Противоопухолевая и гипогликемическая композиция на основе активных ингредиентов из basidiomycotinaи araliaceae - RU2274465C2

Описание

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к области медицины и, в частности, к физиологически активным композициям в том числе, но не только к композициям с противоопухолевой активностью и гипогликемическим действием (т.е. действием снижения уровня сахара в крови). Более конкретно, речь идет о композициях, содержащих активные ингредиенты, обнаруженные в экстрактах плодоносящих тел и/или мицелярной культуре (включая, кроме мицелия, культуральный раствор) грибов, принадлежащих к трубчатым Basidiomycotina, таким как Ganoderma Lucidum и/или Coriolus versicolor, и экстрактах, полученных из корня растения Araliaceae. Также раскрыты способы получения и применения таких композиций.

Уровень техники

Плодоносящие тела и мицелярная культура (которая означает только мицелий и смесь мицелия и культурального раствора мицелия, далее называемую просто "культура") Ganoderma Lucidum, принадлежащего к афиллофоровым трубчатым Basidiomycotina, известны как лечебные средства с античных времен. Известно, что, кроме различных благоприятных воздействий полисахариды и другие низкомолекулярные компоненты, содержащиеся в таких лечебных средствах, обладают различными противоопухолевыми активностями. Вещества, обладающие различными физиологическими активностями, включая противоопухолевую активность, были экстрагированы из плодоносящих тел Coriolus versicolor, принадлежащих к трубчатым Basidiomycotina.

Кроме того, корни растений, принадлежащих к Araliaceae, включая женьшень (Daucus carota), и эктрагированные из них компоненты также, независимо, применяются в качестве природных лечебных средств с античных времен и известны как обладающие многими благоприятными действиями.

Сущность изобретения

Несмотря на то, что различные лечебные методы, включающие лечение и профилактику с помощью природных лечебных средств, весыма привлекательны, поскольку природные лечебные средства, как правило, не обладают отрицательными побочными эффектами, эффективность известных природных средств часто минимальна. Несмотря на то, что эмпирически и экспериментально известно, что как компоненты, экстрагированные из Basidiomycotina, так и компоненты, экстрагированные из женьшеня, обладают полезными благоприятными действиями, сочетание таких специфических компонентов и синергичная амплификация их физиологических активностей, вызванная сочетанием таких компонентов, также известны не были.

Авторы изобретения обнаружили, что композиции, содержащие компоненты, экстрагированные из Basidiomycotina, и компоненты, экстрагированные из корней растений, принадлежащих к Araliaceae, обладают заметной сильной противоопухолевой активностью. Кроме того, такие композиции могут снижать уровень сахара в крови у пациентов с гипергликемией (далее - "гипогликемическое действие"). Не вдаваясь в теорию, авторы изобретения полагают, что физиологические активности указанных композиции могут соотноситься с их окислительно-восстановительным потенциалом.

Таким образом, в одном из вариантов настоящее изобретение относится к композициям, содержащим активные ингредиенты, обнаруженные в одном или нескольких типах Basidiomycotina, принадлежащих к трубчатым Basidiomycotina, и активные ингредиенты, обнаруженные в корнях растения, принадлежащего к Araliaceae. Активные ингредиенты можно получить синтетически или их можно экстрагировать, например, из Ganoderma Lucidum и/или Coriolus versicolor и лечебного женьшеня, которым может быть, например, женьшень обыкновенный (Ранах ginseng) и/или женьшень японский (Panax japonicus). Композиции, предпочтительно, обнаруживают окислительно-восстановительный потенциал менее примерно +1230 мВ, когда содержатся в водном растворе, и предпочтительнее - менее примерно +900 мВ. Такие композиции могут содержать терапевтически эффективное количество активных ингредиентов из указанных компонентов. Такие композиции можно вводить, например, пациентам с опухолями и/или пациентам с высоким содержанием глюкозы в крови.

Хотя в настоящем описании конкретно рассматриваются активные ингредиенты, экстрагированные из природных продуктов, изобретение также охватывает активные ингредиенты, полученные синтетически, обладающие такой же активностью.

В другом варианте настоящее изобретение относится к композициям, содержащим компоненты, экстрагированные из одного или нескольких типов Basidiomycotina, принадлежащих к трубчатым Basidiomycotina, и компоненты, экстрагированные из корня растения, принадлежащего к Araliaceae. Предпочтительно, окислительно-восстановительный потенциал таких композиций составляет +1230 мВ или менее.

В другом варианте настоящее изобретение относится к композициям, в которых в качестве одного или нескольких Basidiomycotina используют Ganoderma Lucidum и/или Coriolus versicolor.

В другом варианте настоящее изобретение относится к композициям, содержащим терапевтически эффективное количество вышеуказанных компонентов. В одном характерном примере композиции содержат компоненты, экстрагированные из 0,5-2 мас. частей корня Araliaceae, и примерно 2 мас. частей вышеуказанных Basidiomycotina. Предпочтительно, компоненты экстрагируют из плодоносящих тел Basidiomycotina. Растение Araliaceae, предпочтительно, принадлежит к семейству лечебного женьшеня, и предпочтительнее, растение Araliaceae представляет собой женьшень обыкновенный и/или женьшень японский.

В другом варианте настоящее изобретение относится к композициям, которые можно применять как противоопухолевые средства. В другом варианте настоящее изобретение относится к композициям, которые обнаруживают гипогликемическое действие. Изобретение относится к способам лечения с использованием таких композиций.

