путем облучения (например, включая, но не ограничиваясь ими, астению, анемию, кахексию и т.п.) и хронической интоксикации салицилатами.

27. Способ по п.23, где указанное эффективное количество составляет 0,001-50 мг/килограмм указанных клеток, ткани, органа или животного.

28. Способ по п.27, где указанное эффективное количество составляет 0, 0001-50 мг/килограмм указанных клеток, ткани, органа или животного.

29. Способ модуляции по меньшей мере одного инфекционного или ракового заболевания или состояния в клетках, тканях, органах или у животного, предусматривающий контактирование с указанной клеткой, тканью, органом или животным, либо введение в них по меньшей мере одного из выбранных эффективных иммуномодулирующих количеств по меньшей мере одного анти-IL-6-антитела или его определенной части или варианта по п.1.

30. Способ по п.29, где указанным животным является примат.

31. Способ по п.30, где указанным приматом является обезьяна или человек.

32. Способ по п.29, где указанное инфекционное или раковое заболевание или состояние представляет собой по меньшей мере одно заболевание или состояние, выбранное из (i) острой или хронической бактериальной инфекции, острых и хронических паразитарных или инфекционных процессов, включая бактериальные, вирусные и грибковые инфекции, ВИЧ-инфекции/ВИЧ-нейропатию, минингит, гепатит, септический артрит, перитонит, пневмонию, эпиглоттит, инфекцию, вызываемую E.coli 0157:h7, гемолитический уремический синдром/тромболитическую тромбоцитопеническую пурпуру, малярию, геморрагическую лихорадку Денге, лейшманиоз, лепру, синдром токсического шока, стрептококковый миозит, газовую гангрену, заболевание, вызываемое бактерией Mycobacterium tuberculosis, внутриклеточную инфекцию, вызываемую Mycobacterium avium, пневмонию, вызываемую Pneumocyctis carinii, воспаление тазовых органов, орхит/эпидидимит, болезнь, вызываемую бактерией Legionella, болезнь Лима, грипп А, заболевание, вызываемое вирусом Эпштейна-Барр, витальный гемафагоцитарный синдром, витальный энцефалит/ассептический менингит и т.п.; (ii) лейкоза, острого лейкоза, острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ), В-клеточного, Т-клеточного или FAВ-ОЛЛ, острого миелоидного лейкоза (ОМЛ), хронического миелоцитарного лейкоза (ХМЛ), хронического лимфоцитарного лейкоза (ХЛЛ), волосатоклеточного лейкоза, миелодисплазии (МД), лимфомы, болезни Ходжкина, злокачественной лимфомы, не-ходжскинской лимфомы, лимфомы Беркитта, множественной миеломы, саркомы Капоши, карциномы толстой и прямой кишки, карциномы поджелудочной железы, карциномы носоглотки, злокачественного гистоцитоза, паранеопластического синдрома/гиперкальцемии при злокачественных опухолях, солидных опухолей, аденокарциномы, саркомы, злокачественной меланомы и т.п.

33. Способ по п.23, где указанное эффективное количество составляет 0,01-100 мг/килограмм указанных клеток, ткани, органа или животного.

34. Способ по любому из пп. 23-33, где указанное контактирование или указанное введение осуществляют по меньшей мере одним способом, выбранным из внутривенного введения, внутримышечного введения, введения в виде болюса, подкожного введения, введения в дыхательные пути, введения путем ингаляции, вагинального, ректального, буккального, подъязычного, интраназального или чрескожного введения.

