Новые генно-инженерные вирусы осповакцины - RU2757933C2

Код документа: RU2757933C2

Чертежи

Показать все 8 чертежа(ей)

Описание

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Область техники, к которой относится изобретение

[0001] Настоящее изобретение относится к новому генно-инженерному вирусу осповакцины.

Уровень техники

[0002] Различные методы применения вирусов для лечения рака были разработаны в последнее время. Вирус осповакцины является одним из вирусов, используемых для лечения рака. Вирус осповакцины был изучен для лечения рака в качестве вектора для доставки терапевтических генов в раковые клетки, как онколитический вирус, который пролиферирует в раковых клетках и разрушает раковые клетки, или как противораковая вакцина, которая экспрессирует опухолевые антигены или иммуномодулирующие молекулы (Expert Opinion on Biological Therapy, 2011, vol. 11, p. 595-608).

[0003] Сообщалось, что вирусы осповакцины, сконструированные таким образом, что они имеют ген N1L, инактивированный путем введения чужеродного гена, кодирующего интерлейкин-12 (IL-12) или интерлейкина-21 (IL-21), и являются дефицитными по гену тимидинкиназы (TK), за счет вставки репортерного гена lacZ и гена люциферазы светлячка, подавляют рост опухоли или повышает выживаемость у мышей, имеющих раковые опухоли (Патентная литература 1).

[0004] Сообщалось о методе применения для лечения рака рекомбинантных вирусов осповакцины, которые являются дефицитными по функции вирусных белков фактора роста вируса осповакцины (VGF) и O1L, и пролиферируют только в раковых клетках, и уничтожают раковые клетки. Хотя указано, что чужеродный ген, такой как маркерный ген или терапевтический ген, кодирующий продукт, обладающий цитотоксичностью или иммунопотенцирующим эффектом, может быть введен в ген, который не является существенным для жизненного цикла вируса осповакцины, введение конкретно исследованного в Примерах гена представляет собой введение маркерного гена, слитого ген люциферазы-зеленого флуоресцентного белка (GFP) или экспрессионной кассеты DsRed. Для введения не рассматривается терапевтический ген. Никаких предложений не сделано для комбинирования многочисленных терапевтических генов (Патентная литература 2).

[0005] Между тем, сообщалось, что при исследовании влияния рекомбинантных белков на выделенные CD8+ Т-лимфоциты рекомбинантный белок-интерлейкин-7 (IL-7) человека сам по себе не вызывает продуцирование определяемых уровней интерферона-гамма (ИФН-γ) CD8+ Т-лимфоциты, но комбинация рекомбинантного белка IL-7 человека и рекомбинантного белка IL-12 человека синергически усиливает синтез ИФН-γ (The Journal of Immunology, 1995, vol. 154, p. 5093-5102). Сообщалось, что онколитический вирус осповакцины, который экспрессирует иммуностимулирующую молекулу, может быстро быть элиминирован сильным иммунным ответом. Также утверждается, что сильный иммунный ответ может служить или врагом, или союзником опосредованной вирусом осповакцины терапии рака (Molecular Therapy, 2005, vol. 11, No. 2, p. 180-195).

Список цитирования

Патентная литература

[0006]

Патентная литература 1: Международная патентная заявка WO 2015/150809

Патентная литература 2: Международная патентная заявка WO 2015/076422

Сущность изобретения

Техническая задача

[0007] Целью настоящего изобретения является создание рекомбинантного вируса осповакцины (в частности, онколитического вируса осповакцины), фармацевтической композиции и комбинированного набора для лечения или профилактики рака.

Решение задачи

[0008] В результате значительного количества многократных теоретических построений и экспериментальных исследований в области получения вируса осповакцины авторы настоящего изобретения создали вирусы осповакцины, содержащие полинуклеотид, кодирующий вирусы IL-7, или вирусы осповакцины, содержащие полинуклеотид, кодирующий IL-12, и вирусы осповакцины, содержащие два полинуклеотида, полинуклеотид кодирующий IL-7 и полинуклеотид, кодирующий IL-12 (Пример 2); и обнаружил, что 1) вирус осповакцины, содержащий два полинуклеотида, полинуклеотид, кодирующий IL-7 и полинуклеотид, кодирующий IL-12 и 2) смесь двух вирусов осповакцины, вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, оказывают цитолитическое действие на различные раковые клетки человека (Пример 3), тем самым осуществив настоящее изобретение:

1) вирус осповакцины, содержащий два полинуклеотида, полинуклеотид, кодирующий IL-7 и полинуклеотид, кодирующий IL-12, может вызывать регрессию опухоли в гуманизированных мышиных моделях рака (Пример 6), может обеспечить полную ремиссию (Пример 7) и может индуцировать приобретенный иммунитет для поддержания противоопухолевого эффекта (Пример 8) в сингенных мышиных моделях рака. Кроме того, 2) смесь двух вирусов осповакцины, вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-7, и вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-12, может обеспечивать полную ремиссию (Пример 7) и могут индуцировать приобретенный иммунитет для поддержания противоопухолевого эффекта (Пример 8) в сингенных мышиных моделях рака.

[0009] В частности, настоящее изобретение может включать в качестве вещества или способа, применимых в медицине или промышленности, следующие изобретения:

[1] Вирус осповакцины, содержащий следующие полинуклеотиды (1) и (2):

(1) полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-7 (IL-7); и

(2) полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-12 (IL-12).

[2] Фармацевтическая композиция, выбранная из следующих фармацевтических композиций (1) или (2):

(1) фармацевтическая композиция, содержащая вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, для применения в комбинации с фармацевтической композицией, содержащей вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7; или

2) фармацевтическая композиция, содержащая вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, для применения в комбинации с фармацевтической композицией, содержащей вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12.

[3] Комбинированный набор, содержащий следующие вирусы осповакцины (1) и (2):

(1) вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7; и

(2) вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12.

[4] Вирус осповакцины согласно [1], где вирус осповакцины является дефицитным по функции фактора роста вируса осповакцины (VGF).

[5] Вирус осповакцины согласно [1], где вирус осповакцины является дефицитным по функции O1L.

[6] Вирус осповакцины согласно [1], где вирус осповакцины является дефицитным по функциям VGF и O1L.

[7] Вирус осповакцины согласно [1], где вирус осповакцины имеет делецию в доменах короткий консенсусных повторов (SCR) во внеклеточной области белка B5R.

[8] Вирус осповакцины согласно [1], где вирус осповакцины является дефицитным по функциям VGF и O1L и имеет делецию в доменах SCR во внеклеточной области белка B5R.

[9] Вирус осповакцины согласно любому из [1] и [4]-[8], где вирус осповакцины представляет собой штамм LC16mO.

[10] Фармацевтическая композиция, содержащая вирус осповакцины согласно любому из [1] и [4]-[9] и фармацевтически приемлемый эксципиент.

[11] Фармацевтическая композиция согласно [2] или набор согласно [3], где вирус осповакцины является дефицитным по функции VGF.

[12] Фармацевтическая композиция согласно [2] или набор согласно [3], где вирус осповакцины является дефицитным по функции O1L.

[13] Фармацевтическая композиция согласно [2] или набор согласно [3], где вирус осповакцины является дефицитным по функциям VGF и O1L.

[14] Фармацевтическая композиция согласно [2] или набор согласно [3], где вирус осповакцины имеет делецию в доменах SCR во внеклеточной области белка B5R.

[15] Фармацевтическая композиция согласно [2] или набор согласно [3], где вирус осповакцины является дефицитным по функциям VGF и O1L и имеет делецию в доменах SCR во внеклеточной области белка B5R.

[16] Фармацевтическая композиция согласно любому из [2] и [11]-[15] или набор согласно любому из [3] и [11]-[15], где вирус осповакцины представляет собой штамм LC16mO.

[17] Фармацевтическая композиция согласно любому из [2] и [11]-[16] или набор согласно любому из [3] и [11]-[16], дополнительно содержащие фармацевтически приемлемый эксципиент.

[18] Фармацевтическая композиция или набор согласно любому из [10]-[17] для профилактики или лечения рака.

[19] Фармацевтическая композиция или набор согласно [18], где рак представляет собой злокачественную меланому, аденокарциному легкого, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак почки, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак молочной железы, рак пищевода, глиобластому, нейробластому, миелому, рак яичников, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, гепатоцеллюлярную карциному, мезотелиому, рак шейки матки или рак желудка.

[20] Способ профилактики или лечения рака, включающий стадию введения вируса осповакцины согласно любому из [1] и [4]-[9] пациенту, нуждающемуся в профилактике или лечении рака.

[21] Способ согласно [20], где рак представляет собой злокачественную меланому, аденокарциному легкого, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак почки, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак молочной железы, рак пищевода, глиобластому, нейробластому, миелому, рак яичников, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, гепатоцеллюлярную карциному, мезотелиому, рак шейки матки или рак желудка.

[22] Вирус осповакцины согласно любому из [1] и [4]-[9], для применения в профилактике или лечении рака.

[23] Вирус осповакцины согласно [22], где рак представляет собой злокачественную меланому, аденокарциному легкого, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак почки, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак молочной железы, рак пищевода, глиобластому, нейробластому, миелому, рак яичников, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, гепатоцеллюлярную карциному, мезотелиому, рак шейки матки или рак желудка.

[24] Применение вируса осповакцины согласно любому из [1] и [4]-[9] для получения фармацевтической композиции для профилактики или лечения рака.

[25] Применение согласно [24], где рак представляет собой злокачественную меланому, аденокарциному легкого, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак почки, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак молочной железы, рак пищевода, глиобластому, нейробластому, миелому, рак яичников, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, гепатоцеллюлярную карциному, мезотелиому, рак шейки матки или рак желудка.

[26] Способ профилактики или лечения рака, включающий стадию введения

(1) вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-7; и

(2) вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-12

пациенту, нуждающемуся в профилактике или лечении рака.

[27] Способ согласно [26], где рак представляет собой злокачественную меланому, аденокарциному легкого, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак почки, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак молочной железы, рак пищевода, глиобластому, нейробластому, миелому, рак яичников, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, гепатоцеллюлярную карциному, мезотелиому, рак шейки матки или рак желудка.

[28] Вирус осповакцины, выбранный из следующих вирусов (1) или (2):

(1) вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, для профилактики или лечения рака в комбинации с фармацевтической композицией, содержащей вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12; или

(2) вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, для профилактики или лечения рака в комбинации с фармацевтической композицией, содержащей вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7.

[29] Вирус осповакцины согласно [28], где рак представляет собой злокачественную меланому, аденокарциному легкого, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак почки, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак молочной железы, рак пищевода, глиобластому, нейробластому, миелому, рак яичников, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, гепатоцеллюлярную карциному, мезотелиому, рак шейки матки или рак желудка.

[30] Применение вируса осповакцины, выбранное из следующих применений (1) или (2):

(1) применение вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-7, для получения фармацевтической композиции для профилактики или лечения рака, для применения в комбинации с фармацевтической композицией, содержащей вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12; или

(2) применение вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-12, для получения фармацевтической композиции для профилактики или лечения рака, для применения в комбинации с фармацевтической композицией, содержащей вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7.

[31] Применение согласно [30], где рак представляет собой злокачественную меланому, аденокарциному легкого, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак почки, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак молочной железы, рак пищевода, глиобластому, нейробластому, миелому, рак яичников, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, гепатоцеллюлярную карциному, мезотелиому, рак шейки матки или рак желудка.

[32] Применение (1) вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-7, и (2) вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-12, для получения комбинированного набора для профилактики или лечения рака.

[33] Применение согласно [32], где рак представляет собой злокачественную меланому, аденокарциному легкого, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак почки, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак молочной железы, рак пищевода, глиобластому, нейробластому, миелому, рак яичников, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, гепатоцеллюлярную карциному, мезотелиому, рак шейки матки или рак желудка.

Полезные эффекты изобретения

[0010] Вирус осповакцины согласно настоящему изобретению и вирусы осповакцины, содержащиеся в фармацевтической композиции и в комбинированном наборе согласно настоящему изобретению, обладают онколитической активностью, экспрессируют полипептиды IL-12 и IL-7, кодируемые полинуклеотидами, переносимыми вирусами в раковые клетки, и вызывают полную ремиссию и приобретенный иммунитет. Вирус осповакцины, фармацевтическая композиция и комбинированный набор согласно настоящему изобретению могут использоваться для профилактики или лечения рака.

Краткое описание чертежей

[0011] Фигура 1 представляет собой схему, иллюстрирующую пример плазмидных векторов для переноса ДНК, используемых в настоящем изобретении, где верхняя карта вектора иллюстрирует пример, в котором ген BFP, функционально связанный с промотором, встроен в ген VGF, а нижняя карта вектора иллюстрирует пример, в котором ген BFP, функционально связанный с промотором, встроен в ген O1L.

[0012] Фигура 2 представляет собой схематичное изображение структуры генома рекомбинантных вирусов осповакцины (LC16mO ΔSCR VGF-p7.5-DsRed/O1L-SP-LacZ и вирусов, сконструированных в процессе получения вирусного вектора).

[0013] Фигура 3 представляет собой схематичное изображение структуры генома рекомбинантных вирусов осповакцины (LC16mO ΔSCR VGF-SP-IL12/O1L-SP-LacZ, LC16mO ΔSCR VGF-SP-IL7/O1L-SP-LacZ).

[0014] Фигура 4 представляет собой схематичное изображение структуры генома рекомбинантного вируса осповакцины (LC16mO ΔSCR VGF-SP-IL12/O1L-SP-IL7).

[0015] Фигура 5-1 представляет собой график, иллюстрирующий онколитические свойства рекомбинантного вируса осповакцины (LC16mO ΔSCR VGF-SP-IL12/O1L-SP-IL7), где по оси ординат показана выживаемость раковых клеток (%), а планки погрешностей представляют собой стандартное отклонение.

[0016] Фигура 5-2 представляет собой график, иллюстрирующий онколитические свойства рекомбинантного вируса осповакцины (LC16mO ΔSCR VGF-SP-IL12/O1L-SP-IL7), где по оси ординат показана выживаемость раковых клеток (%), а планки погрешностей представляют собой стандартное отклонение, Фигура 5-1 и Фигура 5-2 представляют собой графики, полученные в одинаковых экспериментальных условиях, за исключением того, что изучаемые типы клеток были разными.

[0017] Фигура 5-3 график, иллюстрирующий онколитические свойства смеси из 2 рекомбинантных вирусов осповакцины (смесь LC16mO ΔSCR VGF-SP-IL12/O1L-SP-LacZ и LC16mO ΔSCR VGF-SP-IL7/O1L-SP-LacZ), где по оси ординат показана выживаемость раковых клеток (%), а планки погрешностей представляют собой стандартное отклонение.

[0018] Фигура 5-4 представляет собой график, иллюстрирующий онколитические свойства смеси из 2 рекомбинантных вирусов осповакцины (смесь LC16mO ΔSCR VGF-SP-IL12/O1L-SP-LacZ и LC16mO ΔSCR VGF-SP-IL7/O1L-SP-LacZ), где по оси ординат показана выживаемость раковых клеток (%), а планки погрешностей представляют собой стандартное отклонение, Фигура 5-3 и Фигура 5-4 представляют собой графики, полученные в одинаковых экспериментальных условиях, за исключением того, что изучаемые типы клеток были разными.

Подробное описание предпочтительных вариантов осуществления изобретения

[0019] Настоящее изобретение подробно описано ниже.

[0020] Вирус осповакцины, фармацевтическая композиция, для применения в комбинации, и комбинированный набор согласно настоящему изобретению

Настоящее изобретение относится к вирусу осповакцины, содержащему следующие компоненты (1) и (2):

(1) полинуклеотид, кодирующий IL-7; и

(2) полинуклеотид, кодирующий IL-12.

(В настоящем описании вирус осповакцины также упоминается как «вирус осповакцины согласно настоящему изобретению»).

[0021] Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, выбранной из следующих композиций (1) или (2):

(2) фармацевтическая композиция, содержащая вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, для применения в комбинации с фармацевтической композицией, содержащей вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12.

(Используемый здесь термин «фармацевтическая композиция» также относится к «фармацевтической композиции для применения в комбинации в соответствии с настоящим изобретением», и вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7 или вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, содержащиеся в фармацевтической композиции для применения в комбинации в соответствии с настоящим изобретением, описанной выше в (1) или (2), также именуется как «вирус осповакцины для применения в комбинации»).

[0022] Настоящее изобретение также относится к комбинированному набору, включающему следующие вирусы осповакцины (1) и (2):

(1) вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7; и

(2) вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12.

(В настоящем описании комбинированный набор также упоминается как «комбинированный набор согласно настоящему изобретению», а вирусы осповакцины, содержащиеся в комбинированном наборе согласно настоящему изобретению, также именуются как «вирусы осповакцины для комбинированного набора».)

[0023] В соответствии с настоящим изобретением термин «комбинированный набор» означает одну или несколько фармацевтических композиций, используемых для введения двух вирусов осповакцины: (1) вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-7, и (2) вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-12. Когда оба вируса осповакцины вводят одновременно, комбинированный набор может содержать два вируса осповакцины для комбинированного набора вместе в одной фармацевтической композиции, такой как порошок, или отдельно в нескольких фармацевтических композициях. Комбинированный набор согласно настоящему изобретению включает фармацевтическую композицию, содержащую два вируса осповакцины: вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12. Когда оба вируса осповакцины для комбинированного набора не вводят одновременно, комбинированный набор содержит два вируса осповакцины для комбинированного набора в отдельных фармацевтических композициях. Например, комбинированный набор содержит два вируса осповакцины для комбинированного набора в отдельных фармацевтических композициях в одной упаковке или в отдельных фармацевтических композициях в разных упаковках. Комбинированный набор согласно настоящему изобретению может содержать фармацевтически приемлемый эксципиент.

[0024] Вирус осповакцины, используемый в качестве вируса осповакцины согласно настоящему изобретению, вирус осповакцины для применения в комбинации и вирусы осповакцины для комбинированного набора представляют собой вирус рода Orthopoxvirus семейства Poxviridae. Штаммы вируса осповакцины, используемые в настоящем изобретении, включают без ограничений штаммы Lister, New York City Board of Health (NYBH), Wyeth, Copenhagen, Western Reserve (WR), Modified Vaccinia Ankara (MVA), EM63, Ikeda, Dalian, Tian Tan и тому подобное. Штаммы Lister и MVA доступны в Американской коллекции типовых культур (ATCC VR-1549 и ATCC VR-1508, соответственно). Кроме того, штаммы вируса осповакцины, полученные из этих штаммов, могут быть использованы в настоящем изобретении. Например, штаммы LC16, LC16m8 и LC16mO, полученные из штамма Lister, могут быть использованы в настоящем изобретении. Штамм LC16mO представляет собой штамм, полученный через штамм LC16 путем субкультивирования при низкой температуре штамма Lister в качестве родительского штамма. Штамм LC16m8 представляет собой штамм, полученный дальнейшим субкультивированием при низкой температуре штамма LC16mO, имеющего мутацию, приводящую к сдвигу рамки считывания в гене B5R, который кодирует белок вирусной мембраны, и аттенуированный потерей экспрессии и функции этого белка (Tanpakushitsu kakusan koso (Protein, Nucleic acid, Enzyme), 2003, vol. 48, p. 1693-1700). Полногеномные последовательности штаммов Lister, LC16m8 и LC16mO известны, например, под регистрационными номерами No.AY678276.1, No.AY678275.1 и No.AY678277.1, соответственно. Таким образом, штаммы LC16m8 и LC16mO могут быть получены из штамма Lister при помощи известной технологии, такой как гомологичная рекомбинация или сайт-направленный мутагенез.

[0025] В одном варианте осуществления изобретения вирус осповакцины, используемый в настоящем изобретении, представляет собой штамм LC16mO.

[0026] Вирус осповакцины, используемый в настоящем изобретении, может включать аттенуированные и/или опухоль-селективные вирусы осповакцины. Используемый здесь термин «аттенуированный» означает низкую токсичность (например, цитолитические свойства) для нормальных клеток (например, неопухолевых клеток). Используемый здесь термин «опухоль-селективный» означает токсичность для опухолевых клеток (например, онколитические свойства) более высокую, чем для нормальных клеток (например, неопухолевых клеток). Вирусы осповакцины, генетически модифицированные, чтобы быть дефицитными по функции конкретного белка или подавлять экспрессию конкретного гена или белка (Expert Opinion on Biological Therapy, 2011, vol. 11, p. 595-608), могут быть использованы в настоящем изобретении. Например, для того, чтобы повысить селективность вируса осповакцины в отношении опухоли, может быть использован вирус осповакцины, дефицитный по функции TK (Cancer Gene Therapy, 1999, vol. 6, p. 409-422), вирус осповакцины, дефицитный по функции VGF (Cancer Research, 2001, vol. 61, p. 8751-8757), вирус осповакцины, имеющий модифицированный ген TK, модифицированный ген гемагглютинина (HA) и модифицированный ген F3 или нарушенный локус F3 (WO 2005/047458), вирус осповакцины, дефицитный по функции VGF и O1L (WO 2015/076422), вирус осповакцины, в котором целевая последовательность микроРНК, экспрессия которой снижена в раковых клетках, введена в 3'-некодирующую область гена B5R (WO 2011/125469), вирус осповакцины, дефицитный по функции VGF и TK (Cancer Research, 2001, vol. 61, p. 8751-8757), вирус осповакцины, дефицитный по функции TK, HA и F14.5L (Cancer Research, 2007, vol. 67, p. 10038-10046), вирус осповакцины, дефицитный по функции TK и B18R (PLoS Medicine, 2007, vol. 4, p. e353), вирус осповакцины, дефицитный по функции TK и рибонуклеотидредуктазы (PLoS Pathogens, 2010, vol. 6, p. e1000984), вирус осповакцины, дефицитный по функции SPI-1 и SPI-2 (Cancer Research, 2005, vol. 65, p. 9991-9998), вирус осповакцины, дефицитный по функции SPI-1, SPI-2 и TK (Gene Therapy, 2007, vol. 14, p. 638-647) или вирус осповакцины, имеющий мутации в областях E3L и K3L (WO 2005/007824). Кроме того, вирус осповакцины, дефицитный по функции O1L, может быть использован (Journal of Virology, 2012, vol. 86, p. 2323-2336). Кроме того, предполагая, что выведение вируса в результате нейтрализующего действия антител против вируса осповакцины снижается в живом организме, можно использовать вирус осповакцины, дефицитный во внеклеточной области B5R (Virology, 2004, vol. 325, p. 425-431) или вирус осповакцины, дефицитный в области A34R (Molecular Therapy, 2013, vol. 21, p. 1024-1033). Кроме того, предполагая активацию иммунных клеток вирусом осповакцины, можно использовать вирус осповакцины, дефицитный в отношении рецептора интерлейкина-1b (IL-1b) (WO 2005/030971). Такое введение чужеродного гена или делеция или мутация гена может быть осуществлена, например, с помощью известной технологии гомологичной рекомбинации или сайт-направленного мутагенеза. Более того, вирус осповакцины, имеющий комбинацию таких генетических модификаций, может быть использован в настоящем изобретении. Используемый здесь термин «дефицитный» означает, что область гена, указанная этим термином, не обладает функцией, и этот термин используется в значении, включающем в себя удаление области гена, указанной этим термином. Например, «дефицитность» может быть результатом делеции в области, состоящей из указанной области гена, или делеции в соседней области гена, содержащей указанную область гена.

[0027] В одном варианте осуществления изобретения вирус осповакцины согласно настоящему изобретению, вирус осповакцины для применения в комбинации или вирусы осповакцины для комбинированного набора является (являются) дефицитными по функции VGF. В одном варианте осуществления изобретения вирус осповакцины согласно настоящему изобретению, вирус осповакцины для применения в комбинации или вирусы осповакцины для комбинированного набора является (являются) дефицитными по функции O1L. В одном варианте осуществления изобретения вирус осповакцины согласно настоящему изобретению, вирус осповакцины для применения в комбинации или вирусы осповакцины для комбинированного набора является (являются) дефицитными по функциям VGF и O1L. Функция VGF и/или O1L у вируса осповакцины может быть сделана дефицитной способом, описанным в Международной патентной заявке WO 2015/076422.

[0028] VGF представляет собой белок, обладающий высокой степенью гомологии по аминокислотной последовательности с эпидермальным фактором роста (EGF), подобно EGF он связывается с рецептором эпидермального фактора роста и активирует сигнальный каскад из Ras, Raf, киназы митоген-активированной протеинкиназы (MAPK)/регулируемой внеклеточным сигналом киназы (ERK) (MAPK/ERK киназы, MEK) и следующей ERK, стимулируя деление клеток.

[0029] O1L поддерживает активацию ERK и способствует делению клеток вместе с VGF.

[0030] Если вирус осповакцины является дефицитным по функции VGF и/или O1L, то это означает отсутствие экспрессии гена, кодирующего VGF, и/или гена, кодирующего O1L, или нормальной функции VGF и/или O1L при их экспрессии. Дефицит функции VGF и/или O1L вируса осповакцины может быть вызван делецией всей или части гена, кодирующего VGF, и/или гена, кодирующего O1L. Кроме того, гены могут быть мутированы путем нуклеотидной замены, делеции, вставки или добавления, чтобы предотвратить экспрессию нормального VGF и/или O1L. Кроме того, чужеродный ген может быть вставлен в ген, кодирующий VGF и/или ген, кодирующий O1L. В настоящем изобретении считается, что ген является дефицитным, когда нормальный продукт гена не экспрессируется в результате мутации, такой как генетическая замена, делеция, вставка или добавление.

[0031] Является (являются) ли вирус осповакцины согласно настоящему изобретению, вирус осповакцины для применения в комбинации или вирусы осповакцины для комбинированного набора дефицитным по функции VGF и/или O1L, можно определить известным способом, например, путем оценки функции VGF и/или O1L, тестирования на присутствие VGF или O1L с помощью иммунохимического метода с использованием антитела против VGF или антитела против O1L, или определения наличия гена, кодирующего VGF, или ген кодирующего O1L, при помощи полимеразной цепной реакцией (ПЦР).

[0032] B5R (Регистрационный номер No.AAA48316.1) представляет собой мембранный белок 1-го типа, который расположен в оболочке вируса осповакцины и служит для повышения эффективности инфицирования, когда вирус заражает и передается соседним клеткам или другим участкам в организме хозяина. Внеклеточная область B5R содержит 4 структурных домена, называемых доменами SCR (Journal of Virology, 1998, vol. 72, p. 294-302). В одном варианте осуществления изобретения вирус осповакцины согласно настоящему изобретению, вирус осповакцины для применения в комбинации или вирусы осповакцины для комбинированного набора имеют (имеют) делецию в доменах SCR во внеклеточной области B5R.

[0033] Делеция в доменах SCR в внеклеточной области B5R вируса осповакцины включает делецию части или всех 4 доменов SCR во внеклеточной области B5R и означает отсутствие экспрессии области гена, кодирующей часть или все 4 домена SCR во внеклеточной области B5R или отсутствие части или всех 4 доменов SCR во внеклеточной области в экспрессированном белке B5R. В одном варианте осуществления изобретения вирус осповакцины согласно настоящему изобретению, вирус осповакцины для применения в комбинации или вирусы осповакцины для комбинированного набора имеют (имеют) делецию всех 4 доменов SCR. В одном варианте осуществления изобретения 4 домена SCR, удаленные у вируса осповакцины согласно настоящему изобретению, вируса осповакцины для применения в комбинации или вирусов осповакцины для комбинированного набора, соответствуют области от аминокислоты 22 до аминокислоты 237 в аминокислотной последовательности с регистрационным номером No.AAA48316.1, описанной выше.

[0034] Имеет (имеют) ли вирус осповакцины согласно настоящему изобретению, вирус осповакцины для применения в комбинации или вирусы осповакцины для комбинированного набора делецию в доменах SCR во внеклеточной области B5R, можно определить при помощи известного способа, например, путем тестирования на присутствие доменов SCR с помощью иммунохимического метода с использованием антитела против доменов SCR, или определения наличия или размера гена, кодирующего домены SCR, посредством ПЦР.

[0035] В одном варианте осуществления изобретения вирус осповакцины согласно настоящему изобретению, вирус осповакцины для применения в комбинации или вирусы осповакцины для комбинированного набора является (являются) вирусом осповакцины, дефицитным по функциям VGF и O1L, и имеет делецию в доменах SCR во внеклеточной области B5R.

[0036] В одном варианте осуществления изобретения вирус осповакцины согласно настоящему изобретению, вирус осповакцины для применения в комбинации или вирусы осповакцины для комбинированного набора является (являются) вирусом осповакцины штамма LC16mO, дефицитным по функциям VGF и O1L, и имеет делецию в доменах SCR во внеклеточной области B5R.

[0037] В одном варианте осуществления изобретения вирус осповакцины согласно настоящему изобретению представляет собой вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12, и являющийся дефицитным по функциям VGF и O1L.

[0038] В одном варианте осуществления изобретения вирус осповакцины согласно настоящему изобретению представляет собой вирус осповакцины штамма LC16mO, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12, и являющийся дефицитным по функциям VGF и O1L.

[0039] В одном варианте осуществления изобретения вирус осповакцины согласно настоящему изобретению представляет собой вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12, являющийся дефицитным по функциям VGF и O1L, и имеющий делецию в доменах SCR во внеклеточной области B5R.

[0040] В одном варианте осуществления изобретения вирус осповакцины согласно настоящему изобретению представляет собой вирус осповакцины штамма LC16mO, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий IL-12, являющийся дефицитным по функциям VGF и O1L, и имеющий делецию в доменах SCR во внеклеточной области B5R.

[0041] В одном варианте осуществления изобретения вирус осповакцины для применения в комбинации или вирусы осповакцины для комбинированного набора представляет собой (представляют собой) вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и являющийся дефицитным по функциям VGF и O1L, или вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, и являющийся дефицитным по функциям VGF и O1L.

[0042] В одном варианте осуществления изобретения вирус осповакцины для применения в комбинации или вирусы осповакцины для комбинированного набора представляет собой (представляют собой) вирус осповакцины штамма LC16mO, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, и являющийся дефицитным по функциям VGF и O1L, или вирус осповакцины штамма LC16mO, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, и являющийся дефицитным по функциям VGF и O1L.

[0043] В одном варианте осуществления изобретения вирус осповакцины для применения в комбинации или вирусы осповакцины для комбинированного набора представляет собой (представляют собой) вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, являющийся дефицитным по функциям VGF и O1L, и имеющий делецию в доменах SCR во внеклеточной области B5R, или вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, являющийся дефицитным по функциям VGF и O1L, и имеющий делецию в доменах SCR во внеклеточной области B5R.

[0044] В одном варианте осуществления изобретения вирус осповакцины для применения в комбинации или вирусы осповакцины для комбинированного набора представляет собой (представляют собой) вирус осповакцины штамма LC16mO, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7, являющийся дефицитным по функциям VGF и O1L, и имеющий делецию в доменах SCR во внеклеточной области B5R, или вирус осповакцины штамма LC16mO, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12, являющийся дефицитным по функциям VGF и O1L, и имеющий делецию в доменах SCR во внеклеточной области B5R.

[0045] IL-7 представляет собой секреторный белок, функционирующий как агонист рецептора IL-7. Сообщается, что IL-7 способствует выживанию, пролиферации и дифференциации Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов и тому подобного (Current Drug Targets, 2006, vol. 7, p. 1571-1582). В настоящем изобретении IL-7 включает IL-7 естественного происхождения и модифицированные формы, обладающие его функцией. В одном варианте осуществления изобретения IL-7 представляет собой человеческий IL-7. В настоящем изобретении человеческий IL-7 включает человеческий IL-7 естественного происхождения и модифицированные формы, обладающие его функцией. В одном варианте осуществления человеческий IL-7 выбран из группы, состоящей из следующих полипептидов (1)-(3):

(1) полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в регистрационном номере No. NP_000871.1 и имеющую функцию человеческого IL-7;

(2) полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, в которой от 1 до 10 аминокислот удаляют, замещают, вводят в и/или добавляют в аминокислотную последовательность, приведенную в регистрационном номере No. NP_000871.1 и имеющую функцию человеческого IL-7; и

(3) полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую 90% или более идентичности с аминокислотной последовательностью, приведенной в регистрационном номере No. NP_000871.1 и имеющей функцию человеческого IL-7.

В связи с этим, термин «функция человеческого IL-7» относится к влиянию на выживание, пролиферацию и дифференциацию иммунных клеток человека.

[0046] Человеческий IL-7, используемый в настоящем изобретении, предпочтительно представляет собой полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, приведенной в регистрационном номере No. NP_000871.1.

[0047] IL-12 представляет собой гетеродимер субъединицы IL-12 p40 и субъединицы IL-12 α. Сообщается, что IL-12 обладает функцией активации и индуцирования дифференцировки Т-лимфоцитов и NK-клеток (Cancer Immunology Immunotherapy, 2014, vol. 63, p. 419-435). В настоящем изобретении IL-12 включает IL-12, естественного происхождения и модифицированные формы, обладающие его функцией. В одном варианте осуществления изобретения IL-12 представляет собой человеческий IL-12. В настоящем изобретении человеческий IL-12 включает человеческий IL-12 естественного происхождения и модифицированные формы, обладающие его функцией. В одном варианте осуществления изобретения человеческий IL-12, как комбинация субъединицы p40 IL-12 человека и субъединицы α IL-12 человека, выбран из группы, состоящей из следующих полипептидов (1)-(3):

(1) полипептиды, содержащие (1-а) полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в регистрационном номере No. NP_002178.2, (1-b) полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, в которой от 1 до 10 аминокислот удаляют, замещают, вводят в и/или добавляют в аминокислотную последовательность, приведенную в регистрационном номере No. NP_002178.2, или (1-c) полипептид, имеющий 90% или более идентичности с аминокислотной последовательностью, приведенной в регистрационном номере No. NP_002178.2; и

(2-a) полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в регистрационном номере No. NP_000873.2, (2-b) полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, в которой от 1 до 10 аминокислот удаляют, замещают, вводят в и/или добавляют в аминокислотную последовательность, приведенную в регистрационном номере No. NP_000873.2, или (2-c) полипептид, имеющий 90% или более идентичности с аминокислотной последовательностью, приведенной в регистрационном номере No. NP_000873.2, и

обладающие функцией человеческого IL-12;

(2) полипептиды, содержащие (1-a) полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, приведенной в регистрационном номере No. NP_002178.2, и

(2-a) полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в регистрационном номере No. NP_000873.2, (2-b) полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, в которой от 1 до 10 аминокислот удаляют, замещают, вводят в и/или добавляют в аминокислотную последовательность, приведенную в регистрационном номере No. NP_000873.2, или (2-c) полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую 90% или более идентичности с аминокислотной последовательностью, приведенной в регистрационном номере No. NP_000873.2 и

обладающие функцией человеческого IL-12; и

(3) полипептид, содержащий (1-a) полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в регистрационном номере No. NP_002178.2, (1-b) полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, в которой от 1 до 10 аминокислот удаляют, замещают, вводят в и/или добавляют в аминокислотную последовательность, приведенную в регистрационном номере No. NP_002178.2, или (1-c) полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую 90% или более идентичности с аминокислотной последовательностью, приведенной в регистрационном номере No. NP_002178.2, и

(2-a) полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, приведенной в регистрационном номере No. NP_000873.2, и

обладающие функцией человеческого IL-12.

В связи с этим термин «функция человеческого IL-12» относится к активирующему и/или дифференцирующему действию на Т-лимфоциты или NK-клетки. p40 субъединица IL-12 и α субъединица IL-12 могут образовывать IL-12 путем прямого связывания. Кроме того, p40 субъединица IL-12 и α субъединица IL-12 могут быть конъюгированы через линкер.

[0048] Человеческий IL-12, используемый в настоящем изобретении, предпочтительно представляет собой полипептид, содержащий полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, приведенной в регистрационном номере No. NP_002178.2, и полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, приведенной в регистрационном номере No. NP_000873.2.

[0049] Используемый здесь термин «идентичность» означает значение идентичности, полученное поиском, с использованием программы NEEDLE (Journal of Molecular Biology, 1970, vol. 48, p. 443-453) с параметрами по умолчанию. Эти параметры были следующими.

Штраф за пропуск в последовательности = 10

Штраф за продолжение пропуска = 0,5

Матрица = EBLOSUM62

[0050] Вирус осповакцины согласно настоящему изобретению, вирус осповакцины для применения в комбинации, или вирусы осповакцины для комбинированного набора, обладает (обладают) онколитической активностью. Примеры способов оценки того, обладает ли проверяемый вирус онколитической активностью, включают способ оценки снижения выживаемости раковых клеток при добавлении вируса. Примеры раковых клеток, которые могут быть использованы для такой оценки, включают клетки злокачественной меланомы RPMI-7951 (например, ATCC HTB-66), клетки аденокарциномы легкого HCC4006 (например, ATCC CRL-2871), клетки карциномы легкого A549 (например, ATCC CCL-185), клетки мелкоклеточного рака легкого DMS 53 (например, ATCC CRL-2062), клетки плоскоклеточной карциномы легкого NCI-H226 (например, ATCC CRL-5826), клетки рака почки Caki-1 (например, ATCC HTB-46), клетки рака мочевого пузыря 647-V (например, DSMZ ACC 414), клетки рак головы и шеи Detroit 562 (например, ATCC CCL-138), клетки рака молочной железы JIMT-1 (например, DSMZ ACC 589), клетка рака молочной железы MDA-MB-231 (например, ATCC HTB- 26), клетки рака пищевода OE33 (например, ECACC 96070808), клетки глиобластомы U-87MG (например, ECACC 89081402), клетки нейробластомы GOTO (например, JCRB JCRB0612), клетки миеломы RPMI 8226 (например, ATCC CCL-155), клетки рака яичника SK-OV-3 (например, ATCC HTB-77), клетки рака яичника OVMANA (например, JCRB JCRB1045), клетки рака толстой кишки RKO (например, ATCC CRL-2577), клетки колоректальной карциномы HCT 116 (например, ATCC CCL-247), клетки рак поджелудочной железы BxPC-3 (например, ATCC CRL-1687), клон FGC клеток LNCaP рака предстательной железы (например, ATCC CRL-1740), клетки гепатоцеллюлярной карциномы JHH-4 (например, JCRB JCRB0435), клетки мезотелиомы NCI-H28 (например, ATCC CRL-5820), клетки рака шейки матки SiHa (например, ATCC HTB-35) и клетки рака желудка Kato III (например, RIKEN BRC RCB2088). Конкретные примеры способов оценки, которые могут быть использованы, включают способ, описанный ниже в Примере 3.

[0051] Вирус осповакцины согласно настоящему изобретению, вирус осповакцины для применения в комбинации или вирусы осповакцины для комбинированного набора продуцирует(ют) полипептид(ы) IL-7 и/или IL-12. Применение вируса осповакцины согласно настоящему изобретению, вируса осповакцины для применения в комбинации или вирусов осповакцины для комбинированного набора заметно увеличивает противоопухолевый эффект путем продуцирования полипептидов IL-7 и IL-12. Продуцирование IL-7 и IL-12 может быть подтверждено с использованием метода, известного в данной области техники, например, после культивирования с раковыми клетками вируса осповакцины, в который вводят полинуклеотиды, кодирующие полипептиды IL-7 и IL-12, с последующим измерением концентрации IL-7 и IL-12 в культуральном супернатанте, путем иммуноокрашивания клеток, путем проведения Вестерн блот анализа клеточного лизата или путем измерения концентраций IL-7 и IL-12 в клеточном лизате. Концентрации IL-7 и IL-12 могут быть измерены, например, с помощью набора реагентов для ИФА анализа IL-7 человека (RayBiotech, Inc.) и набора реагентов для ИФА анализа IL-12 человека p70 DuoSet (R&D Systems, Inc.), соответственно. Конкретные примеры способов оценки концентраций полипептидов в культуральном супернатанте или клеточном лизате, которые могут быть использованы, включают способ, описанный ниже в Примере 4. Иммуноокрашивание клеток или Вестерн блот анализ клеточного лизата можно проводить с использованием коммерчески доступных антител против IL-7 и IL-12.

[0052] Полинуклеотиды, кодирующие IL-7 и IL-12, могут быть синтезированы на основе общедоступной информации о последовательности с использованием метода синтеза полинуклеотидов, известного в данной области техники. Кроме того, после получения полинуклеотидов модифицированные формы, обладающие функцией каждого полипептида, могут быть получены путем введения мутации в заданный сайт при помощи способа, известного специалистам в данной области техники, такого как сайт-направленный мутагенез (Current Protocols in Molecular Biology edition, 1987, John Wiley & Sons Sections 8.1-8.5).

[0053] Полинуклеотиды, каждый из которых кодирует IL-7 и IL-12, могут быть введены в вирус осповакцины при помощи известной методики, такой как гомологичная рекомбинация или сайт-направленный мутагенез. Например, плазмида (также именуемая как плазмидная ДНК вектора переноса), в которую полинуклеотид(ы) вводят в нуклеотидную последовательность в желаемом для введения сайте, может быть получена и введена в клетки, инфицированные вирусом осповакцины. Область, в которую вводят полинуклеотиды, каждый из которых кодирует IL-7 и IL-12, чужеродные гены, предпочтительно представляет собой область генома, которая является несущественной для жизненного цикла вируса осповакцины. Например, в определенном аспекте область, в которую вводят IL-7 и/или IL-12, может быть областью внутри гена VGF в вирусе осповакцины, дефицитном по функции VGF, областью внутри гена O1L в вирусе вакцины осповакцины, дефицитном по функции O1, или областью или областями внутри одного или обоих генов VGF и O1L в вирусе осповакцины, дефицитном как по функции VGF, так и по функции O1. Вышеуказанный чужеродный ген(ы) может быть введен таким образом, чтобы он транскрибировался в том же или в противоположном направлении, что и гены VGF и O1L.

[0054] Способы введения плазмидной ДНК вектора переноса в клетки специально не ограничиваются, но примеры способов, которые могут быть использованы, включают способ с применением фосфата кальция и электропорацию.

[0055] При введении полинуклеотидов, каждый из которых кодирует IL-7 и IL-12, которые являются чужеродными генами, подходящий промотор(ы) может быть функционально связан с 5'-концом чужеродного гена (генов). Таким образом, чужеродный ген(ы) в вирусе осповакцины согласно настоящему изобретению, вирусе осповакцины для применения в комбинации или вирусах осповакцины для комбинированного набора может быть связан с промотором, который может способствовать экспрессии в опухолевых клетках. Примеры такого промотора включают PSFJ1-10, PSFJ2-16, промотор p7,5K, промотор p11K, промотор T7.10, промотор CPX, промотор HF, промотор H6 и гибридный промотор T7.

[0056] В одном варианте осуществления изобретения вирус осповакцины согласно настоящему изобретению, вирус осповакцины для применения в комбинации или вирусы осповакцины для комбинированного набора не имеет (не имеют) маркерного гена для отбора по чувствительности к лекарственному препарату.

[0057] Вирус осповакцины согласно настоящему изобретению, вирус осповакцины для применения в комбинации или вирусы осповакцины для комбинированного набора может быть экспрессирован и/или размножен путем инфицирования клеток-хозяев вирусом осповакцины и культивирования инфицированных клеток-хозяев. Вирус осповакцины может быть экспрессирован и/или размножен известным в данной области техники способом. Клетки-хозяева, которые могут быть использованы для экспрессии или размножения вируса осповакцины согласно настоящему изобретению, вируса осповакцины для применения в комбинации или вирусов осповакцины для комбинированного набора специальным образом не ограничиваются, при условии, что вирус осповакцины согласно настоящему изобретению, вирус осповакцины для применения в комбинации, или вирусы осповакцины для комбинированного набора могут быть экспрессированы и размножены. Примеры таких клеток-хозяев включают животные клетки, такие как BS-C-1, A549, RK13, HTK-143, Hep-2, MDCK, Vero, HeLa, CV-1, COS, BHK-21 и первичные клетки почек кролика. Предпочтительными для использования являются клетки BS-C-1 (ATCC CCL-26), A549 (ATCC CCL-185), CV-1 (ATCC CCL-70) или RK13 (ATCC CCL-37). Условия культивирования клеток-хозяев, например, температура, рН среды и время культивирования, выбираются в зависимости от конкретного типа клеток.

[0058] Способы получения вируса осповакцины согласно настоящему изобретению, вируса осповакцины для применения в комбинации или вирусов осповакцины для комбинированного набора могут включать стадии: инфицирования клеток-хозяев вирусом осповакцины согласно настоящему изобретению, вирусом осповакцины для применения в комбинации или вирусом осповакцины для комбинированного набора; культивирования инфицированных клеток-хозяев; и экспрессии вируса осповакцины согласно настоящему изобретению, вируса осповакцины для применения в комбинации или вирусов осповакцины для комбинированного набора; и при необходимости сбор и предпочтительно очистку вируса осповакцины согласно настоящему изобретению, вируса осповакцины для применения в комбинации или вирусов осповакцины для комбинированного набора. Способы, которые могут быть использованы для очистки, включают обработку ДНК бензоназой, центрифугирование в градиенте сахарозы, центрифугирование в градиенте плотности иодиксанола, ультрафильтрацию и диафильтрацию.

[0059]

Фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению

Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению включают фармацевтическую композицию, содержащую вирус осповакцины согласно настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый эксципиент. Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению также включают фармацевтическую композицию для применения в комбинации в соответствии с настоящим изобретением. В одном варианте осуществления изобретения фармацевтическая композиция для применения в комбинации в соответствии с настоящим изобретением содержит фармацевтически приемлемый эксципиент.

[0060] Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению могут быть получены способом, обычно используемым в данной области техники, с использованием вспомогательного вещества, обычно используемого в данной области техники, то есть, фармацевтического эксципиента, фармацевтического носителя или тому подобного. Примеры лекарственной формы таких фармацевтических композиций включают парентеральные составы, такие как инъекции и инфузии, которые могут быть введены путем внутривенного введения, подкожного введения, внутриопухолевого введения или тому подобного. В составе могут использоваться эксципиенты, носители или добавки, подходящие для этой лекарственной формы, при условии, что они являются фармацевтически приемлемыми.

[0061] Эффективная доза варьирует в зависимости от тяжести симптома или возраста пациента, лекарственной формы используемого состава или титра вируса, но, например, приблизительно 10²-10¹⁰ бляшкообразующих единиц (БОЕ) может использоваться в качестве эффективной дозы одного вируса, в качестве комбинированной эффективной дозы 2 вирусов в комбинированном наборе или в виде комбинированной эффективной дозы двух вирусов, вводимых в комбинации. Два вируса в комбинированном наборе могут использоваться, например, в дозе приблизительно от 1:10 до 10:1, приблизительно от 1:5 до 5:1, приблизительно от 1:3 до 3:1, приблизительно от 1:2 до 2:1 или примерно 1:1.

[0062]

Применение для профилактики или лечения рака

Фармацевтические композиции в соответствии с настоящим изобретением могут быть использованы в качестве профилактического или терапевтического средства для лечения рака, например, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, аденокарциномы легкого, рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточной карциномы легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичников, колоректального рака, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка.

[0063] Настоящее изобретение включает фармацевтическую композицию для профилактики или лечения рака, например, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, аденокарциномы легкого, рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточной карциномы легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичников, колоректального рака, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка, композицию, содержащую вирус осповакцины согласно настоящему изобретению или вирус осповакцины для применения в комбинации.

[0064] Настоящее изобретение включает комбинированный набор для профилактики или лечения рака, например, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, аденокарциномы легкого, рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточной карциномы легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичников, колоректального рака, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка, комбинированный набор, включающий каждый из вирус осповакцины для комбинированного набора.

[0065] Кроме того, настоящее изобретение включает способ профилактики или лечения рака, например, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, аденокарциномы легкого, рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточной карциномы легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичников, колоректального рака, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка, включающий стадию введения вируса осповакцины согласно настоящему изобретению лицу (например, пациенту), нуждающемуся в профилактике или лечении рака.

[0066] Кроме того, настоящее изобретение включает способ профилактики или лечения рака, например, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, аденокарциномы легкого, рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточной карциномы легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичников, колоректального рака, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка, включающий стадию введения следующего вируса осповакцины (1) и (2) лицу (например, пациенту), нуждающемуся в профилактике или лечении рака:

(1) вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7; и

(2) вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12.

Эти два вируса осповакцины могут вводиться пациенту одновременно, отдельно, непрерывно или с интервалами.

[0067] Кроме того, настоящее изобретение включает вирус осповакцины согласно настоящему изобретению для профилактики или лечения рака, например, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, аденокарциномы легкого, рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточной карциномы легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичников, колоректального рака, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка.

[0068] Настоящее изобретение включает вирус осповакцины, выбранный из следующих вирусов осповакцины (1) или (2), для профилактики или лечения рака, например, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, аденокарциномы легкого, рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточной карциномы легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичников, колоректального рака, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка:

[0069] Кроме того, настоящее изобретение включает применение вируса осповакцины согласно настоящему изобретению для получения фармацевтической композиции для профилактики или лечения рака, например, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, аденокарциномы легкого, рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточной карциномы легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичников, колоректального рака, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка.

[0070] Настоящее изобретение включает применение вируса осповакцины, выбранное из следующих применений (1) или (2), для получения фармацевтической композиции для профилактики или лечения рака, например, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, аденокарциномы легкого, рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточной карциномы легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичников, колоректального рака, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка:

(1) применение вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-7, для изготовления фармацевтической композиции для профилактики или лечения рака, для применения в комбинации с фармацевтической композицией, содержащей вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-12; или

(2) применение вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-12, для изготовления фармацевтической композиции для профилактики или лечения рака, для применения в комбинации с фармацевтической композицией, содержащей вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий IL-7.

[0071] Кроме того, настоящее изобретение включает применение вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-7, и вируса осповакцины, содержащего полинуклеотид, кодирующий IL-12, для получения комбинированного набора для профилактики или лечения рака, например, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, аденокарциномы легкого, рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточной карциномы легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичников, колоректального рака, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка.

[0072] Используемый здесь термин «для профилактики» является синонимом термина «для применения для профилактики», и термин «для лечения» является синонимом термина «для применения для лечения».

[0073] Фармацевтические композиции или комбинированный набор согласно настоящему изобретению могут использоваться в комбинации с различными терапевтическими агентами, обладающими эффективностью в отношении рака, например, рака, выбранного из группы, состоящей из злокачественной меланомы, аденокарциномы легкого, рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, плоскоклеточной карциномы легкого, рака почки, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака пищевода, глиобластомы, нейробластомы, миеломы, рака яичников, колоректального рака, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, гепатоцеллюлярной карциномы, мезотелиомы, рака шейки матки и рака желудка. Комбинированное применение может быть осуществлено путем одновременного введения или раздельного введения непрерывно или с необходимым интервалом. При одновременном введении фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению можно вводить в виде комбинированного препарата или в виде композиций, приготовленных отдельно.

[0074] Виды рака, при которых могут быть использованы вирус осповакцины согласно настоящему изобретению, фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению, комбинированный набор согласно настоящему изобретению, способ профилактики или лечения рака согласно настоящему изобретению или применение согласно настоящему изобретению, включают виды рака, помимо первичного поражения метастазирующие в орган, например лимфатический узел, печень или тому подобное.

[0075] Настоящее изобретение было описано в общем виде, но ниже для ссылки приведены конкретные примеры для более полного понимания настоящего изобретения. Эти примеры предназначены для иллюстрации, но не для ограничения настоящего изобретения.

Примеры

[0076] Эксперименты с коммерчески доступным набором реагентов или реагентом проводились в соответствии с прилагаемыми протоколами, если не указано иное.

[0077]

Пример 1: Конструирование плазмидной ДНК вектора переноса

Плазмидные ДНК вектора переноса для применения для получения рекомбинантных вирусов осповакцины путем гомологичной рекомбинации, получали следующим образом.

[0078]

(1) Конструирование плазмидной ДНК вектора переноса pTN-VGF-P-DsRed

Вектор pUC19-VGF получали, как описано в Международной патентной заявке WO 2015/076422. В частности, геномную ДНК штамма LC16mO (Регистрационный номер No.AY678277.1) использовали в качестве матрицы, и вектор pUC19 от Invitrogen (код продукта: 54357) использовали для получения вектора pUC19-VGF. Полученный вектор pUC19-VGF расщепляли ферментом рестрикции AccI, а затем «затупляли» концы. Плазмидную ДНК вектора переноса получали путем вставки фрагмента ДНК (SEQ ID NO: 22), содержащего промотор p7,5k и фрагмент DsRed в этот сайт расщепления. Полученная плазмидная ДНК была названа pTN-VGF-P-DsRed.

(2) Конструирование плазмидной ДНК векторов переноса pTN-VGF-SP-IL12 и pTN-VGF-SP-IL7

Область гена BFP амплифицировали с помощью двух праймеров (SEQ ID NO: 1 и SEQ ID NO: 2) с использованием ДНК вектора pTagBFP-N (FP172, Evrogen) в качестве матрицы. ПЦР продукт расщепляли ферментами рестрикции SfiI и EcoRI и клонировали в те же сайты ферментов рестрикции в векторе pTK-SP-LG (WO 2015/076422 с условием, что геномную ДНК (Регистрационный номер No.AY678277.1) штамма LC16mO использовали в качестве матрицы и использовали вектор pUC19 от Invitrogen (код продукта: 54357, а для плазмиды pVNC110-Luc/IRES/ EGFP использовали pVNC110-Luc/IRES/EGFP, описанный в WO2011/125469), для получения конструкции pTK-SP-BFP, в которой ген BFP связан с синтетическим промотором вируса осповакцины (Journal of Virological Methods, 1997, vol. 66, p. 135-138). Затем pTK-SP-BFP расщепляли ферментами рестрикции SphI и EcoRI и «затупляли» концы. Полученный фрагмент ДНК клонировали в вектор pUC19-VGF в сайт, получаемый путем расщепления плазмиды ферментом рестрикции AccI и «затупления» концов для конструирования pTN-VGF-SP-BFP (Фиг.1). Затем полинуклеотид, кодирующий человеческий IL-12 (полинуклеотид, содержащий субъединицу p40 IL-12 человека, внутренний сайт связывания рибосомы и субъединицу α IL-12 человека, SEQ ID NO: 7) и полинуклеотид (SEQ ID NO: 8), кодирующий человеческий IL-7 (каждый полинуклеотид содержит сайт фермента рестрикции accggtcgccacc (SEQ ID NO: 16) на 5'-конце и сайт фермента рестрикции gctagcgaattc (SEQ ID NO: 17) на 3'-конце) расщепляли ферментами рестрикции AgeI и NheI. Каждый из полинуклеотидных фрагментов клонировали в тот же сайт фермента рестрикции в pTN-VGF-SP-BFP для конструирования плазмидной ДНК вектора переноса. Сконструированные плазмидные ДНК получили названия pTN-VGF-SP-IL12 и pTN-VGF-SP-IL7, соответственно.

(3) Конструирование плазмидной ДНК векторов переноса pTN-O1L-SP-BFP, pTN-O1L-SP-LacZ, pTN-O1L-SP-IL12 и pTN-O1L-SP-IL7

Аналогично тому, как описано выше в пункте (2), pTK-SP-BFP расщепляли ферментами рестрикции SphI и EcoRI, и фрагмент ДНК, полученный путем «затупления» концов, клонировали в вектор pUC19-O1L (WO 2015/076422 с условием, что, как и при получении вектора pUC19-VGF, геномную ДНК (Регистрационный номер No.AY678277.1) штамма LC16mO использовали в качестве матрицы и использовали вектор pUC19 от Invitrogen (код продукта: 54357); а область гена O1L встраивали в сайт XbaI в векторе pUC19.) в сайт, получаемый путем расщепления плазмиды ферментом рестрикции XbaI и «затупления» концов, для конструирования плазмидной ДНК вектора переноса (Фиг.1). Полученная плазмидная ДНК была названа называли pTN-O1L-SP-BFP. Затем полинуклеотид (SEQ ID NO: 9), содержащий ген LacZ Escherichia coli с оптимизированными для человека кодонами, полинуклеотид (SEQ ID NO: 7), кодирующий человеческий IL-12, и полинуклеотид (SEQ ID NO: 8), кодирующий человеческий IL-7 расщепляли ферментами рестрикции AgeI и NheI. Каждый из полинуклеотидных фрагментов, кодирующих LacZ, IL-12 или IL-7, клонировали в те же сайты фермента рестрикции (сайты AgeI и NheI) в векторе pTN-O1L-SP-BFP для конструирования плазмидной ДНК векторов переноса. Сконструированные плазмидные ДНК были названы pTN-O1L-SP-LacZ, pTN-O1L-SP-IL12 и pTN-O1L-SP-IL7, соответственно.

[0079]

(4) Конструирование плазмидной ДНК векторов переноса pTN-DsRed (B5R-) и pTN-B5RΔ1-4

Область гена B4R амплифицировали с помощью двух праймеров (SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4) с использованием ДНК pB5R (WO 2011/125469, при условии, что геномную ДНК (Регистрационный номер No.AY678277.1) штамма LC16mO использовали в качестве матрицы) в качестве матрицы. Кроме того, область гена DsRed амплифицировали с помощью двух праймеров (SEQ ID NO: 5 и SEQ ID NO: 6) с использованием ДНК pDsRed-Express-N1 (Clontech Laboratories, Inc.) в качестве матрицы. Первый ПЦР продукт расщепляли ферментами рестрикции NotI и FspI, а второй ПЦР продукт расщепляли ферментами рестрикции FspI и MfeI. Эти два фрагмента ДНК клонировали в pB5R, расщепленный ферментами рестрикции NotI и MfeI, чтобы получить плазмидную ДНК вектора переноса. Полученную плазмидную ДНК назвали pTN-DsRed (B5R-). При этом, pB5R расщепляли рестрикционными ферментами NotI и NspI или ферментами рестрикции NspI и SacI. Эти два фрагмента ДНК клонировали в pB5R, расщепленный ферментами рестрикции NotI и SacI, получить плазмидную ДНК вектора переноса. Полученную плазмидную ДНК назвали pTN-B5RΔ1-4. pTN-B5RΔ1-4 кодирует белок B5R с делецией четырех доменов SCR. Их аминокислотная последовательность представляет собой последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18.

[0080]

Пример 2: Конструирование генно-инженерного вируса осповакцины

[0081] Рекомбинантный вирус осповакцины (называемый LC16mO VGF-SP-LucGFP/O1L-p7.5-DsRed), дефицитный по функциями VGF и O1L, получали из штамма LC16mO вируса осповакцины. Этот рекомбинантный вирус осповакцины был сиквенирован на секвенаторе следующего поколения PacBio RSII (Pacific Biosciences of California, Inc.), и вирусный геном был восстановлен из полученной информации о последовательности с использованием программного обеспечения Sprai [BMC GENOMICS. 2014 AUG 21, 15: 699.] для определения нуклеотидной последовательности, которая представляет собой нуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21. Кроме того, петлевые последовательности были добавлены к обоим концам нуклеотидной последовательности и петлевые последовательности на обоих концах представляли собой нуклеотидные последовательности, приведенные в SEQ ID NO: 19 или 20.

