Борсодержащее соединение - RU2739198C2

Чертежи

Описание

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

[0001]

Настоящее изобретение относится к борсодержащему соединению и к способу его получения. Борсодержащее соединение по настоящему изобретению может иметь различные применения. Например, борсодержащее соединение по настоящему изобретению является пригодным в качестве средства нейтронозахватной терапии для применения в борнейтронзахватной терапии (BNCT).

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[0002]

Недавно было привлечено внимание к борнейтронзахватной терапии (BNCT) в качестве нового способа лечения злокачественной опухоли с использованием радиоизотопа. Борнейтронзахватная терапия представляет собой способ лечения, в котором борсодержащее соединение, содержащее изотоп бор-10 (¹⁰B), доставляют в злокачественные клетки и злокачественные клетки облучают низкоэнергетическим нейтроном (например, тепловыми нейтронами), и, таким образом, злокачественные клетки локально уничтожаются посредством ядерной реакции, которая возникает в клетках. В этом способе лечения, поскольку важно обеспечить селективное накопление борсодержащего соединения, которое содержит¹⁰B, клетками злокачественной ткани, чтобы усилить терапевтический эффект, были разработаны борсодержащие соединения, которые селективно захватываются злокачественными клетками.

[0003]

Ранее были синтезированы некоторые борсодержащие соединения, в которых атомы бора или атомные группы бора внесены в основной скелет, в качестве средства, используемого при BNCT. Примеры средства, используемого в реальной клинической практике, включают п-боронофенилаланин (BPA) и меркаптоундекагидрододекаборат (BSH: борокаптат). Среди них BSH представляет собой соединение борного каркаса (кластера), имеющее наиболее низкую токсичность, которое в основном используется в форме натриевой соли для лечения опухоли головного мозга, и, таким образом, его пригодность была подтверждена (см., например, непатентные документы 1-8).

[0004]

Кроме того, также были предложены некоторые соединения, модифицированные посредством BSH (например, непатентные документы 9-10).

ДОКУМЕНТЫ УРОВНЯ ТЕХНИКИ

НЕПАТЕНТНЫЕ ДОКУМЕНТЫ

[0005]

Непатентный документ 1: I. M. Wyzlic et al., Tetrahedron Lett., 1992, 33, 7489-7490,

Непатентный документ 2: W. Tjark, J. Organomet. Chem., 2000, 614-615, 37-47,

Непатентный документ 3: K. Imamura et al., Bull. Chem. Soc. Jpn., 1997, 70. 3103-3110.

Непатентный документ 4: A. S. Al-Madhorn et al., J. Med. Chem., 2002, 45, 4018-4028,

Непатентный документ 5: F. Compostella et al, Res. Develop. Neutron Capture Ther., 2002, 81-84,

Непатентный документ 6: S. B Kahl et al., Progress in Neutron Capture Therapy for Cancer, Plenum Press, New York 1992, 223,

Непатентный документ 7: J. Cai et al., J. Med. Chem., 1997, 40, 3887-3896,

Непатентный документ 8: H. Lim et al., Res. Develop. Neutron Capture Ther., 2002, 37-42

Непатентный документ 9: S. Kusaka et al., Applied Radiation and Isotopes, 2011, 69, 1768-1770

Непатентный документ 10: Y. Hattori et al., J. Med. Chem., 2012, 55, 6980-6984

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ПРОБЛЕМЫ, РЕШАЕМЫЕ ПОСРЕДСТВОМ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0006]

Является желательной дальнейшая разработка новых содержащих бор соединений, селективно захватываемых злокачественными клетками, которые можно использовать для проведения BNCT.

[0007]

Задачей настоящего изобретения является предоставление нового борсодержащего соединения, которое можно использовать для BNCT и т.п., и способа его получения.

СПОСОБЫ РЕШЕНИЯ ПРОБЛЕМ

[0008]

В результате тщательных исследований авторы настоящего изобретения обнаружили, что описанную выше задачу можно решить с использованием борсодержащего соединения и способа его получения, как показано ниже, и они осуществили настоящее изобретение.

[0009]

Таким образом, настоящее изобретение относится к борсодержащему соединению, соответствующему следующей формуле (I) или следующей формуле (II), или его фармацевтически приемлемой соли.

[Формула 1]

[Формула 2]

В формуле (I) или (II), черный круг соответствует атому B, белые круги соответствуют B-H; -R¹ обозначает -(CH₂)n-X¹-R³ (n обозначает целое число от 0 до 6;

X¹ обозначает O, S, NH, S-S, O-CO, NHCO или SCO, или отсутствует; R³ обозначает C₆-C₂₀ алкил, гидрокси C₆-C₂₀ алкил, амино C₆-C₂₀ алкил, азидо C₆-C₂₀ алкил, гидроксикарбонил C₆-C₂₀ алкил, замещенный или незамещенный фенокси C₆-C₂₀ алкил, замещенный или незамещенный фенилтиомочевина C₆-C₂₀ алкил, или замещенную или незамещенную бензильную группу), или группу, имеющую повторяющуюся последовательность -(CH₂)₂-O- 3 раза или более и 10 раз или менее, и имеющую метильную группу или этильную группу на конце со стороны атома кислорода; -R² представляет собой -(CH₂)m-X²-R⁴ (m обозначает целое число от 0 до 8);

X² обозначает O, S, NH, S-S, O-CO, NHCO или SCO, или отсутствует; R⁴ обозначает распознающую опухоль часть, выбранную из группы, состоящей из аминокислоты, амида аминокислоты, 5-аминолевулиновой кислоты, койевой кислоты или ее солей, гидрохинона или его солей, ресвератрола или его солей, лиганда TSPO (транслоцирующий белок) типа DPA (диметилпиразолoпиримидина ацетамид), кофеиновой кислоты или ее солей, моносахаридов или их солей, и нуклеиновых кислот или их компонентов или солей), или отсутствует; и

M⁺ обозначает ион щелочного металла, ион аммония или ион тетраалкиламмония (NR⁴⁺), или ион тетрафенилфосфония.

[0010]

Настоящее изобретение также относится к способу получения борсодержащего соединения следующей формулы,

[Формула 4]

или его фармацевтически приемлемой соли, включая стадию реакции соединения, соответствующего

[Формула 3]

черный круг: B, белый круг: B-H,

(-R¹¹ обозначает -(CH₂)n-X¹-R³ (n обозначает целое число от 0 до 6; X¹ обозначает O, S, NH, S-S, O-CO, NHCO или SCO, или отсутствует; R³ обозначает C₆-C₂₀ алкил, гидрокси C₆-C₂₀ алкил, амино C₆-C₂₀ алкил, азидо C₆-C₂₀ алкил, гидроксикарбонил C₆-C₂₀ алкил, замещенный или незамещенный фенокси C₆-C₂₀ алкил, замещенный или незамещенный фенилтиомочевина C₆-C₂₀ алкил, или замещенную или незамещенную бензильную группу), или группу, имеющую повторяющуюся последовательность -(CH₂)₂-O- 3 раза или более и 10 раз или менее, и имеющую метильную группу или этильную группу на конце со стороны атома кислорода); с R¹²-(CH₂)m-X²-R⁴ (m обозначает целое число от 0 до 8; X² обозначает O, S, NH, S-S, O-CO, NHCO или SCO, или отсутствует; R⁴ обозначает распознающую опухоль часть, выбранную из группы, состоящей из аминокислоты, амида аминокислоты, 5-аминолевулиновой кислоты, койевой кислоты или ее солей, гидрохинона или его солей, ресвератрола или его солей, лиганда TSPO (транслоцирующий белок) типа DPA (диметилпиразолoпиримидина ацетамид), кофеиновой кислоты или ее солей, моносахаридов или их солей, и нуклеиновых кислот, или их компонентов, или их солей, и R¹² обозначает галоген).

[0011]

Настоящее изобретение также относится к способу получения борсодержащего соединения,

[Формула 6]

включая стадию реакции соединения, соответствующего

[Формула 5]

с соединением, соответствующим

R¹¹-R¹³,

где R¹¹ обозначает -(CH₂)n-X¹-R³ (n обозначает целое число от 0 до 6; X¹ обозначает O, S, NH, S-S, O-CO, NHCO или SCO, или отсутствует; и R³ обозначает C₆-C₂₀ алкил, гидрокси C₆-C₂₀ алкил, амино C₆-C₂₀ алкил, азидо C₆-C₂₀ алкил, гидроксикарбонил C₆-C₂₀ алкил, замещенный или незамещенный фенокси C₆-C₂₀ алкил, замещенный или незамещенный фенилтиомочевина C₆-C₂₀ алкил, или замещенный или незамещенную бензильную группу), или группу, имеющую повторяющуюся последовательность -(CH₂)₂-O- 3 раза или более и 10 раз или менее и имеющую метильную группу или этильную группу на конце со стороны атома кислорода; и R¹³ обозначает галоген.