Изобретение также относится к различным способам получения таких композиций, обладающих выше указанными физиологическими активностями. Характерные примеры относятся к получению компонентов из раствора с соответствующим окислительно-восстановительным потенциалом, который можно получить экстрагированием горячей водой одного или нескольких типов трубчатых Basidiomycotina и корня растения Araliaceae. Предпочтительно, одним или несколькими типами Basidiomycotina могут быть Ganoderma Lucidum и/или Coriolus versicolor. Такие компоненты можно экстрагировать в соотношении примерно 0,5-2 мас. частей корня Araliaceae на примерно 2 мас. части вышеуказанных Basidiomycotina. Корнем Araliaceae, предпочтительно, является лечебный женьшень, и предпочтительнее - женьшень обыкновенный и/или женьшень японский. Естественно, терапевтически эффективные композиции можно получить с применением различных методов, которые обеспечивают, по существу, одинаковый эффект.

Другие цели, особенности и преимущества настоящего изобретения будут легко понятны после прочтения приведенного далее подробного описания и прилагаемой формулы изобретения.

Подробное описание изобретения

Активные ингредиенты композиций настоящего изобретения можно получить различными способами, в том числе, но не только, синтетически или путем выделения. В одном предпочтительном способе получения композиций настоящего изобретения активные ингредиенты получают из компонентов, экстрагированных из одного или нескольких типов Basidiomycotina, принадлежащих к трубчатым Basidiomycotina, и компонентов, экстрагированных из корня растения, принадлежащего к Araliaceae. Трубчатые Basidiomycotina включают Ganoderma Lucidum, Coriolus versicolor и другие родственные грибы. Предпочтительно, экстрагированные компоненты можно получить из плодоносящих тел и/или мицелярной культуры (включая, кроме мицелия, культуральный раствор) одного или нескольких типов трубчатых.

Предпочтительно, Basidiomycotina выбирают среди одного или нескольких типов Ganoderma Lucidum и Coriolus versicolor. Предпочтительнее, можно использовать сочетание Ganoderma Lucidum и Coriolus versicolor. Таксономическая идентификация типов Basidiomycotina, используемая в данном описании, основана на идентификациях, приведенных в "Primary Color Picture Book of Japanese Mushrooms", авторы Imazeki и Hongou (Hoiku Co.).

Одним характерным примером Ganoderma Lucidum является гриб Reishi (Ganoderma Lucidum). Хотя данный гриб в природе размножается на деревьях, нативный гриб встречается редко. Однако его можно также культивировать искусственно. Гриб глянцеватый и состоит из воскоподобной шляпки и ножки, высота которой может достигать приблизительно 15 см. Цвет плодоносящего тела красный, голубой, желтый, белый, фиолетовый и черный. Гриб имеет белые тяжи и растет на древесных пнях и/или вокруг основания дерева, ослабленного болезнью.

Гриб Coriolus versicolor в природе растет в западной части Японии, в особенности, в Шинсю (в частности, в префектуре Нагано) и на островах Сикоку и Кюсю. В природе этот гриб является грибом, растущим на древесине, который растет особенно хорошо на широколистных деревьях. Такой Basidiomycotina хорошо размножается в естественных условиях, его можно культивировать в искусственных условиях, и он также растет в клеточной культуре без ограничений. Предпочтительно, используют гриб, выросший в естественных условиях.

Предпочтительно, используют плодоносящие тела грибов и/или культуру тела гриба. Плодоносящие тела можно получить сушкой на воздухе при комнатной температуре в темноте.

Когда используют Ganoderma Lucidum, особенно рекомендуется использовать естественно созревшие черные плодоносящие тела. Когда используют Coriolus versicolor, рекомендуется использовать выросшие в естественных условиях плодоносящие тела, собранные летом и высушенные на воздухе при комнатной температуре в темноте.

Предпочтительно, растением Araliaceae является лечебный женьшень, к которому, кроме женьшеня обыкновенного С.А.Мейера, относятся Panax quiquefolium L., Panax notoginseng, женьшень японский С.А.Мейера. Предпочтительно, используют женьшень обыкновенный и/или женьшень японский. Предпочтительнее, используют женьшень японский. Можно использовать корни любого из указанных типов женьшеня. Кроме того, можно использовать один тип растения Araliaceae, или можно также использовать сочетание 2 или более типов. Также можно использовать растения, принадлежащие к семейству Umbelliferae, как заменитель растения Araliaceae.

Подходящие композиции можно получить методами экстракции с водой. Хотя экстракцию можно проводить водой при комнатной температуре, предпочтительно использовать горячую воду. Сырье для компонентов, экстрагируемых из Basidiomycotina, и компонентов, экстрагируемых из Araliaceae, можно экстрагировать по отдельности с использованием горячей воды и затем полученные экстракты можно объединить или можно смешать вместе Basidiomycotina и корень и экстрагировать с горячей водой. Для экстракции горячей водой сырье можно растолочь, нарезать или измельчить в порошок. Предпочтительно, сырье дробят на небольшие кусочки. Предпочтительнее, кусочки имеют размер приблизительно 5 мм.

Температура воды, используемой для экстракции, может составлять предпочтительно примерно от 80°С до 100°С и более предпочтительно примерно от 90°С до 95°С. Рекомендуемое время экстракции составляет не менее 1 час, предпочтительно 2 час или более и наиболее предпочтительно 2,5 часа или более. Предпочтительно, время экстракции ограничивают 3-4 часами. Процесс экстракции можно проводить с использованием обратного холодильника.

