Модель с использованием генетически модифицированной мыши для ксенотрансплантации гепатоцитов человека - RU2019115976A
Код документа: RU2019115976A
Формула
1. Иммунодефицитная мышь, генетически модифицированная, чтобы содержать ген, кодирующий вариант PiZ (Glu342Lys) α-1-антитрипсина человека (ААТ), при этом данная мышь экспрессирует вариант PiZ α-1-антитрипсина человека (Z-AAT) и при этом данная мышь характеризуется уменьшением количества гепатоцитов мыши по сравнению с иммунодефицитной мышью того же самого типа, которая не экспрессирует Z-AAT.
2. Иммунодефицитная мышь по п. 1, где иммунодефицитная мышь представляет собой генетически модифицированную мышь NSG, NRG или NOG.
3. Иммунодефицитная мышь по п. 1, где гепатоциты иммунодефицитной мыши экспрессируют Z-AAT.
4. Иммунодефицитная мышь по любому из пп. 1-3, дополнительно содержащая ксенотрансплантат или аллотрансплантат, содержащий гепатоцит.
5. Иммунодефицитная мышь по п. 4, где ксенотрансплантат содержит гепатоцит человека.
6. Иммунодефицитная мышь по п. 5, где гепатоцит человека экспрессирует сывороточный альбумин человека.
7. Иммунодефицитная мышь по любому из пп. 4-6, где указанный гепатоцит ксенотрансплантата содержит маркерный белок.
8. Иммунодефицитная мышь по п. 7, где маркерный белок представляет собой зеленый флуоресцентный белок или его флуоресцентный аналог.
9. Иммунодефицитная мышь по любому из пп. 4-8, где по меньшей мере приблизительно 25% гепатоцитов мыши представляют собой пересаженные гепатоциты человека.
10. Иммунодефицитная мышь по любому из пп. 5-9, где указанный сывороточный альбумин человека выявляется в крови мыши.
11. Иммунодефицитная мышь по п. 10, содержащая по меньшей мере приблизительно 0,01 мг/мл сывороточного альбумина человека, присутствующего в сыворотке крови мыши.
12. Иммунодефицитная мышь по любому из пп. 5-11, где указанный гепатоцит человека экспрессирует ААТ человека дикого типа.
13. Иммунодефицитная мышь по п. 12, содержащая по меньшей мере приблизительно 100 мкг/мл ААТ человека дикого типа, присутствующего в сыворотке крови мыши.
14. Иммунодефицитная мышь по любому из пп. 4-13, где гепатоцит ксенотрансплантата или аллотрансплантата представляет собой гепатоцит с редактируемым геномом.
15. Способ получения генетически модифицированной иммунодефицитной мыши, содержащей пересаженные экзогенные гепатоциты, при этом способ предусматривает получение генетически модифицированной иммунодефицитной мыши по любому из пп. 1-3; и введение мыши гепатоцитов человека или аллогенных гепатоцитов.
16. Способ по п. 15, где гепатоциты человека или аллогенные гепатоциты представляют собой первичные гепатоциты.
17. Способ по п. 15 или п. 16, где введение гепатоцитов человека или аллогенных гепатоцитов генетически модифицированной иммунодефицитной мыши предусматривает инъекцию гепатоцитов.
18. Способ по любому из пп. 15-17, где введение гепатоцитов человека или аллогенных гепатоцитов генетически модифицированной иммунодефицитной мыши предусматривает внутриселезеночное введение гепатоцитов.
19. Способ по любому из пп. 15-18, где гепатоцит экспрессирует маркерный белок.
20. Способ по п. 19, где маркерный белок представляет собой зеленый флуоресцентный белок или его флуоресцентный аналог.
21. Способ по любому из пп. 15-20, дополнительно предусматривающий обработку генетически модифицированной иммунодефицитной мыши в целях снижения количества эндогенных гепатоцитов мыши.
22. Способ по п. 21, где обработку генетически модифицированной иммунодефицитной мыши в целях снижения количества эндогенных гепатоцитов мыши осуществляют перед введением гепатоцитов человека или аллогенных гепатоцитов и она включает в себя обработку, выбранную из группы, состоящей из введения генетически модифицированной иммунодефицитной мыши гепатотоксина, осуществления у генетически модифицированной иммунодефицитной мыши по меньшей мере частичной гепатэктомии и как введения гепатотоксина, так и осуществления по меньшей мере частичной гепатэктомии.
23. Способ по п. 22, где гепатотоксин представляет собой монокроталин.
24. Способ по п. 23, предусматривающий введение генетически модифицированной иммунодефицитной мыши приблизительно 10-100 мг/кг монокроталина перед введением гепатоцитов человека или аллогенных гепатоцитов.
25. Способ по любому из пп. 21-24, где обработку генетически модифицированной иммунодефицитной мыши в целях снижения количества гепатоцитов мыши осуществляют перед введением гепатоцитов человека или аллогенных гепатоцитов, во время или после этого и она предусматривает введение генетически модифицированной иммунодефицитной мыши антитела к CD95 мыши.
26. Способ по п. 25, предусматривающий введение генетически модифицированной иммунодефицитной мыши приблизительно 0,1-10 мкг антитела к CD95 мыши.
27. Способ определения безопасности и/или эффективности предполагаемого лечения заболевания печени человека, предусматривающий
получение иммунодефицитной генетически модифицированной мыши по любому из пп. 4-14;
проведение лечения заболевания печени человека у иммунодефицитной генетически модифицированной мыши; и
оценка эффективности предполагаемого лечения на гепатоциты человека у мыши.
28. Способ по п. 27, где предполагаемое лечение предусматривает введение вирусного геннотерапевтического вектора.
29. Способ по п. 27, где предполагаемое лечение предусматривает введение гепатоцита человека с редактируемым геномом.