[0012]

Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, включающей одно или несколько из описанных выше борсодержащих соединений.

[0013]

Такую фармацевтическую композицию можно использовать для лечения злокачественной опухоли посредством BNCT.

ЭФФЕКТ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0014]

Новые борсодержащие соединения и способ получения по настоящему изобретению в подходящем случае можно использовать, в частности, для BNCT.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

[0015]

На фиг. 1 приведен график, демонстрирующий результаты теста захвата борсодержащего соединения по настоящему изобретению и других соединений опухолевыми клетками.

[0016]

На фиг. 2 приведен график, демонстрирующий результаты теста захвата борсодержащего соединения по настоящему изобретению и других соединений клетками глиомы крысы.

[0017]

На фиг. 3 приведен график, демонстрирующий результаты теста захвата борсодержащего соединения по настоящему изобретению и других соединений опухолевыми клетками.

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0018]

Настоящее изобретение относится к борсодержащему соединению, соответствующему следующей химической формуле (I).

[Формула 7]

[0019]

Также настоящее изобретение относится к соли борсодержащего соединения, соответствующей следующей химической формуле (II).

[Формула 8]

[0020]

В формуле (I) или (II), черный круг обозначает атом B, белые круги обозначают B-H; -R¹ обозначает -(CH₂)n-X¹-R³ (n обозначает целое число от 0 до 6; X¹ обозначает O, S, NH, S-S, O-CO, NHCO или SCO, или отсутствует; R³ обозначает C₆-C₂₀ алкил, гидрокси C₆-C₂₀ алкил, амино C₆-C₂₀ алкил, азидо C₆-C₂₀ алкил, гидроксикарбонил C₆-C₂₀ алкил, замещенный или незамещенный фенокси C₆-C₂₀ алкил, замещенный или незамещенный фенилтиомочевина C₆-C₂₀ алкил, или замещенную или незамещенную бензильную группу), или группу, имеющую повторяющуюся последовательность -(CH₂)₂-O- 3 раза или более и 10 раз или менее и имеющую метильную группу или этильную группу на конце со стороны атома кислорода. В данном случае, левая концевая часть -(CH₂)n-X¹-R³ R¹ указывает на сторону атома S в формуле (I).

[0021]

-R² представляет собой -(CH₂)m-X²-R⁴ (m обозначает целое число от 0 до 8; X² обозначает O, S, NH, S-S, O-CO, NHCO или SCO, или отсутствует; R⁴ обозначает распознающую опухоль часть, выбранную из группы, состоящей из аминокислоты, амида аминокислоты, 5-аминолевулиновой кислоты, койевой кислоты или ее солей, гидрохинона или его солей, ресвератрола или его солей, лиганда TSPO (транслоцирующий белок) типа DPA (диметилпиразолопиримидина ацетамид), кофеиновой кислоты или ее солей, моносахаридов или их солей, и нуклеиновых кислот, или их компонентов, или их солей), или отсутствует.

[0022]

В данном случае, M⁺ обозначает одноатомный катион, многоатомный катион или комплексный катион.

[0023]

Когда -R² отсутствует, S⁺ в формуле представляет собой S.

[0024]

В данном случае, часть, соответствующая BSH соединения, представляет собой соединение, имеющее икосаэдрическую структуру борного кластера, включающую атомы бора, водорода и серы. BSH, имеющий так называемую структуру с трехцентровой связью, в которой три атома бора имеют два общих электрона, имеет определенную структуру, в которой электроны являются локализованными, и имеет объем, превышающий объем бензольного кольца, несмотря на тот факт, что BSH является неорганическим соединением с низкой молекулярной массой. Часть, соответствующую BSH, иногда в настоящем описании просто обозначают как S¹⁰B₁₂H₁₁.

[0025]

Как используют в рамках изобретения, замещение в терминах "замещенный или незамещенный фенил", "замещенный или незамещенный фенокси C₆-C₂₀ алкил" или "замещенный или незамещенный бензил" относится к тому, что фенильная группа может иметь одинаковые или различные заместители в любом одном или двух его положениях. Хотя заместитель не ограничен, он предпочтительно относится к замещению C_1-6 алкильной группой, C_1-6 алкоксигруппой, гидроксигруппой, аминогруппой, ди C_1-6 алкиламиногруппой, нитрогруппой, азидогруппой, тиольной группой, дигидроксиборильной кислотой (группа борной кислоты), карбоксильной группой, цианогруппой, трифторметильной группой или галогеном. В данном случае предпочтительные примеры C_1-6 алкильной группы включают метильную группу, этильную группу, пропильную группу, бутильную группу и т.п. Особенно предпочтительно, C_1-6 алкоксигруппа представляет собой метоксигруппу, ди C_1-6 алкиламиногруппа особенно предпочтительно представляет собой метиламиногруппу, и галоген особенно предпочтительно представляет собой фтор.

[0026]

Как используют в рамках изобретения, термин "замещенный или незамещенный фенилтиомочевина C₆-C₂₀ алкил" относится к тому, что фенильная группа может иметь одинаковые или различные заместители в любом одном или двух ее положениях. Предпочтительно заместитель представляет собой, но не ограничивается ими, флуоресцеин, сульфат кумарина, бор дипиррометен (BODIPY) или родамин.

[0027]

Как используют в рамках изобретения, C₆-C₂₀ алкил может представлять собой либо разветвленный, либо линейный, либо циклический алкил. Его примеры включают, но не ограничиваются ими, гептил, октил, нонил, децил, икозил, изооктил, C₆-C₁₆ циклоалкил и т.п. Особенно предпочтительным является линейный C₈-C₁₆ алкил.

[0028]

Как используют в рамках изобретения, примеры аминокислот в R⁴ включают незаменимые аминокислоты (включая D- и L-формы), BPA (п-боронофенилаланин), и содержащую циклическое кольцо аминокислоту. Также амид аминокислоты в R⁴ имеет структуру, в которой карбоксильная группа этих аминокислот заменена CONH. В рамках настоящего изобретения, циклическое кольцо в содержащей циклическое кольцо аминокислоте предпочтительно представляет собой C_3-6циклическое кольцо. Конкретные примеры содержащей циклическое кольцо аминокислоты включают аминоциклобутановую кислоту. Незаменимой аминокислотой является аланин, аргинин, аспарагин, аспарагиновая кислота, цистеин, глутамин, глутаминовая кислота, глицин, гистидин, изолейцин, лейцин, лизин, метионин, фенилаланин, пролин, серин, треонин, триптофан, тирозин или валин.

[0029]

Как используют в рамках изобретения, моносахариды, главным образом, относятся к альдозе или кетозе. Моносахариды, используемые в рамках настоящего изобретения, могут представлять собой любую из триозы, тетрозы, пентозы и гексозы. Более конкретно, примеры этих моносахаридов включают альдозы, такие как глицеральдегид, эритроза, треоза, рибоза, ликсоза, ксилоза, арабиноза, аллоза, талоза, гулоза, глюкоза, альтроза, манноза, галактоза или идоза; и кетозы, такие как дигидроксиацетон, эритрулоза, ксилулоза, рибулоза, псикоза, фруктоза, сорбоза или тагатоза.

[0030]

Как используют в рамках изобретения, предпочтительно, чтобы 5-аминолевулиновая кислота представляла собой либо NH₂-CH₂-CO-(CH₂)₂-COO-, либо или NH₂-(CH₂)-CO-(CH₂)₂-CO-NH-.

[0031]

Как используют в рамках изобретения, лиганд TSPO (транслоцирующий белок) типа DPA (диметилпиразолoпиримидина ацетамид) относится к TSPO типа N,N-диэтил-2-[4- (2-гидроксифенил)]-5,7-диметилпиразолo[1,5-α]пиримидин-3-ацетамида (DPA) и т.п., и имеет, например, следующую структуру, хотя и не ограничивается этим.

[Формула 9]

[0032]

Как используют в рамках изобретения, нуклеиновые кислоты или их компоненты предпочтительно относятся к последовательности из одного нуклеотида или двух или более нуклеотидов. Они включают ATP, GTP, CTP, UTP, dATP, dGTP, dCTP или dTTP, или комбинацию двух или более из них.

[0033]

M⁺ обозначает одноатомный катион, многоатомный катион или комплексный катион, и его примеры включают ионы щелочных металлов, такие как ион натрия и ион калия; ионы щелочноземельных металлов, такие как ион кальция и ион магния; и неорганические основания, такие как ион алюминия и ион аммония. Более того, например, также можно использовать органические основания, такие как триметиламин, триэтиламин, пиридин, пиколин, этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, дициклогексиламин, N,N'-дибензилэтилендиамин и ион сульфония. Предпочтительные примеры M⁺ включают, но не ограничиваются ими, ионы щелочных металлов, ионы аммония или ионы тетраалкиламмония (NR⁴⁺), или ионы тетрафенилфосфония.