Хотя нет особых ограничений по количеству используемой воды относительно экстрагируемого сырья, предпочтительно соотношение, составляющее приблизительно 500 мас. частей воды на примерно 10-20 мас. частей сырья, используемого для экстракции. Концентрация полученного при экстракции раствора при использовании указанного массового соотношения (особенно если используют обратный холодильник), как правило, является подходящей концентрацией для непосредственного введения без дополнительной обработки.

Сырье для экстракции можно удалить из полученного раствора фильтрацией или другими известными способами. При необходимости фильтрат экстракционного раствора и супернатант можно сконденсировать и использовать в виде концентрированного раствора. Кроме того, путем выпаривания водного компонента можно также получить твердый (порошкообразный) экстрагированный компонент и, при необходимости, требуемый сухой экстрагированный компонент можно получить путем сушки или другими известными способами.

Что касается формы введения и лекарственной формы композиции, то, как правило, для получения фармацевтического препарата или стабилизации экстрагированного компонента можно добавлять добавки во время конденсации или сушки.

В экстрагируемом сырье можно использовать соотношение примерно 15 мас. частей Basidiomycotina на примерно 1,5-6 мас. частей корня растения Araliaceae. Предпочтительно, используют примерно 2-4 мас. части корня Araliaceae на примерно 15 мас. частей Basidiomycotina. Более предпочтительно, используют примерно 3 мас. части корня Araliaceae на примерно 15 мас. частей Basidiomycotina.

В таком сочетании в качестве компонента Basidiomycotina можно выбрать Ganoderma Lucidum. Предпочтительно, используют Coriolus versicolor. Ganoderma Lucidum и Coriolus versicolor. Предпочтительное соотношение в общем количестве Basidiomycotina составляет примерно 1-4 мас. части Coriolus versicolor на примерно 2 мас. части Ganoderma Lucidum. Предпочтительно, следует использовать соотношение, составляющее примерно 1 мас. часть Coriolus versicolor на примерно 2 мас. части Ganoderma Lucidum. Более предпочтительно, следует использовать примерно 5 мас. частей Coriolus versicolor, примерно 1,5-6 мас. частей корня растения Araliaceae (предпочтительно, женьшеня японского) и примерно 10 мас. частей Ganoderma Lucidum. Наиболее предпочтительно, используют примерно 5 мас. частей Coriolus versicolor, примерно 3 мас. части корня растения Araliaceae (предпочтительно, женьшеня японского) и примерно 10 мас. частей Ganoderma Lucidum.

Кроме того, можно использовать примерно примерно 10 мас. частей Coriolus versicolor, примерно 1,5-6 мас. частей корня растения Araliaceae (предпочтительно, женьшеня японского) и примерно 5 мас. частей Ganoderma Lucidum.

Другое предпочтительное соотношение составляет примерно 0,5-2 мас. части корня растения Araliaceae на примерно 2 мас. части Basidiomycotina. Более предпочтительно, используют соотношение примерно 0,75-1,25 мас. частей корня растения Araliaceae на примерно 2 мас. части Basidiomycotina. Наиболее предпочтительно, используют соотношение примерно 1 мас. часть корня растения Araliaceae на примерно 2 мас. части Basidiomycotina.

Конкретнее, Ganoderma Lucidum и Coriolus versicolor используют в качестве Basidiomycotina при соотношении 1 мас. часть Coriolus versicolor, примерно 0,5-2 мас. части корня растения Araliaceae и примерно 1 мас. часть Ganoderma Lucidum. Более предпочтительно, можно использовать примерно 0,75-1,25 мас. частей корня растения Araliaceae, и наиболее предпочтительно - 1 мас. часть.

В другом варианте используют примерно 5-10 мас. частей Coriolus versicolor, примерно 3-10 мас. частей корня растения Araliaceae и примерно 10 мас. частей Ganoderma Lucidum. Предпочтительно, в качестве корня растения Araliaceae выбирают корень женьшеня японского.

В случае указанных выше сочетаний в качестве Basidiomycotina можно использовать или один Ganoderma Lucidum или один Coriolus versicolor (т.е., плодоносящие тела любого их них). Предпочтительно, в качестве компонента растения Araliaceae используют женьшень обыкновенный или женьшень японский. Предпочтительнее, можно использовать женьшень японский, но терапевтически эффективные композиции также можно получить, даже если женьшень японский заменить женьшенем обыкновенным.

Теперь будет описываться характерный способ получения композиции с массовым соотношением плодоносящих тел Ganoderma Lucidum, плодоносящих тел Coriolus versicolor и женьшеня японского (корень) 1:1:1. Например, 6 г плодоносящих тел Ganoderma Lucidum, 6 г плодоносящих тел Coriolus versicolor и 6 г женьшеня японского можно объединить, перемешать и измельчить на кусочки размером приблизительно 5 мм. К полученному измельченному продукту можно добавить 500 мл дистиллированной воды и смесь можно кипятить с обратным холодильником в течение 3 часов. После этого раствор фильтруют и получают основной раствор.

Основной раствор для некоторых применений при необходимости можно разбавить. Если разбавление необходимо, для него можно использовать различные соотношения, например, в интервале от 2 до 300 раз, предпочтительно - от 2 до 20 раз, и наиболее предпочтительно - от 4 до 16 раз. Хотя для метода разбавления нет особых ограничений, как и для процесса экстракции, рекомендуется использовать воду.

Кроме того, из основного раствора можно удалить растворитель, используя различные подходящие способы концентрирования, и получить твердые экстракты.

В случае композиций, полученных таким способом, находятся ли они в состоянии раствора или суспензии, окислительно-восстановительный потенциал композиций составляет, предпочтительно, примерно +1230 мВ или менее. Более предпочтительно, композиции имеют окислительно-восстановительный потенциал примерно +900 мВ или менее. Такие композиции обнаруживают сильную противоопухолевую активность.

