Композиции и способы модуляции экспрессии рецептора фактора роста фибробластов 4 (fgfr4) - RU2501803C2
Код документа: RU2501803C2
Чертежи
Показать все 48 чертежа(ей)
Описание
Текст описания приведен в факсимильном виде.
Реферат
Изобретение относится к области молекулярной биологии. Предложен одноцепочечный модифицированный олигонуклеотид, способный ингибировать экспрессию рецептора фактора роста фибробластов 4 FGFR4, а также соответствующие композиция и способы лечения диабета, ожирения, метаболического синдрома, ингибирования экспрессии FGFR4, снижения уровня глюкозы и снижения массы тела. Изобретение может быть использовано в медицине для лечения заболеваний, обусловленных экспрессией рецептора фактора роста фибробластов 4. 7 н. и 14 з.п. ф-лы, 21 табл., 4 ил., 14 пр.
Формула
1. Одноцепочечный модифицированный олигонуклеотид, нацеленный на нуклеиновую кислоту, кодирующую фактор роста фибробластов 4 (FGFR4), и способный ингибировать экспрессию FGFR4 человека, состоящий из 12-30 связанных нуклеозидов и имеющий последовательность нуклеиновых оснований (нуклеооснований), содержащую по меньшей мере 12 непрерывных нуклеиновых оснований из последовательности нуклеиновых оснований, выбранной из последовательностей нуклеиновых оснований, представленных в SEQ ID NO:98, 21, 22, 23, 24, 28, 29, 36, 38, 39, 43, 48, 51, 54, 55, 56, 58, 59, 60, 63, 64, 65, 66, 92, 93, 96, 99, 101, 102,103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 140, 141, 142, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 155, 157, 159, 160, 163, 166 и 166, причем олигонуклеотид содержит по меньшей мере одну фосфоротиоатную межнуклеозидную связь, и/или по меньшей мере один нуклеозид содержит модифицированный сахар, и/или по меньшей мере один нуклеозид содержит модифицированное нуклеооснование.
2. Олигонуклеотид по п.1, отличающийся тем, что он имеет последовательность нуклеооснований, содержащую по меньшей мере 12 непрерывных нуклеиновых оснований из последовательности нуклеиновых оснований, выбранной из последовательностей нуклеиновых оснований, представленных в SEQ ID NO:98, 39, 99, 101, 102, 104, 106, 107, 109, 114, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 128, 130, 131, 132, 133, 134, 136, 137, 141, 144, 146, 147, 150, 151, 152 и 159.
3. Олигонуклеотид по п.1, отличающийся тем, что он имеет последовательность нуклеооснований, содержащую по меньшей мере 12 непрерывных нуклеиновых оснований из последовательности нуклеиновых оснований, выбранной из последовательностей нуклеиновых оснований, представленных в SEQ ID NO:98, 39, 99, 104, 107, 109, 114, 116, 119, 121, 128, 130, 131, 133, 136, 137, 144, 146, 147, 150, 151 и 159.
4. Олигонуклеотид по п.1, отличающийся тем, что он имеет последовательность нуклеооснований, содержащую по меньшей мере 12 непрерывных нуклеиновых оснований из последовательности нуклеиновых оснований, выбранной из SEQ ID NO:98 и SEQ ID NO:99.
5. Олигонуклеотид по п.1, отличающийся тем, что он имеет последовательность нуклеооснований, содержащую по меньшей мере 12 непрерывных нуклеиновых оснований из последовательности нуклеиновых оснований, представленной SEQ ID NO:98.
6. Олигонуклеотид по п.1, отличающийся тем, что он на 90%, 95% или 100% комплементарен нуклеотидной последовательности, кодирующей рецептор фактора роста фибробластов 4, выбранной из нуклеотидных последовательностей, представленных в SEQ ID NO:1-8.
7. Одноцепочечный модифицированный олигонуклеотид, нацеленный на нуклеиновую кислоту, кодирующую фактор роста фибробластов 4 (FGFR4), и способный ингибировать экспрессию FGFR4 мыши, состоящий из 12-30 связанных нуклеозидов и имеющий последовательность нуклеиновых оснований (нуклеооснований), содержащую по меньшей мере 12 непрерывных нуклеиновых оснований из последовательности нуклеиновых оснований, выбранной из последовательностей нуклеиновых оснований, представленных в SEQ ID NO:15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 85, 86, 87, 88, 89, 90 и 91, причем олигонуклеотид содержит по меньшей мере одну фосфоротиоатную межнуклеозидную связь, и/или по меньшей мере один нуклеозид содержит модифицированный сахар, и/или по меньшей мере один нуклеозид содержит модифицированное нуклеооснование.