[0034]

Как используют в рамках изобретения, при упоминании соли нуклеиновой кислоты или ее компонента, кофеиновой кислоты, койевой кислоты, гидрохинона, ресвератрола или моносахаридов, она предпочтительно представляет собой фармацевтически приемлемую соль. Примеры фармацевтически приемлемой соли включают соли с неорганическим основанием, соли с органическим основанием, соли с неорганической кислотой, соли с органической кислотой, соли с основной или кислотной аминокислотой, и т.п. Предпочтительные примеры солей с неорганическим основанием включают, например, соли щелочных металлов, такие как соль натрия или соль калия; соли щелочноземельных металлов, такие как соль кальция и соль магния; соль алюминия, соль аммония и т.п. Предпочтительные примеры солей с органическим основанием включают, например, соли с триметиламином, триэтиламином, пиридином, пиколином, этаноламином, диэтаноламином, триэтаноламином, дициклогексиламином, N,N'-дибензилэтилендиамином и т.п. Предпочтительные примеры солей с неорганической кислотой включают, например, соли с хлористоводородной кислотой, бромистоводородной кислотой, азотной кислотой, серной кислотой, фосфорной кислотой, и т.п. Предпочтительные примеры солей с органической кислотой включают, например, соли с муравьиной кислотой, уксусной кислотой, трифторуксусной кислотой, фумаровой кислотой, щавелевой кислотой, виннокаменной кислотой, малеиновой кислотой, лимонной кислотой, янтарной кислоты, яблочной кислотой, метансульфоновой кислотой, бензолсульфоновой кислотой, п-толуолсульфоновой кислотой, и т.п. Предпочтительные примеры солей с основной аминокислотой включают, например, соли с аргинином, лизином, орнитином и т.п., и предпочтительные примеры солей с кислотной аминокислотой включают, например, соли с аспарагиновой кислотой, глутаминовой кислотой и т.п.

[0035]

В рамках настоящего изобретения, согласно предпочтительному варианту осуществления, -R¹ представляет собой -(CH₂)n-X¹-R³ (n обозначает целое число от 1 до 4; X¹ обозначает O, S, NH, S-S, O-CO, NHCO или SCO; и R³ обозначает C₆-C₂₀ алкил); и M⁺ представляет собой ион щелочного металла, ион аммония или ион тетраалкиламмония (NR⁴⁺), или ион тетрафенилфосфония.

[0036]

В другом предпочтительном варианте осуществления -R² представляет собой -(CH₂)m-X²-R⁴ (m обозначает целое число от 0 до 8; X² обозначает O, S, NH, S-S, O-CO, NHCO или SCO, или отсутствует; и -R⁴ обозначает койевую кислоту, соответствующую

[Формула 10]

где R⁵ представляет собой гидроксильную группу или ее соль). В рамках настоящего изобретения "-" в химической формуле обозначает одинарную связь и не обозначает метильную группу.

[0037]

В другом варианте осуществления, -R² представляет собой -(CH₂)m-X²-R⁴ (m обозначает целое число от 0 до 8; X² обозначает O, S, NH, S-S, O-CO, NHCO или SCO, или отсутствует; и -R⁴ представляет собой

[Формула 11]

где R⁶ и R⁷ могут быть одинаковыми или могут различаться, и соответствуют группе, выбранной из гидроксильной группы и ее солей).

[0038]

В другом варианте осуществления, -R² представляет собой -(CH₂)m-X²-R⁴ (m обозначает целое число от 0 до 8; X² обозначает O, S, NH, S-S, O-CO, NHCO или SCO, или отсутствует; и -R⁴ представляет собой соединение, соответствующее либо

[Формула 12]

либо

[Формула 13]

или его соль.

[0039]

В другом варианте осуществления -R² представляет собой -(CH₂)m-X²-R⁴ (m обозначает целое число от 0 до 8; X² обозначает O, S, NH, S-S, O-CO, NHCO или SCO, или отсутствует; и -R⁴ представляет собой любую группу, выбранную из групп, соответствующих

[Формула 14]

или

[Формула 15]

где R⁹ представляет собой водород, метил, изобутил, 1-пропил, изопропил, трет-бутил, этил, карбонилметил, 2-карбонилэтил, гидроксиметил, гидрокси, меркаптометил, метилтиоэтил, 2-амино-2-оксоэтил, 3-амино-3-оксопропил, замещенный или незамещенный бензил, 4-гидроксибензил, 3-аминопропил, 4-аминобутил, 3-гуанидинопропил, индолилметил, имидазолметил, замещенный или незамещенный фенил, 1-гидроксиэтил или пара-боронофенил, и их соли).

[0040]

В другом варианте осуществления -R² представляет собой -(CH₂)m-X²-R⁴ (m обозначает целое число от 0 до 8; X² обозначает O, S, NH, S-S, O-CO, NHCO или SCO, или отсутствует; и -R⁴ представляет собой любую группу, выбранную из групп, соответствующих

[Формула 16]

или

[Формула 17]

где R¹⁰ обозначает

[Формула 18]

и его соль.

[0041]

В другом варианте осуществления -R² представляет собой -(CH₂)m-X²-R⁴ (m обозначает целое число от 0 до 8; X² обозначает O, S, NH, S-S, O-CO, NHCO или SCO, или отсутствует; и -R⁴ представляет собой любую группу, выбранную из групп, соответствующих

[Формула 19]

или

[Формула 20]

и их солям.

[0042]

В другом варианте осуществления, R² отсутствует.

[0043]

Далее описан способ получения борсодержащего соединения, соответствующего химической формуле (I) по настоящему изобретению.

[0044]

В способе получения борсодержащего соединения (I) по настоящему изобретению в качестве исходного материала используют цианоэтил BSH, соответствующий общей формуле (1a):

[Формула 21]

Эти соединения BSH можно синтезировать способом, известным из литературы (например, Gabel, D.; Moller, D.; Harfst, S.; Rosler, J.; Ketz, H.; Inorg. Chem. 1993, 32, 2276-2278), но не ограничиваясь этим. Иными словами, этот способ включает реакцию BSH и β-бромпропионитрила в ацетонитриле, а затем обработку продукта гидроксидом тетраметиламмония и т.п., тем самым получая заданное соединение цианоэтил BSH.

[0045]

Борсодержащее соединение по настоящему изобретению можно получать путем реакции цианоэтил BSH (1a) с соединением, соответствующим общей формуле (2a): R¹¹-R¹³ (2a)

где R¹¹ обозначает -(CH₂)n-X¹-R³ (n обозначает целое число от 0 до 6; X¹ обозначает O, S, NH, S-S, O-CO, NHCO или SCO, или отсутствует; и R³ обозначает C₆-C₂₀ алкил, гидрокси C₆-C₂₀ алкил, амино C₆-C₂₀ алкил, азидо C₆-C₂₀ алкил, гидроксикарбонил C₆-C₂₀ алкил, замещенный или незамещенный фенокси C₆-C₂₀ алкил, замещенный или незамещенный фенилтиомочевина C₆-C₂₀ алкил, или замещенную или незамещенную бензильную группу), или группу, имеющую повторяющуюся последовательность -(CH₂)₂-O- 3 раза или более и 10 раз или менее и имеющую метильную группу или этильную группу на конце со стороны атома кислорода; и R¹³ представляет собой галоген.

[0046]

Условия реакции не ограничены, однако предпочтительно они представляют собой температуру реакции 80°C или более, и время реакции 12 часов или более и 72 часа или менее. Используемый растворитель предпочтительно представляет собой диметилформамид, диметилсульфоксид, ацетонитрил и т.п.

[0047]

В рамках настоящего изобретения, что касается химической формулы (2a), можно использовать коммерчески доступный продукт, или его можно синтезировать и использовать. Способ получения этих соединений не ограничен, однако в качестве примера может быть приведен путь синтеза 6-бромгексилоксибензола.

[0048]

[Формула 22]

[0049]

Соединение по настоящему изобретению можно получать путем растворения фенола в ацетонитриле и реакции с дибромгексаном в присутствии любого из карбоната калия, карбоната натрия, гидроксида натрия и гидроксида калия.

[0050]

В описанной выше реакции в качестве растворителя можно использовать вещество, отличное от ацетонитрила, ацетона, диметилформамида, диметилсульфоксида, тетрагидрофурана, 1,4-диоксана и т.п. Среди них предпочтительно используют ацетонитрил и ацетон.

[0051]

Условия реакции не ограничены, однако предпочтительно реакцию проводят при температуре 60°C или более и 120°C или менее в течение 3 часов и более.