[0082]

(1) Собирали рекомбинантные вирусы осповакцины, имеющие вирусный геном, показанный на Фиг. 2. Процедура сбора вируса подробна описана ниже. Клетки CV1 (ATCC CCL-70) или клетки RK13 (ATCC CCL-37), культивированные до 80% конфлюэнтности в 6-луночных чашках, инфицировали LC16mO VGF-SP-LucGFP/O1L-p7.5-DsRed при множественности заражения (МЗ)=0,02-0,1, и оставляли вирус адсорбироваться при комнатной температуре в течение 1 часа. pTN-O1L-SP-BFP, сконструированный в Примере 1 (3), смешивали с реагентом для трансфекции FuGENE® HD (Roche), добавляли к клеткам в соответствии с руководством для включения в клетки и клетки культивировали в атмосфере 5% СО₂ и при температуре 37°C в течение 2-5 суток. Клетки замораживали-оттаивали, обрабатывали ультразвуком и разбавляли реагентом Opti-MEM (Invitrogen), чтобы получить отдельные бляшки с помощью следующей операции. 100 мкл полученной разбавленной жидкости добавляли для инокуляции клеток BS-C-1 (ATCC CCL-26) или клеток RK13, культивированных до субконфлюенции в 6-луночных чашках. Добавляли 2 мл среды Игла MEM (NISSUI, 05900), содержащей 0,8% метилцеллюлозы (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 136-02155), 5% фетальной бычьей сыворотки, 0,225% бикарбоната натрия (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 195-16411) и добавку GlutaMAX (TM) I (GIBCO, 35050-061), и культивировали клетки в атмосфере 5% СО₂ и при температуре 37°C в течение 2-5 суток. Среду удаляли, и бляшки, определенные по экспрессии BFP, счищали кончиком наконечника и суспендировали в Opti-MEM. Эту операцию повторяли три раза или более с клетками BS-C-1 или RK13 для очистки бляшек и сбора вирусных бляшек (В этом примере описываемая до этого момента процедура в дальнейшем называется «сбор»). Бляшки суспендировали в Opti-MEM и обрабатывали ультразвуком. Геномную ДНК выделяли из 200 мкл обработанного ультразвуком раствора с использованием набора Pure Viral Nucleic Acid Kit (Roche) в соответствии с руководством и скринировали с помощью ПЦР. ПЦР проводили для VGF с двумя праймерами (SEQ ID NO: 10 и SEQ ID NO: 11) для O1L с двумя праймерами (SEQ ID NO: 12 и SEQ ID NO: 13) и для B5R с двумя праймерами (SEQ ID NO: 14 и SEQ ID NO: 15). Среди клонов отбирали те, у которых был обнаружен ожидаемый размер продукта ПЦР, клон вируса, для которого правильная нуклеотидная последовательность продукта ПЦР была подтверждена прямым секвенированием (называемый LC16mO VGF-SP-LucGFP/O1L-SP-BFP. Фиг.2) отбирали и размножали с помощью клеток A549 (ATCC CCL-185) или клеток RK13, а затем титр вируса измеряли клетками RK13. Используя LC16mO VGF-SP-LucGFP/O1L-SP-BFP и pTN-DsRed (B5R-), полученные в Примере 1 (4), рекомбинантный вирус, определенный по экспрессии DsRed вместо экспрессии BFP, собирали способом как описано выше. Этот вирус получил название LC16mO Δ-DsRed VGF-SP-LucGFP/O1L-SP-BFP (Фиг. 2).

[0083]

(2) Собирали рекомбинантный вирус, содержащий делецию 4 доменов SCR в белке B5R. В частности, используя LC16mO Δ-DsRed VGF-SP-LucGFP/O1L-SP-BFP, полученный в Примере 2 (1) и pTN-B5R1-1-4, сконструированный в Примере 1 (4), рекомбинантный вирус, определенный по отсутствию экспрессии DsRed вместо экспрессии BFP, собирали таким же образом, как в Примере 2 (1). Этот вирус получил название LC16mO ΔSCR VGF-SP-LucGFP/O1L-SP-BFP (Фиг. 2). Кроме того, используя полученные LC16mO ΔSCR VGF-SP-LucGFP/O1L-SP-BFP и pTN-VGF-P-DsRed, сконструированные в Примере 1 (1), рекомбинантный вирус, определенный по экспрессии DsRed вместо экспрессии BFP, собирали таким же способом, как в Примере 2 (1). Этот вирус получил название LC16mO ΔSCR VGF-p7.5-DsRed/O1L-SP-BFP (Фиг. 2). Затем, используя полученные LC16mO ΔSCR VGF-p7.5-DsRed/O1L-SP-BFP и pTN-O1L-SP-LacZ, сконструированные в Примере 1 (3), рекомбинантный вирус, определенный по отсутствию экспрессии BFP вместо экспрессии BFP, собирали таким же образом, как в Примере 2 (1). Этот вирус получил название LC16mO ΔSCR VGF-p7.5-DsRed/O1L-SP-LacZ (Фиг. 2).

[0084]

(3) Собирали рекомбинантные вирусы осповакцины с делецией области SCR, имеющие вирусный геном, показанный на Фиг. 3, и экспрессирующие терапевтический ген и маркерный ген. В частности, используя каждую из конструкций LC16mO ΔSCR VGF-p7.5-DsRed/O1L-SP-LacZ, полученную в Примере 2 (2), и плазмидную ДНК векторов переноса (pTN-VGF-SP-IL12 и pTN-VGF-SP-IL7), сконструированные в Примере 1 (2), каждый из рекомбинантных вирусов, определенный по отсутствию экспрессии DsRed вместо экспрессии BFP, собирали таким же образом, как в Примере 2 (1). Эти вирусы получили название LC16mO ΔSCR VGF-SP-IL12/O1L-SP-LacZ (далее именуемый «вирус осповакцины, несущий hIL12») и LC16mO ΔSCR VGF-SP-IL7/O1L-SP-LacZ (далее именуемый «вирус осповакцины, несущий hIL7».) (Фиг. 3). Для очистки клетки A549 или RK13 инфицировали каждым из рекомбинантных вирусов. Клетки культивировали в атмосфере 5% СО₂ и при температуре 37°C в течение 2-5 суток, а затем собирали инфицированные клетки. Клетки замораживали-оттаивали и обрабатывали ультразвуком. Вирусы очищали центрифугированием в градиенте плотности с использованием OptiPrep (Axis-Shield Diagnostics Ltd.). Титр каждого вируса измеряли с использованием клеток RK13.

[0085]

(4) Собирали рекомбинантный вирус осповакцины с делецией домена SCR, имеющий вирусный геном, показанный на Фиг. 4, и экспрессирующий полинуклеотид, кодирующий человеческий IL-7, и полинуклеотид, кодирующий человеческий IL-12.

(4-1) В частности, используя LC16mO ΔSCR VGF-p7.5-DsRed/O1L-SP-BFP, полученный в Примере 2 (2), и плазмидную ДНК вектора переноса pTN-VGF-SP-IL12, сконструированную в Примере 1 (2), каждый из рекомбинантных вирусов, определенный по отсутствию экспрессии DsRed вместо экспрессии BFP, собирали таким же образом, как в Примере 2 (1). Это вирус получил название LC16mO ΔSCR VGF-SP-IL12/O1L-SP-BFP.

[0086]

(4-2) Затем, используя LC16mO ΔSCR VGF-SP-IL12/O1L-SP-BFP, полученный в Примере 2 (4-1), и плазмидную ДНК вектора переноса pTN-O1L-SP-IL7, сконструированную в Примере 1 (3), каждый из рекомбинантных вирусов, определенный по отсутствию экспрессии BFP вместо экспрессии BFP, собирали таким же образом, как в Примере 2 (1). Этот вирус получил название LC16mO ΔSCR VGF-SP-IL12/O1L-SP-IL7 (далее в Примерах ниже этот вирус также называется «вирус осповакцины, несущий hIL12 и hIL7) (Фиг. 4). Каждый рекомбинантный вирус очищали способом, описанным в Примере 2 (3), и затем титр каждого вируса измеряли с использованием клеток RK13.

[0087]

Пример 3: Онколитические свойства генно-инженерного вируса осповакцины

Оценивали способность вируса осповакцины, несущего hIL12 и hIL7, полученного в Примере 2, лизировать различные раковые клетки человека (способность уничтожать клетки). Кроме того, аналогичным образом оценивали способность комбинированной смеси двух вирусов, вируса осповакцины, несущего hIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7, полученных в Примере 2 лизировать различные раковые клетки человека.

[0088] В частности, 100 мкл каждых клеток, суспендированных в концентрации 1×10⁴ клеток/мл в среде (среда, описанная ниже, содержащая 10% фетальной бычьей сыворотки (GE Healthcare) и 1% пенициллин-стрептомицина (Life Technologies), первыми добавляли 96-луночные планшеты (AGC TECHNO GLASS CO., LTD.). После культивирования в течение ночи 1) вирусы осповакцины, несущие hIL12 и hIL7, и 2) смесь, объединяющую вирус осповакцины, несущий hIL12, и вирус осповакцины, несущий hIL7, в соотношении концентраций 1:1 (в дальнейшем именуемую «смесь вируса осповакцины, несущего hIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7) разбавляли Opti-MEM (Life Technologies) до концентрации 5×10⁴ БОЕ/мл, 5×10⁵ БОЕ/мл и 5×10⁶ БОЕ/мл соответственно. По 20 мкл каждого из вирусных растворов добавляли в каждую лунку для инфицирования клеток при МЗ=1,0, 10 или 100. В качестве контроля использовали лунки без клеток и лунок, в которые вместо вируса добавляли Opti-MEM (МЗ=0). Затем клетки культивировали в течение 5 суток в CO₂ инкубаторе с концентрацией CO₂ 5% и при температуре 37°C. Выживаемость клеток на 5-е сутки измеряли с при помощи набора для люминесцентного анализа жизнеспособности клеток CellTiter-Glo (Promega KK.). В частности, в соответствии с протоколом набора для анализа в каждую лунку добавляли 100 мкл каждого реагента CellTiter-Glo и оставляли на 30 минут, затем общее количество переносили в 96-луночные черные планшеты (Corning Incorporated) и измеряли силу люминесценции в каждой лунке при помощи прибора EnSpire (PerkinElmer Inc.). Для расчета выживаемости клеток в каждой лунке значение лунок, в которых не было посеянных клеток, определяли как выживаемость 0%, а значение лунок, в которых были высеяны клетки без добавления вируса, определяли как выживаемость 100%.

[0089] Клетки, в отношении которых оценивали действие полученных рекомбинантных вирусов, представляли собой клетки злокачественной меланомы RPMI-7951 (ATCC HTB-66), клетки аденокарциномы легкого HCC4006 (ATCC CRL-2871), клетки карциномы легкого A549 (ATCC CCL-185), клетки мелкоклеточного рака легкого DMS 53 (например, ATCC CRL-2062), клетки плоскоклеточной карциномы легкого NCI-H226 (например, ATCC CRL-5826), клетки рака почки Caki-1 (например, ATCC HTB-46), клетки рака мочевого пузыря 647-V (например, DSMZ ACC 414), клетки рак головы и шеи Detroit 562 (например, ATCC CCL-138), клетки рака молочной железы JIMT-1 (например, DSMZ ACC 589), клетка рака молочной железы MDA-MB-231 (например, ATCC HTB- 26), клетки рака пищевода OE33 (например, ECACC 96070808), клетки глиобластомы U-87MG (например, ECACC 89081402), клетки нейробластомы GOTO (например, JCRB JCRB0612), клетки миеломы RPMI 8226 (например, ATCC CCL -155), клетки рака яичника SK-OV-3 (например, ATCC HTB-77), клетки рака яичника OVMANA (например, JCRB JCRB1045), клетки рака толстой кишки RKO (например, ATCC CRL-2577), клетки колоректальной карциномы HCT 116 (например, ATCC CCL-247), клетки рак поджелудочной железы BxPC-3 (например, ATCC CRL-1687), клон FGC клеток LNCaP рака предстательной железы (например, ATCC CRL-1740), клетки гепатоцеллюлярной карциномы JHH-4 (например, JCRB JCRB0435), клетки мезотелиомы NCI-H28 (например, ATCC CRL-5820), клетки рака шейки матки SiHa (например, ATCC HTB-35) и клетки рака желудка Kato III (например, RIKEN BRC RCB2088).

[0090] В качестве среды использовали среду RPMI1640 (Sigma-Aldrich Co. LLC., R8758) для RPMI-7951, HCC4006, DMS 53, NCI-H226, Caki-1, 647-V, Detroit 562, JIMT-1, OE33, U- 87MG, GOTO, RPMI8226, SK-OV-3, OVMANA, RKO, HCT 116, BxPC-3, LNCaP FGC, JHH-4, NCI-H28 и Kato III, среду DMEM (Sigma-Aldrich Co. LLC., D6429) для A549 и MDA-MB-231 и среду EMEM (ATCC 30-2003) для SiHa. Результаты показаны на Фиг. 5-1 - Фиг. 5-4. В связи с этим действие вируса осповакцины, несущего hIL12 и hIL7, показано отдельно на Фиг. 5-1 и Фиг. 5-2, и действие смеси вируса осповакцины, несущего hIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7, показано отдельно на Фиг. 5-3 и Фиг. 5-4.

[0091] В результате было показано, что вирус осповакцины, несущий hIL12 и hIL7, обладает способностью уничтожать клетки всех исследованных линий раковых клеток человека (Фиг. 5-1 и Фиг. 5-2). Кроме того, также было показано, что смесь вируса осповакцины, несущего hIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7, обладает способностью уничтожать клетки всех исследованных линий раковых клеток человека (Фиг. 5-3 и Фиг. 5-4). На Фиг. 5-1 - Фиг. 5-4 показаны онколитические свойства при МЗ=0, 1, 10 и 100 слева направо в этом порядке для каждой клеточной линии.

[0092]

Пример 4: Синтез белка раковыми клетками, инфицированными генно-инженерным вирусом осповакцины

Когда раковые клетки были инфицированы вирусом осповакцины, несущим hIL12 и hIL7, то измеряли концентрации белка IL-7 человека и белка IL-12 человека, продуцируемого раковыми клетками. Кроме того, аналогичным образом измеряли концентрации белка IL-7 человека и белка IL-12 человека, продуцируемого раковыми клетками, когда раковые клетки были инфицированы смесью вируса осповакцины, несущего hIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7.

[0093] Измерение белка IL-7 человека проводили следующим образом. В частности, сначала 100 мкл клеток рака яичника SK-OV-3, суспендированных в концентрации 1×10⁴ клеток/мл в среде RPMI1640, содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки, и 1% пенициллин-стрептомицина высевали в 96-луночные планшеты. После культивирования в течение ночи 1) вирус осповакцины, несущий hIL12 и hIL7, или 2) смесь, вируса осповакцины, несущего hIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7, готовили в Opti-MEM, и 20 мкл каждого добавляли для инфицирования клеток при МЗ=1,0. Затем клетки культивировали в течение 24 часов в CO₂ инкубаторе с концентрацией CO₂ 5% при температуре 37°C и собирали культуральный супернатант. Концентрацию белка, содержащегося в культуральном супернатанте, измеряли с помощью ИФА набора, указанного в Таблице 1 и прибора EnSpire.

[0094] Измерение белка IL-12 человека проводили следующим образом. В частности, сначала 100 мкл клеток рака яичника SK-OV-3, суспендированных в концентрации 1×10⁵ клеток/мл в среде RPMI1640, содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки, и 1% пенициллин-стрептомицина высевали в 96-луночные планшеты. После культивирования в течение ночи 1) вирус осповакцины, несущий hIL12 и hIL7, или 2) смесь вируса осповакцины, несущего hIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7, готовили в Opti-MEM, и 20 мкл каждого добавляли для инфицирования клеток при МЗ=1,0. Затем клетки культивировали в течение 48 часов в CO₂ инкубаторе с концентрацией CO₂ 5% при температуре 37°C и собирали культуральный супернатант. Концентрацию белка, содержащегося в культуральном супернатанте, измеряли с помощью ИФА набора, указанного в Таблице 1 и прибора EnSpire.

[0095]

Таблица 1: Набор ИФА, используемый в Примере 4

Таблица 1

БелокНабор ИФАПроизводительIL-7 человекаНабор ИФА для определения IL-7 человекаRayBiotech, Inc.IL-12 человекаНабор ИФА DuoSet для определения p70 IL-12 человекаR&D Systems, Inc.

[0096]

В результате было показано, что белок IL-12 человека и белок IL-7 человека продуцировались клетками, к которым был добавлен вирус осповакцины, несущий hIL12 и hIL7, и клетки, к которым была добавлена смесь вируса осповакцины, несущего hIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7 (Таблицы 2-1 и 2-2).

[0097]

Таблица 2-1: Концентрация белка IL-12 человека в культуральном супернатанте

Таблица 2-1

Генно-инженерный вирус осповакциныБелок IL-12 человека
Концентрация (нг/мл)Вирус осповакцины, несущий hIL12 и hIL731,45Смесь вируса осповакцины, несущего hIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL717,74

[0098]

Таблица 2-2. Концентрация белка IL-7 человека в в культуральном супернатанте

Таблица 2-2

Генно-инженерный вирус осповакциныБелок IL-7 человека
Концентрация (нг/мл)Вирус осповакцины, несущий hIL12 и hIL70,86Смесь вируса осповакцины, несущего hIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL70,60

[0099]

Пример 5: Конструирование плазмидная ДНК вектора переноса, несущей полинуклеотид, кодирующий мышиный IL-12, и конструирование рекомбинантного вируса осповакцины, несущего полинуклеотид, кодирующий мышиный IL-12

(1) Плазмидную ДНК вектора переноса pTN-VGF-SP-mIL12 конструировали способом, описанным в Примере 1 (2). Вместо полинуклеотида (SEQ ID NO: 7), кодирующего IL-12 человека в способе, описанном в Примере 1 (2), использовали полинуклеотид, кодирующий мышиный IL-12 (полинуклеотид, содержащий субъединицу p40 IL-12 мыши, внутренний сайт связывания рибосомы и субъединицу α IL-12. SEQ ID NO: 23), и этот полинуклеотидный фрагмент клонировали в pTN-VGF-SP-BFP.

(2) Плазмидную ДНК вектора переноса pTN-O1L-SP-Luc2 конструировали способом, описанным в Примере 1 (3). Вместо полинуклеотида (SEQ ID NO: 9), содержащего ген LacZ Escherichia coli в способе, описанном в Примере 1 (3), использовали полинуклеотид (100-1752 в Регистрационном номере No.DQ188840), кодирующий ген люциферазы Luc2, и этот полинуклеотид фрагмент клонировали в pTN-O1L-SP-BFP.

[0100]

(3) Рекомбинантный вирус собирали в соответствии со способом, описанным в Примере 2 (2). В способе Примера 2 (2) вместо pTN-O1L-SP-LacZ использовали LC16mO ΔSCR VGF-p7.5-DsRed/O1L-SP-BFP и pTN-O1L-SP-Luc2, полученные в Примере 5 (2). Этот вирус получил название LC16mO ΔSCR VGF-p7.5-DsRed/O1L-SP-Luc2 (далее этот вирус также именуется как «контрольной вирус осповакцины»).

[0101]

(4) Рекомбинантный вирус собирали в соответствии со способом, описанным в Примере 2 (3). Вместо LC16mO ΔSCR VGF-p7.5-DsRed/O1L-SP-LacZ и pTN-VGF-SP-IL12 в способе, описанном в Примере 2 (3), использовали LC16mO ΔSCR VGF-p7.5-DsRed/O1L -SP-Luc2, полученный в Примере 5 (3), и pTN-VGF-SP-mIL12, полученный в Примере 5 (1), соответственно. Этот вирус получил название LC16mO ΔSCR VGF-SP-mIL12/O1L-SP-Luc2 (далее этот вирус также именуется как «вирус осповакцины, несущий mIL12»).

[0102]

(5) Рекомбинантный вирус собирали в соответствии со способом, описанным в Примере 2 (4-1). Вместо pTN-VGF-SP-IL12 в способе Примера 2 (4-1) использовали LC16mO ΔSCR VGF-p7.5-DsRed/O1L-SP-BFP и pTN-VGF-SP-mIL12, полученные в Примере 5 (1). Этот вирус получил название LC16mO ΔSCR VGF-SP-mIL12/O1L-SP-BFP.

Кроме того, рекомбинантный вирус собирали в соответствии со способом, описанным в Примере 2 (4-2). Вместо LC16mO ΔSCR VGF-SP-IL12/O1L-SP-BFP в способе Примера 2 (4-2) использовали LC16mO ΔSCR VGF-SP-mIL12/O1L-SP-BFP, полученный как описано выше, и pTN-O1L-SP-IL7. Этот вирус получил название LC16mO ΔSCR VGF-SP-mIL12/O1L-SP-IL7 (далее этот вирус также именуется как «вирус осповакцины, несущий mIL12 и hIL7»).

[0103]

Пример 6: Противоопухолевое действие генно-инженерного вируса осповакцины у гуманизированных мышей, имеющих раковую опухоль

Противоопухолевое действие in vivo вируса осповакцины, несущего hIL12 и hIL7, оценивали с использованием гуманизированных мышей (мышей, у которых иммунная система заменена иммунными клетками человека путем введения гемопоэтических стволовых клеток человека мыши с тяжелым иммунодефицитом), которым пересаживали раковые клетки человека.

[0104] В частности, для создания гуманизированных мышей 3×10⁴ гемопоэтических стволовых клеток (Lonza), полученных из пуповинной крови человека, сначала вводили путем инъекции через хвостовую вену мышам NOG (NOD/Shi-scidIL-2RγKO Jic, 6-недельные самки, CLEA Japan, Inc.), облученным рентгеновским излучением в дозе 2,0 Гр, используя рентгеновское облучающее устройство. Через 13 недель после введения этих клеток, 100 мк суспензии в ФСБ клеток рака легкого человека NCI-H1373 (ATCC CRL-5866), в концентрации 3×10⁷ клеток/мл, трансплантировали путем инъекции клеток подкожно в заднюю часть правого бока мышей. Диаметр опухоли измеряли с помощью циркуля после трансплантации раковых клеток, и мышей распределяли группам, так что средний объем опухоли в группе (малая ось мм × малая ось мм × большая ось мм × 0,52) составлял от 37 мм³ до 47 мм³. В тот же день 20 мкл вируса осповакцины, несущего hIL12 и hIL7, разведенного в ФСБ до концентрации 1,0×10⁸ БОЕ/мл, инъецировали в опухоль (эта группа в Таблице получила название «группа, получавшая вирус осповакцины, несущий hIL12 и hIL7»). 20 мкл ФСБ вводили в опухоль животных из группе, которая получила название «группа, получавшая носитель (ФСБ). Диаметр опухоли каждой мыши измеряли с помощью циркуля каждые 2-4 дня, объем опухоли рассчитывали на основании вышеприведенной формулы, а процентное (%) изменение объема опухоли на 14-й день после введения вируса рассчитывали по следующей формуле для каждой особи (n=7-8):

Процентное (%) изменение объема опухоли на 14-й день после введения вируса = 100 (%) × объем опухоли (мм³) на 14-й день после введения вируса/объем опухоли (мм³) в день введения вируса.

Эффект регресса опухоли определяли как положительный, если средний процент (%) изменения объема опухоли на 14-й день после введения вируса в каждой группе был менее 100 и наблюдалось значимое различие (различие была значимым если значение p <0,05) между объемом опухоли на 14-й день после введения вируса и объемом опухоли в день введения вируса в каждой группе при оценке двусторонним критерием Стьюдента.

В этом Примере контрольной вирус осповакцины (2×10⁶ БОЕ/особь), вирус осповакцины, несущий hIL12 (2×10⁶ БОЕ/особь) или вирус осповакцины, несущий hIL7 (2×10⁶ БОЕ/особь) (именуемые в Таблице как «контрольная группа, получавшая вирус осповакцины», «группа, получавшая вирус осповакцины, несущий hIL12» и «группа, получавшая вирус осповакцины, несущий hIL7») вводили в том же объеме инъекции (20 мкл) и в том же разбавителе (ФСБ), что и вирус, с которым проводили сравнение вирус осповакцины, несущий hIL12 и hIL7 (2×10⁶ БОЕ/особь).

[0105]

В результате, группа, получавшая вируса осповакцины, несущий hIL12 и hIL7, продемонстрировала среднее процентное изменение объема опухоли на 14-й день после введения вируса менее 100%. Кроме того, наблюдалась значимое различие между объемом опухоли на 14-й день после введения вируса и объема опухоли в день введения вируса, оцененное двусторонним критерием Стьюдента, и поэтому эффект регресса опухоли был определен как положительный (Таблица 3). Таким образом, было показано, что введение вируса осповакцины, несущего hIL12 и hIL7, обладает эффектом регресса опухоли. С другой стороны, эффект регресса опухоли не был подтвержден в группе, получающей или вирус осповакцины, несущий hIL12, или вирус осповакцины, несущий hIL7 (Таблица 3).

[0106]

Таблица 3: Процентное (%) изменение объема опухоли у гуманизированных мышей, имеющих раковую опухоль, при введении вируса осповакцины, несущего hIL12 и hIL7

Таблица 3

Экспериментальная группаnПроцентное (%) изменение объема опухоли на 14-й день после введения
Среднее +/- среднеквадратическая ошибкаЗначение p (объем опухоли на 14-й день после введения и объем опухоли в день введения, оцененное двусторонним критерием СтьюдентаГруппа, получавшая носитель (ФСБ)7653 ± 43<0,05Контрольная группа, получавшая вирус осповакцины7187 ± 390,09Группа, получавшая вирус осповакцины, несущий hIL78199 ± 33<0,05Группа, получавшая вирус осповакцины, несущий hIL128140 ± 290,40Группа, получавшая вирус осповакцины, несущий hIL12 и hIL7861 ± 6<0,05

[0107]

Пример 7: Вызывающее полную ремиссию действие генно-инженерного вируса осповакцины в сингенной мышиной модели рака

[0108]

(1) Действие вируса осповакцины, несущего mIL12 и hIL7

Вызывающее полную ремиссию действие вируса осповакцины, несущего mIL12 и hIL7, in vivo оценивали с использованием мышей, которым подкожно трансплантировали сингенные клетки линии рака мышей (сингенные мыши, имеющие рак). Поскольку человеческий IL-12, как известно, не влияет на мышиные иммунные клетки, использовали генно-инженерный вирус осповакцины, содержащий полинуклеотид, кодирующий мышиный IL-12, вместо полинуклеотида, кодирующего IL-12 человека (полученный в Примере 5).

[0109]

В частности, 50 мл мышиных клеток рака легкого линии LR/2 (LLC1) (ATCC CRL-1642) (далее именуемых LLC1) в концентрации 4 × 10⁶ клеток/мл в ФСБ сначала подкожно трансплантировали в правый бок мышам линии C57BL/6J (самцы в возрасте 5-7 недель, CHARLES RIVER LABORATORIES JAPAN, INC.). Объем опухоли рассчитывали таким же образом, как и в Примере 6, и мышей распределяли по группам, так что средний объем опухоли каждой группы составлял от 50 мм³ до 60 мм³. На следующий день 30 мкл вируса осповакцины, несущего mIL12 и hIL7, разведенного ФСБ до концентрации 6,7×10⁸ БОЕ/мл, вводили в опухоль 12 мышам (2×10⁷ БОЕ, эта группа в Таблице получила название «группа, получавшая вирус осповакцины, несущий mIL12 и hIL7»). Аналогичную внутриопухолевую инъекцию вируса проводили через 2 дня и 4 дня после первого введения. 30 мкл ФСБ вместо вируса вводили в опухоль животным из группы, которая получила название «группа, получавшая носитель (ФСБ)».

Диаметр опухоли измеряли при помощи циркуля два раза в неделю и рассчитывали объем опухоли. Отсутствие опухоли, наблюдаемое при пальпации на 27-й день после первого введения вируса, определялось как полная ремиссия и подсчитывалось количество особей, достигших полной ремиссии. Животных групп, имеющих в течение испытательного периода средний объем опухоли больше 1700 мм³, умерщвляли из соображений этики обращения с животными. В этом примере контрольной вирус осповакцины, вирус осповакцины, несущий mIL12, или вирус осповакцины, несущий hIL7 (каждый по 2×10⁷ БОЕ/доза, три дозы) (соответственно именуемые в Таблице «контрольная группа, получавшая вирус осповакцины», «группа, получавшая вирус осповакцины, несущий mIL12» и «группа, получавшая вирус осповакцины, несущий hIL7») вводили в том же объеме инъекции (30 мкл на дозу) и в том же разбавителе (ФСБ) что и вирус, с которым проводили сравнение вирус осповакцины, несущий mIL12 и hIL7 (2×10⁷ БОЕ/доза, три дозы).

[0110] В результате у трех особей в группе, получавшей вирус осповакцины, несущий mIL12 и hIL7, в конце эксперимента наблюдалась полная ремиссия. С другой стороны, ни одна из особей не достигла полной ремиссии в группе, получающей сравнительный вирус (Таблица 4-1). Таким образом, было показано, что введение вируса осповакцины, несущего mIL12 и hIL7, обладает более сильным вызывающий полную ремиссию действием, по сравнению с вирусом осповакцины, несущим hIL7, или вирусом осповакцины, несущим mIL12, в сингенных мышиных моделях рака.

[0111]

Таблица 4-1. Количество мышей, которые достигли полной ремиссии, при введении вируса осповакцины, несущего mIL12 и hIL7

Таблица 4-1

Экспериментальная группаКоличество мышей, которые достигли полной ремиссии/ Количество мышей в экспериментеГруппа, получавшая носитель (ФСБ)0/12Контрольная группа, получавшая вирус осповакцины0/12Группа, получавшая вирус осповакцины, несущий hIL70/12Группа, получавшая вирус осповакцины, несущий mIL120/12Группа, получавшая вирус осповакцины, несущий mIL12 и hIL73/12

[0112]

(2) смесь вируса осповакцины, несущего mIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7

Вызывающее полную ремиссию действием 1:1 смеси вируса осповакцины, несущего mIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7, (в дальнейшем именуемой «смесь вируса осповакцины, несущего mIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7») in vivo оценивали с использованием сингенных мышей, имеющих рак.

[0113]

Эксперимент проводили так же, как описано в пункте (1), при условии, что трансплантировали мышиные клетки рака легкого линии LLC1, суспендированные в концентрации 8×10⁶ клеток/мл. Кроме того, вместо 30 мкл (2×10⁷ БОЕ) вируса осповакцины, несущего mIL12 и hIL7, разведенного до концентрации 6,7×10⁸ БОЕ/мл, использовали 30 мкл (каждого 2×10⁷ БОЕ/доза, три дозы) смеси вируса осповакцины, несущего mIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7 (каждый вирус разводили ФСБ до 6,7×10⁸ БОЕ/мл) (группа, именуемая в Таблице «группа, получавшая смесь вируса осповакцины, несущего mIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7»). В эксперименте принимало участие семь мышей (n=7). Контрольный вирус осповакцины (4×10⁷ БОЕ/доза, три дозы), смесь 1:1 вируса осповакцины, несущего mIL12, и контрольного вируса осповакцины (каждый 2×10⁷ БОЕ/доза, три дозы) или смесь 1:1 вируса осповакцины, несущего hIL7, и контрольного вируса осповакцины (каждый 2×10⁷ БОЕ/доза, три дозы) (соответственно, в Таблице именуются «контрольная группа, получавшая вирус осповакцины», «группа, получавшая смесь вируса осповакцины, несущего mIL12, и контрольного вируса осповакцины» и «группа, получавшая смесь вируса осповакцины, несущего hIL7, и контрольного вируса осповакцины») использовали в объеме инъекции 30 мкл каждый в качестве вируса для сравнения.

[0114] В результате четыре особи в группе, получавшей смесь вируса осповакцины, несущего mIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7, достигли полной ремиссии. Только одна особь достигла полной ремиссии в группе, получавшей смесь вируса осповакцины, несущего mIL12, и контрольного вируса осповакцины, в то время как ни одна особь не достигла полной ремиссии в группах, получавших другие сравнительные вирусы (Таблица 4-2). Таким образом, было показано, что смесь вируса осповакцины, несущего mIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7, обладает более сильным вызывающий полную ремиссию действием, по сравнению со смесями, содержащими или вирус осповакцины, несущий hIL7, или вирус осповакцины, несущий mIL12, в сингенной мышиной модели рака.

[0115]

Таблица 4-2. Количество мышей, которые достигли полной ремиссии, при введении смеси вируса осповакцины, несущего mIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7

Таблица 4-2

Экспериментальная группаКоличество мышей, которые достигли полной ремиссии/ Количество мышей в экспериментеГруппа, получавшая носитель (ФСБ)0/7Контрольная группа, получавшая вирус осповакцины0/7Группа, получавшая смесь вируса осповакцины, несущего hIL7, и контрольного вируса осповакцины0/7Группа, получавшая смесь вируса осповакцины, несущего mIL12, и контрольного вируса осповакцины1/7Группа, получавшая смесь вируса осповакцины, несущего mIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL74/7

[0116]

Пример 8: Действие по формированию приобретенного иммунитета генно-инженерного вируса осповакцины в сингенных мышиных моделях рака (эффект отторжения опухоли в результате приобретенного иммунитета)

(1) Вирус осповакцины, несущий mIL12 и hIL7:

Мышей, достигших полной ремиссии в результате лечения вирусом осповакцины, несущим mIL12 и hIL7, повторно заражали теми же раковыми клетками, чтобы оценить действие вируса по формированию приобретенного иммунитета.

[0117] В частности, вначале получали мышей с раковой опухолью LLC1 в соответствии с Примером 7, и вводили в опухоль этим мышам вирус осповакцины, несущий mIL12 и hIL7, (при условии, что внутриопухолевая инъекция вируса также проводилась на 1-й и 3-й дни после первое введение в дополнение ко 2-му и 4-му дням (всего 5 раз). В таблице эта группа получила название «группа, получавшая вирус осповакцины, несущий mIL12 и hIL7». Полная ремиссия была подтверждена на 23-й день после последнего введения вируса. Особям, сохраняющим состояние полное ремиссии на 51-й день после последней введения вируса, и мышам такого же возраста, не зараженным вирусом (контрольная группа), подкожно трансплантировали 50 мкл раковых клеток LLC1, суспендированных в ФСБ в концентрации 8×10⁶/мл. Объем опухоли рассчитывали в соответствии с Примером 6, и подсчитывали количество особей, у которых в результате визуального осмотра и пальпации было подтверждено образование опухоли на 14-й день после трансплантации LLC1, чтобы определить отношение количества мышей, имеющих привитую опухоль, к количеству мышей, которым были пересажены раковые клетки. В этом примере значения, полученные для контрольной группы и группа, получавшей вирусом, были проверены точным критерием Фишера, и действие по формированию приобретенного иммунитета оценивали как положительное, если имело место значимое различие (менее 5%).

[0118]

В результате подкожная опухоль была сформирована во всех случаях у 10 особей в контрольной группе общей численностью 10 особей, но у 6 особей из группы, получавшей вирус, несущий mIL12 и hIL7, общей численностью 10 особей, отсутствовало формирование опухоли после повторно заражения раковыми клетками LLC1, по данным визуального осмотра и пальпации (Таблица 5-1) (Р<0,05, точный критерий Фишера). Таким образом, в этом Примере было подтверждено действие вируса осповакцины, несущего mIL12 и hIL7, по формированию приобретенного иммунитета.

[0119]

Таблица 5-1. Результат эксперимента по повторному заражению раковыми клетками мышей с полной ремиссией

Таблица 5-1

Экспериментальная группаКоличество мышей, имеющих привитую опухоль/Количество мышей, которым были пересажены раковые клеткиКонтрольная группа10/10Группа, получавшая вирус осповакцины, несущий mIL12 и hIL74/10

[0120]

(2) Смесь вируса осповакцины, несущего mIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7:

Мышей, достигших полной ремиссии в результате лечения смесью вируса осповакцины, несущего mIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7, повторно заражали теми же раковыми клетками, чтобы оценить действие вируса по формированию приобретенного иммунитета.

[0121] В частности, эксперимент проводили так же, как и в пункте (1). Однако вместо мышей, достигших полной ремиссии в результате введения вируса осповакцины, несущего mIL12 и hIL7, использовали мышей, достигших полной ремиссии в результате введения смеси вируса осповакцины, несущего mIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7, в соответствии с Примером 7 (2) (в 1-й, 3-й и 5-й день после распределения по группам, всего 3 раза) (в Таблице эта группа именуется «группа, получавшая смесь вируса осповакцины, несущего mIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7»). Дополнительную трансплантацию раковых клеток проводили на 74-й день после последнего введения вирусов (определение полной ремиссии проводили на 24-й день после последнего введения).

[0122] В результате подкожная опухоль была сформирована у всех особей в контрольной группе общей численностью восемь особей на 14-й день после дополнительной трансплантации раковых клеток, но у восьми особей из группы, получавшей смесь вируса осповакцины, несущего mIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7, общей численностью 10 особей отсутствовало формирование опухоли после повторно заражения раковыми клетками LLC1, по данным визуального осмотра и пальпации (Таблица 5-2) (Р<0,05, точный критерий Фишера).

Таким образом, в этом Примере было подтверждено действие смеси вируса осповакцины, несущего mIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL7, по формированию приобретенного иммунитета.

[0123]

Таблица 5-2. Результат эксперимента по повторному заражению раковыми клетками мышей с полной ремиссией

Таблица 5-2

Экспериментальная группаКоличество мышей, имеющих привитую опухоль/Количество мышей, которым были пересажены раковые клеткиКонтрольная группа8/8Группа, получавшая смесь вируса осповакцины, несущего mIL12, и вируса осповакцины, несущего hIL72/10

Промышленная применимость

[0124]

Вирус осповакцины, фармацевтическая композиция и комбинированный набор согласно настоящему изобретению могут быть использованы для профилактики или лечения различных видов рака.

Описание списка последовательностей

[0125] Описание «Искусственная последовательность» указывается в числовом идентификаторе <223> списка последовательностей.

Нуклеотидные последовательности, приведенные в SEQ ID NO: 1-6 и 10-15, являются праймерами.

Нуклеотидные последовательности, приведенные в SEQ ID NO: 7, 8 и 9, представляют собой полинуклеотид, содержащий ген IL-12 человека, полинуклеотид, содержащий ген IL-7 человека, и полинуклеотид, содержащий ген LacZ Escherichia coli, соответственно. В SEQ ID NO: 7 нуклеотидная последовательность с 14 по 1000 нуклеотид соответствует области, кодирующей субъединицу p40 IL-12, и нуклеотидная последовательность с 1606 по 2367 нуклеотид соответствует области, кодирующей субъединицу α IL-12.

Нуклеотидные последовательности, приведенные в SEQ ID NO: 16 и 17, являются сайтами ферментов рестрикции, связанными с каждой из кодирующих областей генов SEQ ID NO: 7-9.

Аминокислотная последовательность, приведенная в SEQ ID NO: 18, представляет собой белок B5R, имеющий делецию 4 доменов SCR.

Нуклеотидные последовательности, приведенные в SEQ ID NO: 19 и 20, представляют собой последовательности петлевых последовательностей на обоих концах LC16mO VGF-SP-LucGFP/O1L-p7.5-DsRed.

Нуклеотидная последовательность, приведенная в SEQ ID NO: 21, представляет собой последовательность, без петлевых последовательностей на обоих концах LC16mO VGF-SP-LucGFP/O1L-p7.5-DsRed.

Нуклеотидная последовательность, приведенная в SEQ ID NO: 22, представляет собой фрагмент ДНК, содержащий промотор p7,5k и фрагмент DsRed.

Нуклеотидная последовательность, приведенная в SEQ ID NO: 23, представляет собой полинуклеотид, содержащий ген мышиного IL-12.

--->

СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> Astellas Pharma Inc.

Национальный университет корпорации Тоттори Юниверсити

<120> Новые генно-инженерные вирусы осповакцины

<130> A17006A00

<150> JP 2016-107481

<151> 2016-05-30

<160> 23

<170> Патентная версия 3.5

<210> 1

<211> 37

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Вектор pTagBFP-N прямой праймер

<400> 1

atggccggac cggccaccgg tcgccaccat gagcgag 37

<210> 2

<211> 41

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Вектор pTagBFP-N обратный праймер

<400> 2

tcgaattcgc tagcggccgc ttaattaagc ttgtgcccca g 41

<210> 3

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> B4R прямой праймер

<400> 3

cagtcacgac gttgtaaa 18

<210> 4

<211> 73

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> B4R обратный праймер

<400> 4

catgcgcacc ttgaagcgca tgaactcctt gatgacgtcc tcggaggagg ccatttttat 60

ttatgagcgt taa 73

<210> 5

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> DsRed прямой праймер

<400> 5

gagttcatgc gcttcaaggt 20

<210> 6

<211> 99

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> DsRed обратный праймер

<400> 6

ctcaattgat tctagctata agtctttaat cttttgatac ttgttcgtta ttaattatta 60

attattttaa cggatttata tctacaggaa caggtggtg 99

<210> 7

<211> 2379

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> полинуклеотид, содержащий IL-12 человека

<400> 7

accggtcgcc accatgtgtc atcagcaact tgtcatcagc tggttttcac tcgtgtttct 60

tgccagccct ttggtagcga tttgggaact caagaaagac gtgtatgtcg ttgagctgga 120

ttggtatcct gatgcccctg gagagatggt ggtgctgacc tgtgatactc ccgaagagga 180

tgggataacc tggacccttg accagtcctc tgaagtcctg gggagtggca aaactctgac 240

gattcaggtg aaagagtttg gcgacgctgg ccagtacacc tgtcataagg gtggcgaagt 300

actgtctcat tcccttctgc tgctgcacaa gaaagaggac gggatttggt caacagacat 360

tctgaaagac cagaaggaac cgaagaacaa aacgttcctc cgctgtgagg cgaagaacta 420

ctcaggcaga ttcacatgct ggtggctgac tacaatcagc actgatctga cgttctccgt 480

caagagttct cgaggaagct ctgatccgca aggagtcaca tgcggtgcag ccactctgag 540

cgctgagagg gtgagaggag acaacaaaga gtacgagtat tccgtggagt gccaggaaga 600

ttccgcctgt ccagccgcag aagaaagctt gcctatcgag gtgatggttg atgctgttca 660

caaactcaag tacgagaatt acacctccag cttctttatc cgggacatca tcaaacccga 720

tccacccaag aatctgcagt tgaaacccct caagaactca cgtcaggttg aggtgtcttg 780

ggagtatccc gatacatggt caacaccaca cagttatttc agcctgacct tttgcgtcca 840

ggtgcaaggg aagagcaagc gcgaaaagaa agacagggtg ttcaccgaca agactagtgc 900

taccgtgatt tgccggaaga atgccagcat atctgttaga gcacaggaca ggtactactc 960

ctcctcttgg agtgaatggg catcagtacc atgcagctga tgcatctagg gcggccaatt 1020

ccgcccctct ccctcccccc cccctaacgt tactggccga agccgcttgg aataaggccg 1080

gtgtgcgttt gtctatatgt gattttccac catattgccg tcttttggca atgtgagggc 1140

ccggaaacct ggccctgtct tcttgacgag cattcctagg ggtctttccc ctctcgccaa 1200

aggaatgcaa ggtctgttga atgtcgtgaa ggaagcagtt cctctggaag cttcttgaag 1260

acaaacaacg tctgtagcga ccctttgcag gcagcggaac cccccacctg gcgacaggtg 1320

cctctgcggc caaaagccac gtgtataaga tacacctgca aaggcggcac aaccccagtg 1380

ccacgttgtg agttggatag ttgtggaaag agtcaaatgg ctctcctcaa gcgtattcaa 1440

caaggggctg aaggatgccc agaaggtacc ccattgtatg ggatctgatc tggggcctcg 1500

gtgcacatgc tttacatgtg tttagtcgag gttaaaaaaa cgtctaggcc ccccgaacca 1560

cggggacgtg gttttccttt gaaaaacacg atgataagct tgccaatgtg gcctcctggt 1620

agtgcgtcac agccaccacc cagtcccgca gcagctactg gattgcatcc agctgctaga 1680

cctgtctctc tgcaatgtag gctgagcatg tgtccagcta ggagcttgct gcttgttgcc 1740

acgcttgtgc tcctggacca cctgtcattg gcacgcaatc tgcccgttgc cactcccgat 1800

ccaggcatgt ttccgtgcct ccatcactct cagaacctcc tgcgggcagt cagcaatatg 1860

ctgcagaaag cgaggcaaac actggagttt tacccgtgta ccagcgaaga gatagatcac 1920

gaggacatta ccaaggacaa gacgtcaaca gtggaagctt gtctgcctct ggagctcaca 1980

aagaatgagt cctgcctgaa tagccgtgaa accagtttca tcaccaatgg gtcttgcttg 2040

gctagtcgca aaacatcctt catgatggca ttgtgccttt cctccatcta tgaggatctc 2100

aagatgtatc aggtggagtt caaaaccatg aacgccaaac tgctgatgga tcccaaacga 2160

cagatctttc tcgatcagaa catgcttgcc gtaatcgacg aactgatgca agccctgaac 2220

ttcaacagcg aaactgtgcc tcagaagtct agccttgaag agcccgactt ctacaaaacc 2280

aagatcaagc tgtgcatact cctgcatgcc tttcggatta gagccgtgac tattgacaga 2340

gtcatgtcct acctgaacgc ctcatgagct agcgaattc 2379

<210> 8

<211> 559

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> полинуклеотид, содержащий IL-7 человека

<400> 8

accggtcgcc accatgtttc atgtctcttt tcggtacatc tttggacttc cacccctgat 60

actggtgttg ctgcctgtag cctcatcaga ctgtgacatt gaaggcaaag acggcaaaca 120

gtatgagagc gttctcatgg tgagcatcga tcagctcctt gactccatga aggaaattgg 180

ctccaattgc ctcaataacg agttcaactt cttcaaacgt cacatttgcg atgccaacaa 240

agaggggatg ttcctgttta gagccgctcg aaagctcagg cagttcctga agatgaactc 300

tactggggat ttcgatctgc atctgctgaa agtgagtgaa gggactacga tactgctgaa 360

ttgtaccgga caagtcaaag gaagaaagcc cgcagctttg ggtgaagcgc aaccgacaaa 420

gagtctggag gagaataaga gcctgaaaga acagaagaag ctcaatgacc tttgctttct 480

gaaacgcctt ttgcaggaga tcaagacctg ttggaacaag atcctgatgg gtacaaagga 540

gcactgagct agcgaattc 559

<210> 9

<211> 3082

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> LacZ с оптимизированными кодонами

<400> 9

accggtcgcc accatggacc cggtggtgct gcagaggcgg gattgggaga atcctggggt 60

gacgcagctg aatcggctgg ctgctcaccc accatttgca tcatggagaa attccgaaga 120

ggcccggacc gaccgcccct ctcagcagct cagaagtctt aatggagaat ggcgcttcgc 180

atggtttcct gctcccgagg ctgtaccgga aagttggctc gagtgcgatt tgcccgaggc 240

agataccgtc gtggttccct ccaactggca gatgcacggc tatgatgccc ctatctacac 300

caatgtcact taccctataa cagtgaaccc accctttgtg cctaccgaga atcccaccgg 360

atgctacagt ctgacattta acgtggacga gtcttggctg caggaaggcc agactagaat 420

catcttcgat ggtgtcaaca gcgcttttca tctgtggtgc aacgggcgtt gggtgggtta 480

cggccaagac agtaggctcc cttctgaatt cgatctctct gccttcctgc gggccggtga 540

gaatagactt gccgttatgg ttctgcgttg gagcgacggt tcctacctgg aggaccagga 600

tatgtggagg atgtctggca ttttccgaga tgtgagcctc cttcacaaac ctaccactca 660

aatctccgac tttcatgttg ccacaaggtt caacgacgac ttttcacgcg ctgttctgga 720

ggccgaggtc caaatgtgcg gcgaactgcg cgattatctg cgcgtgactg tgagcctttg 780

gcaaggagag acacaggtgg catcaggcac cgcacccttc ggcggagaaa tcatcgacga 840

acggggagga tatgctgata gggttactct taggctgaat gtagaaaacc ccaagctctg 900

gtctgcagaa atacctaacc tctatcgcgc agttgtggaa ctgcacacgg cagacgggac 960

cctgattgaa gccgaagcct gtgacgtcgg cttccgtgaa gtgcgcatcg agaatgggct 1020

gctccttctt aacggtaagc cactgttgat cagaggcgtg aataggcatg agcatcatcc 1080

gctccacgga caggtgatgg atgagcagac aatggttcag gacatactct tgatgaaaca 1140

gaacaacttc aatgccgtgc gctgtagcca ctaccctaat cacccactgt ggtataccct 1200

gtgtgacagg tacggcctgt atgtcgtgga tgaggcaaac attgaaactc atggcatggt 1260

gccaatgaat cggctgacag atgaccccag atggctgccc gccatgtcag agcgtgtgac 1320

caggatggta cagcgggaca gaaatcaccc cagtgtcata atctggtccc ttgggaacga 1380

atcagggcat ggtgcaaacc acgatgctct gtaccgctgg attaagagcg ttgaccctag 1440

tcggccagtg cagtatgaag gtggaggcgc cgataccact gcaactgaca ttatttgccc 1500

aatgtacgct cgggtcgacg aggatcaacc gttccctgcg gtcccaaagt ggagcattaa 1560

gaaatggctg tctttgcctg gagaaacacg cccgctgatt ctgtgcgaat atgcccacgc 1620

aatggggaac tccctgggcg ggtttgcaaa gtattggcag gcttttcgcc agtatccacg 1680

actgcaggga ggctttgtgt gggactgggt agatcagagc ctgatcaaat acgacgaaaa 1740

tggcaatcca tggtccgcct atggaggtga ctttggtgat acccctaatg acaggcagtt 1800

ttgcatgaac ggactcgtct ttgcagatcg aactccacat ccggccctga ctgaggccaa 1860

gcatcagcag caattcttcc agtttcggct gtctgggcag accattgagg tgacttccga 1920

gtacttgttt cgacacagcg acaatgagct gctgcactgg atggtggccc tcgatggcaa 1980

accactggcc tcaggagagg tgcccctgga tgtagcgccc caggggaaac agcttatcga 2040

gttgcccgaa ctgccccaac ccgagtctgc tgggcaactc tggcttaccg tgcgagtcgt 2100

tcagccaaat gccactgcct ggtccgaggc tggccacatt agcgcatggc agcagtggag 2160

actggctgag aacctcagcg ttacccttcc cgcagcctct cacgccatcc ctcacttgac 2220

cactagtgag atggacttct gtatcgagct gggcaacaaa cgctggcagt ttaacagaca 2280

gtcaggcttc ttgtcccaga tgtggattgg cgacaagaag cagctgttga cccctttgcg 2340

ggatcagttc acaagggcgc ctctggacaa tgacatcgga gtgagcgagg ctacacgaat 2400

agatccaaac gcgtgggtcg agaggtggaa ggcggctggg cactaccaag ctgaagcggc 2460

cctgttgcaa tgtaccgccg atacgctcgc cgatgccgtc ctcattacga cagcccacgc 2520

ttggcagcac cagggcaaaa cactgtttat ctcccgtaag acatacagaa tcgatggcag 2580

cggtcaaatg gccattacgg tagacgtgga agttgcgtca gatacacccc atcccgcgag 2640

gatcggactg aactgtcaat tggcccaagt cgcagagaga gtgaactggc tgggactcgg 2700

gcctcaggag aattatccag accggctcac agccgcttgc ttcgataggt gggaccttcc 2760

actctctgat atgtacaccc catacgtgtt cccctcagag aatggcctgc ggtgtgggac 2820

acgagaactg aactacggac cgcatcagtg gagaggggac ttccagttca acatcagccg 2880

gtatagtcag cagcagctga tggaaacgtc ccatagacat ctgctgcacg ctgaggaagg 2940

gacatggctg aacattgacg ggttccacat gggaataggt ggcgatgaca gctggtcccc 3000

tagcgtaagc gccgagtttc aactgagtgc tgggagatat cattaccaac tggtctggtg 3060

ccagaaatga gctagcgaat tc 3082

<210> 10

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> VGF прямой праймер

<400> 10

ggtaacgcta tcgaaacgac 20

<210> 11

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> VGF обратный праймер

<400> 11

ttagttcgtc gagtgaacct 20

<210> 12

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> O1L прямой праймер

<400> 12

acagggatta agacggaaag 20

<210> 13

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> O1L обратный праймер

<400> 13

gtcaacaagc atcttccaac 20

<210> 14

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> B5R прямой праймер для ПЦР

<400> 14

cgtataatac gttggtctat 20

<210> 15

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> B5R обратный праймер для ПЦР

<400> 15

gatcgtgcca atagtagtta 20

<210> 16

<211> 13

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 5' сайт фермента рестрикции в SEQ ID NOS: с 7 по 9

<400> 16

accggtcgcc acc 13

<210> 17

<211> 12

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 3' сайт фермента рестрикции в SEQ ID NOS: с 7 по 9

<400> 17

gctagcgaat tc 12

<210> 18

<211> 101

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Белок B5R с делецией 4 доменов

<400> 18

Met Lys Thr Ile Ser Val Val Thr Leu Leu Cys Val Leu Pro Ala Val

1 5 10 15

Val Tyr Ser Thr Cys Val Arg Ser Asn Glu Lys Phe Asp Pro Val Asp

20 25 30

Asp Gly Pro Asp Asp Glu Thr Asp Leu Ser Lys Leu Ser Lys Asp Val

35 40 45

Val Gln Tyr Glu Gln Glu Ile Glu Ser Leu Glu Ala Thr Tyr His Ile

50 55 60

Ile Ile Val Ala Leu Thr Ile Met Gly Val Ile Phe Leu Ile Ser Val

65 70 75 80

Ile Val Leu Val Cys Ser Cys Asp Lys Asn Asn Asp Gln Tyr Lys Phe

85 90 95

His Lys Leu Leu Pro

100

<210> 19

<211> 104

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Часть последовательности генома вируса осповакцины

<400> 19

tagtaaaatt aaattaatta taaaattata tatataattt actaacttta gttagataaa 60

ttaataatat ataagtttta gtacattaat attatatttt aaat 104

<210> 20

<211> 104

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Часть последовательности генома вируса осповакцины

<400> 20

atttaaaata taatattaat gtactaaaac ttatatatta ttaatttatc taactaaagt 60

tagtaaatta tatatataat tttataatta atttaatttt acta 104

<210> 21

<211> 202489

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Часть последовательности генома модифицированного вируса осповакцины

