Пиранодипиридиновое соединение - RU2743998C2

Чертежи

Описание

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

[0001] Настоящее изобретение относится к пиранодипиридиновым соединениям, обладающим ингибирующим действием в отношении рецептора α-амино-3-гидрокси-5-метил-4-изоксазолпропионовой кислоты (AMPA), и их фармацевтически приемлемым солям.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[0002] Известно, что глутаминовая кислота, высвобождаемая из пресинаптической области, играет важную роль в передаче сигнала возбуждения в центральной нервной системе. Такое действие обусловлено тем, что глутаминовая кислота связывается с глутаматными рецепторами, присутствующими в постсинаптической области, и глутаматные рецепторы классифицируют на ионотропные рецепторы и сопряженные с G-белком рецепторы, причем первые дополнительно классифицируют на рецептор α-амино-3-гидрокси-5-метил-4-изоксазолпропионовой кислоты (AMPA), рецептор N-метил-D-аспарагиновой кислоты (NMDA), каинатный рецептор и т. п. Среди вышеописанных AMPA-рецептор является рецептором, который в значительной степени экспрессируется в головном мозге и играет ключевую роль в регуляции быстрой синаптической передачи возбуждения или синаптической пластичности.

Таким образом, поскольку AMPA-рецептор играет физиологически важную роль, то его дисфункция, как известно, связана с различными заболеваниями, например, вызывая нарушение возбудимости нейронов, где присутствует AMPA-рецептор. Примеры таких заболеваний включают эпилепсию, различные типы боли (боль периферических нервов, боль центральных нервов и ноцицептивную боль (каждая из которых включает хроническую, острую или периодическую боль)), различные демиелинизирующие заболевания, такие как рассеянный склероз, различные нейродегенеративные заболевания, такие как болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, боковой амиотрофический склероз (ALS), хорея Хантингтона и невропатия при СПИДе, различные психиатрические заболевания, такие как тревога, депрессия, биполярное расстройство настроения, зависимость, злоупотребление лекарственными средствами и шизофрения, нарушение координации движений, такое как ишемия головного мозга, травма головы, цереброспинальное поражение, тремор, дистония и дискинезия, и нарушение развития, такое как аутизм. Следовательно, предполагается, что ингибиторы AMPA-рецептора (ингибиторы AMPA) могут привести к излечению данных заболеваний, а также известно, что они применимы, в частности, при лечении эпилепсии (непатентный литературный источник 1).

Эпилепсия представляет собой одно из наиболее часто встречающихся заболеваний центральной нервной системы, и при этом во всем мире больны эпилепсией приблизительно 50 миллионов или более пациентов. Согласно Всемирной организации здравоохранения эпилепсию определяют как "хроническое заболевание головного мозга, вызванное различными причинами; в основном оно характеризуется повторяющимися припадками (эпилептическими припадками), возникающими из-за чрезмерных электрических разрядов в нейронах мозга, и при этом припадки включают симптомы по клиническим результатам и результатам обследования, которые сильно различаются".

Примеры известных эпилептических припадков включают парциальные припадки, такие как простой парциальный припадок, сложный парциальный припадок и вторично-генерализованный припадок, отсутствие припадка, миоклонические судороги, клонические судороги, тонический припадок, тонико-клонический припадок, атонический припадок, комплекс туберозного склероза, синдром Драве, прогрессирующую миоклоническую эпилепсию, болезнь Лафора, Болезнь Унферрихта-Лундборга, дентаторубро-паллидольюисову атрофию, синдром хрупкой Х-хромосомы, синдром Веста и синдром Леннокса-Гасто. Лечение эпилепсии основывается на фармакотерапии с помощью противоэпилептических лекарственных средств. Целью лечения эпилепсии является устранение эпилептических припадков и предотвращение развития побочных эффектов, вызванных лечением. Лечение с помощью противоэпилептических лекарственных средств в основном начинается с одного лекарственного средства. Обычно лечение с помощью одного лекарственного средства осуществляют с последовательным использованием двух или трех разных лекарственных средств, а если это безуспешно, то предпринимают попытку лечения с помощью нескольких лекарственных средств. Ослабление припадков вследствие лечения с помощью противоэпилептических лекарственных средств можно ожидать у приблизительно 70% пациентов с впервые выявленной эпилепсией. Однако известно, что у оставшихся приблизительно 30% пациентов, эпилептические припадки сложно подавить даже путем медикаментозного лечения, включающего терапию с помощью нескольких лекарственных средств.

Полагают, что эпилептический припадок случается тогда, когда нарушение возбудимости некоторых нейронов превращается в нарушение синхронизации частоты пульсации во всей популяции нейронов, при этом было много сообщений о том, что глутаматные нейроны, в частности AMPA-рецептор, играют ключевую роль в возникновении и развитии эпилептического припадка. Например, сообщалось, что ингибиторы AMPA подавляют возникновение и развитие судорог в крысиных моделях судорог, индуцированных бикукуллином (непатентные литературные источники 2 и 3); кроме того, хорошо известно, что ингибиторы AMPA проявляют сильное противосудорожное действие в широком диапазоне моделей судорог (непатентные литературные источники 4 и 5). Более того, известно, что ингибиторы AMPA также оказывают останавливающее припадки действие на модели с эпилептическим статусом, которые перенесли чрезвычайно сильный и продолжительный припадок, и поэтому предполагается, что ингибиторы AMPA также применимы по отношению к объектам с эпилептическим статусом (непатентный литературный источник 6).

Сообщалось, что у людей подобным образом экспрессия AMPA-рецептора была повышена в гиппокампальных нейронах, образующих эпилептический очаг, образцы которых отбирали у пациентов с эпилепсией (непатентный литературный источник 7). Более того сообщалось, что благодаря противосудорожному действию, оказываемому на людей ингибиторами AMPA-рецептора, предполагается, что они эффективны, в частности, в качестве средств для лечения эпилепсии (непатентный литературный источник 5).

Как описано выше, предполагается, что ингибиторы AMPA станут терапевтическими средствами от различных заболеваний центральной нервной системы, таких как эпилепсия; однако известно, что они оказывают угнетающее действие на центральную нервную систему, такое как седативный эффект или нарушение координации, при дозе, практически эквивалентной или ниже той, при которой проявляется основной эффект (непатентный литературный источник 8). Сообщалось, что угнетающее действие на центральную нервную систему людей уменьшается тогда, когда доза увеличивается постепенно (непатентный литературный источник 9); однако угнетающее действие на центральную нервную систему наблюдается при дозе от средней до высокой, что стало проблемой для пациентов с эпилепсией, нуждающихся в долгосрочном введении, которая заключается в снижении качества жизни, а также приводит к ограничению в отношении дозы.

[0003] Следующее соединение известно как соединение, обладающее ингибирующим действием в отношении AMPA-рецептора (патентный литературный источник 1):

[химическая формула 1]

где каждый из A¹, A² и A³ может независимо представлять собой C_6-14ароматическую углеводородную циклическую группу или 5-14-членную ароматическую гетероциклическую группу; каждый из X¹, X² и X³ может независимо представлять собой одинарную связь; Q может представлять собой атом кислорода; Z может представлять собой атомом углерода; R¹ и R² могут присоединятся друг к другу таким образом, что CR²-ZR¹ образует углерод-углеродную двойную связь, представленную как C=C; и R³ может присоединятся к любому атому на A³ и вместе с атомом может образовывать необязательно замещенное 5-8-членное гетероциклическое кольцо.

В частности, в патентном литературном источнике 1 в качестве примера 9 раскрывается соединение, имеющее трициклическую структуру, представленную формулой:

[химическая формула 2]

Список использованной литературы

Патентная литература

[0004] [Патентный литературный источник 1] WO02/22587

Непатентная литература

[0005] [Непатентный литературный источник 1] Daniela Catarzi et al. Medicinal Research Reviews, vol. 27, № 2, pp. 239-278, 2007.

[Непатентный литературный источник 2] Rogawski MA et al. Acta Neurol Scand Suppl. 2013; (197): 9-18.

[Непатентный литературный источник 3] Alfonso Tortorella et al. JPET 280: 1401-1405, 1997.

[Непатентный литературный источник 4] De Sarro et al. Curr Top Med Chem. 2005; 5 (1): 31-42.

[Непатентный литературный источник 5] Russo E et al. Expert Opin Investig Drugs. 2012 Sep; 21(9): 1371-89.

[Непатентный литературный источник 6] Brita Fritsch et al. Epilepsia, 51 (1): 108-117, 2010.

[Непатентный литературный источник 7] Hosford DA et al. J Neurosci 1991; 11: 428-434.

[Непатентный литературный источник 8] Shun-ichi Yamaguchi et al. Epilepsy Research, 15 (1993) 179-184.

[Непатентный литературный источник 9] Hanada T. Expert Opin Drug Discov. 2014 Feb 24, 9(4): 449-458.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ

[0006] Целью настоящего изобретения является получение нового соединения, характеризующегося потенциалом в применении для лечения эпилепсии, которое обладает ингибирующим действием в отношении AMPA-рецептора и уменьшенным угнетающим действием на центральную нервную систему, или его фармацевтически приемлемой соли.

[0007] Авторы настоящего изобретения продолжили активные поиски для достижения вышеописанной цели и в результате обнаружили новые пиранодипиридиновые соединения, обладающие ингибирующим действием в отношении AMPA-рецептора и уменьшенным угнетающим действием на центральную нервную систему, или их фармацевтически приемлемые соли.

[0008] Если кратко, то настоящее изобретение относится к нижеизложенным пунктам <1> - <24>.

<1> Соединение, выбранное из группы, состоящей из

9-(2-хлорфенил)-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она:

[химическая формула 3]

2-фтор-6-(7-(5-метоксипиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила:

[химическая формула 4]

2-фтор-6-(7-(6-метилпиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила:

[химическая формула 5]

9-(2-хлор-3-фторфенил)-7-(6-метилпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она:

[химическая формула 6]

2-фтор-6-(7-(2-метоксипиримидин-5-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила:

[химическая формула 7]

7-(пиридин-3-ил)-9-(2,3,5,6-тетрафторфенил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она:

[химическая формула 8]

3-(8-оксо-7-(тиофен-3-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиколинонитрила:

[химическая формула 9]

3-(8-оксо-7-(тиофен-3-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиразин-2-карбонитрила:

[химическая формула 10]

9-(2-фторфенил)-7-фенил-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она:

[химическая формула 11]

2-(7-(4-фторфенил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила:

[химическая формула 12]

3-(7-(4-фторфенил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиколинонитрила:

[химическая формула 13]

3-(7-(2-фторфенил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиколинонитрила:

[химическая формула 14]

3-(3-фтор-8-оксо-7-фенил-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиколинонитрила:

[химическая формула 15]

2-фтор-6-(3-фтор-8-оксо-7-(пиридин-3-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила:

[химическая формула 16]

2-фтор-6-(7-(5-фторпиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила:

[химическая формула 17]

2-фтор-6-(10-фтор-3-оксо-4-(пиридин-3-ил)-4,5-дигидро-3H-хромено[3,4-b]пиридин-2-ил)бензонитрила:

[химическая формула 18]

9-(2-хлор-3-фторфенил)-7-(5-фторпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она:

[химическая формула 19]

2-фтор-6-(8-оксо-7-(пиримидин-5-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила:

[химическая формула 20]

3,6-дифтор-2-(8-оксо-7-(пиридин-3-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила:

[химическая формула 21]

2-(7-(5-хлорпиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)-6-фторбензонитрила:

[химическая формула 22]

2-фтор-6-(7-(2-метилпиримидин-5-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила:

[химическая формула 23]

и

9-(3-фтор-2-метилфенил)-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она:

[химическая формула 24]

или его фармацевтически приемлемая соль.