[0052]

Кроме того, путем изменения соответствующим образом длины цепи дибромалкана можно получить соединение, имеющее произвольную длину алкильной цепи.

[0053]

На каждой стадии последующую стадию проводят после проведения соответствующих стадий нейтрализации и очистки. Каждый продукт, полученный на каждой стадии, можно выделять и очищать, или можно подвергать следующей стадии как есть. Способы выделения и очистки включают способы промывания, экстракции, перекристаллизации, различные способы хроматографии и т.п. В каждом продукте на каждой стадии эти способы выделения и очистки также можно использовать отдельно или в соответствующей комбинации двух или более их типов.

[0054]

В рамках настоящего изобретения также является возможным получение группы соединений, имеющей более высокую способность распознавания опухоли. В качестве способа получения такого соединения существуют, но не ограничиваясь ими, следующие способы. Иными словами, такой способ включает стадию реакции соединения, соответствующего следующей химической формуле (III)

[Формула 23]

черный круг: B, белый круг: B-H,

(R¹¹ обозначает -(CH₂)n-X¹-R³ (n обозначает целое число от 0 до 6; X¹ обозначает O, S, NH, S-S, O-CO, NHCO или SCO, или отсутствует; R³ обозначает C₆-C₂₀ алкил, гидрокси C₆-C₂₀ алкил, амино C₆-C₂₀ алкил, азидо C₆-C₂₀ алкил, гидроксикарбонил C₆-C₂₀ алкил, замещенный или незамещенный фенокси C₆-C₂₀ алкил, замещенный или незамещенный фенилтиомочевина C₆-C₂₀ алкил, или замещенную или незамещенную бензильную группу), или группу, имеющую повторяющуюся последовательность -(CH₂)₂-O- 3 раза или более и 10 раз или менее и имеющую метильную группу или этильную группу на конце со стороны атома кислорода); с R¹²-(CH₂)m-X²-R⁴ (m обозначает целое число от 0 до 8; X² обозначает O, S, NH, S-S, O-CO, NHCO или SCO, или отсутствует; R⁴ обозначает распознающую опухоль часть, выбранную из группы, состоящей из аминокислоты, койевой кислоты или ее солей, гидрохинона или его солей, ресвератрола или его солей, лиганда TSPO (транслоцирующий белок) бензодиазепинового типа, моносахаридов или их солей, и нуклеиновых кислот; и R¹² обозначает галоген).

[0055]

В описанном выше способе получения является возможным растворение соединения химической формулы (III) в ацетонитриле и добавление к нему соединения, соответствующего R¹²-(CH₂)m-X₂-R⁴, для реакции смеси при 70°C или более и 140°C или менее в течение 12 часов или более.

[0056]

В качестве растворителя в описанной выше реакции можно использовать вещество, отличное от ацетонитрила, диметилформамида, диметилсульфоксида, метанола, этанола и т.п. Среди них предпочтительно используют ацетонитрил и диметилформамид.

[0057]

В описанной выше реакции тип соли химической формулы (III) конкретно не ограничен, однако предпочтительной является натриевая соль, соль тетраметиламмония и т.п. Кроме того, галоген конкретно не ограничен, однако предпочтительно используют Br.

[0058]

Такое соединение в подходящем случае можно использовать как есть или использовать в форме фармацевтически приемлемой соли, или использовать в форме фармацевтического препарата, известного специалисту в данной области, путем смешения его с фармацевтически приемлемым носителем, или можно использовать в форме заключенного в BSH вирусного оболочечного вектора и т.п., в борнейтронзахватной терапии (BNCT). Иными словами, его можно использовать в качестве фармацевтической композиции или терапевтического средства против злокачественной опухоли.

[0059]

Лечение осуществляют через любой подходящий путь введения посредством введения средства, содержащего соединение по настоящему изобретению, с использованием способа, посредством которого соединение накапливается в заданной области. Соединение по настоящему изобретению предпочтительно концентрируется в опухоли. Фармацевтический препарат, содержащий соединение, можно вводить сразу или можно вводить постепенно. При необходимости введение фармацевтического препарата можно повторять. Если желательно, после удаления опухоли в степени, возможной с использованием хирургического способа, оставшуюся опухоль можно разрушать с использованием фармацевтического препарата по настоящему изобретению.

[0060]

Лечение фармацевтическим препаратом с борсодержащим соединением по настоящему изобретению проводят c использованием подходящего пути введения посредством введения его с использованием способа, в котором борсодержащее соединение накапливается в опухоли-мишени. Предпочтительно борсодержащее соединение концентрируется в опухоли до облучения радиационным излучением, и соотношение опухоль/кровь до облучения радиационным излучением преимущественно составляет приблизительно 2:1 или по меньшей мере 1,5:1. При BNCT важно, чтобы существовала разница концентраций бора между опухолью и окружающими ее нормальными тканями, и соединение, в котором бор внесен в структуру, селективно накапливающуюся в опухоли по настоящему изобретению, было в высокой степени эффективным. Это связано с тем, что существует разница концентраций бора между опухолью и окружающими нормальными тканями и является возможным селективное уничтожение опухоли, одновременно снижая повреждение окружающих нормальных тканей. С другой стороны, чтобы BNCT была успешной, необходимо накопление приблизительно 20 м.д. бора в опухоли, и это может быть достигнуто коррекцией дозы. Борсодержащее соединение может быть введено сразу или может быть введено постепенно. После желаемого накопления соединения в опухоли область облучают эффективным количеством низкоэнергетических нейтронов. Область может быть облучена через кожу, или область может быть полностью или частично открыта перед облучением. Введение борсодержащего соединения и последующее облучение при необходимости можно повторять. Если желательно, после удаления опухоли в той степени, насколько это возможно посредством хирургического вмешательства, оставшуюся опухоль разрушают с использованием борсодержащего соединения по настоящему изобретению. В другом варианте осуществления пациентам вводят надлежащее количество борсодержащего соединения, после чего проводят облучение эффективным количеством²⁵²калифорния, который представляет собой встречающееся в природе испускающее нейтроны вещество. Предпочтительно, чтобы²⁵²калифорний был введен в опухоль, а затем удален в течение надлежащего периода времени.

[0061]

В рамках настоящего изобретения тип опухоли конкретно не ограничен, однако особенно подходящими индивидуумами могут быть индивидуумы с опухолью головного мозга, включающей глиобластому и злокачественную глиому и т.п., злокачественной меланомой, раком молочной железы или раком предстательной железы и т.п. Кроме того, также мишенью может быть карцинома из эпителиальных клеток, такая как рак легкого, рак матки, рак почки и рак печени, различные саркомы и т.п.

[0062]

Для введения борсодержащего соединения по настоящему изобретению борсодержащее соединение можно вводить пациентам путем смешения с надлежащими эксципиентами, адъювантами и/или фармацевтически приемлемыми носителями, отдельно или в комбинации с другими средствами. Носители, которые особенно предпочтительно можно использовать, включают, но не ограничиваются ими, фармацевтически инертные водные носители. Такие носители включают физиологический раствор, забуференный физиологический раствор, декстрозу, воду и т.п. В одном варианте осуществления настоящего изобретения фармацевтически приемлемые носители являются фармацевтически неактивными.

[0063]

Борсодержащее соединение по настоящему изобретению можно вводить перорально и парентерально. В случае парентерального введения, его можно вводить внутриартериально (например, через сонную артерию), внутримышечно, подкожно, внутрь костного мозга, интратекально, внутрижелудочковым путем, внутривенно, внутрибрюшинно или интраназальным путем.

[0064]

Фармацевтический можно составлять в виде любой формы, такой как порошки, гранулы, мелкие гранулы, сухие сиропы, таблетки, капсулы, инъекции, и жидкости и растворы. Кроме того, в зависимости от дозированной формы, фармацевтический препарат можно получать путем надлежащего смешения, или разбавления или растворения вместе с фармацевтическими добавками, такими как надлежащие эксципиенты; разрыхлители; связующие вещества; смазывающие вещества; разбавители; буферы, такие как фосфорная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота, уксусная кислота и другие органические кислоты, или их соли; обеспечивающие изотоничность средства; антисептики; увлажнители; эмульгаторы; диспергирующие средства; стабилизаторы; солюбилизаторы; антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота; низкомолекулярные (менее чем приблизительно 10 остатков) полипептиды (например, полиаргинин или трипептиды); белки (например, сывороточный альбумин, желатин, или иммуноглобулин); гидрофильные полимеры (например, поливинилпирролидон); аминокислоты (например, глицин, глутаминовая кислота, аспарагиновая кислота или аргинин); моносахариды, дисахариды и другие углеводы (включая целлюлозы или ее производные, глюкозу, маннозу или декстрин); хелатирующие агенты (например, EDTA); сахарные спирты (например, маннит или сорбит); противоионы (например, натрий); и/или неионные поверхностно-активные вещества (например, полисорбат, полоксамер), в соответствии с известными в фармацевтике способами. Такое вещество, которое повышает изотоничность и химическую стабильность, является нетоксичным для реципиента в используемых дозировках и концентрациях. Особенно предпочтительными в качестве фармацевтического препарата являются инъекции, изготовленные с водным носителем.