<400> 21

attttattta gtgtctagaa aaaaatgtgt gacccatgac tgtaggaaac tctagagtgt 60

aagaaagatc gatcgcttta tagagaccat cagaaagagg tttaatattt ttgtgagacc 120

atcgaagaga gaaagagata aaactttttt acgactccat cagaaagagg tttaatattt 180

ttgtgagacc atcgaagaga gaaagagata aaactttttt acgactccat cagaaagagg 240

tttaatattt ttgtgagacc atcgaaggag aaagagataa aactttttta cgactccatc 300

agaaagaggt ttaatatttt tgtgagacca tcgaagagag aaagagataa aactttttta 360

cgactccatc agaaagaggt ttaatatttt tgtgagacca tcgaagagag aaagagataa 420

aactttttta cgactccatc agaaagaggt ttaatatttt tgtgagacca tcgaagagag 480

aaagagataa aactttttta cgactccatc agaaagaggt ttaatatttt tgtgagacca 540

tcgaagagag aaagagataa aactttttta cgactccatc agaaagaggt ttaatatttt 600

tgtgagacca tcgaagagag aaagagataa aactttttta cgactccatc agaaagaggt 660

ttaatatttt tgtgagacca tcgaagagag aaagagataa aactttttta cgactccatc 720

agaaagaggt ttaatatttt tgtgagacca tcgaagagag aaagagataa aactttttta 780

cgactccatc agaaagaggt ttaatatttt tgtgagacca tcgaagagag aaagagataa 840

aactttttta cgactccatc agaaagaggt ttaatatttt tgtgagacca tcgaagagag 900

aaagagataa aactttttta cgactccatc agaaagaggt ttaatatttt tgtgagacca 960

tcgaagagag aaagagataa aactttttta cgactccatc agaaagaggt ttaatatttt 1020

tgtgagacca tcgaagagag aaagagataa aactttttta cgactccatc agaaagaggt 1080

ttaatatttt tgtgagacca tcgaagagag aaagagataa aactttttta cgactccatc 1140

agaaagaggt ttaatatttt tgtgagacca tcgaagagag aaagagataa aactttttta 1200

cgactccatc agaaagaggt ttaatatttt tgtgagacca tcgaagagag aaagagataa 1260

aactttttta cgactccatc agaaagaggt ttaatatttt tgtgagacca tcgaagagag 1320

aaagagataa aactttttta cgactccatc agaaagaggt ttaatatttt tgtgagacca 1380

tcgaagagag aaagagataa aactttttta cgactccatc agaaagaggt ttaatatttt 1440

tgtgagacca tcgaagagag aaagagataa aactttttta cgactccatc agaaagaggt 1500

ttaatatttt tgtgagacca tcgaagagag aaagagaaag agatagttag tctagatatt 1560

tttcttagta caaaagtcaa tgttttaaaa tatatggaca agaatttgtc tgtataaaaa 1620

cttgtgtgaa attttgtacc aaagaaaaaa tgtgagcagt atcccctaca tggattttac 1680

tagatcattt atataccaaa aaatattata cgatctacgt tttattatat gattttaacg 1740

tgtaaattat aaacattatt ttatgatata caattgtctg gtaacctaga tgggcatagg 1800

ggatgttgat aagctcgacg agtatatgtt gttggacgtt attgtttaag aaatagttga 1860

tgcatcagaa agagaataaa aaatatttta gtgagaccat cgaagagaga aagagataaa 1920

acttttttac gactccatca gaaagaggtt taatattttt gtgagaccat cgaagagaga 1980

aagagaataa aaatatttta tgactccatt gaagagagaa agagaaaatg agaatgagaa 2040

taaaaatatt ttagtgacac catcagaaag aggtttaata tttttgtgag accatcgaag 2100

agagaaagag aataaaaata ttttatgact ccattgaaga gagaaagaga aaatgagaat 2160

gagaataaaa atattttagt gacaccatca gaaagaggtt taatattttt tatgagacca 2220

tcaaagagag aaagaaaata aaaatatttt tgtaaaactt tttttatgag accatcaaag 2280

agagaaagag aataaaaata tttttgtaaa acttttttta tgagaccatc aaagagagaa 2340

agagaataaa aatatttttg taaaactttt tttatgagac catcaaagag agaaagagaa 2400

taaaaatatt tttgtaaaac tttttttatg agaccatcaa agagagaaag agaataaaaa 2460

tatttttgta aaactttttt tatgagacca tcaaagagag aaagagaata aaaatatttt 2520

tgtaaaactt tttttatgag accatcaaag agagaaagag aataaaaata tttttgtaaa 2580

acttttttta tgagaccatc aaagagagaa agagaataaa aatatttttg taaaactttt 2640

tttatgagac catcaaagag agaaagagaa taaaaatatt tttgtaaaac tttttttatg 2700

agaccatcaa agagagaaag agaataaaaa tatttttgta aaactttttt tatgagacca 2760

tcaaagagag aaagagaata aaaatatttt tgtaaaactt tttttatgag accatcaaag 2820

agagaaagag aataaaaata tttttgtaaa acttttttta tgagaccatc aaagagagaa 2880

agagaataaa aatatttttg taaaactttt tttatgagac catcaaagag agaaagagaa 2940

taaaaatatt tttgtaaaac tttttttatg agaccatcaa agagagaaag agaataaaaa 3000

tatttttgta aaactttttt tatgagacca tcaaagagag aaagagaata aaaatatttt 3060

tgtaaaactt tttttatgag accatcaaag agagaaagag aataaaaata tttttgtaaa 3120

acttttttta tgagaccatc aaagagagaa agagaataaa aatatttttg taaaactttt 3180

tttatgagac catcaaagag agaaagagaa taaaaatatt tttgtaaaac tttttttatg 3240

agaccatcaa agagagaaag agaataaaaa tatttttgta aaactttttt tatgagacca 3300

tcaaagagag aaagagaata aaaatatttt tgtaaaactt tttttatgag accatcaaag 3360

agagaaagag aataaaaata tttttgtaaa acttttttta tgataccatc aaagagagaa 3420

agagaataaa aatatttttg taaaactttt tttatgagac catcaaagag agaaagagaa 3480

taaaaatatt tttgtaaaac tttttttatg agaccatcaa agagagaaag agaataaaaa 3540

tatttttgta aaactttttt tatgagacca tcaaagagag aaagagaata aaaatatttt 3600

tgtaaaactt tttttatgag accatcaaag agagaaagag aataaaaata tttttgtaaa 3660

acttttttta tgagaccatc aaagagagaa agagaataaa aatatttttg taaaactttt 3720

tttatgagac catcaaagag agaaagagaa taaaaatatt tttgtaaaac tttttttatg 3780

agaccatcaa agagagaaag agaataaaaa tatttttgta aaactttttt tatgagacca 3840

tcaaagagag aaagagaata aaaatatttt tgtaaaactt tttttatgag accatcaaag 3900

agagaaagag aataaaaata tttttgtaaa acttttttta tgagaccatc aaagagagaa 3960

agagaataaa aatatttttg taaaactttt tttatgagac catcaaagag agaaagagaa 4020

taaaaatatt tttgtaaaac tttttttatg agaccatcaa agagagaaag agaataaaaa 4080

tatttttgta aaactttttt tatgagacca tcaaagagag aaagagaata aaaatatttt 4140

tgtaaaactt tttttatgag accatcaaag agagaaagag aataaaaata tttttgtaaa 4200

acttttttta tgagaccatc aaagagagaa agagaataaa aatatttttg taaaactttt 4260

tttatgagac catcaaagag agaaagagaa taaaaatatt tttgtaaaac tttttttatg 4320

agaccatcaa agagagaaag agaataaaaa tatttttgta aaactttttt tatgagacca 4380

tcaaagagag aaagagaata aaaatatttt tgtaaaactt tttttatgag accatcaaag 4440

agagaaagag aataaaaata tttttgtaaa acttttttta tgagaccatc aaagagagaa 4500

agagaataaa aatatttttg taaaactttt tttatgagac catcaaagag agaaagagaa 4560

taaaaatatt tttgtaaaac tttttttatg agaccatcaa agagagaaag agaataaaaa 4620

tatttttgta aaactttttt tatgagacca tcaaagagag aaagagaata aaaatatttt 4680

tgtaaaactt tttttatgag accatcaaag agagaaagag aataaaaata tttttgtaaa 4740

acttttttta tgagaccatc agaaagaggt ttaatatttt tgtgataccc tgaaaggaaa 4800

taggaatagg aataggaata ggaatagtgt cataatcgta tcacactatt gagacagaaa 4860

aagaagaagt cgcgagaggt aactttttgt gaatgtagtt aagaacattt ttgttttgca 4920

aaccggaata tagtgtccgg tacacttttt taattcgtgg tgtgcctgaa tcgttcgatt 4980

aaccctactc atccaatttc agatgaatag agttatcgat tcagacacac gctttgagtt 5040

ttgttgaatc gatgagtgaa gtatcatcgg ttgcaccttc agatgccgat ccgtcgacat 5100

acttgaatcc atccttgacc tcaagttcag atgattcctt gcacatgtct ccgatacgaa 5160

cgctaaactc tagattcttg acacattttg tatcgacgat cgttgaaccg atgatatctt 5220

cgtaactcac tttcttatga gagatgttag acccgagtac tggatgggtc ttgatgtcgc 5280

tgtctttctc ttcttcgcta catctgatgt cgatagacac ctcacagtct ttgatcatag 5340

caagagcttc ttcatgagtg atcgcgggag agtccttacc ttgtcctggg gacacgctgg 5400

acaatctagc attcactgtg tttccatcag cggattctga gatggattta atctgaggac 5460

atttggtgaa tccaaagttc attctcagac ctccaccgat gatggagtaa taagtggtag 5520

gaggatctac atcctcgact gatgtggaat catcttctga ttccacctcg ggatctggat 5580

ctgactcgga ctctgtaatt tccgttacgg attggcaaat cttatcattg gtcggtgttt 5640

ggtcttgctt tgtgactttg ataataacat cgattcccat atgatgtttg ttttcttctt 5700

ccgtacacga ggaggaggat gaggatgatt gctgaagact ggcaggcata gcagctgccg 5760

ccaggcacat gcatgccagt acgatatatt gtttcataat tgctattgat tgagtactgt 5820

tctttatgat tctacttcct taccgtgcaa taaattagaa tatattttct acttttacga 5880

gaaattaatt attgtattta ttatttatgg gtgaaaaact tactataaaa agtgggtggg 5940

tttggaatta gtgatcagtt tatgtatatc gcaactaccg ggcatatggc tatcgacatc 6000

gagaacatta cccacatgat aagagattgt atcagtttcg tagtcttgag tattggtatt 6060

actatatagt atatagatgt cgcccactag agttactgtc tccgaatgcg gcatgatagt 6120

atcattcttt gctttcgtta actgtttgga ggaagaatct ttgttattgc atttaatctc 6180

gaaattcaga gtgcacacct ttctcctgta aagaaacctg aagtcgctac cttattaagg 6240

acggagaagt atccatcacg aaagacggga tcgcagtctt tatgattcat agtaatagtt 6300

agttccgacg ttgagatgga ttcgctgaga ccggtagtgg tcgtccgagt acacgacgtg 6360

tcgttaactg gatacagatt aatttccaca tcgatatagt taaaggtatt actgggtacg 6420

ggttcgcatt tatctgcgga agagacggtg tgagaatatg ttccgagacc acacggagaa 6480

cagatgacgt ctccggatac tccgtatcct attccacatt ttgtttggga aacacatgcc 6540

ttgcatccgg atgatccttt gagaagacaa taatatccgg gagagcattc acagattcta 6600

ttgtgagtcg tgttacacga tcgcgtcttc cgttacaact tagacaagcg ggtaaatgat 6660

tattgcgaga tgtgaaggta cccgaaccac acggcgtaca ttgtgtgtta gtcttgctat 6720

cgcataatct ggaagcgtat gttcccggac acaaattatg gcgtttgtat tcgttgtctt 6780

tacactttcc atcggatggt gcatgcggtg ctatatctct tccgtttatt attatacatg 6840

agagaaacaa tatatacgag tataatacgg acttcatgat ttaataatgt agtaatcgtc 6900

gtcttgttcc tgtttcctac ttctccaatc atatagatat tttctttcta tcatggataa 6960

tatttgtaat ggttctttcc gtacaacata ctgtttagat gatattgcgc ataatttccg 7020

gaggcaaata cgatagtcta gattgaccga tggtagactc taatttattg agtgctttgt 7080

cgacgagttt acttttacgc tccatcgata gatggcactg ttctatgaga tcgtcgtaca 7140

tgggaaatga aatgtgactg tctgaatgta tggctttaag atagctgtga taccgtatac 7200

aggtcggtgt cggagattcg aatctcttta aggcgactta tgtcacgatg atggaatcta 7260

tcttatcgaa tgatatattt ttcataaata cacttttata gtcctcgttt aaacagaatt 7320

tactatgtag ttccgcgaat gactcgtccc ttaataggca gtaggctagt atctttttta 7380

cgtagtaatc gtcgtaggga gagacatctt gtagaacaac gatttaatca taggtagaga 7440

tactttcagt ctgtggtgga tgatgtcatt cacaacatcc gccttgtata tgatgtttct 7500

gttttcaaac accaagtcga ataccgtctt tagtcggaag gttgatgtcg tatccgatgt 7560

atgaggcaac attgttgtta caattttgaa aggcggtatt atagtattcg tctttctgaa 7620

tgtcgaacct atctaataga taccgtagta tattgagagt gtatccttga ttatgtttta 7680

tgaatagata aagtagatgt tgtccttctt ccttttgttc gtgccaattg agtaacatta 7740

tgagaatatg acctgttgca caatcgttcc atgatgggtg tacaatcaag attattacgt 7800

atcctcgaga taaaagagca tacaccacac gaggactatg tttggtatac tgttgaaggt 7860

aagtgtgtaa ccgcgttaat gtttgctcca taatctatta tcgcgtagat gaatcgcttc 7920

tcggctcgca tcttagtgtg acttgacttg taataattgc tttcgtagaa cgtggatatg 7980

tgtttacagt agtaatgaag agaagtgagt tcatcctcgt cggcgcaatt agggtcggat 8040

cctttgtaca gaacgtaata gtttaagctc ccattgaatt tatatctaag ataacacagc 8100

aatagatcgg atgatttact aaagtcatca atggtgtccg ttagtatatc aaagatcttg 8160

ttatcgattg atagtggtca tccttgctat caaagttacg catgccgtgg tgtaacaata 8220

tctttaatac agatggatta aatcgtgtat tcatcgtata gcaatgtaat ggagagttac 8280

ctcgtttatt cagatcgcag tgtttaataa ctagcttaaa cagatgagac gatgtattca 8340

catcaaagaa cgtgaaatac atatgacaga cattgttgac agaaacgtga ccttcattct 8400

taccgtcgtc cataaatacg ttaggtatgt accacatact gtcgcgaacg atgcgtacaa 8460

tctcgtccat ctcataatga tttacttttt cataattaaa gatgtgaaag aaaaacagaa 8520

caatatattt ttttagtaat gtttatgcga gacatataaa ataaactccg tgtttatgat 8580

gccggtaaat gtttttatca tcttggacgg aatcgatttt gtaatatgtc atggaaacaa 8640

atgaaacagg acattatcgc tccatgataa attatttaat ggagtaataa agtatctcca 8700

tgggtaattt cgaaatcaag ttatcgtctg tattaatgtt gtccactatg gagtcgatcc 8760

tctcattgtt ctttacagtt tctgtaatga tggacgttag ttcttttttg taccatttga 8820

tgtcggattc tttgcgtatc tcagtctgtg gcgtttgctt tgtttaaata atatatcaaa 8880

catggagacg cctgatatgt aggcattctt cattctatta atgtctgctc tatagcgctt 8940

tagttcctta tgacgaccgg cgatatcata ctttacttta gaaggaaaat catcatctat 9000

gattaaggcg tatctgatac aggcgaataa tggttcagga tatagatagc gtatatctct 9060

attaaatgcg tcaatcatag tctctagagt gggatggtag ctaagtaata aatcaactat 9120

cctcgttttg ttttctcttt ggtaactgct tttctggatg gccgtattga ttatcgagcg 9180

tgatgttgta acactcgctc catattccaa taaccgcttt gcaaattgta tattattgac 9240

atcgaccgcg taatatagta gagttatcga tcatatctat atcatccatg tacttgctta 9300

gtatatcaaa tacatctatt agtatggttt cataacagtg atacccgcaa ttattaaatc 9360

tcgataatat cagaccgtac atacatagac ggccattgtt cgatacgtga tttacagccg 9420

cgtgtccata ttttccacga taaaccttac gacgtttaca tcgacgagat tattattaac 9480

aaagtagtcg tgtagaggat agttgttgtc cgtcgtctta tccatggttg ctccgttatc 9540

caacatgcat tgaatgatag gtatacttac catatcgccg taatgtaagt agtttatcaa 9600

catggcttgt acatcctgtt gtctaaatct ctttagaatg ttatcgatga tgtagtggtt 9660

atattctctg gaatcgtacg aagtaatact acgcattacg tcgacaagag tatgacgtct 9720

ctcaataaga agattaacga tttccatgtc tacattatat ggggttactc taaatcgctt 9780

gtttagataa tacgcctcta atatagggct gacgtcgtat actctacacg tgtccacatc 9840

ctttattaat aataatttaa caatctctat atctatggtt gagcaagacc agtagtattg 9900

gatgggtaaa gatcctcctt cgtctctgcc atggatggaa acattgttat cgatcaaaca 9960

tttaattaca tccttggata gagattgaga ttctctatga gacgatatat agtaatgaag 10020

agagttctta cacatatcac tgtcgtacat acaggtacga aatacgtaac cggtgctgta 10080

acattctgat ttaagaagcc atagcaatac ttctggtctc ggattaggcg tcgttacgta 10140

tatatccacc aatccgagac cattgattgc ataattcgta ttcttggacg gacgtatccg 10200

tttatccaca attaggtatt ttagcagacg taagtcgata ttatccgaat acagatcgaa 10260

atcatttata ttcgacttga gttcgttaga ggaatttgaa tagctggata tcagtagatg 10320

cacaatctga gattttacgt atctatgctt actgtatact cctagcggag ttaatccttc 10380

gttgtttcta caaagtctct cgactccgcg agagagtaac agccgaacaa tcttaatgtc 10440

tgtatcgcat ttattggaga cgtaacaatg tagcgcattg tttcctcgtc tatctatatg 10500

ttttgataag ttgtgacacg tttcaatttc tagttttatt tttttgtacg tcacatcttc 10560

atccagtaga cgacatagaa tagtgcactc tctaccacaa taatccatag ctattctggt 10620

gctaattatt cctatttcac gaaaaatgat aaaggcaatc attcctcata agatgataaa 10680

aagtgtagtg agagagcatg aaggagattt agtatttagc agtgcggata tgatccaaga 10740

gggtgagata gtcgttctcg ttcagaatct ttcgcagcat aagtagtatg tcgatatact 10800

tatcgttgaa gactcttcca gagacgatag ctgattgagt acaaagtcca atgattgcac 10860

gaagttcttc ggcggttttc atggagtcat ttctgatgaa acatttaatg atctccacgc 10920

aattgtccca cggaagtgaa tccttcaact caccaccaaa gagctccgtt gcatcagttc 10980

tgaaagagat gagaagcctg tagagagacc ctgcgctttc tctatgggtc catctatgag 11040

aaacccacag gatgtattca gtcagacaat gtctgacgtc ggccacggta ttcagggagt 11100

ccttagtagc gtggcaatga cagggtctga actgggcaca aggaaaggcc attgtgaagg 11160

tagacgaagg ttaacctgat ggtagacctg tagccgtcta tgctaataga gggctttaat 11220

ttccattttt taatggggtt gtggatgagg aatgagagtg atatcatatt gagatacgta 11280

gttatgtaga ggtgtatttc ctatattatt tactttcggt ttcatatttt accaactctt 11340

taataaattt cttttcacga tgcatcttat taaatgacgt tttctcataa gtggacatat 11400

agatgcagaa gtaatgaaga aaagtattac ctctatcatc tacataatta gggtctgctc 11460

ctttttttaa caacttatac agtacgtagt agtagtttat cggttttaaa tcaagtctag 11520

aatatatagt ggattaatat atttttatat tcgctaaagc tatctatact atcagaaagc 11580

atatcattct caacttcatc atgagttaaa tatttgtgta atggaatgtg accatcactg 11640

tcatgacata ctcctttaat aggtttttta aaacagatga ttcaaatcct tcattcatta 11700

gataacagtg taacggagtc gtaccttcta ctagtttgtt tatatcacag cattctacaa 11760

acagtctaaa caatagagaa gacggacaga ctttaacgta taaatgacac atgttatcga 11820

tattcgttga tgaattatta ttaaacgtag ttatgataaa tgattctaac gacatttctc 11880

gctagagata aaatctagta tcgtatcata ctcgcatagc atagtttttc ataattaata 11940

caatatttaa aagacttatt cggaaagtat tttaatacat gtatcatcga tggagatcca 12000

tatgaggagt cacttgtagt tcttcagtag taataacagt gctatcatcg atagtataat 12060

tatatgttgt tgtaattgga gtaactgttg gtagttcttc cgtggaatca ataattatac 12120

taacagcaat agtataatta tataaatatg ttccgttgat atcacatatt ttaatgaact 12180

catttctaac accctcagct atatctgtcc aattaaatgt agccaacaat ctactacgtt 12240

ctctttgatt gactacttgt acggtagcga cgctacacta tctttattgt cttctacatg 12300

ctccaattga atgtcatgat acaacgcagt ttttcttatg catgtttcat aacaccacga 12360

acatgtcgca gtaagataat ttttgtaaat tcatgattgc cggtcataaa caagcccgtc 12420

aataattgtg gctatatatt cagtttatag agcaaaataa ttaagcacaa tagcgcttaa 12480

tctcaaaata tgttatgttt atttttttca tattaaacat actggttaaa atcctctaaa 12540

ggctgatctt catctataaa tcaagatcat aattacattt agacagtggt ttcatgttta 12600

taaaaatgtt ctttttgtgt gaataaggaa tatactaatc aataatcaac catcgacccc 12660

attacgatag tatgcaggca accccccatt agagaggtac gtgtaatcag tctctccagt 12720

tttagtattt ttataagtca ttgttacata aacggctttt aaacagtctc ctcgataata 12780

agccatatct ggaaatttat taaatactcg agtcatttta cgcacggtca aaaaagtaag 12840

taatgtcgac gacttcttac attctataga aacacctaga atactcattt tcttttggaa 12900

aatatcctca gactctgatt tgaacaatgc acgacctata gtaaaccgtg accaataagt 12960

tatattagtc aatggtatat ccaaaccatc aagtgtggat agtacgccga tagtccagtc 13020

tttggtatcg atagtgtagt tattgaactg agaagttacc gtatagtctt tttggtcatc 13080

tctaaacaag gaaactaata cctctacact attgaacgat ttatcttccg taatgggtgg 13140

aataacggga atataaagtg gactagcgat ggatgaagtc acgaatataa gacacgctat 13200

taatccgtat atcatcattt tgatattact tataataacg atttgtttaa tttttagttt 13260

atactattaa ttgtaaatga tattattatt ttttttaagt attatcagct ttagtttata 13320

ctattactat ttgtaatatt tagacataga taaacgtgat aaaagtctat ttgtttatat 13380

ttattgcgga tagcagtatt tccctataaa aagtatacgt cctgtgttgt ctttaatcat 13440

gtacatgaat ggatggttta tgtagacctt cgtacgatat accatcgaaa agttagtcat 13500

aaatactcct gtaacggccg atgcttctgt atactcctca ttaacatcta taaacgtcgt 13560

atgtagaaat ttttctacag tgatagtttc attacacatc ttgctaaaat ctgcataata 13620

tccgaatata ttagtaagtc ctaaattttc taaaatcggt accagattat acggttctgt 13680

catttccact ttaaactttg gcatatacaa gtctatactt ttagtagata acataccaca 13740

ccatttttta aatttttcat ctgttatatt tttttctatg ttatatatac cttctatgtc 13800

gtccggtagt ataattacca tactagagtt tccctcgtat ggaatatcga taatagagaa 13860

tcctccgaat aattcattaa tatgtacata ttgcaagtta ttctcggtac ccaccatcat 13920

atcaacgctg gtaactatat tcttagaaat ataaaacttg tctgtatatg taagatgttt 13980

agaaaatgga tatttccaca ttgctttaaa atggacggcg ctaacaactg tcatacgagt 14040

attaatggat agcggactag tcaataagga attaatttta ccatttgtca ttgtcttaac 14100

ccattcgttg attagttcct ttgtttggtt agcattatta aagtttacag tttgaaaatc 14160

gtcttttatt ttttgtagga aggaggcatg gaactcgata ctatcgctac cgtatatttt 14220

atttgcggta gctagtgtcg cacaatacgg aatatctacg tccatgtcat tattgtcatc 14280

gggtgtattc tcattcatat tctctatata ttttgatagt tgttcagctg tagaaccagc 14340

tgctccatga tttagaatag ataaagtaga taaaatagaa actggagaaa tcaaaacatt 14400

ttcatccgtg tgttttaaga ttagttcttt aaagatatcc atggtataga ccaaacaata 14460

acgataacga tatatatcat aaataaataa tgttaaattt tagtttatgt ttgtaccccg 14520

tattcatact taacaaattg gtattgcgta cacaatcaat catattacat accattaata 14580

atgcaagcat aaaaaatcgt tagtagatgt ttctaaatat aggttccgta agcaaagaat 14640

ataagaatga agcggtaatg ataaaatcaa ttgttatcta aaatgatcat actcatttat 14700

tttattctat tatattaaca catacatttt taacagcaac acattcaata ttgtattgtt 14760

atttttatat tatttacaca attaacaata tattattagt ttatattact gaattaataa 14820

tataaaattc ccaatcttgt cataaacaca cactgagaaa cagcataaac acaaaatcca 14880

tcaaaaatgt tgataaatta tctgatgttg ttgttcgctg ctatgataat cagatcattc 14940

gccgatagtg gtaacgctat cgaaacgaca ttgccagaaa ttacaaacgc tacaacagat 15000

attccagcta tcagattatg cggtccagag ggagatggat attgtttaca cggtgactgt 15060

atccacgcta gagatattga cggtatgtat tgtagatgct ctcatggtta tacaggcatt 15120

agatgtcagc atgtagtatt agtagaattc ttacttgtac agctcgtcca tgccgagagt 15180

gatcccggcg gcggtcacga actccagcag gaccatgtga tcgcgcttct cgttggggtc 15240

tttgctcagg gcggactggg tgctcaggta gtggttgtcg ggcagcagca cggggccgtc 15300

gccgatgggg gtgttctgct ggtagtggtc ggcgagctgc acgctgccgt cctcgatgtt 15360

gtggcggatc ttgaagttca ccttgatgcc gttcttctgc ttgtcggcca tgatatagac 15420

gttgtggctg ttgtagttgt actccagctt gtgccccagg atgttgccgt cctccttgaa 15480

gtcgatgccc ttcagctcga tgcggttcac cagggtgtcg ccctcgaact tcacctcggc 15540

gcgggtcttg tagttgccgt cgtccttgaa gaagatggtg cgctcctgga cgtagccttc 15600

gggcatggcg gacttgaaga agtcgtgctg cttcatgtgg tcggggtagc ggctgaagca 15660

ctgcacgccg taggtcaggg tggtcacgag ggtgggccag ggcacgggca gcttgccggt 15720

ggtgcagatg aacttcaggg tcagcttgcc gtaggtggca tcgccctcgc cctcgccgga 15780

cacgctgaac ttgtggccgt ttacgtcgcc gtccagctcg accaggatgg gcaccacccc 15840

ggtgaacagc tcctcgccct tgctcaccat ggtggctgcg gccgccacgg cgatcttgcc 15900

gcccttcttg gccttaatga gaatctcgcg gatcttgcgg gcgtccaact tgccggtcag 15960

tcctttaggc acctcgtcca cgaacacaac accaccgcgc agcttcttgg cggttgtaac 16020

ctggctggcc acatagtcca cgatctcctt ctcggtcatg gttttaccgt gttccagcac 16080

gacgactgcg gcgggcagct cgccggcatc gtcgtcgggc aggccggcga ccccggcgtc 16140

gaagatgttg gggtgttgca gcaggatgct ctccagttcg gctggggcta cctggtagcc 16200

cttgtatttg atcaggctct tcagccggtc cacgatgaag aagtgctcgt cctcgtccca 16260

gtaggcgatg tcgccgctgt gcagccagcc gtccttgtcg atgagagcgt ttgtagcctc 16320

ggggttgtta acgtagccgc tcatgatcat ggggccacgg acgcacagct cgccgcgctg 16380

gttcacaccc agtgtcttac cggtgtccaa gtccaccacc ttagcctcga agaagggcac 16440

caccttgcct actgcgccag gcttgtcgtc cccttcgggg gtgatcagaa tggcgctggt 16500

tgtttctgtc aggccgtagc cctggcggat gcctggtagg tggaagcgtt tggccacggc 16560

ctcacctacc tccttgctga gcggcgcccc gccgctggcg atctcgtgca agttgcttag 16620

gtcgtacttg tcgatgagag tgctcttagc gaagaagcta aatagtgtgg gcaccagcag 16680

ggcagattga atcttatagt cttgcaagct gcgcaagaat agctcctcct cgaagcggta 16740

catgagcacg acccgaaagc cgcagatcaa gtagcccagc gtggtgaaca tgccgaagcc 16800

gtggtgaaat ggcaccacgc tgaggatagc ggtgtcgggg atgatctggt tgccgaagat 16860

ggggtcgcgg gcatgactga atcggacaca agcggtgcgg tgcggtaggg ctacgccctt 16920

gggcaatccg gtactgccac tactgttcat gatcagggcg atggttttgt cccggtcgaa 16980

gctctcgggc acgaagtcgt actcgttgaa gccgggtggc aaatgggaag tcacgaaggt 17040

gtacatgctt tggaagccct ggtagtcggt cttgctatcc atgatgatga tcttttgtat 17100

gatcggtagc ttcttttgca cgttgaggat cttttgcagc cctttcttgc tcacgaatac 17160

gacggtgggc tggctgatgc ccatgctgtt cagcagctcg cgctcgttgt agatgtcgtt 17220

agctggggcc acagccacac cgatgaacag ggcacccaac acgggcatga agaactgcaa 17280

gctattctcg ctgcacacca cgatccgatg gtttgtattc agcccatagc gcttcatagc 17340

ttctgccagc cgaacgctca tctcgaagta ctcggcgtag gtaatgtcca cctcgatatg 17400

tgcgtcggta aaggcgatgg tgccgggcac cagggcgtag cgcttcatgg ctttgtgcag 17460

ctgctcgccg gcggtcccgt cttcgagtgg gtagaatggc gctgggccct tcttaatgtt 17520

tttggcatct tccatggccc cggccgtgca ataaattaga atagtttttc aatttttggt 17580

acctcgacct tatttatatg ccaaaaaaaa aaaaaaaaaa gctgatccaa tttcgacgag 17640

actatcaacg ttcagaaaac ccaaacacta caacgtcata tatcccatct cccggtatta 17700

tgcttgtatt agtaggcatt attattatta cgtgttgtct attatctgtt tataggttca 17760

ctcgacgaac taaactactt atacaagata tggttgtgcc ataattttta taaatttttt 17820

ttatgagtat ttttacaaaa atgtataaag tgtatgtctt atgtatattt ataaaaatgc 17880

taaatatgcg atgtatctat gttatttgta tttatctaaa caatacctct acctctagat 17940

attatacaaa aattttttat ttcagcatat taaagtaaaa tctagttacc ttgaaaatga 18000

atacagtggg tggttccgta tcaccagtaa gaacataata gtcgaataca gtatccgatt 18060

gagattttgc atacaatact agtctagaaa gaaatttgta atcattttct gtgacgggag 18120

tccatatatc tgtatcatcg tctagtttat cagtgtccca tgctatattc ctgttatcat 18180

cattagttaa tgaaaataac tctcgtgctt cagaaaagtc aaatattgta tccatacata 18240

catctccaaa actatcgctt atacgtttat ctttaacgat acctatacct agatggttat 18300

ttactaacag acattttcca gatctattga ctataactcc tatagtttcc acatcaacca 18360

agtaatgatc atctattgtt atataacaat aacataactc ttttccattt ttatcagtat 18420

gtatatctat atcaacgtcg tcgttgtagt gaatagtagt cattgatcta ttatatgaaa 18480

cggatatgtc tagaacggca attgttttac gtccagttaa cactttcttt gatttaaagt 18540

ctagagtctt tgcaaacata atatccttat ccgactttat atttcctgta gggtggtata 18600

attttatttt gcctccacat atcggtgttt ccaaatatat tactagacaa tattccatat 18660

agttattagt taagggtacc caattagaac acgtacgctt attatcatca tttggatcgt 18720

atttcataaa agttattgta ctatcgatgt caacacattc tacatttttt aatcgtctat 18780

atagtatttt tctgatattt tctataatat cagaattgtc ttccatcgga agttgtatac 18840

tatcggaatc agttacatgt ttaaataatt ctctgatgtc attccttata caatcaaatt 18900

cattattaaa cagtttaata gtctgtagac ctttatcgtc gtaaatatcc attgtcttat 18960

tagttacgct tatttttatg tgttttacat tgctttatta tattttataa gaatgattgt 19020

ttgacgaatc acgagaacta ttaagacaca ttattaggta tatattataa aaaagttttt 19080

gattacgatg ttataagagg aaagaggaca cattaacatc atacatcaat taactacatt 19140

cttataacat cgtaatcaaa agaattgcaa ttttgatgta taacaactgt caatgggtta 19200

tggaattgta tattacatat tatacggtat gttggtaacg acaaataccg gtcggtaatt 19260

gtctgccggt gtaatagaat tatatatata tctatctatt acaccggcct tgtatacata 19320

ataataagtt gtggtagtat gatctccata tttataattt aggactttgt attcagtatt 19380

tttggaatca taaaaaataa aaaaaagttt tactaattta aaatttaaaa agtatttaca 19440

tttttttcac tgtttagtcg cggatatgga attcgatcct gccaaaatca atacatcatc 19500

tatagatcat gtaacaatat tacaatacat agatgaacca aatgatataa gactaacagt 19560

atgcattatc cgaaatatta ataacattac atattatatc aatatcacaa aaataaatac 19620

acatttggct aatcaatttc gggcttggaa aaaacgtatc gccggaaggg actatataac 19680

taacttatct agagatacag gaatacaaca atcaaaactt actgaaacta tacgtaactg 19740

tcaaaaaaat agaaacatat atggtctata tatacactac aatttagtta ttaatgtggt 19800

tattgattgg ataaccgatg tgattgttca atcaatatta agagggttgg taaattggta 19860

catagctaat aatacctata cacccaataa tacaacaacc atttctgagt tggatatcat 19920

caaaatactg gataaatacg aggacgtgta tagagtaagt aaagaaaaag aatgtggaat 19980

ttgctatgaa gttgtttact caaaacgatt agaaaacgat agatactttg gtttattgga 20040

ttcgtgtaat catatatttt gcataacatg tatcaatata tggcataaaa cacgaagaga 20100

aaccggtgcg tcggataatt gtcctatatg tcgtacccgt tttagaaaca taacaatgag 20160

caagttctat aagctagtta actaataaat aaaaagttta atttgttgac gacgtatgtc 20220

gttatttttt ctcgtataaa agattaaatt caattcaatt cgttgtttct aatataatct 20280

gccgtattgg atggattctc aagacaattg catttagatt atattatcat gaataaaaat 20340

agtagcacac aactacttca gcaaatattc ttttttgaaa cgccatctat cgtagtgagg 20400

acacaagtga acctataatt atcaaattta ttagtatcag tcacatgaag gactttctgt 20460

agagtgacga ttccactatc tgtggtacga acggtttcat cttctttgat gccatcaccc 20520

agatgttcta taaacttggt atcctcgtcc gatttcatat cctttgccaa ccaatacata 20580

tagctaaact caggcatatg ttccacacat cctgaacaat gaaattctcc agaagatgtt 20640

acaatgtcta gatttggaca tttggtttca accgcgttaa catatgagtg aacacaccca 20700

tacatgaaag cgatgagaaa taggattctc atcttgccaa aatatcacta gaaaaaattt 20760

atttatcaat tttaaaggta taaaaaatac ttattgttgc tcgaatattt tgtatttgat 20820

ggtatacgga agattagaaa tgtaggtatt atcatcaact gattctatgg ttttatgtat 20880

tctatcatgt ttcactattg cgttggaaat aatatcatat gcttccacat atattttatt 20940

ttgttttaac tcataatact cacgtaattc tggattattg gcatatctat gaataatttt 21000

agctccatga tcagtaaata ttaatgagaa catagtatta ccacctacca ttattttttt 21060

catctcattc aattcttaat tgcaaagatc tatataatca ttatagcgtt gacttatgga 21120

ctctggaatc ttagacgatg tacagtcatc tataatcatg gcatatttaa tacattgttt 21180

tatagcatag tcgttatcta cgatgttaga tatttctctc aatgaatcaa tcacataatc 21240

taatgtaggt ttatgacata atagcatttt cagcagttca atgtttttag attcgttgat 21300

ggcaatggct atacatgtat atccgttatt tgatctaatg ttgacatctg aaccggattc 21360

tagcagtaaa gatactagag attgtttatt atatctaaca gccttgtgaa gaagtgtttc 21420

tcctcgtttg tcaatcatgt taatgtcttt aagataaggt aggcaaatgt ttatagtact 21480

aagaattggg caagcataag acatgtcaca aagacccttt ttgtatgtat aagtgtaaaa 21540

attataacat ccatagttgg atttacatag gtgtccaatc gggatctctc catcatcgag 21600

ataattgatg gcatctccct tcctttttta gtagatattt catcgtgtaa gaatcaatat 21660

taatatttct aaagtatccg tgtatagcct ctttatttac cacagttcca tattccacta 21720

gagggatatc gccgaatgtc atatactcaa ttagtatatg ttggaggaca tccgagttca 21780

ttgttttcaa tatcaaaaag atggtttcct tatcatttct ccatagtggt acaatactac 21840

acattatttc gtgcggcttt ccattttcca aaaacaattt gaccaaatct aaatctacat 21900

ctttattgta tctataatca ctatttagat aatcagccat aattcctcga gtgcaacatg 21960

ttagatcgtc tatatatgaa taagccgtgt tatctattcc tttcattaac aatttaacga 22020

tgtctatatc tatatgagat gacttaatat aatattgaag agctgtacaa tagtttttat 22080

ctataaaaga cggcttgatt ccgtgattaa ttagacattt aacaacttcc ggacgcacat 22140

atgctctcgt atccgacttt gaatacagat gagagatgat atacagatgc aatacggtac 22200

cgcaatttcg tagttgataa tcatcatacg cgtatcagta ctcgtcctca taaagaacac 22260

tgcagccatt ttctatgaac aaatcaataa ttttaggaac aggatcattg tcattacata 22320

attttctata actgaacgat ggttttcaca tttaacactc aagtcaaatc catgttctac 22380

caacaccttt atcaagtcaa cgtctacatt tttggatttc atatagctga atatattaaa 22440

gtcatttatg ttgctaaatc cagtggcttc tagtagagcc atcgctatat cctttaactt 22500

taacatgtct actatttgtg tattcttcta atggggtagc tgtctccaat ttttgcgtaa 22560

tggattagtg ccactgtcta gtagtagttt gacgacctcg acattattac aatgctcatt 22620

aaaaaggtat gcgtgtaaag cattattctt gaattggttc ctggtatcat taggatctct 22680

gtctctcaac atctgtttaa gttcatcgag agccacctcc tcattttcca aatagtcaaa 22740

cattttgact gaatgagcta ctgtgaactc tatacaccca cacaactaat gtcattaaat 22800

atcatgtcaa aaacttgtac aattattaat aaaaataatt tagtgtttaa attttaccag 22860

ttccagattt tacacctccg ttaatacctc cattaacccc actggacgat cctcctcccc 22920

acattccacc gccaccagat gtataagttt tagatccttt attactacca tcatgtccat 22980

ggataaagac actccacatg ccgccactac cccctttaga agacatatta ataagactta 23040

aggacaagtt taacaataaa attaatcacg agtaccctac taccaaccta cactattata 23100

tgattatagt ttctattttt acagtacctt gactaaagtc tctagtcaca agagcaatac 23160

taccaaccta cactattata tgattatagt ttctattttt ataggaacgc gtacgagaaa 23220

atcaaatgtc taatttctaa cggtagtgtt gataaacgat tatcgtcaat ggatacctcc 23280

tctatcatgt cgtctatttt cttactttgt tctattaact tattagcatt atatattatt 23340

tgattataaa acttatattg cttattagcc caatctgtaa atatcggatt attaacatat 23400

cgtttctttg taggtttatt taacatgtac atcactgtaa gcatgtccgt accatttatt 23460

ttaatttgac gcatatccgc aatttctttt tcgcagtcgg ttataaattc tatatatgat 23520

ggatacatgc tacatgtgta cttataatcg actaatatga agtacttgat acatattttc 23580

agtaacgatt tattattacc acctatgaat aagtacctgt gatcgtctag gtaatcaact 23640

gtttttttaa tacattcgat ggttggtaat ttactcagaa taatttccaa tatcttaata 23700

tataattctg ctatttctgg gatatattta tctgccagta taacacaaat agtaatacat 23760

gtaaacccat attttgttat tatattaatg tctgcgccat tatctattaa ccattctact 23820

aggctgacac tatgcgactc aatacaatga taaagtatac tacatccatg tttatctatt 23880

ttgtttatat cattaatata cggcttacaa agttttagta tcgataacac atccaactca 23940

cgcatagaga aggtagggaa taatggcata atatttatta ggttatcatc attgtcatta 24000

tctacaacta agtttccatt ttttaaaata tactcgacaa ctttaggatc tctattgcca 24060

aatttttgaa aatatttatt tatatgctta aatctatata atgtagctcc ttcatcaatc 24120

atacatttaa taacattgat gtatactgta tgataagata catattctaa caatagatct 24180

tgtatagaat ctgtatatct tttaagaatt gtggatatta ggatattatt acgtaaacta 24240

ttacacaatt ctaaaatata aaacgtatca cggtcgaata atagttgatc aactatataa 24300

ttatcgattt tgtgattttt cttcctaaac tgtttacgta aatagttaga tagaatattc 24360

attagttcat gaccactata gttactatcg aataacgcgt caaatatttc ccgtttaata 24420

tcgcatttgt caagataata atagagtgtg gtatgttcac gataagtata ataacgcatc 24480

tctttttcgt gtgaaattaa atagtttatt acgtccaaag atgtagcata accatcttgt 24540

gacctagtaa taatataata atagagaact gttttaccca ttctatcatc ataatcagtg 24600

gtgtagtcgt aatcgtaatc gtctaattca tcatcccaat tataatattc accagcacgt 24660

ctaatctgtt ctattttgat cttgtatcca tactgtatgt tgctacatgt aggtattcct 24720

ttatccaata atagtttaaa cacatctaca ttgggatttg atgttgtagc gtatttttct 24780

acaatattaa taccattttt gatactattt atttctatac ctttcgaaat tagtaatttc 24840

aataagtcta tatcgatgtt atcagaacat agatattcga atatatcaaa atcattgata 24900

tttttatagt cgactgacga caataacaaa atcacgacat cgtttttgat attattattt 24960

ttcttggtaa cgtatgcctt taatggagtt tcaccatcat actcatataa tggatttgca 25020

ccactttcta tcaatgattg tgcactgctg gcatcgatgt taaatgtttt acaactatca 25080

tagagtatct tatcgttaac catgattggt tgttgatgct atcgcatttt ttggtttctt 25140

tcatttcagt tatgtatgga tttagcacgt ttgggaagca tgagctcata tgatttcagt 25200

actgtagtgt cagtactatt agtttcgatc agatcaatgt ctagatctat agaatcaaaa 25260

cacgataggt cagaagataa tgaatatctg tacgcttctt gttgtactgt aacttctggt 25320

tttgttagat ggttgcatcg tgctttaacg tcaatggtac aaattttatc ctcgctttgt 25380

gtatcatatt cgtccctact ataaaattgt atattcagat tatcatgaga tgtgtatacg 25440

ctaacggtat caataaacgg agcacaccat ttagtcataa ccgtaatcca aaaattttta 25500

aagtatatct taacgaaaga agttgtgtca ttgtctacgg tgtatggtac tagatcctca 25560

taagtgtata tatctagagt aatgtttaat ttattaaatg gttgataata tggatcctca 25620

tgacaatttc cgaagatgga aataagacat aaacacgcaa taaatctaat tgcggacatg 25680

gttactcctt aaaaaaatac gaataatcac cttggctatt tagtaagtgt catttaacac 25740

tatactcata ttaatccatg gactcataat ctctatacgg gattaacgga tgttctatat 25800

acggggatga gtagttctct tctttaactt tatacttttt actaatcata tttagactga 25860

tgtatgggta atagtgtttg aagagctcgt tctcatcatc agaataaatc aatatctctg 25920

tttttttgtt atacagatgt attacagcct catatattac gtaatagaac gtgtcatcta 25980

ccttattaac tttcaccgca tagttgtttg caaatacggt taatcctttg acctcgtcga 26040

tttccgacca atctgggcgt ataatgaatc taaactttaa tttcttgtaa tcattcgaaa 26100

taatttttag tttgcatccg tagttatccc ctttatgtaa ctgtaaattt ctcaacgcga 26160

tatctccatt aataatgatg tcgaattcgt gctgtatacc catactgaat ggatgaacga 26220

ataccgacgg cgttaatagt aatttacttt ttcatcttta catattgggt actagtttta 26280

ctatcataag tttataaatt ccacaagcta ctatggaata agccaaccat cttagtataa 26340

cacacatgtc ttaaagttta ttaattaatt acatgttgtt ttatatatat cgctacgaat 26400

ttaaacagag aaatcagttt aggaaaaaaa attatctatc tacatcatca cgtctctgta 26460

ttctacgata gagtgctact ttaagatgcg acagatctgt gtcatcaaat atatactcca 26520

ttaaaatgat tattccggca gcgaacttga tattggatat atcacaacct ttgttaatat 26580

ctacgacaat agacagcagt cccatggttc cataaacagt gagtttatct ttctttgaag 26640

agatattttg tagagatctt ataaaactgt cgaatgacat cgcatttata tctttagcta 26700

aatcgtatat gttaccatcg taatatctaa ccgcgtctat cttaaacgtt tccatcgctt 26760

taaagacgtt tccgatagat ggtctcattt catcagtcat actgagccaa caaatataat 26820

cgtgtataac atctttgata gaatcagact ctaaagaaaa cgaatcggct ttattatacg 26880

cattcatgat aaacttaatg aaaaatgttt ttcgttgttt aagttggatg aatagtatgt 26940

cttaataatt gttattattt cattaattaa tatttagtaa cgagtacact ctataaaaac 27000

gagaatgaca taactagtta tcaaagtgtc taggacgcgt aattttcata tggtatagat 27060

cctgtaagca ttgtctgtat tctggagcta ttttctctat cgcattagtg agttcagaat 27120

atgttataaa tttaaatcga ataacgaaca taactttagt aaagtcgtct atattaactc 27180

ttttattttc tagccatcgt aataccatgt ttaagatagt atattctcta gttactacga 27240

tctcatcgtt gtctagaata tcacatactg aatctacatc caattttaga aattggtctg 27300

tgttacatat ctcttctata ttattgttga tgtattgtcg tagaaaacta ttacgtagac 27360

cattttcttt ataaaacgaa tatatagtac tccaattatc tttaccgata tatttgcaca 27420

cataatccat tctctcaatc actacatctt taagattttc gttgttaaga tatttggcta 27480

aactatataa ttctattaga tcatcaacag aatcagtata tatttttcta gatccaaaga 27540

cgaactcttt ggcgtcctct ataatattcc cagaaaagat attttcgtgt tttagtttat 27600

cgagatctga tctgttcata tacgccatga ttgtacggta cgttatgata accgcataaa 27660

ataaaaatcc attttcattt ttaaccaata ctattcataa ttgagattga tgtaatactt 27720

tgttactttg aacgtaaaaa cagtacacgg atccgtatct ccaacaagca cgtagtaatc 27780

aaatttggtg ttgttaaact tcgcaatatt catcaattta gatagaaact tatactcatc 27840

atctgtttta ggaatccatg tattattacc actttccaac ttatcattat cccaggctat 27900

gtttcgtcca tcatcgttgc gcagagtgaa taattctttt gtattcggta gttcaaatat 27960

atgatccatg catagatcag taaagctatt gtagatgtga tttttcctaa atctaatata 28020

aaactcgttt actagcaaac actttcctga tttatcgacc aagacacata tggtttctaa 28080

atctatcaag tggtggggat ccatagttat gacgcagtaa catatattat tacattcttg 28140

actgtcgcta atatctaaat atttattgtt atcgtattgg attctgcata tagatggctt 28200

gtatgtcaaa gatatagaac acataaccaa tttatagtcg cgctttacat tctcgaatct 28260

aaagttaaga gatttagaaa acattatatc ctcggatgat gttatcactg tttctggagt 28320

aggatatatt aaagtcttta cagatttcgt ccgattcaaa taaatcacta aataatatcc 28380

cacattatca tctgttagag tagtatcatt aaatctatta tattttatga aagatatatc 28440

actgctcacc tctatatttc gtacattttt aaactgtttg tataatatct ctctgataca 28500

atcagatata tctattgtgt cggtagacga taccgttaca tttgaattaa tggtgttcca 28560

ttttacaact tttaacaagt tgaccaattc atttctaata gtatcaaact ctccatgatt 28620

aaatatttta atagtatcca ttttatatca ctacggacac aaagtagctg acataaacca 28680

ttgtataatt tttatgtttt atgtttatta gcgtacacat tttggaagtt ccggcttcca 28740

tgtatttcct ggagagcaag tagatgatga ggaaccagat agtttatatc cgtacttgca 28800

cttaaagtct acattgtcgt tgtatgagta tgatctttta aacccgctag acaagtatcc 28860

gtttgatatt gtaggatgtg gacatttaac aatctgacac gtgggtggat cggaccattc 28920

tcctcctgaa cacaggacac tagagttacc aatcaacgaa tatccactat tgcaactata 28980

agttacaacg ctcccatcgg tataaaaatc ctcgtatccg ttatgtcttc cgttggatat 29040

agatggaggg gattggcatt taacagattc acaaataggt gcctcgggat tccataccat 29100

agatccagta gatcctaatt cacaatacga tttagattca ccgatcaaat gatatccgct 29160

attacaagag tacgttatac tagagccaaa gtctactcca ccaatatcaa gttggccatt 29220

atcgatatct cgaggcgatg ggcatctccg tttaatacat tgattaaaga gtgtccatcc 29280

agtacctgta catttagcat atataggtcc cattttttgc tttctgtatc caggtagaca 29340

tagatattct atagtgtctc ctatgttgta attagcatta gcatcagtct ccacactatt 29400

cttaaatttc atattaatgg gtcgtgacgg aatagtacag catgatagaa cgcatcctat 29460

tcccaacaat gtcaggaacg tcacgctctc caccttcata tttatttatc cgtaaaaatg 29520

ttatcctgga catcgtacaa ataataaaaa gcccatatat gttcgctatt gtagaaattg 29580

tttttcacag ttgctcaaaa acgatggcag tgacttatga gttacgttac actttggagt 29640

ctcatcttta gtaaacatat cataatattc gatattacga gttgacatat cgaacaaatt 29700

ccaagtattt gattttggat aatattcgta ttttgcatct gctataatta agatataatc 29760

accgcaagaa cacacgaaca tctttcctac atggttaaag tacatgtaca attctatcca 29820

tttgtcttcc ttaactatat atttgtatag ataattacga gtctcgtgag taattccagt 29880

aattacatag atgtcgccgt cgtactctac agcataaact atactatgat gtctaggcat 29940

gggagacttt tttatccaac gatttttagt gaaacattcc acatcgttta atactacata 30000

tttttcatac gtggtataaa ctccacccat tacatatata tcatcgttta cgaataccga 30060

cgcgcctgaa tatctaggag taattaagtt tggaagtctt atccatttcg aagtgccgtg 30120

tttcaaatat tctgccacac ccgttgaaat agaaaattct aatcctccta ttacatataa 30180

ctttccatcg ttaacacaag tactaacttc tgattttaac gacgacatat tagtaaccgt 30240

tttccatttt ttcgtttcaa gatctacccg cgatacggaa taaacatgtc tattgttaat 30300

catgccgcca ataatgtata gacaattatg taaaacattt gcattataga attgtctatc 30360

tgtattaccg actatcgtcc aatattctgt tctaggagag taatgggtta ttgtggatat 30420

ataatcagag tttttaatga ctactatatt atgttttata ccatttcgtg tcactggctt 30480

tgtagatttg gatatagtta atcccaacaa tgatatagca ttgcgcatag tattagtcat 30540

aaacttggga tgtaaaatgt tgatgatatc tacatcgttt ggatttttat gtatccactt 30600

taataatatc atagctgtaa catcctcatg atttacgtta acgtcttcgt gggataagat 30660

agttgtcagt tcatcctttg ataattttcc aaattctgga tcggatgtca ccgcagtaat 30720

attgttgatt atttctgaca tcgacgcatt atatagtttt ttaattccat atcttttaga 30780

aaagttaaac atccttatac aatttgtgaa attaatatta tgaatcatag tttttacaca 30840

tagatctact acaggcggaa catcaattat tacggcagca actagtatca tttctacatt 30900

gtttatggtg atgtttatct tcttccagcg catatagtct aatagcgatt caaacgcgtg 30960

atagtttata ccattcaata taatcgcttc atcctttaga tggtgatcct gaatgcgttt 31020

aaaaaaatta tacggagacg ccgtaataat ttccttattc acttgtataa tttccccatt 31080

gatagaaaat atcacgcttt ccattcttaa agtactataa gtaattatag tataatgtaa 31140

acgtttatat attcaatatt tttataaaaa tcattttgac attaattcct ttttaaattt 31200

ccgtctatca tctatagaaa cgtattctat gaatttataa aatgctttta cgtgtcctat 31260

cgtaggcgat agaaccgcta aaaagcctat cgaatttcta caaaagaatc tgttatatgg 31320

tatagggaga gtataaaaca ttaaatgtcc gtacttatta aagtattcag tagccaatcc 31380

taactctttc gaatacttat taatggctct tgttctgtac gaatctattt ttttgaacaa 31440

cggacctagt ggtatatctt gttctatgta tctaaaataa tgtctgacta gatccgttag 31500

tttaatatcc tcagtcatct tgtctagaat ggcaaatcta actgcgggtt taggctttag 31560

tttagtttct atatctacat ctatgtcttt atctaacacc aaaaatataa tagctaatat 31620

tttattacaa tcatccggat attcttctac gatctcacta actaatgttt ctttggttat 31680

actagtatag tcactatcgg acaaataaag aaaatcagat gatcgatgaa taatacattt 31740

aaattcatca tctgtaagat ttttgagatg tctcattaga atattattag ggttagtact 31800

cattatcatt aggcagctat tacttatttt attatttttc accatataga tcaatcatta 31860

gatcatcaaa atatgtttca atcatcctaa agagtatggt gaatgactct tcccatctaa 31920

tttctgaacg ttcaccaatg tctctagcca ctttggcact aatagcgatc attcgcttag 31980

cgtcttctat attattaact ggttgattca atctatctag caatggaccg tcggacagcg 32040

tcattctcat gttcttaatc aatgtacata catcgccgtc atctaccaat tcatccaaca 32100

acataagctt tttaaaatca tcattataat aggtttgatc gttgtcattt ctccaaagaa 32160

tatatctaat aagtagagtc ctcatgctta gtaatttaac tattttagtt aacaactatt 32220

ttttatgtta aatcaattag tacaccgcta tgtttaatac ttattcatat tttagttttt 32280

aggattgaga atcaatacaa aaattaatgc atcattaatt ttagaaatac ttagtttcca 32340

cgtagtcaat gaaacatttg aactcatcgt acaggacgtt ctcgtacagg acgtaactat 32400

aaaccggttt atatttgttc aagatagata caaatccgat aacttttttt acgaattcta 32460

cgggatccac tttaaaagtg tcataccggg ttctttttat ttttttaaac agatcaatgg 32520

tgtgatgttg attaggtctt ttacaaattt gatatagaat agcgtttaca tattctccat 32580

aatggtcaat cgccatttgt tcgtatgtca taaattcttt aattatatga cactgtgtat 32640

tatttagttc atccttgttc attgttagga atctatccaa aatggcaatt atactagaac 32700

tataggtgcg ttgtatacac atattgatgt gtctgtttat acaatccatg atatttggat 32760

ccatgctact accttcgggt aaaattgtag catcatatac catttctagt actttaggtt 32820

cattattatc cattgcagag gacgtcatga tcgaatcata aaaaaatata ttatttttat 32880

gttattttgt taaaaataat catcgaatac ttcgtaagat actccttcat gaacataatc 32940

agttacaaaa cgtttatatg aagtaaagta tctacgattt ttacaaaagt ccggatgcat 33000

aagtacaaag tacgcgataa acggaataat aatagattta tctagtctat ctttttctat 33060

agctttcata gttagataca tggtctcaga agtaggatta tgtaacatca gcttcgataa 33120

aatgactggg ttatttagtc ttacacattc gctcatacat gtatgaccgt taactacaga 33180

gtctacacta aaatgattga acaatagata gtctaccatt gtttcgtatt cagatagtac 33240

agcgtagtac atggcatctt cacaaattat atcattgtct aatagatatt tgacgcatct 33300

tatggatccc acttcaacag ccatcttaaa atcggtagaa tcatattgct ttcctttatc 33360

attaataatt tctagaacat catctctatc ataaaagata caaatattaa ctgtttgatc 33420

cgtaataaca ttgctagtcg atagcaattt gttaataaga tgcgctgggc tcaatgtctt 33480

aataagaagt gtaagaggac tatctccgaa tttgttttgt ttattaacat ccgttgatgg 33540

aagtaaaaga tctataatgt ctacattctt gactgtttta gagcatacaa tatggagagg 33600

tgtatttcca tcatgatctg gttttgaggg actaattcct agtttcatca tccatgagat 33660

tgtagaagct tttggattgt ctgacataag atgtctatga atatgatttt tgccaaattt 33720

atccactatc ctggcttcga atccgatgga cattattttt ttaaacactc tttctgaagg 33780

atctgtacac gccaacaacg gaccacatcc ttcttcatca accgagttgt taatcttggc 33840

tccatactgt accaataaat ttattctctc tatgacttca tcatctgttc ccgagagata 33900

atatagaggc gttttatgct gtttatcaca cgcgtttgga tctgcgccgt gcgtcagcag 33960

catcgcgact attctattat tattaatttt agaagctata tgcaatggat aatttccatc 34020

atcatccgtc tcatttggag agtatcctct atgaagaagt tcttcgacaa atcgttcatc 34080

tagtccttta attccacaat acgcatgtag aatgtgataa ttatttccag aaggttcgat 34140

agcttgtagc atattcctaa atacatctaa atttttacta ttatatttgg cataaagaga 34200

tagataatac tcggccgaca taatgttgtc cattgtagta taaaaattaa tatttctatt 34260

tctatttctg tatatttgca acaatttact ctctataaca aatatcataa cttagttctt 34320

ttatgtcaag aaggcactgg tttagttcat ctataaatgt cacgccataa ctaccacgca 34380

tgccatactc agaattatga taaagatatt tatccttggg gtgtaggtaa tggggattaa 34440

tctttgttgg atcagtctct aagttaacac atgtcacaca tgatccattt atagttatat 34500

cacacgatga tgatttatga attgattccg gaagatcgct atcgtatttt gtggttccac 34560

aattcatttc catacatgtt attgtcacac taatattatg atgaacttta tctagccgct 34620

gagtggtaaa caacagaaca gatagtttat tatctttacc aacaccctca gccgctgcca 34680

caaatctctg atccgtatcc atgatggtca tgtttatttc tagtccgtat ccagtcaaca 34740

ctatgttagc atttctgtcg atatagcttt cactcatatg acactcacca ataatagtag 34800

aattaatgtc gtaatttaca ccaatagtga gttcggcggc aaagtaccaa taccggtaat 34860

cttgtcgagg aggacatata gtattcttgt attctaccga atacccgaga gatgcgatac 34920

aaaagagtaa gactaatttg taaaccatct tactcaaaat atgtaacaat agtacgatgc 34980

aatgagtaag acaataggaa atctatctta tatacacata attattctat caattttacc 35040

aattagttag tgtaatgtta acaaaaatgt gggagaatct aattagtttt tctttacaca 35100

attgacgtac atgagtttga gttccttgtt tttgctaatt atttcatcca atttattatt 35160

cttgacgata tcgagatctt ttgtatagga gtcagacttg tattcaacat gcttttctat 35220

aatcatttta gctatttcgg catcatccaa tagtacattt tccagattag cagaatagat 35280