Величину окислительно-восстановительного потенциала измеряют в водном растворе, предпочтительно в воде. Окислительно-восстановительный потенциал можно измерить непосредственно в вышеописанном основном растворе или в растворе, разбавленном водой. Если композиция переведена в твердое состояние, твердое вещество перед измерением окислительно-восстановительного потенциала следует растворить или суспендировать с использованием водного раствора, такого как вода.

В данном случае окислительно-восстановительный потенциал раствора определенной композиции определяют следующим образом. Окислительно-восстановительный потенциал является потенциалом окислительно-восстановительного электрода, который наблюдают, когда электрод погружают в испытываемый раствор. В случае применения стандартного электрода сначала определяют отдельный потенциал стандартного электрода, который является разностью потенциалов между окислительно-восстановительным электродом (например, платиновым электродом) и стандартным электродом. Затем стандартный электрод прибора для измерения электродного потенциала помещают в испытываемый раствор и отмечают разность потенциалов. Разность потенциалов, отмеченная для испытываемого раствора, плюс отдельный потенциал составляют окислительно-восстановительный потенциал раствора. Например, если используют платиновый тест-электрод и стандартный электрод (например, AgCl (внутренний раствор 3,3 моль/л KCl)), потенциал, полученный путем сложения потенциала отдельного электрода стандартного электрода с разностью потенциалов стандартного электрода и испытываемого раствора, является окислительно-восстановительным потенциалом. В данном описании окислительно-восстановительный потенциал определяют при температуре испытываемого раствора 25° С.

После получения композиции или после ее растворения или суспендирования ее окислительно-восстановительный потенциал, как правило, изменяется со временем. Поэтому следует время от времени проверять окислительно-восстановительный потенциал. Предпочтительно, раствор используют, когда окислительно-восстановительный потенциал составляет примерно +900 мВ или менее. Окислительно-восстановительный потенциал композиции также следует контролировать перед каждым введением. Предпочтительно, композицию и ее раствор хранят при 25°С, и температура в измерительной комнате также должна быть 25°С.

Оказывается, что окислительно-восстановительный потенциал полученной композиции имеет большое значение, поскольку, особенно в случае композиции с окислительно-восстановительным потенциалом +900 мВ или менее, существует отрицательная корреляция между окислительно-восстановительным потенциалом композиции и ее противоопухолевой активностью. Иными словами, чем ниже окислительно-восстановительный потенциал, тем сильнее противоопухолевая активность.

В результате противоопухолевая активность и гипогликемическая активность обсуждаемой композиции можно оценить до введения композиции, измеряя окислительно-восстановительный потенциал композиции перед ее введением. Таким образом можно повысить эффективность лечения.

В более предпочтительных композициях настоящего изобретения окислительно-восстановительный потенциал составляет, предпочтительно, +330 мВ или менее, более предпочтительно, +300 мВ или менее, и, наиболее предпочтительно, потенциал составляет -300 мВ или более.

Композиции настоящего изобретения могут содержать только компоненты, экстрагированные из Basidiomycotina, и компоненты, экстрагированные из корня растения Araliaceae. Однако можно ввключать также другие активные или неактивные ингредиенты до тех пор, пока дополнительные ингредиенты не подавляют синергичное действие двух вышеуказанных экстрагированных компонентов. Например, указанные в данном описании экстрагированные компоненты можно смешать с фармацевтически приемлемыми носителями и добавками для того, чтобы получить композиции, подходящие для введения. Хотя нет особых ограничений по форме, композиции можно получить в форме раствора, сиропа, суспензии, эмульсии, гранул, таблеток, пилюль, капсул, кремов, пастилок, жевательных таблеток, суппозитория, глазных капель, инъекции, аэрозоля, эликсира и т.п.. Композиции настоящего изобретения также можно применять в твердой (порошок) форме, а растворы можно восстановить во время применения путем добавления воды. Таким образом, для композиций настоящего изобретения приемлемы различные способы введения.

Показано, что композиции настоящего изобретения обладают противоопухолевой активностью, в частности, в отношении лейкоза, цервикальной карциномы, легочной карциномы, рака яичников, рака молочной железы (включая метастатический рак) и рака кожи (включая метастатический рак). Примером лейкоза является эритробластический лейкоз. Таким образом, композиции настоящего изобретения можно применять в качестве противоопухолевых средств для млекопитающих, в том числе, например, людей, приматов, крупного рогатого скота, лошадей, собак и кошек.

Хотя известно, что компоненты, экстрагированные из Basidiomycotina, обладают противоопухолевой активностью и известно, что компоненты, экстрагированные из Araliaceae, обладают противоопухолевой активностью, композиции настоящего изобретения обладают значительно более сильной противоопухолевой активностью по сравнению с противоопухолевой активностью отдельных компонентов.

Кроме того, композиции настоящего изобретения также обладают гипогликемическим действием как при инсулинзависимом сахарном диабете, так и при инсулиннезависимом сахарном диабете.

Кроме того, как было показано, композиции настоящего изобретения не вызывают какого-либо отрицательного действия. В действительности, композиции настоящего изобретения могут быть полезны для снижения и облегчения отрицательного действия других лекарственных средств.