[0065]

Способы составления и введения описаны, например, в последнем издании Фармакопеи Японии и ее последнем дополнении, и в конечной версии "REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCES" (Maack Publishing Co., Easton, Pa.).

[0066]

Фармацевтический препарат борсодержащего соединения по настоящему изобретению представляет собой средство, содержащееся в количестве, эффективном для достижения заданным средством предполагаемой цели, и "терапевтически эффективное количество" или "фармакологически эффективное количество" хорошо известно специалисту в данной области и относится к количеству средства, эффективному для достижения фармакологического результата. Определение терапевтически эффективной дозы хорошо известно специалисту в данной области.

[0067]

Терапевтически эффективное количество относится к количеству средства, требуемому для смягчения болезненного состояния при введении. Терапевтический эффект и токсичность таких соединений можно определять с использованием стандартных фармацевтических методик в клеточных культурах или у экспериментальных животных. Предпочтительно доза находится в диапазоне циркулирующих концентраций, которые включают ED₅₀ с небольшой токсичностью или ее отсутствием. Эта доза варьируется в этом диапазоне в зависимости от используемой дозированной формы, чувствительности пациентов и пути введения. В качестве примера, дозу композиции соответствующим образом выбирают в зависимости от возраста и других параметров пациентов, типа заболевания, типа используемых композиций и т.п. Предпочтительная суточная доза соединения химической формулы (I) составляет от 0,01 до 1,000 мг на 1 кг масс тела животного, подвергаемого лечению. У человека, предпочтительная суточная доза соединения химической формулы (I) составляет от 0,01 до 800 мг, и более предпочтительно от 1 до 600 мг, на 1 кг массы тела.

[0068]

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей одно или несколько борсодержащих соединений, соответствующих химической формуле (I) или (II), или их фармацевтически приемлемых солей. Иными словами, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению содержит одно или несколько борсодержащих соединений, соответствующих химической формуле (I) или (II), или их фармацевтически приемлемых солей.

[0069]

Настоящее изобретение относится к применению одного или нескольких борсодержащих соединений, соответствующих химической формуле (I) или (II), или их фармацевтически приемлемых солей для получения лекарственного средства для лечения злокачественной опухоли. В рамках настоящего изобретения предпочтительно, чтобы лечение злокачественной опухоли проводилось с использованием BNCT.

Настоящее изобретение относится к применению одного или нескольких борсодержащих соединений, соответствующих химической формуле (I) или (II), или их фармацевтически приемлемых солей для получения лекарственного средства для лечения злокачественной опухоли посредством BNCT.

[0070]

Далее описаны конкретные примеры получения борсодержащего соединения по настоящему изобретению посредством примеров вариантов осуществления, однако настоящее изобретение не ограничивается ими.

ПРИМЕРЫ

[0071]

В приведенных ниже примерах анализ, и выделение, и очистку соединений проводили с использованием следующих моделей и реагентов. Спектр ЯМР: JEOL JMTC-400/54/SS 400 МГц (произведенный JEOL Ltd.). Если нет иных указаний, в качестве внутреннего стандарта использовали TMS. Приведенный ниже химический сдвиг выражали с помощью величины δ. Силикагель для колоночной хроматографии: BW-200 (произведенный FUJI SILYSIA CHEMICAL LTD.). Температура плавления: измеряли с использованием BUCHI Melting point B-545. IR: измеряли с использованием JASCO FT/IR-460 plus.

[0072]

(Пример 1-1)

Получение S-н-октил-тиоундекагидро-клозо-додекабората, соль динатрия

S- (2-цианоэтил)-тиоундекагидро-клозо-додекаборат 2, соль тетраметиламмония (250 мг, 0,685 ммоль) растворяли в ацетонитриле (10 мл) и добавляли 1-бромоктан (142 мкл, 0,822 ммоль), затем смесь нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 24 часов. После концентрирования реакционной смеси до сухого состояния к ней добавляли ацетон (100 мл) и нерастворимые вещества удаляли фильтрацией. К фильтрату добавляли 25% гидроксид тетраметиламмония/метанол (250 мг, 0,685 ммоль) и полученный преципитат собирали фильтрацией и промывали ацетоном. Полученное бесцветное твердое вещество растворяли в H₂O (100 мл), добавляли амберлит IR120 (H⁺) (5,0 мл) и смеси позволяли стоять в течение 30 минут. Реакционную смесь фильтровали и фильтрат нейтрализовывали 1 Н NaOH, а затем концентрировали до сухого состояния с получением заданного соединения (159 мг, 72,0%) в виде бесцветного аморфного твердого вещества.¹H-ЯМР (DMSO-d₆): 0,25-1,65 (м, 26H), 2,08-2,09 (м, 2H), 2,19-2,23 (м, 2H).

[0073]

Аналогичным образом синтезировали, соединения, представлены в таблице 1 ниже.

[Таблица 1]

Название соединенияСтруктурная формула¹H-ЯМРСправочный примерABS01

1H-ЯМР (DMSO-d6): 0,43-1,44 (м, 11H), 1,69 (с, 3H).Справочный примерABS02

1H-ЯМР (DMSO-d6): 0,43-1,44 (м, 18H), 2,23 (т, 2H, J=7,6 Гц). Пример 1-2ABS03

1H-ЯМР (DMSO-d6): 0,42-1,44 (м, 22H), 2,08-2,09 (м, 2H), 2,21 (т, 2H, J=7,6 Гц)Пример 1-3ABS04

1H-ЯМР (DMSO-d6): 0,42-1,44 (м, 26H), 2,08-2,09 (м, 2H), 2,21 (т, 2H, J=7,6 Гц)Пример 1-4ABS05

1H-ЯМР (DMSO-d6): 0,42-1,44 (м, 30H), 2,08-2,09 (м, 2H), 2,20 (т, 2H, J=7,6 Гц)Пример 1-5ABS06

1H-ЯМР (DMSO-d6): 0,42-1,44 (м, 34H), 2,08-2,09 (м, 2H), 2,20 (т, 2H, J=7,6 Гц)Пример 1-6ABS07

1H-ЯМР (DMSO-d6): 0,42-1,44 (м, 38H), 2,08-2,09 (м, 2H), 2,21 (т, 2H, J=7,6 Гц)Пример 1-7ABS08

1H-ЯМР (DMSO-d6): 0,42-1,44 (м, 42H), 2,08-2,09 (м, 2H), 2,21 (т, 2H, J=7,6 Гц)Пример 1-8ABS09

1H-ЯМР (DMSO-d6): 0,42-1,44 (м, 46H), 2,08-2,09 (м, 2H), 2,21 (т, 2H, J=7,6 Гц)Пример 1-9ABS10

1H-ЯМР (DMSO-d6): 0,42-1,44 (м, 50H), 2,08-2,09 (м, 2H), 2,21 (т, 2H, J=7,6 Гц)Пример 1-10ABS11

1H-ЯМР (CD₃CN): 0,45-1,60 (ушир. м, 23H), 2,39 (т, 2H, J=7,2 Гц), 3,09 (т, 2H, J=7,2Hz Гц)Пример 1-11ABS12

1H-ЯМР (DMSO-d6): 0,45-1,44 (ушир. м, 23H), 1,51 (т, 2H, J=9,2 Гц), 2,21 (т, 2H, J=9,2Hz Гц)Пример 1-12ABS13

1H-ЯМР (CD₃CN): 0,45-1,60 (ушир. м, 23H), 2,39 (т, 2H, J=7,2 Гц), 3,27 (т, 2H, J=7,2Hz Гц)Справочный примерABS14

1H-ЯМР (CD₃CN): 0,45-1,55 (ушир. м, 17H), 1,63-1,70 (м, 1H), 2,24 (d, 2H, J=6,4 Гц)Пример 1-14ABS15

¹H-ЯМР (D₂O): 0,85-1,78 (м, 21H), 2,15-2,26 (м, 2H), 3,95 (т, 2H, J=6,4), 6,90 (d, 2H, J=8,0 Гц), 7,63 (d, 2H, J=8,0 Гц).Пример 1-15ABS16

1H-ЯМР (CD₃CN): 0,45-1,60 (ушир. м, 11H), 2,55 (т, 2H, J=5,6 Гц), 3,34 (с, 3H), 3,48-3,60 (м, 14H, )Пример 1-16ABS17