<2> Соединение, выбранное из группы, состоящей из

9-(2-хлорфенил)-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она:

[химическая формула 25]

2-фтор-6-(7-(5-метоксипиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила:

[химическая формула 26]

2-фтор-6-(7-(6-метилпиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила:

[химическая формула 27]

9-(2-хлор-3-фторфенил)-7-(6-метилпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она:

[химическая формула 28]

2-фтор-6-(7-(2-метоксипиримидин-5-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила:

[химическая формула 29]

7-(пиридин-3-ил)-9-(2,3,5,6-тетрафторфенил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она:

[химическая формула 30]

3-(8-оксо-7-(тиофен-3-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиколинонитрила:

[химическая формула 31]

3-(8-оксо-7-(тиофен-3-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиразин-2-карбонитрила:

[химическая формула 32]

9-(2-фторфенил)-7-фенил-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она:

[химическая формула 33]

2-(7-(4-фторфенил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила:

[химическая формула 34]

3-(7-(4-фторфенил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиколинонитрила:

[химическая формула 35]

3-(7-(2-фторфенил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиколинонитрила:

[химическая формула 36]

3-(3-фтор-8-оксо-7-фенил-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиколинонитрила:

[химическая формула 37]

2-фтор-6-(3-фтор-8-оксо-7-(пиридин-3-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила:

[химическая формула 38]

2-фтор-6-(7-(5-фторпиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила:

[химическая формула 39]

2-фтор-6-(10-фтор-3-оксо-4-(пиридин-3-ил)-4,5-дигидро-3H-хромено[3,4-b]пиридин-2-ил)бензонитрила:

[химическая формула 40]

9-(2-хлор-3-фторфенил)-7-(5-фторпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она:

[химическая формула 41]

2-фтор-6-(8-оксо-7-(пиримидин-5-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила:

[химическая формула 42]

3,6-дифтор-2-(8-оксо-7-(пиридин-3-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила:

[химическая формула 43]

2-(7-(5-хлорпиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)-6-фторбензонитрила:

[химическая формула 44]

и

2-фтор-6-(7-(2-метилпиримидин-5-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила:

[химическая формула 45]

или его фармацевтически приемлемая соль.

<3> 9-(2-Хлорфенил)-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-он:

[химическая формула 46]

или его фармацевтически приемлемая соль.

<4> 2-Фтор-6-(7-(6-метилпиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрил:

[химическая формула 47]

или его фармацевтически приемлемая соль.

<5> 9-(2-Хлор-3-фторфенил)-7-(6-метилпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-он:

[химическая формула 48]

или его фармацевтически приемлемая соль.

<6> 2-Фтор-6-(7-(2-метоксипиримидин-5-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрил:

[химическая формула 49]

или его фармацевтически приемлемая соль.

<7> 3-(7-(4-Фторфенил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиколинонитрил:

[химическая формула 50]

или его фармацевтически приемлемая соль.

<8> 3-(3-Фтор-8-оксо-7-фенил-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиколинонитрил:

[химическая формула 51]

или его фармацевтически приемлемая соль.

<9> 2-Фтор-6-(3-фтор-8-оксо-7-(пиридин-3-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрил:

[химическая формула 52]

или его фармацевтически приемлемая соль.

<10> 2-Фтор-6-(8-оксо-7-(пиримидин-5-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрил:

[химическая формула 53]

или его фармацевтически приемлемая соль.

<11> 3,6-Дифтор-2-(8-оксо-7-(пиридин-3-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрил:

[химическая формула 54]

или его фармацевтически приемлемая соль.

<12> 2-Фтор-6-(7-(2-метилпиримидин-5-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрил:

[химическая формула 55]

или его фармацевтически приемлемая соль.

<13> Фармацевтическая композиция, содержащая в качестве активного ингредиента соединение по любому из пунктов <1> - <12> или его фармацевтически приемлемую соль.

<14> Фармацевтическая композиция по пункту <13>, которая является ингибитором AMPA-рецептора.

<15> Фармацевтическая композиция по пункту <13> для лечения эпилепсии.

<16> Фармацевтическая композиция по пункту <15>, где эпилепсия представляет собой парциальную эпилепсию.

<17> Средство для лечения эпилепсии, содержащее соединение по любому из пунктов <1> - <12> или его фармацевтически приемлемую соль.

<18> Средство по пункту <17>, где эпилепсия представляет собой парциальную эпилепсию.

<19> Способ лечения эпилепсии, включающий введение пациенту соединения по любому из пунктов <1> - <12> или его фармацевтически приемлемой соли.

<20> Способ по пункту <19>, где эпилепсия представляет собой парциальную эпилепсию.

<21> Соединение по любому из пунктов <1> - <12> или его фармацевтически приемлемая соль, применяемые для лечения эпилепсии.

<22> Соединение по пункту <21>, где эпилепсия представляет собой парциальную эпилепсию.

<23> Применение соединения по любому из пунктов <1> - <12> или его фармацевтически приемлемой соли для получения средства для лечения эпилепсии.

<24> Применение соединения по пункту <23>, где эпилепсия представляет собой парциальную эпилепсию.

[0009] Пиранодипиридиновые соединения, представленные формулами (I) - (XXII), согласно настоящему изобретению (далее по тексту называемые соединениями (I) - (XXII)) или их фармацевтически приемлемые соли обладают ингибирующим действием в отношении AMPA-рецептора, как показано в данных касательно активности в описанном ниже примере фармакологического испытания, при этом подавляющее действие в отношении судорог и угнетающее действие на центральную нервную систему отделены друг от друга. Соединения (I) - (XXII) согласно настоящему изобретению обладают ингибирующим действием в отношении AMPA-рецептора, и поэтому можно ожидать от них подавления нарушения возбудимости, вызванного глутаминовой кислотой в головном мозге, что приводит к подавлению эпилептических припадков; и более того, соединения (I) - (XXII) согласно настоящему изобретению характеризуются широтой терапевтического действия в отношении угнетающего действия на центральную нервную систему и поэтому являются применимыми в качестве средств для лечения эпилепсии.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

[0010] На фиг. 1 представлена диаграмма, демонстрирующая результаты испытания на способность удерживаться на вращающемся барабане в отношении соединений, полученных согласно примерам 1-4 и 6-13, и контрольного соединения.

На фиг. 2 представлена диаграмма, демонстрирующая результаты испытания на способность удерживаться на вращающемся барабане в отношении соединений, полученных согласно примерам 5 и 14-22, и контрольного соединения.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

[0011] Далее будет подробно описано настоящее изобретение.

[0012] Для удобства в соединениях по настоящему описанию структурная формула может представлять конкретный изомер; однако, соединение не ограничено формулой, показанной для удобства, и включает все структурно возможные изомеры и смеси изомеров соединения, таких как геометрические изомеры, оптические изомеры, ротамеры, стереоизомеры и таутомеры, и может быть либо одним из изомеров, либо смесью, содержащей каждый из изомеров в заданном соотношении. Таким образом, в данном описании соединение может быть представлено, например, оптическими изомерами и рацематом; однако оно не ограничивается любым из них в настоящем описании, причем соединение в настоящем описании может быть рацематом, любым оптически активным веществом или смесью, содержащей каждое из оптически активных веществ в заданном соотношении.

[0013] Кроме того, также могут присутствовать кристаллические полиморфы, хотя настоящее изобретение подобным образом не ограничено любым из них, при этом соединение по настоящему изобретению может быть представлено какой-либо одной из кристаллических форм или их смесью, а также настоящее изобретение включает аморфные формы. Соединение по настоящему изобретению также охватывает ангидриды и сольваты (в частности, гидрат).

[0014] Настоящее изобретение также включает соединения, полученные с помощью изотопной маркировки соединений (I) - (XXII). Такие изотопно меченые соединения идентичны соединениям (I) - (XXII), за исключением того, что один или несколько атомов были заменены атомами, атомная масса и массовое число которых отличаются от тех, что обычно обнаруживают в природе. Примеры изотопов, которые могут быть включены в соединения по настоящему изобретению, включают в себя изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фтора, фосфора, серы, йода и хлора, такие как²H,³H,¹¹C,¹⁴C,¹⁵N,¹⁸O,¹⁸F и³⁵S.

[0015] Вышеупомянутые изотопно меченые соединения, например, соединения, в которые были включены радиоактивные изотопы, такие как³H и/или¹⁴C, пригодны для топографического анализа фармацевтических препаратов и/или субстратов.³H и¹⁴C считаются пригодными, поскольку их легко получать и выявлять. Изотопы¹¹C и¹⁸F считаются пригодными для PET (позитронно-эмиссионной томографии), и все эти изотопы пригодны для визуализации головного мозга. Замещение более тяжелым изотопом, таким как²H, обеспечивает определенные терапевтические преимущества, такие как увеличение периода полураспада in vivo или уменьшение необходимой дозы вследствие более высокой метаболической устойчивости, и поэтому его считают применимым в определенных ситуациях. Вышеупомянутые изотопно меченые соединения могут быть одинаковым образом получены путем осуществления процедур, раскрытых в примерах ниже по тексту, с применением легкодоступных изотопно меченых реагентов вместо реагентов, которые не являются изотопно мечеными.

[0016] Используемое в данном документе выражение "фармацевтически приемлемая соль" не имеет конкретных ограничений при условии, что эта соль образована любым из соединений по настоящему изобретению и может представлять собой, например, соль присоединения кислоты, такую как соль неорганической кислоты, соль органической кислоты или соль кислой аминокислоты.

[0017] Что касается "фармацевтически приемлемой соли" в данном документе, то, если не указано иное, количество молекул кислоты на одну молекулу соединения в образованной соли не имеет конкретных ограничений при условии, что эта соль образуется с соответствующим соотношением; однако, количество молекул кислоты на одну молекулу соединения составляет предпочтительно от приблизительно 0,1 до приблизительно 5, более предпочтительно от приблизительно 0,5 до приблизительно 2 и еще более предпочтительно приблизительно 0,5, приблизительно 1 или приблизительно 2.