Например, когда композиции настоящего изобретения вводят больным людям в качестве противоопухолевых средств, композиции оказывают благоприятное действие, такое как ослабление боли, улучшение аппетита и улучшение сна, помимо того что вызывают излечивание или регрессию опухолей. При введении людям для снижения уровня сахара в крови композиции настоящего изобретения также, кроме снижения уровня сахара в крови, оказывают различное благоприятное действие, такое как ослабление болевых ощущений в организме, особенно существенное ослабление головных болей и онемения конечностей, повышение аппетита, восстановление зрения, снижение стресса и улучшение сна у пациентов.

Хотя композиции настоящего изобретения можно вводить в терапевтически эффективных количествах либо перорально, либо парентерально, предпочтительно, композиции вводят перорально. Общие дозы, подходящие для перорального введения, указываются ниже. Как правило, дозу соответствующим образом регулируют согласно сиптомам у пациента и сопротивляемости его организма. Вообще говоря, обычными или нормальными дозировками являются, например, ежесуточная дозировка экстрагированных компонентов, полученных из 200 мг - 2 г Basidiomycotina и 100 мг - 1 г корня растения Araliaceae, на 1 кг массы тела. Указанные дозы вводят, предпочтительно, 1-3 раза в сутки.

В особенности, при применении в качестве противоопухолевых средств, предпочтительно вводить компоненты, экстрагированные из сырья при соотношении примерно 0,27 г Basidiomycotina и корня растения Araliaceae на 1 кг массы тела в сутки. Более предпочтительно, вводят экстрагированные компоненты, полученные из сырья, при соотношении примерно 0,18 г Basidiomycotina на 1 кг массы тела в сутки и экстрагированные компоненты, полученные из примерно 0,09 г корня растения Araliaceae на 1 кг массы тела в сутки.

При применении в качестве гипогликемического средства, предпочтительно, вводят компоненты, экстрагированные из сырья, при соотношении примерно 0,12 г Basidiomycotina и корня растения Araliaceae на 1 кг массы тела в сутки. Более предпочтительно, вводят компоненты, экстрагированные из сырья, при соотношении примерно 0,08 г Basidiomycotina на 1 кг массы тела в сутки и компоненты, экстрагированные из примерно 0,04 г корня растения Araliaceae на 1 кг массы тела в сутки.

При применении в качестве гипогликемического средства (т.е. для снижения уровня сахара в крови) композицию, предпочтительно, вводят с водой и/или спиртовыми экстрактами корня растения Araliaceae. Такие спиртовые экстракты можно получить, используя корень растения Araliaceae, предпочтительно, лечебного женьшеня, и наиболее предпочтительно - женьшеня японского, в форме кусочков или порошка (предпочтительно, кусочков размером приблизительно 5 мм). Добавляют примерно от 300 до 600 мас. частей 40% спиртового раствора к 10-20 мас. частям кусочков. Горячее экстрагирование осуществляют путем нагревания раствора до 80-100°С до тех пор, пока спирт не испарится почти полностью.

Поскольку токсичность композиций настоящего изобретения очень низкая и отсутствуют какие-либо серьезные отрицательные действия, при необходимости, на основании симптомов, также можно безопасно применять высокую дозу.

Рекомендуемой лекарственной формой для перорального введения является раствор или сироп. Вода рекомендуется в качестве среды для введения.

В итоге характерными аспектами настоящего изобретения являются перечисленные далее.

(1) Композиции, содержащие терапевтически эффективное количество активных ингредиентов, обнаруженных в одном или нескольких типах Basidiomycotina, принадлежащих к трубчатым Basidiomycotina, и корне растения, принадлежащего к Araliaceae. Указанные активные ингредиенты можно получить синтетически или путем выделения из природных источников. В предпочтительном варианте используют соотношение примерно 0,5-2 мас. частей корня растения Araliaceae на 2 мас. части Basidiomycotina, и из них выделяют активные ингредиенты. Такие композиции обладают гипогликемической (снижение уровня сахара в крови) активностью.

(2) Композиции, указанные в разделе (1), в которых вышеуказанными одним или несколькими типами Basidiomycotina являются Ganoderma Lucidum и/или Coriolus versicolor.

(3) Композиции, указанные в разделах (1) и (2), в которых вышеуказанное растение, принадлежащее к Araliaceae, представляет собой лечебный женьшень.

(4) Композиции, указанные в разделах (1)-(3), в которых вышеуказанное растение Araliaceae представляет собой женьшень обыкновенный и/или женьшень японский.

(5) Композиции, указанные в разделах (1)-(4), окислительно-восстановительный потенциал которых составляет +1230 мВ или менее.

(6) Композиции, содержащие терапевтически эффективное количество экстрагированных горячей водой компонентов из одного или нескольких типов Basidiomycotina, принадлежащих к трубчатым Basidiomycotina, и экстрагированных горячей водой компонентов из корня растения, принадлежащего к Araliaceae. Другие композиции содержат такие экстрагированные компоненты в растворе, содержащем 40% или более спирта и корень растения, принадлежащего к Araliaceae.

(7) Композиции, указанные в разделе (6), обладающие гипогликемической активностью.

(8) Композиции, содержащие компоненты, экстрагированные из одного или нескольких типов Basidiomycotina, принадлежащих к трубчатым Basidiomycotina, и компоненты, экстрагированные из корня растения, принадлежащего к Araliaceae.

(9) Способ лечения пациентов путем введения терапевтически эффективного количества композиции согласно любому из разделов (1)-(8). Например, такие композиции можно вводить пациентам для снижения у них уровня сахара в крови.