attaatgtcg tatttgaaca gagcctgtaa catctcaatg tctttattat ctatagccaa 35340

tttaatgtcc ggaatgaaga gaagggaatt attggtgttt gtcgacgtca tatagtcgag 35400

caagagaatc atcatatcca cgtgtccatt ttttatagtg atgtgaatac aactaaggag 35460

aatagccaga tcaaaagtag atggtatctc tgaaagaaag taggaaacaa tacttacatc 35520

attaagcatg acggcatgat aaaatgaagt tttccatcca gttttcccat agaacatcag 35580

tctccaattt ttcttaacaa acagttttac cgtttgcatg ttaccactat caaccgcata 35640

atacaatgca gtgtttccct tgtcatcaaa ttgtgaatca tccagtccac tgaatagcaa 35700

aatctttact attttagtat cttccaatgt ggctgcctga tgtaatggaa attcattctc 35760

tagaagattt ttcaatgctc cagcgttcaa caacgtacat actagacgca cgttattatc 35820

agctattgca taatacaagg cactatgacc gttgatatcc gccttaaatg catctttgct 35880

agagagaaag cttttcagct gcttagactt ccaagtatta attcgtgaca gatccatgtc 35940

tgaaacaaga cgctaattag tgtatatttt ttcatttttt ataattttgt catattgcac 36000

cagaattaat aatatctcta atagatctga ttagtagata catggctatc gcaaaacaac 36060

atatacacat ttaataaaaa taatatttat taagaaaatt cagatttcac gtacccatca 36120

atataaataa aataatgatt ccttacaccg tacccatatt aaggagattc caccttaccc 36180

ataaacaata taaatccagt aatatcatgt ctgatgatga acacaaatgg tgtattaaat 36240

tccagttttt caggagatga tctcgccgta gctaccataa tagtagatgc ctctgctaca 36300

gttccttgtt cgtcgacatc tatctttgca ttctgaaaca ttttataaat atataatggg 36360

tccctagtca tatgtttaaa cgacgcatta tctggattaa acatactagg agccatcatt 36420

tcggctatcg acttaatatc cctcttattt tcgatagaaa atttagggag tttaagattg 36480

tacactttat tccctaattg aaacgaccaa tagtctaatt ttgcagccgt gatagaatct 36540

gtgaaatggg tcatattatc acctattgcc aggtacatac taatattagc atccttatac 36600

ggaaggcgta ccatgtcata ttctttgtca tcgattgtga ttgtatttcc ttgcaattta 36660

gtaactacgt tcatcatggg aaccgttttc gtaccgtact tattagtaaa actagcattg 36720

cgtgttttag tgatatcaaa cggatattgc catatacctt taaaatatat agtattaatg 36780

attgcccata gagtattatt gtcgagcata ttagaatcta ctacattaga cataccggat 36840

ctacgttcta ctatagaatt aattttatta accgcatctc gtctaaagtt taatctatat 36900

aggccgaatc tatgatattg ttgataatac gacggtttaa tacacacagt attatctacg 36960

aaactttgat aagttagatc agtgtacgta tatttagatg ttttcagctt agctaatcct 37020

gatattaatt ctgtaaatgc tggacccaga tctctttttc tcaaatccat agtcttcaat 37080

aattctattc tagtattacc tgatgcaggc aatagcgaca taaacataga aaacgaataa 37140

ccaaacggtg agaagacaat attatcatct tgaatatttt tatacgctac tataccggca 37200

ttggtaaatc cttgtagacg ataggcggac gctgaacacg ctaacgatag tatcaataac 37260

gcaatcatga ttttatggta ttaataatta accttatttt tatgttcggt ataaaaaaat 37320

tattgatgtc tacacatcct tttgtaattg acatctatat atccttttgt ataatcaact 37380

ctaatcactt taacttttac agttttccct accagtttat ccctatattc aacatatcta 37440

tccatatgca tcttaacact ctctgccaag atagcttcag agtgaggata gtcaaaaaga 37500

taaatatata gagcataatc attctcgtat actctgccct ttattacatc acccgcattg 37560

ggcaacgaat aacaaaatgc aagcatcttg ttaacgggct cgtaaattgg gataaaaatt 37620

atgtttttat tgtcttatat ctattttatt caagagaata ttcaggaatt tctttttccg 37680

gttgtatctc atcgcagtat atatcatttg tacattgttt tatatttttt aatagtttac 37740

accttttagt aggactagta tcgtacaatt catagctgta ttttgaattc caatcacgca 37800

taaaaatatc ttccaattgt tgacgaagac ctaatccatc atccggtgta atattaatag 37860

atgctccaca tgtatccgta aagtaatttc ctgtccaatt tgaggtacct atataggccg 37920

ttttatcggt taccatatat ttggcatggt ttaccctaga atacggaatg ggaggatcag 37980

catctggtac aataaatagc tttacttcta tatttatgtt tttagatttt agcatagcga 38040

tagatcttaa aaagtttctc atgataaacg aagatcgttg ccagcaacta atcaatagct 38100

taacggatac ttgtctgtct atagcggatc ttcttaattc atcttctata taaggccaaa 38160

acaaaatttt acccgccttc gaataaataa tagggataaa gttcataaca gatacataaa 38220

cgaatttact cgcatttcta atacatgaca ataaagcggt taaatcattg gttctttcca 38280

tagtacatag ttgttgcggc gcagaagcaa taaatacaga gtgtggaacg ccgcttacgt 38340

taatactaag aggatgatct gtattataat acgacggata aaagtttttc caattatatg 38400

gtagattgtt aactccaaga taccagtata cctcaaaaat ttgagtgaga tccgctgcca 38460

agttcctatt attgaagatc gcaataccca attctttgac ctgagttagt gatctccaat 38520

ccatgttagc gcttcctaaa taaatatgtg tattatcaga tatccaaaat tttgtatgaa 38580

gaactcctcc taggatattt gtaatatcta tgtatcgtac ttcaactccg gccatttgta 38640

gtctttcaac atcctttaat ggtttgttag atttattgac ggctactcta actcgtactc 38700

ctcttttggg taattgtaca atctcgttta atattatcgt gccgaaattc gtacccactt 38760

catccgataa actccaataa aaagatgata tatctagtgt ttttgtggta ttggatagaa 38820

tttccctcca catgttaaat gtagacaaat atactttatc aaattgcata cctataggaa 38880

tagtctctgt aatcactgcg attgtattat ccggattcat tttatttgtt aaaaaataat 38940

cctatatcac ttcactctat taaaaatcca agtttctatt tctttcatga ctgatttttt 39000

aacttcatcc gtttccttat gaagatgatg tttggcacct tcataaattt ttatttctct 39060

attacaattt gcatgttgca tgaaataata tgcacctaaa acatcgctaa tcttattgtt 39120

tgttccctgg agtatgagag tcggggggtg ttaatcttgg aaattatttt tctaaccttg 39180

ttggtagcct tcaagacctg actagcaaat ccagccttaa ttttttcatg attgactaat 39240

gggtcgtatt ggtatttata aacttcatcc atatctctag atactgattc tggacatagc 39300

tttccgactg gcgcatttgg tgtgatggtt cccataagtt tggcagctag cagattcagt 39360

cttgaaacag catctgcatt aactagagga gacattagaa tcattgctgt aaacaagttt 39420

ggattatcgt aagaggctag ctcccatgga atgacccaat aagtagattt aatagttacc 39480

acgtgctgta ccaaagtcat caatcatcat tttttcacca ttacttcttc catgtccaat 39540

atgatcatgt gagaatacta aaattcctaa cgatgatatg ttttcagcta gttcgtcata 39600

acgtccagaa tgtttaccag ctccatgact tataaatact aatgccttag gatatgtaat 39660

aggtttccaa tatttacaat atatgtaatc attgtccaga ttgaacatac agtttgcact 39720

catgattcac gttatataac tatcaatatt aacagttcgt ttgatgatca tattattttt 39780

atgttttatt gataattgta aaaacataca attaaatcaa tatagaggaa ggagacggct 39840

actgtctttt gtgagatagt catggcgact aaattagatt atgaggatgc tgttttttac 39900

tttgtggatg atgataaaat atgtagtcgc gactccatca tcgatctaat agatgaatat 39960

attacgtgga gaaatcatgt tatagtgttt aacaaagata ttaccagttg tggaagactg 40020

tacaaggaat tgatgaagtt cgatgatgtc gctatacggt actatggtat tgataaaatt 40080

aatgagattg tcgaagctat gagcgaagga gaccactaca tcaattttac aaaagtccat 40140

gatcaggaaa gtttattcgc taccatagga atatgtgcta aaatcactga acattgggga 40200

tacaaaaaga tttcagaatc tagattccaa tcattgggaa acattacaga tctgatgacc 40260

gacgataata taaacatctt gatacttttt ctagaaaaaa aattgaattg atgatatagg 40320

ggtcttcata acgcataatt attacgttag cattctatat ccgtgttaaa aaaaattatc 40380

ctatcatgta tttgagagtt ttatatgtag caaacatgat agctgtgatg ccaataagct 40440

ttagatattc acgcgtgcta gtgttaggga tggtattatc tggtggtgaa atgtccgtta 40500

tataatctac aaaacaatca tcgcatatag tatgcgatag tagagtaaac atttttatag 40560

tttttactgg attcatacat cgtctaccca attcggttat aaatgaaatt gtcgccaatc 40620

ttacacccaa ccccttgtta tccattagta tagtattaac ttcgttattt atgtcataaa 40680

ctgtaaatga ttttgtagat gccatatcat acatgatatt catgtcccta ttataatcat 40740

tactaacttt atcacaatat atgttgataa tatctatata tgatctagtc tttgtgggca 40800

actgtctata caagtcgtct aaacgttgtt tactcatata gtatcgaaca gccatcatta 40860

catggtcccg tttcgttgat agataatcga gtatgttagt ggacttgtca aatctatata 40920

ccatattttc tggaagtgga tatacatagt cgtgatcaac attattgcta gcctcatctt 40980

ctatatcctg tactatacca ttatctatat catctacata atctacgata ttattacaca 41040

taaacatcga caacatacta ttgtttatta tctaagtcct gttgatccaa acccttgatc 41100

tcctctattt gtactatcta gagattgtac ttcttccagt tctggataat atatacgttg 41160

atagattagc tgagctattc tatctccagt atttacatta aacgtacatt ttccattatt 41220

aataagaatg actcctatgt ttcccctata atcttcgtct attacaccac ctcctatatc 41280

aatgcctttt agtgacagac cagacctagg agctattcta ccatagcaaa tcttaggcat 41340

ggacatacta atatctgtct taattaactg tctttctcct ggagggatag tataatcgta 41400

agcgctatac aaatcatatc cggcagcacc cggcgattgc ctagtaggag atttagctct 41460

gttagtttcc ttaacaaatc taactggtga gttaatattc atgttgaaca taaaactaat 41520

attttatttc aaaattattt accatcccat atattccatg aataagtgtg atgattgtac 41580

acttctatag tatctatata cgattcacga taaaatcctc ctatcaatag cagtttatta 41640

tccactatga tcaattctgg attatccctc ggataaatag gatcatctat cagagtccat 41700

gtattgctgg attcacaata aaattccgca tttctaccaa ccaagaataa ccttctaccg 41760

aacactaacg cgcatgattt ataatgagga taataagtgg atggtccaaa ctgccactga 41820

tcatgattgg gtagcaaata ttctgtagtt gtatcagttt cagaatgtcc tcccattacg 41880

tatataacat tgtttataga tgccactgct ggattacatc taggtttcag aagactcggc 41940

atattaaccc aagcagcatc cccgtggaac caacgctcaa cagatgtggg atttggtaga 42000

cctcctacta cgtataattt attgttagcg ggtatcccgc tagcatacag tctggggcta 42060

ttcatcggag gaattggaat ccaattgttt gatatataat ttacagctat agcattgtta 42120

tgtatttcat tgttcatcca tccaccgatg agatatacta cttctccaac atgagtactt 42180

gtacacatat ggaatatatc tataatttga tccatgttca taggatactc tatgaatgga 42240

tacttgtatg atttgcgtgg ttgtttatca caatgaaata ttttggtaca gtctagtatc 42300

cattttacat tatttatacc tctgggagaa agataatttg acctgattac atttttgata 42360

aggagtagca gatttcctaa tttatttctt cgcctcatat accacttaat gacaaaatca 42420

actacataat cctcatctgg aacatttagt tcatcgcttt ctagaataag tttcatagat 42480

agataatcaa aattgtctat gatgtcatct tccagttcca aaaagtgttt ggcaataaag 42540

tttttagtat gacataagag attggatagt ccgtattcta tacccatcat gtaacactcg 42600

acacaatatt cctttctaaa atctcgtaag ataaagttta tacaagtgta gatgataaat 42660

tctacagagg ttaatataga agcacgtaat aaattgacga cgttatgact atctatatat 42720

acctttccag tatatgagta aataactata gaagttaaac tgtgaatgtc aaggtctaga 42780

caaaccctcg taactggatc tttatttttc gtgtattttt gacgtaaatg tgtgcgaaag 42840

taaggagata actttttcaa tatcgtagaa ttgactatta tattgcctcc tatggcatca 42900

ataattgttt tgaatttctt agtcatagac aatgctaata tattcttaca gtacacagta 42960

ttgacaaata tcggcattta tgtttcttta aaagtcaaca tctagagaaa aatgattatc 43020

tttttgagac ataactccca ttttttggta ttcacccaca cgtttttcga aaaaattagt 43080

ttttccttcc aatgatatat tttccatgaa atcaaacgga ttggtaacat tataaatttt 43140

tttaaatccc aattcagaaa tcaatctatc cgcgacgaat tctatatatg ttttcatcat 43200

ttcacaattc attcctataa gtttaactgg aagagccgca gtaagaaatt cttgttcaat 43260

ggatactgca tctgttataa tagatctaac ggtttcttca ctcggtggat gcaataaatg 43320

tttaaacatc aaacatgcga aatcgcagtg cagaccctcg tctctactaa ttagttcgtt 43380

ggaaaacgtg agtccgggca ttaggccacg ctttttaagc caaaatatgg aagcgaatga 43440

tccggaaaag aagattcctt ctactgcagc aaaggcaata agtctctctc cataaccggc 43500

gctgtcatgt atccactttt gagcccaatc ggccttcttt tttacacaag gcatcgtttc 43560

tatggcatta aagagatagt ttttttcatt actatcttta acataagtat cgatcaaaag 43620

actatacatt tccgaatgaa tgttttcaat ggccatctga aatccgtaga aacatctagc 43680

ctcggtaatc tgtacttctg tacaaaatcg ttccgccaaa ttttcattca ctattccgtc 43740

actggctgca aaaaacgcca atacatgttt tataaaatat ttttcgtctg gtgttagttt 43800

attccaatca ttgatatctt tagatatatc tacttcttcc actgtccaaa atgatgcctc 43860

tgccttttta tacatgttcc agatgtcatg atattggatt gggaaaataa caaatctatt 43920

tggatttggt gcaaggatgg gttccataac taaattaaca ataacaataa attttttttc 43980

agttatctat atgcctgtac ttggatcttt tgtacatcga tatcgccgca atcactacaa 44040

taattacaag tattattgat agcattgtta ttagtactat cataattaaa ttatctacat 44100

tcatgggtgc tgaataatcg ttattatcat cattatcatt ttgtaattgt gacatcatac 44160

tagataaatc gtttgcgaga ttgttgtggg aagcgggcat ggaggatgca ttatcattat 44220

tatttaacgc cttccatttg gattcacaaa tgttacgcac attcaacatt ttatggaaac 44280

tataattttg tgaaaacaga taacaagaaa actcgtcatc gttcaaattt ttaacgatag 44340

taaaccgatt aaacgtcgag ctaatttcta acgctagcga ctctgttgga tatgggtttc 44400

cagatatata tcttttcagt tcccctacgt atctataatc atctgtagga aatggaagat 44460

atttccattt atctactgtt cctaatatca tatgtggtgg tgtagtagaa ccattaagcg 44520

cgaaagatgt tatttcgcat cgtattttaa cttcgcaata atttctggtt agataacgca 44580

ctctaccagt caagtcaatg atattagcct ttacagatat attcatagta gtcgtaacga 44640

tgactccatc ttttagatgc gatactcctt tgtatgtacc agaatcttcg tacctcaaac 44700

tcgatatatt taaacaagtt aatgagatat taacgcgttt tatgaatgat gatatataac 44760

cagaagtttt atcctcggtg gctagcgcta taaccttatc attataatac caactagtgt 44820

gattaatatg tgacacgtca gtgtgggtac aaatatgtac attatcgtct acgtcgtatt 44880

cgatacatcc gcatacagcc aacaaatata aaatgacaaa tactctaacg acgttcgtac 44940

ccatcttgat gcggtttaat aaatgttttg atttcaattt attgtaaaaa aagattcggt 45000

tttatactgt tcgatattct cattgcttat attttcatct atcatctcca cacagtcaaa 45060

tccgtggtta gcatgcacct catcaaccgg taaaagacta tcggactctt ctatcattat 45120

aactctagaa tatttaattt ggtcattatt aatcaagtca attatcttat ttttaacaaa 45180

cgtgagtatt ttactcattt tttataaaaa cttttagaaa tatacagact ctatcgtgtg 45240

tctatatctt ctttttatat ccaatgtatt tatgtctgat ttttcttcat ttatcatata 45300

taatggtcca aattctacac gtgcttcgga ttcatccaga tcattaaggt tcttataatt 45360

gtaacatcct tctcttccct cttctacatc ttccttctta ttcttattct tagcgtcaca 45420

gaatctacca cagcaggatc ccatgacgag cgtcatatta aactaatcca ttttcaatta 45480

taatatatga ttagtaatga ccattaaaat aaaaaatatt cttcataacc ggcaagaaag 45540

tgaaaagttc acattgaaac tatgtcagta gtatacatca tgaaatgaga tgaaatgaga 45600

tgaaatgatg atatatatac tctattttgg tggaggatta tatgatataa ttcgtggata 45660

atcattttta agacacattt ctttattcgt aaatcttttc acgttaaatg agtgtccata 45720

ttttgcaatt tcttcatatg atggcggtgt acgtggacga ggctgctcct gttcttgttg 45780

tagtcgccga ctgtcgtgtc tgcgtttaga tccctccatt atcgcgattg cgtagatgga 45840

gtactattat ataccttgta attaaatttt tttattaatt aaacgtataa aaacgttccg 45900

tatctgtatt taagagccag atttcgtcta atagaacaaa tagctacagt aaaaataact 45960

agaataattg ctacacccac tagaaaccac ggatcgtaat acggcaatcg gttttcgata 46020

ataggtggaa cgtatatttt atttaaggac ttaacaattg tctgtaaacc acaatttgct 46080

tccgcggatc ctgtattaac tatctgtaaa agcatatgtt gaccgggcgg agccgaacat 46140

tctccgatat ctaatttctg tatatctata atattattaa cctccgcata cgcattacag 46200

ttcttttcta gcttggatac cgcactaggt acatcgtcta gatctattcc tatttcctca 46260

gcgatagctc ttctatcctt ttccggaagc aatgaaatca cttcaataaa tgattcaacc 46320

atgagtgtga aactaagtcg agaattactc atgcatttgt tagttattcg gagcgcgcaa 46380

tttttaaact gtcctataac ctctcctata tgaatagcac aagtgacatt agtagggata 46440

gaatgttgag ctaatttttg taaataacta tctataaaaa gattatacaa agttttaaac 46500

tctttagttt ccgccattta tccagtctga gaaaatgtct ctcataataa atttttccaa 46560

gaaactaatt gggtgaagaa tggaaacctt taatctatat ttatcacagt ctgtcttggt 46620

acacatgatg aattcttcta atgccgtact aaattcgata tctttttcga tttctggata 46680

tgtttttaat aaagtatgaa caaagaaatg gaaatcgtaa taccagttat gttcaacttt 46740

gaaattgttt tttattttct tgttaatgat tccagccact tgggaaaagt caaagtcgtt 46800

taatgccgat ttaatacgtt cattaaaaac aaacttttta tcctttagat gaattattat 46860

tggttcattg gaatcaaaaa gtaagatatt atcgggttta agatctgcgt gtaaaaagtt 46920

gtcgcagcat ggtagttcgt aaattttaat gtataacaga gccatctgta aaaagataaa 46980

ctttatgtat tgtaccaaag atttaaatcc taatttgata gctagctcgg tatctacttt 47040

atctgccgaa tacagtgcta ggggaaaaat tataatgttt cctctttcat attcgtagtt 47100

agttctcttt tcatgttcga aaaagtgaaa catgcggtta aaatagttta taacattaat 47160

attactgtta ataactgccg gataaaagtg ggatagtaat ttcacgaatt tgatactgtc 47220

ctttctctcg ttaaacgcct ttaaaaaaac tttagaagaa tatctcaatg agagttcctg 47280

accatccata gtttgtatca ataatagcaa catatgaaga acccgtttat acagagtatg 47340

taaaaatgtt aatttatagt ttaatcccat ggcccacgca cacacgatta attttttttc 47400

atctcccttt agattgttgt atagaaattt gggtactgtg aactccgccg tagtttccat 47460

gggactatat aattttgtgg cctcgaatac aaattttact acatagttat ctatcttaaa 47520

gactatacca tatcctcctg tagatatgtg ataaaaatcg tcgtttatag gataaaatcg 47580

tttatccttt tgttggaaaa aggatgaatt aatgtaatca ttctcttcta tctttagtag 47640

tgtttcctta ttaaaattct taaaataatt taacaatcta actgacggag cccaattttg 47700

gtgtaaatct aattgggaca ttatattgtt aaaatacaaa cagtctccta atataacagt 47760

atctgataat ctatggggag acatccattg atattcaggg gatgaatcat tggcaacacc 47820

catttattgt acaaaaagcc ccaatttaca aacgaaagtc caggtttgat agagacaaac 47880

aattaactat tttgtctctg tttttaacac ctccacagtt tttaatttct ttagtaatga 47940

aattattcac aatatcagta tcttctttat ctaccagaga ttttactaac ttgataacct 48000

tggctgtctc attcaatagg gtagtaatat ttgtatgtgt gatattgata tctttttgaa 48060

ttgtttcttt tagaagtgat tctttgatgg tgccagcata cgaattacaa taatgcagaa 48120

actcggttaa catgcaggaa ttatagtaag ccaattccaa ttgttgcctg tgttgtatta 48180

gagtgtcaat atgagcaatg gtgtccttgc gtttctctga tagaatgcga gcagcgattt 48240

tggcgttatc atttgacgat atttctggaa tgacgaatcc tgtttctact aactttttgg 48300

taggacaaag tgaaacaatc aagaagatag cttctcctcc tatttgtgga agaaattgaa 48360

ctcctctaga tgatctactg acgatagtat ctccttgaca gatattggac cgaattacag 48420

aagtacctgg aatgtaaagc cctgaaaccc cctcattttt taagcagatt gttgccgtaa 48480

atcctgcact atgcccaaga tagagagctc ctttggtgaa tccatctcta tgtttcagtt 48540

taaccaagaa acagtcagct ggtctaaaat ttccatctct atctaataca gcatctaact 48600

tgatgtcagg aactatgacc ggtttaatgt tatatgtaac attgagtaaa tccttaagtt 48660

cataatcatc actgtcatca gttatgtacg atccaaacaa tgtttctacc ggcatagtgg 48720

atacgaagat gctatccatc agaatgtttc cctgattagt attttctata tagctattct 48780

tctttaaacg attttccaaa tcagtaacta tgttcatttt tttaggagta ggacgcctag 48840

ccagtatgga agaggatttt ctagatcctc tcttcaacat ctttgatctc gatggaatgc 48900

aaaaccccat agtgaaacaa ccaacgataa aaataatatt gtttttcact ttttataatt 48960

ttaccatctg actcatggat tcattaatat ctttataaga gctactaacg tataattctt 49020

tataactgaa ctgagatata tacaccggat ctatggtttc cataattgag taaatgaatg 49080

ctcggcaata actaatggca aatgtataga acaacgaaat tatactagag ttgttaaagt 49140

taatattttc tatgagctgt tccaataaat tatttgttgt aactgcgttc aagtcataaa 49200

tcatcttgat actatccagt aaaccgtttt taagttctgg aatattatca tcccattgta 49260

aagcccctaa ttcgactatc gaatatcctg ctctgatagc agtttcaata tcgacggacg 49320

tcaatactgt aataaaggtg gtagtattgt catcatcgtg ataaactact ggaatatggt 49380

cgttagtagg tacggtaact ttacacaacg cgatatataa ctttcctttt gtaccatttt 49440

taacgtagtt gggacgtcct gcagggtatt gttttgaaga aatgatatcg agaacagatt 49500

tgatacgata tttgttggat tcctgattat tcactataat ataatctaga cagatagatg 49560

attcgataaa tagagaaggt atatcgttgg taggataata catccccatt ccagtattct 49620

cggatactct attgatgaca ctagttaaga acatgtcttc tattctagaa aacgaaaaca 49680

tcctacatgg actcattaaa acttctaacg ctcctgattg tgtctcgaat gcctcgtaca 49740

aggatttcaa ggatgccata gattctttga ccaacgattt agaattgcgt ttagcatctg 49800

atttttttat taaatcgaat ggtcggctct ctggtttgct accccaatga taacaatagt 49860

cttgtaaaga taaaccgcaa gaaaatttat acgcatccat ccaaataacc ctagcaccat 49920

cggatgatat taatgtatta ttatagattt tccatccaca attattgggc cagtatactg 49980

ttagcaacgg tatatcgaat agattactca tgtaacctac tagaatgata gttcgtgtac 50040

tagtcataat atctttaatc caatctaaga aatttaaaat tagatttttt acactgttaa 50100

agttaacaaa agtattaccc ggatacgtgg atatcatata tggcattggt ccattatcag 50160

taatagctcc ataaactgat acggcgatgg tttttatatg tgtttgatct aacgaggaag 50220

aaattcgcgc ccacaattca tctctagata tgtatttaat atcaaacggt aacacatcaa 50280

tttcgggacg cgtatatgtt tctaaatttt taatccaaat ataatgatga cctatatgcc 50340

ctattatcat actgtcaact atagtacacc tagggaactt acgatacatc tgtttcctgt 50400

aatcgttaaa ttttacaaat ctataacatg ctaaaccttt tgacgacaac cattcattaa 50460

tttctgatat ggaatctgta ttctcaatac cgtatcgttc taaagctagt gctatatctc 50520

cctgttcgtg ggaacgcttt cgtataatat cgatcaacgg ataatctgaa gtttttggag 50580

aataatatga ctcatgatct atttcgtcca taaacaatct agacatagga attggaggcg 50640

atgatcttaa ttttgtgcaa tgagtcgtca atcctataac ttctaatctt gtaatattca 50700

tcatcgacat aatactatct atgttatcat cgtatattag tataccacgg ccttcttcat 50760

ttcgtgccaa aatgatatac agtcttaaat agttacgcaa tatctcaata gtttcataat 50820

tgttagctgt tttcatcaag atttgtaccc tgtttaacat gatggcgttc tataacgtct 50880

ctattttcta tttttaattt tttaaatttt taacgattta ctgtggctag atacccaatc 50940

tctctcaaat atttttttag cctcgcttac aagctgttta tctatactat taaaactgac 51000

gaatccgtga ttttggtaat gggttccgtc gaaatttgcc gaagtgatat gaacatattc 51060

gtcgtcgact atcaacaatt ttgtattatt ctgaatagtg aaaaccttca cagatagatc 51120

attttgaaca cacaacgcat ctagactttt ggcggttgcc atagaatata cgtcgttctt 51180

atcccaatta ccaactagaa gtctgatctt aactcctcta ttaatggctg cttctataat 51240

ggagttgtaa atgtcgggcc aatagtagct attaccgtcg acacgtgtag tgggaactat 51300

ggccaaatgt tcaatatcta tactagtctt agccgacttg agtttatcaa taactacatc 51360

ggtatctaga tctctagaat atcccaatag gtgttccgga gaatcagtaa agaacactcc 51420

acctatagga ttcttaatat gatacgcagt gctaactggc aaacaacaag ccgcagagca 51480

taaattcaac catgaatttt ttgcgctatt aaaggcttta aaagtatcaa atcttctacg 51540

aagatctgtg gccagcgggg gataatcaga atatacacct aacgttttaa tcgtatgtat 51600

agatcctcca gtaaatgacg cgtttcctac ataacatctt tcatcatctg acacccaaaa 51660

acaaccgagt agtagtccca cattattttt tttatctata ttaacggtta taaaatttat 51720

atccgggcag tgactttgta gctctcccag atttcttttc cctcgttcat ctagcaaaac 51780

tattatttta atcccttttt cagatgcctc ttttagttta tcaaaaataa gcgcgcccct 51840

agtcgtactc agaggattac aacaaaaaga tgctatgtat atatatttct tagctagagt 51900

gataatttcg ttaaaacatt caaatgttgt caaatgatcg gatctaaaat ccatattttc 51960

tggtagtgtt tctaccagcc tacattttgc tcccgcaggt accgatgcaa atggccacat 52020

ttagttaaca taaaaactta tacatcctgt tctatcaacg attctagaat atcatcggct 52080

atatcgctaa aattttcatc aaagtcgaca tcacaaccta actcagtcaa tatattaaga 52140

agttccatga tgtcatcttc gtctatttct atatccgtat ccattgtaga ttgttgaccg 52200

attatcgagt ttaaatcatt actaatactc aatccttcag aatacaatct gtgtttcatt 52260

gtaaatttat aggcggtgta tttaagttgg tagattttca attatgtatt aatatagcaa 52320

cagtagtttt tgctcctcct tgattctagc atcctcttca ttattttctt ctacgtacat 52380

aagcatgtcc aatacgttag acaacacacc gacgatggcg gccgccacag acacgaatat 52440

gactaaaccg atgaccattt aaaaacccct ctctagcttt cacttaaact gtatcgatca 52500

ttcttttagc acatgtataa tataaaaaca ttattctatt tcgaatttag gcttccaaaa 52560

atttttcatc cgtaaaccga taataatata tatagacttg ttaatagtcg gaataaatag 52620

attaatgctt aaactatcat catctccacg attagagata caatatttac attctttttg 52680

ctgtttcgaa actttatcaa tacacgttaa tacaaaccca ggaaggagat attgaaactg 52740

aggctgttga aaatgaaacg gtgaatacaa taattcagat aatgtaaaat catgattccg 52800

tattctgatg atattagaac tgctaatgga tgtcgatggt atgtatctag gagtatctat 52860

tttaacaaag catcgatttg ctaatataca attatcattt tgattaattg ttattttatt 52920

catattctta aaaggtttca tatttatcaa ttcttctaca ttaaaaattt ccatttttaa 52980

tttatgtagc cccgcaatac tcctcattac gtttcatttt ttgtctataa tatccatttt 53040

gttcatctcg gtacatagat tatccaattg agaagcgcat ttagtagttt tgtacatttt 53100

aagtttattg acgaatcgtc gaaaactagt tatagttaac attttattat ttgataccct 53160

gatattaata cccctgccgt tactattatt tataactgat gtaacccacg taacattaga 53220

attaattatc gatagtaatg catcaacgct tccaaaattg tctattataa actcaccgat 53280

aattttttta ttgcatgttt tcatattcat taggattatc aaatctttaa tcttattacg 53340

attgtatgcg ttgatattac aagacgtcat tctaaaagac ggaggatttc catcaaatgc 53400

cagacaatca cgtacaaagt acatggaaat aggttttgtt ctattgcgca tcatagattt 53460

atatagaaca cccgtagaaa tactaatttg ttttactcta taaaatacta atgcatctat 53520

ttcatcgttt tgtataacgt ctttccaagt gtcaaattcc aaattttttt cattgatagt 53580

accaaattct tctatctctt taactacttg catagatagg taattacagt gatgcctaca 53640

tgccgttttt tgaaactgaa tagatgcgtc tagaagcgat gctacgctag tcacaatcac 53700

cactttcata tttagaatat atatatgtaa aaatatagta gaatttcatt ttgttttttc 53760

tatgctataa atgaattctc attttgcatc tgctcatact ccgttttata ttaataccaa 53820

agaaggaaga tatctggttc taaaagccgt taaagtatgc gatgttagaa ctgtagaatg 53880

cgaaggaagt aaagcttcct gcgtactcaa agtagataaa ccctcatcgc ccgcgtgtga 53940

gagaagacct tcgtccccgt ccagatgcga gagaatgaat aaccctggaa aacaagttcc 54000

gtttatgagg acggacatgc tacaaaatat gttcgcggct aatcgcgata atgtagcttc 54060

tagacttttg tcctaaaata ctattatatc cttttcgata ttaataaatc cgtgtcgtcc 54120

aggtttttta tctctttcag tatgtgaata gataggtatt ttatctctat tcatcatcga 54180

atttaagaga tccgataaac attgtttgta ttctccagat gtcagcatct gatacaacaa 54240

tatatgtgca cataaacctc tggcacttat ttcatgtacc ttccccttat cactaaggag 54300

aatagtattt gagaaatatg tatacatgat attatcatga attagatata cagaatttgt 54360

aacactctcg aaatcacacg atgtgtcggc gttaagatct aatatatcac tcgataacac 54420

attttcatct agatacacta gacatttttt aaagctaaaa tagtctttag tagtgacagt 54480

aactatgcga ttattttcat cgatgataca tttcatcggc atattattac gcttaccatc 54540

aaagactata ccatgtgtat atctaacgta ttctagcatg gttgccatac gcgcattaaa 54600

cttttcagga tctttggata gatcttccaa tctatctatt tgagaaaaca tttttatcat 54660

gttcaatagt tgaaacgtcg gatccactat atagatatta tctataaaga ttttaggaac 54720

tacgttcatg gtatcctggc gaatattaaa actatcaatg atatgattat cgttttcatc 54780

ttttatcacc atatagtttc taagatatgg gattttactt aatataatat tatttcccgt 54840

gataaatttt attagaaagg ccaaatctat aagaaaagtc ctagaattag tctgaagaat 54900

atctatatcg ccgtatagta tatttggatt aattagatat agagaatatg atccgtaaca 54960

tatacaactt ttattatggc gtctaagata ttcttccatc aacttattaa catttttgac 55020

tagggaagat acattatgac gtcccattac ttttgccttg tctattactg cgacgttcat 55080

agaatttagc atatctcttg ccaattcttc cattgatgtt acattataag aaattttaga 55140

tgaaattaca tttggagctt taatagtaag aactcctaat atgtccgtgt atgtggtcac 55200

taatacagat tgtagttcta taatcgtaaa taatttacct atattatatg tttgagtctg 55260

tttagaaaag tagctaagta tacgatcttt tatttctgat gcagatgtat caacatcgga 55320

aaaaaatctt tttttattct tttttactaa agatacaaat atgtctttgt taaaaacagt 55380

tattttctga atatttctag cttgtaattt taacatatga tattcgttca cactaggtac 55440

tctgcctaaa taggtttcta taatctttaa tgtaatatta ggaagagtat tctgatcagg 55500

attcctattc attttgagga tttaaaactc tgattattgt ctaatatggt ctctacgcaa 55560

actttttcac agagcgatag agtttttgat aactcgtttt tcttaagaaa tataaaacta 55620

ctgtttccag agctcgctct atcttttatt ttatctaatt cgatacaaac tcctgatact 55680

ggttcagaaa gtaattcatt aattttcagt cctttataga agatatttaa tatagataat 55740

acaaaatctt cagtttttga tatcgatctg attgatccta gaactagata tattaataac 55800

gtgctcatta ggcagtttat ggcagcttga taattagata tagtatattc cagttcatat 55860

ttattagata ccgcattgcc cagattttga tattctatga attcctctga aaataaatcc 55920

aaaataacta gacattctat tttttgtgga ttagtgtact ctcttccctc tatcatgttc 55980

actactggtg tccacgatga taaatatcta gagggaatat aatatagtcc ataggatgcc 56040

aatctagcaa tgtcgaataa ctgtaatttt attcttcgct cttcattatg aattgattct 56100

tgaggtataa acctaacaca aattatatta ttagactttt cgtatgtaat gtctttcatg 56160

ttataagttt ttaatcctgg aatagaatct attttaatga ggcttttaaa cgcagagttc 56220

tccaacgagt caaagcataa tactctgttg tttttcttat atacgatgtt acgattttct 56280

tctttgaatg gaataggttt ttgaattagt ttataattac aacataatag ataaggaagt 56340

gtgcaaatag tacgcggaaa aaacataata gctcccctgt tttcatccat ggttttaagt 56400

aaatgatcac tggcttcttt agtcaatgga tattcgaaca ttaaccgttt catcatcatt 56460

ggacagaatc catatttctt aatgtaaaga gtgatcaaat cattgtgttt attgtaccat 56520

cttgttgtaa atgtgtattc ggttatcgga tctgctcctt tttctattaa agtatcgata 56580

tcgatctcgt ctaagaattc aactatatcg acatatttca tttgtataca cataaccatt 56640

actaacgtag aatgtatagg aagagatgta acgggaacag ggtttgttga ttcgcaaact 56700

attctaatac ataattcttc tgttaatacg tcttgcacgt aatctattat agatgccaag 56760

atatctatat aattattttg taagatgatg ttaactatgt gatctatata agtagtgtaa 56820

taattcatgt attttgatat atgttccaac tctgtctttg tgatgtctag tttcgtaata 56880

tctatagcat cctcaaaaaa tatattcgca tatattccca agtcttcagt tctatcttct 56940

aaaaaatctt caacgtatgg aatataataa tctattttac ctcttctgat atcattaatg 57000

atatagtttt tgacactatc ttctgtcaat tgattcttat tcactatatc taagaaacgg 57060

atagcgtccc taggacgaac tactgccatt aatatctcta ttatagcttc tggacataat 57120

tcatctatta taccagaatt aatgggaact attccgtatc tatctaacat agttttaaga 57180

aagtcagaat ctaagacttg atgttcatat attggttcat acatgaaatg atctctattg 57240

atgatagtga ctatttcatt ctctgaaaat tggtaactca ttctatatat gctttccttg 57300

ttgatgaagg atagaatata ctcaatagaa tttgtaccaa caaactgttc tcttatgaat 57360

cgtatatcat catctgaaat aatcatgtaa ggcatacatt taacaattag agacttgtct 57420

cctgttatca atatactatt cttgtgataa tttatgtgtg aggcaaattt gtccacgttc 57480

tttaattttg ttatagtaga tatcaaatcc aatggagcta cagttcttgg cttaaacaga 57540

tatagttttt ctggaacaaa ttctacaaca ttattataaa ggactttggg tagataagtg 57600

ggatgaaatc ctattttaat taatgcgata gccttgtcct cgtgcagata tccaaacgct 57660

tttgtgatag tatggcattc attgtctaga aacgctctac gaatatctgt gacagatatc 57720

atctttagag aatatactag tcgcgttaat agtactacaa tttgtatttt ttaatctatc 57780

tcaataaaaa aattaatatg tatgattcaa tgtataacta aactactaac tgttattgat 57840

aactagaatc agaatctaat gatgacgtaa ccaagaagtt tatctactgc caatttagct 57900

gcattatttt tagcatctcg tttagatttt ccatcggcct tatcgaatac tcttccgtcg 57960

atatctacac aggcataaaa tgtaggagag ttactaggcc caactgattc aatacgaaaa 58020

gaccaatctc tcttagttat ttggcagtac tcattaataa cggtgacagg gttagcatct 58080

ttccaatcaa taattttttt agccggaata acatcatcaa aagacttatg atcctctctc 58140

attgattttt cgcgggatac atcatctatt atggcgtcag ccataacatc agcatccggc 58200

ttatccgcct ccgttgtcat aaaccaacga ggaggaatat cgtcggagct gtacaccata 58260

gcactacgtt gaagatcgta cagagcttta ttaacttctc gcttctccat attaagttgt 58320

ctagttagtt gtgcagcagt agctccttcg attccaatgg ttttaatagc ctcacacaca 58380

atctctgcgt cagaacgctc gtcaatatag atcttagaca tttttagaga gaactaacac 58440

aaccagcaat aaaactgaac ctactttatc atttttttat tcatcatcct ctggtggttc 58500

gtcgttccta tcgaatgtgg atctgattaa cccgtcatct ataggtgatg ctggttctgg 58560

agattctgga ggagatggat tattatctgg aagaatctct gttatttcct tgttttcatg 58620

tatcgattgc gttgtaacat taagattgcg aaatgctcta aatttgggag gcttaaagtg 58680

ttgtttgcaa tctctacacg cgtgtctaac tagtggaggt tcgtcagctg ctctagtttg 58740

aatcatcatc ggtgtagtat tcctactttt acagttagga cacggtgtat tgtatttctc 58800

gtcgagaacg ttaaaataat cgttgtaact cacatccttt attttatcta tattgtattc 58860

tactcctttc ttaatgcatt ttataccgaa taagagatag cgaaggaatt ctttttcggt 58920

gccgctagta cccttaatca tatcacatag tgttttatat tccaaatttg tggcaataga 58980

cggtttattt ctatacgata gtttgtttct ggaatccttt gagtattcta taccaatatt 59040

attctttgat tcgaatttag tttcttcgat attagatttt gtattaccta tattcttgat 59100

gtagtacttt gatgattttt ccatggccca ttctattaag tcttccaagt tggcatcatc 59160

cacatattgt gatagtaatt ctcggatatc agtagcggct accgccattg atgtttgttc 59220

attggatgag taactactaa tgtatacatt ttccatttat aacacttatg tattaacttt 59280

gttcatttat attttttcat tattatgttg atattaacaa aagtgaatat atatatgtta 59340

ataattgtat tgtggttata cggctacaat tttataatga gtgaaagtca gtgtccgatg 59400

atcaatgacg atagctttac tctgaaaaga aagtatcaaa tcgatagtgc ggagtcaaca 59460

ataaaaatgg ataagaagag gataaagttt cagaatagag ccaaaatggt aaaagaaata 59520

aatcagacaa taagagcagc acaaactcat tacgagacat tgaaactagg atacataaaa 59580

tttaagagaa tgattatgac tactactcta gaagatatag caccatctat tccaaataat 59640

cagaaaactt ataaactatt ctcggacatt tcagccatcg gcaaagcatc acagaatccg 59700

agtaagatgg tatatgctct gctgctttac atgtttccca atttgtttgg agatgatcat 59760

agattcattc gttatagaat gcatccaatg agtaaaatca aacacaagat cttctctcct 59820

ttcaaactta atcttattag aatattagtg gaagaaagat tctataataa tgaatgcaga 59880

tctaataaat ggagaataat tggaacacaa gttgataaaa tgttgatagc tgaatctgat 59940

aaatatacaa tagatgcaag gtataaccta aaacccatgt atagaatcaa gggagaatct 60000

gaagaagata ccctctttat caaacagatg gtagaacaat gtgtgacatc ccaggaattg 60060

gtggaaaaag tgttgaagat actgtttaga gatttgttca agagtggaga atacaaagcg 60120

tacagatacg atgatgatgt agaaaatgga tttattggat tggatacact aaaattaaac 60180

attgttcatg atatagttga accatgtatg cctgttcgta ggccagtggc taagatactg 60240

tgtaaagaaa tggtaaataa atactttgag aatccgctac atattattgg taaaaatctt 60300

caagagtgca ttgactttgt tagtgaatag gcatttcatc tttctccaat actaattcaa 60360

attgttaaat taataatgga tagtataaat agttattagt tataagatag taaaaataat 60420

tattagaata agagtgtagt atcatagata actctcttct ataaaaatgg attttattcg 60480

tagaaagtat cttatataca cagtagaaaa taatatagat tttttaaagg atgatacatt 60540

aagtaaagta aacaatttta ccctcaatca tgtactagct ctcaagtatc tagttagcaa 60600

ttttcctcaa cacgttatta ctaaggatgt attagctaat accaattttt ttgttttcat 60660

acatatggta cgatgttgta aagtgtacga agcggtttta cgacacgcat ttgatgcacc 60720

cacgttgtac gttaaagcat tgactaagaa ttatttatcg tttagtaacg caatacaatc 60780

gtacaaggaa accgtgcata aactaacaca agatgaaaaa tttttagagg ttgccgaata 60840

catggacgaa ttaggagaac ttataggcgt aaattatgac ttagttctta atccattatt 60900

tcacggaggg gaacccatca aagatatgga aatcattttt ttaaaactgt ttaagaaaac 60960

agacttcaaa gttgttaaaa aattaagtgt tataagatta cttatttggg catacctaag 61020

caagaaagat acaggcatag agtttgcgga taatgataga caagatatat atactctatt 61080

tcaacaaact ggtagaatcg tccatagcaa tctaacagaa acgtttagag attatatctt 61140

tcccggagat aagactagct attgggtgtg gttaaacgaa agtatagcta atgatgcgga 61200

tatcgttctt aatagacccg ccattaccat gtatgataaa attcttagtt atatatactc 61260

tgagataaaa caaggacgcg ttaataaaaa catgcttaag ttagtttata tctttgagcc 61320

tgaaaaagat atcagagaac ttctgctaga aatcatatat gatattcctg gagatatcct 61380

atctattatt gatgcaaaaa acgacgattg gaaaaaatat tttattagtt tttataaagc 61440

taattttatt aacggtaata catttattag tgatagaacg tttaacgagg acttattcag 61500

agttgttgtt caaatagatc ccgaatattt cgataatgaa cgaattatgt ctttattctc 61560

tacgagtgct gcggacatta aacgatttga tgagttagat attaataaca gttatatatc 61620

taatataatt tatgaggtga acgatatcac attagataca atggatgata tgaagaagtg 61680

tcaaatcttt aacgaggata cgtcgtatta tgttaaggaa tacaatacat acctgttttt 61740

gcacgagtcg gatcccatgg tcatagagaa cggaatacta aagaaactgt catctataaa 61800

atccaagagt agacggctga acttgtttag caaaaacatt ttaaaatatt atttagacgg 61860

acaattggct cgtctaggtc ttgtgttaga tgattataaa ggagacttgt tagttaaaat 61920

gataaaccat cttaagtctg tggaggatgt atccgcattc gttcgatttt ctacagataa 61980

aaaccctagt attcttccat cgctaatcaa aactatttta gctagttata atatttccat 62040

catcgtctta tttcaaaggt ttttgagaga taatctatat catgtagaag aattcttgga 62100

taaaagcatc catctaacca agacggataa gaaatatata cttcaattga taagacacgg 62160

tagatcatag aacagaccaa atatattatt aataatttgt atatacatag atataattat 62220

cacacatttt tgataaatgg gaactgctgc aacaattcag actcccacca aattaatgaa 62280

taaagaaaat gcagaaatga ttttggaaaa aattgttgat catatagtta tgtatattag 62340

tgacgaatca agtgattcag aaaataatcc tgaatatatt gattttcgta acagatacga 62400

agactataga tctctcatta taaaaagtga tcacgagttt gtaaagctat gtaaaaatca 62460

tgcggagaaa agttctccag aaacgcaaca aatgattatc aaacacatat acgaacaata 62520

tcttattcca gtatctgaag tactattaaa acttataatg tccatgggtg acataattac 62580

atataacgga tgtaaagaca atgaatggat gctagaacaa ctctctaccc taaactttaa 62640

caatctccgc acatggaact catgtagcat aggcaatgta acgcgtctgt tttatacatt 62700

ttttagttat ctgatgaaag ataaactaaa tatataagta taatcccatt ctaatacttt 62760

aacctgatgt attagcatct tattagaata ttaacctaac taaaagacat aacataaaaa 62820

ctcattacat agttgataaa aagcggtagg atataaatat tatggctgcc accgttccgc 62880

gttttgacga cgtgtacaaa aatgcacaaa gaagaattct agatcaagaa acatttttta 62940

gtagaggtct aagtagaccg ttaatgaaaa acacatatct atttgataat tacgcgtatg 63000

gatggatacc agaaactgca atttggagta gtagatacgc aaacttagat gcaagtgact 63060

attatcccat ttcgttggga ttacttaaaa agtttgagtt tctcatgtct ctatataaag 63120

gtcctattcc agtatacgaa gaaaaagtaa atactgaatt catagccaat ggatcgttct 63180

ctggtagata cgtatcatat cttcgaaagt tttctgctct tccaacaaac gagtttatta 63240

gttttttgtt actgacctcc atccctatct ataatatctt gttctggttt aaaaatactc 63300

agtttgatat tactaaacac acattattca gatacgttta tacagataat gccaaacacc 63360

tggcgttggc taggtatatg catcaaacag gagactataa gcctttgttt agtcgtctca 63420

aagagaatta tatatttacc ggtcccgttc caataagtat caaagatata gatcacccta 63480

atcttagtag agcaagaagt ccatccgatt atgagacatt agctaatatt agtactatat 63540

tgtactttac caagtatgat ccggtattaa tgtttttatt gttttacgta cctgggtatt 63600

caattactac aaaaattact ccagccgtag aatatctaat ggataaactg aatctaacaa 63660

agagcgacgt acaactgttg taaattattt tatgcttcgt aaaatgtagg ttttgaacca 63720

aacattcttt caaagaatga gatgcataaa actttattat ccaatagatt gactatttcg 63780

gacgtcaatc gtttaaagta aacttcgtaa aatattcttt gatcactgcc gagtttaaaa 63840

cttctatcga taattgtttc atatgtttta atatttacaa gttttttggt ccatggtaca 63900

ttagccggac aaatatatgc aaaataatat cgttctccaa gttctatagt ttctggatta 63960

tttttattat attcagtaac caaatacata ttagggttat ctgcggattt ataatttgag 64020

tgatgcattc gactcaacat aaataattct agaggagacg atctactatc aaattcggat 64080

cgtaaatctg tttctaaaga acggagaata tctatacata cctgattaga attcatccgt 64140

ccttcagaca acatctcaga cagtctggtc ttgtatgtct taatcatatt cttatgaaac 64200

ttggaaacat ctcttctagt ttcactagta cctttattaa ttctctcagg tacagatttt 64260

gaattcgacg atgccgagta tttcatcgtt gtatatttct tcttcgattg cataatcaga 64320

ttcttatata ccgcctcaaa ctctatttta aaattattaa acaatactct attattaatc 64380

agtcgttcta actctttcgc tatttctata gacttatcga catcttgact gtctatctct 64440

gtaaacacgg agtcggtatc tccatacacg ctacgaaaac gaaatctgta atctataggc 64500

aacgatgttt tcacaatcgg attaatatct ctatcgtcca tataaaatgg attacttaat 64560

ggattggcaa accgtaacat accgttagat aactctgctc catttagtac cgattctaga 64620

tacaagatca ttctacgtcc tatggatgtg caactcttag ccgaagcgta tgagtataga 64680

gcactatttc taaatcccat cagaccatat actgagttgg ctactatctt gtacgtatat 64740

tgcatggaat cataaatggc cttttcagtt gaactggtag cctgttttaa catcttttta 64800

tatctggctc tctctgccaa aaatgttctt aatagtctag gaatggttcc ttctatcgat 64860

ctatcgaaaa ttgctatttc agagatgagg ttcggtagtc taggttcaca atgaaccgta 64920

atatatctag gaggtggata tttctgaagc aagagctgat tatttatttc ttcttccaat 64980

ctattggtac taacaacgac accgactaat gtttccggag atagatttcc aaagatacac 65040

acattaggat acagactgtt ataatcaaag attaatacat tattactaaa cattttttgt 65100

tttggagcaa ataccttacc gccttcataa ggaaactttt gttttgtttc tgatctaact 65160

aagatagttt tagtttccaa caatagcttt aacagtggac ccttgatgac tgtactcgct 65220

ctatattcga ataccatgga ttgaggaagc acatatgttg acgcacccgc gtctgttttt 65280

gtttctactc cataatactc ccacaaatac tgacacaaac aagcatcatg aatacagtat 65340

ctagccatat ctaaagctat gtttagatta taatccttat acatctgagc taaatcaacg 65400

tcatcctttc cgaaagataa tttatatgta tcattaggta aagtaggaca taatagtacg 65460

actttaaatc cattttccca aatatcttta cgaattactt tacatataat atcctcatca 65520

acagtcacat aattacctgt ggttaaaacc tttgcaaatg cagcggcttt gcctttcgcg 65580

tctgtagtat cgtcaccgat gaacgtcatt tctctaactc ctctatttaa tactttaccc 65640

atgcaactga acgcgttctt ggatatagaa tccaatttgt acgaatccaa tttttcaaat 65700

ttttgaatga atgaatatag atcgaaaaat atagttccat tattgttatt aacgtgaaac 65760

gtagtattgg ccatgccgcc tactccctta tgactagact gatttctctc ataaatacag 65820

agatgtacag cttccttttt gtccggagat ctaaagataa tcttctctcc tgttaataac 65880

tctagacgat tagtaatata tctcagatca aagttatgtc cgttaaaggt aacgacgtag 65940

tcgaacgtta gttccaacaa ttgtttagct attcgtaaca aaactatttc agaacataga 66000

actagttctc gttcgtaatc catttccatt agtgactgta tcctcaaaca tcctctatcg 66060

acggcttctt gtatttcctg ttccgttaac atctcttcat taatgagcgt aaacaataat 66120

cgtttaccac ttaaatcgat ataacagtaa cttgtatgcg agattgggtt aataaataca 66180

gaaggaaact tcttatcgaa gtgacactct atatctagaa ataagtacga tcttgggata 66240

tcgaatctag gtattttttt agcgaaacag ttacgtggat cgtcacaatg ataacatcca 66300

ttgttaatct ttgtcaaata ttgctcgtcc aacgagtaac atccgtctgg agatatcccg 66360

ttagaaatat aaaaccaact aatattgaga aattcatcca tggtggcatt ttgtatgctg 66420

cgtttctttg gctcttctat caaccacata tctgcgacgg agcattttct atctttaata 66480

tctagattat aacttattgt ctcgtcaatg tctatagttc tcatctttcc caacggcctc 66540

gcattaaatg gaggaggaga caatgactga tatatttcgt ccgtcactac gtaataaaag 66600

taatgaggaa atcgtataaa tacggtctcg ccatttcgac atctggattt cagatataaa 66660

aatctgtttt caccgtgact ttcaaaccaa ttaatgcacc gaacatccat ttatagaatt 66720

tagaaatata ttttcattta aatgaatccc aaacattggg gaagagccgt atggaccatt 66780

atttttatag tactttcgca agcgggttta gacggcaaca tagaagcgtg taaacgaaaa 66840

ctatatacta tagttagcac tcttccatgt cctgcatgta gacggcacgc gactattgct 66900

ataaaggaca ataatgtcat gtctagcgat gatctgaatt atatttatta ttttttcatc 66960

agattattta acaatttggc atctgatccc aaatacgcga tcgatgtgac aaaggttaac 67020

cctttataaa cttaacccat tataaaactt atgattagtc acaactgaaa taaccgcgtg 67080

attatttttt ggtataattc tacacggcat ggtttctgtg actatgaatt caacccccgt 67140

tacattagtg aaatctttaa caaacagcaa gggttcgtca aagacataaa actcattgtt 67200

tacaatcgaa atagaccccc tatcacactt aaaataaaaa atatccttat cctttaccac 67260

caaataaaat tctgattggt caatgtgaat gtattcactt aacagttcca caaatttatt 67320

tattaactcc gaggcacata catcgtcggt attttttatg gcaaacttta ctcttccagc 67380

atccgtttct aaaaaaatat taacgagttc catttatatc atccaatatt attgaaatga 67440

cgttgatgga cagatgatac aaataagaag gtacggtacc tttgtccacc atctcctcca 67500

attcatgctc tattttgtca ttaactttaa tgtatgaaaa cagtacgcca catgcttcca 67560

tgacagtgtg taacactttg gatacaaaat gtttgacatt agtataattg tccaagactg 67620

tcaatctata atagatagta gctataatat attctatgat ggtattgaag aagatgacaa 67680

ccttggcata ttgatcattt aacacagaca tggtatcaac agatagcttg aatgaaagag 67740

aatcagtaat tggaataagc gtcttctcga tagagtgtcc gtataccaac atgtctgata 67800

ttttgatgta ttccattaaa ttatttagtt ttttcttttt attctcgtta aacagcattt 67860

ctgtcaacgg accccaacat cgttgaccga ttaagttttg attgattttt ccgtgtaagg 67920

cgtatctagt cagatcgtat agcctatcca ataatccatc gtctgtgtgt agatcacatc 67980

gtacactttt taattctcta tagaagagcg acagacatct ggagcaatta cagacagcaa 68040

tttctttatt ctctacagat gtaagatact tgaagacatt cctatgatga tgcagaattt 68100

tggataacac ggtattgatg gtatctgtta ccataattcc tttgatggct gatagtgtca 68160

gagcacaaga tttccaatct ttgacaattt ttagcaccat tatctttgtt ttgatatcta 68220

tatcagacag catggtgcgt ctgacaacac agggattaag acggaaagat gaaatgattc 68280

tctcaacatc ttcaatggat accttgctat tttttctggc attatctata tgtgcgagaa 68340

tatcctctag cctgcaggtc aattcggtag ttgcgatata cataaactga tcactaattc 68400

caaacccacc cactttttat agtaagtttt tcacccataa ataataaata caataattaa 68460

tttctcgtaa aagtagaaaa tatattctaa tttattgcac ggtaaggaag tagtcgaaac 68520

gaattcgccc ttgcttgcaa gccaccatgg cctcctccga ggacgtcatc aaggagttca 68580

tgcgcttcaa ggtgcgcatg gagggctccg tgaacggcca cgagttcgag atcgagggcg 68640

agggcgaggg ccgcccctac gagggcaccc agaccgccaa gctgaaggtg accaagggcg 68700

gccccctgcc cttcgcctgg gacatcctgt ccccccagtt ccagtacggc tccaaggtgt 68760

acgtgaagca ccccgccgac atccccgact acaagaagct gtccttcccc gagggcttca 68820

agtgggagcg cgtgatgaac ttcgaggacg gcggcgtggt gaccgtgacc caggactcct 68880

ccctgcagga cggctccttc atctacaagg tgaagttcat cggcgtgaac ttcccctccg 68940

acggccccgt aatgcagaag aagactatgg gctgggaggc ctccaccgag cgcctgtacc 69000

cccgcgacgg cgtgctgaag ggcgagatcc acaaggccct gaagctgaag gacggcggcc 69060

actacctggt ggagttcaag tccatctaca tggccaagaa gcccgtgcag ctgcccggct 69120

actactacgt ggactccaag ctggacatca cctcccacaa cgaggactac accatcgtgg 69180

agcagtacga gcgcgccgag ggccgccacc acctgttcct gtaggcgcgc ctataagggc 69240

gaattcgcgg cctcgacgct agagaatcag tatccttttt gatgatagtg gatctcaatg 69300

acatgggacg tctaaacctt cttattctat caccagattg catggtgatt tgtcttcttt 69360

cttttatcat aatgtaatct ctaaattcat cggcaaattg tctatatcta aaatcataat 69420

atgagatgtt tacctctaca aatatctgtt cgtccaatgt tagagtattt acatcagttt 69480

tgtattccaa attaaacatg gcaacggatt taattttata ttcctctatt aagtcctcgt 69540

cgataataac agaatgtaga taatcattta atccatcgta catggttgga agatgcttgt 69600

tgacaaaatc tttaattgtc ttgatgaagg tgggactata tctaacatct tgattaataa 69660

aatttataac attgtccata ggatactttg taactagttt tatacacatc tcttcatcgg 69720

taagtttaga cagaatatcg tgaacaggtg gtatattata ttcatcagat atacgaagaa 69780

caatgtccaa atctatattg tttaatatat tatatagatg tagcgtagct cctacaggaa 69840

tatctttaac taagtcaatg atttcatcaa ccgttagatc tattttaaag ttaatcatat 69900

aggcattgat ttttaaaagg tatgtagcct tgactacatt ctcattaatt aaccattcca 69960

agtcactgtg tgtaagaaga ttatattcta tcataagctt gactacattt ggtcccgata 70020

ccattaaaga attcttatga tataaggaaa cagcttttag gtactcatct actctacaag 70080

aattttggag agccttaacg atatcagtga cgtttattat ttcaggagga aaaaacctaa 70140

cattgagaat gtcggagtta atagcttcca gatacagtga ttttggcaat agtccgtgta 70200

atccataatc cagtaacacg agctggtgct tgctagacac cttttcaatg tttaattttt 70260

ttgaaataag ctttgataaa gccttcctcg caaattccgg atacatgaac atgtcggcga 70320

catgattaag tattgttttt tcattatttt tatattttct caacaagttc tcaatacccc 70380

aatagatgat agaatatcac ccaatgcgtc catgttgtct atttccaaca ggtcgctata 70440