[0018] Предпочтительные примеры солей неорганических кислот включают гидрохлорид, гидробромид, сульфат, нитрат и фосфат, а предпочтительные примеры солей органических кислот включают ацетат, сукцинат, фумарат, малеат, тартрат, цитрат, лактат, стеарат, бензоат, метансульфонат, p-толуолсульфонат и бензолсульфонат.

[0019] Предпочтительные примеры солей кислых аминокислот включают аспартат и глутамат.

[0020] Если соединения (I) - (XXII) согласно настоящему изобретению получают в свободной форме, их можно преобразовать в соли, которые могут быть образованы соединениями (I) - (XXII), описанными выше, или их гидратами в соответствии с общепринятым способом.

[0021] Если соединения (I) - (XXII) согласно настоящему изобретению получают в виде солей или гидратов соединений (I) - (XXII), то их можно преобразовать в свободные формы соединений (I) - (XXII), описанных выше, в соответствии с общепринятым способом.

[0022] Более того, различные изомеры, получаемые для соединений по настоящему описанию (например, геометрические изомеры, оптические изомеры, ротамеры, стереоизомеры и таутомеры), можно очищать и выделять с применением обычных способов разделения, например, перекристаллизации, способа получения диастереомерной соли, способа ферментативного расщепления и различных типов хроматографии (например, тонкослойной хроматографии, колоночной хроматографии и газовой хроматографии).

[0023] [Получение]

Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно получить путем смешивания фармацевтически приемлемых добавок с соединением, выбранным из группы соединений (I) - (XXII), или его фармацевтически приемлемой солью. Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно получить согласно известному способу, такому как способ, описанный в General Rules for Preparations of the Japanese Pharmacopoeia 16th Edition.

Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно вводить пациентам соответствующим образом в зависимости от лекарственной формы.

[0024] Доза каждого из соединений (I) - (XXII) согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли будет отличаться в зависимости от тяжести состояния, возраста, пола, массы тела, типа лекарственной формы или соли, конкретной формы заболевания и т. п.; однако, как правило, в случае перорального введения суточная доза для взрослого человека составляет от приблизительно 30 μг до 10 г, предпочтительно от 100 μг до 5 г и более предпочтительно от 100 μг до 1 г, а в случае введения посредством инъекции суточная доза составляет от приблизительно 30 μг до 1 г, предпочтительно от 100 μг до 500 мг и более предпочтительно от 100 μг до 300 мг, при этом каждую дозу вводят в виде однократной дозы или разделенной на несколько доз.

[0025] Соединения по настоящему изобретению можно применять в качестве химических зондов для захвата целевого белка биологически активного низкомолекулярного соединения. В частности, соединения по настоящему изобретению можно преобразовать в зонды для аффинной хроматографии, фотоаффинные зонды или подобные путем введения групп-меток, линкеров или подобного в те части соединений, которые отличны от их структурных частей, необходимых для проявления активности, с помощью методик, описанных, например, в J. Mass Spectrum. Soc. Jpn. Vol. 51, No. 5 2003, p 492-498 или WO 2007/139149.

[0026] Примеры групп-меток, линкеров или подобного, используемых для химических зондов, включают группы, перечисленные в группе, состоящей из (1) - (5) ниже:

(1) группы-метки для белков, такие как фотоаффинные группы-метки (например, бензоильная группа, бензофеноновая группа, азидогруппа, карбонилазидогруппа, диазиридиновая группа, еноновая группа, диазогруппа и нитрогруппа) и химические аффинные группы (например, кетонная группа, в которой альфа-углеродный атом замещен атомом галогена, карбамоильная группа, сложноэфирная группа, алкилтио-группа, α,β-ненасыщенный кетон, сложный эфир или другие акцепторы Михаэля и оксирановая группа);

(2) отщепляемые линкеры, такие как -S-S-, -O-Si-O-, моносахариды (такие как глюкозная группа или галактозная группа) или дисахариды (такие как лактоза), а также олигопептидные линкеры, отщепляемые посредством ферментативных реакций;

(3) группы с меткой для флуоресцентной in situ гибридизации, такие как биотин и 3-(4,4-дифтор-5,7-диметил-4H-3a,4a-диаза-4-бора-s-индацен-3-ил)пропионильная группа;

(4) обнаруживаемые маркеры, например, радиоактивные группы-метки, такие как¹²⁵I,³²P,³H и¹⁴C; флуоресцентные группы-метки, такие как флуоресцеин, родамин, дансил, умбеллиферон, 7-нитрофуразанил и 3-(4,4-дифтор-5,7-диметил-4H-3a,4a-диаза-4-бора-s-индецен-3-ил)пропионильная группа; хемилюминесцентные группы, такие как люциферин и люминол; и ионы тяжелых металлов, такие как ионы металлов-лантаноидов и ионы радия; или

(5) группы, связанные с твердофазными носителями, такими как стеклянные шарики, стеклянные пластины, титровальные микропланшеты, агарозные гранулы, агарозные слои, полистирольные гранулы, полистирольные слои, нейлоновые гранулы и нейлоновые слои.

Зонды, полученные посредством введения в соединения по настоящему изобретению групп-меток или подобного, выбранных из группы, состоящей из вышеуказанных (1) - (5), способом, описанным в вышеуказанных документах или подобных, можно применять в качестве химических зондов для идентификации меченых белков, применимых для поиска мишеней нового лекарственного средства и т. д.

ПРИМЕРЫ

[0027] Соединения (I) - (XXII) по настоящему изобретению можно получить, например, с применением способов, описанных в приведенных далее примерах, и эффекты соединений можно подтверждать с применением способов, описанных в нижеследующем "Примере испытания". Однако следует понимать, что данные примеры являются иллюстративными, и что настоящее изобретение в любом случае не ограничивается следующими конкретными примерами, и к тому же можно осуществлять модификации, не выходя за объем настоящего изобретения.

[0028] Соединения, для которых указаны названия из документов или т. п., получали в соответствии с приведенными в данных документах сведениям или т. п.

[0029] Сокращения, применяемые в данном документе, представляют собой общепринятые сокращения, хорошо известные специалисту в данной области. В данном документе будут использованы следующие сокращения:

AIBN: 2,2'-азобис(изобутиронитрил)

(Ataphos)₂PdCl₂: бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(II)

DCM: дихлорметан

DIAD: диизопропилазодикарбоксилат

диглим: 1-метокси-2-(2-метоксиэтокси)этан

DME: 1,2-диметоксиэтан

DMEAD: ди-2-метоксиэтил азодикарбоксилат

DMF: N,N-диметилформамид

DMSO: диметилсульфоксид

EDC: 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида гидрохлорид

IPA: изопропиловый спирт

mCPBA: 3-хлорпербензойная кислота

MTBE: 2-метокси-2-метилпропан

н-: нормальный

NBS: N-бромсукцинимид

NMP: N-метил-2-пирролидинон

Pd(PPh₃)₄: тетракис(трифенилфосфин)палладий(0)

Pd(dppf)Cl₂: (1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен)дихлорпалладий(II)

трет-: третичный

TBAF: третрабутиламмония фторид

TFA: трифторуксусная кислота

THF: тетрагидрофуран

¹H-ЯМР: спектрометрия на основе протонного ядерного магнитного резонанса

MS: масс-спектрометрия

[0030] В приведенных далее примерах, примерах, на которые делается ссылка, и примерах получения "комнатная температура", как правило, составляет от приблизительно 10°C до приблизительно 35°C. «%» относится к проценту по весу, если не указано иное.

[0031] Химические сдвиги спектров протонного ядерного магнитного резонанса регистрируются в единицах измерения δ (ppm) относительно тетраметилсилана, а константы взаимодействия регистрируются в герцах (Гц). Сокращения паттернов расщепления являются следующими:

s: синглет; d: дублет; t: триплет; q: квартет; m: мультиплет; br.s: широкий синглет.

[0032] Для реакций с использованием микроволнового реактора из примеров получения, примеров, на которые делается ссылка, и других примеров применяли Initiator^TM или Initiator+^TM от Biotage Corporation.

[0033] В случае хроматографии как силикагель использовали Silica Gel60 (70-230 меш ASTM) от Merck Corporation или PSQ60B от Fuji Silysia Chemical Ltd. или предварительно упакованную колонку {колонка: Hi-Flash^TM Column (Silicagel) от Yamazen Corporation, размер: любой из S (16 × 60 мм), M (20 × 75 мм), L (26 × 100 мм), 2L (26 × 150 мм) и 3L (46 × 130 мм); или использовали Biotage^TM SNAP Ultra Silica Cartridge от Biotage Corporation, размер: любой из 10 г, 25 г и 50 г}.

В качестве NH-силикагеля использовали CHROMATOREX NH-DM2035 от Fuji Silysia Chemical Ltd. или предварительно упакованную колонку (колонка: Hi-Flash^TM Column (Amino) от Yamazen Corporation, размер: любой из S (16 × 60 мм), M (20 × 75 мм), L (26 × 100 мм), 2L (26 × 150 мм) и 3L (46 × 130 мм); или использовали Presep^TM (Luer Lock) NH2 (HC) от Wako Pure Chemical Industries, Ltd., размер: любой из типа M (14 г/25 мл), типа L (34 г/70 мл), типа 2L (50 г/100 мл) и типа 3L (110 г/200 мл)}.

В качестве нейтральной окиси алюминия использовали активный нейтральный оксид алюминия 90, 70-230 меш, Merck, E6NXX.

[0034] В качестве названий соединений, показанных ниже, использовали названия, выведенные на экран «E-Notebook» версии 12 (PerkinElmer Co., Ltd.), за исключением обычно используемых реагентов.

[0035] Пример получения 1

Синтез 6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

[Химическая формула 56]

(1) Синтез (3-бром-6-метоксипиридин-2-ил)метилацетата

3-Бром-6-метокси-2-метилпиридин (CAS № 126717-59-7) (4,87 кг, 24,1 моль, 1 эквивалент) растворяли в хлороформе (25 л) и охлаждали до 0-10°C. В раствор добавляли 65% mCPBA (8,32 кг, 31,3 моль, 1,3 эквивалента) и полученную суспензию нагревали при 40-50°C в течение 10 часов. Реакционную смесь охлаждали до 10°C и перемешивали в течение 15 минут. Данную суспензию фильтровали и остаток промывали хлороформом (20 л). Объединенные фильтраты сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. К полученному фильтрату добавляли уксусный ангидрид (12,2 л, 129 моль, 5,4 эквивалента) при комнатной температуре и смесь нагревали и перемешивали при 65-70°C в течение 12 часов. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. К реакционной смеси добавляли метанол (35 л) и смесь перемешивали в течение 2 часов. Данную реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли н-гексан (40 л) и воду (30 л) и смесь перемешивали в течение 30 минут. Ее фильтровали и остаток промывали н-гексаном (15 л). Все фильтраты объединяли и водный слой отделяли. Органический слой последовательно промывали водой (2×30 л) и 10% водным раствором гидрокарбоната натрия (25 л). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и отфильтрованный раствор концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (10% этилацетат/н-гексан) с получением указанного в заголовке соединения (2,34 кг).