(10) Композиции, содержащие активные ингредиенты из одного или нескольких типов Basidiomycotina, принадлежащих к трубчатым Basidiomycotina, и корня растения, принадлежащего к Araliaceae. Указанные активные ингредиенты можно получить синтетически или путем выделения из природных источников. Предпочтительно, используют соотношение 0,5-2 мас. частей корня растения Araliaceae на 2 мас. части Basidiomycotina, и выделяют из них активные ингредиенты. Такие композиции обладают противоопухолевой активностью.

11) Композиции, указанные в разделе (10), в которых вышеуказанными одним или несколькими типами Basidiomycotina являются Ganoderma Lucidum и/или Coriolus versicolor.

(12) Композиции, указанные в разделах (10) и (11), в которых вышеуказанное растение, принадлежащее к Araliaceae, представляет собой лечебный женьшень.

(13) Композиции, указанные в разделах (10)-(12), в которых вышеуказанное растение Araliaceae представляет собой женьшень обыкновенный и/или женьшень японский.

(14) Композиции, указанные в разделах (5)-(8) и (10)-(13), окислительно-восстановительный потенциал которых составляет +1230 мВ или менее.

(15) Способ лечения пациентов путем введения терапевтически эффективного количества композиции согласно любому из разделов (10)-(14). Такие композиции можно вводить, например, пациентам с опухолями и, предпочтительно, пациентам, которым диагностирована конечная стадия рака.

(16) Композиции, содержащие компоненты, экстрагированные из примерно 10 мас. частей Coriolus versicolor и примерно 1,5-6 мас. частей Ganoderma Lucidum.

(17) Композиции, указанные в разделе (16), окислительно-восстановительный потенциал которых составляет +1230 мВ или менее.

(18) Способы лечения пациентов путем введения терапевтически эффективного количества композиции согласно любому из разделов (16) и (17).

Другие варианты настоящего изобретения также рассмотрены в описании.

Каждый из дополнительных примеров, композиций и стадий способов, описанных выше и далее, можно использовать отдельно или в сочетании с другими примерами для получения улучшенных композиций и способов получения и применения таких композиций. Теперь будут описываться характерные примеры настоящего изобретения, где такие примеры, композиции и стадии способов излагаются в сочетании или более подробно. Такое подробное описание предназначается для специалистов в данной области техники для руководства при практическом осуществлении предпочтительных аспектов настоящего изобретения и не предназначается для ограничения объема изобретения. Только формула изобретения определяет объем притязаний изобретения. Следовательно, сочетания особенностей и стадий, описанные подробно далее, не являются необходимыми для практического осуществления изобретения в самом широком смысле, а только представляют иллюстративные примеры осуществления изобретения.

Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения

Пример 1. Получение композиции I

Для получения этой композиции использовали плодоносящие тела Ganoderma Lucidum, плодоносящие тела Coriolus versicolor и корень женьшеня японского С.А. Мейера. Черные плодоносящие тела Ganoderma Lucidum, выросшие в естественных условиях, собрали летом в лесу на севере Китая. Затем черные плодоносящие тела сушили на воздухе при комнатной температуре в темноте. Нативные плодоносящие тела Coriolus versicolor собирали летом в Японии и затем сушили на воздухе при комнатной температуре в темноте. Корни зрелых растений женьшеня японского собирали летом в Японии и затем сушили на воздухе при комнатной температуре в темноте.

Взвешивали по отдельности 6 г Ganoderma Lucidum, 6 г Coriolus versicolor и 6 г женьшеня японского, смесь из указанных трех видов сырья измельчали на кусочки размером примерно 5 мм. К полученной смеси добавляли 500 мл воды (деионизованная вода, чистота 1 мкСм/см или менее) и смесь кипятили 2 час с обратным холодильником. Затем раствор фильтровали и получали экстрагированную композицию. Было определено, что 1 мл такой композиции содержал экстрагированные компоненты, эквивалентные приблизительно 0,012 г Ganoderma Lucidum, приблизительно 0,012 г Coriolus versicolor и приблизительно 0,012 г женьшеня японского. Затем раствор разводили, используя вышеуказанную деионизованную воду, в соотношениях 1/4, 1/8, 1/16, 1/32, 1/64, 1/128 и 1/256.

Пример 2. Получение композиции II

Взвешивали по отдельности 6 г Ganoderma Lucidum, 6 г Coriolus versicolor и 6 г женьшеня японского и смесь из указанных трех видов сырья измельчали до получения порошка. Полученную порошкообразную смесь обрабатывали так же, как в примере 1, для того, чтобы получить композицию примера 2. Композицию примера 2 разводили так же, как в примере 1.

Пример 3. Определение противоопухолевой активности и ингибирования пролиферации на клетках лейкоза человека (клетки К562)

В каждую лунку титрационного микропланшета помещали 150 мкл (20×10³клеток) культурального раствора клеточной системы К562. Клеточную систему К562 получали в Department of Clinical Microbiology Rigshopital, Aafs, 7806 at National University Hospital of Denmark. В соответствующие лунки добавляли по 50 мкл основных растворов, а также каждого из разведении растворов, полученных согласно приведенным выше примерам 1-2, и клетки культивировали при 37°С. Пролиферацию клетки определяли через 24 час, 48 час, 72 час и 96 час культивирования с использованием метода с SRB (сульфонамин В).

Метод с SRB осуществляли следующим образом. В каждую лунку добавляли 50 мкл 80% ТСА (трихлоруксусная кислота) и клетки иммобилизовывали в течение 1 час. Затем клетки промывали 4 раза и тщательно высушивали. В каждую лунку добавляли 200 мкл 4% SRB (сульфонамина В), клетки окрашивали в течение 30 минут, промывали 4 раза и затем высушивали. В каждую лунку добавляли 10 мМ трис и перемешивали в течение 5 минут. После этого в каждой лунке измеряли поглощение при длине волны 490 нм. Отношение числа клеток после культивирования за указанное время и начального числа клеток использовали в качестве степени ингибирования пролиферации (%).

