Модификация продуцирования белков в растениях - RU2017103382A
Код документа: RU2017103382A
Формула
1. Способ продуцирования белка, представляющего интерес, в растении или в части растения, включающий:
a) обработку растения или части растения для увеличения образования вторичной биомассы листьев в растении или в части растения;
b) введение одной или более чем одной нуклеиновой кислоты в растение или в часть растения, причем нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, представляющий интерес, и нуклеотидная последовательность функционально связана с регуляторной областью, которая является активной в растении;
c) инкубацию растения или части растения в условиях, которые обеспечивают экспрессию нуклеотидной последовательности, кодирующей белок, представляющий интерес, продуцирующей при этом белок, представляющий интерес, причем выход белка, представляющего интерес, повышается по сравнению с выходом белка, представляющего интерес, полученного из той же растительной ткани похожего растения, которое выращено в тех же самых условиях, но которое не было обработано для увеличения вторичной биомассы листьев.
2. Способ по п. 1, где на стадии обработки, стадии а), в растении или в части растения отношение вторичной биомассы листьев к первичной биомассе листьев составляет величину между 0.2:1 и 3:1.
3. Способ по п. 1, где стадия обработки, стадия а), проводится в течение промежутка времени от примерно 40 дн до стадии введения одной или более чем одной нуклеиновой кислоты до дня введения одной или более чем одной нуклеиновой кислоты, включая этот день, или от примерно 40 дн до стадии введения одной или более чем одной нуклеиновой кислоты до дня сбора растения или части растения, включая этот день.
4. Способ по п. 1, где стадия обработки, стадия а), включает увеличение продолжительности освещения во время роста растения, повышение интенсивности освещенности во время роста растения, прищипывание верхушечной почки растения, культивацию растения в присутствии агента, гормона или их комбинации, что увеличивает образование вторичных стеблей, применение химического соединения, которое уменьшает доминирование верхушки, или их комбинацию.
5. Способ по п. 4, где прищипывание включает механическое прищипывание или химическое прищипывание.
6. Способ по п. 1, включающий также стадию d) сбора растения.
7. Способ по п. 1, включающий также стадию d) сбора растения и очистки белка, представляющего интерес.
8. Способ по п. 6, где собирают первичные стебли и вторичные стебли.
9. Способ по п. 6, где собирают вторичные стебли.
10. Способ по п. 9, где собирают также промежуточные листья с первичных стеблей (Р2) и молодые листья с первичных стеблей (Р1).
11. Способ по п. 6, где собирают также промежуточные листья с первичных стеблей (Р2), молодые листья с первичных стеблей (Р1), старые листья со вторичных стеблей (S3), промежуточные листья со вторичных стеблей (S2) и молодые листья со вторичных стеблей (S1).
12. Способ по п. 6, где старые листья (Р3) с первичных стеблей растения исключают во время сбора.
13. Способ по п. 1, где нуклеотидная последовательность кодирует фармацевтически активный белок, антитело, антиген, вакцину, фермент или имеющий промышленное значение фермент.
14. Способ по п. 1, где нуклеотидная последовательность кодирует белок НА вируса гриппа.
15. Способ по п. 1, где на стадии экспрессии, стадии с), нуклеиновая кислота транзиентно экспрессируется в растении.
16. Способ по п. 1, где на стадии экспрессии, стадии с), нуклеиновая кислота стабильно экспрессируется в растении.
17. Способ по п. 14, где белок, представляющий интерес, который получают из растения, является вирусоподобной частицей (VLP), содержащей белок НА.
18. Способ по п. 1, где увеличение содержания вторичной биомассы листьев представляет собой результат увеличения количества вторичных стеблей и листьев, увеличения длины вторичных стеблей или листьев, или того, и другого.
19. Способ по п. 4, где гормон является синтетическим цитокином.
20. Способ по п. 19, где синтетический цитокин представляет собой 6-бензиламинопурин (ВАР).