[0036] (2) Синтез (6-метокси-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)метилацетата

Смешанный раствор (3-бром-6-метоксипиридин-2-ил)метилацетата (1,0 кг, 3,85 моль, 1 эквивалент), бис(пинаколато)диборана (1,47 кг, 5,79 моль, 1,5 эквивалента) и ацетата калия (1,14 кг, 11,6 моль, 3 эквивалента) в DMSO (200 мл) и 1,4-диоксана (10 л) барботировали аргоном в течение 20 минут. В раствор добавляли Pd(dppf)Cl₂ (141 г, 193 ммоль, 0,05 эквивалента) и барботировали аргон через раствор в течение дополнительных 10 минут. Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 16 часов, затем охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли воду и н-гексан и смесь фильтровали через Celite^TM. Органический и водный слои фильтрата разделяли и водный слой снова экстрагировали н-гексаном. Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия и отфильтрованный раствор концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (1,80 кг) в виде неочищенного продукта. Данный неочищенный продукт использовали для следующей реакции без дополнительной очистки.

[0037] (3) Синтез (3-(бензилокси)-6'-метокси-[2,3'-бипиридин]-2'-ил)метанола

Смесь 3-(бензилокси)-2-бромпиридина (CAS № 132330-98-4) (900 г, 3410 ммоль), (6-метокси-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)метилацетата (1,80 кг), карбоната цезия (2,22 кг, 6,81 моль), DME (18 л) и воды (1,8 л) барботировали аргоном в течение 20 минут. В раствор добавляли Pd(PPh₃)₄ (80 г, 69,2 ммоль) и барботировали аргон через раствор в течение дополнительных 10 минут. Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 18 часов, затем охлаждали до 60°C и добавляли воду (5 л) и 6 н. водный раствор гидроксида натрия (5 л). Данный раствор перемешивали при 50-60°C в течение 2 часов и охлаждали до комнатной температуры. В реакционную смесь добавляли этилацетат (10 л) и разделяли органический и водный слои. Органический слой экстрагировали 2 M хлористоводородной кислотой (2×5 л). Данный водный слой подщелачивали 6 н. водным раствором гидроксида натрия (5 л) и экстрагировали этилацетатом (3×5 л). Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали, затем полученный раствор концентрировали при пониженном давлении до приблизительно половины исходного объема раствора. К данному раствору добавляли активированный уголь, смесь нагревали с обратным холодильником в течение 30 минут и охлаждали до комнатной температуры, затем фильтровали через Celite^TM. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток перемешивали в растворе 2% MTBE в н-гексане в течение ночи и полученные твердые вещества собирали фильтрованием с получением указанного в заголовке соединения (760 г).

[0038] (4) Синтез 2'-(гидроксиметил)-6'-метокси-[2,3'-бипиридин]-3-ола

В 5 л реактор высокого давления из нержавеющей стали загружали суспензию из 10% палладия на угле (содержание воды 50%) (33,0 г) в этаноле (3,3 л) в атмосфере азота. В суспензию медленно добавляли (3-(бензилокси)-6'-метокси-[2,3'-бипиридин]-2'-ил)метанол (330 г, 1020 ммоль). Реакционную смесь гидрогенизировали при комнатной температуре под давлением 150 psi в течение 20 часов. После завершения реакции реакционный сосуд продували азотом. Реакционную смесь фильтровали через Celite^TM, а остаток промывали метанолом (2,5 л). Объединенные фильтраты концентрировали при пониженном давлении, полученный остаток суспендировали в н-гексане и полученный в результате продукт фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (225 г).

[0039] (5) Синтез 6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

В раствор 2'-(гидроксиметил)-6'-метокси-[2,3'-бипиридин]-3-ола (225 г, 969 ммоль, 1 эквивалент) и трифенилфосфина (308 г, 1170 ммоль, 1,2 эквивалента) в DCM (4,5 л) по каплям добавляли DIAD (230 мл, 1180 ммоль, 1,2 эквивалента) при 0-10°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем добавляли DCM и воду и отделяли органический слой. Водный слой снова экстрагировали DCM. Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли 1,4-диоксан (2,25 л) и концентрированную хлористоводородную кислоту (1,13 л). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи, затем перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут и осадок собирали фильтрованием. К полученному твердому веществу добавляли воду (2,5 л) и водный раствор аммиака (250 мл), смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут и осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество перемешивали в ацетоне (1 л) при комнатной температуре в течение 30 минут и осадок собирали фильтрованием. Полученное в результате твердое вещество сушили с получением указанного в заголовке соединения (160 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ (ppm): 5,15 (s, 2H), 6,35-6,55 (m, 1H), 7,12-7,18 (m, 1H), 7,25-7,32 (m, 1H), 8,03-8.13 (m, 1H), 8,13-8,21 (m, 1H), 11,82 (br. s, 1H).

[0040] Пример получения 2

Синтез 9-бром-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

[Химическая формула 57]

(1) Синтез 7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8 (7H)-она

В смесь 6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она, полученного согласно примеру получения 1 (4 г, 20,0 ммоль, 1 эквивалент), карбоната серебра (6,61 г, 24,0 ммоль, 1,2 эквивалента), йодида меди(I) (2,28 г, 12,0 ммоль, 0,6 эквивалента), пиридина (9,7 мл, 120 ммоль, 6 эквивалентов) и DMF (100 мл) медленно добавляли суспензию циклического сложного 1,3-пропандиолового эфира пиридин-3-бороновой кислоты (CAS № 131534-65-1) (9,77 г, 59,9 ммоль, 3 эквивалента) в DMF (100 мл) при 65°C в атмосфере кислорода. Реакционную смесь перемешивали при 65°C в течение ночи. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли NH-силикагель. Смесь фильтровали через Celite^TM и остаток промывали хлороформом. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель на силикагеле, 10%-100% этилацетат/н-гептан, 5% метанол/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (610 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,65 (d, J=15,4 Гц, 1H), 4,79 (d, J=15,4 Гц, 1H), 6,74-6,81 (m, 1H), 7,06-7,18 (m, 2H), 7,49-7,59 (m, 1H), 7,64-7,74 (m, 1H), 8,21-8,30 (m, 1H), 8,32-8,38 (m, 1H), 8,51-8,56 (m, 1H), 8,75-8,82 (m, 1H).

[0041] (2) Синтез 9-бром-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (300 мг, 1,08 ммоль, 1 эквивалент), NBS (231 мг, 1,30 ммоль, 1,2 эквивалента) и DMF (9 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. В реакционную смесь добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 5%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (277 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,59-4,66 (m, 1H), 4,72-4,79 (m, 1H), 7,10-7,14 (m, 1H), 7,15-7,19 (m, 1H), 7,53-7,58 (m, 1H), 7,66-7,71 (m, 1H), 8,26 (dd, J=4,6, 1,7 Гц, 1H), 8,52-8,55 (m, 1H), 8,78 (s, 1H), 8,80 (dd, J=4,8, 1,7 Гц, 1H).

[0042] Пример получения 3

Синтез 9-бром-7-(тиофен-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

[Химическая формула 58]

(1) Синтез 7-(тиофен-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она, полученного согласно примеру получения 1 (1 г, 5,00 ммоль, 1 эквивалент), тиофен-3-бороновой кислоты (CAS № 6165-69-1) (1,28 г, 9,99 ммоль, 2 эквивалента), карбоната серебра (1,65 г, 5,99 ммоль, 1,2 эквивалента), йодида меди(I) (571 мг, 3,00 ммоль, 0,6 эквивалента), пиридина (2,42 мл, 30,0 ммоль, 6 эквивалентов) и DMF (40 мл) перемешивали при 70°C в течение 3 дней. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, затем наносили на силикагелевую подушку (NH-силикагель и силикагель) и элюировали этилацетатом. Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель на силикагеле, 10%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (129 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,79 (br. s, 2H), 6,71-6,77 (m, 1H), 7,04-7,07 (m, 1H), 7,07-7,10 (m, 1H), 7,11-7,17 (m, 1H), 7,28-7,32 (m, 1H), 7,50-7,56 (m, 1H), 8,21-8,25 (m, 1H), 8,26-8,31 (m, 1H).

MS [M+H]⁺=283

[0043] (2) Синтез 9-бром-7-(тиофен-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 7-(тиофен-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (129 мг, 0,457 ммоль, 1 эквивалент), NBS (98 мг, 0,548 ммоль, 1,2 эквивалента) и DMF (3 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. В реакционную смесь добавляли лед и воду. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, затем осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали водой и н-гептаном с получением указанного в заголовке соединения (132 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,77 (br. s, 2H), 7,03-7,06 (m, 1H), 7,08-7,12 (m, 1H), 7,13-7,17 (m, 1H), 7,29-7,33 (m, 1H), 7,51-7,56 (m, 1H), 8,21-8,26 (m, 1H), 8,72 (s, 1H).

MS [M+Na]⁺=383

[0044] Пример получения 4

Синтез 9-бром-7-(4-фторфенил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

[Химическая формула 59]

(1) Синтез 9-бром-7-(4-фторфенил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она, полученного согласно примеру получения 1 (5 г, 25,0 ммоль, 1 эквивалент), 4-фторбензолбороновой кислоты (CAS № 1765-93-1) (8,39 г, 59,9 ммоль, 2,4 эквивалента), карбоната серебра (8,26 г, 30,0 ммоль, 1,2 эквивалента), йодида меди(I) (2,85 г, 15,0 ммоль, 0,6 эквивалента), пиридина (12,1 мл, 150 ммоль, 6 эквивалентов) и DMF (200 мл) перемешивали при 70°C в атмосфере кислорода в течение 3 дней. Реакционную смесь непосредственно наносили на силикагелевую подушку (NH-силикагель) и элюировали этилацетатом. Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в хлороформе. В раствор добавляли NH-силикагель и смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, 10%-100% этилацетат/н-гептан). Полученное соединение растворяли в DMF (50 мл). В раствор добавляли NBS (4,01 г, 22,5 ммоль, 0,9 эквивалента) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. В реакционную смесь добавляли лед и воду. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, а затем осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали водой и н-гептаном с получением указанного в заголовке соединения (4,81 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,68 (s, 2H), 7,08-7,13 (m, 1H), 7,13-7,17 (m, 1H), 7,23-7,27 (m, 4H), 8,25 (dd, J=4,7, 1,6 Гц, 1H), 8,75 (s, 1H).