Результаты, относящиеся к композиции, полученной в каждом из примеров 1 и 2, приведены в таблицах 1 и 2 соответственно. Как видно из таблиц 1 и 2, основной раствор и разведенные растворы (до разведения примерно в 16 раз) композиции I, полученной в примере 1, заметно ингибировали пролиферацию клеточной системы К562. Основной раствор и разведенные растворы (до разведения примерно в 8 раз) композиции II, полученной в примере 2, также заметно ингибировали пролиферацию клеточной системы К562. Полученные результаты подтверждают, что указанные композиции обладают противоопухолевой активностью, при этом композиция I, полученная путем экстракции кусочков, обладает более сильной противоопухолевой активностью.

Пример 4. Измерение окислительно-восстановительного потенциала композиций

Каждую из разведенных композиций, полученных в примере 1, инкубировали при 25°С в течение 24 часов и измеряли окислительно-восстановительный потенциал (мВ) каждого раствора. Использовали прибор для измерения окислительно-восстановительного потенциала (НМ-14, изготовлен Touaku Denpa Kogyou, платиновый электрод, стандартный электрод - хлорид серебра, внутренний раствор 3,3 моль/л KCl). Температура в измерительной комнате составляла 25°С. При 25°С потенциал отдельного электрода стандартного электрода составляет 206 мВ. Значения потенциалов приводятся в табл.3. Окислительно-восстановительные потенциалы вычисляли, прибавляя 206 мВ к каждому из потенциалов, указанных в табл.3.

Таким образом, окислительно-восстановительный потенциал, например, при разведении 1:4 составляет 226 мВ. Далее вычисляли корреляцию между окислительно-восстановительным потенциалом композиции при различных степенях разведения и степенью ингибирования пролиферации клеток (через 24 часа), измеренной в примере 3, и обнаруживали, что она составляет -0,960. Поэтому оказывается, что существует сильная отрицательная корреляция между окислительно-восстановительным потенциалом и ингибированием пролиферации клеток.

Пример 5. Клинические испытания на больных раком

Получали основной раствор согласно примеру 1. Полученный основной раствор постоянно вводили 26 пациентам с тяжелой формой рака в дозах по 150 мл 3 раза в день в течение 35 дней. Было обнаружено, что все пациенты, получавшие композицию, или сообщают, или у них обнаруживается ослабление боли, улучшение аппетита, улучшение состояния кожи, снижение стресса, улучшение сна и улучшение различных расстроенных функций организма. Также наблюдали смягчение осложнений и восстановление.

В табл.4 указаны случаи, при которых повреждения регрессировали, и случаи, при которых повреждения полностью излечивались. В табл.5 приведены результаты анализов крови у некоторых пациентов, и в табл.6 приведены результаты иммунологических анализов у некоторых из таких пацинтов.

Как следует из результатов, приведенных в таблицах 4-6, подтверждается что композиции настоящего изобретения обладают противоопухолевой активностью in vivo, т.е. в организме человека. Иными словами, получены благоприятные результаты лечения в случае цервикальной карциномы, карциномы легких, рака яичников, рака молочной железы (метастаз), рака кожи (метастаз), рака молочной железы и рака кожи.

Пример 6. Клинические испытания на больных диабетом

Основной раствор получали согласно примеру 1. Кроме того, женьшень японский измельчали на кусочки размером примерно 5 мм. Добавляли 500 мас. частей 40% раствора этилового спирта к 10-20 мас. частям полученных кусочков, осуществляли тепловую экстракцию, нагревая раствор до 80-100°С до тех пор, пока спирт почти полностью не испарялся, и получали экстракционный раствор женьшеня японского.

Основной раствор композиции примера 1 и экстракционный раствор женьшеня японского смешивали в соотношении 2:1. Полученный раствор вводили ежедневно 25 больным (11 мужчинам и 14 женщинам) сахарным диабетом в дозах по 150 мл 2 раза в течение 25 дней.

Было обнаружено, что все пациенты, кому вводили композицию, или сообщали, или у них находили ослабление боли, особенно значительные улучшения наблюдались в отношении головной боли и онемения конечностей, улучшение аппетита, восстановление зрения, снижение стресса и улучшение сна. Также наблюдали смягчение осложнений и излечение. У некоторых пациентов даже возвращалась чувствительность в некротических нижних конечностях.

Клинические результаты приведены в табл.7. Как видно из табл.7, подтверждается снижение уровня глюкозы в крови у всех пациентов после такого клинического введения. Введение указанной композиции не вызывало какие-либо отрицательные действия. Кроме субъективного улучшения симптомов, также было обнаружено заметное гипогликемическое действие.

Кроме того, следует отметить, что пациентов 13, 16, 20 и 22 лечили только композицией настоящего изобретения, описанной выше (т.е., раствором композиции примера 1 и экстракционным раствором женыпения японского, смешанными в соотношении 2:1). Так, 4 больных NIDDM (инсулиннезависимый сахарный диабет) лечили, вводя только композицию настоящего изобретения. Больных с IDDM (инсулинзависимый сахарный диабет) (13) и 9 больных NIDDM лечили путем введения как композиции настоящего изобретения, так и инсулина. Ранее, до проведения настоящего испытания, всех пациентов лечили инсулином. Кроме того, пациентам, которых лечили как композицией настоящего изобретения, так и инсулином, давали те же дозы инсулина, которые они получали до проведения испытания.

