Способ клонирования антител птиц - RU2011111725A

Реферат

1. Способ получения библиотеки когнатных пар, содержащей соединенные последовательности, кодирующие вариабельные области, где указанный способ включает: ! a) получение содержащей лимфоциты клеточной фракции от донора, принадлежащего к классу птиц; ! b) получение популяции выделенных одиночных клеток путем распределения клеток из указанной клеточной фракции по отдельности во множество емкостей, причем по меньшей мере субпопуляция клеток экспрессирует гены иммуноглобулинов и, необязательно, любой маркерный антиген В-клеток птиц; и ! c) амплификацию и осуществление соединения кодирующих вариабельные области последовательностей, содержащихся в указанной популяции выделенных одиночных клеток, путем амплификации, в процедуре мультиплексной молекулярной амплификации, представляющих интерес нуклеотидных последовательностей с использованием матрицы, полученной из выделенной одиночной клетки или популяции изогенных клеток, и осуществления соединения представляющих интерес амплифицированных нуклеотидных последовательностей. ! 2. Способ по п.1, в котором субпопуляция клеток характеризуется любым из следующих признаков: ! - экспрессия IgY (IgY+), ! - экспрессия IgY и отсутствие экспрессии CD3 (IgY+ CD3-), ! - экспрессия IgY, отсутствие экспрессии или низкая экспрессия Bu-1 и отсутствие экспрессии CD3 (IgY+ Bu-1- CD3-), ! - экспрессия Bu-1 и IgY (Bu-1+ IgY+), ! - экспрессия Bu-1 и IgY и отсутствие экспрессии CD3 (Bu-1+ IgY+ CD3-), ! - экспрессия Bu-1, но отсутствие экспрессии каких-либо маркеров моноцитов (Bu-1+, monocyte-), ! - экспрессия Bu-1 и отсутствие экспрессии или низкие уровни экспрессии IgM (Bu-1+ IgM-), или ! - экспрессия Bu-1 и BAFF (Bu-1+ BAFF+). ! 3. Способ по п.2, в котором субпопуляц