MS [M+Na]⁺=395

[0045] Пример получения 5

Синтез трибутил(2,6-дифторфенил)станнана

[Химическая формула 60]

(1) Синтез трибутил(2,6-дифторфенил)станнана

В раствор 1-бром-2,6-дифторбензола (CAS № 64248-56-2) (5,15 г, 26,7 ммоль, 1 эквивалент) в THF (100 мл) добавляли н-бутиллитий (2,65 M раствор в н-гексане, 11,6 мл, 30,7 ммоль, 1,15 эквивалента) при -78°C. Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 30 минут. В реакционную смесь добавляли три-н-бутилолова хлорид (8,69 мл, 32,0 ммоль, 1,2 эквивалента). Реакционной смеси давали нагреться до комнатной температуры на протяжении 2 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли воду и смесь экстрагировали DCM. Органический слой концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (9,38 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 0,83-0,93 (m, 9H), 1,08-1,24 (m, 6H), 1,27-1,38 (m, 6H), 1,46-1,62 (m, 6H), 6,77-6,84 (m, 2H), 7,21-7,30 (m, 1H).

[0046] Пример получения 6

Синтез трибутил(2,3,5,6-тетрафторфенил)станнана

[Химическая формула 61]

(1) Синтез трибутил(2,3,5,6-тетрафторфенил)станнана

В раствор 1-бром-2,3,5,6-тетрафторбензол (CAS № 1559-88-2) (1 г, 4,37 ммоль, 1 эквивалент) в THF (20 мл) добавляли н-бутиллитий (2,65 M раствор в н-гексане, 1,81 мл, 4,80 ммоль, 1,1 эквивалента) при -78°C. Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 30 минут. В реакционную смесь добавляли три-н-бутилолова хлорид (1,42 мл, 5,24 ммоль, 1,2 эквивалента). Реакционной смеси давали нагреться до комнатной температуры на протяжении 3 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли воду и смесь экстрагировали DCM. Органический слой концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (1,49 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 0,84-0,93 (m, 9H), 1,17-1,39 (m, 12H), 1,46-1,63 (m, 6H), 6,92-7,02 (m, 1H).

[0047] Пример получения 7

Синтез 3-(метоксиметокси)-2-(трибутилстаннил)пиридина

[Химическая формула 62]

(1) Синтез 2-йод-3-(метоксиметокси)пиридина

В раствор 2-йод-3-гидроксипиридина (CAS № 40263-57-8) (9,67 г, 43,8 ммоль, 1 эквивалент) в THF (200 мл) добавляли гидрид натрия (60% масляная дисперсия, 1,93 г, 48,1 ммоль, 1,1 эквивалента) при 0°C и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 10 минут. В раствор добавляли хлорметилметиловый эфир (3,66 мл, 48,1 ммоль, 1,1 эквивалента) и смесь перемешивали при 0°C в течение 10 минут и при комнатной температуре в течение 1 часа. В реакционную смесь добавляли воду, а затем смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток экстрагировали хлороформом и органический слой концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, 0%-40% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (9,9 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 3,52 (s, 3H), 5,27 (s, 2H), 7,18 (dd, J=8,2, 4,5 Гц, 1H), 7,28 (dd, J=8,2, 1,6 Гц, 1H), 8,06 (dd, J=4,5, 1,6 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=266

[0048] (2) Синтез 3-(метоксиметокси)-2-(трибутилстаннил)пиридина

В раствор н-бутиллития (2,69 M раствор в н-гексане, 27,8 мл, 74,7 ммоль, 2 эквивалента) в THF (150 мл) добавляли раствор 2-йод-3-(метоксиметокси)пиридина (9,9 г, 37,4 ммоль, 1 эквивалент) в THF (30 мл) при -78°C. Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 20 минут. В реакционную смесь добавляли три-н-бутилолова хлорид (11,2 мл, 41,1 ммоль, 1,1 эквивалента). Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 40 минут и при комнатной температуре в течение 1,5 часа. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток экстрагировали DCM. Органический слой концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали нейтральной окисью алюминия (н-гептан). Полученный неочищенный продукт снова очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, 0%-10% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (11,4 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 0,84-0,91 (m, 9H), 1,04-1,22 (m, 6H), 1,26-1,38 (m, 6H), 1,46-1,64 (m, 6H), 3,47 (s, 3H), 5,16 (s, 2H), 7,05-7,11 (m, 1H), 7,23-7,26 (m, 1H), 8,40-8,44 (m, 1H).

MS [M+H]⁺=430

[0049] Пример получения 8

Синтез 6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

[Химическая формула 63]

(1) Синтез (3-бром-6-метоксипиридин-2-ил)метанола

В раствор 3-бром-6-метокси-2-метилпиридина (CAS № 126717-59-7) (5,5 г, 27,2 ммоль, 1 эквивалент) в хлороформе (100 мл) добавляли 65% mCPBA (10,8 г, 40,8 ммоль, 1,5 эквивалента) при 0°C. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 24 часов. В реакционную смесь добавляли водный раствор пентагидрата тиосульфата натрия и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и смесь экстрагировали хлороформом. Полученный органический слой сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 0%-20% метанол/этилацетат). Полученное соединение перемешивали в уксусном ангидриде (20 мл) при 120°C в течение 3 часов. В реакционную смесь добавляли метанол и смесь концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 20%-75% этилацетат/н-гептан). К полученному соединению в метаноле (22 мл) добавляли карбонат калия (1 M водный раствор, 10,4 мл) при комнатной температуре. После перемешивания при той же температуре в течение 1 часа реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли воду и смесь экстрагировали хлороформом. Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (1,75 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 3,97 (s, 3H), 4,03 (t, J=4,7 Гц, 1H), 4,68 (dd, J=4,7, 0,8 Гц, 2H), 6,57-6,64 (m, 1H), 7,69 (d, J=8,6 Гц, 1H).

[0050] (2) Синтез 3-бром-2-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-6-метоксипиридина

В раствор (3-бром-6-метоксипиридин-2-ил)метанола (1,75 г, 8,03 ммоль, 1 эквивалент) в DCM последовательно добавляли трет-бутилдиметилхлорсилан (1,45 г, 9,63 ммоль, 1,2 эквивалента) и имидазол (0,656 г, 9,63 ммоль, 1,2 эквивалента) при комнатной температуре. После перемешивания при той же температуре в течение 3 часов в реакционную смесь добавляли воду и смесь экстрагировали DCM. Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 5%-25% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (2,36 г).

MS [M+H]⁺=332

[0051] (3) Синтез (2-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-6-метоксипиридин-3-ил)бороновой кислоты

В смесь 3-бром-2-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-6-метоксипиридина (12 г, 36,1 ммоль, 1 эквивалент), DMSO (24 мл) и 1,4-диоксана (144 мл) последовательно добавляли ацетат калия (10,6 г, 108 ммоль, 3 эквивалента) и бис(пинаколато)диборан (16,1 г, 63,2 ммоль, 1,75 эквивалента) при комнатной температуре. После дегазации добавляли Pd(dppf)Cl₂ (1,32 г, 1,81 ммоль, 0,05 эквивалента). Реакционную смесь перемешивали при 80-85°C в течение 20 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли воду и смесь экстрагировали DCM. Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 4,8%-25% этилацетат/н-гептан) с получением неочищенного продукта (20 г). Для следующей реакции использовали 12 г полученного неочищенного продукта. В смесь неочищенного продукта (12 г), ацетата аммония (12,2 г, 158 ммоль), ацетона (200 мл) и воды (100 мл) добавляли перйодат натрия (33,8 г, 158 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания при той же температуре в течение ночи реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли воду и смесь экстрагировали DCM. Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 5%-25% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (5,5 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 0,10 (s, 6H), 0,89 (s, 9H), 3,94 (s, 3H), 4,84 (s, 2H), 6,60-6,85 (m, 3H), 8,06-8,13 (m, 1H).

[0052] (4) Синтез (3-(бензилокси)-6'-метокси-[2,3'-бипиридин]-2'-ил)метанола

К водному раствору (2-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-6-метоксипиридин-3-ил)бороновой кислоты (10,5 г, 35,4 ммоль, 1,1 эквивалента) и 3-(бензилокси)-2-бромпиридина (CAS № 132330-98-4) (8,5 г, 32,2 ммоль, 1 эквивалент) в 1,4-диоксане последовательно добавляли карбонат цезия (12,6 г, 38,6 ммоль, 1,2 эквивалента) и Pd(PPh₃)₄ (1,86 г, 1,61 ммоль, 0,05 эквивалента) при комнатной температуре. После перемешивания при той же температуре в течение 10 минут реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 18 часов. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток наносили на силикагелевую подушку (NH-силикагель) и элюировали этилацетатом. Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении. В раствор полученного соединения в THF добавляли TBAF (1 M раствор в THF, 40,2 мл, 40,2 ммоль, 1,25 эквивалента) при комнатной температуре. После перемешивания в течение 3 часов реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 5%-67% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (11 г).

[0053] (4-2) Синтез (3-(бензилокси)-6'-метокси-[2,3'-бипиридин]-2'-ил)метанола

В смесь (2-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-6-метоксипиридин-3-ил)бороновой кислоты (19,4 г, 65,2 ммоль, 1,1 эквивалента), 3-(бензилокси)-2-бромпиридина (CAS № 132330-98-4) (15,7 г, 59,3 ммоль, 1 эквивалент), 1,4-диоксана (200 мл) и воды (20 мл) последовательно добавляли карбонат цезия (23,2 г, 71,1 ммоль, 1,2 эквивалента) и Pd(PPh₃)₄ (3,43 г, 2,96 ммоль, 0,05 эквивалента) при комнатной температуре. После перемешивания при той же температуре в течение 10 минут реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 18 часов. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток наносили на силикагелевую подушку (NH-силикагель) и элюировали этилацетатом. Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении. В раствор полученного соединения в THF (150 мл) добавляли TBAF (1 M раствор в THF, 71,1 мл, 71,1 ммоль, 1,2 эквивалента) при комнатной температуре. После перемешивания в течение 4 часов реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 50%-67% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (20,3 г).

[0054] (5) Синтез 2'-(гидроксиметил)-6'-метокси-[2,3'-бипиридин]-3-ола

В раствор (3-(бензилокси)-6'-метокси-[2,3'-бипиридин]-2'-ил)метанола (11 г, 34,1 ммоль) в этилацетате добавляли 10% палладия на угле (содержание воды 50%) (3 г) при комнатной температуре в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали в атмосфере водорода в течение 1 часа. Реакционную смесь фильтровали через Celite^TM и остаток промывали этилацетатом. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 10%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (8 г).

[0055] (6) Синтез 8-метокси-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридина

В раствор 2'-(гидроксиметил)-6'-метокси-[2,3'-бипиридин]-3-ола (8 г, 34,4 ммоль, 1 эквивалент) в THF последовательно добавляли трифенилфосфин (9,94 г, 37,9 ммоль, 1,1 эквивалента) и DMEAD (8,87 г, 37,9 ммоль, 1,1 эквивалента) при 0°C. После перемешивания при той же температуре в течение 30 минут реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 10%-67% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (5,53 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 3,96 (s, 3H), 5,24 (s, 2H), 6,79 (d, J=8,6 Гц, 1H), 7,10 (dd, J=8,2, 4,7 Гц, 1H), 7,21 (dd, J=8,2, 1,2 Гц, 1H), 8,23 (dd, J=4,7, 1,2 Гц, 1H), 8,34 (d, J=8,6 Гц, 1H).