¹H-ЯМР (D₂O): 0,56-1,78 (м, 23H), 2,34-2,49 (м, 2H), 3,14-3,59 (м, 2H), 6,40 (ушир., 1H), 6,56-6,65 (м, 5H), 6,95-7,35 (м, 6H), 7,49 (ушир., 1H), 7,65 (с, 1H).Пример 1-17ABS18

1H-ЯМР (DMSO-d6): 0,42-1,59 (м, 23H), 1,91-1,98 (м, 2H), 2,06-2,77 (м, 1H)

[0074]

(Пример 2-1) Получение (S- ( (3-амино-3-гидроксикарбонилбутил)октил)-λ³-сульфанил)ундекагидро-клозо-додекабората, соли натрия

S-н-октил-тиоундекагидро-клозо-додекаборат, соль динатрия (122 мг, 0,338 ммоль), полученный согласно примеру 1, растворяли в ацетонитриле (10 мл) и добавляли бромат (S)- (+)-2-амино-4-бромбутановой кислоты (119 мг, 0,453 ммоль), затем смесь нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 24 часов. После концентрирования реакционной смеси до сухого состояния к ней добавляли ацетон (100 мл) и нерастворимые вещества удаляли фильтрацией. После концентрирования фильтрата полученную смесь очищали колоночной хроматографией ODS (H₂O-80% H₂O/MeCN) и лиофилизировали с получением заданного соединения (110 мг, 81,3%) в виде бесцветного порошка.¹H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,65 (м, 24H), 2,20-2,50 (м, 1H), 3,85-3,29 (м, 4H), 3,79-3,87 (м, 1H).

[0075]

Аналогичным образом синтезировали соединения, представленные в таблицах 2-4.

[Таблица 2]

Название соединенияСтруктурная формула¹H-ЯМРСправочный примерASL01

Справочный примерASL02

1H-ЯМР (D₂O): 0,75-1,80 (ушир., 11H), 2,21-2,28 (м, 4H), 2,97-3,26 (м, 4H), 3,69-3,76 (м, 2H)Справочный примерASL03

Справочный примерASL04

1H-ЯМР (D₂O): 0,81-1,80 (м, 11H), 2,19-2,31 (м, 2H), 2,52 (с, 3H), 2,85-3,22 (м, 2H), 3,70-3,78 (м, 1H).Справочный примерASL05

1H-ЯМР (D₂O): 0,65-1,75 (м, 18H), 2,29-2,42 (м, 2H), 2,93-3,26 (м, 4H), 3,87-3,93 (м, 1H).Справочный примерASL06

1H-ЯМР (D₂O): 0,79-1,82 (м, 17H), 1,99-2,10 (м, 1H), 2,28-2,40 (м, 2H), 2,84 (dd, 1H, J=12,8 Гц, 7,2 Гц, ), 2,94-3,03 (м, 2H), 3,04-3,27 (м, 2H), 3,79-3,87 (м, 1H).Пример 2-2ASL07

1H-ЯМР (D₂O): 0,65-1,75 (м, 20H), 2,25-2,45 (м, 2H), 2,96-3,29 (м, 4H), 3,87-3,91 (м, 1H).Пример 2-3ASL08

¹H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,65 (м, 24H), 2,20-2,50 (м, 2H), 2,85-3,29 (м, 4H), 3,79-3,87 (м, 1H).Пример 2-4ASL09

¹H-ЯМР (CD₃CN): 0,65-1,80 (м, 26H), 2,24-2,48 (м, 2H), 2,82-3,22 (м, 4H), 3,99-4,09 (м, 1H).Пример 2-5ASL10

¹H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,65 (м, 28H), 2,20-2,60 (м, 2H), 2,79-3,32 (м, 4H), 4,05-4,20 (м, 1H).Пример 2-6ASL11

¹H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,65 (м, 32H), 2,20-2,60 (м, 2H), 2,79-3,32 (м, 4H), 4,05-4,20 (м, 1H).Пример 2-7ASL12

¹H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,65 (м, 34H), 2,42-2,48 (м, 4H), 2,81-3,06 (м, 4H), 3,69-3,74 (м, 1H).Справочный примерASL13

1H-ЯМР (D₂O): 0,80-1,75 (м, 17H), 2,20-2,35 (м, 4H), 2,90-3,20 (м, 2H), 3,65-3,76 (м, 1H), 4,04-410 (м, 2H).Пример 2-8ASL14

¹H-ЯМР (CD₃CN): 0,65-1,80 (м, 30H), 2,24-2,48 (м, 2H), 2,94-3,31 (м, 4H), 3,35-3,81 (м, 5H).Пример 2-9ASL15

¹H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,65 (м, 23H), 2,27-2,54 (м, 2H), 2,85-3,35 (м, 6H), 4,03-4,16 (м, 1H), 7,59 (ушир., 2H).Пример 2-10ASL16

¹H-ЯМР (CD₃CN): 0,77-1,80 (м, 23H), 2,27-2,54 (м, 2H), 2,88-3,29 (м, 4H), 3,49-3,55 (м, 2H), 4,03-4,11 (м, 1H).Пример 2-11ASL17

¹H-ЯМР (CD₃CN): 0,65-1,80 (м, 23H), 2,24-2,48 (м, 2H), 2,82-3,16 (м, 4H), 3,27 (т, 2H, J=7,2 Гц), 4,03-4,11 (м, 1H).Пример 2-12ASL18

¹H-ЯМР (D₂O): 0,85-1,92 (м, 11H), 2,52-2,73 (м, 2H), 3,82-4,46 (м, 3H),6,98-7,07 (м, 3H), 7,39-7,42 (м, 2H).

[Таблица 3]

Название соединенияСтруктурная формула¹H-ЯМРПример 2-13ASL19

¹H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,65 (м, 19H), 2,18-2,48 (м, 2H), 2,85-3,35 (м, 6H), 3,68-3,81 (ушир. м, 2H), 3,82-3,89 (м, 1H), 6,71 (д, 2H, J=8,0 Гц), 7,87 (д, 2H, J=8,0 Гц).Пример 2-14ASL20

¹H-ЯМР (D₂O): 0,88-1,78 (м, 19H), 2,14-2,32 (м, 2H), 2,75-3,18 (м, 6H), 3,68-3,74 (ушир. м, 1H), 3,80 (т, 2H, J=6,4 Гц), 6,69-6,78 (м, 4H)Пример 2-15ASL21

¹H-ЯМР (D₂O): 0,88-1,78 (м, 19H), 2,16-2,36 (м, 2H), 2,75-3,18 (м, 6H), 3,68-3,74 (ушир. м, 1H), 3,93 (т, 2H, J=6,4 Гц), 6,88-6,93 (м, 3H), 7,24-7,28 (м, 2H)Пример 2-16ASL22

¹H-ЯМР (D₂O): 0,85-1,78 (м, 21H), 2,15-2,26 (м, 2H), 2,81-3,16 (м, 4H), 3,65-3,72 (м, 1H), 3,95 (т, 2H, J=6,4), 6,90 (д, 2H, J=8,0 Гц), 7,63 (д, 2H, J=8,0 Гц).Пример 2-17ASL23

¹H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,65 (м, 29H), 1,84-2,15 (м, 4H), 2,31-2,55 (м, 8H), 2,65-2,75 (м, 4H), 2,96-3,05 (м, 1H), 3,14-3,21 (м, 1H), 4,09-4,15 (м, 1H).Пример 2-18ASL24

1H-ЯМР (DMSO-d6): 0,65-1,55 (ушир. м, 34H), 1,74-1,83 (м, 2H), 1,64-1,72 (м, 4H), 2,78-2,92 (м, 4H), 3,16-3,18 (м, 2H), 4,24-4,33 (м, 3H), 7,94 (с, 1H), 8,24 (ушир., 2H)Пример 2-19ASL25

¹H-ЯМР (CD₃CN): 0,65-1,80 (м, 24H), 2,22-2,44 (ушир. м, 2H), 3,20-3,53 (м, 3H), 3,66-4,06 (м, 1H), 4,76-4,95 (ушир. м, 1H).Пример 2-20ASL26

¹H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,65 (м, 27H), 2,20-2,50 (м, 2H), 2,76-3,19 (м, 4H).Пример 2-21ASL27

¹H-ЯМР (CD₃CN): 0,65-1,80 (м, 32H), 2,09-2,38 (м, 4H), 2,75-3,49 (м, 8H), 3,79-4,07 (м, 3H), 6,87-6,91 (м, 2H), 7,15-7,18 (м, 2H).Пример 2-22ASL28

¹H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,65 (м, 44H), 2,20-2,60 (м, 2H), 2,79-3,32 (м, 4H), 4,05-4,20 (м, 1H).Пример 2-23ASL29

[Таблица 4]