tccaccaata gaagtttttc caaaaaagat tctaggaaca gttctaccac cagtaatttg 70500

ttcaaaataa tcacgcaatt cattttcggg tttaaattct ttaatatcga caatttcata 70560

cgctcctctt ttgaaactaa acttatttag aatatccagt gcatttctac aaaaaggaca 70620

tgtatacttg acaaaaattg tcactttgtt attggccaac ctttgttgta caaattcctc 70680

ggccatttta atatttaagt gatataaaac tatctcgact tatttaactc tttagtcgag 70740

atatatggac gcagatagct atatgatagc caactacaga aggcaaacgc tataaaaaac 70800

ataattacaa cgagcatatt tataaatatt tttattcagc attacttgat atagtaatat 70860

taggcacagt caaacattca accactctcg atacattaac tctctcattt tctttaacaa 70920

attctgcaat atcttcgtaa aaagattctt gaaacttttt agaatatcta tcgactctag 70980

atgaaatagc gttcgtcaac atactatgtt ttgtatacat aaaggcgcct attttaacag 71040

tttctagtga caaaatgcta gcgatcctag gatcctttag aatcacatag attgacgatt 71100

cgtctctctt agtaactcta gtaaaataat catacaatct agtacgcgaa ataatattat 71160

ccttgacttg aggagatcta aacaatctag ttttgagaac atcgataagt tcatcgggaa 71220

tgacatacat actatcttta atagaactct tttcatccag ttgaatggat tcgtccttaa 71280

ccaactgatt aatgagatct tctattttat cattttccag atgatatgta tgtccattaa 71340

agttaaattg tgtagcgctt ctttttagtc tagcagccaa tactttaaca tcactaatat 71400

cgatatacaa aggagatgat ttatctatgg tattaagaat tcgtttttcg acatctgtca 71460

aaaccaattc ctttttgcct gtatcatcca gttttccatc ctttgtaaag aaattatttt 71520

ctactagact attaataaga ctgataagga ttcctccata attgcacaat ccaaactttt 71580

taacaaaact agactttaca agatctacag gaatgcgtac ttcaggtttt ttagcttgtg 71640

attttttctt ttgcggacat tttctagtaa ccaactcatc taccatttca ttgattttag 71700

cagtgaaata agctttcaat gcacgggcac tgatactatt gaaaacgagt tgatcttcaa 71760

attccgccat ttaagttcac caaacaactt ttaaatacaa atatatcaat agtagtagaa 71820

taagaactat aaaaaaaata ataattaacc aataccaacc ccaacaaccg gtattattag 71880

ttgatgtggt agttttctca tcacttagaa cagatttaac aatttctata aagtctgtca 71940

aatcatcttc cggagacccc ataaatacac caaatatagc ggcgtacaac ttatccattt 72000

atacattgaa tattggcttt tctttatcgc tatcttcatc atattcatca tcaatatcaa 72060

caagtcccag attacgagcc agatcttctt ctacattttc agtcattgat acacgttcac 72120

tatctccaga gagtccgata acgttagcca ccacttctct atcaatgatt agtttcttga 72180

gcgcgaatgt aatttttgtt tccgttccgg atctatagaa gacgataggt gtgataattg 72240

ccttggccaa ttgtctttct cttttactga gtgattctag ttcaccttct atagatctga 72300

gaatggatga ttctccagtc gaaacatatt ctaccatgga tccgtttaat ttgttgatga 72360

agatggattc atccttaaat gttttctctg taatagtttc caccgaaaga ctatgcaaag 72420

aatttggaat gcgttccttg tgcttaatgt ttccatagac ggcttctaga agttgataca 72480

acataggact agccgcggta acttttattt ttagaaagta tccatcgctt ctatcttgtt 72540

tagatttatt tttataaagt ttagtctctc cttccaacat aataaaagtg gaagtcattt 72600

gactagataa actatcagta agttttatag agatagacga acaattagcg tattgagaag 72660

catttagtgt aacgtattcg atacattttg cattagattt actaatcgat tttgcatact 72720

ctataacacc cgcacaagtc tgtagagaat cgctagatgc agtaggtctt ggtgaagttt 72780

caactctctt cttgattacc ttactcatga ttaaacctaa ataattgtac tttgtaatat 72840

aatgatatat attttcactt tatctcattt gagaataaaa atgtttttgt ttaaccactg 72900

catgatgtac agatttcgga atcgcaaacc accagtggtt ttattttatc cttgtccaat 72960

gtgaattgaa tgggagcgga tgcgggtttc gtacgtagat agtacattcc cgtttttaga 73020

ccgagactcc atccgtaaaa atgcatactc gttagtttgg aataactcgg atctgctata 73080

tggatattca tagattgact ttgatcgatg aaggctcccc tgtctgcagc catttttatg 73140

atcgtctttt gtggaatttc ccaaatagtt ttataaactc gcttaatatc ttctggaagg 73200

tttgtattct gaatggatcc accatctgcc ataatcctat tcttgatctc atcattccat 73260

aattttctct cggttaaaac tctaaggaga tgcggattaa ctacttgaaa ttctccagac 73320

aatactctcc gagtgtaaat attactggta tacggttcca ccgactcatt atttcccaaa 73380

atttgagcag ttgatgcagt cggcataggt gccaccaata aactatttct aagaccgtat 73440

gttctgattt tatcttttag aggttcccaa ttccaaagat ccgacggtac aacattccaa 73500

agatcatatt gtagaatacc gttactggcg tacgatccta catatgtatc gtatggtcct 73560

tccttctcag ctagttcaca actcgcctct aatgcaccgt aataaatggt ttcgaagatc 73620

ttcttattta gatcttgtgc ttccaggcta tcaaatggat aatttaagag aataaacgcg 73680

tccgctaatc cttgaacacc aataccgata ggtctatgtc tcttattaga gatttcagct 73740

tctggaatag gataataatt aatatctata attttattga gatttctgac aattactttg 73800

accacatcct tcagtttgag aaaatcaaat cgcccatcta ttacaaacat gttcaaggca 73860

acagatgcca gattacaaac ggctacctca ttagcatccg catattgtat tatctcagtg 73920

caaagattac tacacttgat agttcctaaa ttttgttgat tactcttttt gttacacgca 73980

tccttataaa gaatgaatgg agtaccagtt tcaatctgag attctataat cgctttccag 74040

acgactcgag cctttattat agatttgtat ctcctttctc tttcgtatag tgtatacaat 74100

cgttcgaact cgtctcccca aacattgtcc aatccaggac attcatccgg acacatcaac 74160

gaccactctc cgtcatcctt cactcgtttc ataaagagat caggaatcca aagagctata 74220

aatagatctc tggttctatg ttcctcgttt cctgtattct ttttaagatc gaggaacgcc 74280

ataatatcag aatgccacgg ttccaagtat atggccataa ctccaggccg tttgtttcct 74340

ccctgatcta tgtatctagc ggtgttatta taaactctca acattggaat aataccgttt 74400

gatataccat tggtaccgga gatatagctt ccactggcac gaatattact aattgataga 74460

cctattcccc ctgccatttt agagattaat gcgcatcgtt ttaacgtgtc atagataccc 74520

tctatgctat catcgatcat gttaagtaga aaacagctag acatttggtg acgactagtt 74580

cccgcattaa ataaggtagg agaagcgtgc gtaaaccatt tttcagaaag tagattgtac 74640

gtctcaatag ctgagtctat atcccattga tgaattccta ctgcgacacg cattaacatg 74700

tgctgaggtc tttcaacgat cttgttgttt attttcaaca agtaggattt ttccaaagtt 74760

ttaaaaccaa aatagttgta tgaaaagtct cgttcgtaaa taataaccga gttgagttta 74820

tccttatatt tgttaactat atccatggtg atacttgaaa taatcggaga atgtttccca 74880

tttttaggat taacatagtt gaataaatcc tccatcactt cactaaatag tttttttgtt 74940

tccttgtgta gatttgatac ggctattctg gcggctaaaa tggcataatc cggatgttgt 75000

gtagtacaag tggctgctat ttcggctgcc agagtgtcca attctaccgt tgttactcca 75060

ttatatattc cttgaataac cttcatagct attttaatag gatctatatg atccgtgttt 75120

aagccataac ataattttct aatacgagac gtgattttat caaacatgac attttccttg 75180

tatccatttc gtttaatgac aaacattttt gttggtgtaa taaaaaaatt atttaacttt 75240

tcattaatag ggatttgacg tacgtagcgt acaaaatgat cgttcctggt atatagataa 75300

agagtcctat atatttgaaa atcgttacgg ctcgattaaa ctttaatgat tgcatagtga 75360

atatatcatt aggatttaac tccttgacta tcatggcggc gccagaaatt accatcaaaa 75420

gcattaatac agttatgccg atcgcagtta gaacggttat agcatccacc atttatatct 75480

aaaaattaga tcaaagaata tgtgacaaag tcctagttgt atactgagaa ttgacgaaac 75540

aatgtttctt acatattttt ttcttattag taactgactt aatagtagga actggaaagc 75600

tagacttgat tattctataa gtatagatac ccttccaaat aatattctct ttgataaaag 75660

ttccagaaaa tgtagaattt tttaaaaagt tatcttttgc tattaccaag attgtgttta 75720

gacgcttatt attaatatga gtgatgaaat ccacaccgcc tctagatatc gcctttattt 75780

ccacattaga tggtaaatcc aatagtgaaa ctatcttttt aggaatgtat ggactcgcgt 75840

ttagaggagt gaacgtcttg ggcgtcggaa aggatgattc gtcaaacgaa taaacaattt 75900

cacaaatgga tgttaatgta ttagtaggaa atttcttgac gctattggaa ttgaagattc 75960

taatggatga tgttctacct atttcatccg ataacatgtt aatttccgac accaacggtt 76020

ttaatatttc gatgatatac ggtagtctct ctttcggact tatatagctt attccacaat 76080

acgagtcatt atatactcca aaaaacaaaa taactagtat aaaatctgta tcgaatggga 76140

aaaacgaaat tatcgacata ggtatagaat ccggaacatt gaacgtatta atacttaatt 76200

ctttttctgt ggtaagtacc gataggttat tgacattgta tggttttaaa tattctataa 76260

cttgagactt gatagatatt agtgatgaat tgaaaattat ttttatcacc acgtgtgttt 76320

caggatcatc gtcgacgcct gtcaaccaac cgaatggagt aaaataaata tcattaatat 76380

atgctctaga tattagtatt tttatcaatc ctttgattat catcttctcg taggcgaatg 76440

attccatgat caagagtgat ttgagaacat cctccggagt attaatgggc ttagtaaaca 76500

gtccatcgtt gcaataataa aagttatcca agttaaagga tattatgcat tcgtttaaag 76560

atatcacctc atctgacgga gacaattttt tggtaggttt tagagacttt gaagctactt 76620

gtttaacaaa gttattcatc gtcgtctact attctattta attttgtagt taatttatca 76680

catatcacat taattgactt tttggtccat ttttccatac gtttatattc ttttaatcct 76740

gcgttatccg tttccgttat attcagggat agatcttgca agttaaatag aatgctctta 76800

aataatgtca ttttcttatc cgctaaaaat ttaaagaatg tataaacctt tttcagagat 76860

ttgaaactct taggtggtgt cctagtacac aatatcataa acaaactaat aaacattcca 76920

cattcagatt ccaacagctg attaacttcc acattaatac agcctatttt cgctccaaat 76980

gtacattcga aaaatctgaa taaaacatcg atgtcacaat ttgtattatc caatacagaa 77040

tgtttgtgat tcgtgttaaa accatcggag aaggaataga aataaaaatt attatagtgg 77100

tggaattcag ttggaatatt gcctccggag tcataaaagg atactaaaca ttgtttttta 77160

tcataaatta cacatttcca atgagacaaa taacaaaatc caaacattac aaatctagag 77220

gtagaacttt taattttgtc tttaagtata tacgataaga tatgtttatt cataaacgcg 77280

tcaaattttt catgaatcgc taaggagttt aagaatctca tgtcaaattg tcctatataa 77340

tccacttcgg atccataagc aaactgagag actaagttct taatacttcg attgctcatc 77400

caggctcctc tctcaggctc tattttcatc ttgacgacct ttggattttc accagtatgt 77460

attcctttac gtgataaatc atcgattttc aaatccattt gtgagaagtc tatcgcctta 77520

gatacttttt cccgtagtcg aggtttaaaa aaatacgcta acggtatact agtaggtaac 77580

tcaaagacat catatataga atggtaacgc gtctttaact cgtcggttaa ctctttcttt 77640

tgatcgagtt cgtcgctact attgggtctg ctcaggtgcc ccgactctac tagttccaac 77700

atcataccga taggaataca agacactttg ccggcggttg tagatttatc atatttttcc 77760

actacatatc cgttacaatt tgttaaaaat ttagatacat ctatattgct acataatcca 77820

gctagtgaat atatatgaca taataaattg gtaaatccta gttctggtat tttactaatt 77880

actaaatctg tatatctttc catttatcat ggaaaagaat ttaccagata tcttcttttt 77940

tccaaactgc gttaatgtat tctcttacaa atattcacaa gatgaattca gtaatatgag 78000

taaaacggaa cgtgatagtt tctcattggc cgtgtttcca gttataaaac atagatggca 78060

taacgcacac gttgtaaaac ataaaggaat atacaaagtt agtacagaag cacgtggaaa 78120

aaaagtatct cctccatcac taggaaaacc cgcacacata aacctaaccg cgaagcaata 78180

tatatacagt gaacacacaa taagctttga atgttatagt tttctaaaat gtataacaaa 78240

tacagaaatc aattcgttcg atgagtatat attaagagga ctattagaag ctggtaatag 78300

tttacagata ttttccaatt ccgtaggtaa acgaacagat actataggtg tactagggaa 78360

taagtatcca tttagcaaaa ttccattggc ctcattaact cctaaagcac aacgagagat 78420

attttcagcg tggatttctc atagacctgt agttttaact ggaggaactg gagtgggtaa 78480

gacgtcacag gtacccaagt tattgctttg gtttaattat ttatttggtg gattctctac 78540

tctagataaa atcactgact ttcacgaaag accagtcatt ctatctcttc ctaggatagc 78600

tttagttaga ttgcatagca ataccatttt aaaatcattg ggatttaagg tactagatgg 78660

atctcctatt tctttacggt acggatctat accggaagaa ttaataaaca aacaaccaaa 78720

aaaatatgga attgtatttt ctacccataa gttatctcta acaaaactat ttagttatgg 78780

cactcttatt atagacgaag ttcatgagca tgatcaaata ggagatatta ttatagcagt 78840

agcgagaaag catcatacga aaatagattc tatgttttta atgactgcca cattagagga 78900

tgaccgagaa cggctaaaag tatttttacc taatcccgca tttatacata ttcctggaaa 78960

tacactgttt aaaattagcg aggtatttat tcataataag ataaatccat cttccagaat 79020

ggcatacata gaagaagaaa agagaaattt agttactgct atacagatgt atactcctcc 79080

tgatggatca tccggtatag tctttgtggc atccgttgca cagtgtcacg aatataaatc 79140

atatttagaa aaaagattac cgtatgatat gtatattatt catggtaagg tcttagatat 79200

agacgaaata ttagaaaaag tgtattcatc acctaatgta tcgataatta tttctactcc 79260

ttatttggaa tccagcgtta ctatacgcaa tgttacacac atttatgata tgggtagagt 79320

ttttgtcccc gctccttttg gaggatcgca acaatttatt tctaaatcta tgagagatca 79380

acgaaaagga agagtaggaa gagttaatcc tggtacatac gtctatttct atgatctgtc 79440

ttatatgaag tctatacagc gaatagattc agaatttcta cataattata tattgtacgc 79500

taataagttt aatctaacac tccccgaaga tttgtttata atccctacaa atttggatat 79560

tctatggcgt acaaaggaat atatagactc gttcgatatt agtacagaaa catggaataa 79620

attattatcc aattattata tgaagatgat agagtatgct aaactttatg tactaagtcc 79680

tattctcgct gaggagttgg ataactttga gaggacggga gaattaacta gtattgtacg 79740

agaagccatt ttatctctaa atttacgaat taagatttta aattttaaac ataaagatga 79800

tgatacgtat atacactttt gtaaaatatt attcggtgtc tataacggaa caaacgctac 79860

tatatattat catagacctc taacgggata tatgaatatg atttcagata ctatatttgt 79920

tcctgtagat aataactaaa aatcaaactc taatgaccac atcttttttt agagatgaaa 79980

aattttccac atctcctttt gtagacacga ctaaacattt tgcagaaaaa agtttattag 80040

tgtttagata atcgtatact tcatcagtgt agatagtaaa tgtgaacaga taaaaggtat 80100

tcttgctcaa tagattggta aattccatag aatatattaa tcctttcttc ttgagatccc 80160

acatcatttc aaccagagac gttttatcca atgatttacc tcgtactata ccacatacaa 80220

aactagattt tgcagtgacg tcgtacctgg tattcctacc aaacaaaatt ttacttttag 80280

ttcttttaga aaattctaag gtagaatctc tatttgccaa tatgtcatct atggaattac 80340

cactagcaaa aaatgataga aatatatatt gatacatcgc agctggtttt gatctactat 80400

actttaaaaa cgaatcagat tccataattg cctgtatatc atcagctgaa aaactatgtt 80460

ttacacgtat tccttcggca tttcttttta atgatatatc ttgtttagac aatgataaag 80520

ttatcatgtc catgagagac gcgtctccgt atcgtataaa tatttcatta gatgttagac 80580

gcttcattag gggtatactt ctataaggtt tcttaatcag tccatcattg gttgcgtcaa 80640

gaactactat cggatgttgt tgggtatctc tagtgttaca catggcctta ctaaagtttg 80700

ggtaaataac tatgatatct ctattaatta tagatgcata tatttcattt gtcaaggata 80760

ttagtatcga cttgctatcg tcattaatac gtgtaatgta atcatataaa tcatgcgata 80820

gccaaggaaa atttaaatag atgttcatca tataatcgtc gctataattc atattaatac 80880

gttgacattg actaatttgt aatatagcct cgccacgaag aaagctctcg tattcagttt 80940

catcgataaa ggataccgtt aaatataact ggttgccgat agtctcatag tctattaagt 81000

ggtaagtttc gtacaaatac agaatcccta aaatattatc taatgttgga ttaatcttta 81060

ccataactgt ataaaatgga gacggagtca taactatttt accgtttgta cttactggaa 81120

tagatgaagg aataatctcc ggacatgctg gtaaagaccc aaatgtctgt ttgaagaaat 81180

ccaatgttcc aggtcctaat ctcttaacaa aaattacgat attcgatccc gatatccttt 81240

gcattctatt taccagcata tcacgaacta tattaagatt atctatcatg tctattctcc 81300

caccgttata taaatcgcct ccgctaagaa acgttagtat atccatacaa tggaatactt 81360

catttctaaa atagtattcg ttttctaatt ctttaatgtg aaatcgtata ctagaaaggg 81420

aaaaattatc tttgagtttt ccgttagaaa agaaccacga aactaatgtt ctgattgcgt 81480

ccgattccgt tgctgaatta atggatttac accaaaaact catataactt ctagatgtag 81540

aagcattcgc taaaaaatta gtagaatcaa aggatataag tagatgttcc aacaagtgag 81600

caattcccaa gatttcatct atatcattct cgaatccgaa attagaaatt cccaagtaga 81660

tatccttttt catccgatcg ttgatgaaaa tacgaacttt attcggtaag acaatcattt 81720

actaaggagt aaaataggaa gtaatgttcg tatgtcgtta tcatcgtata aattaaaggt 81780

gtgtttttta ccattaagtg acattataat tttaccaata ttggaattat aatataggtg 81840

tatttgcgca ctcgcgacgg ttgatgcatc ggtaaatata gctgtatcta atgttctagt 81900

cggtatttca tcatttcgct gtctaataat agcgttttct ctatctgttt ccattacagc 81960

tgcctgaagt ttattggtcg gataatatgt aaaataataa gaaatacata cgaataacaa 82020

aaataaaata agatataata aagatgccat ttagagatct aattttgttc aacttgtcca 82080

aattcctact tacagaagat gaggaatcgt tggagatagt gtcttcctta tgtagaggat 82140

ttgaaatatc ttataatgac ttgataactt actttccaga taggaaatac cataaatata 82200

tttataaagt atttgaacat gtagatttat cggaggaatt aagtatggaa ttccatgata 82260

caactctgag agatttagtc tatcttagat tgtacaagta ttccaagtgt atacggccgt 82320

gttataaatt aggagataat ctaaaaggca tagttgttat aaaggacagg aatatttata 82380

ttagggaagc aaatgatgac ttgatagaat atctcctcaa ggaatacact cctcagattt 82440

atacatattc taatgagcgc gtccccataa ctggttcaaa attaattctt tgtggatttt 82500

ctcaagttac atttatggcg tatacaacgt cgcatataac aacaaataaa aaggtagatg 82560

ttctcgtttc caaaaaatgt atagatgaac tagtcgatcc aataaattat caaatacttc 82620

aaaatttatt tgataaagga agcggaacaa taaacaaaat actcaggaag atattttatt 82680

cggtaacagg tggccaaact ccataggtag ctttttctat ttcggatttt agaatttcca 82740

aattcaccag cgatttatcg gttttggtga aatccaagga tttattaatg tccacaaatg 82800

ccatttgttt tgtctgtgga ttgtatttga aaatggaaac gatgtagtta gatagatgcg 82860

ctgcgaagtt tcctattagg gttccgcgct tcacgtcacc cagcatactt gaatcaccat 82920

cctttaaaaa aatgataaga tatcaacatg gagtatatca tactcggatt ttaattcttc 82980

tactgactca ctgacatttt cacaaatact acaatacggt ttaccgaaaa taatcagtac 83040

gttcttcatt tatgggtatc aaaaacttaa aatcgttact gctggaaaat aaatcactga 83100

cgatattaga tgataattta tacaaagtat acaatggaat atttgtggat acaatgagta 83160

tttatatagc cgtcgccaat tgtgtcagaa acttagaaga gttaactacg gtattcataa 83220

aatacgtaaa cggatgggta aaaaagggag ggcatgtaac cctttttatc gatagaggaa 83280

gtataaaaat taaacaagac gttagagaca agagacgtaa atattctaaa ttaaccaagg 83340

acagaaaaat gctagaatta gaaaagtgta catccgaaat acaaaatgtt accggattta 83400

tggaagaaga aataaaggca gaaatgcaat taaaaatcga taaactcaca tttcaaatat 83460

atttatctga ttctgataac ataaaaatat cattgaatga gatactaaca catttcaaca 83520

ataatgagaa tgttacatta ttttattgtg atgaacgaga cgcagaattc gttatgtgtc 83580

tcgaggctaa aacacatttc tctaccacag gagaatggcc gttgataata agtaccgatc 83640

aggatactat gctatttgca tctgctgata atcatcctaa gatgataaaa aacttaactc 83700

aactgtttaa atttgttccc tcggcagagg ataactattt agcaaaatta acggcgttag 83760

tgaatggatg tgatttcttt cctggactct atggggcatc tataacaccc accaacttaa 83820

acaaaataca attgtttagt gattttacaa tcgataatat agtcactagt ttggcaatta 83880

aaaattatta tagaaagact aactctaccg tagacgtgcg taatattgtt acgtttataa 83940

acgattacgc taatttagac gatgtctact cgtatattcc tccttgtcaa tgcactgttc 84000

aagaatttat attttccgca ttagatgaaa aatggaatga atttaaatca tcttatttag 84060

agaccgttcc gttaccctgt caattaatgt acgcgttaga accacgtaag gagattgatg 84120

tttcagaagt taaaacttta tcatcttata tagatttcga aaatactaaa tcagatatcg 84180

atgttataaa atctatatcc tcgatcttcg gatattctaa cgaaaactgt aacacgatag 84240

tattcggcat ctataaggat aatttactac tgagtataaa tagttcattt tactttaacg 84300

atagtctgtt aataaccaat actaaaagtg ataatataat aaatataggt tactagatta 84360

aaaatggtgt tccaactcgt gtgctctacg tgcggcaaag atatttctca cgaacgatat 84420

aaattgatta tacgaaaaaa atcattaaag gatgtactcg tcagtgtaaa gaacgaatgt 84480

tgtaggttaa aattatctac acaaatagaa cctcaacgta acttaacagt gcaacctcta 84540

ttggatataa actaatatgg atccggttaa ttttatcaag acatatgcgc ctagaggttc 84600

tattattttt attaattata ccatgtcatt aacaagtcat ttgaatccat cgatagaaaa 84660

acatgtgggt atttattatg gtacgttatt atcggaacac ttggtagttg aatctaccta 84720

tagaaaagga gttcgaatag tcccattgga tagttttttt gaaggatatc ttagtgcaaa 84780

agtatacatg ttagagaata ttcaagttat gaaaatagca gctgatacgt cattaacttt 84840

attgggtatt ccgtatggat ttggtcatga tagaatgtat tgttttaaat tggtagctga 84900

ctgttataaa aatgccggta ttgatacatc gtctaaacga atattaggta aagatatttt 84960

tctgagccaa aacttcacag acgataatag atggataaag atatatgatt ctaataattt 85020

aacattttgg caaattgatt accttaaagg gtgagttaat atgcataact actcctccgt 85080

tgttttttcc ctcgttcttt ttcttaacgt tgtttgccat cactctcata atgtaaagat 85140

attctaaaat ggtaaacttt tgcatatcgg acgcagaaat tggtataaat gttgtaattg 85200

tattatttcc cgtcaatgga ctagtcacag ctccatcagt tttatatcct ttagagtatt 85260

tctcactcgt gtctagcatt ctagagcatt ccatgatctg tttatcgttg atattggccg 85320

gaaagataga ttttttattt tttattatat tactattggc aattgtagat ataacttctg 85380

gtaaatattt ttctaccttt tcaatctctt ctattttcaa gccggctata tattctgcta 85440

tattgttgct agtatcaata ccttttctgg ctaagaagtc atatgtggta ttcactatat 85500

cagttttaac tggtagttcc attagccttt ccacttctgc agaataatca gaaattggtt 85560

ctttaccaga aaatccagct actataatag gctcaccgat gatcattggc aaaatcctat 85620

attgtaccag attaatgaga gcatatttca tttccaataa ttctgctagt tcttgagaca 85680

ttgatttatt tgatgaatct agttggttct ctagatactc taccatttct gccgcataca 85740

ataacttgtt agataaaatc agggttatca aagtgtttag cgtggctaga atagtgggct 85800

tgcatgtatt aaagaatgcg gtagtatgag taaaccgttt taacgaatta tatagtctcc 85860

agaaatctgt ggcgttgcat acatgagccg aatgacatcg aagattgtcc aatattttta 85920

atagctgctc tttgtccatt atttctatat ttgactcgca acaattgtag ataccattaa 85980

tcaccgattc ctttttcgat gctggacaat agcacaattg tttagctttg gactctatgt 86040

attcagaatt aatagatata tctctcaata cagattgcac tatacatttt gaaactatgt 86100

caaaaattgt agaacgacgc tgttctgcag ccatttaact ttaaataatt tacaaaaatt 86160

taaaatgagc atccgtataa aaatcgataa actgcgccaa attgtggcat atttttcaga 86220

gttcagtgaa gaagtgtcta taaatgtaga ctcgacggat gagttaatgt atatttttgc 86280

cgccttgggc ggatctgtaa acatttgggc cattatacct ctcagtgcat cagtgtttta 86340

ccgaggagcc gaaaacattg tgtttaatct tcctgtgtcc aaggtaaaat cgtgtttgtg 86400

tagttttcac aatgatgcca tcatagatat agaacctgat ctggaaaata atctagtaaa 86460

actttctagt tatcatgtag taagtgtcga ttgtaataag gaactgatgc ctattaggac 86520

agatactact atttgtctaa gtatagatca aaagaaatct tatgtgttta attttcacaa 86580

gtatgaagaa aaatgttgtg gtagaaccgt cattcattta gaatggttgt tgggctttat 86640

caagtgtatt agtcagcatc agcatctggc tattatgttt aaagatgaca atattattat 86700

gaagactcct ggtaatactg atgcattttc cagggaatat tctatgactg aatgttctca 86760

agaactacaa aagttttctt tcaaaatagc tatctcgtct ctcaacaaac tacgaggatt 86820

caaaaagaga gtcaatgttt ttgaaactag aatcgtaatg gataatgacg ataacatttt 86880

aggaatgttg ttttcggata gagttcaatc ctttaagatc aacatcttta tggcgttttt 86940

agattaatac tttcaatgag ataaatatgg gtggcagagt aagtgttgag ctccctaaac 87000

gggatccgcc tccgggagta cccactgatg agatgttatt aaacgtggat aaaatgcatg 87060

acgtgatagc tcccgctaag cttttagaat atgtgcatat aggaccacta gcaaaagata 87120

aagaggataa agtaaagaaa agatatccag agtttagatt agtcaacaca ggacccggtg 87180

gtctttcggc attgttaaga caatcgtata atggaaccgc acccaattgc tgtcgcactt 87240

ttaatcgtac tcattattgg aagaaggatg gaaagatatc agataagtat gaagagggtg 87300

cagtattaga atcgtgttgg ccagacgttc acgacactgg aaaatgcgat gttgatttat 87360

tcgactggtg tcagggggat acgttcgata gaaacatatg ccatcagtgg atcggttcag 87420

cctttaatag gagtaataga actgtagagg gtcaacaatc gttaataaat ctgtataata 87480

agatgcaaac attatgtagt aaagatgcta gtgtaccaat atgcgaatca tttttgcatt 87540

atttacgcgc acacaataca gaagatagca aagagatgat cgattatatt ctaagacaac 87600

agtctgcgga ctttaaacag aaatatatga gatgtagtta tcccactaga gataagttag 87660

aagagtcatt aaaatatgcg gaacctcgag aatgttggga tccagagtgt tcgaatgcca 87720

atgttaattt cttactaaca cgtaattata ataatttagg actttgcaat attgtacgat 87780

gtaataccag cgtgaacaac ttacagatgg ataaaacttc ctcattaaga ttgtcatgtg 87840

gattaagcaa tagtgataga ttttctactg ttcccgtcaa tagagcaaaa gtagttcaac 87900

ataatattaa acattcgttc gacctaaaat tgcatttgat cagtttatta tctctcttgg 87960

taatatggat actaattgta gctatttaaa tgggtgccgc ggcaagcata cagacgacgg 88020

tgaatacact cagcgaacgt atctcgtcta aattagaaca agaagcgaac gctagtgctc 88080

aaacaaaatg tgatatagaa atcggaaatt tttatatccg acaaaaccat ggatgtaacc 88140

tcactgttaa aaatatgtgc tctgcggacg cggatgctca gttggatgct gtgttatcag 88200

ccgctacaga aacatatagt ggattaacac cggaacaaaa agcatacgtg ccagctatgt 88260

ttactgctgc gttaaacatt cagacgagtg taaacactgt tgttagagat tttgaaaatt 88320

atgtgaaaca gacttgtaat tctagcgcgg tcgtcgataa caaattaaag atacaaaacg 88380

taatcataga tgaatgttac ggagccccag gatctccaac aaatttggaa tttattaata 88440

caggatctag caaaggaaat tgtgccatta aagcgttgat gcaattgacg actaaggcca 88500

ctactcaaat agcacctaga caagttgctg gtacaggagt tcagttttat atgattgtta 88560

tcggtgttat aatattggca gcgttgttta tgtactatgc caagcgtatg ttgttcacat 88620

ccaccaatga taaaatcaaa cttattttag ccaataagga aaacgtccat tggactactt 88680

acatggacac attctttaga acttctccga tggttattgc taccacggat atgcaaaact 88740

gaaaatatat tgataatatt ttaatagatt aacatggaag ttatcgctga tcgtctagac 88800

gatatagtga aacaaaatat agcggatgaa aaatttgtag attttgttat acacggtcta 88860

gagcatcaat gtcctgctat acttcgacca ttaattaggt tgtttattga tatactatta 88920

tttgttatag taatttatat ttttacggta cgtctagtaa gtagaaatta tcaaatgttg 88980

ttggtggcgc tagtcatcac attaactatt ttttattact ttatactata atagtactag 89040

actgacttct aacaaacatc tcacctgcca taaataaatg cttgatatta aagtcttcta 89100

tttctaacac tattccatct gtggaaaata atactctgac attatcgcta attgacacat 89160

cggtgagtga tatgcctata aagtaataat cttctttggg cacatatacc agtgtaccag 89220

gttctaacaa cctatttact ggtgctcctg tagcatactt tttctttacc ttgagaatat 89280

ccatcgtttg cttggtcaat agcgatatgt gattttttat caaccactcg aaaaagtaat 89340

tggagtgttc atatcctcta cgggctattg tctcatggcc gtgtatgaaa tttaagtaac 89400

acgactgtgg tagatttgtt ctatagagcc gattgccgca aatagataga actaccaata 89460

tgtctgtaca aatgttaaac attaattgat taacagaaaa aacaatgttc gttctgggaa 89520

tagaaaccag atcaaaacaa aattcgttag aatatatgcc acgtttatac atggaatata 89580

aaataactac agtttgaaaa ataacagtat catttaaaca tttaacttgc ggggttaatt 89640

tcacaacttt actgttttta aactgttcaa aatatagcat cgatccgtga gaaatacgtt 89700

tagccgcctt taatagagga aatcccaccg cctttctgga tctcaccaac gacgatagtt 89760

ctgaccagca actcatttct tcatcatcca cctgttttaa catataatag gcaggagata 89820

gatatccgtc attgcaatat tccttctcgt aggcacacaa tctaatattg ataaaatctc 89880

cattctcttc tctgcattta ttatcttgtt tcggtggctg attaggctgt agtcttggtt 89940

taggctttgg tatatcgttg ttgaatctat tttggtcatt aaatctttca tttcttcctg 90000

gtatattttt atcacctcgt ttggttggat ttttgtctat attatcgttt gtaacatcgg 90060

tacgggtatt catttatcac aaaaaaaact tctctaaatg agtctactgc tagaaaacct 90120

catcgaagaa gataccatat tttttgcagg aagtatatct gagtatgatg atttacaaat 90180

ggttattgcc ggcgcaaaat ccaaatttcc aagatctatg ctttctattt ttaatatagt 90240

acctagaacg atgtcaaaat atgagttgga gttgattcat aacgaaaata tcacaggagc 90300

aatgtttacc acaatgtata atataagaaa caatttgggt ctaggagatg ataaactaac 90360

tattgaagcc attgaaaact atttcttgga tcctaacaat gaagttatgc ctcttattat 90420

taataatacg gatatgactg ccgtcattcc taaaaaaagt ggtaggagaa agaataagaa 90480

catggttatc ttccgtcaag gatcatcacc tatcttgtgc attttcgaaa ctcgtaaaaa 90540

gattaatatt tataaagaaa atatggaatc cgcgtcgact gagtatacac ctatcggaga 90600

caacaaggct ttgatatcta aatatgcggg aattaatgtc ctgaatgtgt attctccttc 90660

cacatccata agattgaatg ccatttacgg attcaccaat aaaaataaac tagagaaact 90720

tagtactaat aaggaactag aatcgtatag ttctagccct cttcaagaac ccattaggtt 90780

aaatgatttt ctgggactat tggaatgtgt taaaaaaaat attcctctaa cagatattcc 90840

gacaaaggat tgattactat aaatggagaa tgttcctaat gtatacttta atcctgtgtt 90900

tatagagccc acgtttaaac attctttatt aagtgtttat aaacacagat taatagtttt 90960

atttgaagta ttcgttgtat tcattctaat atatgtattt tttagatctg aattaaatat 91020

gttcttcatg cctaaacgaa aaatacccga tcctattgat agattacgac gtgctaatct 91080

agcgtgtgaa gacgataaat taatgatcta tggattacca tggatgacaa ctcaaacatc 91140

tgcgttatca ataaatagta aaccgatagt gtataaagat tgtgcaaagc ttttgcgatc 91200

aataaatgga tcacaaccag tatctcttaa cgatgttctt cgcagatgat gattcatttt 91260

ttaagtattt ggctagtcaa gatgatgaat cttcattatc tgatatattg caaatcactc 91320

aatatctaga ctttctgtta ttattattga tccaatcaaa aaataaatta gaagccgtgg 91380

gtcattgtta tgaatctctt tcagaggaat acagacaatt gacaaaattc acagactctc 91440

aagattttaa aaaactgttt aacaaggtcc ctattgttac agatggaagg gtcaaactta 91500

ataaaggata tttgttcgac tttgtgatta gtttgatgcg attcaaaaaa gaatcctctc 91560

tagctaccac cgcaatagat cctattagat acatagatcc tcgtcgtgat atcgcatttt 91620

ctaacgtgat ggatatatta aagtcgaata aagtgaacaa taattaattc tttattgtca 91680

tcatgaacgg cggacatatt cagttgataa tcggccccat gttttcaggt aaaagtacag 91740

aattaattag acgagttaga cgttatcaaa tagctcaata taaatgcgtg actataaaat 91800

attctaacga taatagatac ggaacgggac tatggacgca tgataagaat aattttgaag 91860

cattggaagc aactaaacta tgcgatgtct tggaatcaat tacagatttc tccgtgatag 91920

gtatcgatga aggacagttc tttccagaca ttgttgaatt ctgtgagcgt atggcaaacg 91980

aaggaaaaat agttatagta gccgcactcg atgggacatt tcaacgtaaa ccgtttaata 92040

atattttgaa tcttattcca ttatctgaaa tggtggtaaa actaactgct gtgtgtatga 92100

aatgctttaa ggaggcttcc ttttctaaac gattgggtga ggaaaccgag atagaaataa 92160

taggaggtaa tgatatgtat caatcggtgt gtagaaagtg ttacatcgac tcataatatt 92220

atatttttta tctaaaaaac taaaaataaa cattgattaa attttaatat aatacttaaa 92280

aatggatgtt gtgtcgttag ataaaccgtt tatgtatttt gaggaaattg ataatgagtt 92340

agattacgaa ccagaaagtg caaatgaggt cgcaaaaaaa ctgccgtatc aaggacagtt 92400

aaaactatta ctaggagaat tattttttct tagtaagtta cagcgacacg gtatattaga 92460

tggtgccacc gtagtgtata taggatctgc tcccggtaca catatacgtt atttgagaga 92520

tcatttctat aatttaggag tgatcatcaa atggatgcta attgacggcc gccatcatga 92580

tcctatttta aatggattgc gtgatgtgac tctagtgact cggttcgttg atgaggaata 92640

tctacgatcc atcaaaaaac aactgcatcc ttctaagatt attttaattt ctgatgtaag 92700

atccaaacga ggaggaaatg aacctagtac ggcggattta ctaagtaatt acgctctaca 92760

aaatgtcatg attagtattt taaaccccgt ggcatctagt cttaaatgga gatgcccgtt 92820

tccagatcaa tggatcaagg acttttatat cccacacggt aataaaatgt tacaaccttt 92880

tgctccttca tattcagctg aaatgagatt attaagtatt tataccggtg agaacatgag 92940

actgactcga gttaccaaat tagacgctgt aaattatgaa aaaaagatgt actaccttaa 93000

taagatcgtc cgtaacaaag tagttgttaa ctttgattat cctaatcagg aatatgacta 93060

ttttcacatg tactttatgc tgaggaccgt gtactgcaat aaaacatttc ctactactaa 93120

agcaaaggta ctatttctac aacaatctat atttcgtttc ttaaatattc caacaacatc 93180

aactgaaaaa gttagtcatg aaccaataca acgtaaaata tctagcaaaa attctatgtc 93240

taaaaacaga aatagcaaga gatccgtacg cggtaataaa tagaaacgta ctactgagat 93300

atactaccga tatagagtat aatgatttag ttactttaat aaccgttaga cataaaattg 93360

attctatgaa aactgtgttt caggtattta acgaatcatc cataaattat actccggttg 93420

atgatgatta tggagaacca atcattataa catcgtatct tcaaaaaggt cataacaagt 93480

ttcctgtaaa ttttctatac atagatgtgg taatatctga cttatttcct agctttgtta 93540

gactagatac tacagaaact aatatagtta atagtgtact acaaacaggt gatggtaaaa 93600

agactcttcg tcttcccaaa atgttagaga cggaaatagt tgtcaagatt ctctatcgcc 93660

ctaatatacc attaaaaatt gttagatttt tccgcaataa catggtaact ggagtagaga 93720

tagccgatag atctgttatt tcagtcgctg attaatcaat tagtagagat gagataagaa 93780

cattataata atcaataata tatcttatat cttatatctt atatcttata tcttgtttag 93840

aaaaatgcta atattaaaat agctaacgct agtaatccaa tcggaagcca tttgatatct 93900

ataatagggt atctaatttc ctgatttaaa tagcggacag ctatattctc ggtagctact 93960

cgtttggaat cacaaacatt atttacatct aatttactat ctgtaatgga aacgtttccc 94020

aatgaaatgg tacaatccga tacattgcat tttgttatat ttttttttaa agaggctggt 94080

aacaacgcat cgcttcgttt acatggctcg taccaacaat aatagggtaa tcttgtatct 94140

attcctatcc gtactatgct tttatcagga taaatacatt tacatcgtat atcgtctttg 94200

ttagcatcac agaatgcata aatttgttcg tccgtcatga taaaaattta aagtgtaaat 94260

ataactatta tttttatagt tgtaataaaa agggaaattt gattgtatac tttcggttct 94320

ttaaaagaaa ctgacttgat aaaaatggct gtaatctcta aggttacgta tagtctatat 94380

gatcaaaaag agattaatgc tacagatatt attattagtc atgttaaaaa tgacgacgat 94440

atcggtaccg ttaaagatgg taaactaggt gctatggatg gggcattatg taagacttgt 94500

gggaaaacgg aattggaatg tttcggtcac tggggtaaag taagtattta taaaactcat 94560

atagttaagc ctgaatttat ttcagaaatt attcgtttac tgaatcatat atgtattcac 94620

tgcggattat tgcgttcacg agaaccgtat tccgacgata ttaacctaaa agagttatcg 94680

ggacacgctc ttaggagatt aaaggataaa atattatcca agaaaaagtc atgttggaac 94740

agcgaatgta tgcaaccgta tcaaaaaatt actttttcaa agaaaaaggt ttgtttcgtc 94800

aacaagttgg atgatattaa cgttcctaat tctctcatct atcaaaagtt aatttctatt 94860

catgaaaagt tttggccatt attagaaatt catcaatatc cagctaactt attttataca 94920

gactactttc ccatccctcc gttgattatt agaccggcta ttagtttttg gatagatagt 94980

atacccaaag aaaccaatga attaacttac ttattaggta tgatcgttaa gaattgtaac 95040

ttgaatgctg atgaacaggt tatccagaag gcggtaatag aatacgatga tattaaaatt 95100

atttctaata acactaccag tatcaattta tcatatatta catccggcaa aaataatatg 95160

attagaagtt atatcgtcgc ccggcgaaaa gatcagaccg ctagatctgt aattggtccc 95220

agtacatcta tcaccgttaa tgaggtagga atgcccgcat atattagaaa tacacttaca 95280

gaaaagatat ttgttaatgc ctttacagtg gataaagtta aacaactatt agcgtcaaac 95340

caagttaaat tttactttaa taaacgatta aaccaattaa caagaatacg ccaaggaaag 95400

tttattaaaa ataaaataca tttattgcct ggtgattggg tagaagtagc tgttcaagaa 95460

tatacaagta ttatttttgg aagacagccg tctctacata gatacaacgt catcgcttca 95520

tctatcagag ctaccgaagg agatactatc aaaatatctc ccggaattgc caactctcaa 95580

aatgctgatt tcgacgggga tgaggaatgg atgatattag aacaaaatcc taaagctgta 95640

attgaacaaa gtattcttat gtatccgacg acgttactca aacacgatat tcatggagcc 95700

cccgtttatg gatctattca agatgaaatc gtagcagcgt attcattgtt taggatacaa 95760

gatctttgtt tagatgaagt attgaacatc ttggggaaat atggaagaga gttcgatcct 95820

aaaggtaaat gtaaattcag cggtaaagat atctatactt acttgatagg tgaaaagatt 95880

aattatccgg gtctcttaaa ggatggtgaa attattgcaa acgacgtaga tagtaatttt 95940

gttgtggcta tgaggcatct gtcattggct ggactcttat ccgatcataa gtcgaacgtg 96000

gaaggtatca actttattat caagtcatct tatgttttta agagatatct atctatttac 96060

ggttttgggg tgacattcaa agatctgaga ccaaattcga cgttcactaa taaattggag 96120

gccatcaacg tagaaaaaat agaacttatc aaagaagcat acgccaaata tctcaacgat 96180

gtaagagacg ggaaaatagt tccattatct aaagctttag aggcggacta tgtggaatcc 96240

atgttatcca acttgacaaa tcttaatatc cgagagatag aagaacatat gagacaaacg 96300

ctgatagatg atccagataa taacctcctg aaaatggcca aagcgggtta taaagtaaat 96360

cctacagaac taatgtatat tctaggtacg tatggacaac aaaggattga tggtgaacca 96420

gcagagactc gagtattggg tagagtttta ccttactatc ttccagactc taaggatcca 96480

gaaggaagag gttacattct taattcttta acaaaaggat taacgggttc tcaatattac 96540

ttttcgatgc tggttgccag atctcaatct actgatatcg tctgtgaaac atcacgtacc 96600

ggaacactgg ctagaaaaat cattaaaaag atggaggata tggtggtcga cggatacgga 96660

caagtagtta taggtaatac gctcatcaag tacgccgcca attataccaa aattctaggc 96720

tcagtatgta aacctgtaga tcttatctat ccagatgagt ccatgacttg gtatttggaa 96780

attagtgctc tgtggaataa aataaaacag ggattcgttt actctcagaa acagaaactt 96840

gcaaagaaga cattggcgcc gtttaatttc ctagtattcg tcaaacccac cactgaggat 96900

aatgctatta aggttaagga tctgtacgat atgattcata acgtcattga tgatgtgaga 96960

gagaaatact tctttacggt atctaatata gattttatgg agtatatatt cttgacgcat 97020

cttaatcctt ctagaattag aattacaaaa gaaacggcta tcactatctt tgaaaagttc 97080

tatgaaaaac tcaattatac tctaggtggt ggaactccta ttggaattat ttctgcacag 97140

gtattgtctg agaagtttac acaacaagcc ctgtccagtt ttcacactac tgaaaaaagt 97200

ggtgccgtca aacaaaaact tggtttcaac gagtttaata acttgactaa tttgagtaag 97260

aataagaccg aaattatcac tctggtatcc gatgatatct ctaaacttca atctgttaag 97320

attaatttcg aatttgtatg tttgggagaa ttaaatccag acatcactct tcgaaaagaa 97380

acagataggt atgtagtaga tataatagtc aatagattat acatcaagag agcagaaatt 97440

accgaattag tcgtcgaata tatgattgaa cgatttatct cctttagcgt cattgtaaag 97500

gaatggggta tggaaacatt cattgaggat gaggataata ttagatttac tgtctatcta 97560

aatttcgttg aaccagagga attgaatctt agtaagttta tgatggttct tccgggtgcc 97620

gccaacaagg gcaagattag taaattcaag attcctatct ctgattatac gggttatgac 97680

gacttcaatc aaacaaaaaa gctcaataag atgactgtag aactcatgaa tctaaaagaa 97740

ttgggttctt tcgatttgga aaacgtcaac gtgtatcctg gagtatggaa tacatacgat 97800

atcttcggta tcgaggccgc tcgtgaatac ttgtgcgaag ccatgttaaa cacctatgga 97860

gaagggttcg attatctgta tcagccttgt gatcttctcg ctagtttact atgtgctagt 97920

tacgaaccag aatcagtgaa taaattcaag ttcggcgcag ctagtactct taagagagct 97980

acgttcggag acaataaagc attgttaaac gcggctcttc ataaaaagtc agaacctatt 98040

aacgataata gtagctgcca cttttttagc aaggtcccta atataggaac tggatattac 98100

aaatacttta tcgacttggg tcttctcatg agaatggaaa ggaaactatc tgataagata 98160

tcttctcaaa agatcaagga aatggaagaa acagaagact tttaattctt atcaataaca 98220

tatttttcta tgatctgtct tttaaacgat ggattttcca caaatgcgcc tctcaagtcc 98280

ctcatagaat gatacacgta taaaaaatat agcataggca atgactcctt atttttagac 98340

attagatatg ccaaaatcat agccccgctt ctatttactc ccgcagcaca atgaaccaac 98400

acgggctcgt ttcgttgatc acatttagat aaaaaggcgg ttacgtcgtc aaaatattta 98460

ctaatatcgg tagttgtatc atctaccaac ggtatatgaa taatattaat attagagtta 98520

ggtaatgtat atttatccat cgtcaaattt aaaacatatt tgaacttaac ttcagatgat 98580

ggtgcatcca tagcattttt ataatttccc aaatacacat tattggttac tcttgtcatt 98640

atagtgggag atttggcttt gtgcatatct ccagttgaac gtagtagtaa gtatttatac 98700

aaacttttct tatccattta taacgtacaa atggataaaa ctactttatc ggtaaacgcg 98760

tgtaatttag aatacgttag agaaaaggct atagtaggcg tacaagcagc caaaacatca 98820

acacttatat tctttgttat tatattggca attagtgcgc tattactctg gtttcagacg 98880

tctgataatc cagtctttaa tgaattaacg agatatatgc gaattaaaaa tacggttaac 98940

gattggaaat cattaacgga tagcaaaaca aaattagaaa gtgatagagg tagacttcta 99000

gccgctggta aggatgatat attcgacttc aaatgtgtgg atttcggcgc ctattttata 99060

gctatgcgat tggataagaa aacatatctg ccgcaagcta ttaggcgagg tactggagac 99120

gcgtggatgg ttaaaaaggc ggcaaaggtc gatccatctg ctcaacaatt ttgtcagtat 99180

ttgataaaac acaagtctaa taatgttatt acttgtggta atgagatgtt aaatgaatta 99240

ggttatagcg gttattttat gttaccgcat tggtgttccg attttagtaa tatggaatag 99300

tgttagataa atgcggtaac aaatgttcct gtaaggaacc ataacagttt agatttaacg 99360

ttaaagatga gcataaacat aataaacaaa attacaatca aacctataac attaatatca 99420

aacaatccaa aaaatgaaat cagtggagta gtaaacgcgt acataactcc tggataacgt 99480

ttagcagctg ccgttcctat tctagaccaa aaattcggtt tcatgttttc gaaacggtat 99540

tctgcaacaa gtcgaggatc gtgttctaca tatttggcgg cgttatccag tatctgccta 99600

ttgatcttca tttcgttttc gattctggct atttcaaaat aaaatcccga tgatagacct 99660

ccagacttta taatttcatc tacgatgttc agcgccgtag taactctaat aatataggct 99720

gataagctaa catcataccc tcctgtatat gtgaatatgg catgattttt gtccattaca 99780

agctcggttt taactttatt gcctgtaata atttctctca tctgtaggat atctattttt 99840

ttgtcatgca ttgccttcaa gacgggacga agaaacgtaa tatcctcaat aacgttatcg 99900

ttttctacaa taactacata ttctaccttt ttattttcta actcagtaaa aaaattagaa 99960

tcccataggg ctaaatgtct agcgatattt cttttcgttt cctctgtaca catagtgtta 100020

caaaaccctg aaaagaagtg agtatacttg tcatcatttc taatgtttcc tccagtccac 100080

tgtataaacg cataatcctt gtaatgatct ggatcatcct tgactaccac aacatttctt 100140

ttttctggca taacttcgtt gtcctttaca tcatcgaact tctgatcatt aatatgctca 100200

tgaacattag gaaatgtttc tgatggaggt ctatcaataa ctggcacaac aataacagga 100260

gttttcaccg ccgccattta gttattgaaa ttaatcatat acaactcttt aatacgagtt 100320

atattttcgt ctatccattg tttcacattg acatatttcg acaaaaagat ataaaatgcg 100380

tattccaatg cttctctgtt taatgaatta ctaaaatata caaacacgtc actgtctggc 100440

aataaatgat atcttagaat attgtaacaa tttattttgt attgcacatg ttcgtgatct 100500

atgagttctt cttcgaatgg cataggatct ccgaatctga aaacgtataa ataggagtta 100560

gaataataat atttgagagt attggtaata tataaactct ttagcggtat aattagtttt 100620

tttctctcaa tttctatttt tagatgtgat ggaaaaatga ctaattttgt agcattagta 100680

tcatgaactc taatcaaaat cttaatatct tcgtcacacg ttagctcttt gaagttttta 100740

agagatgcat cagttggttc tacagatgga gtaggtgcaa caattttttg ttctacacat 100800

gtatgtactg gagccattgt tttaactata atggtgcttg tatcgaaaaa ctttaatgca 100860

gatagcggaa gctcttcgcc gcgactttct acatcgtaat tgggttctaa cgccgatctc 100920

tgaatggata ctagttttct aagttctaat gtgattctct gaaaatgtaa atccaattcc 100980

tccggcatta tagatgtgta tacatcggta aataaaacta tagtatccaa cgatcccttc 101040

tcgcaaattc tagtcttaac caaaaaatcg tatataacca cggagatggc gtatttaaga 101100

gtggattctt ctaccgtttt gttcttggat gtcatatagg aaactataaa gtccgcacta 101160

ctgttaagaa tgattactaa cgcaactata tagtttaaat taagcatttt ggaaacataa 101220

aataactctg tagacgatac ttgactttcg aataagtttg cagacaaacg aagaaagaac 101280

agacctctct taatttcaga agaaaacttt ttttcgtatt cctgacgtct agagtttata 101340

tcaataagaa agttaagaat tagtcggtta atgttgtatt tcattaccca agtttgagat 101400

ttcataatat tatcaaaaga catgataata ttaaagataa agcgctgact atgaacgaaa 101460

tagctatatg gttcgctcaa gaatatagtc ttgttaaacg tggaaacgat aactgtattt 101520

ttaatcacgt cagcggcatc taaattaaat ataggtatat ttattccaca cactctacaa 101580

tatgccacac catcttcata ataaataaat tcgttagcaa aattattaat tttagtgaaa 101640

tagttagcgt caactttcat agcttccttc aatctaattt gatgctcaca cggtgcgaat 101700

tccactctaa catccctttt ccatgcctca ggttcatcga tctctataat atctagtttt 101760

ttgcgtttca caaacacagg ctcgtctctc gcgatgagat ctgtatagta actatgtaaa 101820

tgataactag atagaaagat gtagctatat agatgacgat cctttaagag aggtataata 101880

actttacccc aatcagatag actgttgtta tggtcttcgg aaaaagaatt tttataaatt 101940

tttccagtat tttccaaata tacgtactta acatctaaaa aatccttaat gataatagga 102000

atggataatc cgtctatttt ataaagaaat acatatcgca cattatactt ttttttggaa 102060

atgggaatac cgatgtgtct acataaatat gcaaagtcta aatatttttt agagaatctt 102120

agttggtcca aattcttttc caagtacggt aatagatttt tcatattgaa cggtatcttc 102180

ttaatctctg gttctagttc cgcattaaat gatgaaacta agtcactatt tttataacta 102240

acgattacat cacctctaac atcatcattt accagaatac tgatcttctt ttgtcgtaaa 102300

tacatgtcta atgtgttaaa aaaaagatca tacaagttat acgtcatttc atctgtggta 102360

ttcttgtcat tgaaggataa actcgtacta atctcttctt taacagcctg ttcaaattta 102420

tatcctatat acgaaaaaat agcaaccagt gtttgatcat ccgcgtcaat attctgttct 102480

atcgtagtgt ataacaatcg tatatcttct tctgtgatag tcgatacgtt ataaaggttg 102540

ataacgaaaa tatttttatt ttgtgaaata aagtcatcgt aggattttgg acttatattc 102600

gcgtctagta gatatgcttt tatttttgga atgatctcaa ttagaatagt ctctttagag 102660

tccatttaaa gttacaaaca actaggaaat tggtttatga tgtataattt ttttagtttt 102720

tatagattct ttattctata cttaaaaaat gaaaataaat acaaaggttc ttgagggttg 102780

tgttaaattg aaagcgagaa ataatcataa attatttcat tatcgcgata tccgttaagt 102840

ttgtatcgta atggcgtggt caattacgaa taaagcggat actagtagtt tcacaaagat 102900

ggctgaaatc agagctcatc taaaaaatag cgctgaaaat aaagataaaa acgaggatat 102960

tttcccggaa gatgtaataa ttccatctac taagcccaaa accaaacgag ccactactcc 103020

tcgtaaacca gcggctacta aaagatcaac caaaaaggag gaagtggaag aagaagtagt 103080

tatagaggaa tatcatcaaa caactgaaaa aaattctcca tctcctggag tcagcgacat 103140

tgtagaaagc gtggccgctg tagagctcga tgatagcgac ggggatgatg aacctatggt 103200

acaagttgaa gctggtaaag taaatcatag tgctagaagc gatctttctg acctaaaggt 103260

ggctaccgac aatatcgtta aagatcttaa gaaaattatt actagaatct ctgcagtatc 103320

gacggttcta gaggatgttc aagcagctgg tatctctaga caatttactt ctatgactaa 103380

agctattaca acactatctg atctagtcac cgagggaaaa tctaaagttg ttcgtaaaaa 103440

agttaaaact tgtaagaagt aaatgcgtgc acttttttat aaagatggta aactctttac 103500

cgataataat tttttaaatc ctgtatcaga cgataatcca gcgtatgagg ttttgcaaca 103560

tgttaaaatt cctactcatt taacagatgt agtagtatat gaacaaacgt gggaggaggc 103620

gttaactaga ttaatttttg tgggaagcga ttcaaaagga cgtagacaat acttttacgg 103680

aaaaatgcat gtacagaatc gcaacgctaa aagagatcgt atttttgtta gagtatataa 103740

cgttatgaaa cgaattaatt gttttataaa caaaaatata aagaaatcgt ccacagattc 103800

caattatcag ttggcggttt ttatgttaat ggaaactatg ttttttatta gatttggtaa 103860

aatgaaatat cttaaggaga atgaaacagt agggttatta acactaaaaa ataaacacat 103920

agaaataagt cccgatgaaa tagttatcaa gtttgtagga aaggacaaag tttcacatga 103980

atttgttgtt cataagtcta atagactata taaaccgcta ttgaaactga cggatgattc 104040

tagtcccgaa gaatttctgt tcaacaaact aagtgaacga aaggtatacg aatgtatcaa 104100

acagtttggt attagaatca aggatctccg aacgtatgga gtcaattata cgtttttata 104160

taatttttgg acaaatgtaa agtccatatc tcctcttccg tcaccaaaaa agttaatagc 104220

attaactatc aaacaaactg ctgaagttgt aggtcatact ccatcaattt caaaaagagc 104280

ttatatggca acgactattt tagaaatggt aaaggataaa aattttttag atgtagtatc 104340

taaaactacg ttcgatgaat tcctatctat agtcgtagat cacgttaaat catctacgga 104400

tggatgatat agatctttac acaaataatt acaagaccga taaatggaaa tggataagcg 104460

tatgaaatct ctcgcaatga cagctttctt cggagagcta aacacattag atattatggc 104520

attgataatg tctatattta aacgccatcc aaacaatacc attttttcag tggataagga 104580

tggtcagttt atgattgatt tcgaatacga taattataag gcttctcaat atttggatct 104640

gaccctcact ccgatatctg gagatgaatg caagactcac gcatcgagta tagccgaaca 104700

attggcgtgt gcggatatta ttaaagagga tattagcgaa tacatcaaaa ctactccccg 104760

tcttaaacga tttataaaaa aataccgcaa tagatcagat actcgcatca gtcgagatac 104820

agaaaagctt aaaatagctc tagctaaagg catagattac gaatatataa aagacgcttg 104880

ttaataagta aatgaaaaaa aactagtcgt ttataataaa acacgatatg gatgccaacg 104940

tagtatcatc ttctactatt gcgacgtata tagacgcttt agcgaagaat gcttcagaat 105000

tagaacagag gtctaccgca tacgaaataa ataatgaatt ggaactagta tttattaagc 105060

cgccattgat tactttgaca aatgtagtga atatctctac gattcaggaa tcgtttattc 105120

gatttaccgt tactaataag gaaggtgtta aaattagaac taagattcca ttatctaagg 105180

tacatggtct agatgtaaaa aatgtacagt tagtagatgc tatagataac atagtttggg 105240

aaaagaaatc attagtgacg gaaaatcgtc ttcacaaaga atgcttgttg agactatcga 105300

cagaggaacg tcatatattt ttggattaca agaaatatgg atcctctatc cgactagaat 105360

tagtcaatct tattcaagca aaaacaaaaa actttacgat agactttaag ctaaaatatt 105420

ttctaggatc cggtgcccag tctaaaagtt ctttattaca cgctattaat catccaaagt 105480