[0056] (7) Синтез 6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 8-метокси-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридина (5,4 г, 25,2 ммоль, 1 эквивалент) и пиридина гидрохлорида (29,1 г, 252 ммоль, 10 эквивалентов) перемешивали при 150°C в течение 1 часа. В реакционную смесь добавляли воду и осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали водой и сушили с получением указанного в заголовке соединения (3,8 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ (ppm): 5,15 (s, 2H), 6,35-6,55 (m, 1H), 7,12-7,18 (m, 1H), 7,25-7,32 (m, 1H), 8,03-8,13 (m, 1H), 8,13-8,21 (m, 1H), 11,90 (br. s, 1H).

[0057] Пример получения 9

Синтез бензил(3-(3-(бензилокси)пиридин-2-ил)-4-метокси-2-оксобут-3-ен-1-ил)карбоната (смесь E/Z)

[Химическая формула 64]

(1) Синтез 2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-1-морфолиноэтанона

Смесь 2,3,4,6,7,8-гексагидро-1H-пиримидо[1,2-a]пиримидина (1,91 г, 13,7 ммоль, 0,3 эквивалента), этил-2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)ацетата (стр. 27 в дополнительной информации к Journal of the American Chemical Society, 2011, 133(35), 14082-14089) (CAS № 67226-78-2) (10 г, 45,8 ммоль, 1 эквивалент), морфолина (4,41 мл, 50,4 ммоль, 1,1 эквивалента) и 2-метилтетрагидрофурана (50 мл) перемешивали при 60°C в течение ночи. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, а затем последовательно промывали 5% водным раствором хлорида аммония и водой. Раствор концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (10,4 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 0,11 (s, 6H), 0,90 (s, 9H), 3,54-3,74 (m, 8H), 4,29 (s, 2H).

MS [M+H]⁺=260

[0058] (2) Синтез 1-(3-(бензилокси)пиридин-2-ил)-3-гидроксипропан-2-она

В раствор 3-(бензилокси)-2-метилпиридина (стр. 22 в дополнительной информации к Journal of Medicinal Chemistry, 2008, 51(15), 4708-4714) (CAS № 177559-01-2) (4,4 г, 22,1 ммоль, 1 эквивалент) в 2-метилтетрагидрофуране (44 мл) добавляли н-бутиллитий (2,65 M раствор в н-гексане, 10,0 мл, 26,5 ммоль, 1,2 эквивалента) при -78°C. Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 1 часа. Реакционную смесь по каплям добавляли в раствор 2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-1-морфолиноэтанона (6,87 г, 26,5 ммоль, 1,2 эквивалента) в 2-метилтетрагидрофуране (13,2 мл) при -78°C. Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 30 минут. В реакционную смесь добавляли 5% водный раствор хлорида аммония и смеси давали нагреться до комнатной температуры. Отделяли органический слой. Полученный органический слой промывали 5% водным раствором хлорида аммония. В полученный органический слой добавляли 2 н. хлористоводородную кислоту (26,4 мл, 52,8 ммоль, 2,39 эквивалента) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Отделяли водный слой. Полученный водный слой нейтрализовали 2 н. водным раствором гидроксида натрия и экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили над сульфатом натрия и фильтровали, а затем полученный раствор концентрировали при пониженном давлении при 60°C настолько, чтобы его объем равнялся примерно пяти объемам использованного 3-(бензилокси)-2-метилпиридина. Оставшийся раствор охлаждали до комнатной температуры. К этой смеси добавляли н-гептан (50 мл). Осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали MTBE с получением указанного в заголовке соединения (3,53 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 3,48 (br. s, 1H), 4,03 (s, 2H), 4,28 (s, 2H), 5,08 (s, 2H), 7,12-7,25 (m, 2H), 7,30-7,55 (m, 5H), 8,16 (dd, J=4,7, 1,6 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=258

[0059] (3) Синтез бензил(3-(3-(бензилокси)пиридин-2-ил)-2-оксопропил)карбоната

В раствор 1-(3-(бензилокси)пиридин-2-ил)-3-гидроксипропан-2-она (21 г, 81,6 ммоль, 1 эквивалент) в THF (210 мл) добавляли пиридин (8,58 мл, 106 ммоль, 1,3 эквивалента) и 1-карбобензокси-3-метилимидазолия трифлат (CAS № 163080-99-7) (35,9 г, 97,9 ммоль, 1,2 эквивалента) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов, затем добавляли MTBE, уксусную кислоту (8,5 мл) и воду и отделяли органический слой. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (33 г) в виде неочищенного продукта. Данный неочищенный продукт использовали для следующей реакции без дополнительной очистки.

MS [M+H]⁺=392

[0060] (4) Синтез бензил(3-(3-(бензилокси)пиридин-2-ил)-4-метокси-2-оксобут-3-ен-1-ил)карбоната (смесь E/Z)

В смесь бензил(3-(3-(бензилокси)пиридин-2-ил)-2-оксопропил)карбоната (33 г) и триметилортоформиата (CAS № 149-73-5) (66 мл, 603 ммоль) добавляли уксусный ангидрид (132 мл, 1,40 моль) и уксусную кислоту (66 мл, 1,15 моль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при 70°C в течение 3 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 15%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (29,2 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 3,84 (s, 0,85×3H), 3,94 (s, 0,15×3H), 4,74 (s, 0,85×2H), 5,04 (s, 0,15×2H), 5,10 (s, 0,85×2H), 5,11 (s, 0,15×2H), 5,17 (s, 0,85×2H), 5,19 (s, 0,15×2H), 7,10-7,43 (m, 0,85×12H и 0,15×13H), 7,64 (s, 0,85×1H), 8,15 (dd, J=4,0, 2,2 Гц, 0,15×1H), 8,27 (dd, J=4,8, 1,5 Гц, 0,85×1H).

MS [M+H]⁺=434

[0061] Пример 1

Синтез 9-(2-хлорфенил)-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

[Химическая формула 65]

(1) Синтез 9-(2-хлорфенил)-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 9-бром-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она, полученного согласно примеру получения 2 (44,8 мг, 0,126 ммоль, 1 эквивалент), 2-хлорфенилбороновой кислоты (CAS № 3900-89-8) (49,2 мг, 0,314 ммоль, 2,5 эквивалента), Pd(PPh₃)₄ (15 мг, 0,013 ммоль, 0,1 эквивалента), карбоната цезия (61,5 мг, 0,189 ммоль, 1,5 эквивалента) и 1,4-диоксана (2 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 110°C в течение 2 часов. В реакционную смесь добавляли воду и смесь разделяли и экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (50%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (36,7 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,73 (d, J=15,4 Гц, 1H), 4,87 (d, J=15,4 Гц, 1H), 7,09-7,14 (m, 1H), 7,16-7,20 (m, 1H), 7,29-7,34 (m, 2H), 7,42-7,49 (m, 2H), 7,52-7,57 (m, 1H), 7,73-7,78 (m, 1H), 8,24 (dd, J=4,7, 1,6 Гц, 1H), 8,43 (s, 1H), 8,58-8,61 (m, 1H), 8,78 (dd, J=4,9, 1,6 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=388

[0062] Пример 2

Синтез 2-фтор-6-(7-(5-метоксипиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила

[Химическая формула 66]

(1) Синтез 7-(5-метоксипиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

В раствор 6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она, полученного согласно примеру получения 1 (500 мг, 2,50 ммоль, 1 эквивалент), в DMF последовательно добавляли пиридин (1,21 мл, 15,0 ммоль, 6 эквивалентов), карбонат серебра (758 мг, 2,75 ммоль, 1,1 эквивалента) и йодид меди(I) (476 мг, 2,50 ммоль, 1 эквивалент) при комнатной температуре. Раствор перемешивали в течение 25 минут, а затем по каплям добавляли раствор 5-метоксипиридин-3-бороновой кислоты (CAS № 850991-69-4) (764 мг, 5,00 ммоль, 2 эквивалента) в DMF при 85°C на протяжении 3 часов. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи, затем фильтровали через Celite^TM и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (50%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (135 мг).

MS [M+H]⁺=308

[0063] (2) Синтез 9-бром-7-(5-метоксипиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

В раствор 7-(5-метоксипиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (273 мг, 0,888 ммоль, 1 эквивалент) в DMF добавляли NBS (182 мг, 1,02 ммоль, 1,15 эквивалента) при комнатной температуре. После перемешивания при той же температуре в течение 3 часов в реакционную смесь добавляли воду и смесь экстрагировали хлороформом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (50%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (213 мг).

MS [M+H]⁺=388

[0064] (3) Синтез 2-фтор-6-(7-(5-метоксипиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила

В раствор 9-бром-7-(5-метоксипиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (45 мг, 0,117 ммоль, 1 эквивалент) в DME последовательно добавляли сложный пинаколовый эфир 2-циано-3-фторфенилбороновой кислоты (CAS № 765916-91-4) (43,2 мг, 0,175 ммоль, 1,5 эквивалента), 2 M водный раствор карбоната натрия (87 μл, 0,175 ммоль, 1,5 эквивалента) и (Ataphos)₂PdCl₂ (4,13 мг, 5,83 мкмоль, 0,05 эквивалента) при комнатной температуре. Реакционную смесь подвергали реакции в микроволновом реакторе при 100°C в течение 1 часа 30 минут. Затем реакционную смесь фильтровали через Celite^TM и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (50%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (22 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 3,93 (s, 3H), 4,74 (d, J=15,6 Гц, 1H), 4,92 (d, J=15,6 Гц, 1H), 7,11-7,29 (m, 4H), 7,44-7,49 (m, 1H), 7,58-7,68 (m, 1H), 8,17 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,25 (dd, J=4,5, 1,4 Гц, 1H), 8,50 (d, J=2,7 Гц, 1H), 8,56 (s, 1H).

MS [M+H]⁺=427.

[0065] Пример 3

Синтез 2-фтор-6-(7-(6-метилпиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила

[Химическая формула 67]

(1) Синтез 7-(6-метилпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

В раствор 6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она, полученного согласно примеру получения 1 (1 г, 5,00 ммоль, 1 эквивалент), в DMF последовательно добавляли пиридин (3,39 мл, 30,0 ммоль, 6 эквивалентов), карбонат серебра (1,65 г, 5,99 ммоль, 1,2 эквивалента) и йодид меди(I) (571 мг, 3,00 ммоль, 0,6 эквивалента) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение 25 минут, а затем по каплям добавляли раствор 6-метилпиридин-3-бороновой кислоты (CAS № 659742-21-9) (1,64 г, 12,0 ммоль, 2,4 эквивалента) в DMF при 95°C на протяжении 3 часов. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи, а затем реакционную смесь фильтровали через Celite^TM. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (50%-100% этилацетат/н-гептан, 10% метанол/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (600 мг).