Название соединенияСтруктурная формула¹H-ЯМРПример 2-24AAL01

¹H-ЯМР (DMSO-d6): 0,78-1,58 (ушир. м, 22H), 1,60-1,84 (м, 4H), 2,68-3,05 (м, 6H), 3,13-3,51 (м, 4H), 3,64-3,82 (м, 1H), 6,90 ушир., 1H), 7,15-7,37 (м, 5H), 8,33 (т, 1H, J=5,37 Гц)Пример 2-25AAL02

¹H-ЯМР (CD₃CN): 0,45-1,42 (ушир. м, 26H), 1,86-1,96 (м, 2H), 2,71-3,07 (м, 6H), 3,16-3,30 (м, 2H), 3,98-4,05 (м, 1H), 6,78-6,96 (м, 1H), 7,22-7,40 (м, 2H), 7,68-7,78 (м, 2H).Пример 2-26AAL03

¹H-ЯМР (DMSO-d6): 0,78-1,75 (ушир. м, 24H), 1,96-2,22 (м, 2H), 2,68-3,01 (м, 6H), 3,07-3,11 (м, 1H), 3,68-3,76 (м, 1H), 4,09-4,27 (м, 1H), 7,31 (д, 2H, J=8,0 Гц), 7,71 (д, 2H, J=8,0 Гц), 8,25-8,46 (ушир. м, 2H).

[0076]

(Пример 3)

Получение (S-((5-гидрокси-4-оксо-4H-пиран-2-ил)метил)октил)-λ³-сульфанил)ундекагидро-клозо-додекабората, соли натрия

S-н-октил-тиоундекагидро-клозо-додекаборат, соль динатрия (173 мг, 0,535 ммоль), полученный согласно примеру 1, растворяли в ацетонитриле (10 мл) и добавляли 2-бромметил-5-гидрокси-4H-пиранон (131 мг, 0,639 ммоль), затем смесь нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 24 часов. После концентрирования реакционной смеси до сухого состояния к ней добавляли ацетон (100 мл) и нерастворимый материал удаляли фильтрацией. После концентрирования фильтрата полученную смесь очищали колоночной хроматографией ODS (H₂O-70% H₂O/MeCN) и лиофилизировали с получением заданного соединения (184 мг, 80,8%) в виде бесцветного порошка.¹H-ЯМР (DMSO-d₆): 0,60-1,85 (м, 26H), 3,05-3,09 (м, 2H), 4,12-4,31 (м, 2H), 6,61 (с, 1H), 7,09 (с, 1H).

[0077]

Аналогичным образом синтезировали соединения, представленные в таблице 5 ниже.

[Таблица 5]

Название соединенияСтруктурная формула¹H-ЯМРСправочный примерKA01

Справочный примерKA02

Справочный примерKA03

1H-ЯМР (CD₃CN): 0,74-1,78 (м, 11H), 2,52 (с, 3H), 3,89 (д, 1H, J=14,4 Гц), 4,12 (д, 1H, J=14,4 Гц), 6,49-6,51 (ушир. м, 1H), 7,93 (с, 1H).Справочный примерKA04

1H-ЯМР (CD₃CN): 0,64-1,78 (м, 18H), 2,89-3,16 (м, 2H), 3,97 (д, 1H, J=14,8 Гц), 4,19 (д, 1H, J=14,8 Гц), 6,49-6,52 (ушир. м, 1H), 7,94 (с, 1H).Пример 3-2KA05

1H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,85 (м, 20H), 3,04-3,14 (м, 2H), 4,12-4,22 (м, 2H), 6,58-6,62 (ушир. м, 1H), 8,01 (с, 1H).Пример 3-3KA06

1H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,85 (м, 24H), 3,04-3,14 (м, 2H), 4,12-4,22 (м, 2H), 6,58-6,62 (ушир. м, 1H), 7,99 (с, 1H).Пример 3-4KA07

1H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,85 (м, 28H), 3,04-3,14 (м, 2H), 4,12-4,22 (ушир. м, 2H), 6,58-6,62 (ушир. м, 1H), 7,97 (с, 1H).Пример 3-5KA08

1H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,85 (м, 32H), 3,04-3,14 (м, 2H), 4,12-4,22 (ушир. м, 2H), 6,60 (ушир., 1H), 7,96 (с, 1H).Пример 3-6KA09

1H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,85 (м, 36H), 3,04-3,14 (м, 2H), 4,12-4,22 (ушир. м, 2H), 6,60 (ушир., 1H), 7,96 (с, 1H).Пример 3-7KA10

1H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,85 (м, 40H), 3,04-3,14 (м, 2H), 4,12-4,22 (ушир. м, 2H), 6,60 (ушир., 1H), 7,96 (с, 1H).Пример 3-8KA11

1H-ЯМР (D₂O): 0,65-1,85 (м, 23H), 2,96-3,17 (м, 2H), 3,44-3,55 (м, 2H), 4,10-4,25 (м, 2H), 6,52-6,65 (ушир. м, 1H), 8,05 (с, 1H).Пример 3-9KA12

1H-ЯМР (D₂O): 0,65-1,85 (м, 15H), 2,24-2,31 (м, 2H), 2,97-3,18 (м, 2H), 4,04-4,26 (м, 4H), 6,59 (с, 1H), 7,96 (с, 1H).Пример 3-10KA13

1H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,85 (ушир. м, 11H), 3,29 (с, 3H), 3,55-3,64 (м, 14H), 3,75-3,88 (м, 2H), 4,16-4,44 (м, 2H), 6,63-6,66 (ушир. м, 1H), 8,04 (с, 1H).

[0078]

Соединения, представленные в таблице 6, синтезировали аналогично тому, как в примерах 1-3.

[Таблица 6]

Название соединения Структурная формула¹H-ЯМРПример 4-1GLC01

¹H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,90 (м, 26H), 2,03 (с, 3H), 2,10 (с, 6H), 2,20 (с, 3H), 3,19-3,37 (ушир. м, 2H), 3,71-3,80 (ушир. м, 1H), 4,08-4,15 (м, 2H), 4,32-4,36 (м, 1H), 5,07 (т, J=4,8 Гц, 1H), 6,48 (ушир., 1H).Пример 4-2GLC02

¹H-ЯМР (D₂O): 0,55-1,90 (м, 26H), 2,60-3,48 (ушир. м, 2H), 3,58-4,05 (м, 2H), 4,82-4,90 (м, 1H), 5,89-5,92 (м, 1H).Пример 4-3HQ01

1H-ЯМР (DMSO-d6): 0,45-1,42 (ушир. м, 25H), 2,21 (с, 3H), 3,89 (д, 2H, J=14,4 Гц), 3,53 (т, 2H, J=6,4 Гц), 6,35 (д, 2H, J=8,8 Гц), 6,42 (д, 2H, J=8,8 Гц).Пример 4-4HQ02

1H-ЯМР (CD₃CN): 0,55-1,78 (ушир. м, 38H), 2,75-2,82 (м, 2H), 2,96-3,03 (м, 2H), 3,53 (т, 2H, J=6,4 Гц), 6,69-6,76 (м, 4H).Пример 4-5REB01

1H-ЯМР (DMSO-d6): 0,45-1,78 (ушир. м, 34H), 2,80-2,95 (м, 4H), 3,91-3,98 (м, 2H), 6,20 (с, 1H), 6,51 (д, 1H, J=9,6 Гц), 6,57 (д, 1H, J=9,6 Гц), 6,75 (д, 2H, J=8,0 Гц), 6,84-7,05 (м, 2H), 7,40 (д, 2H, J=8,0 Гц), 9,37 (с, 1H), 9,57 (с, 1H)..Пример 4-6DBP01

¹H-ЯМР (D₂O): 0,65-1,65 (м, 42H), 1,63-1,77 (м, 4H), 2,26 (с, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,70 (с, 3H), 2,81-2,88 (м, 2H), 3,28 (кв, 2H, J=7,2 Гц), 3,51 (кв, 2H, J=7,2 Гц), 3,84 (с, 1H), 4,00 (т, 2H, J=6,0 Гц), 6,84 (с, 1H), 7,01 (д, 2H, J=8,8 Гц), 7,66 (д, 2H, J=8,8 Гц).Пример 4-7DBP02

¹H-ЯМР (D₂O): 0,65-1,65 (м, 32H), 1,70-1,77 (м, 2H), 2,09 (с, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,69 (с, 3H), 2,81-2,88 (м, 1H), 2,99-3,07 (м, 2H), 3,18-3,24 (м, 1H), 3,34 (кв, 2H, J=7,2 Гц), 3,50 (кв, 2H, J=7,2 Гц), 3,86 (с, 1H), 4,13 (т, 2H, J=6,0 Гц), 6,67 (с, 1H), 7,01 (д, 2H, J=8,8 Гц), 7,70 (д, 2H, J=8,8 Гц).Пример 4-8CFA01

1H-ЯМР (CD₃CN): 0,78-1,78 (ушир. м, 26H), 1,95-2,02 (м, 2H), 2,26 (с, 3H), 2,27 (с, 3H), 2,76-2,88 (м, 2H), 2,99-3,08 (м, 2H), 3,53 (м, 2H), 3,23-3,42 (м, 2H), 7,23 (д, 1H, J=8,4 Гц), 7,41-7,48 (м, 3H).Пример 4-95ALA01

1H-ЯМР (DMSO-d6): 0,78-1,54 (ушир. м, 25H), 1,59-1,98 (м, 4H), 2,07-2,27 (м, 2H), 2,32-2,45 (м, 1H), 2,53-2,62 (м, 1H), 2,78-3,16 (м, 6H), 4,02-4,13 (м, 1H).