caaggcctaa tacatctctg gaaatagaat tcacacctag agacaatgaa acagttccat 105540

atgatgaact aataaaggaa ttgacgactc tatcacgtca tatatttatg gcttctccag 105600

agaatgtaat tctttctccg cctattaacg cgcctataaa aacctttatg ttgcctaaac 105660

aagatatagt aggtttggat ctggaaaatc tatatgccgt aactaagact gacggcattc 105720

ctataactat cagagttaca tcaaacgggt tgtattgtta ttttacacat cttgggtata 105780

ttattagata tccagttaag agaataatag attccgaagt agtagtcttt ggtgaggcag 105840

ttaaggataa gaactggacc gtatatctta ttaagctaat agagcctgtg aatgctatca 105900

gtgatagact agaagaaagt aagtatgttg aatctaaact agtggatatt tgtgatcgga 105960

tagtattcaa gtcaaagaaa tacgaaggtc cgtttactac aactagtgaa gtcgtcgata 106020

tgttatctac atatttacca aagcaaccag aaggtgttat tctgttctat tcaaagggac 106080

ctaaatctaa cattgatttt aaaattaaaa aggaaaatac tatagaccaa actgcaaatg 106140

tagtatttag gtacatgtcc agtgaaccaa ttatctttgg agaatcgtct atctttgtag 106200

agtataagaa atttagcaac gataaaggct ttcctaaaga atatggttct ggtaagattg 106260

tgttatataa cggcgttaat tatctaaata atatctattg tttggaatat attaatacac 106320

ataatgaagt gggtattaag tccgtggttg tacctattaa gtttatagca gaattcttag 106380

ttaatggaga aatacttaaa cctagaattg ataaaaccat gaaatatatt aactcagaag 106440

attattatgg aaatcaacat aatatcatag tcgaacattt aagagatcaa agcatcaaaa 106500

taggagatat ctttaacgag gataaactat cggatgtggg acatcaatac gccaataatg 106560

ataaatttag attaaatcca gaagttagtt attttacgaa taaacgaact agaggaccgt 106620

tgggaatttt atcaaactac gtcaagactc ttcttatttc tatgtattgt tccaaaacat 106680

ttttagacga ttccaacaaa cgaaaggtat tggcgattga ttttggaaac ggtgctgacc 106740

tggaaaaata cttttatgga gagattgcgt tattggtagc gacggatccg gatgctgatg 106800

ctatagctag aggaaatgaa agatacaaca aattaaactc tggaattaaa accaagtact 106860

acaaatttga ctacattcag gaaactattc gatccgatac atttgtctct agtgtcagag 106920

aagtattcta ttttggaaag tttaatatca tcgactggca gtttgctatc cattattctt 106980

ttcatccgag acattatgct accgtcatga ataacttatc cgaactaact gcttctggag 107040

gcaaggtatt aatcactacc atggacggag acaaattatc aaaattaaca gataaaaaga 107100

cttttataat tcataagaat ttacctagta gcgaaaacta tatgtctgta gaaaaaatag 107160

ctgatgatag aatagtggta tataatccat caacaatgtc tactccaatg actgaataca 107220

ttatcaaaaa gaacgatata gtcagagtgt ttaacgaata cggatttgtt cttgtagata 107280

acgttgattt cgctacaatt atagaacgaa gtaaaaagtt tattaatggc gcatctacaa 107340

tggaagatag accgtctaca aaaaactttt tcgaactaaa tagaggagcc attaaatgtg 107400

aaggtttaga tgtcgaagac ttacttagtt actatgttgt ttatgtcttt tctaagcggt 107460

aaataataat atggtatggg ttctgatatc cccgttctaa atgcattaaa taattccaat 107520

agagcgattt ttgttcctat aggaccttcc aactgtggat actctgtatt gttaatagat 107580

atattaatac ttttgtcggg taacagaggt tctacgtctt ctaaaaataa aagttttata 107640

acatctggcc tgttcataaa taaaaacttg gcgattctat atatactctt attatcaaat 107700

ctagccattg tcttatagat gtgagctact gtaggtgtac catttgattt tctttctaat 107760

actatatatt tctctcgaag aagttcttgc acatcatctg ggaataaaat actactgttg 107820

agtaaatcag ttattttttt tatatcgata ttgatggaca tttttatagt taaggataat 107880

aagtatccca aagtcgataa cgacgataac gaagtattta tacttttagg aaatcacaat 107940

gactttatca gattaaaatt aacaaaatta aaggagcatg tatttttttc tgaatatatt 108000

gtgactccag atacatatgg atctttatgc gtcgaattaa atgggtctag ttttcagcac 108060

ggtggtagat atatagaggt ggaggaattt atagatgctg gaagacaagt tagatggtgt 108120

tctacatcca atcatatatc taaagatata cccgaagata tgcacactga taaatttgtc 108180

atttatgata tatacacttt tgacgctttc aagaataaac gattggtatt cgtacaggtg 108240

cctccgtcgt taggagatga tagtcatttg actaatccgt tattgtcacc gtattatcgt 108300

aattcagtag ccagacaaat ggtcaatgat atgattttta atcaagattc atttttaaaa 108360

tatttattag aacatctgat tagaagccac tatagagttt ctaaacatat aacaatagtt 108420

agatacaagg ataccgaaga attaaatcta acgagaatat gttataatag agataagttt 108480

aaggcgtttg tattcgcttg gtttaacggc gtttcggaaa atgaaaaggt actagatacg 108540

tataaaaagg tatctaattt gatataatga attcagtgac tgtatcacac gcgccatata 108600

ctattactta tcacgatgat tgggaaccag taatgagtca attggtagag ttttataacg 108660

aagtagccag ttggctgcta cgagacgaga cgtcgcctat tcctgataag ttctttatac 108720

agttgaaaca accgcttaga aataaacgag tatgtgtgtg tggtatagat ccgtatccga 108780

aagatggaac tggtgtaccg ttcgaatcac caaattttac aaaaaaatca attaaggaga 108840

tagcttcatc tatatctaga ttaaccggag taattgatta taaaggttat aaccttaata 108900

taatagacgg ggttataccc tggaattatt acttaagttg taaattagga gaaacaaaaa 108960

gtcacgcgat ttactgggat aaaatttcta agttactgct gcagcatata actaaacacg 109020

ttagtgttct ttattgtttg ggtaaaacag atttctcgaa tatacgggcc aagttagaat 109080

ccccggtaac taccatagtc ggatatcatc cagcggctag agaccgccaa ttcgagaaag 109140

atagatcatt tgaaattatc aacgttttac tggaattaga caacaaggca cctataaatt 109200

gggctcaagg gtttatttat taatgcttta gtgaaatttt aacttgtgtt ctaaatggat 109260

gcggctatta gaggtaataa tgttatcttt gttcttaaga ctataggtgt cccgtcagcg 109320

tgcagacaaa atgaagatcc aagatttgta gaagcattta aatgcgacga gttagaaaga 109380

tatattgaga ataatccaga atgtacacta ttcgaaagtc ttagggatga ggaagcatac 109440

tctatagtca gaattttcat ggatgtagat ttagacgcgt gtctagacga aatagattat 109500

ttaacggcta ttcaagattt tattatcgag gtgtcaaact gtgtagctag attcgcgttt 109560

acagaatgcg gcgccattca tgaaaatgta ataaaatcca tgagatctaa tttttcattg 109620

actaagtcta caaatagaga taaaacaagt tttcatatta tctttttaga cacgtatacc 109680

actatggata cattgatagc tatgaaacga acactattag aattaagtag atcatctgaa 109740

aatccactaa ccagatcgat agacactgcc gtatatagga gaaaaacaac tcttcgggtt 109800

gtaggtacta ggaaaaatcc aaattgcgac actattcatg taatgcaacc accgcatgat 109860

aatatagaag attacctatt cacttacgtg gatatgaaca acaatagtta ttacttttct 109920

ctacaacgac gattggagga tttagttcct gataagttat gggaaccagg gtttatttca 109980

ttcgaagacg ctataaaaag agtttcaaaa atattcatta attctataat aaactttaat 110040

gatctcgatg aaaataattt tacaacggta ccactggtca tagattacgt aacaccttgt 110100

gcattatgta aaaaacgatc gcataaacat ccgcatcaac tatcgttgga aaatggtgct 110160

attagaattt acaaaactgg taatccacat agttgtaaag ttaaaattgt tccgttggat 110220

ggtaataaac tgtttaatat tgcacaaaga attttagaca ctaactctgt tttattaacc 110280

gaacgaggag accatatagt ttggattaat aattcatgga aatttaacag cgaagaaccc 110340

ttgataacaa aactaatttt gtcaataaga catcaactac ctaaggaata ttcaagcgaa 110400

ttactctgtc caagaaaacg aaagactgta gaagctaaca tacgagacat gttagtagat 110460

tcagtagaga ccgataccta tccggataaa cttccgttta aaaatggtgt attggacctg 110520

gtagacggaa tgttttactc tggagatgat gctaaaaaat atacgtgtac tgtatcaacc 110580

ggatttaaat ttgacgatac aaagttcgtc gaagacagtc cagaaatgga agagttaatg 110640

aatatcatta acgatatcca accattaacg gatgaaaata agaaaaatag agagctatat 110700

gaaaaaacat tatctagttg tttatgtggt gctaccaaag gatgtttaac attctttttt 110760

ggagaaactg caactggaaa gtcgacaacc aaacgtttgt taaagtctgc tatcggtgac 110820

ctgtttgttg agacgggtca aacaatttta acagatgtat tggataaagg acctaatcca 110880

tttatcgcta acatgcattt gaaaagatct gtattctgta gcgaactacc tgattttgcc 110940

tgtagtggat caaagaaaat tagatctgac aatattaaaa agttgacaga accttgtgtc 111000

attggaagac cgtgtttctc caataaaatt aataatagaa accatgcgac aatcattatc 111060

gatactaatt acaaacctgt ctttgatagg atagataacg cattaatgag aagaattgcc 111120

gtcgtgcgat tcagaacaca cttttctcaa ccttctggta gagaggctgc tgaaaataat 111180

gacgcgtacg ataaagtcaa actattagac gaggggttag atggtaaaat acaaaataat 111240

agatatagat ttgcatttct atacttgttg gtgaaatggt acagaaaata tcatgttcct 111300

attatgaaac tatatcctac accggaagag attcctgact ttgcattcta tctcaaaata 111360

ggtactctgt tagtatctag ctctgtaaag catattccat taatgacgga cctctccaaa 111420

aagggatata tattgtacga taatgtggtc actcttccgt tgactacttt ccaacagaaa 111480

atatccaagt attttaattc tagactattt ggacacgata tagagagctt catcaataga 111540

cataagaaat ttgccaatgt tagtgatgaa tatctgcaat atatattcat agaggatatt 111600

tcatctccgt aaatatatgc tcatatattt atagaagata tcacatatct aaatgaatac 111660

cggaatcata gatttatttg ataatcatgt tgatagtata ccaactatat tacctcatca 111720

gttagctact ctagattatc tagttagaac tatcatagat gagaacagaa gcgtgttatt 111780

gttccatatt atgggatcag gtaaaacaat aatcgctttg ttgttcgcct tggtagcttc 111840

cagatttaaa aaggtttaca ttctagtgcc gaacatcaac atcttaaaaa ttttcaatta 111900

taatatgggt gtagctatga acttgtttaa tgacgaattc atagctgaaa atatctttat 111960

tcattccaca acaagttttt attctcttaa ttataacgat aacgtcatta attataacgg 112020

attatctcgc tacaataact ctatttttat cgttgatgag gcacataata tctttgggaa 112080

taatactgga gaacttatga ccgtgataaa aaataaaaac aagattcctt ttttactatt 112140

gtctggatct cccattacta acacacctaa tactctgggt catattatag atttaatgtc 112200

cgaagagacg atagattttg gtgaaattat tagtcgtggt aagaaagtaa ttcagacact 112260

tcttaacgaa cgaggtgtga atgtacttaa ggatttgctt aaaggaagaa tatcatatta 112320

cgaaatgcct gataaagatc taccaacgat aagatatcac ggacgtaagt ttctagatac 112380

tagagtagta tattgtcaca tgtctaaact tcaagagaga gattatatga ttactagacg 112440

acagctatgt tatcatgaaa tgtttgataa aaatatgtat aacgtgtcaa tggcagtatt 112500

gggacaactt aatctgatga ataatttaga tactttattt caggaacagg ataaggaatt 112560

gtacccaaat ctgaaaataa ataatggcgt gttatacgga gaagaattgg taacgttaaa 112620

cattagttcc aaatttaagt actttattaa tcggatacag acactcaacg gaaaacattt 112680

tatatacttt tctaattcta catatggcgg attggtaatt aaatatatca tgctcagtaa 112740

tggatattct gaatataatg gttctcaggg aactaatcca catatgataa acggcaaacc 112800

aaaaacattt gctatcgtta ctagtaaaat gaaatcgtct ttagaggatc tattagatgt 112860

gtataattct cctgaaaacg atgatggtag tcaattgatg tttttgtttt cgtcaaacat 112920

tatgtccgaa tcctatactc tgaaagaggt aaggcatatt tggtttatga ctatcccaga 112980

tactttttct caatacaacc aaattcttgg acgatctatt agaaaattct cttacgccga 113040

tatttctgaa ccagttaatg tatatctttt agccgccgta tattccgatt tcaatgacga 113100

agtgacgtca ttaaacgatt acacacagga tgaattaatt aatgttttac catttgacat 113160

caaaaagctg ttatatctaa aatttaagac gaaagaaacg aatagaatat actctattct 113220

tcaagagatg tctgaaacgt attctcttcc accacatcca tcaattgtaa aagttttatt 113280

gggagaattg gtcagacaat ttttttataa taattctcgt attaagtata acgataccaa 113340

gttacttaaa atggttacat cagttataaa aaataaagaa gacgctagga attacataga 113400

tgatattgta aacggtcact tctttgtatc gaataaagta tttgataaat ctcttttata 113460

caaatacgaa aacgatatta ttacagtacc gtttagactt tcctacgaac catttgtttg 113520

gggagttaac tttcgtaaag aatataacgt ggtatcttct ccataaaact gatgagatat 113580

ataaagaaat aaatgtcgag ctttgttacc aatggatacc tttccgttac attggaacct 113640

catgagctga cgttagacat aaaaactaat attaggaatg ccgtatataa gacgtatctc 113700

catagagaaa ttagtggtaa aatggccaag aaaatagaaa ttcgtgaaga cgtggaatta 113760

cctctcggcg aaatagttaa taattctgta gttataaacg ttccgtgtgt aataacctac 113820

gcgtattatc acgttgggga tatagtcaga ggaacattaa acatcgaaga tgaatcaaat 113880

gtaactattc aatgtggaga tttaatctgt aaactaagta gagattcggg tactgtatca 113940

tttagcgatt caaagtactg cttttttcga aatggtaatg cgtatgacaa tggcagcgaa 114000

gtcactgccg ttctaatgga ggctcaacaa ggtatcgaat ctagttttgt ttttctcgcg 114060

aatatcgtcg actcataaga aagagaatag cggtaagtat aaacacgaat actatggcaa 114120

taattgcgaa tgttttattc tcttcgatat atttttgata atatgaaaaa catgtctctc 114180

tcaaatcgga caaccatctc ataaaatagt tatctcgcgc tggcgaggtg gttgctgctc 114240

gtataatctc cccagaataa tatacttgcg tgtcgtcgtt caatttatac ggatttctat 114300

agttctctgt tatataatgc ggttttctat catgattaga cgacgacaat agtgttctaa 114360

atttagatag ttgatcagaa tgaatgttta ttggcgttgg aaaaattatc catacagcgt 114420

ctgcagagtg gttgatagtt gttcctagat atgtaaaata atccaactta ctaggcagca 114480

aattgtctag ataaaatact gaatcaaacg gtgcagacgt attggcggat ctaatggaat 114540

ccaattgatt aactatcttt tgaaaatata catttttatg atccaatact tgtaagaata 114600

tagaaataat gataagtcca tcatcgtgtt tttttgcctc ttcataagaa ctatattttt 114660

tcttattcca atgaacaaga ttaatctctc cagagtattt gtacacatct atcaagtgat 114720

tggatccata atcgtcttcc tttccccaat atatatgtag tgatgataac acatattcat 114780

tggggagaaa ccctccactt atatatcctc ctttaaaatt aatccttact agttttccag 114840

tgttctggat agtggttggt ttcgactcat tataatgtat gtctaacggc ttcaatcgcg 114900

cgttagaaat tgctttttta gtttctatat taataggaga tagttgttgc ggcatagtaa 114960

aaatgaaatg ataactgttt aaaaatagct cttagtatgg gaattacaat ggatgaggaa 115020

gtgatatttg aaactcctag agaattaata tctattaaac gaataaaaga tattccaaga 115080

tcaaaagaca cgcatgtgtt tgctgcgtgt ataacaagtg acggatatcc gttaatagga 115140

gctagaagaa cttcattcgc gttccaggcg atattatctc aacaaaattc agattctatc 115200

tttagagtat ccactaaact attacggttt atgtactaca atgaactaag agaaatcttt 115260

agacggttga gaaaaggttc tatcaacaat atcgatcctc actttgaaga gttaatatta 115320

ttgggtggta aactagataa aaaggaatct attaaagatt gtttaagaag agaattaaaa 115380

gaggaaagtg atgaacgtat aacagtaaaa gaatttggaa atgtaattct aaaacttaca 115440

acacgggata aattatttaa taaagtatat ataagttatt gcatggcgtg ttttattaat 115500

caatcgttgg aggatttatc gcatactagt atttacaatg tagaaattag aaagattaaa 115560

tcattaaatg attgtattaa cgacgataaa tacgaatatc tgtcttatat ttataatatg 115620

ctagttaata gtaaatgaac ttttacagat ctagtataat tagtcagatt attaagtata 115680

atagacgact agctaagtct attatttgcg aggatgactc tcaaattatc acactcacgg 115740

cattcgttaa ccaatgccta tggtgtcata aacgagtatc cgtgtccgct attttattaa 115800

ctactgataa caaaatatta gtatgtaaca gacgagatag ttttctctat tctgaaataa 115860

ttagaactag aaacatgttt agaaagaaac gattatttct gaattattcc aattatttga 115920

acaaacagga aagaagtata ctatcgtcat ttttttctct agatccagct actactgata 115980

atgatagaat agacgctatt tatccgggtg gcatacccaa aaggggtgag aatgttccag 116040

agtgtttatc cagggaaatt aaagaagaag ttaatataga caattctttt gtattcatag 116100

acactcggtt ttttattcat ggcatcatag aagataccat tattaataaa ttttttgagg 116160

taatcttctt tgtcggaaga atatctctaa cgagtgatca aatcattgat acatttaaaa 116220

gtaatcatga aatcaaggat ctaatatttt tagatccgaa ttcaggtaat ggactccaat 116280

acgaaattgc aaaatatgct ctagatactg caaaacttaa atgttacggc catagaggat 116340

gttattacga atcattaaaa aaattaactg aggatgattg attagaaaat ataaattaat 116400

ttaccatcgt gtatttttat aacgggattg tccggcatat catgtagata gttaccgtct 116460

acatcgtata ctcgaccatc tacgccttta aatcctctat ttattgacat taatctatta 116520

gaattggaat accaaatatt agtaccctca attagtttat tggtaatatt ttttttagac 116580

gatagatcga tggctcttga aaccaaggtt ttccaaccgg actcattgtc gatcggtgag 116640

aagtcttttt cattagcatg aatccattct aatgatgtat gtttaaacac tctaaacaat 116700

tggacaaatt cttttgattt gctttgaatg atttcaaata ggtcttcgtc tacagtaggc 116760

ataccattag ataatctagc cattataaag tgcacgttta catatctacg ttctggagga 116820

gtaagaacgt gactattgag acgaatggct cttcctacta tctgacgaag agacgcctcg 116880

ttccatgtca tatctaaaat gaagatatca ttaattgaga aaaaactaat accctcgcct 116940

ccactagaag agaatacgca tgttttaatg cattctccgt tagtgtttga ttcttggtta 117000

aactcagcca ccgccttgat tctagtatct tttgttctag atgagaactc tatattagag 117060

ataccaaaga ctttgaaata tagtaataag atttctattc ctgactgatt aacaaatggt 117120

tcaaagacta gacatttacc atgggatgct aatattccca aacatacatc tataaatttg 117180

acgcttttct cttttaattc agtaaataga gagatatcag ccgcactagc atcccctttc 117240

aatagttctc cctttttaaa ggtatctaat gcggatttag aaaactctct atctcttaat 117300

gaatttttaa aatcattata tagtgttgct atctcttgcg cgtattcgcc cggatcacga 117360

ttttgtcttt caggaaagct atcgaacgta aacgtagtag ccatacgtct cagaattcta 117420

aatgatgata tacctgtttt tatttcagcg agtttagcct tttgataaat ttcttcttgc 117480

tttttcgaca tattaacgta tcgcattaat actgttttct tagcgaatga tgcagaccct 117540

tctacgtcat caaaaataga aaactcgtta ttaactatgt acgaacatag gcctcctagt 117600

ttggagacta attctttttc atcgactaga cgtttattct caaatagcga ttggtgttgt 117660

aaggatcctg gtcgtagtaa gttaaccaac atggtgaatt cttgcacact attgacgata 117720

ggtgtagccg ataaacaaat catcttatgg ttttttaacg caatggtctt agataaaaaa 117780

ttatatactg aacgagtagg acggatctta ccatcttctt tgattaatga tttagaaatg 117840

aagttatgac attcatcaat gatgacgcat attctactct tggcattaat agttttgata 117900

ttagtaaaaa atttatttct aaaattttga tcatcgtaat taataaaaat acaatccttc 117960

gttatctctg gagcgtatct gagtatagtg ttcatccaag gatcttctat caaagccttt 118020

ttcaccaata agataatagc ccaattcgta taaatatcct taagatgttt gagaatatat 118080

acagtagtca ttgttttacc gacacccgtt tcatggaaca ataaaagaga atgcatactg 118140

tctaatccta agaaaactct tgctacaaaa tgttgataat ccttgaggcg tactacgtcc 118200

gaccccatca tttcaacggg catattagta gttctgcgca atgcataatc gatataggcc 118260

gcgtgtgatt tactcattta tgagtgataa gtaataacta tgttttaaaa atcacagcag 118320

tagtttaact agtcttctct gatgtttgtt ttcgatactt tttgaatcag aagtcatact 118380

agaataaagc aacgagtgaa cgtaatagag agcttcgtat actctattcg aaaactctaa 118440

gaacttatta atgaattccg tatccactgg attgtttaaa atactaaatt gaacactgtt 118500

cacatccttc caagaagaag acttagtgac ggacttaaca tgagacataa ataaatccaa 118560

atttttttta caaacatcac tagccaccat aatggcgcta tctttcaacc agctatcgct 118620

tacgcatttt agcagtctaa catttttaaa gagactacaa tatattctca tagtatcgat 118680

tacacctcta ccgaatagag taggaagttt aataatacaa tatttttcgt ttacaaaatc 118740

aaataatggt cgaaacacgt cgaaggttaa catcttataa tcgctaatgt atagattgtt 118800

ttcagtgaga tgattattag atttaatagc atctcgttca cgtttgaaca gtttattgcg 118860

tgcgctgagg tcggcaacta cggcgtccgc tttagtactc ctcccataat actttacgct 118920

attaatcttt aaaatttcat agactttatc tagatcgctt tctggtaaca tgatatcatg 118980

tgtaaaaagt tttaacatgt cggtcggcat tctatttaga tcattaactc tagaaatctg 119040

aagaaagtaa ttagctccgt attccagact aggtaatggg cttttaccta gagacagatt 119100

aagttctggc aatgtttcat aaaatggaag aaggacatgc gttccctccc ggatattttt 119160

tacaatttca tccatttaca actctatagt ttgttttcat tattattagt tattatctcc 119220

cataatcttg gtaatactta ccccttgatc gtaagatacc ttatacaggt cattacatac 119280

aactaccaat tgtttttgta cataatagat tggatggttg acatccatgg tggaataaac 119340

tactcgaaca gatagtttat ctttccccct agatacatta gccgtaatag ttgtcggcct 119400

aaagaatatc tttggtgtaa agttaaaagt tagggttctt gttccattat tgctttttgt 119460

cagtagttca ttataaattc tcgagatggg tccgttctct gaatatagaa catcatttcc 119520

aaatctaact tctagtctag aaataatatc ggtcttattc ttaaaatcta ttcccttgat 119580

gaagggatcg ttaatgaaca aatccttggc ctttgattcg gctgatctat tatctccgtt 119640

atagacgtta cgttgactag tccaaagact tacaggaata gatgtatcga tgatgttgat 119700

actatgtgat atgtgagcaa agattgttct cttagtggca tcactatatg ttccagtaat 119760

ggcggaaaac tttttagaaa tgttatatat aaaagaattt tttcgtgttc caaacattag 119820

cagattagta tgaagataaa cactcatatt atcaggaaca ttatcaattt ttacatacac 119880

atcagcatct tgaatagaaa cgataccatc ttctggaacc tctacgatct cggcagactc 119940

cggataacca gtcggtggac catcgctaac aataactaga tcatccaaca atctactcac 120000

atatgcatct atataatctt tttcatcttg tgagtaccct ggatacgaaa taaatttatt 120060

atccgtattt ccataataag gtttagtata aacagagaga gatgttgccg catgaacttc 120120

agttacagtc gccgttggtt ggtttatttg acctattact ctcctaggtt tctctataaa 120180

cgatggttta atttgtacat tcttaaccat atatccaata aagctcaatt caggaacata 120240

aacaaattct ttgttgaacg tttcaaagtc gaacgaagag tcacgaataa cgatatcgga 120300

tactggattg aaggtcaccg ttacggtaat ttttgaatcg gatagtttaa gactgctgaa 120360

tgtatcttcc acatcaaacg gagttttaat ataaacgtat actgtagatg gttctttaat 120420

agtgtcatta ggagttaggc caatagaaat atcattaagt tcactagaat atccagagtg 120480

tttcaaagca attgtattat tgatacaatt attatataat tcttcgccct caatttccca 120540

aataacaccg ttacacgaag agatagatac gtgattaata catttatatc caacatatgg 120600

tacgtaaccg aatcttccca tacctttaac ttctggaagt tccaaactca gaaccaaatg 120660

attaagcgca gtaatatact gatccctaat ttcgaagcta gcgatagcct gattgtctgg 120720

accatcgttt gtcataactc cggatagaga aatatattgc ggcatatata aagttggaat 120780

ttgactatcg actgcgaaga cattagaccg tttaatagag tcatccccac cgatcaaaga 120840

attaatgata gtattattca ttttctattt aaaatggaaa aagcttacaa taaactccgt 120900

agagaaatat ctataatttg tgagttttcc ttaaagtaac agcttccgta aacgccgtct 120960

ttatctctta gtaagtttat tgtatttatg accttttcct tatcttcata gaatactaaa 121020

ggcaacaaag aaatttttgg ttcttctcta agagctacgt gagacttaac catagacgcc 121080

aacgaatccc tacatatttt agaacagaaa taccctactt caccaccctt gtatgtctca 121140

atactaatag gtctaaaaac caaatcttga ttacaaaacc aacacttatc aattacacta 121200

tttgtcttaa tagacacatc tgccatagat ttataatact ttggtagtat acaagcgagt 121260

gcttcttctt tagcgggctt aaagactgct ttaggtgctg aaataaccac atctggaagg 121320

cttactcgct tagccattta attacggaac tattttttta tacttctaat gagcaagtag 121380

aaaacctctc atctacaaaa acgtactcgt gtccataatc ctctaccata gtaacacgtt 121440

ttttagatct catatgtgct aaaaagtttt cccatactaa ttggttacta ttatttttcg 121500

tataattttt aacagtttga ggttttagat ttttagttac agaagtgata tcgaatattt 121560

tatccaaaaa gaatgaataa ttaattgtct tagaaggagt gttttcttgg caaaagaata 121620

ccaagtgctt aaatatttct actacttcat taatcttttc tgtactcaga ttcagtttct 121680

catcttttac ttgattgatt atttcaaaga ctaacttata atccttttta tttattctct 121740

cgttagcctt aagaaaacta gatacaaaat ttgcatctac atcatccgtg gatatttgat 121800

ttttttccat gatatccaag agttccgaga taatttctcc agaacattga tgagacaata 121860

atctccgcaa tacatttctc aaatgaataa gtttattaga cacgtggaag tttgactttt 121920

tttgtacctt tgtacatttt tgaaataccg actcgcaaaa aatacaatat tcatatcctt 121980

gttcagatac tataccgttg tgtctacaac cgctacataa tcgtagattc atgttaacac 122040

tctacgtatc tcgtcgtcca atattttata taaaaacatt ttatttctag acgttgccag 122100

aaaatcctgt aatattttta gttttttggg ctgtgaataa agtatcgccc taatatggtt 122160

accgtcctcc gccaatatag tagttaaatt atccgcacat gcagaagaac accgcttagg 122220

cggattcagt acaatgttat atttttcgta ccaactcatt taaatatcat aatctaaaat 122280

agttctgtaa tatgtctagc gctaatatat tgatcataat cctgtgcata aattaagata 122340

caacaatgtc tcgaaatcat cgacatggct tcttccatag ttagaagatc gtcgtcaaag 122400

ttagcaacgt gattcatcaa catttgctgt tttgaggcag caaatactga accgtcgcca 122460

ttcaaccatt cataaaaacc atcgtctgaa tccattgata atttcttgta ctggtttttg 122520

agagctcgca tcaatctagc atttctagct cccggattga aaacagaaag aggatcgtac 122580

atccagggtc cattttctgt aaatagaatc gtataatgtc ccttcaagaa gatatcagac 122640

gatccacaat caaagaattg gtctccgagt ttgtaacaga cagcggactt taacctatac 122700

atgataccgt ttagcataat ttctggtgat acgtcaatcg gagtatcatc tattagagat 122760

ctaaagccgg tgtaacattc tccaccaaac atattcttat tctgacgtcg ttctacataa 122820

aacatcattg ctccattaac gataacaggg gaatgaacag cactacccat cacattagtt 122880

cccaatggat caatgtgtgt aactccagaa catcttccat agcctatgtt aggaggagcg 122940

aacaccactc ttccactatt gccatcgaat gccatagaat aaatatcctt ggaattgata 123000

gaaatcggac tgtcggatgt tgtgatcatc ttcataggat taacaactat gtatggtgcc 123060

gcctgaagtt tcatatcgta actgatgccg tttataggtc tagccacaga aaccaacgta 123120

ggtctaaatc caactataga caaaatagaa gccaatatct gttcctcatc tgtcataact 123180

tgagagcatc cagtatgaat aatcttcatt agatggggat ctaccgcatc atcatcgtta 123240

caataaaaaa ttcccattct aatgttcata attgcttttc taatcatggt atgcatgttt 123300

gctctctgaa tctctgtgga aattagatct gatacacctg taatcactat cggattatcc 123360

tccgtaagac gattaaccaa caacatataa ttataagact ttacttttct aaattcataa 123420

agttgctgga ttaggctata ggtgtctcca tgtacatacg cgttctcgag cgcaggaagt 123480

ttaataccga atagtgccat cagaatagga tgaatatagt aattagtttc tggttttcta 123540

taaataaaag acaaatcttg tgaactagac atatcggtaa aatgcatgga ttggaatcgt 123600

gtagtcgaca gaagaatatg atgattagat ggagagtata ttttatctaa ctctttgagt 123660

tggtcaccga ttctaggact agctcgagaa tgaataagta ctaaaggatg agtacatttc 123720

acagaaacac tagcattgtt caatgtgctc tttacatggg taaggagttg aaatagctcg 123780

tttctatttg ttctgacaat atttagttta ttcataatgt taagcatatc ctgaatagta 123840

aagttagatg tgtcatactt gttagtagtt agatatttag caattgcatt cccatcattt 123900

ctcaatctcg tactccaatc atgcgtggat gctacttcgt cgatggaaac catacaatcc 123960

tttttggtag tctgttgagc ttgatcattt cctgcacgtt taggtttggt acgttgattt 124020

ctagcccctg cggatataaa gtcatcgtct acaatttggg acaatgaatt gcatacacta 124080

caagacaaag atttatcaga agtgtgaata tgatcttcat ctaccaaaga aagagtttga 124140

ttagtataac tagattttag tcctgcgtta gatgttaaaa aaacatcgct attgaccacg 124200

gcttccatta tttatattcg tagtttttac tcgaaagcgt gattttaata tccaatctta 124260

ttacttttgg aatcgttcaa aacctttgac taattgtaga atttgattta ttgccctacg 124320

cgtatactcc cttgcatcat atacgttcgt caccagatcg tttgtttcgg cctgaagttg 124380

gtgcatatct ctttcaacat tcgacatgag atccttaagg gccatatcgt ctagattttg 124440

ttgagatgct gctcctggat ttggattttg ttgtgctgtt gtacatactg taccaccagt 124500

aggtgtagga gtacatacag tggccacaat aggaggttga ggaggtgtaa ccgttggagt 124560

agtacaagaa atatttccat ccgattgttg tgtacatgta gttgttggta acgtctgaga 124620

aggttgggta gatggcggtg tcgtcgtctt ttgatcttta ttaaatttag agataatatc 124680

ctgaacagca ttgctcggcg tcaacgctgg aaggagtgaa ctcgccggcg catcagtatc 124740

ttcagacagc caatcaaaaa gattagacat atcagatgat gtattagttt gttgtcgtgg 124800

ttttggtgta ggagcagtac tactaggtag aagaatagga gccggtgtag ctgttggaac 124860

cggctgtgga gttatatgaa tagttggttg tagcggttgg ataggctgtc tgctggcggc 124920

catcatatta tctctagcta gttgttctcg caactgtctt tgataatacg actcttgaga 124980

ctttagtcct atttcaatcg cttcatcctt tttcgtatcc ggatcctttt cttcagaata 125040

atagattgac gactttggtg tagaggattc tgccagcctc tgtgagaact tgttaaagaa 125100

gtccatttaa ggctttaaaa ttgaattgcg attataagat taaatggcag acacagacga 125160

tattatcgac tatgaatccg atgatctcac cgaatacgag gatgatgaag aagaggaaga 125220

agatggagag tcactagaaa ctagtgatat agatcccaaa tcttcttata agattgtaga 125280

atcagcatcc actcatatag aagatgcgca ttccaatctt aaacatatag ggaatcatat 125340

atctgctctt aaacgacgct atactagacg tataagtcta tttgaaatag cgggtataat 125400

agcagaaagc tataacttgc ttcaacgagg aagattacct ctagtttcag aattttctga 125460

cgaaacgatg aagcaaaata tgctacatgt aattatacaa gagatagagg agggttcttg 125520

tcctatagtc atcgaaaaga acggagaatt gttgtcggta aacgattttg acaaagatgg 125580

tctaaaattc catctagact atattatcaa aatttggaaa cttcaaaaac gatattagaa 125640

tttatacgaa tatcgttctc taaatgtcac aatcaagtct cgcatgttca gcaatttatt 125700

gtcgtacttt atatcgtgtt cattaacgat atcttgcaaa atagtaatga ttctatcttc 125760

cttcgataga tattcttcag agattattgt cttatattct ttcttgttat ccgatatgaa 125820

tttgataaga ctttgaacat tattgatacc cgtctgttta attttttcta cagatatttt 125880

agttttggca gattctatcg tatctgtcaa tagacatcca acatcgacat tcgacgtcaa 125940

ttgtctataa atcagagtat aaattttaga aataacatta gcgaattgtt gtgcgttgat 126000

gtcgttattc tgaaacagta tgattttagg tagcattttc ttaacaaaga gaacgtattt 126060

attgttactc agttgaacag atgatatatc cagattacta acgcatctga ttccgtatac 126120

caaactttca gaagaaatgg tgtacaattg tttgtattca ttcaatgtct ctttttcaga 126180

aattagttta gagtcgaata ctgcaataat tttcaagaga tagttttcat cagataagat 126240

tttatttagt gtagatatga taaaactatt gttttgttgg agaacttgat acgccgcgtt 126300

ctctgtagtc gacgctctca aatgggaaac gatctccatt atttttttgg aatcggatac 126360

aatatcttcg gtatcttgac gcagtctagt atacatagag ttaagagaga ttagagtttg 126420

tacattaagc aacatgtctc taaatgtggc tacaaacttt tcctttttca catcatctag 126480

tttattatat accgatttca caacggcacc agatttaagg aaccagaatg aaaaactctg 126540

ataactacaa tatttcatca tagttacgat tttatcatct tctatagttg gtgtaatagc 126600

gcataccttt ttctccaaga ctggaaccaa cgtcataaaa atgtttaaat caaaatccat 126660

atcaacatct gatgcgctaa gaccagtctc gcgttcaaga ttatctttac taatggtgac 126720

gaactcatcg tatagaactc taagtttgtc cattatttat ttacagattt agttgtttaa 126780

tttatttgtg ctcttccaga gttgggatag tatttttcta acgtcggtat tatattatta 126840

ggatctacgt tcatatgtat cataatatta atcatccacg ttttgataaa tctatcttta 126900

gcttctgaaa taacgtattt aaacaaagga gaaaaatatt tagctacggc atcagacgca 126960

ataacatttt ttgtaaatgt aacgtattta gacgacagat cttcgttaaa aagttttcca 127020

tctatgtaga atccatcggt tgttaacacc attcccgcgt cagattgaat aggagtttga 127080

atagtttgtt ttggaaatag atccttcaat aacttatagt tgggtgggaa aaaatcgatt 127140

ttatcactag actctttctt ttttactatc attacctcat gaactatttc ttgaatgagt 127200

atatgtattt tctttcctat atcggacgcg ttcattggaa aatataccat gtcgttaact 127260

ataagaatat ttttatcctc gtttacaaac tgaataatat cagatgtagt tcgtaaacga 127320

actatatcat caccagcaca acatctaact atatgatatc cactagtttc ctttagtcgt 127380

ttattatctt gttccatatt agcagtcatt ccatcattta agaaggcgtc aaaaataata 127440

gggagaaatg acattttgga ttctgttaca actttaccaa aattaaggat atacggactt 127500

actatctttt tctcaacgtc aatttgatga acacacgatg aaaatgtact tcgatgagat 127560

tgatcatgta gaaaacaaca agggatacaa tatttccgca tatcatgaaa tatattaaga 127620

aatcccacct tattatattt ccccaaagga tccatgcatg taaacattat gccgttatca 127680

ttaataaaga cttctttctc atcggatctg taaaagttgt tactgatttt tttcattcca 127740

ggatctagat aattaataat gatgggtttt ctattcttat tctttgtatt ttggcatatc 127800

ctagaccagt aaacagtttc cactttggta aaatcagcag acttttgaac gctattaaac 127860

atggcattaa tggcaataac taaaaatgta aaatattttt ctatgttagg aatatggttt 127920

ttcactttaa tagatatatg gtttttggcc aaaatgatag atattttttt atccgaggat 127980

agtaaaatat tattagtcgc cgtctctata aaaatgaagc tagtctcgat atccaatttt 128040

attctagaat tgataggagt cgccaaatgt accttatacg ttatatctcc cttgatgcgt 128100

tccatttgtg tatctatatc ggacacaaga tctgtaaata gttttacgtt attaatcatc 128160

acggtatcgc cgtcgctaga taacgctaat gtaccatcca agtcccaaat ggagagattt 128220

aactgttcat cgtttagaat aaaatgatta ccggtcatat taataaagtg ttcatcgtat 128280

ctagataaca acgacttata attaatgtcc aagtcttgaa ctcgctgaat gatctttttt 128340

aacccagtta gttttagatt ggtacgaaat atattgttaa actttgattc tacagtaatg 128400

tccaaatcta gttgtggaaa tacttccatc aacattgttt caaacttgat aatattatta 128460

tctacatctt cgtacgatcc aaattccgga atagatgtat cgcacgctct ggccacccag 128520

ataaccaaaa agtcacacgc tccaggatat acattgtata aaaagctatc gttttttagt 128580

agggtttttt tctgcgtgta tacgaaggga ttaaaaatag tattatcaac gtaactatat 128640

tccaaattat tcttatgaga atagataata atatcgtcct taatatctaa caaatttcct 128700

aaatatccct ttaattgagt cattcgaagc gtcaatagaa tatgtctctt aactatttcc 128760

ggctgttgta tatttaaatg acttcgtaaa aaataatata tgggcgactt ctcatctatg 128820

taatcatatg gagtgagata tagggctcgt tctacctcct gccccttacc cacctgtaat 128880

accaattgcg gacttactat atatcgcata tttatatcgt ggggtaaagt gaaaatctac 128940

taccgatgat gtaagtctta caatgttcga accagtacca gatcttaatt tggaggcctc 129000

cgtagaacta ggggaggtaa atatagatca aacaacacct atgataaagg agaatagcgg 129060

ttttatatcc cgtagtagac gtctattcgc ccatagatct aaggatgatg agagaaaact 129120

agcactacga ttctttttac aaagacttta ttttttagat catagagaga ttcattattt 129180

gttcagatgc gttgacgctg taaaagacgt cactattacc aaaaaaaata acattatcgt 129240

ggcgccttat atagcacttt taactatcgc atcaaaagga tgcaaactta cagaaacaat 129300

gattgaagca ttctttccag aactatataa tgaacatagt aagaaattta aattcaactc 129360

tcaagtatcc atcatccaag aaaaactcgg ataccagttt ggaaactatc acgtttatga 129420

ttttgaaccg tattactcta cagtagctct ggctattcga gatgaacatt catctggcat 129480

ttttaatatc cgtcaagaga gttatctggt aagttcatta tctgaaataa catatagatt 129540

ttatctaatt aatctaaaat ctgatcttgt tcaatggagt gctagtacgg gcgctgtaat 129600

taatcaaatg gtaaatactg tattgattac agtgtatgaa aagttacaac tggtcataga 129660

aaatgattca caatttacat gttcattggc tgtggaatca aaacttccaa taaaattact 129720

taaagataga aatgaattat ttacaaaatt cattaacgag ttaaaaaaga ccagttcatt 129780

caagataagc aaacgcgata aggatacgct actaaaatat tttacttagg actggagtta 129840

gaatttatag acgactcatt tcgtttatca ttgttactat tattactatt actatcatta 129900

ttagtgttgg cattattagt attcttcttg tcatcttgtt cagaaatata cagcaatgct 129960

atacctaata ctaaatacat tatcatgctc gcaatggctc taacaacaac gaaccaaaat 130020

gaatttggtc gtagcttttg ttcacaaaaa tacataaaga aatgtctaca taaatctatg 130080

gcgccattgg ctacttgaaa tagcgccagt cctcctacag attttaatat agctgtataa 130140

catgacattt attcatcatc aaaagagaca gagtcaccat ctgtcatatt tagatttttt 130200

ttcatgtgtt caaagtatcc tctactcatt tcattataat agtttatcat acttagaatt 130260

ttaggacgga tcaatgagta agacttgact agatcgtcag tagtaatttg tgcatcgtct 130320

attctgcatc cgcttcgtcg aataatgtat agcatcgctt tgagattctc catagctatc 130380

aagtctttat acaatgacat ggaaatatct gtgaatactt tatacttctc caacatcgat 130440

gccttaacat catcgcctac tttagcattg aaaatacgtt ctattgtgta gatggatgta 130500

gcaagatttt taaacaacaa tgccatctta cacgatgatt gcctcaagtc tccaatcgtt 130560

tgtttagaac gattagctac agagtccaat gcttggctga ctagcatatt attatcttta 130620

gaaattgtat tcttcaatga ggcgtttatc atatctgtga tttcgttagt catattacag 130680

tctgactggg ttgtaatgtt atccaacata tcacctatgg atacggtaca cgtaccagca 130740

tttgtaataa tcctatctaa gatgttgtat ggcattgcgc agaaaatatc ttctcctgta 130800

atatctccac tctcgataaa tctactcaga ttattcttaa atgccttatt ctctggagaa 130860

aagatatcag tgtccatcat ttcattaata gtatacgcag aaaagatacc acgagtatca 130920

attctatcca agatacttat cggttccgag tcacagataa tggtttcctc tccttcggga 130980

gatcctgcat agaaatatct aggacaatag tttctatact gtctgtaact ctgataatct 131040

ctaaagtcac taactgatac catgaaattg agaagatcaa acgctgaagt aattaatttt 131100

tctgcctcgt ttttactaca actagttttc atcaatgtag tgacgatgta ttgtttagtt 131160

acttttggtc taatactgat gatagagata ttattgcttc ccataatgga tcttctagta 131220

gtcaccttaa agcccattga tgcgaatagc agatagataa agtcttggta tgactccttt 131280

ctaatatagt acggactacc tttgtcaccc aactttatac ccacataagc cataacaacc 131340

tctttaatag ccgtttcatg aggtttatca gccatgagcc tgagtagttg gaagaatctc 131400

atgaatcccg tctcagaaag tcctatatgc atgatagatt tatctttcct gggaaactct 131460

cgtatagtca tagatgaaat actcttcaaa gtttctgaaa taagattagt aacagtctta 131520

cctccgacta ctctaggtaa caaacaaact ctaataggtg ttttctctgc ggagataata 131580

tcagaaagga tagagcaata agtagtatta ttgtgattat aaagaccgaa tacataacag 131640

gtagaattta taaacatcat gtcctgaagg tttttagact tgtattcctc gtaatccata 131700

ccgtcccaaa acatggattt ggtaactttg atagccgtag atctttgttc cttcgccaac 131760

aggttaaaga aattaataaa gaatttgttg tttctattta tgtccacaaa ttgcacgttt 131820

ggaagcgcca cggttacatt cactgcagca ttttgaggat cgcgagtatg aagtacgatg 131880

ttattgttta ctggtatatc tggaaagaaa tctaccagtc taggaataag agattgatat 131940

cgcatagaaa tagtaaagtt tataatctca tcatcgaaga gcattttgtt accattgtaa 132000

taaatatcca ctctgtcata tgtataaatg aagtactgtt caaacatgat gagatgttta 132060

tatgttggca tagtagtgag atcgacgttt ggtaatggca atgtattaag attaactcca 132120

taatgtctag cagcatctgc gatgttataa gcgtcgtcaa agcggggtcg atcttgtatt 132180

gttatatatt gtctaacacc tataagatta tcaaaatctt gtctgcttaa tacaccgtta 132240

acaatttttg ccttgaattc ttttattggt gcattaataa catccttata gaggatgtta 132300

aacaaataag tgttatcaaa gttaagatct ggatatttct tttctgctag aacatccatt 132360

gagtcggagc catctggttt aatataacca ccgataaatc tagctctgta ttctgtatcc 132420

gtcaatctaa tattaagaag gtgttgagtg aaaggtggaa gatcgtaaaa gctgtgagta 132480

ttaatgatag gattagtttc cgaactaatg ttaattgggg tattaataat atctatattt 132540

ccagcgttaa gtgtaacatt aaacagtttt aattcacgtg acgtggtatc aattaaataa 132600

ttaatgccca atttggatat agcagcctga agctcatctt gtttagttac ggatcctaat 132660

gagttattaa gcaatatatc gaacggatga acgaaggttg ttttgagttt gtcgcatact 132720

ttgtaatcta gacatagatg cggaagaacg gtagaaacta tacgaaataa atattcagag 132780

tcctctaatt gatcaagagt aactattgac ttaataggca tcatttattt agtattaaat 132840

gacgaccgta ccagtgacgg atatacaaaa cgatttaatt acagagtttt cagaagataa 132900

ttatccatct aacaaaaatt atgaaataac tcttcgtcaa atgtctattc taactcacgt 132960

taacaacgtg gtagatagag aacataatgc cgccgtagtg tcatctccag aggaaatatc 133020

ctcacaactt aatgaagatc tatttccaga tgatgattca ccggccacta ttatcgaacg 133080

agtacaacct catactacta ttattgacga tactccacct cctacgtttc gtagagagtt 133140

attaatatcg gaacaacgtc aacaacgaga aaaaagattt aatattacag tatcgaaaaa 133200

tgctgaagca ataatggaat ctagatctat aataacttct atgccaacac aaacaccatc 133260

cttgggagta gtttatgata aagataaaag aattcagatg ttagaggatg aagtggttaa 133320

tcttagaaat caacgatcta atacaaaatc atctgataat ttagataatt ttaccaaaat 133380

actatttggt aagactccgt ataaatcaac agaagttaat aagcgtatag ccatcgttaa 133440

ttatgcaaat ttgaacgggt cccccttatc agtcgaggac ttggatgttt gttcggagga 133500

tgaaatagat agaatctata aaacgattaa acaatatcac gaaagtagaa aacgaaaaat 133560

tatcgtcact aacgtgatta ttattgtcat aaacattatc gagcaggcat tgctaaaact 133620

cggatttgaa gaaatcaaag gactgagtac cgatatcact tcagaaatta tcgatgtgga 133680

gatcggagat gactgcgatg ctgtagcatc aaaactagga atcggtaaca gtccggttct 133740

taatattgta ttgtttatac tcaagatatt cgttaaacga attaaaatta tttaatttaa 133800

tacattccca tatccagaca acaatcgtct ggattaatct gttcctgtcg tctcataccg 133860

gacgacatat taatcttttt attagtgggc atctttttag atggtttctt tttcccagca 133920

ttaactgatt cgatacctag aagatcgtga ttgatctctc cgaccattcc acgaacttct 133980

aattggccgt ctctgacggt accataaact attttaccag cattagtaac agcttggaca 134040

atctgaccat ccatcgcatt gtacgatgta gtagtaactg ttgttctacg tctaggagca 134100

ccagaagtat ttttggagcc cttggaggct gatgtagaag aagacgagga ttttgatttt 134160

ggtttacatg taatacattt tgaactcttt gattttgtat cacatgcgcc ggcagtcaca 134220

tctgtttgag aattaagatt attgttgcct cctttgacgg ctgcatctcc accgatttgc 134280

gctagtagat ttttaagctg tggtgtaatc ttattaactg tttcgatata atcatcgtaa 134340

ctgcttctaa cggctaaatt ttttttatcc gccatttaga agctaaaaat atttttattt 134400

atgcagaaga tttaactaga ttatacaatg aactaatatg atccttttcc agattattta 134460

caaacttggt attttttggt tctggaggag gcgaatttaa attcggactt ggattcggat 134520

tttgtaagtt cttgatctta ttatacatcg agtataggat ggcgacagta actgctacac 134580

aaataccgat caaaagaaga ataccaatca tttattgaca ataacttcac tattgatcaa 134640

gtatgcaata tatcatcttt tcactaaata agtagtaata atgattcaac aatgtcgaga 134700

tatatggacg ataataattt agttcatgga aatatcgcta tgattggtgt gaatgactcc 134760

gctaactctg tggggtgcgc agtgctttcc ccacatagaa taaattagca ttccgactgt 134820

gataataata ccaagtataa acgccataat actcaatact ttccatgtac gagtgggact 134880

agtagactta ctaaagtcaa taaaggcgaa gatacacgaa agaatcaaaa gaatgattcc 134940

agcgattagc acgccggaaa aataatttcc aatcataagc atcatgtcca tttaactaat 135000

aaaaatttta aatcgccgaa tgaacaaagt ggaatataaa ccatataaaa acaatagttt 135060

gtactgcaaa aataatatct atttttgttt tcgaagatat ggtaaaatta aatagtagta 135120

cacagcatgt tataactaac agcagcaacg gctcgtaatt acttatcatt tactagacga 135180

aaaggtggtg ggatattttc ttgctcaaat aatacgaata tatcacccat ccattttatg 135240

cgatgtttat atactctaat ctttaataga tctatagacg acgggtttac caacaatata 135300

gattttatcg attcatctaa tttaaaccct tccttaaacg tgaatgatct attatctggc 135360

ataacgatga ccctacctga tgaatcggac aatgtactgg gccatgtaga ataaattatc 135420

aacgaattat cgtctacgaa catttatatc atttgtttta attttaggac gcgaataaat 135480

ggatataaaa tagaaaataa cagatattac aaccagtgtt atggccgcgc ccaaccaggt 135540

aggcagtttt attttatctt ttactacagg ttctcctgga tgtacgtcac caacggcgga 135600

cgtagttcta gtacaattag acgtaagttc cgcttgggaa ttttttaacg ctaaagagtt 135660

aacgttaatc gtgcacccaa cgtatttaca tctagttctt tgaacatctt gattataata 135720

taaccatttt ctatctctag attcgtcagt gcactcatgt aaccaacata ccctaggtcc 135780

taaatattta tctccggaat tagattttgg ataattcgcg caccaacaat ttctatttcc 135840

tttatgatcg ttacaaaaga cgtataatgc cgtatcccca aaagtaaaat aatcaggacg 135900

aataattcta ataaactcag aacaatatct cgcatccata tgtttggagc aaatatcgga 135960

ataagtagac atagccggtt tccgttttgc acgtaaccat tctaaacaat tggggtttcc 136020

aggatcgttt ctacaaaatc cagtcatgaa atcatcacaa tgttctgtct tgtaattatt 136080

attaaatatt tttggacagt gtttggtatt tgtcttagaa caacattttg ccacgctatc 136140

actatcgccc aggagataat ccttttttat aaaatgacat cgttgcccgg atgctatata 136200

atcagtggcg tgttttaaat ccttaatata ttcaggagtt acctcgttct gataatagat 136260

taatgatcca ggacgaaatt tgaaagaact acatggttct ccatgaatta atacatattg 136320

tttagcaaat tcaggaacta taaaactact acaatgatct atcgacatac catctatcaa 136380

acaaaacttg ggtttaattt ctcccggaga tgtttcataa tagtacgtat aactttcttc 136440

tgcaaactta acagctctat tatattcagg ataattaaaa cctaattcca tatatttgtc 136500

tcgtatatct gctattcctg gtgctatttt gattctatta agagtaacag ctgcccccat 136560

tcttaataat cgtcagtatt taaactgtta aatgttggta tatcaacatc taccttattt 136620

cccgcagtat aaggtttgtt gcaggtatac tgttcaggaa tggttacatt tatacttctt 136680

ctatagtcct gtctttcgat gttcatcaca tatgcaaaga acagaataaa caaaataatg 136740

taagaaataa tattaaatat ctgtgaattc gtaaatacat tgattgccat aataattaca 136800

gcagctacaa tacacacaat agacattccc acagtgttgc cattacctcc acgatacatt 136860

tgagttacta agcaataggt aataactaag ctagtaagag gcaatagaaa agatgagata 136920

aatatcatca atatagagat tagaggaggg ctatatagag ccaagacgaa caaaatcaaa 136980

ccgagtaacg ttctaacatc attatttttg aagattccca aataatcatt cattcctcca 137040

taatcgtttt gcatcatacc tccatcttta ggcataaacg attgctgctg ttcctctgta 137100

aataaatctt tatcaagcac tccagcaccc gcagagaagt cgtcaagcat attgtaatat 137160

cttaaataac tcatttatat attaaaaaat gtcactatta aagatggagt ataatcttta 137220

tgccgaacta aaaaaaatga cttgtggtca acccctaagt ctttttaacg aagacgggga 137280

tttcgtagaa gttgaaccgg gatcatcctt taagtttctg atacctaagg gattttacgc 137340

ctctccttcc gtaaagacga gtctagtatt cgagacatta acaacgaccg ataataaaat 137400

cactagtatc aatccaacaa atgcgccaaa gttatatcct cttcaacgca aagtcgtatc 137460

tgaagtagtt tctaatatga ggaaaatgat cgaatcaaaa cgtcctctat acattactct 137520

tcacttggcg tgtggatttg gtaagactat taccacgtgt tatcttatgg ctacacacgg 137580

tagaaaaacc gtcatttgcg tacccaataa aatgttaata catcaatgga agacacaggt 137640

agaggcagtc ggattggaac ataagatatc catagatgga gtaagtagtc tattaaagga 137700

actaaagact caaagtccgg atgtattaat agtagtcagt agacatctga caaacgatgc 137760

cttttgtaaa tatatcaata agcattatga tttgttcatc ttggatgaat cacatacgta 137820

taatctgatg aacaatacag cagttacaag atttttagcg tattatcctc cgatgatgtg 137880

ttatttttta actgctacac ctagaccagc taacagaatt tattgtaaca gtattattaa 137940

tattgccaag ttatccgatc taaaaaaaac tatctatgcg gtagatagtt tttttgagcc 138000

atattccaca gacaatatta gacatatgat aaaacgatta gatggaccat ctaataaata 138060

tcatatatat actgagaagt tattatctgt agacgagcct agaaatcaac ttattcttga 138120

taccctggta gaagaattca agtcaggaac tattaatcgc attttagtta ttactaaact 138180

acgtgaacat atggtattat tctacaaacg attattagat cttttcggac cagaggttgt 138240

atttatagga gacgcccaaa atagacgtac tccagatatg gtcaaatcaa tcaaggaact 138300

aaatagattt atattcgtat ccaccttatt ttattccggt actggtttag atattcctag 138360

tttggattcg ttgttcattt gctcggcagt aatcaacaat atgcaaatag agcaattact 138420

agggagggta tgtcgagaaa cagaactatt agataggacg gtatatgtat ttcctaacac 138480

atccatcaaa gaaataaagt acatgatagg aaatttcatg caacgaatta ttagtctgtc 138540

tgtagataaa ctaggattta aacaaaaaag ttatcggaaa catcaagaat ccgatcccac 138600

ttttgtatgt acaacatcct ccagagaaga acgtgtatta aatagaatat ttaactcgca 138660

aaatcgttaa gaagtttaag cgacgatccg catgctgcac aggccagtgt attacccctc 138720

atagtattaa tataatccaa tgatactttt gtgatgtcgg aaatcttaac caatttagac 138780

tgacaggcag aacacgtcat gcaatcatca tcgtcatcga taactgtagt cttgggcttc 138840

tttttgcggc tcttcattcc ggaacgcaca ttggtgctat ccatttaggt agtaaaaaat 138900

aagtcagaat atgccctata acacgatcgt gcaaaacctg gtatatcgtc tctatcttta 138960

tcacaatata gtgtatcaac atctttatta ttattgacct cgtttatctt ggaacatgga 139020

atgggaacat ttttgttatc aacggccacc tttgccttaa ttccagatgt tgtaaaatta 139080

taactaaaca gtctatcatc gacacaaatg aaattcttgt ttagacgttt gtagtttacg 139140

tatgcggctc gttcgcgtct cattttttca gatattgcag gtactataat attaaaaata 139200

agaatgaaat aacataggat taaaaataaa gttatcatga cttctagcgc tgatttaact 139260

aacttaaaag aattacttag tctgtacaaa agtttgagat tttcagattc tgcggctata 139320

gaaaagtata attctttggt agaatgggga acatctactt actggaaaat aggcgtgcaa 139380

aaggtagcta atgtcgagac gtcaatatct gattattatg atgaggtaaa aaataaaccg 139440

tttaatattg atccgggcta ttacattttc ttaccggtat attttgggag cgtctttatt 139500

tattcgaagg gtaaaaatat ggtagaactt ggatctggaa actcttttca aataccagat 139560

gatatgcgaa gtgcgtgtaa caaagtatta gacagcgata acggaataga ctttctgaga 139620

tttgttttgt taaacaatag atggataatg gaagatgcta tatcaaaata tcagtctcca 139680

gttaatatat ttaaactagc tagtgagtac ggattaaaca tacccaaata tttagaaatt 139740

gaaatagagg aagacacatt atttgacgac gagttatact ctattataga acgctctttc 139800

gatgataaat ttccaaaaat atccatatcg tatattaagt tgggagaact tagacggcaa 139860

gttgtagact ttttcaaatt ctcattcatg tatattgagt ccatcaaggt agatcgtata 139920

ggagataata tttttattcc tagcgttata acaaaatcag gaaaaaagat attagtaaaa 139980

gatgtagacc atttaatacg atctaaggtt agagaacata catttgtaaa agtaaaaaag 140040

aaaaacacat tttccatttt atacgactat gatggaaacg gaacagaaac tagaggagaa 140100

gtaataaaac gaattataga cactatagga cgagactatt atgttaacgg aaagtatttc 140160