MS [M+H]⁺=292

[0066] (2) Синтез 9-бром-7-(6-метилпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

В раствор 7-(6-метилпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (600 мг, 2,06 ммоль, 1 эквивалент) в DMF добавляли NBS (458 мг, 2,58 ммоль, 1,25 эквивалента) при комнатной температуре. После перемешивания при той же температуре в течение 2 часов в реакционную смесь добавляли ледяную воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (50%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (400 мг).

MS [M+H]⁺=372

[0067] (3) Синтез 2-фтор-6-(7-(6-метилпиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила

В раствор 9-бром-7-(6-метилпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (50 мг, 0,135 ммоль, 1 эквивалент) в DME (4,5 мл) последовательно добавляли сложный пинаколовый эфир 2-циано-3-фторфенилбороновой кислоты (CAS № 765916-91-4) (50,1 мг, 0,203 ммоль, 1,5 эквивалента), 2 M водный раствор карбоната натрия (101 μл, 0,203 ммоль, 1,5 эквивалента) и (Ataphos)₂PdCl₂ (4,78 мг, 6,75 мкмоль, 0,05 эквивалента) при комнатной температуре. Реакционную смесь подвергали реакции в микроволновом реакторе при 105°C в течение 2 часов. Затем реакционную смесь фильтровали через Celite^TM и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (50%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (37 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 2,68 (s, 3H), 4,74 (d, J=15,6 Гц, 1H), 4,90 (d, J=15,6 Гц, 1H), 7,08-7,14 (m, 1H), 7,16-7,25 (m, 2H), 7,36-7,49 (m, 2H), 7,57-7,69 (m, 2H), 8,25 (dd, J=4,7, 1,6 Гц, 1H), 8,45 (d, J=2,7 Гц, 1H), 8,55 (s, 1H).

MS [M+H]⁺=411

[0068] Пример 4

Синтез 9-(2-хлор-3-фторфенил)-7-(6-метилпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

[Химическая формула 68]

(1) Синтез 9-(2-хлор-3-фторфенил)-7-(6-метилпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

В раствор 9-бром-7-(6-метилпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она, полученного согласно примеру 3-(2) (50 мг, 0,135 ммоль, 1 эквивалент), в DME (4,5 мл) последовательно добавляли 2-хлор-3-фторфенилбороновую кислоту (CAS № 871329-52-1) (35,3 мг, 0,203 ммоль, 1,5 эквивалента), 2 M водный раствор карбоната натрия (101 μл, 0,203 ммоль, 1,5 эквивалента) и Pd(PPh₃)₄ (5,46 мг, 4,73 мкмоль, 0,035 эквивалента) при комнатной температуре. Реакционную смесь подвергали реакции в микроволновом реакторе при 105°C в течение 3 часов. Затем реакционную смесь фильтровали через Celite^TM и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (50%-100% этилацетат/н-гептан). К полученному неочищенному продукту на основе указанного в заголовке соединения добавляли диэтиловый эфир и осадок собирали фильтрованием с получением твердого указанного в заголовке соединения (21 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 2,67 (s, 3H), 4,74 (d, J=15,6 Гц, 1H), 4,89 (d, J=15,6 Гц, 1H), 7,08-7,13 (m, 1H), 7,13-7,20 (m, 2H), 7,22-7,31 (m, 2H), 7,36-7,40 (m, 1H), 7,59-7,64 (m, 1H), 8,22-8,25 (m, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,43-8,45 (m, 1H).

MS [M+H]⁺=420

[0069] Пример 5

Синтез 2-фтор-6-(7-(2-метоксипиримидин-5-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила

[Химическая формула 69]

(1) Синтез трет-бутил-3-((2-метоксипиримидин-5-ил)амино)-3-оксопропаноата

Раствор 3-(трет-бутокси)-3-оксопропионовой кислоты (CAS № 40052-13-9) (1,41 г, 8,79 ммоль, 1,1 эквивалента), 2-метоксипиримидин-5-амина (CAS № 56621-89-7) (1,00 г, 7,99 ммоль, 1,0 эквивалент), триэтиламина (1,34 мл, 9,59 ммоль, 1,2 эквивалента) и EDC (1,84 г, 9,59 ммоль, 1,2 эквивалента) в DCM (20 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. В реакционную смесь добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и смесь экстрагировали DCM. Органический слой концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 50%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (2,12 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 1,52 (s, 9H), 3,42 (s, 2H), 4,01 (s, 3H), 8,76 (s, 2H), 9,52 (br. s, 1H).

[0070] (2) Синтез трет-бутил-3-(бензилокси)-2'-((((бензилокси)карбонил)окси)метил)-1'-(2-метоксипиримидин-5-ил)-6'-оксо-1',6'-дигидро-[2,3'-бипиридин]-5'-карбоксилата

Смесь трет-бутил-3-((2-метоксипиримидин-5-ил)амино)-3-оксопропаноата (333 мг, 1,25 ммоль, 1,2 эквивалента), лития бромида (180 мг, 2,08 ммоль, 2,0 эквивалента), бензил(3-(3-(бензилокси)пиридин-2-ил)-4-метокси-2-оксобут-3-ен-1-ил)карбоната (смесь E/Z), полученного согласно примеру получения 9 (450 мг, 1,04 ммоль, 1,0 эквивалент), триэтиламина (0,506 мл, 3,63 ммоль, 3,5 эквивалента) и пропионитрила (3,00 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. Реакционную смесь непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 40%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (430 мг).

MS [M+H]⁺=651

[0071] (3) Синтез трет-бутил-3-гидрокси-2'-(гидроксиметил)-1'-(2-метоксипиримидин-5-ил)-6'-оксо-1',6'-дигидро-[2,3'-бипиридин]-5'-карбоксилата

Смесь трет-бутил-3-(бензилокси)-2'-((((бензилокси)карбонил)окси)метил)-1'-(2-метоксипиримидин-5-ил)-6'-оксо-1',6'-дигидро-[2,3'-бипиридин]-5'-карбоксилата (430 мг, 0,661 ммоль, 1,0 эквивалент), 10% палладия на угле (содержание воды 53,9%) (70,3 мг, 0,03 ммоль, 0,046 эквивалента), THF (2,00 мл) и метанола (5,00 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 40 минут. Реакционную смесь фильтровали через Celite^TM и остаток промывали этилацетатом. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 0%-20% метанол/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (280 мг).

MS [M+H]⁺=427

[0072] (4) Синтез трет-бутил-7-(2-метоксипиримидин-5-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-карбоксилата

В смесь трет-бутил-3-гидрокси-2'-(гидроксиметил)-1'-(2-метоксипиримидин-5-ил)-6'-оксо-1',6'-дигидро-[2,3'-бипиридин]-5'-карбоксилата (280 мг, 0,657 ммоль, 1,0 эквивалент), трифенилфосфина (241 мг, 0,919 ммоль, 1,4 эквивалента) и THF (3,00 мл) добавляли раствор DMEAD (215 мг, 0,919 ммоль, 1,4 эквивалента) в THF (1,00 мл) при 0°C. После того как убедились в прогрессе реакционной смеси, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении приблизительно на половину от исходного объема раствора. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 40%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (210 мг).

MS масса/заряд=410

[0073] (5) Синтез 7-(2-метоксипиримидин-5-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

К трет-бутил-7-(2-метоксипиримидин-5-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-карбоксилату (210 мг, 0,514 ммоль, 1,0 эквивалент) добавляли TFA (3,00 мл) и реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли DMSO (3,00 мл) и дигидрат ацетата лития (262 мг, 2,57 ммоль, 5,0 эквивалентов) и реакционную смесь перемешивали при 120°C в течение 30 минут. В реакционную смесь добавляли 10% водный раствор хлорида натрия и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 0%-20% метанол/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (110 мг).

MS [M+H]⁺=309

[0074] (6) Синтез 9-бром-7-(2-метоксипиримидин-5-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 7-(2-метоксипиримидин-5-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (20,0 мг, 0,065 ммоль, 1,0 эквивалент), NBS (17,3 мг, 0,097 ммоль, 1,5 эквивалента) и DMF (2,00 мл) перемешивали при 50°C в течение 30 минут. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 100% этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (11,0 мг).

MS [M+H]⁺=387

[0075] (7) Синтез 2-фтор-6-(7-(2-метоксипиримидин-5-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила

Смесь 9-бром-7-(2-метоксипиримидин-5-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (11,0 мг, 0,028 ммоль, 1,0 эквивалент), сложного пинаколового эфира 2-циано-3-фторфенилбороновой кислоты (CAS № 765916-91-4) (10,5 мг, 0,043 ммоль, 1,5 эквивалента), (Ataphos)₂PdCl₂ (2,01 мг, 2,84 мкмоль, 0,1 эквивалента), фторида калия (4,95 мг, 0,085 ммоль, 3,0 эквивалента), 1,4-диоксана (0,8 мл) и воды (0,4 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 140°C в течение 10 минут. Реакционную смесь непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 80%-100% этилацетат/н-гептан). Полученный неочищенный продукт снова очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, 50%-80% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (6,0 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,12 (s, 3H), 4,88 (s, 2H), 7,11-7,17 (m, 1H), 7,17-7,26 (m, 2H), 7,44 (d, J=7,0 Гц, 1H), 7,64 (td, J=8,1, 5,7 Гц, 1H), 8,26 (dd, J=4,4, 1,5 Гц, 1H), 8,54 (s, 2H), 8,57 (s, 1H).

MS [M+H]⁺=428

[0076] Пример 6

Синтез 7-(пиридин-3-ил)-9-(2,3,5,6-тетрафторфенил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

[Химическая формула 70]

(1) Синтез 7-(пиридин-3-ил)-9-(2,3,5,6-тетрафторфенил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 9-бром-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она, полученного согласно примеру получения 2 (40 мг, 0,112 ммоль, 1 эквивалент), трибутил(2,3,5,6-тетрафторфенил)станнана, полученного согласно примеру получения 6 (74,0 мг, 0,168 ммоль, 1,5 эквивалента), (Ataphos)₂PdCl₂ (3,98 мг, 5,62 мкмоль, 0,05 эквивалента), йодида меди(I) (2,14 мг, 0,011 ммоль, 0,1 эквивалента) и 1,4-диоксана (1,5 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 150°C в течение 5 часов. Реакционную смесь непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель на силикагеле, 5%-95% этилацетат/н-гептан). Полученный неочищенный продукт растирали в порошок со смешанным раствором диэтилового эфира и н-гептана (1:5) и осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали диэтиловым эфиром и н-гептаном с получением указанного в заголовке соединения (24,4 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,74 (d, J=15,6 Гц, 1H), 4,88 (d, J=15,6 Гц, 1H), 7,05-7,16 (m, 2H), 7,17-7,21 (m, 1H), 7,53-7,59 (m, 1H), 7,73-7,79 (m, 1H), 8,26 (dd, J=4,6, 1,5 Гц, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,61 (d, J=2,4 Гц, 1H), 8,81 (dd, J=4,8, 1,5 Гц, 1H).