[0079]

(Биологическая оценка 1)

Цитотоксичность, захват клетками и эффект уничтожения клеток при облучении нейтронами оценивают путем проведения следующих биологических анализов борсодержащих соединений (средств на основе бора), полученных согласно примерам.

[0080]

Тест цитотоксичности (WST-8)

С использованием 96-луночного микропланшета клетки глиомы крысы (C6) или клетки меланомы (B16) высевали с плотностью 1,5×10⁴ клеток/мл на лунку и культивировали при комнатной температуре (37°C, 5% CO₂) в течение 24 часов. Культуральную жидкость отбирали всасыванием, и культуральную жидкость, содержащую борсодержащее соединение, полученное согласно примеру, добавляли в различных концентрациях в каждую лунку в количестве 100 мкл. После культивирования при комнатной температуре (37°C, 5% CO₂) в течение 24 часов культуральную жидкость отбирали всасыванием, добавляли 100 мкл раствора WST-8 соответственно, и полученную смесь далее культивировали при комнатной температуре (37°C, 5% CO₂) в течение 4 часов. С использованием устройства для считывания микропланшетов количественно определяли поглощение при длине волны 450 нм (длина волны для сравнения: 655 нм), и в качестве контроля фона использовали поглощение в лунках, не содержащих клетки. Таким образом, определяли каждую величину IC₅₀.

[0081]

Среди борсодержащих соединений, полученных согласно примерам, соединения, имеющие в качестве R4 койевую кислоту или аминокислоту, продемонстрировали по меньшей мере приблизительно ту же степень цитотоксичности, что и 4-бороно-L-фенилаланин (L-BPA).

[0082]

(Биологическая оценка 2)

Тест захвата борсодержащего соединения в опухолевые клетки

Клетки глиомы крысы (C6) или клетки меланомы (B16) в количестве 1,5×10⁷ клеток высевали и культивировали при комнатной температуре (37°C, 5% CO₂) в течение 24 часов. Культуральную жидкость отбирали всасыванием и добавляли культуральную жидкость, содержавшую 0,2 мМ каждого средства на основе бора, и смесь далее культивировали при комнатной температуре (37°C, 5% CO₂) в течение 24 часов. После отбора культуральной жидкости путем всасывания клетки промывали три раза PBS, а затем обрабатывали трипсином для выделения клеток. Количество выделенных клеток подсчитывали и HClO₄ (60%, 0,3 мл) и H₂O₂ (31%, 0,6 мл) нагревали при 75°C в течение одного часа для получения раствора для озоления. Раствор для озоления фильтровали с использованием мембранного фильтра и внутриклеточную концентрацию бора определяли путем измерения концентрации бора в растворе с использованием ICP-AES.

[0083]

Результаты теста захвата борсодержащих соединений согласно примерам представлены на фиг.1 и 3. В данном случае в качестве контроля для сравнения был выбран 4-бороно-L-фенилаланин (L-BPA), использованный для клинических испытаний BNCT.

[0084]

В результате было обнаружено, что, когда алкильная цепь имеет определенную длину или более, соединение по настоящему изобретению захватывается клетками в большей степени при обработке в более низкой концентрации, по сравнению с BPA. Также, в случае C14 или выше захват средства имеет тенденцию к снижению. Поскольку токсичность средства имеет тенденцию к увеличению пропорционально длине алкильной цепи, можно считать, что среди исследованных соединений длина алкильной цепи особенно предпочтительно составляет от C₆ до C₁₄.

[0085]

Сходный эксперимент проводили с использованием глиомы крысы (F98).

[0086]

В результате, борсодержащее соединение по настоящему изобретению эффективно захватывалось клетками (фиг.2).

[0087]

Другие результаты по захвату основных соединений представлены в таблице 7 ниже. В таблице o означает, что захват выше, чем BPA, Δ: захват приблизительно такой же, как BPA, и ×: захват ниже, чем BPA.

[0088]

[Таблица 7]

Название соединения Структурная формулаСравнение величины захвата в клетках меланомы мыши B16 относительно той же дозы BPAABS01

×ABS02

×ABS03

ABS04

ABS05

ABS06

ASL01

×ASL04

×ASL05

×ASL06

×ASL07

ASL08

ASL09

ASL10

ASL11

KA01

×KA03

×KA04

×KA05

KA06

KA07

KA08

KA09

KA10

AAL01

AAL02

GLC01

GLC02

HQ01

×HQ02

REB01

DBP01

DBP02

CFA01

5ALA01

[0089]

(Биологическая оценка 3) Эффект уничтожения клеток для опухолевых клеток, подвергнутых облучению нейтронным излучением

5,0×10⁶ клеток высевают и культивируют при комнатной температуре (37°C, 5% CO₂) в течение 24 часов. Эту культуральную жидкость отбирают всасыванием, добавляют культуральную жидкость, содержащую 2,0 мМ каждого борсодержащего средства, и смесь далее культивируют при комнатной температуре (37°C, 5% CO₂) в течение 6 часов. После отбора культуральной жидкости всасывание клетки промывали три раза посредством PBS, а затем обрабатывали трипсином для выделения клеток. Выделенные клетки суспендируют в культуральной жидкости, доводят до плотности 5,0×10³ клеток/мл, и 1 мл этой суспензии переносят в пробирку Teflon (зарегистрированный торговый знак). Пробирку Teflon (зарегистрированный торговый знак), содержащую раствор с клетками, облучают термальными нейтронами при от 0 до 4,3×10¹² см^-2, и клетки высевают в 6 мл культуральной жидкости в количестве 300 клеток в каждом случае. После культиврования при комнатной температуре (37°C, 5% CO₂) в течение 9 суток колонию иммобилизуют этанолом и окрашивают 0,1% кристаллическим фиолетовым, и количество колоний подсчитывают для сравнения эффекта уничтожения клеток.

Реферат

Изобретение относится к новому борсодержащему соединению, а именно к соединению, соответствующему следующей формуле 1, или его фармацевтически приемлемой соли, выбранной из соли щелочного металла, соли аммония, соли тетраалкиламмония (NR4+) или соли тетрафенилфосфония:[Формула 1]В формуле 1: черный круг обозначает атом B, белый круг обозначает B-H; -R1обозначает -(CH2)n-X1-R3(n обозначает целое число от 0 до 6; X1обозначает O-CO, или отсутствует; R3обозначает C6-C20алкил, гидрокси C6-C20алкил, амино C6-C20алкил, азидо C6-C20алкил, гидроксикарбонил C6-C20алкил, замещенный, где заместители представляют собой нитро, гидроксил, B(OH)2, или незамещенный фенокси C6-C20алкил, замещенный, где заместитель представляет собой диоксифенилксантен, или незамещенный фенилтиомочевина C6-C20алкил, или незамещенную бензильную группу), или группу, имеющую повторяющуюся последовательность -(CH2)2-O- 3 раза или более и 10 раз или менее и имеющую метильную группу или этильную группу на конце со стороны атома кислорода; -R2обозначает -(CH2)m-X2-R4(m обозначает целое число от 0 до 8; X2обозначает O, NH, NHCO или отсутствует; R4обозначает распознающую опухоль часть, выбранную из группы, состоящей из аминокислоты, амида аминокислоты, 5-аминолевулиновой кислоты, койевой кислоты, гидрохинона, ресвератрола, лиганда TSPO (транслоцирующий белок) типа DPA (ацетамид диметилпиразолoпиримидина), кофеиновой кислоты или ее солей, моносахаридов, и нуклеиновых кислот или их солей). Также предложены способы получения борсодержащих соединений и фармацевтическая композиция. Предложенное борсодержащее соединение может быть использовано для лечения злокачественной опухоли с использованием борнейтронзахватной терапии (BNCT). 5 н. и 8 з.п. ф-лы, 7 табл., 4 пр., 3 ил.

Формула

).

).

).

).

(I)

, включающий стадию реакции соединения, соответствующего