tctaaggttg gtagtgcagg cttaaagcaa ttgactaata aattagatat taatgagtgc 140220

gcaactgtcg atgagttagt tgatgagatt aataaatccg gaactgtaaa acgaaaaata 140280

aaaaaccaat cagcatttga tttaagcaga gaatgtttgg gatatccaga agcggatttt 140340

ataacgttag ttaataacat gcggttcaaa atagaaaatt gtaaggttgt aaatttcaat 140400

attgaaaata ctaattgttt aaataacccg agtattgaaa ctatatatgg aaactttaac 140460

cagttcgtct caatctttaa tgtcgtcacc gatgtcaaaa aaagattatt cgagtgaaat 140520

aatatgcgcc tttgatatag gtgcaaaaaa tcctgccaga actgttttag aagtcaagga 140580

taactccgtt agggtattgg atatatcaaa attagactgg agttctgatt gggaaaggcg 140640

catagctaaa gatttgtcac aatatgaata cactacagtt cttctagaac gtcagcctag 140700

aaggtcgccg tatgttaaat ttatctattt tattaaaggc tttttatatc atacatcggc 140760

tgccaaagtt atttgcgtct cgcctgtcat gtctggtaat tcatatagag atcgaaaaaa 140820

gagatcggtc gaagcatttc ttgattggat ggacacattc ggattgcgag actccgttcc 140880

ggatagacgc aaattagacg atgtagcgga tagtttcaat ttggctatga gatacgtatt 140940

agataaatgg aatactaatt atacacctta taataggtgt aaatctagaa attacataaa 141000

aaaaatgtaa taacgttagt aacgccatta tggataatct atttaccttt ctacatgaaa 141060

tagaagatag atatgccaga actattttta actttcatct aataagttgc gatgaaatag 141120

gagatatata tggtcttatg aaagaacgca tttcctcaga ggatatgttt gataatatag 141180

tgtataataa agatatacat cctgccatta agaaactagt gtattgcgac atccaactta 141240

ctaaacacat tattaatcag aatacgtatc cggtatttaa cgattcttca caagtgaaat 141300

gttgtcatta tttcgacata aactcagata atagcaatat tagctctcgt acagtagaga 141360

tatttgagag ggaaaagtca tctcttgtat catatattaa aactaccaat aagaagagaa 141420

aggtcaatta cggcgaaata aagaaaactg ttcatggagg cactaatgca aattactttt 141480

ccggtaaaaa gtctgacgag tatctgagta ctacagttag atccaacatt aatcaacctt 141540

ggatcaaaac catttctaag agaatgagag tagatatcat taatcactct atagtaacgc 141600

gtggaaaaag ctctatatta caaactatag aaattatttt tactaataga acatgtgtga 141660

aaatattcaa ggattctact atgcacatta ttctatccaa ggacaaggat gaaaaggggt 141720

gtatacacat gattgacaaa ttattctatg tctattataa tttatttctg ttgttcgaag 141780

atatcatcca aaacgagtac tttaaagaag tagctaatgt tgtaaaccac gtactcacgg 141840

ctacggcatt agatgagaaa ttattcctaa ttaagaaaat ggctgaacac gatgtttatg 141900

gagttagcaa tttcaaaata gggatgttta acctgacatt tattaagtcg ttggatcata 141960

ccgttttccc ctctctgtta gatgaggata gcaaaataaa gttttttaag gggaaaaagc 142020

tcaatattgt agcattacga tctctggagg attgtataaa ttacgtgact aaatccgaga 142080

atatgataga aatgatgaag gaaagatcga ctattttaaa tagcatagat atagaaacgg 142140

aatcggtaga tcgtctaaaa gaattgcttc taaaatgaaa aaaaacactg attcagaaat 142200

ggatcaacga ctcggatata agtttttggt gcctgatcct aaagccggag ttttttatag 142260

accgttacat ttccaatatg tatcgtattc taattttata ttgcatcgat tgcatgaaat 142320

cttgaccgtc aagcggccac tcttatcgtt taagaataat acagaacgaa ttatgataga 142380

aattagcaat gttaaagtga ctcctccaga ttactcacct ataatcgcga gtattaaagg 142440

taagagttat gacgcattag ccacgttcac tgtaaatatc tttaaagagg taatgaccaa 142500

agagggtata tccatcacta aaataagtag ttatgaggga aaagattctc atttgataaa 142560

aattccgcta ctaataggat acgggaataa aaatccactt gatacagcca agtatcttgt 142620

tcctaatgtc ataggtggag tctttatcaa taaacaatct gtcgaaaaag taggaattaa 142680

tctagtagaa aagattacaa catggccaaa atttagggtt gttaagccaa actcattcac 142740

tttctcgttt tcctccgtat cccctcctaa tgtattaccg acaagatatc gccattacaa 142800

gatatctctg gatatatcac aattggaagc gttgaatata tcatcgacaa agacatttat 142860

aacggtcaat attgttttgc tgtctcaata tttatctaga gtgagtctag aattcattag 142920

acgtagttta tcatacgata tgcctccaga agttgtctat ctagtaaacg cgataataga 142980

tagtgctaaa cgaattactg aatctattac tgactttaat attgatacat acattaatga 143040

cctggtggaa gctgaacaca ttaaacaaaa atctcagtta acgatcaacg agttcaaata 143100

tgaaatgctg cataactttt tacctcatat gaactataca cccgatcaac taaagggatt 143160

ttatatgata tctttactaa gaaagtttct ctactgtatc ttccacactt ctagatatcc 143220

agatagagat tcgatggttt gtcatcgcat cctaacgtac ggcaaatatt ttgagacgtt 143280

ggcacatgat gaattagaga attacatagg caacatccga aacgatatca tgaacaatca 143340

caagaacaga ggcacttacg cggtaaacat tcatgtacta acaactcccg gacttaatca 143400

tgcattttct agtctattga gtggaaagtt caaaaagtca gacggtagtt atcgaacaca 143460

tcctcactat tcatggatgc agaatatttc tattcctagg agtgttggat tttatccgga 143520

tcaagtaaag atttcaaaga tgttttctgt cagaaaatac catccaagtc aatatcttta 143580

cttttgttca tcagacgttc cggaaagagg tcctcaggta ggtttagtat ctcaattgtc 143640

tgtcttgagt tccattacaa atatactaac gtctgagtat ttggatttgg aaaagaaaat 143700

ttgtgagtat atcagatcat attataaaga tgatataagt tactttgaaa caggatttcc 143760

aatcactata gaaaatgctc tagtcgcatc tcttaatcca aatatgatat gtgattttgt 143820

aactgacttt agacgtagaa aacggatggg attcttcggt aacttggagg taggtattac 143880

tttagttagg gatcacatga atgaaattcg cattaatatt ggagcgggaa gattagtcag 143940

accattcttg gttgtggata acggagagct catgatggat gtgtgtccgg agttagaaag 144000

cagattagac gacatgacat tctctgacat tcagaaagag tttccgcatg tcatcgaaat 144060

ggtagatata gaacaattta cttttagtaa cgtatgtgaa tcggttcaaa aatttagaat 144120

gatgtcaaag gatgaaagaa agcaatacga tttatgtgac tttcctgccg aatttagaga 144180

tggatatgtg gcatcttcat tagtgggaat caatcacaat tctggaccca gagctattct 144240

tggatgtgct caagctaaac aagctatctc ttgtctgagt tcggatatac gaaataaaat 144300

agacaatgga attcatttga tgtatccaga gaggccaatc gtgattagta aggctttaga 144360

aacttcaaag attgcggcta attgcttcgg ccaacatgtt actatagcat taatgtcgta 144420

caaaggtatc aatcaagagg atggaattat cattaaaaaa caatttattc agagaggcgg 144480

tctcgatatt gttacagcca agaaacatca agtagaaatt ccgttggaaa actttaataa 144540

caaagaaaga gataggtcta acgcctattc aaaattagaa agtaatggat tagttagact 144600

gaatgctttc ttggaatccg gagacgctat ggcacgaaat atctcatcaa gaactcttga 144660

agatgatttt gctagagata atcagattag cttcgatgtt tccgagaaat ataccgatat 144720

gtacaaatct cgcgttgaac gagtacaagt agaacttact gacaaagtta aggtacgagt 144780

attaaccatg aaagaaagaa gacccattct aggagacaaa tttaccacta gaacgagtca 144840

aaagggaaca gtcgcgtatg tcgcggatga aacggaactt ccatacgacg aaaatggtat 144900

cacaccagat gtcattatta attctacatc catcttctct agaaaaacta tatctatgtt 144960

gatagaagtt attttaacag ccgcatattc tgctaagccg tacaacaata agggagaaaa 145020

ccgacctgtc tgttttccta gtagtaacga aacatccatc gatacatata tgcaattcgc 145080

taaacaatgt tatgagcatt caaatccgaa attgtccgat gaagaattat cggataaaat 145140

cttttgtgaa aagattctct atgatcctga aacggataag ccttatgcat ccaaagtatt 145200

ttttggacca atttattact tgcgtctgag gcatttaact caggacaagg caaccgttag 145260

atgtagaggt aaaaagacga agctcattag acaggcgaat gagggacgaa aacgtggagg 145320

aggtatcaag ttcggagaaa tggagagaga ctgtttaata gcgcatggtg cagccaatac 145380

tattacagaa gttttgaaag attcggaaga agattatcaa gatgtgtatg tttgtgaaaa 145440

ttgtggagac atagcagcac aaatcaaggg tattaataca tgtcttagat gttcaaaact 145500

taatctctct cctctcttaa caaaaattga taccacacac gtatctaaag tatttcttac 145560

tcaaatgaac gccagaggcg taaaagtcaa attagatttc gaacgaagac ctccttcgtt 145620

ttataaacca ttagataaag ttgatctcaa gccgtctttt ctggtgtaat attctagttt 145680

ggtagtagat acatatcaat atcatcaaat tcgagatccg aattataaaa tgggcgtgga 145740

ttgttaacta tagaatcgga cgtctgatat tcgaaaatct gtggagtttc aggttttggt 145800

ggaggtgtaa ctgctacttg ggatactgaa gtctgatatt cagaaagctg tggatgttct 145860

ggttcggcat ccaccgatgg tgttacacca ctactaattg gttcagtaac gtctgtggac 145920

gatggaggca ccacttctac agaacctgta gcctcagtca tcaacggagc tacttcaatg 145980

cgaggaaatg tataatttgg taatggtttc tcatgtggat ctgaagaaga ggtaagatat 146040

ctactagaaa gataccgatc acgttctagt tctcttttgt agaacttaac tttttctttc 146100

tccgcatcta gttgatattc caacctcttc acgttactac gttcagattc caattcacgt 146160

tcgcatgggt tacctccaca gtttttacga gcgatttcac gttcagcctt catgcgtctc 146220

tccctctctc tatcgagttt atcagagcag tctttctgaa ggcgatcgaa ctccataaat 146280

ttctccaacg ctttgattgt ttccatagat ttccgaagtt cagcttttag gactgtgatt 146340

ctttttcttt cgaattcaca gctggatgta caaccgtttc cattaccgcc atctctaagt 146400

ttcttttcta gatcggcaac atttcatccc catgcctttt acattcctcg agtctactgt 146460

cgtcgaaata tcgttccagc tccttttcga catcaataac tttagcacgt tgtctctcaa 146520

gctctctttt gtagttatct gattccctgg cacgtttaag atcttcatgc aattgagtca 146580

gctcttaact tcctctcttg cttcttcgtc atagtactta caatcactat gggatccatt 146640

gttaccacgt ctacactcgg cgagctcgcg tttaagagat tcaatttccc gtttgtattg 146700

gtccatgttt ccattgctac caccattaga tttacaggct gctagttgtc gttcgagatc 146760

agaaatacgg gttttcttgg aattgatttc gtcgatgtac ttggcatcga aacacttatt 146820

aagttctttt tccaattcta cgattttatt tctttcgcga gtcaattccc tcctgtagta 146880

actatctgtt ttgtcagatt cacgctctct acgtagactt tcttgcaagt tactaatttg 146940

ttccctagca cgtccgagtt tagttttata tgctgaatag agttctgatt catcctttga 147000

gcagatctct agcgatcgtt taagattcct gattctagtc tttagcctat ttacctcctc 147060

agaagatgtt ccgttaccgt tgcgtttaca ctcgttaagc tgtctatcaa gatccatgat 147120

tctatctcta aaacgttgca tctctctttc catatcagca ttgctttcat tattacgtct 147180

gcagtcactc aactgtcttt caatatctga gattctatct ctaagacgtc gcatctctct 147240

ctgtttcggc attggtttca ttattacgtc tacagtcgtt caactgtctt tcaagatctg 147300

atattctaga ttggagtctg ctaatctctg tagcattttc acggcattca ctcagttgtc 147360

tttcaagatc tgaaatttta gattggagtc tgctaatctc tgtaagattt cctcctccgc 147420

tctcgatgca gtcggtcaac ttattctcta gttctctaat acgcgaacgc agtgcatcaa 147480

cttcttgcgt gtcttcctgg ttgcgtgtac attcatcgag tctagattcg agatctctaa 147540

cgcgtcgtcg ttcttcctca agttctctgc gtactacaga aagcgtgtcc ttatcttgtt 147600

gatatttagc aatttctgat tctagagtac tgattttgct tacgtagtta ctaatagttg 147660

tcttggcctt atcaagatcc tccttgtatt tgtcgcattc cttgatatcc ctacgaagtc 147720

tggacagttc ccattcgaca ttacgacgtt tatcgatttc agctcggaga tcgtcatcgc 147780

gttgttttag ccacatacga ctgagttcaa gttctcgttg acaagatcca tctacttttc 147840

cattcctaat agtatccagt tccttttcta gttctgaacg catttcttgt tccctatcaa 147900

gcgattctct caattctcgg atagtcttct tatcaatttc taataaatct gaaccatcat 147960

ctgtcccatt ttgaatatcc ctgtgttctt tgatctcttt tgtaagtcgg tcgattcttt 148020

cggttttata aacagaatcc ctttccaaag tcctaatctt actgagttta tcactaagtt 148080

ctgcattcaa ttcggtgagt tttctcttgg cttcttccaa ctctgtttta aactctccac 148140

tattttcgca ttcttcctcg catttatcta accattcaat tagtttatta ataactagtt 148200

ggtaatcagc gattcctata gccgttcttg taattgtggg aacataatta ggatcttcta 148260

atggattgta tggcttgata gcatcatctt tatcattatt agggggatgg acaaccttaa 148320

ttggttggtc ctcatctcct ccagtagcgt gtggttcttc aataccagtg ttagtaatag 148380

gcttaggcaa atgcttgtcg tacgcgggca cttcctcatc catcaagtat ttataatcgg 148440

gttctacttc agaatattct tttctaagag acgcgacttc gggagttagt agaagaactc 148500

tgtttctgta tctatcaacg ctggaatcaa tactcaagtt aaggatagcg aatacctcat 148560

cgtcatcatc cgtatcctct gaaacgccat catatgacat ttcatgaagt ctaacgtatt 148620

gataaataga atcagattta gtattaaaca gatccttaac ctttttagta aacgcatatg 148680

tatattttag atctccagat ttcataatat gatcacatgc cttaaatgtc agtgcttcca 148740

tgatataatc tggaacacta atgggtgacg aaaaagatac agcaccatat gctacgttga 148800

taaataaatc tgaaccacta agtagataat gattaatgtt aaggaaaaga aaatattcag 148860

tgtataggta tgtcttggcg tcatatcttg tactaaacac gctaaacagt ttgttaatgt 148920

gatcaatttc caatagatta attagagcag cgggaatacc aacaaacata ttaccacatc 148980

cgtattttct atgaatatca catatcatgt taaaaaatct tgatagaaga gcgaatatct 149040

cgtctgactt aatgagtcgt agttcagcag caacataagt cataactgta aatagaacat 149100

actttcctgt agtgttgatt ctagactcca catcaacacc attattaaaa atagttttat 149160

atacatcttt aatctgctct ccgttaatcg tcgaacgttc tagtatacgg aaacactttg 149220

atttcttatc tgtagttaat gacttagtga tatcacgaag aatattacga attacatttc 149280

ttgtttttct tgagagacct gattcagaac tcaactcatc gttccatagt ttttctacct 149340

cagtggcgaa atctttggag tgcttggtac atttttcaat aaggttcgtg acctccattt 149400

attataaaaa atttattcaa aacttaacta caatcgggta attataagat cgtagatctc 149460

ccatgtggcg gaatactacc atctatcgca tgtggatgga cagtaggtaa tggccatggg 149520

aacagtaatg attgcatatt tatctttctt gctagtatta ctgcatattg tcccaatgtt 149580

tcgatgtgat gttctaacct atcaactgcc gctgtatcac aacaatagtg tccgatgaaa 149640

ttaagattat gatccaatgt gtttaatata tgattatcaa gtcttatacg atccgcgtct 149700

tttttgacag gatcaggttc ttctacagga agaagtttcg gcctcttatg atattcatgt 149760

ctgggaaacg gtggtctagg gtgaggctcc ggtatcggag tgggttttgg attataatca 149820

tcatcgtcta tgacatcatc atcatcttcg acttcgatat ttattttgct atcttgatga 149880

tgtcctgtat cagttgcatt ttcagcactc gactgaatat tagcgcattc attgtctatt 149940

attaccatat ttctaaaccc aaaatgtatg tgttgaacat cagtactatc gttgatgagt 150000

cttatagcat gaattcgctt atcgttatcg ggtttatctt ctgtcacctt agcaattcct 150060

tttttattaa actctacata atcatatcca tttctattgt ttgttctaat ataaacgagt 150120

atagcatcat tgctaaattt ttcaatagta tcgaaaacag aatatcctaa accatataat 150180

atatattcag gaacactcaa actaaatgtc caggattctc ctaaatacgt aaactttaat 150240

agtgcgaaat cattcaaaaa tctaccactt atagatagat agtacataaa tgcgtatagt 150300

agtctaccta tctctttatt atgaaaaccg gcattacgat catatatgtc gtgatatacc 150360

tgtgatccgt ttacgttaaa ccataaatac atgggtgatc ctataaacat gaatttattt 150420

ctaattctca gagctatagt taattgaccg tgtaatattt gcttacatgc atacttgata 150480

cgcttattaa taagattttt atcattgctc gttatctcag aatcgtatat ataaggagta 150540

ccattgtgat tcttaccaga tattatacaa aatactatat ataaaatata ttgacccacg 150600

ttagtaatca tataaatgtt taacgtttta aattttgtat ttaatgatcc attatcatac 150660

gctagcatgg tcttatgata ttcattcttt aaaatataat attgtgttag ccattgcatt 150720

ggggctccta atggagattt tttattctca tccattttag gataggcttt cataaagtcc 150780

ctaataactt cgtgaataat gtttctatgt tttctactga tgcatgtatt tgcttcgatt 150840

tttttatccc atgtttcatc tatcatagat ttaaacgcag taatgctcgc aacattaaca 150900

tcttgaaccg ttggtacaat tccgttccat aaatttataa tgttcgccat ttatataact 150960

cattttttga atatactttt aattaacaaa agagttaagt tactcatatg gacgccgtcc 151020

agtctgaaca tcaatctttt tagccagaga tatcatagcc gctcttagag tttcagcgtg 151080

attttccaac ctaaatagaa cttcatcgtt gcgtttacaa cacttttcta tttgttcaaa 151140

ctttgttgtt acattagtaa tctttttttc caaattagtt agccgttgtt tgagagtttc 151200

ctcattgtcg tctccatcgg ctttaacaat tgcttcgcgt ttagcctctg gctttttagc 151260

agcctttgta gaaaaaaatt cagttgctgg aattgcaaga tcgtcatctc cggggaaaag 151320

agttccgtcc atttaaagta cagattttag aaactgacac tctgcgttat ttatatttgg 151380

tacaacacat ggattataaa tatcgatgtt aataacatca gaaaatgtaa agtctataca 151440

ttgttgcatc gtgttaaatt ttctaatgga tctagtatta ttgggtccaa cttctgcctg 151500

aaatccaaat atggaagcgg atacaaaacc gtttcctgga taaaccacac atctccactt 151560

ttgctttaca tcagaaattg tgtcgttgac atcttgaact ctcctatcta atgccggtgt 151620

tccacctata gattttgaat attcgaatgc tgcatgagta gcattaaatt ccttaatatt 151680

gccataattt tcatatattg agtaaccctg gataaaaagt aaacacaccg cagccgtcgc 151740

taccacaata aaaaaaattg atagagagtt catttataat ctattagaag ctgacaaaat 151800

ttttttacac gcatcagaca atgctttaat aaatagttca acatctactt ttgtcatatc 151860

gaaccgatgg tatgattcta acctagaatt acatccgaaa aagttgacta tgttcatagt 151920

cattaagtca ttaacaaaca acattccaga ctctggatta taagacgata ctgtttcgtc 151980

acaattacct accttaatca tgtgattatg aatattggct attagagcac cttctaagaa 152040

atctataata tctttgaaac acgatttaaa atcaaaccac gaatatactt ctacgaagaa 152100

agttagttta cccataggag aaataactat aaatggagat ctaaatacaa aatccggatc 152160

tatgatagtt ttaacattat tatattctct attaaatacc tccacatcta aaaatgttaa 152220

ttttgaaact atgtcttcgt ttattaccgt acctgaacta aacgctataa gctctattgt 152280

ttgagaactc tttaaacgat attcttgaaa tacatgtaac aaagtttcct ttaactcggt 152340

cggtttatct accatagtta cagaatttgt atccttatct ataatataat aatcaaaatc 152400

gtataaagtt atataattat cgcgttcaga ttgggatctt ttcaaataga ctaaaaaccc 152460

catttctcta gtaagtatct tatgtatatg tttgtaaaat atcttcatgg tgggaatatg 152520

ctctaccgca gttagccatt cctcattgac agcggtagat gtattagaca aaactattcc 152580

aatgtttaac aagggccatt ttacgagatt attaaatcct tgtttgataa atgtagccaa 152640

tgagggttcg agttcaacga cgattgaatt ctcttcccgc ggatgctgca tgatgaacga 152700

cgggatgttg ttcgattgat ttggaattct ttttcgactt tttgtttata ttaaatattt 152760

taaaatttat agcggatagc aattcatgta ccacggataa tgtagacgcg tattgcgcat 152820

cgatatcttt attattagat aaatttatca ataaatgtga gaagtttgcc tcgttaaggt 152880

cttccattta aatattatat aaacatttgt gtttgtaact tattcgtctt ttatggaata 152940

gttttttact agtaaagctg caattacaca ctttgtccgt aaaacataaa tataaacacc 153000

agcttttatc aatcgttcca aaaagtcgac ggcggacatt tttaacatgg catctatttt 153060

aaatacactt aggtttttgg aaaaaacatc attttataat tgtaacgatt caataactaa 153120

agaaaagatt aagattaaac ataagggaat gtcatttgta ttttataagc caaagcattc 153180

taccgttgtt aaatacttgt ctggaggagg tatatatcat gatgatttgg ttgtattggg 153240

gaaggtaaca attaatgatc taaagatgat gctattttac atggatttat catatcatgg 153300

agtgacaagt agtggagcaa tttacaaatt gggatcgtct atcgatagac tttctctaaa 153360

taggactatt gttacaaaag ttaataataa ttataattat gatgatacat tttttgacga 153420

cgatgattga tcgctattgc acaattttgt ttttttactt tctaatatag cgtttagatt 153480

ctttttcatg tgcgaatatt gatttactaa aatatctatg tttaactttt gttctataac 153540

gtccttatcg gcggtatcgg tacatatacg taattcacct tcacaaaata cggagtcttc 153600

gataataata gccaatcgat tattggatct agctgtctgt atcatattca acatgtttaa 153660

tatatccttt cgtttcccct ttacaggcat cgatcgtagc atattttccg cgtctgatat 153720

ggaaatgtta aaactacaaa aatgcgtaat gttagcccgt cctaatattg gtacgtgtct 153780

ataagtttgg catagtagaa taatagacgt gtttaaatgc cttccgaagt ttaagaattc 153840

tattagagta ttgcattttg atagtttatc acctacatca tcaaaaataa gtaaaaagtg 153900

tgctgatttt ttatgatttt gtgcgacagc aatacatttt tctatgttac ttttagttcg 153960

tatcagatta tattctagag attcctgact actaacgaaa ttaatatgat ttggccaaat 154020

gtatccatca taatctgggt tataaacggg tgtaaacaag aatatatgtt tatatttttt 154080

aactagtgta gaaaacagag atagtaaata gatagttttt ccagatccag atcctcccgt 154140

taaaaccatt ctaaacggca tttttaataa attttctctt gaaaattgtt tttcttggaa 154200

acaattcata attatattta cagttactaa attaatttga taataaatca aaatatggaa 154260

aactaaggtt gttagtaggg aggagaacaa agaaggcaca tcgtgatata aataacattt 154320

attatcatga tgacaccaga aaacgacgaa gagcagacat ctgtgttctc cgctactgtt 154380

tacggagaca aaattcaggg aaagaataaa cgcaaacgcg tgattggtct atgtattaga 154440

atatctatgg ttatttcact actatctatg attaccatgt ccgcgtttct catagtgcgc 154500

ctaaatcaat gcatgtctgc taacgaggct gctattactg acgccgctgt tgccgttgct 154560

gctgcatcat ctactcatag aaaggttgcg tctagcacta cgcaatatga tcacaaagaa 154620

agctgtaatg gtttatatta ccagggttct tgttatatat tacattcaga ctaccagtta 154680

ttctcggatg ctaaagcaaa ttgcactgcg gaatcatcaa cactacccaa taaatccgat 154740

gtcttgacta cctggctcat tgattatgtt gaggatacat ggggatctga tggtaatcca 154800

attacaaaaa ctacatccaa ttatcaagat tctgatgtat cacaagaagt tagaaagtat 154860

ttttgtgtta aaacaatgaa ctaatattta tttttgtaca ttaataaatg aaatcgctta 154920

atagacaaac tgtaagtagg tttaagaagt tgtcggtgcc ggccgctata atgatgatac 154980

tctcaaccat tattagtggc ataggaacat ttctgcatta caaagaagaa ctgatgccta 155040

gtgcttgcgc caatggatgg atacaatacg ataaacattg ttatttagat actaacatta 155100

aaatgtctac agataatgcg gtttatcagt gtcgtaaatt acgagctaga ttgcctagac 155160

ctgatactag acatctgaga gtattgttta gtatttttta taaagattat tgggtaagtt 155220

taaaaaagac caataataaa tggttagata ttaataatga taaagatata gatattagta 155280

aattaacaaa ttttaaacaa ctaaacagta cgacggatgc tgaagcgtgt tatatataca 155340

agtctggaaa actggttaaa acagtatgta aaagtactca atctgtacta tgtgttaaaa 155400

aattctacaa gtgacaacaa aaaatgaatt aataataagt cgttaacgta cgccgccatg 155460

gacgccgcgt ttgttattac tccaatgggt gtgttgacta taacagatac attgtatgat 155520

gatctcgata tctcaatcat ggactttata ggaccataca ttataggtaa cataaaaact 155580

gtccaaatag atgtacggga tataaaatat tccgacatgc aaaaatgcta ctttagctat 155640

aagggtaaaa tagttcctca ggattctaat gatttggcta gattcaacat ttatagcatt 155700

tgtgccgcat acagatcaaa aaataccatc atcatagcat gcgactatga tatcatgtta 155760

gatatagaag ataaacatca gccattttat ctattcccat ctattgatgt ttttaacgct 155820

acaatcatag aagcgtataa cctgtataca gctggagatt atcatctaat catcaatcct 155880

tcagataatc tgaaaatgaa attgtcgttt aattcttcat tctgcatatc agacggcaat 155940

ggatggatca taattgatgg gaaatgcaat agtaattttt tatcataaaa gttgtaaagt 156000

aaataataaa acaataaata ttgaactagt agtacgtata ttgagcaatc agaaatgatg 156060

ctggtacctc ttatcacggt gaccgtagtt gcgggaacaa tattagtatg ttatatatta 156120

tatatttgta ggaaaaagat acgtactgtc tataatgaca ataaaattat catgacaaaa 156180

ttaaaaaaga taaagagttc taattccagc aaatctagta aatcaactga tagcgaatca 156240

gactgggagg atcactgtag tgctatggaa caaaacaatg acgtagataa tatttctagg 156300

aatgagatat tggacgatga tagcttcgct ggtagtttaa tatgggataa cgaatccaat 156360

gttatagcgc ctagcacaga acacatttac gatagtgttg ctggaagcac gctgctaata 156420

aataatgatc gtaatgaaca gactatttat cagaacacta cagtagtaat taatgaaacg 156480

gagactgtta aagtacttaa tgaagatacc aaacagaatc ctaactattc atccaatcct 156540

ttcgtaaatt ataataaaac cagtatttgt agcaagtcaa atccgtttat tacagaactt 156600

aacaataaat ttagtgagaa taatccgttt agacgagcac atagcgatga ttatcttaat 156660

aagcaagaac aagatcatga acacgatgat atagaatcat cggtcgtatc attggtgtga 156720

ttagtttcct ttttataaaa ttgaagtaat atttagtatt attgctgccg tcacgttgta 156780

caaatggaga tattccctgt attcggcatt tctaaaatta gcaattttat tgctaataat 156840

gactgtagat attatataga tacagaacat caaaaaatta tatctgatga gatcaataga 156900

cagatggatg aaacggtact tcttaccaac atcttaagcg tagaagttgt aaatgacaat 156960

gagatgtacc atcttattcc tcatagatta tcgacgatta tactctgtat tagttctgtc 157020

ggaggatgtg ttatctctat agataatgac atcaatgaca aaaatattct aacatttccc 157080

attgatcatg ctgtaatcat atccccactg agtaaatgtg tcgtagttag caagggtcct 157140

acaaccatat tggttgttaa agcggatata cctagcaaac gattggtaac atcgtttaca 157200

aacgacatac tatatgtaaa caatctgtca ctgattaatt atttgccgtt gtctgtattc 157260

attattagac gagtcaccga ctatttggat agacgcatat gcgatcagat atttgctaat 157320

aataagtggt attccattat aaccatcgac gataagcaat atcctattcc atcaaactgt 157380

ataggtatgt cctctgccaa gtacataaat tctagcatcg agcaagatac tttaatccat 157440

gtttgtaacc tcgagcatcc gttcgactca gtatacaaaa aaatgcagtc gtacaattct 157500

ctacctatca aggaacaaat attgtacggt agaattgata atataaatat gagcattagt 157560

atttctgtgg attaatagat ttctagtatg gggatcatta atcatctcta atctctaaat 157620

acctcataaa acgaaaaaaa agctattatc aaatactgta cggaatggat tcattctctt 157680

ctctttttat gaaactctgt tgtatatcta ctgataaaac tggaagcaaa aaatctgata 157740

aaaagaataa gaataagatc aaggattata tggaacacga ttattataaa ataacaatag 157800

ttcctggttc ctcttccacg tctactagct cgtggtatta tacacatgcc tagtaatagt 157860

ctctttgcgt tgacggaaag cagactagaa ataacaggct aaaatgttca gacaccataa 157920

tagttcccaa cccagataat aacagagttc catcaacaca ttcctttaaa ctcaatccca 157980

aacccaaaac cgttaaaatg tatccggcca attgatagta gataatgagg tgtacagcgc 158040

atgataattt acacagtaac caaaatgaaa atactttagt aattataaga aatatagatg 158100

gtaacgtcat catcaacaat ccgataatat gcctgagagt aaacattgat ggataaaaca 158160

aaaatgctcc gcataactct atcatggcaa taacacaacc aaacacttgt aaaattccta 158220

aattagtaga aaatacaacg gatatcgatg tataagtgat ctcgagaaat aataagaata 158280

aagtaatgcc cgtaaagata aacatcaaca ttgtttggta atcattaaac caattagtat 158340

gaagttgaac taatttcaca gtagatttta ttccagtgtt atcctcgcat gtataagtac 158400

ctggtaagat atctttatat tccataatca atgagacatc actatccgat aacgaatgaa 158460

gtctagcact agtatgccat ttacttaata ttgtcgtctt ggaagtttta ttataagtta 158520

aaatatcatg gttatccaat ttccatctaa tatactttgt cggattatct atagtacacg 158580

gaataatgat ggtatcatta catgctgtat actctatggt ctttgtagtt gttataacaa 158640

ccaacgtata gaggtatatc aacgatattc taactcttga cattttttat ttatttaaaa 158700

tgataccttt gttatttatt ttattctatt ttgctaacgg tattgaatgg cataagtttg 158760

aaacgagtga agaaataatt tctacttact tattagacga cgtattatac acgggtgtta 158820

atggggcggt atacacattt tcaaataata aactaaacaa aactggttta actaataata 158880

attatataac aacatctata aaagtagagg atgcggataa ggatacatta gtatgcggaa 158940

ccaataacgg aaatcccaaa tgttggaaaa tagacggttc agacgaccca aaacatagag 159000

gtagaggata cgctccttat caaaatagca aagtaacgat aatcagtcac aacggatgtg 159060

tactatctga cataaacata tcaaaagaag gaattaaacg atggagaaga tttgacggac 159120

catgtggtta tgatttatac acggcggata acgtaattcc aaaagatggt ttacgaggag 159180

cattcgtcga taaagacggt acttatgaca aagtttacat tcttttcact gatactatcg 159240

gctcaaagag aattgtcaaa attccgtata tagcacaaat gtgcctaaac gacgaaggtg 159300

gtccatcatc attgtctagt catagatggt cgacgtttct caaagtcgaa ttagaatgtg 159360

atatcgacgg aagaagttat agacaaatta ttcattctag aactataaaa acagataatg 159420

atacgatact atatgtattc ttcgatagtc cttattccaa gtccgcatta tgtacctatt 159480

ctatgaatac cattaaacaa tctttttcta cgtcaaaatt ggaaggatat acaaagcaat 159540

tgccgtctcc agctcctggt atatgtttac cagctggaaa agttgttcca cataccacgt 159600

ttgaagtcat agaaaaatat aatgtactag atgatattat aaagccttta tctaaccaac 159660

ctatcttcga aggaccgtct ggtgttaaat ggttcgatat aaaggagaag gaaaatgaac 159720

atcgggaata tagaatatac ttcataaaag aaaattctat atattcgttc gatacaaaat 159780

ctaaacaaac tcgtagctcg caagtcgatg cgcgactatt ttcagtaatg gtaacttcga 159840

aaccgttatt tatagcagat atagggatag gagtaggaat gccacaaatg aaaaaaatac 159900

ttaaaatgta atcttaatcg agtacaccac acgacaatga acaaacataa gacagattat 159960

gctggttatg cttgctgcgt aatatgcggt ctaattgtcg gaattatttt tacagcgaca 160020

ctattaaaag ttgtagaacg taaattagtt catacaccat caatagataa aacgataaaa 160080

gatgcatata ttagagaaga ttgtcctact gactggataa gctataataa taaatgtatc 160140

catttatcta ctgatcgaaa aacctgggag gaaggacgta atgcatgcaa agctctaaat 160200

ccaaattcgg atctaattaa gatagagact ccaaacgagt taagtttttt aagaagcatt 160260

agacgcggat attgggtagg agaatccgaa atattaaacc agacaacccc atataatttt 160320

atagctaaga atgccacgaa gaatggaact aaaaaacgga aatatatttg tagcacaacg 160380

aatactccca aactgcattc gtgttacact atataacaat tacactacat ttttatcata 160440

ccactacttc ggttagatgt tttagaaaaa aataaatatc gccgtaccgt tcttgttttt 160500

ataaaaataa caattaacaa ttatcaaatt ttttctttaa tattttacgt ggttgaccat 160560

tcttggtggt aaaataatct cttagtgttg gaatggaatg ctgtttaatg tttccacact 160620

catcgtatat tttgacgtat gcagtcacat cgtttacgca atagtcagac tgtagttcta 160680

tcatgcttcc tacatcagaa ggaggaacag ttttaaagtc tcttggtttt aatctattac 160740

cgttagtttt catgaaatcc tttgttttat ccacttcaca ttttaaataa atgtccacta 160800

tacattcttt tgttaatttt actagatcgt catgggtcat agaatttata ggttccgtag 160860

tccatggatc caaactagca aacttcgcgt atacggtatc gcgattagtg tatacaccaa 160920

ctgtatgaaa attaagaaaa cagtttaata gatcaacaga aatatttaat cctccgtttg 160980

atacagatgc gccatattta tggatttcgg attcacacgt tgtttgtctg aggtgttcgt 161040

ctagtgttgc ttctacgtaa acttcgattc ccatatattc tttattgtca gaatcgcata 161100

ccgatttatc atcatacact gtttgaaaac taaatggtat acacatcaaa ataacaaata 161160

ctaacgagta cattctgcaa tattgttatc gtaattggaa aaatagtgtt cgagtgagtt 161220

ggattatgtg agtattggat tgtatatttt attttatatt ttgtaataag aataaaatgc 161280

taatgtcaag tttattccaa tagatgtctt attaaaaaca tatataataa ataacaatgg 161340

ctgaatggca taaaattatc gaggatatct caaaaaataa taagttcgag gatgccgcca 161400

tcgttgatta caagactaca aagaatgttc tagctgctat tcctaacaga acatttgcca 161460

agattaatcc gggtgaaatt attcctctca tcactaatcg taatattcta aaacctctta 161520

ttggtcagaa atattgtatt gtatatacta actctctaat ggatgagaac acgtatgcta 161580

tggagttgct tactgggtac gcccctgtat ctccgatcgt tatagcgaga actcataccg 161640

cacttatatt tttgatgggt aagccaacaa catccagacg tgacgtgtat agaacgtgta 161700

gagatcacgc tacccgtgta cgtgcaactg gtaattaaaa taaaaagtaa tattcatatg 161760

tagtgtcaat tttaaatgat gatgatgaaa tgtataatat ccatattgac gatgtcaata 161820

atgccggtat tggcatacag ttcatcgatt tttagatttc attcagagga tgtggaatta 161880

tgttatgggc atttgtattt tgataggatc tataatgtag taaatataaa atataatccg 161940

catattccat atagatataa ttttattaat cgcacgttaa ccgtagatga actagacgat 162000

aatgtctttt ttacacatgg ttatttttta aaacacaaat atggttcact taatcctagt 162060

ttgattgtct cattatcagg aaacttaaaa tataatgata tacaatgctc agtaaatgta 162120

tcgtgtctca ttaaaaattt ggcaacgagt acatctacta tattaacatc taaacataag 162180

acttattctc tacatcggtc cacgtgtatt actataatag gatacgattc tattatatgg 162240

tataaagata taaatgacaa gtataatgac atctatgatt ttactgcaat atgtatgcta 162300

atagcgtcta cattgatagt gaccatatac gtgtttaaaa aaataaaaat gaactcttaa 162360

ttatgctatg ctattagaaa tggataaaat caaaattacg gttgattcaa aaattggtaa 162420

tgttgttacc atatcgtata acttggaaaa gataactatt gatgtcacac ctaaaaagaa 162480

aaaagaaaag gatgtattat tagcgcaatc agttgctgtc gaagaggcaa aagatgtcaa 162540

ggtagaagaa aaaaatatta tcgatattga agatgacgat gatatggatg tagaaagcgc 162600

gtaatactat ctataaaaat aagtatataa taaatacttt ttatttacgg tactcttgta 162660

gtggtgatac cctactcaat tattttttta aaaaaatact tattctgatt cttctaacca 162720

tttccgtgtt cgttcgaatg ccacatcgac gtcaaagata ggggagtagt tgaaatctag 162780

ttctgcattg ttggtacgca cctcaaatgt agtgttggat atcttcaacg tatagttgtt 162840

gagtagtgat ggttttctaa atagaattct cttcatatca ttcttgcacg cgtacatttt 162900

tagcatccat cttggaattc tagatccttg ttctattccc aatggtttca tcaataaaag 162960

attaaacata tcgtacgaac acgatggaga gtaatcgtag caaaagtaag catttccttt 163020

aatctcagat cccggatact ggatatattt tgcagccaac acgtgcatcc atgcaacatt 163080

tcctacatat acccggctat gcaccgcgtc atcatcgact gtacgataca taatgttacc 163140

gtgttgctta cattgctcgt aaaagacttt cgtcaatttg tctccttctc cgtaaattct 163200

agtgggtctt aggcaacaag tatacaattt tgctccattc atgattacgg aattattggc 163260

tttcataacc agttgctcgg ccatacgttt actttttgcg tatacatgtc ctggtgatat 163320

atcataaagg gtatgctcat ggccgatgaa tggatcaccg tgtttattgg gtcctattgc 163380

ttccatgcta ctagtataga tcaaatactt gattcctagg tccacacaag ctgccaaaat 163440

agtctgtgtt ccataatagt ttactttcat gatttcatta tcggtgtatt ttccaaatac 163500

atccactaga gcagccgtat gaataatcag atttacccca tctagcgctt ctctcacctt 163560

atcaaagtcg tttatatcac attgtatata gtttataacc ttaactttcg aggttattgg 163620

ttgtggatct tctacaatat ctatgactct gatttcttga acatcatctg cactaattaa 163680

cagttttact atatacctgc ctagaaatcc ggcaccacca gtaaccgcgt acacggccat 163740

tgctgccact cataatatca gactacttat tctattttac taaataatgg ctgtttgtat 163800

aatagaccac gataatatca gaggagttat ttactttgaa ccagtccatg gaaaagataa 163860

agttttagga tcagttattg gattaaaatc cggaacgtat agtttaataa ttcatcgtta 163920

cggagatatt agtcaaggat gtgattccat aggcagtcca gaaatattta tcggtaacat 163980

ctttgtaaac agatatggtg tagcatatgt ttatttagat acagatgtaa atatatctac 164040

aattattgga aaggcgttat ctatttcaaa aaatgatcag agattagcgt gtggagttat 164100

tggtatttct tacataaatg aaaagataat acattttctt acaattaacg agaatggcgt 164160

ttgatatatc agttaatgcg tctaaaacaa taaatgcatt agtttacttt tctactcagc 164220

aaaataaatt agtcatacgt aatgaagtta atgatacaca ctacactgtc gaatttgata 164280

gggacaaagt agttgacacg tttatttcat ataataaaca taatgacacc atagagataa 164340

gaggggtgct tccagaggaa actaatattg gttgcgcggt taatacgccg gttagtatga 164400

cttacttgta taataagtat agttttaaac tgattttagc agaatatata agacacagaa 164460

atactatatc cagcaatatt tattcggcat tgatgacact agatgatttg gctattaaac 164520

agtatggaga cattgatcta ttatttaatg agaaacttaa agtagactcc gattcgggac 164580

tatttgactt tgtcaacttt gtaaaggata tgatatgttg tgattctaga atagtagtag 164640

ctctatctag tctagtatct aaacattggg aattgacaaa taaaaagtat aggtgtatgg 164700

cattagccga acatatatct gatagtattc caatatctga gctatctaga ctacgataca 164760

atctatgtaa gtatctacgc gggcacactg agagcataga ggatgaattt gattattttg 164820

aagacgatga ttcgtctaca tgttctgccg taaccgacag ggaaacggat gtataatttt 164880

ttttatagcg tgaaggatat gataaaaaat ataattgttg tatttatccc attccaatca 164940

ccttatatga ttctgtaaca caataaagga gtctcataga tgtatagagg tcagatactg 165000

gtttgataaa ctgtttattc cacataagta tgtttgactt tatggttaga cccgcatact 165060

ttaacaaatc actgaaaatt ggagttaggt attgacctct cagaatcagt tgccgttctg 165120

gaacattaaa tgtatttttt atgatatact ccaacgcatt tatgtgggca tacaacaagt 165180

cattactaat ggagtattcc aagagtttta gttgtctagt atttaacaag agaagagatt 165240

tcaacagact gtttatgaac tcgaatgccg cctcattgtc gcttatattg atgatgtcga 165300

attctcccaa tatcatcacc gatgagtagc tcatcttgtt atcgggatcc aagttttcta 165360

aagatgtcat taaaccctcg atcatgaatg gatttatcat catcgttttt atgttggaca 165420

tgagcttagt ccgtttgtcc acatctatag acgacgattt ctgaattatt tcatatatcc 165480

ctctctttaa ctccaggaac ttgtcaggat ggtctacttt aatatgttct cgtctaagag 165540

atgaaaatct ttggatggtc gcatgtgact tttctctaaa ggatgacgtt gcccaagatc 165600

ctctcttaaa tgaatccatc ttatccttgg acaagatgga cagtctattt tccttagatg 165660

gtttaatatt tttgttaccc atgatctata aaggtagacc taatcgtctc ggatgaccta 165720

tatatttatt ttcagtttta ttatacgcat aaattgtaaa aaatatgtta ggtttacaaa 165780

aatgtctcgt ggggcattaa tcgtttttga aggattggac aaatctggaa aaacaacaca 165840

atgtatgaac atcatggaat caatactttc aaacacaata aaatacctta actttcctca 165900

gagatccact gtcactggaa agatgataga tgactatcta actcgtaaaa aaacctataa 165960

tgatcatata gttaatctat tattttgtgc aaatagatgg gagtttgcat cttttataca 166020

agaacaacta gaacagggaa ttactttaat agttgataga tacgcatttt ctggagtagc 166080

gtatgccgcc gctaaaggcg cgtcaatgac tctcagtaag agttatgaat ctggattgcc 166140

taaacccgac ttagttatat tcttggaatc tggtagcaaa gaaattaata gaaacgtcgg 166200

cgaggaaatt tatgaagatg ttacattcca acaaaaggta ttacaagaat ataaaaaaat 166260

gattgaagaa ggagatattc attggcaaat tatttcttct gaattcgagg aagatgtaaa 166320

gaaggagttg attaagaata tagttataga ggctatacac acggttactg gaccagtggg 166380

gcaactgtgg atgtaatagt gaaattacat tttttataaa tagatgttag tacagtgtta 166440

taaatggatg aagcatatta ctctggcaac ttggaatcag tactcggata cgtgtccgat 166500

atgcataccg aactcgcatc aatatctcaa ttagttattg ccaagataga aactatagat 166560

aatgatatat taaacaagga cattgtaaat tttatcatgt gtagatcaaa cttggataat 166620

ccatttatct ctttcctaga tactgtatat actattatag atcaagagaa ctatcagact 166680

gagttgatta attcattaga cgacaatgaa attatcgatt gtatagttaa taagtttatg 166740

agcttttata aggataacct agaaaatata gtagatgcta tcattactct aaaatatata 166800

atgaataatc cagattttaa aactacgtat gccgaagtac tcggttccag aatagccgat 166860

atagatatta aacaagtgat acgtaagaat atactacaat tgtctaatga tatccgcgaa 166920

cgatatttgt gaaaaatatt aaaaaaaaat acttttttta ttaaatgacg tcgcttcgcg 166980

aatttagaaa attatgctgt gatatatatc acgcatcagg atataaagaa aaatctaaat 167040

taattagaga ctttataaca gatagggatg ataaatattt gatcattaag ctattgcttc 167100

ccggattaga cgatagaatt tataacatga acgataaaca aattataaaa ttatatagta 167160

taatatttaa acaatctcag gaagatatgc tacaagattt aggatacgga tatataggag 167220

acactattag gactttcttc aaagagaaca cagaaatccg tccacgagat aaaagcattt 167280

taactttaga agaagtggat agtttcttaa ctacgttatc atccgtaact aaagaattgc 167340

atcaaataaa attattgact gatatcgcat ccgtttgtac atgtaatgat ttaaaatgtg 167400

tagtcatgct tattgataaa gatctaaaaa ttaaagcggg tcctcggtac gtacttaacg 167460

ctattagtcc tcatgcctat gatgtgttta gaaaatctaa taacttgaaa gagataatag 167520

aaaattcatc taaacaaaat ctagactcta tatctatttc tgttatgact ccaattaatc 167580

ccatgttagc ggaatcgtgt gattctgtca ataaagcgtt taaaaaattt ccatcaggaa 167640

tgtttgcgga agtcaaatac gatggtgaaa gagtacaagt tcataaaaat aataacgagt 167700

ttgccttctt tagtagaaac atgaaaccag tactctctca taaagtggat tatctcaaag 167760

aatacatacc gaaagcattt aaaaaagcta cgtctatcgt attggattct gaaattgttc 167820

ttgtagacga acataatgta ccgctaccgt ttggaagttt aggaatacac aaaaagaaag 167880

aatataaaaa ctctaacatg tgtttgttcg tgtttgactg tttgtacttt gatggattcg 167940

atatgacgga cattccattg tacgaacgaa gatcttttct caaagatgtt atggttgaaa 168000

tacccaatag aatagtattc tcagagttga cgaatattag taacgagtct cagttaactg 168060

acgtattgga tgatgcacta acgagaaaat tagaaggatt ggtcttaaaa gatattaatg 168120

gagtatacga accgggaaag agaagatggt taaaaataaa gcgagactat ttgaacgagg 168180

gttccatggc agattctgcc gatttagtag tactaggtgc ttactatggt aaaggagcaa 168240

agggtggtat catggcagtc tttctaatgg gttgttacga cgatgaatcc ggtaaatgga 168300

agacggttac caagtgttca ggacacgatg ataatacgtt aagggagttg caagaccaat 168360

taaagatgat taaaattaac aaggatccca aaaaaattcc agagtggtta gtagttaata 168420

aaatctatat tcccgatttt gtagtagagg atccgaaaca atctcagata tgggaaattt 168480

caggagcaga gtttacatct tccaagtccc ataccgcaaa tggaatatcc attagatttc 168540

ctagatttac taggataaga gaggataaaa cgtggaaaga atctactcat ctaaacgatt 168600

tagtaaactt gactaaatct taatagttac atacaaacta aaaattaaaa taacactatt 168660

tagttggtgg tcgccatgga tggtgttatt gtatactgtc taaacgcgct agtaaaacat 168720

ggcgaggaaa taaatcatat aaaaaatgat ttcatgatta aaccatgttg tgaaagagtt 168780

tgtgaaaaag tcaagaacgt tcacatcggc ggacaatcta aaaacaatac agtgattgca 168840

gatttgccat atctggataa tgctgtatcc gatgtatgca aatcgatata tatatagtat 168900

caagaatatc cagatttgct aatttgataa agatagatga cgatgacaag actcctactg 168960

gtgtatataa ttattttaaa cttaaagatg ccattcctgt tattatatct ataggaaagg 169020

ataaagatgt ctgtgaacta ttaatctcat cagacatatc gtgtgcatgc gtggagttaa 169080

attcatatca cgtagccatt cttcccatgg atgtttcctt ttttaccaaa ggaaatgcat 169140

cattgattat tctcctgttt gatttctcta tcgatgcggc acctctctta agaagtgtaa 169200

ccgataataa tgttattata tctagacacc agcgtctaca tgacgagctt ccgagttcca 169260

attggttcaa gttttacata agtataaagt ccgactattg ttctatatta tatatggttg 169320

ttgatggatc tgtgatgcat gcgatagctg ataatagaac tcacgcaatt attagcaaaa 169380

atatattaga caatactacg attaacgatg agtgtagatg ctgttatttt gaaccacaga 169440

ttaggattct tgatagagat gagatgctca atggatcatc gtgtgatatg aacagacatt 169500

gtattatgat gaatttacct gatgtaggcg aatttggatc tagtatgttg gggaaatatg 169560

aacctgacat gattaagatt gctctttcgg tggctggtaa tttaataaga aatcgagact 169620

acattcccgg gagacgagga tatagctact acgtttacgg tatagcctct agataatttt 169680

tttaagcacg aaataaaaaa cataatttta aaccaatcta tttcatacta ttttgtgtga 169740

tcaccatgga cataaagata gatattagta tttctggtga taaatttacg gtgactacta 169800

ggagggaaaa tgaagaaaga aaaaaatatc tacctctcca aaaagaaaaa actactgatg 169860

ttatcaaacc tgattatctt gagtacgatg acttgttaga tagagatgag atgtttacta 169920

ttctagagga atattttatg tacagaggtc tattaggcct cagaataaaa tatggacgac 169980

tctttaacga aattaaaaaa ttcgacaatg atgcggaaga acaattcggt actatagaag 170040

aactcaagca gaaacttaga ttaaattctg aagagggagc agataacttt atagattata 170100

taaaggtaca aaaacaggat atcgtcaaac ttactgtata cgattgcata tctatgatag 170160

gattgtgtgc atgcgtggta gatgtttgga gaaatgagaa actgttttct agatggaaat 170220

attgtttacg agcgattaaa ctgtttattg atgatcacat gcttgataag ataaaatcta 170280

tactgcagaa tagactagtg tatgtggaaa tgtcatagaa agttaatgag agcaaaaata 170340

tataaggttg tattccatat ttgttatttt tttctgtaat agttagaaaa atacattcga 170400

tggtctatct atcagattat tatgtgttat aaggtacttt ttctcataat aaactagagt 170460

atgagtaaga tagtgttttt caaaacatat aaatctaaaa ttgatggatg agatatacag 170520

ctattaattt cgaaaatata ttttaatctg ataactttaa acatggattt ttgatggtgg 170580

tttaacgttt taaaaaaaga ttttgttatt gtagtatatg ataatattaa aagatggata 170640

taaagaattt gctgactgta tgtactattt tttacattac tacattggct acggcagata 170700

tacctactcc gccaccaacg gggcatgtga cgagggagaa tatcttgata agaggcataa 170760

tcaatgttgt aatcggtgtc cacctggaga atttgccaag gtcagatgta gtggtagtga 170820

taacacaaaa tgtgaacgct gcccacctca tacatatacc gcaatcccca attactctaa 170880

tggatgtcat caatgtagaa aatgcccaac aggatcattt gataaggtaa agtgtaccgg 170940

aacacagaac agtaaatgtt cgtgtcttcc tggttggtat tgcgctactg attcttcaca 171000

gactgaagat tgtcgagatt gtataccaaa aaggagatgt ccatgcggat actttggtgg 171060

aatagatgaa caaggaaatc ctatttgtaa atcgtgttgt gttggtgaat attgcgacta 171120

cctacgtaat tatagacttg atccatttcc tccatgcaaa ctatctaaat gtaattaatt 171180

atgattttga tgataatgtt accatacatt atatcgctac ttggttagtg tattattcag 171240

tatgaagacc tattaataat tacttatctt ttgacgatct tgttataatt ataatataaa 171300

aacttatggc atagtaactt ataattgctg acgcgataaa ttcgtaataa tctgttttgt 171360

tcaaaggaat ctacaggcat aaaaataaaa atataattta taatatactc ttacagcgcg 171420

ccatcatgaa taacagcagt gaattgattg ctgttattaa tggatttaga aatagtggac 171480

gattttgtga tattagtata gttattaatg atgaaaggat aaacgctcat aaactcatcc 171540

tatctggagc ctccgaatat ttttccattc tgttttccaa taattttatc gattctaatg 171600

aatacgaagt taatctaagt catttagatt atcaaagtgt taacgatttg atcgattata 171660

tttatgggat acctttgagc ctaactaacg ataacgtgaa atatattctt tcaaccgctg 171720

attttttaca aattggatct gccattactg agtgcgaaaa atacatactt aaaaatcttt 171780

gttctagaaa ctgtatcgat ttctacatat acgctgataa atataataac aagaaaatag 171840

aatcagcgtc gtttaacaca atattacaaa atattttgag actcatcaac gatgaaaact 171900

ttaaatactt aacagaggaa tcaatgataa aaattttaag cgatgatatg ttaaatataa 171960

aaaatgagga tttcgcccca ctaattctca ttaaatggtt agagagtact caacaatcat 172020

gcaccgtcga gttacttaga tgcctcagaa tatcattgct ttccccacaa gttataaaat 172080

cactttatag tcatcgactg gttagttcaa tctacgaatg tataacattc ttaaacaata 172140

tagcattctt ggatgaatca tttcctagat accatagcat cgagttgata tctatcggta 172200

taagtaattc gcatgataag atttccataa actgctacaa tcataaaaaa aatacatggg 172260

aaatgatatc ttcacgtaga tataggtgta gtttcgcagt ggccgtcctg gataatatta 172320

tttatatgat gggtggatat gatcagtccc cgtatagaag ttcaaaggtt atagcgtaca 172380

atacatgtac aaattcttgg atatatgata taccagagct aaaatatcct cgttctaatt 172440

gtgggggact ggctgatgac gaatacattt attgtatagg cggcatacgc gatcaggatt 172500

catcgttgac atctagtatt gatagatgga agccatcaaa accatattgg cagaagtatg 172560

ctaaaatgcg cgaaccaaaa tgtgatatgg gggttgcgat gttaaacgga ttaatatatg 172620

tcatgggtgg aatcgttaaa ggtgacacgt gtaccgacgc actagagagt ttatcagaag 172680

atggatggat gaagcatcaa cgtcttccaa taaaaatgtc caatatgtcg acgattgttc 172740

atgatggcaa gatttatata tctggaggtt acaacaatag tagtgtagtt aatgtaatat 172800

cgaatctagt ccttagctat aattcgatat atgatgaatg gaccaaatta tcatcattaa 172860

acattcctag aattaatccc gctctatggt cagcgcataa taaattatat gtaggaggag 172920

gaatatctga tgatgttcga actaatacat ctgagacata cgacaaagaa aaagattgtt 172980

ggacattgga taatggtcac gtgttaccac gcaattatat aatgtataaa tgcgaaccga 173040

ttaaacataa atatccattg gaaaaaacac agtacacgaa tgattttcta aagtatttgg 173100

aaagttttat aggtagttga tagaacaaaa tacataattt tgtaaaaata aatcactttt 173160

tatactaata tgacacgatt accaatactt ttgttactaa tatcattagt atacgctaca 173220

ccttctcctc agacatctaa aaaaataggt gatgatgcaa ctctatcatg taatcgaaat 173280

aatacaaatg actacgttgt tatgagtgct tggtataagg agcccaattc cattattctt 173340

ttagctgcta aaagcgacgt cttgtatttt gataattata ccaaggataa aatatcttac 173400

gactctccat acgatgatct agttacaact atcacaatta aatcattgac tgctagagat 173460

gccggtactt atgtatgtgc attctttatg acatcgccta caaatgacac tgataaagta 173520

gattatgaag aatactccac agagttgatt gtaaatacag atagtgaatc gactatagac 173580

ataatactat ctggatctac acattcaccg gaaactagtt ctgagaaacc tgattatata 173640

gataattcta attgctcgtc ggtattcgaa atcgcgactc cggaaccaat tactgataat 173700

gtagaagatc atacagacac cgtcacatac actagtgata gcattaatac agtaagtgca 173760

tcatctggag aatccacaac agacgagact ccggaaccaa ttactgataa agaagaagat 173820

catacagtca cagacactgt ctcatacact acagtaagta catcatctgg aattgtcact 173880

actaaatcaa ccaccgatga tacgtacaat gataatgata cagtaccacc aactactgta 173940

ggcggtagta caacctctat tagcaattat aaaaccaagg actttgtaga aatatttggt 174000

attaccgcat taattatatt gtcggccgtg gcaatattct gtattacgta ttatatatgt 174060

aataaacgtt cacgtaaata caaaacagag aacaaagtct agatttttga cttacataaa 174120

tgtctgggat agtaaaatct atcatattga gcggaccatc tggtttagga aagacagcca 174180

tagccaaaag actatgggaa tatatttgga tttgtggtgt cccataccac tagatttcct 174240

cgtcctatgg aacgagaagg tgtcgattac cattacgtta acagagaggc catctggaag 174300

ggaatagccg ccggaaactt tctagaacat actgagtttt taggaaatat ttacggaact 174360

tctaaaactg ctgtgaatac agcggctatt aataatcgta tttgtgtgat ggatctaaac 174420

atcgatggcg ttagaagtct taaaaatacg tacctaatgc cttactcggt gtatataaga 174480

cctacctctc ttaaaatggt tgagaccaag cttcgtcgta gaaacactga agcggatgat 174540

gagattcatc gtcgtgtgat gttggcaaaa actgacatgg atgaggcagg tgaagccggt 174600

ctattcgaca ctattattat tgaagatgat gtgaatttag catatagtaa gttaattcag 174660

atactacagg accgtattag aatgtatttt aacactaatt agagacttaa gacttaaaac 174720

ttgataatta ataatataac tcgtttttat atgtgtctat ttcaacgtct aatgtattag 174780

ttaaatatta aaacttacca cgtaaaactt aaaatttaaa atgatatttc attgacagat 174840