В табл.8 приведены средний уровень глюкозы в крови у пациентов каждой группы. Результаты группируют согласно типу сахарного диабета и типу лечения. В табл.8 приведены данные об уровне глюкозы в крови до и после введения, а также содержание глюкозы в крови после введения в процентах по сравнению с содержанием до введения.

Как видно из табл.8, подтверждается, что у всех больных после такого введения композиции по изобретению наблюдалось заметное снижение глюкозы в крови. При введении указанной композиции не наблюдалось какого-либо отрицательного действия.

Пример 7. Клинические испытания на больных раком

Получали основной раствор композиции согласно примеру 1. Полученный раствор постоянно вводили перорально 3 больным с тяжелой формой рака в дозах по 150 мл 3 раза в день в течение 35 дней. Пациенту 1 (P.V.) вводили только основной раствор и не назначали ничего другого. Пациенту 2 (Y.T.), кроме основного раствора, вводили дозы 5-FU по 800 мг 6 раз в сутки в течение 35 дней как химиотерапию. Анализы крови и иммунологические анализы проводили для каждого пациента до и после введения препаратов.

Для контроля пациент 4 (A.R.) не получал какого-либо специфического лечения в это время. Однако анализы крови и иммунологические анализы проводили также и для пациента 4.

В Табл.9 приведены состояние и способ лечения каждого пациента. В Табл.10 приведены сведения о восстановлении или улучшении состояния, о которых сообщали указанные пациенты. В таблицах 11 и 12 приведены результаты анализов крови и иммунологических анализов для каждого пациента соответственно.

Как видно из табл.10, все пациенты, получавшие композицию примера 1, сообщали об ослаблении боли, улучшении аппетита, улучшении сна и улучшении в различных расстройствах функций организма. Также наблюдалось смягчение осложнений и восстановление.

Кроме того, как видно из табл.11, лечение пациента 1 (S.V.), получавшего только композицию настоящего изобретения, улучшает содержание в крови каждой составной части. Далее, у пациента 2 (Y.T., химиотерапия) и пациента 3 (N.V., лучевая терапия) наблюдалось улучшение в соответствующих анализах крови. Введение композиции настоящего изобретения также улучшало иммунологические показатели у пациентов 2 и 3, подвергавшихся или химиотерапии или лучевой терапии, что видно из табл.12.

Пример 8. Другие характерные способы получения композиции настоящего изобретения

Хотя в предыдущих примерах использовали компоненты, экстрагированные горячей водой из трубчатых Basidiomycotina, и компоненты, экстрагированные горячей водой (и/или спиртом) из корня растения, принадлежащего к Araliaceae, рассматриваются и другие композиции. Например, компоненты можно экстрагировать из различных природных продуктов с применением других приемов экстракции. Как пример, исходные вещества можно подвергнуть экстракции, экстрагированные компоненты можно профильтровать и обработать отгонкой в вакууме. Полученное вещество можно простерилизовать, высушить и затем просеять и получить порошок.

Затем высушенные экстрагированные компоненты можно ввести в состав порошков, гранул, капсул, таблеток и т.д.. Например, экстрагированные компоненты можно смешать со связующим веществом, гранулировать и высушить и получить гранулы. Такие гранулы можно использовать как таковые, или их можно спрессовать в таблетку или заполнить ими капсулы. Выбранное связующее вещество можно добавлять или до или после грануляции высушенных экстрагированных компонентов. С другой стороны, экстрагированные компоненты можно высушить и инкапсулировать. Кроме того, можно добавить другие фармацевтически приемлемые добавки, в том числе, но не только, один или несколько консервантов, для того, чтобы увеличить срок хранения композиции.

Кроме того, активные ингредиенты можно растворить в фармацевтически приемлемом растворителе, раствор профильтровать и упаковать в ампулы. Такие ампулы можно стерилизовать. И также в раствор можно добавить другие фармацевтически приемлемые добавки, в том числе, но не только, один или несколько консервантов, для того чтобы увеличить срок хранения композиции.

Кроме того, активные ингредиенты можно выделить, и можно использовать в качестве лечебных средств только активные ингредиенты. Активные ингредиенты можно охарактеризовать и затем получить синтетически. В таком случае полученные синтетически активные ингредиенты можно использовать в порошках, гранулах, капсулах, таблетках, ампулах и т.д., по порядку, и получить другие варианты для введения композиции настоящего изобретения пациентам. И также можно добавить различные другие фармацевтически приемлемые добавки, которые необходимы.

Реферат

Изобретение относится к области медицины. Композиции, которые содержат активные компоненты из одного или нескольких типов Basidiomycotina, принадлежащих к трубчатым Basidiomycotina, и активные компоненты из корня растения, принадлежащего к Araliaceae. Такие композиции обладают гипогликемической и противоопухолевой активностью. Предпочтительно, Basidiomycotina могут являться Ganoderma Lucidum и/или Coriolus versicolor, а растением, принадлежащем к Araliaceae, может быть лечебный женьшень, например женьшень обыкновенный и/или женьшень японский. Предпочтительно, водный раствор композиции имеет окислительно-восстановительный потенциал менее примерно 1230 мВ, более предпочтительно - менее примерно 900 мВ, и наиболее предпочтительно - менее примерно 330 мВ. Также описываются способы получения таких композиций, которые могут включать экстракцию горячей водой вышеуказанных компонентов. Изобретение обеспечивает получение активных экстрактов противогипогликемического действия. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 12 табл.

Формула