35. Способ по любому из пп.23-33, который дополнительно предусматривает введение до, во время или после указанного (1) контактирования или введения по меньшей мере одной композиции, содержащей терапевтически эффективное количество по меньшей мере одного соединения или белка, выбранного по меньшей мере из одного из антагониста TNF, противоревматического средства, миорелаксанта, наркотического средства, нестероидного противовоспалительного лекарственного средства (НСПВС), аналгетика, анестезирующего средства, седативного средства, местного анестезирующего средства, нейромышечного блокатора, противомикробного средства, средства против псориаза, кортикостероида, анаболического стероида, ассоциированного с диабетом агента, минералов, микроэлементов, тиреоидного фактора, витамина, кальций-ассоциированного гормона, средства против диареи, средства против кашля, противорвотного средства, противоязвенного средства, слабительного средства, антикоагулянта, эритропоэтина, филграстима, сарграмостима, иммунизирующего средства, иммуноглобулина, иммунодепрессанта, гормона роста, гормон-заместительного лекарственного средства, модулятора рецептора эстрогена, мидриатического средства, средства против циклоплегии, алкилирующего агента, антиметаболита, митотического ингибитора, радиофармацевтического препарата, антидепрессанта, средства против маниакального психоза, антипсихотического средства, анксиолитика, гипнотического средства, симпатомиметика, стимулятора, донепецила, такрина, противоастматического средства, бета-агониста, стероида для ингаляции, ингибитора лейкотриена, метилксантина, кромолина, эпинефрина или его аналога, дорназы альфа, цитокина или антагониста цитокина.

36. Медицинское устройство, содержащее по меньшей мере одно анти-IL-6-антитело или его определенную часть или вариант по п.1, где указанное устройство является подходящим для контактирования или введения указанного по меньшей мере одного анти-IL-6-антитела или его определенной части или варианта по меньшей мере одним способом, выбранным из внутривенного введения, внутримышечного введения, введения в виде болюса, подкожного введения, введения в дыхательные пути, введения путем ингаляции, вагинального, ректального, буккального, подъязычного, интраназального или чрескожного введения.

37. Человеческое антитело или его определенная часть или вариант, где указанное антитело или его определенная часть или вариант связываются с тем же самым эпитопом или антигенной областью, что и анти-IL-6-антитело или его определенная часть или вариант по п.1.

38. Композиция, содержащая по меньшей мере одно анти-IL-6-антитело или его определенную часть или вариант по п.1 и по меньшей мере один разбавитель, выбранный из стерильной воды, стерильной забуференной воды, и по меньшей мере один консервант, выбранный из группы, состоящей из фенола, м-крезола, п-крезола, о-крезола, хлоркрезола, бензилового спирта, нитрита фенилртути, феноксиэтанола, формальдегида, хлорбутанола, хлорида магния, алкилпарабена, хлорида бензалкония, хлорида бензэтония, дегидроацетата натрия и тимерозала или их смесей, в водном разбавителе.

39. Композиция по п.38, где концентрация анти-IL-6-антитела или его определенной части или варианта составляет примерно от 0,1 мг/мл до 100 мг/мл.

40. Композиция по п.39, которая дополнительно содержит агент, придающий изотоничность.

41. Композиция по п.39, которая дополнительно содержит физиологически приемлемый буфер.

42. Композиция, содержащая в первом контейнере по меньшей мере одно анти-IL-6-антитело или его определенную часть или вариант по п.1 в лиофилизированной форме и, необязательно, во втором контейнере по меньшей мере стерильную воду, стерильную забуференную воду и по меньшей мере один консервант, выбранный из группы, состоящей из фенола, м-крезола, п-крезола, о-крезола, хлоркрезола, бензилового спирта, нитрита фенилртути, феноксиэтанола, формальдегида, хлорбутанола, хлорида магния, алкилпарабена, хлорида бензалкония, хлорида бензэтония, дегидроацетата натрия и тимерозала или их смесей, в водном разбавителе.

43. Композиция по п.42, где концентрацию анти-IL-6-антитела или его определенной части или варианта доводят примерно до 0,1 мг/мл - 500 мг/мл.

44. Композиция по п.42, которая дополнительно содержит агент, придающий изотоничность.

45. Композиция по п.42, которая дополнительно содержит физиологически приемлемый буфер.

46. Способ лечения по меньшей мере одного IL-6-опосредованного состояния, предусматривающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, композиции по п.42.

47. Способ лечения по меньшей мере одного IL-6-опосредованного состояния, предусматривающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, композиции по п.42.

48. Промышленное изделие для фармацевтического введения человеку, содержащее упаковочный материал и контейнер, содержащий раствор или лиофилизированную форму по меньшей мере одного анти-IL-6-антитела или его определенной части или варианта по п.1.