agatcacaca ttatgaactt tcaaggactt gtgttaactg acaattgcaa aaatcaatgg 174900

gtcgttggac cattaatagg aaaaggtgga ttcggtagta tttatactac taatgacaat 174960

aattatgtag taaaaataga gcccaaagct aacggatcat tatttaccga acaggcattt 175020

tatactagag tacttaaacc atccgttatc gaagaatgga aaaaatctca caatataaag 175080

cacgtaggtc ttatcacgtg caaggcattt ggtctataca aatccattaa tgtggaatat 175140

cgattcttgg taattaatag attaggtgca gatctagatg cggtgatcag agccaataat 175200

aatagattac caaaaaggtc ggtgatgttg atcggaatcg aaatcttaaa taccatacaa 175260

tttatgcacg agcaaggata ttctcacgga gatattaaag cgagtaatat agtcttggat 175320

caaatagata agaataaatt atatctagtg gattacggat tggtttctaa attcatgtct 175380

aatggcgaac atgttccatt tataagaaat ccaaataaaa tggataacgg tactctagaa 175440

tttacaccta tagattcgca taaaggatac gttgtatcta gacgtggaga tctagaaaca 175500

cttggatatt gtatgattag atggttggga ggtatcttgc catggactaa gatatctgaa 175560

acaaagaatt gtgcattagt aagtgccaca aaacagaaat atgttaacaa tactgcgact 175620

ttgttaatga ccagtttgca atatgaacct agagaattgc tgcaatatat taccatggta 175680

aactctttga catattttga ggaacccaat tacgacaagt ttcggcacat attaatgcag 175740

ggtgtatatt attaagtgtg gtgtttggtc gatgtaaaat ttttgtcgat aaaaattaaa 175800

aaataactta atttattatt gatctcgtgt gtacaaccga aatcatggcg atgttttacg 175860

cacacgctct cggtgggtac gacgagaatc ttcatgcctt tcctggaata tcatcgactg 175920

ttgccaatga tgtcaggaaa tattctgttg tgttagttta taataacaag tatgacattg 175980

taaaagacaa atatatgtgg tgttacagtc aggtgaacaa gagatatatt ggagcactgc 176040

tgcctatgtt tgagtgcaat gaatatctac aaattggaga tccgatccat gatcaagaag 176100

gaaatcaaat ctctatcatc acatatcgcc acaaaaacta ctatgctcta agcggaatcg 176160

ggtacgagag tctagacttg tgtttggaag gagtagggat tcatcatcac gtacttgaaa 176220

caggaaacgc tgtatatgga aaagttcaac atgattattc tactatcaaa gagaaggcca 176280

aagaaatgag tacacttagt ccaggaccta tcatcgatta ccacgtctgg ataggagatt 176340

gtatctgtca agttactgct gtggacgtac atggaaagga aattatgaga atgagattca 176400

aaaagggtgc ggtgcttccg atcccaaatc tggtaaaagt taaacttggg gagaatgata 176460

cagaaaatct ttcttctact atatcggcgg caccatcgag gtaaccacct ctctggaaga 176520

cagcgtgaat aatgtactca tgaaacgttt ggaaactata cgccatatgt ggtctgtcgt 176580

atatgatcat tttgatattg tgaatggtaa agaatgctgt tatgtgcata cgcatttgtc 176640

taatcaaaat cctataccga gtactgtaaa aacaaatttg tacatgaaga ctatgggatc 176700

atgcattcaa atggattcca tggaatctct agagtatctt agcgaactga aggaatcagg 176760

tggatggagt cccagaccag aaatgcagga atttgaatat ccagatggag tggaagacac 176820

tgaatcaatt gagagattgg tagaggagtt cttcaataga tcagaacttc aggctggtga 176880

atcagtcaaa tttggtaatt ctattaattg ttaaacatac atctgtttca gctaagcaac 176940

taagaacacg tatacggcag cagcttcctt tatactctca tcttttacca acacaaaggg 177000

tggatatttg ttcattggag ttgataataa tacacacaaa gtatttggat tcacggtggg 177060

ttacgactac ctcagactga tagagaatga tatagaaaag catatcaaaa gactttgtgt 177120

tgtgtatttc tgtgagaaga aagaggacat caagtacgcg tgtcgattca tcaaggtata 177180

taaacctggg gatgagacta ccttgacata cgtgtgcgct atcaaagtgg aaagatgctg 177240

ttgtgctgtg tttgcagatt ggccagaatc atggtatatg gatactaatg gtatcaagaa 177300

gtattctcca gatgaatggg tgtcacatat aaaattttaa ttaatgtaat agagaacaaa 177360

taataaggtt gtaatatcat atagacaata actaacaatt aattagtaac tgttatctct 177420

tttttaacta accaactaac tatataccta ttaatacatc gtaattatag ttcttaacat 177480

ctattaatca ttaattcgct tctttaattt tttataaact aacattgtta attgaaaagg 177540

gataacatgt tacagaatat aaattatata tggatttttt taaaaaggaa atacttgact 177600

ggagtatata tttatctctt cattatatag cacgcgtgtt ttccaatttt tccacatccc 177660

atataataca ggattataat ctcgttcgaa catacgagaa agtggataaa acaatagttg 177720

attttttatc taggttgcca aatttattcc atattttaga atatggggaa aatattctac 177780

atatttattc tatggatgat gctaatacga atattataat tttttttcta gatagagtat 177840

taaatattaa taagaacggg tcatttatac acaatctcgg gttatcatca tccattaata 177900

taaaagaata tgtatatcaa ttagttaata atgatcatcc agataatagg ataagactaa 177960

tgcttgaaaa tggacgtaga acaagacatt ttttgtccta tatatcagat acagttaata 178020

tctatatatg tattttaata aatcatggat tttatataga tgccgaagac agttacggtt 178080

gtacattatt acatagatgt atatatcact ataagaaatc agaatcagaa tcatacaatg 178140

aattaattaa gatattgtta aataatggat ccgatgtaga taaaaaagat acgtacggaa 178200

acacaccttt tatcctatta tgtaaacacg atatcaacaa cgtggaattg tttgagatat 178260

gtttagagaa tgctaatata gactctgtag actttaatag atatacacct cttcattatg 178320

tctcatgtcg taataaatat gattttgtaa agttattaat ttctaaagga gcaaatgtta 178380

atgcgcgtaa tagattcgga actactccat tttattgtgg aattatacac ggtatctcgc 178440

ttataaaact atatttggaa tcagacacag agttagaaat agataatgaa catatagttc 178500

gtcatttaat aatttttgat gctgttgaat ctttagatta tctattatcc agaggagtta 178560

ttgatattaa ctatcgtact atatacaacg aaacatctat ttacgacgct gtcagttata 178620

atgcgtataa tacgttggtc tatctattaa acaaaaatgg tgattttgag acgattacta 178680

ctagtggatg tacatgtatt tcggaagcag tcgcaaacaa caacaaaata ataatggaag 178740

tactattgtc taaacgacca tctttgaaaa ttatgataca gtctatgata gcaattacta 178800

aacataaaca gcataatgca gatttattga aaatgtgtat aaaatatact gcgtgtatga 178860

ccgattatga tactcttata gatgtacagt cgctacagca atataaatgg tatattttaa 178920

gatgtttcga tgaaatagat atcatgaaga gatgttatat aaaaaataaa actgtattcc 178980

aattagtttt ttgtatcaaa gacattaata ctttaatgag atacggtaaa catccttctt 179040

tcgtgaagtg cactagtctc gacgtatacg gaagtcgtgt acgtaatatc atagcatcta 179100

ttagatatcg tcagagatta attagtctat tatccaagaa gctggatgcg ggagataaat 179160

ggtcgtgttt tcctaacgaa ataaaatata aaatattgga aaactttaac gataacgaac 179220

tatccacata tctaaaaatc ttataaacat tattaaaata taaaatctaa gtggataaaa 179280

tcacactaca tcattgtttc cttttagtgc tcgacagtgt atactatttt taacgctcat 179340

aaataaaaat gaaaacgatt tccgttgtta cgttgttatg cgtactacct gctgttgttt 179400

attcaacatg tactgtaccc actatgaata acgctaaatt aacgtctacc gaaacatcgt 179460

ttaatgataa acagaaagtt acatttacat gtgatcaggg atatcattct ttggatccaa 179520

atgctgtctg tgaaacagat aaatggaaat acgaaaatcc atgcaagaaa atgtgcacag 179580

tttctgatta tgtctctgaa ttatatgata agccattata cgaagtgaat tccaccatga 179640

cactaagttg caacggcgaa acaaaatatt ttcgttgcga agaaaaaaat ggaaatactt 179700

cttggaatga tactgttacg tgtcctaatg cggaatgtca acctcttcaa ttagaacacg 179760

gatcgtgtca accagttaaa gaaaaatact catttgggga atatatgact atcaactgtg 179820

atgttggata tgaggttatt ggtgcttcgt acataagttg tacagctaat tcttggaatg 179880

ttattccatc atgtcaacaa aaatgtgata tgccgtctct atctaacgga ttaatttccg 179940

gatctacatt ttctatcggt ggcgttatac atcttagttg taaaagtggt tttacactaa 180000

cggggtctcc atcatccaca tgtatcgacg gtaaatggaa tcccatactc ccaacatgtg 180060

tacgatctaa cgaaaaattt gatccagtgg atgatggtcc cgacgatgag acagatttga 180120

gcaaactctc gaaagacgtt gtacaatatg aacaagaaat agaatcgtta gaagcaactt 180180

atcatataat catagtggcg ttaacaatta tgggcgtcat atttttaatc tccgttatag 180240

tattagtttg ttcctgtgac aaaaataatg accaatataa gttccataaa ttgctaccgt 180300

aaatataaat ccgttaaaat aattaataat taataacgaa caagtatcaa aagattaaag 180360

acttatagct agaatcaatt gagatgtctt cttcagtgga tgttgatatc tacgatgccg 180420

ttagagcatt tttactcagg cactattata acaagagatt tattgtgtat ggaagaagta 180480

acgccatatt acataatata tacaggctat ttacaagatg cgccgttata ccgttcgatg 180540

atatagtacg tactatgcca aatgaatcac gtgttaaaca atgggtgatg gatacactta 180600

atggtataat gatgaatgaa cgcgatgttt ctgtaagcgt tggcaccgga atactattca 180660

tggaaatgtt tttcgattac aataaaaata gtatcaacaa tcaactaatg tatgatataa 180720

ttaatagcgt atctataatt ctagctaatg agagatatag aagcgctttt aacgacgatg 180780

gtatatacat ccgtagaaat atgattaaca agttgtacgg atacgcatct ctaactacta 180840

ttggcacgat cgctggaggt gtttgttatt atctgttgat gcatctagtt agtttgtata 180900

aataattatt tcaatatact agttaaaatt ttaagatttt aaatgtataa aaaactaata 180960

acgtttttat ttgtaatagg tgcattagca tcctattcga ataatgagta cactccgttt 181020

aataaactga gtgtaaaact ctatatagat ggagtagata atatagaaaa ttcatatact 181080

gatgataata atgaattggt gttaaatttt aaagagtaca caatttctat tattacagag 181140

tcatgcgacg tcggatttga ttccatagat ataaatgtta taaacgacta taaaattatt 181200

gatatgtata ccattgactc gtctactatt caacgcagag gtcacacgtg tagaatatct 181260

accaaattat catgccatta tgataagtac ccttatattc acaaatatga tggtgatgag 181320

cgacaatatt ctattactgc agagggaaaa tgctataaag gaataaaata tgaaataagt 181380

atgatcaacg atgatactct attgagaaaa catactctta aaattggatc tacttatata 181440

tttgatcgtc atggacatag taatacatat tattcaaaat atgattttta aaaatttaaa 181500

atatattatc acttcagtga cagtagtcaa ataacaaaca acaccatgag atatattata 181560

attctcgcag ttttgttcat taatagtata catgctaaaa taactagtta taagtttgaa 181620

tccgtcaatt ttgattccaa aattgaatgg actggggatg gtctatacaa tatatccctt 181680

aaaaattatg gcatcaagac gtggcaaaca atgtatacaa atgtaccaga aggaacatac 181740

gacatatccg catttccaaa gaatgatttc gtatctttct gggttaaatt tgaacaaggc 181800

gattataaag tggaagagta ttgtacggga ctatgcgtcg aagtaaaaat tggaccaccg 181860

actgtaacat tgactgaata cgacgaccat atcaatttgt acatcgagca tccgtatgct 181920

actagaggta gcaaaaagat tcctatttac aaacgcggtg acatgtgtga tatctacttg 181980

ttgtatacgg ctaacttcac attcggagat tctaaagaac cagtaccata tgatatcgat 182040

gactacgatt gcacgtctac aggttgcagc atagactttg tcacaacaga aaaagtgtgc 182100

gtgacagcac agggagccac agaagggttt ctcgaaaaaa ttactccatg gagttcgaaa 182160

gtatgtctga cacctaaaaa gagtgtatat acatgcgcaa ttagatccaa agaagatgtt 182220

cccaatttca aggacaaaat ggccagagtt atcaagagaa aatttaatac acagtctcaa 182280

tcttatttaa ctaaatttct cggtagcaca tcaaatgatg ttaccacttt tcttagcatg 182340

cttaacttga ctaaatattc ataactaatt tttattaatg atacaaaaac gaaataaaac 182400

tgcatattat acactggtta acgcccttat aggctctaac cattttcaag atgaggtccc 182460

tgattatagt ccttctgttc ccctctatca tctactccat gtctattaga caatgtgaga 182520

aaactgaaga ggaaacatgg ggattgaaaa tagggttgtg tataattgcc aaagatttct 182580

atcccgaaag aactgattgc agtgttcatc tcccaactgc aagtgaagga ttgataactg 182640

aaggcaatgg attcagggat atacgaaaca ccgataaatt ataaaaaaag caatgtgtcc 182700

gctgtttccg ttaataatac tatttttgta actggcggat tattcataaa taactctaat 182760

agcacgatcg tggttaacaa tatggaaaaa cttgacattt ataaagacaa acaatggtcg 182820

attatagaaa tgcctatggc tagggtatat cacggcatcg actcgacatt tggaatgtta 182880

tattttgccg gaggtctatc cgttaccgaa caatatggta atttagagaa aaacaacgag 182940

atatcttgtt acaatcctag aacgaataag tggtttgata tttcatatac tatttataag 183000

atatccatat catcattgtg taaactaaat aacgtcttct atgtatttag taaggacatt 183060

ggatatgtgg aaaagtatga tggtgcatgg aagttagtac atgatcgtct ccccgctata 183120

aaggcattat caacttctcc ttattgattg aaaatgaaaa tataaatagt ttttatgtat 183180

agcagtatta ccctatagtt ttattgctta ctactaacat ggatacagat gttacaaatg 183240

tagaagatat cataaatgaa atagatagag agaaagaaga aatactaaaa aatgtagaaa 183300

ttgaaaataa taaaaacatt aacaagaatc atccaagtgg atatattaga gaagcactcg 183360

ttattaatac cagtagtaat agtgattcca ttgataaaga agttatagaa tgtatctgtc 183420

acgatgtagg aatatagatc atatctacta atttttataa tcgatacaaa acataaaaaa 183480

caactcgtta ttacatagca ggcatggaat ccttcaagta ttgttttgat aacgatggca 183540

agaaatggat tatcggaaat actttatatt ctggtaattc aatactctat aaggtcagaa 183600

aaaatttcac tagttcgttc tacaattacg taatgaagat agatcacaaa tcacacaagc 183660

cattgttgtc tgaaatacga ttctatatat ctgtattgga tcctttgact atcgacaact 183720

ggacacggga acgtggtata aagtatttgg ctattccaga tctgtatgga attggagaaa 183780

ccgatgatta tatgttcttc gttataaaga attcgggaag agtattcgcc ccaaaggata 183840

ctgaatcagt cttcgaagca tgcgtcacta tgataaacac gttagagttt atacactctc 183900

gaggatttac ccatggaaaa atagaaccga ggaatatact gattagaaat aaacgtcttt 183960

cactaattga ctattctaga actaacaaac tatacaagag tggaaactca catatagatt 184020

acaacgagga catgataact tcaggaaata tcaattatat gtgtgtagac aatcatcttg 184080

gagcaacagt ttcaagacga ggagatttag aaatgttggg atattgcatg atagaatggt 184140

tcggtggcaa acttccatgg aaaaacgaaa gtagtataaa agtaataaaa caaaaaaaag 184200

aatataaaaa atttatagct actttctttg aggactgttt tcctgaagga aatgaacctc 184260

tggaattagt tagatatata gaattagtat acacgttaga ttattctcaa actcctaatt 184320

atgacagact acgtaaactg tttatacaag attgaaatta tattcttttt ttatagagtg 184380

tggtagtgtt acggatattt aatattagac tatctctatc gcgctacacg accaatatcg 184440

attactatgg atatcttcta tgaaaggaga gaatgtattc atttctccag cgtcaatctc 184500

gtcagtattg acaatactgt attatggagc taatggatcc actgctgaac agctatcgaa 184560

atatgtagaa aaggaggaga acacggataa ggttagcgct cagaatatct cattcaaatc 184620

catgaataaa gtatatgggc gatattctgc cgtgtttaaa gattcctttt tgagaaaaat 184680

tggcgataag tttcaaactg ttgacttcac tgattgtcgc actatagatg caatcaacaa 184740

gtgtgtagat atctttactg aggggaaaat caatccacta ttggatgaac cattgtctcc 184800

tagcaattag tgccgtatac tttaaagcaa aatggttgac gccattcgaa aaggaattta 184860

ccagtgatta tcccttttac gtatcaccaa cggaaatggt agacgtaagt atgatgtcta 184920

tgtacggcga gctatttaat cacgcatctg taaaagaatc attcggcaac ttttcaatca 184980

tagaactgcc atatgttgga gatactagta tgatggtcat tcttccagac aagattgatg 185040

gattagaatc catagaacaa aatctaacag atacaaattt taagaaatgg tgtgacttta 185100

tggatgctat gtttatagat gttcacattc ccaagtttaa ggtaacaggt tcgtataatc 185160

tggtggatac tctagtaaag tcaggactga cagaggtgtt cggttcaact ggagattata 185220

gcaatatgtg taattcagat gtgagtgtcg acgctatgat ccacaaaacg tatatagatg 185280

tcaatgaaga gtatacagaa gcagctgcag caacttctgt actagtggca gactgtgcat 185340

caacagttac aaatgagttc tgtgcagatc atccgttcat ctatgtgatt aggcatgttg 185400

atggaaaaat tcttttcgtt ggtagatatt gctctccgac aactaattgt taaccatttt 185460

ttttaaaaaa aatagaaaaa acatgtggta ttagtgcagg tcgttattct tccaattgca 185520

attggtaaga tgacggccaa ctttagtacc cacgtctttt caccacagca ctgtggatgt 185580

gacagactga ccagtattga tgacgtcaaa caatgtttga ctgaatatat ttattggtcg 185640

tcctatgcat accgcaacag gcaatgcgct ggacaattgt attccacact cctctctttt 185700

agagatgatg cggaattagt gttcatcgac attcgcgagc tggtaaaaaa tatgccgtgg 185760

gatgatgtca aagattgtac agaaatcatc cgttgttata taccggatga gcaaaaaacc 185820

atcagagaga tttcggccat catcggactt tgtgcatatg ctgctactta ctggggaggt 185880

gaagaccatc ccactagtaa cagtctgaac gcattgtttg tgatgcttga gatgctaaat 185940

tacgtggatt ataacatcat attccggcgt atgaattgat gagttgtaca tcttgacatt 186000

ttctttcttc tcttctccct ttcttctctt ctcccttcct ccctcttctc cctttcccag 186060

aaacaaactt ttttacccac tataaaataa aatgagtata ctacctatta tatttcttcc 186120

tatatttttt tattcttcat tcgttcagac ttttaacgcg cctgaatgta tcgacaaagg 186180

gcaatatttt gcatcattca tggagttaga aaacgagcca gtaatcttac catgtcctca 186240

aataaatacg ctatcatccg gatataatat attagatatt ttatgggaaa aacgaggagc 186300

ggataatgat agaattatac cgatagataa tggtagcaat atgctaattc tgaacccgac 186360

acaatcagac tctggtattt atatatgcat taccacgaac gaaacctact gtgacatgat 186420

gtcgttaaat ttgacaatcg tgtctgtctc agaatcaaat atagatctta tctcgtatcc 186480

acaaatagta aatgagagat ctactggcga aatggtatgt cccaatatta atgcatttat 186540

tgctagtaac gtaaacgcag atattatatg gagcggacat cgacgcctta gaaataagag 186600

acttaaacaa cggacacctg gaattattac catagaagat gttagaaaaa atgatgctgg 186660

ttattataca tgtgttttag aatatatata cggtggcaaa acatataacg taaccagaat 186720

tgtaaaatta gaggtacggg ataaaataat accttctact atgcaattac cagatggcat 186780

tgtaacttca ataggtagta atttgactat tgcatgcaga gtatcgttga gacctcccac 186840

aacggacacc gacgtctttt ggataagtaa tggtatgtat tacgaagaag atgatgggga 186900

cggaaacggt agaataagtg tagcaaataa aatctatatg accgataaga gacgtgttat 186960

tacatcccgg ttaaacatta atcctgtcaa ggaagaagat gctacaacgt ttacgtgtat 187020

ggcgtttact attcctagca tcagcaaaac agttactgtt agtataacgt gaatgtatgt 187080

tgttacattt ccatgtcaat tgagtttata agaattttta tacattatct tccaacaaac 187140

aattgacgaa cgtattgcta tgattaactc ccacgatact atgcatatta ttaatcatta 187200

acttgcagac tatacctagt gctattttga catactcatg ttcttgtgta attgcggtat 187260

ctatattatt aaagtacgta aatctagcta tagttttatt atttaatttt agataatata 187320

ccgtctcctt atttttaaaa attgccacat cctttattaa atcatgaatg ggaatttcta 187380

tgtcatcgtt agtatattgt gaacaacaag agcagatatc tataggaaag ggtggaatgc 187440

gatacattga tctatgtagt tttaaaacac acgcaaactt tgaagaattt atataaatca 187500

ttccatcgat acatccttct atgttgagat gtatatatcc aggaattcgt ttattaatat 187560

cgggaaatgt ataaactaaa acattgcccg aaagcggtgc ctctatctgc gttatatccg 187620

ttcttaactt acaaaatgta accaatacct ttgcatgact tgttttgttc ggcaacgtta 187680

gtttaaactt gacgaatgga ttaattacaa tagcatgatc cgcgcatcta ttaagttttt 187740

ttactttaac gcccttgtat gtttttacag agactttatc taaatttcta gtgcttgtat 187800

gtgttataaa tataacggga tatagaactg aatcacctac cttagatacc caattacatt 187860

ttatcagatc cagataataa acaaattttg tcgccctaac taattctata ttgttatata 187920

ttttacaatt ggttatgata tcatgtaata acttggagtc taacgcgcat cgtcgtacgt 187980

ttatacaatt gtgatttagt gtagtatatc tacacatgta tttttccgca ctatagtatt 188040

ctggactagt gataaaacta tcgttatatc tatcttcaat gaactcatcg agatattgct 188100

ctctgtcata ttcatacacc tgcataaact ttctagacat cttacaatcc gtgttatttt 188160

aggatcatat ttacatattt acgggtatat caaagatgtt agattagtta atgggaatcg 188220

tctataataa tgaatattaa acaattatat gaggactttt accacaaagc atcataaaaa 188280

tgagtcgtcg tctgatttat gttttaaata tcaaccgcga atcaactcat aaaatacaag 188340

agaatgaaat atatacatat tttagtcatt gcaatataga ccatacttct acagaacttg 188400

attttgtagt taaaaactat gatctaaaca gacgacaaca tgtaactggg tatactgcac 188460

tacactgcta tttgtataat aattacttta caaacgatgt actgaagata ttattaaatc 188520

atggagtgga tgtaacgatg aaaaccagta gcggacgtat gcctgtttat atattgctta 188580

ctagatgttg taatatttca catgatgtag tgatagatat gatagacaaa gataaaaacc 188640

acttattaca tagagactat tccaacctat tactagagta tataaaatct cgttacatgt 188700

tattgaagga agaggatatc gatgagaaca tagtatccac tttattagat aagggaatcg 188760

atcctaactt taaacaagac ggatatacag cgttacatta ttattatttg tgtctcgcac 188820

acgtttataa accaggtgag tgtagaaaac cgataacgat aaaaaaggcc aagcgaatta 188880

tttctttgtt tatacaacat ggagctaatc taaacgcgtt agataattgt ggtaatacac 188940

cattccattt gtatcttagt attgaaatgt gtaataatat tcatatgact aaaatgctgt 189000

tgacttttaa tccgaatttc gaaatatgta ataatcatgg attaacgcct atactatgtt 189060

atataacttc cgactacata caacacgata ttcttgttat gttaatacat cactatgaaa 189120

caaatgttgg agaaatgccg atagatgagc gtcgtatgat cgtattcgag tttatcaaaa 189180

catattctac acgtccggca gattcgataa cttatttgat gaataggttt aaaaatataa 189240

atatttatac ccgctatgaa ggaaagacat tattacacgt agcatgtgaa tataataata 189300

cacaagtaat agattatctt atacgtatca acggagatat aaatgcgtta accgacaata 189360

acaaacacgc tacacaactc attatagata acaaagaaaa ttccccatat accattaatt 189420

gtttactgta tatacttaga tatattgtag ataagaatgt gataagatcg ttggtggatc 189480

aacttccatc tctacctatc tttcgtcgct tatcatacta gtcatatcct aaatgttgat 189540

catattccac caaatgattg tgaaagagat tgagattaaa tcgtctaaca aacaattagt 189600

ttttatgaca ttaacatata ataaataaat taatcattat tgacttaacg atgacgaaag 189660

ttatcatcat cttaggattc ttgattatta atacaaattc attgtctatg aaatgtgaac 189720

aaggtgtctc atattataat tcacaagaat taaagtgttg taaactatgt aagccaggaa 189780

catattcaga tcatcgatgt gataaataca gcgataccat ttgtggacat tgtccgagtg 189840

acacattcac gtcaatatat aatcgttctc cttggtgtca tagttgtaga ggtccatgtg 189900

gtactaatcg agtagaggtc acaccttgta cacctaccac aaatagaatc tgtcattgtg 189960

actcgaatag ttattgtctc cttaaagctt ctgatggtaa ctgtgttaca tgtgctccta 190020

aaacaaaatg tggtcgtggg tatggaaaga aaggagaaga tgaaatgggt aataccattt 190080

gtaagaaatg tcggaagggt acttattcag atattgtatc tgactctgat caatgtaaac 190140

caatgacaag ataagactta ctcgcatcta ctggatagac ataaaatatc ctcctcgtaa 190200

taatgaaata taaatataca ctaattatta atatcaataa caatcgagta ttaatatata 190260

ggtcattttt aaatcccttt tgggttccgt cccaaacggc gtttcggtct gcgtcgccgc 190320

catggccatg ccgagcctct ccgcgtgctc ctccatcgag gacgacttca actatggcag 190380

ctcggtggcg tctgccagcg tgcacatacg aatggcattt ctaagaaaag tctacggtat 190440

cctttgtcta caatttcttt taacaacggc aacaactgca gtatttttat actttgactg 190500

catgcggaca tttatacaag ggagtcctgt tctaatattg gcatcaatgt tcggatctat 190560

aggcttgatt ttcgcattga ctttacacag acataaacat cccctgaatc tgtacctgct 190620

ttgtggattt acactgtcgg aatctctaac gctggcctct gttgttactt tctatgatgt 190680

gcatgtcgtt atgcaagctt tcatgctgac tactgcagcg tttcttgctc tgactacata 190740

tactctacaa tcaaagagag atttcagtaa acttggagca ggattgtttg ctgctttgtg 190800

gattttaatt ttgtcaggac tcttggggat atttgtgcaa aatgagacag tgaagctggt 190860

cctgtctgct tttggggccc ttgtattctg tggattcatt atctatgaca cgcactcact 190920

aatacataag ctctcgcctg aagagtatgt gttagcctct atcaatctct acttggatat 190980

catcaatctg ttcttgcatc tgttgcagct tttggaagta tctaataaga aataaagttt 191040

aaaatagaat taataaaaac atataggtca ttttttaaac atggattgga aaccaaggta 191100

gttagttaat acacacaaga tatatttttt tcacatcatc cacccatggg taacaccaag 191160

gttgttagtt aataatatac aagatatttt ttctcactct gatccatgta aaccaaggac 191220

gagataagac actctcattc ctcatccaca accccattaa aaaatggaaa ttaaagccct 191280

ctattagcat agacggctac aggtctacca tcaggttaac cttcgtctac cttcacaatg 191340

gcctttcctt gtgcccagtt cagaccctgt cattgccacg ctactaagga ctccctgaat 191400

accgtggccg acgtcagaca ttgtctgact gaatacatcc tgtgggtttc tcatagatgg 191460

acccatagag aaagcgcagg gtctctctac aggcttctca tctctttcag aactgatgca 191520

acggagctct ttggtggtga gttgaaggat tcacttccgt gggacaattg cgtggagatc 191580

attaaatgtt tcatcagaaa tgactccatg aaaaccgccg aagaacttcg tgcaatcatt 191640

ggactttgta ctcaatcagc tatcgtctct ggaagagtct tcaacgataa gtatatcgac 191700

atactactta tgctgcgaaa gattctgaac gagaacgact atctcaccct cttggatcat 191760

atccgcactg ctaaatacta aatctccttc atgctctctc actacacttt ttatcatctt 191820

atgaggaatg attgccttta tcatttttcg tgaaatagga ataattagca ccagaatagc 191880

tatggattat tgtggtagag agtgcactat tctatgtcgt ctactggatg aagatgtgac 191940

gtacaaaaaa ataaaactag aaattgaaac gtgtcacaac ttatcaaaac atatagatag 192000

acgaggaaac aatgcgctac attgttacgt ctccaataaa tgcgatacag acattaagat 192060

tgttcggctg ttactctctc gcggagtcga gagactttgt agaaacaacg aaggattaac 192120

tccgctagga gtatacagta agcatagata cgtaaaatct cagattgtgc atctactgat 192180

atccagctat tcaaattcct ctaacgaact caagtcgaat ataaatgatt tcgatctgta 192240

ttcggataat atcgacttac gtctgctaaa atacctaatt gtggataaac ggatacgtcc 192300

gtccaagaat acgaattatg caatcaatgg tctcggattg gtggatatat acgtaacgac 192360

gcctaatccg agaccagaag tattgctatg gcttcttaaa tcagaatgtt acagcaccgg 192420

ttacgtattt cgtacctgta tgtacgacag tgatatgtgt aagaactctc ttcattacta 192480

tatatcgtct catagagaat ctcaatctct atccaaggat gtaattaaat gtttgatcga 192540

taacaatgtt tccatccatg gcagagacga aggaggatct ttacccatcc aatactactg 192600

gtcttgctca accatagata tagagattgt taaattatta ttaataaagg atgtggacac 192660

gtgtagagta tacgacgtca gccctatatt agaggcgtat tatctaaaca agcgatttag 192720

agtaacccca tataatgtag acatggaaat cgttaatctt cttattgaga gacgtcatac 192780

tcttgtcgac gtaatgcgta gtattacttc gtacgattcc agagaatata accactacat 192840

catcgataac attctaaaga gatttagaca acaggatgta caagccatgt tgataaacta 192900

cttacattac ggcgatatgg taagtatacc tatcattcaa tgcatgttgg ataacggagc 192960

aaccatggat aagacgacgg acaacaacta tcctctacac gactactttg ttaataataa 193020

tctcgtcgat gtaaacgtcg taaggtttat cgtggaaaat atggacacgc ggctgtaaat 193080

cacgtatcga acaatggccg tctatgtatg tacggtctga tattatcgag atttaataat 193140

tgcgggtatc actgttatga aaccatacta atagatgtat ttgatatact aagcaagtac 193200

atggatgata tagatatgat cgataactct actatattac gcggtcgatg tcaataatat 193260

acaatttgca aagcggttat tggaatatgg agcgagtgtt acaacatcac gctcgataat 193320

caatacggcc atccagaaaa gcagttacca aagagaaaac aaaacgagga tagttgattt 193380

attacttagc taccatccca ctctagagac tatgattgac gcatttaata gagatatacg 193440

ctatctatat cctgaaccat tattcgcctg tatcagatac gccttaatca tagatgatga 193500

ttttccttct aaagtaaagt atgatatcgc cggtcgtcat aaggaactaa agcgctatag 193560

agcagacatt aatagaatga agaatgccta catatcaggc gtctccatgt ttgatatatt 193620

atttaaacaa agcaaacgcc acagactgag atacgcaaag aatccgacat caaatggtac 193680

aaaaaagaac taacgtccat cattacagaa actgtaaaga acaatgagag gatcgactcc 193740

atagtggaca acattaatac agacgataac ttgatttcga aattacccat ggagatactt 193800

tattactcca ttaaataatt tatcatggag cgataatgtc ctgtttcatt tgtttccatg 193860

acatattaca aaatcgattc cgtccaagat gataaaaaca tttaccggca tcataaacac 193920

ggagtttatt ttatatgtct cgcataaaca ttactaaaaa aatatattgt tctgtttttc 193980

tttcacatct ttaattatga aaaagtaaat cattatgaga tggacgagat tgtacgcatc 194040

gttcgcgaca gtatgtggta catacctaac gtatttatgg acgacggtaa gaatgaaggt 194100

cacgtttctg tcaacaatgt ctgtcatatg tatttcacgt tctttgatgt gaatacatcg 194160

tctcatctgt ttaagctagt tattaaacac tgcgatctga ataaacgagg taactctcca 194220

ttacattgct atacgatgaa tacacgattt aatccatctg tattaaagat attgttacac 194280

cacggcatgc gtaactttga tagcaaggat gaccactatc aatcgataac aagatctttg 194340

atatactaac ggacaccatt gatgacttta gtaaatcatc cgatctattg ctgtgttatc 194400

ttagatataa attcaatggg agcttaaact attacgttct gtacaaagga tccgacccta 194460

attgcgccga cgaggatgaa ctcacttctc ttcattacta ctgtaaacac atatccacgt 194520

tctacgaaag caattattac aagtcaagtc acactaagat gcgagccgag aagcgattca 194580

tctacgcgat aatagattat ggagcaaaca ttaacgcggt tacacactta ccttcaacag 194640

tataccaaac atagtcctcg tgtggtgtat gctcttttat ctcgaggata cgtaataatc 194700

ttgattgtac acccatcatg gaacgattgt gcaacaggtc atattctcat aatgttactc 194760

aattggcacg aacaaaagga agaaggacaa catctacttt atctattcat aaaacataat 194820

caaggataca ctctcaatat actacggtat ctattagata ggttcgacat tcagaaagac 194880

gaatactata ataccgcctt tcaaaattgt aacaacaatg ttgcctcata catcggatac 194940

gacatcaacc ttccgactaa agacggtatt cgacttggtg tttgaaaaca gaaacatcat 195000

atacaaggcg gatgttgtga atgacatcat ccaccacaga ctgaaagtat ctctacctat 195060

gattaaatcg ttgttctaca agatgtctct ccctacgacg attactacgt aaaaaagata 195120

ctagcctact gcctattaag ggacgagtca ttcgcggaac tacatagtaa attctgttta 195180

aacgaggact ataaaagtgt atttatgaaa aatatatcat tcgataagat agattccatc 195240

atcgtgacat aagtcgcctt aaagagattc gaatctccga caccgacctg tatacggtat 195300

cacagctatc ttaaagccat acattcagac agtcacattt catttcccat gtacgacgat 195360

ctcatagaac agtgccatct atcgatggag cgtaaaagta aactcgtcga caaagcactc 195420

aataaattag agtctaccat cggtcaatct agactatcgt atttgcctcc ggaaattatg 195480

cgcaatatca tctaaacagt atgttgtacg gaaagaacca ttacaaatat tatccatgat 195540

agaaagaaaa tatctatatg attggagaag taggaaacag gaacaagacg acgattacta 195600

cattattaaa tcatgaagtc cgtattatac tcgtatatat tgtttctctc atgtataata 195660

ataaacggaa gagatatagc accgcatgca ccatccgatg gaaagtgtaa agacaacgaa 195720

tacaaacgcc ataatttgtg tccgggaaca tacgcttcca gattatgcga tagcaagact 195780

aacacacaat gtacgccgtg tggttcgggt accttcacat ctcgcaataa tcatttaccc 195840

gcttgtctaa gttgtaacgg aagacgcgat cgtgtaacac gactcacaat agaatctgtg 195900

aatgctctcc cggatattat tgtcttctca aaggatcatc cggatgcaag gcatgtgttt 195960

cccaaacaaa atgtggaata ggatacggag tatccggaga cgtcatctgt tctccgtgtg 196020

gtctcggaac atattctcac accgtctctt ccgcagataa atgcgaaccc gtacccagta 196080

atacctttaa ctatatcgat gtggaaatta atctgtatcc agttaacgac acgtcgtgta 196140

ctcggacgac cactaccggt ctcagcgaat ccatctcaac gtcggaacta actattacta 196200

tgaatcataa agactgcgat cccgtctttc gtgatggata cttctccgtc cttaataagg 196260

tagcgacttc aggtttcttt acaggagaaa ggtgtgcact ctgaatttcg agattaaatg 196320

caataacaaa gattcttcct ccaaacagtt aacgaaagca aagaatgata ctatcatgcc 196380

gcattcggag acagtaactc tagtgggcga catctatata ctatatagta ataccaatac 196440

tcaagactac gaaactgata caatctctta tcatgtgggt aatgttctcg atgtcgatag 196500

ccatatgccc ggtagttgcg atatacataa actgatcact aattccaaac ccacccactt 196560

tttatagtaa gtttttcacc cataaataat aaatacaata attaatttct cgtaaaagta 196620

gaaaatatat tctaatttat tgcacggtaa ggaagtagaa tcataaagaa cagtactcaa 196680

tcaatagcaa ttatgaaaca atatatcgta ctggcatgca tgtgcctggc ggcagctgct 196740

atgcctgcca gtcttcagca atcatcctca tcctcctcct cgtgtacgga agaagaaaac 196800

aaacatcata tgggaatcga tgttattatc aaagtcacaa agcaagacca aacaccgacc 196860

aatgataaga tttgccaatc cgtaacggaa attacagagt ccgagtcaga tccagatccc 196920

gaggtggaat cagaagatga ttccacatca gtcgaggatg tagatcctcc taccacttat 196980

tactccatca tcggtggagg tctgagaatg aactttggat tcaccaaatg tcctcagatt 197040

aaatccatct cagaatccgc tgatggaaac acagtgaatg ctagattgtc cagcgtgtcc 197100

ccaggacaag gtaaggactc tcccgcgatc actcatgaag aagctcttgc tatgatcaaa 197160

gactgtgagg tgtctatcga catcagatgt agcgaagaag agaaagacag cgacatcaag 197220

acccatccag tactcgggtc taacatctct cataagaaag tgagttacga agatatcatc 197280

ggttcaacga tcgtcgatac aaaatgtgtc aagaatctag agtttagcgt tcgtatcgga 197340

gacatgtgca aggaatcatc tgaacttgag gtcaaggatg gattcaagta tgtcgacgga 197400

tcggcatctg aaggtgcaac cgatgatact tcactcatcg attcaacaaa actcaaagcg 197460

tgtgtctgaa tcgataactc tattcatctg aaattggatg agtagggtta atcgaacgat 197520

tcaggcacac cacgaattaa aaaagtgtac cggacactat attccggttt gcaaaacaaa 197580

aatgttctta actacattca caaaaagtta cctctcgcga cttcttcttt ttctgtctca 197640

atagtgtgat acgattatga cactattcct attcctattc ctattcctat ttcctttcag 197700

ggtatcacaa aaatattaaa cctctttctg atggtctcat aaaaaaagtt ttacaaaaat 197760

atttttattc tctttctctc tttgatggtc tcataaaaaa agttttacaa aaatattttt 197820

attctctttc tctctttgat ggtctcataa aaaaagtttt acaaaaatat ttttattctc 197880

tttctctctt tgatggtctc ataaaaaaag ttttacaaaa atatttttat tctctttctc 197940

tctttgatgg tctcataaaa aaagttttac aaaaatattt ttattctctt tctctctttg 198000

atggtctcat aaaaaaagtt ttacaaaaat atttttattc tctttctctc tttgatggtc 198060

tcataaaaaa agttttacaa aaatattttt attctctttc tctctttgat ggtctcataa 198120

aaaaagtttt acaaaaatat ttttattctc tttctctctt tgatggtctc ataaaaaaag 198180

ttttacaaaa atatttttat tctctttctc tctttgatgg tctcataaaa aaagttttac 198240

aaaaatattt ttattctctt tctctctttg atggtctcat aaaaaaagtt ttacaaaaat 198300

atttttattc tctttctctc tttgatggtc tcataaaaaa agttttacaa aaatattttt 198360

attctctttc tctctttgat ggtctcataa aaaaagtttt acaaaaatat ttttattctc 198420

tttctctctt tgatggtctc ataaaaaaag ttttacaaaa atatttttat tctctttctc 198480

tctttgatgg tctcataaaa aaagttttac aaaaatattt ttattctctt tctctctttg 198540

atggtctcat aaaaaaagtt ttacaaaaat atttttattc tctttctctc tttgatggtc 198600

tcataaaaaa agttttacaa aaatattttt attctctttc tctctttgat ggtctcataa 198660

aaaaagtttt acaaaaatat ttttattctc tttctctctt tgatggtctc ataaaaaaag 198720

ttttacaaaa atatttttat tctctttctc tctttgatgg tctcataaaa aaagttttac 198780

aaaaatattt ttattctctt tctctctttg atggtctcat aaaaaaagtt ttacaaaaat 198840

atttttattc tctttctctc tttgatggtc tcataaaaaa agttttacaa aaatattttt 198900

attctctttc tctctttgat ggtctcataa aaaaagtttt acaaaaatat ttttattctc 198960

tttctctctt tgatggtctc ataaaaaaag ttttacaaaa atatttttat tctctttctc 199020

tctttgatgg tctcataaaa aaagttttac aaaaatattt ttattctctt tctctctttg 199080

atggtatcat aaaaaaagtt ttacaaaaat atttttattc tctttctctc tttgatggtc 199140

tcataaaaaa agttttacaa aaatattttt attctctttc tctctttgat ggtctcataa 199200

aaaaagtttt acaaaaatat ttttattctc tttctctctt tgatggtctc ataaaaaaag 199260

ttttacaaaa atatttttat tctctttctc tctttgatgg tctcataaaa aaagttttac 199320

aaaaatattt ttattctctt tctctctttg atggtctcat aaaaaaagtt ttacaaaaat 199380

atttttattc tctttctctc tttgatggtc tcataaaaaa agttttacaa aaatattttt 199440

attctctttc tctctttgat ggtctcataa aaaaagtttt acaaaaatat ttttattctc 199500

tttctctctt tgatggtctc ataaaaaaag ttttacaaaa atatttttat tctctttctc 199560

tctttgatgg tctcataaaa aaagttttac aaaaatattt ttattctctt tctctctttg 199620

atggtctcat aaaaaaagtt ttacaaaaat atttttattc tctttctctc tttgatggtc 199680

tcataaaaaa agttttacaa aaatattttt attctctttc tctctttgat ggtctcataa 199740

aaaaagtttt acaaaaatat ttttattctc tttctctctt tgatggtctc ataaaaaaag 199800

ttttacaaaa atatttttat tctctttctc tctttgatgg tctcataaaa aaagttttac 199860

aaaaatattt ttattctctt tctctctttg atggtctcat aaaaaaagtt ttacaaaaat 199920

atttttattc tctttctctc tttgatggtc tcataaaaaa agttttacaa aaatattttt 199980

attctctttc tctctttgat ggtctcataa aaaaagtttt acaaaaatat ttttattctc 200040

tttctctctt tgatggtctc ataaaaaaag ttttacaaaa atatttttat tctctttctc 200100

tctttgatgg tctcataaaa aaagttttac aaaaatattt ttattctctt tctctctttg 200160

atggtctcat aaaaaaagtt ttacaaaaat atttttattc tctttctctc tttgatggtc 200220

tcataaaaaa agttttacaa aaatattttt attttctttc tctctttgat ggtctcataa 200280

aaaatattaa acctctttct gatggtgtca ctaaaatatt tttattctca ttctcatttt 200340

ctctttctct cttcaatgga gtcataaaat atttttattc tctttctctc ttcgatggtc 200400

tcacaaaaat attaaacctc tttctgatgg tgtcactaaa atatttttat tctcattctc 200460

attttctctt tctctcttca atggagtcat aaaatatttt tattctcttt ctctcttcga 200520

tggtctcaca aaaatattaa acctctttct gatggagtcg taaaaaagtt ttatctcttt 200580

ctctcttcga tggtctcact aaaatatttt ttattctctt tctgatgcat caactatttc 200640

ttaaacaata acgtccaaca acatatactc gtcgagctta tcaacatccc ctatgcccat 200700

ctaggttacc agacaattgt atatcataaa ataatgttta taatttacac gttaaaatca 200760

tataataaaa cgtagatcgt ataatatttt ttggtatata aatgatctag taaaatccat 200820

gtaggggata ctgctcacat tttttctttg gtacaaaatt tcacacaagt ttttatacag 200880

acaaattctt gtccatatat tttaaaacat tgacttttgt actaagaaaa atatctagac 200940

taactatctc tttctctttc tctcttcgat ggtctcacaa aaatattaaa cctctttctg 201000

atggagtcgt aaaaaagttt tatctctttc tctcttcgat ggtctcacaa aaatattaaa 201060

cctctttctg atggagtcgt aaaaaagttt tatctctttc tctcttcgat ggtctcacaa 201120

aaatattaaa cctctttctg atggagtcgt aaaaaagttt tatctctttc tctcttcgat 201180

ggtctcacaa aaatattaaa cctctttctg atggagtcgt aaaaaagttt tatctctttc 201240

tctcttcgat ggtctcacaa aaatattaaa cctctttctg atggagtcgt aaaaaagttt 201300

tatctctttc tctcttcgat ggtctcacaa aaatattaaa cctctttctg atggagtcgt 201360

aaaaaagttt tatctctttc tctcttcgat ggtctcacaa aaatattaaa cctctttctg 201420

atggagtcgt aaaaaagttt tatctctttc tctcttcgat ggtctcacaa aaatattaaa 201480

cctctttctg atggagtcgt aaaaaagttt tatctctttc tctcttcgat ggtctcacaa 201540

aaatattaaa cctctttctg atggagtcgt aaaaaagttt tatctctttc tctcttcgat 201600

ggtctcacaa aaatattaaa cctctttctg atggagtcgt aaaaaagttt tatctctttc 201660

tctcttcgat ggtctcacaa aaatattaaa cctctttctg atggagtcgt aaaaaagttt 201720

tatctctttc tctcttcgat ggtctcacaa aaatattaaa cctctttctg atggagtcgt 201780

aaaaaagttt tatctctttc tctcttcgat ggtctcacaa aaatattaaa cctctttctg 201840

atggagtcgt aaaaaagttt tatctctttc tctcttcgat ggtctcacaa aaatattaaa 201900

cctctttctg atggagtcgt aaaaaagttt tatctctttc tctcttcgat ggtctcacaa 201960

aaatattaaa cctctttctg atggagtcgt aaaaaagttt tatctctttc tctcttcgat 202020

ggtctcacaa aaatattaaa cctctttctg atggagtcgt aaaaaagttt tatctctttc 202080

tctcttcgat ggtctcacaa aaatattaaa cctctttctg atggagtcgt aaaaaagttt 202140

tatctctttc tctcttcgat ggtctcacaa aaatattaaa cctctttctg atggagtcgt 202200

aaaaaagttt tatctctttc tccttcgatg gtctcacaaa aatattaaac ctctttctga 202260

tggagtcgta aaaaagtttt atctctttct ctcttcgatg gtctcacaaa aatattaaac 202320

ctctttctga tggagtcgta aaaaagtttt atctctttct ctcttcgatg gtctcacaaa 202380

aatattaaac ctctttctga tggtctctat aaagcgatcg atctttctta cactctagag 202440

tttcctacag tcatgggtca cacatttttt tctagacact aaataaaat 202489

<210> 22

<211> 908

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> polynucleotide comprising p7.5k promoter-DsReD

<400> 22

cctgcaggtc aattcggtag ttgcgatata cataaactga tcactaattc caaacccacc 60

cactttttat agtaagtttt tcacccataa ataataaata caataattaa tttctcgtaa 120

aagtagaaaa tatattctaa tttattgcac ggtaaggaag tagtcgaaac gaattcgccc 180

ttgcttgcaa gccaccatgg cctcctccga ggacgtcatc aaggagttca tgcgcttcaa 240

ggtgcgcatg gagggctccg tgaacggcca cgagttcgag atcgagggcg agggcgaggg 300

ccgcccctac gagggcaccc agaccgccaa gctgaaggtg accaagggcg gccccctgcc 360

cttcgcctgg gacatcctgt ccccccagtt ccagtacggc tccaaggtgt acgtgaagca 420

ccccgccgac atccccgact acaagaagct gtccttcccc gagggcttca agtgggagcg 480

cgtgatgaac ttcgaggacg gcggcgtggt gaccgtgacc caggactcct ccctgcagga 540

cggctccttc atctacaagg tgaagttcat cggcgtgaac ttcccctccg acggccccgt 600

aatgcagaag aagactatgg gctgggaggc ctccaccgag cgcctgtacc cccgcgacgg 660

cgtgctgaag ggcgagatcc acaaggccct gaagctgaag gacggcggcc actacctggt 720

ggagttcaag tccatctaca tggccaagaa gcccgtgcag ctgcccggct actactacgt 780

ggactccaag ctggacatca cctcccacaa cgaggactac accatcgtgg agcagtacga 840

gcgcgccgag ggccgccacc acctgttcct gtaggcgcgc ctataagggc gaattcgcgg 900

cctcgacg 908

<210> 23

<211> 2349

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> polynucleotide comprising mouse IL-12

<400> 23

accggtcgcc accatgtgcc ctcagaaact gaccatctca tggttcgcca ttgttctgtt 60

ggtcagtccc ctgatggcca tgtgggaact ggagaaagac gtctatgtgg tggaggtcga 120

ttggacccca gatgctcctg gagagactgt gaacctgacc tgtgatacac ctgaggagga 180

cgacattacg tggactagtg accagagaca tggggtgatt ggaagtggta agaccctgac 240

aatcacagtc aaagaattcc tggatgcagg gcagtatacg tgtcacaaag gcggcgaaac 300

gctctcccat tcccacttgc tccttcacaa gaaggagaat ggcatttggt ctacagagat 360

cctcaagaac tttaagaaca agacctttct gaagtgcgaa gcacccaact atagcggtag 420

gtttacttgc agttggctgg tacagcgaaa tatggacctc aaattcaaca tcaaaagctc 480

tagcagctct cccgattctc gtgccgtgac ctgtgggatg gcctctcttt ccgccgagaa 540

agtcaccctg gaccaaagag actacgagaa gtattcagtg agctgtcaag aagatgtgac 600

atgcccaaca gctgaggaaa cccttcccat cgaattggct ctggaagcta gacagcagaa 660

caagtacgaa aactactcca ctagcttctt catacgcgac atcatcaagc cagatcctcc 720

gaagaatctg cagatgaagc ccctgaagaa ctctcaggtc gaagttagct gggagtatcc 780

ggactcctgg tcaactccac actcctactt ttcactgaag ttcttcgtga ggatacagag 840

gaagaaggag aaaatgaaag agactgagga gggatgtaat cagaaaggag cctttctcgt 900

ggaaaagacc agtacagagg ttcaatgcaa aggcggcaat gtatgcgttc aagcgcagga 960

tcggtactac aatagcagct gttccaagtg ggcatgcgtg ccttgtcggg tacgctcatg 1020

atgcatctag ggcggccaat tccgcccctc tccctccccc ccccctaacg ttactggccg 1080

aagccgcttg gaataaggcc ggtgtgcgtt tgtctatatg tgattttcca ccatattgcc 1140

gtcttttggc aatgtgaggg cccggaaacc tggccctgtc ttcttgacga gcattcctag 1200

gggtctttcc cctctcgcca aaggaatgca aggtctgttg aatgtcgtga aggaagcagt 1260

tcctctggaa gcttcttgaa gacaaacaac gtctgtagcg accctttgca ggcagcggaa 1320

ccccccacct ggcgacaggt gcctctgcgg ccaaaagcca cgtgtataag atacacctgc 1380

aaaggcggca caaccccagt gccacgttgt gagttggata gttgtggaaa gagtcaaatg 1440

gctctcctca agcgtattca acaaggggct gaaggatgcc cagaaggtac cccattgtat 1500

gggatctgat ctggggcctc ggtgcacatg ctttacatgt gtttagtcga ggttaaaaaa 1560

acgtctaggc cccccgaacc acggggacgt ggttttcctt tgaaaaacac gatgataagc 1620

ttgccaatgg tgtcagtccc taccgcttct cctagtgcct catccagcag ctctcagtgt 1680

cgtagcagca tgtgccaatc acggtacctg ttgttccttg ctactctcgc tctgctcaac 1740

cacctgtctt tggcacgcgt gattccggtt tccggtcctg cgagatgcct gtcacagtcc 1800

cggaatctgc tgaaaaccac cgatgacatg gtcaagacag ccagagagaa gctgaagcac 1860

tacagttgca ctgcagagga tatagaccac gaagatatca cgcgagatca aaccagcaca 1920

ctgaaaacat gcttgccact cgagttgcat aagaacgagt cttgtcttgc cactagagaa 1980

acctctagca ccacaagggg cagttgtctc ccaccccaga aaacgtccct gatgatgaca 2040

ctgtgtcttg gaagcatcta tgaggacctg aagatgtacc agacagagtt tcaggccata 2100

aatgccgctc tgcagaacca caaccatcag cagattatcc tggacaaagg gatgcttgtc 2160

gccattgacg agctgatgca aagcctgaat cacaacggcg aaactctgcg acagaaacca 2220

cccgtaggag aagcagaccc ctatagggtg aagatgaagc tctgcatcct cctccatgca 2280

ttctccacta gggtggtgac catcaatcgc gttatggggt atctgagttc cgcttgagct 2340

agcgaattc 2349

183

<---

Реферат

Настоящее изобретение относится к биотехнологии, а именно к генетически рекомбинантному вирусу осповакцины, эффективному для профилактики или лечения рака. Вирус осповакцины содержит два полинуклеотида, полинуклеотид, кодирующий IL-7 и кодирующий IL-12. Вирус обладает онколитической активностью. Фармацевтическая композиция содержит вирус осповакцины и используется для профилактики или лечения рака. Вирус осповакцины вызывает полную ремиссию и приобретенный иммунитет. 5 н. и 10 з.п. ф-лы, 8 ил., 8 табл., 8 пр.

Формула

1. Вирус осповакцины, содержащий следующие полинуклеотиды (1) и (2):

(1) полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-7 (IL-7); и

(2) полинуклеотид, кодирующий интерлейкин-12 (IL-12),

причем вирус осповакцины является онколитическим в отношении раковых клеток человека.

2. Вирус осповакцины по п.1, где вирус осповакцины является дефицитным по функции фактора роста вируса осповакцины (VGF).

3. Вирус осповакцины по п.1, где вирус осповакцины является дефицитным по функции O1L.

4. Вирус осповакцины по п.1, где вирус осповакцины является дефицитным по функциям VGF и O1L.

5. Вирус осповакцины по п.1, где вирус осповакцины имеет делецию в доменах коротких консенсусных повторов (SCR) во внеклеточной области белка B5R.

6. Вирус осповакцины по п.1, где вирус осповакцины является дефицитным по функциям VGF и O1L и имеет делецию в доменах SCR во внеклеточной области белка B5R.

7. Вирус осповакцины по любому из пп.1-6, где вирус осповакцины представляет собой штамм LC16mO.

8. Фармацевтическая композиция для профилактики или лечения рака, содержащая вирус осповакцины по любому из пп.1-7 и фармацевтически приемлемый эксципиент.

9. Фармацевтическая композиция по п.8, где рак представляет собой злокачественную меланому, аденокарциному легкого, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак почки, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак молочной железы, рак пищевода, глиобластому, нейробластому, миелому, рак яичников, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, гепатоцеллюлярную карциному, мезотелиому, рак шейки матки или рак желудка.

10. Способ профилактики или лечения рака, включающий стадию введения вируса осповакцины по любому из пп.1-7 пациенту, нуждающемуся в профилактике или лечении рака.

11. Способ по п.10, где рак представляет собой злокачественную меланому, аденокарциному легкого, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак почки, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак молочной железы, рак пищевода, глиобластому, нейробластому, миелому, рак яичников, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, гепатоцеллюлярную карциному, мезотелиому, рак шейки матки или рак желудка.

12. Вирус осповакцины по любому из пп.1-7 для применения в профилактике или лечении рака.

13. Вирус осповакцины по п.12, где рак представляет собой злокачественную меланому, аденокарциному легкого, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак почки, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак молочной железы, рак пищевода, глиобластому, нейробластому, миелому, рак яичников, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, гепатоцеллюлярную карциному, мезотелиому, рак шейки матки или рак желудка.

14. Применение вируса осповакцины по любому из пп.1-7 для получения фармацевтической композиции для профилактики или лечения рака.

15. Применение по п.14, где рак представляет собой злокачественную меланому, аденокарциному легкого, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак почки, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак молочной железы, рак пищевода, глиобластому, нейробластому, миелому, рак яичников, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, гепатоцеллюлярную карциному, мезотелиому, рак шейки матки или рак желудка.

Патенты аналоги

Авторы

НАКАО Синсуке (JP)

КАВАСЕ Тацуя (JP)

НАКАМУРА Такафуми (JP)

NAKAO SHINSUKE

KAWASE TATSUYA

NAKAMURA TAKAFUMI

NAKAO Shinsuke

KAWASE Tatsuya

NAKAMURA Takafumi

Патентообладатели

ASTELLAS PHARMA INC

Astellas Pharma Inc.

Заявители

ASTELLAS PHARMA INC

Astellas Pharma Inc.

СПК: A61K35/768 A61K38/2046 A61K38/208 A61K48/005 A61P35/00 A61P35/02 A61P37/04 C07K14/5418 C07K14/5434 C12N7/00 C12N15/09 C12N15/86 C12N2710/24132 C12N2710/24143 C12N2710/24162 C12N2710/24171

Публикация: 2021-10-25

Дата подачи заявки: 2017-05-29

РОССТИП

Поиск по товарам

Добавить свой товар

Сообщества

Товары

Участники

Патенты

Запросов

Поставщикам

О сервисе

Блогерам

Помощь