8. Олигонуклеотид по п.7, отличающийся тем, что он на 90%, 95% или 100% комплементарен нуклеотидной последовательности, кодирующей рецептор фактора роста фибробластов мыши 4, выбранной из нуклеотидных последовательностей, представленных в SEQ ID NO:9-14.
9. Олигонуклеотид по п.1 или 7, отличающийся тем, что он содержит по меньшей мере одну фосфоротиоатную межнуклеозидную связь, и где необязательно каждая межнуклеозидная связь в олигонуклеотиде является фосфоротиоатной межнуклеозидной связью.
10. Олигонуклеотид по п.1 или 7, отличающийся тем, что по меньшей мере один нуклеозид олигонуклеотида содержит модифицированный сахар, который необязательно представляет собой бициклический сахар или сахар, содержащий 2′-О-метоксиэтильную группу.
11. Олигонуклеотид по п.1 или 7, отличающийся тем, что по меньшей мере один нуклеозид олигонуклеотида содержит модифицированное нуклеооснование, которое необязательно представляет собой 5-метилцитозин.
12. Олигонуклеотид по п.1 или 7, отличающийся тем, что модифицированный олигонуклеотид содержит:
гэп-сегмент, состоящий из связанных дезоксинуклеозидов;
5′ фланкирующий сегмент, состоящий из связанных нуклеозидов;
3′ фланкирующий сегмент, состоящий из связанных нуклеозидов;
причем гэп-сегмент расположен между 5′ фланкирующим сегментом и 3′ фланкирующим сегментом, и каждый нуклеозид каждого фланкирующего сегмента содержит модифицированный сахар.
гэп-сегмент, состоящий из связанных дезоксинуклеозидов;
5′ фланкирующий сегмент, состоящий из связанных нуклеозидов;
3′ фланкирующий сегмент, состоящий из связанных нуклеозидов;
причем гэп-сегмент расположен между 5′ фланкирующим сегментом и 3′ фланкирующим сегментом, и каждый нуклеозид каждого фланкирующего сегмента содержит модифицированный сахар.
13. Олигонуклеотид по п.1 или 7, отличающийся тем, что модифицированный олигонуклеотид содержит:
гэп-сегмент, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; 5′ фланкирующий сегмент, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; 3' фланкирующий сегмент, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; причем гэп-сегмент расположен между 5′ фланкирующим сегментом и 3' фланкирующим сегментом, где каждый нуклеозид каждого фланкирующего сегмента содержит 2′-О-метоксиэтилсахар; и где каждая межнуклеозидная связь представляет собой фосфоротиоатную связь.
гэп-сегмент, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; 5′ фланкирующий сегмент, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; 3' фланкирующий сегмент, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; причем гэп-сегмент расположен между 5′ фланкирующим сегментом и 3' фланкирующим сегментом, где каждый нуклеозид каждого фланкирующего сегмента содержит 2′-О-метоксиэтилсахар; и где каждая межнуклеозидная связь представляет собой фосфоротиоатную связь.
14. Олигонуклеотид по п.1 или 7, отличающийся тем, что модифицированный олигонуклеотид состоит из 20 связанных нуклеозидов.
15. Композиция для лечения диабета, ожирения или метаболического синдрома, содержащая эффективное количество олигонуклеотида по п.1 или 7 или его соли и фармацевтический приемлемый носитель или разбавитель.
16. Способ лечения диабета, ожирения или метаболического синдрома, включающий введение субъекту олигонуклеотида по любому из пп.1-14 или композиции по п.15.
17. Способ по п.16, отличающийся тем, что одновременно с олигонуклеотидом вводят агент против ожирения или агент, снижающий уровень глюкозы или нейролептик.
18. Способ ингибирования экспрессии рецептора фактора роста фибробластов 4 в человеческих клетках или тканях, включающий контактирование указанных клеток или тканей с олигонуклеотидом по любому из пп.1-14 или композицией по п.15.
19. Способ повышения уровня метаболизма, включающий введение субъекту олигонуклеотида по любому из пп.1-14 или композиции по п.15.
20. Способ снижения уровня глюкозы или повышения чувствительности к инсулину или их комбинация, включающий введение субъекту олигонуклеотида по любому из пп.1-14 или композиции по п.15.
21. Способ снижения массы тела или содержания телесного жира или их комбинации, включающий введение субъекту олигонуклеотида по любому из пп.1-14 или композиции по п.15.