49. Промышленное изделие по п.49, где указанным контейнером является стеклянный или пластиковый контейнер с пробкой для многоразового использования.

50. Промышленное изделие по п.49, где указанным контейнером является блистерная упаковка, которая может быть проколота и использована для внутривенного введения, внутримышечного введения, введения в виде болюса, внутрибрюшинного введения, подкожного введения, введения в дыхательные пути, введения путем ингаляции, назального введения, вагинального, ректального, буккального, подъязычного, интраназального, субдермального или чрескожного введения.

51. Промышленное изделие по п.49, где указанным контейнером является компонент устройства или системы для внутривенного введения, внутримышечного введения, введения в виде болюса, внутрибрюшинного введения, подкожного введения, введения в дыхательные пути, введения путем ингаляции, назального введения, вагинального, ректального, буккального, подъязычного, интраназального, субдермального или чрескожного введения.

52. Промышленное изделие по п.49, где указанным контейнером является компонент устройства или системы типа инжектора или пэн-инжектора для внутривенного введения, внутримышечного введения, введения в виде болюса, внутрибрюшинного введения, подкожного введения, введения в дыхательные пути, введения путем ингаляции, назального введения, вагинального, ректального, буккального, подъязычного, интраназального, субдермального или чрескожного введения.

53. Способ получения препарата, содержащего по меньшей мере одно анти-IL-6-антитело или его определенную часть или вариант, предусматривающий смешивание по меньшей мере одного анти-IL-6-антитела или его определенной части или варианта по п.1 по меньшей мере в одном буфере, содержащем физиологический раствор или соль.

54. Способ продуцирования по меньшей мере одного анти-IL-6-антитела или его определенной части или варианта по п.1, предусматривающий получение клетки-хозяина, трансгенного животного, трансгенного растения или клетки растения, способных экспрессировать выделяемые количества указанного антитела или его определенной части или варианта.

55. Способ по п.54, где указанной клеткой-хозяином является клетка млекопитающего, клетка растения или дрожжевая клетка.

56. Способ по п.54, где указанным трансгенным животным является млекопитающее.

57. Способ по п.56, где указанное трансгенное млекопитающее выбрано из козы, коровы, овцы, лошади и примата, не являющегося человеком.

58. Трансгенное животное или растение, экспрессирующее по меньшей мере одно антитело по п.1.

59. По меньшей мере, одно анти-IL-6-антитело или его определенная часть или вариант, продуцируемые способом по п.54.

60. Выделенное химерное, гуманизированное или CDR-привитое антитело против IL-6 или его определенная часть или вариант, содержащие мышиную вариабельную область и человеческую константную область, где указанное антитело или его определенная часть или вариант специфически связываются по меньшей мере с одним эпитопом, содержащим по меньшей мере 1-3 аминокислоты из аминокислот Gln29-Leu34 человеческого IL-6.

61. Анти-IL-6-антитело или его определенная часть или вариант по п.60, где указанное антитело или его определенная часть или вариант связываются с IL-6 с аффинностью, составляющей по меньшей мере 10^-9М.

62. Анти-IL-6-антитело или его определенная часть или вариант по п.60, где указанное антитело или его определенная часть или вариант связываются с IL-6 с аффинностью, составляющей по меньшей мере 10^-11М.

63. Анти-IL-6-антитело или его определенная часть или вариант по п.60, где указанное антитело или его определенная часть или вариант связываются с IL-6 с аффинностью, составляющей по меньшей мере 10^-12М.

64. Анти-IL-6-антитело или его определенная часть или вариант по п.60, где указанное антитело или его определенная часть или вариант, в основном, нейтрализуют по меньшей мере одну активность по меньшей мере одного (IL-6).

65. Анти-IL-6-антитело или его определенная часть или вариант по п.64, где указанная активность представляет собой по меньшей мере одну активность, выбранную из группы, состоящей из ингибирования IL-6-индуцированной секреции IFN-гамма, ингибирования цитотоксичности клеток LAK, ингибирования транскрипции мРНК IFN-гамма, ингибирования внутриклеточной секреции IFN-гамма CD3⁺-клетками и экспрессии CD95.