MS [M+Na]⁺=448

[0077] Пример 7

Синтез 3-(8-оксо-7-(тиофен-3-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиколинонитрила

[Химическая формула 71]

(1) Синтез 3-(8-оксо-7-(тиофен-3-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиколинонитрила

Смесь 9-бром-7-(тиофен-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она, полученного согласно примеру получения 3 (40 мг, 0,111 ммоль, 1 эквивалент), сложного неопентилгликолевого эфира 2-цианопиридин-3-бороновой кислоты (CAS № 868944-75-6) (35,9 мг, 0,166 ммоль, 1,5 эквивалента), (Ataphos)₂PdCl₂ (3,92 мг, 5,54 мкмоль, 0,05 эквивалента), фторида калия (19,3 мг, 0,332 ммоль, 3 эквивалента), 1,4-диоксана (1 мл) и воды (0,3 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 120°C в течение 3 часов. Реакционную смесь непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель на силикагеле, 5%-100% этилацетат/н-гептан). Полученный неочищенный продукт снова очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, 5%-95% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (23,4 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,88 (br. s, 2H), 7,09-7,15 (m, 2H), 7,16-7,20 (m, 1H), 7,37-7,40 (m, 1H), 7,52-7,59 (m, 2H), 8,05-8,10 (m, 1H), 8,23-8,27 (m, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,67-8,72 (m, 1H).

MS [M+Na]⁺=407

[0078] Пример 8

Синтез 3-(8-оксо-7-(тиофен-3-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиразин-2-карбонитрила

[Химическая формула 72]

(1) Синтез 7-(тиофен-3-ил)-9-(трибутилстаннил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 9-бром-7-(тиофен-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она, полученного согласно примеру получения 3 (34,8 мг, 0,096 ммоль, 1 эквивалент), гекса-н-бутилдиолова (0,058 мл, 0,116 ммоль, 1,2 эквивалента), Pd(PPh₃)₄ (5,57 мг, 4,82 мкмоль, 0,05 эквивалента) и 1,4-диоксана (1 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 140°C в течение 6 часов. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, а затем непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, 0%-30% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (38,3 мг).

MS [M+H]⁺=573

[0079] (2) Синтез 3-(8-оксо-7-(тиофен-3-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиразин-2-карбонитрила

Смесь 7-(тиофен-3-ил)-9-(трибутилстаннил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (38,3 мг, 0,067 ммоль, 1 эквивалент), 3-бромпиразин-2-карбонитрила (CAS № 1250022-24-2) (18,5 мг, 0,101 ммоль, 1,5 эквивалента), йодида меди(I) (1,28 мг, 6,70 мкмоль, 0,1 эквивалента), Pd(PPh₃)₄ (3,87 мг, 3,35 мкмоль, 0,05 эквивалента) и 1,4-диоксана (1 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 150°C в течение 2,5 часов. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, а затем непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель на силикагеле, 5%-95% этилацетат/н-гептан). Полученный неочищенный продукт растирали в порошок со смешанным раствором этанола и н-гептана (1:1) и осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали н-гептаном с получением указанного в заголовке соединения (14,2 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,91 (br. s, 2H), 7,10-7,15 (m, 2H), 7,16-7,21 (m, 1H), 7,38-7,42 (m, 1H), 7,53-7,59 (m, 1H), 8,23-8,27 (m, 1H), 8,64-8,68 (m, 1H), 8,79 (s, 1H), 8,82-8,86 (m, 1H).

MS [M+Na]⁺=408

[0080] Пример 9

Синтез 9-(2-фторфенил)-7-фенил-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

[Химическая формула 73]

(1) Синтез 7-фенил-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она, полученного согласно примеру получения 1 (5 г, 25,0 ммоль, 1 эквивалент), фенилбороновой кислоты (CAS № 98-80-6) (6,09 г, 50,0 ммоль, 2 эквивалента), карбоната серебра (8,26 г, 30,0 ммоль, 1,2 эквивалента), йодида меди(I) (2,85 г, 15,0 ммоль, 0,6 эквивалента), пиридина (12,1 мл, 150 ммоль, 6 эквивалентов) и DMF (150 мл) перемешивали при 70°C в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и к остатку добавляли 28% водный раствор аммиака и хлороформ. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут, а затем фильтровали. Фильтрат экстрагировали хлороформом. В органический слой добавляли силикагель и смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, 10%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (3,27 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,70 (s, 2H), 6,74-6,79 (m, 1H), 7,05-7,10 (m, 1H), 7,10-7,14 (m, 1H), 7,24-7,28 (m, 2H), 7,52-7,60 (m, 3H), 8,22-8,25 (m, 1H), 8,29-8,34 (m, 1H).

MS [M+H]⁺=277

[0081] (2) Синтез 9-бром-7-фенил-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 7-фенил-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (3,27 г, 11,8 ммоль, 1 эквивалент), NBS (2,32 г, 13,0 ммоль, 1,1 эквивалента) и DMF (35 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. В реакционную смесь добавляли ледяную воду. Смесь перемешивали при 0°C в течение 2 часов, а затем осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали водой и н-гептаном с получением указанного в заголовке соединения (3,00 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,67 (s, 2H), 7,07-7,12 (m, 1H), 7,12-7,16 (m, 1H), 7,22-7,28 (m, 2H), 7,51-7,61 (m, 3H), 8,22-8,26 (m, 1H), 8,75 (s, 1H).

MS [M+H]⁺=355

[0082] (3) Синтез 9-(2-фторфенил)-7-фенил-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 9-бром-7-фенил-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (40 мг, 0,113 ммоль, 1 эквивалент), 2-фторфенилбороновой кислоты (CAS № 1993-03-9) (23,6 мг, 0,169 ммоль, 1,5 эквивалента), н-гидрата трикалия фосфата (64,8 мг), Pd(PPh₃)₄ (6,51 мг, 5,63 мкмоль, 0,05 эквивалента), 1,4-диоксана (1 мл) и воды (0,3 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 130°C в течение 70 минут. Реакционную смесь непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 10%-70% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (31,5 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,77 (s, 2H), 7,06-7,20 (m, 4H), 7,29-7,36 (m, 3H), 7,49-7,64 (m, 4H), 8,24 (dd, J=4,7, 1,6 Гц, 1H), 8,49 (d, J=1,2 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=371

[0083] Пример 10

Синтез 2-(7-(4-фторфенил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила

[Химическая формула 74]

(1) Синтез 2-(7-(4-фторфенил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила

Смесь 9-бром-7-(4-фторфенил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она, полученного согласно примеру получения 4 (50 мг, 0,134 ммоль, 1 эквивалент), 2-(1,3,2-диоксаборинан-2-ил)бензонитрила (CAS № 172732-52-4) (37,6 мг, 0,201 ммоль, 1,5 эквивалента), (Ataphos)₂PdCl₂ (4,74 мг, 6,70 мкмоль, 0,05 эквивалента), триэтиламина (0,075 мл, 0,536 ммоль, 4 эквивалента), 1,4-диоксана (1 мл) и воды (0,3 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 130°C в течение 3 часов. Реакционную смесь непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, 5%-60% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (19,9 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,80 (s, 2H), 7,08-7,13 (m, 1H), 7,14-7,18 (m, 1H), 7,24-7,30 (m, 2H), 7,30-7,36 (m, 2H), 7,43-7,48 (m, 1H), 7,60-7,68 (m, 2H), 7,73-7,77 (m, 1H), 8,24 (dd, J=4,7, 1,4 Гц, 1H), 8,53 (s, 1H).

MS [M+Na]⁺=418

[0084] Пример 11

Синтез 3-(7-(4-фторфенил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиколинонитрила

[Химическая формула 75]

(1) Синтез 3-(7-(4-фторфенил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиколинонитрила

Смесь 9-бром-7-(4-фторфенил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она, полученного согласно примеру получения 4 (800 мг, 2,14 ммоль, 1 эквивалент), сложного неопентилгликолевого эфира 2-цианопиридин-3-бороновой кислоты (CAS № 868944-75-6) (648 мг, 3,00 ммоль, 1,4 эквивалента), (Ataphos)₂PdCl₂ (76 мг, 0,107 ммоль, 0,05 эквивалента), фторида калия (374 мг, 6,43 ммоль, 3 эквивалента), 1,4-диоксана (16 мл) и воды (4 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 120°C в течение 2,5 часов. Реакционную смесь непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 5%-90% этилацетат/н-гептан). Полученный неочищенный продукт наносили на силикагелевую подушку (NH-силикагель) и элюировали этилацетатом. Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в DCM. Раствор фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток растирали в порошок со смешанным раствором IPA и н-гептана (1:1) и осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали н-гептаном и суспендировали в IPA и осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали IPA с получением указанного в заголовке соединения (493 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,81 (s, 2H), 7,09-7,15 (m, 1H), 7,15-7,20 (m, 1H), 7,27-7,36 (m, 4H), 7,52-7,58 (m, 1H), 8,03-8,08 (m, 1H), 8,23-8,27 (m, 1H), 8,64 (s, 1H), 8,67-8,71 (m, 1H).

MS [M+H]⁺=397

[0085] Пример 12

Синтез 3-(7-(2-фторфенил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиколинонитрила

[Химическая формула 76]

(1) Синтез этил-3-((2-фторфенил)амино)-3-оксопропаноата

В раствор 2-фторанилина (CAS № 348-54-9) (5 г, 45,0 ммоль, 1 эквивалент) и триэтиламина (6,90 мл, 49,5 ммоль, 1,1 эквивалента) в THF (100 мл) добавляли этилмалонилхлорид (CAS № 36239-09-5) (6,05 мл, 47,2 ммоль, 1,05 эквивалента) при 0°C и смесь перемешивали при той же температуре в течение 1 часа. В реакционную смесь добавляли 1 M хлористоводородную кислоту и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 5%-45% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (8,64 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 1,33 (t, J=7,2 Гц, 3H), 3,51 (s, 2H), 4,28 (q, J=7,2 Гц, 2H), 7,02-7,18 (m, 3H), 8,24-8,36 (m, 1H), 9,50 (br. s, 1H).

MS [M+H]⁺=226

[0086] (2) Синтез 1-(2-фторфенил)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-карбоновой кислоты

Раствор этил-3-((2-фторфенил)амино)-3-оксопропаноата (8,64 г, 38,4 ммоль, 1 эквивалент), диметилацеталя ацетилацетальдегида (CAS № 5436-21-5) (6,08 мл, 46,0 ммоль, 1,2 эквивалента) и этоксида натрия (20% раствор в этаноле, 48,9 мл, 127 ммоль, 3,3 эквивалента) в этаноле (105 мл) перемешивали при 80°C в течение 15 часов. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, а затем концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли 5 M хлористоводородную кислоту и смесь экстрагировали DCM. Органический слой концентрировали при пониженном давлении. Остаток растирали в порошок со смешанным раствором этилацетата и н-гептана и осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали н-гептаном с получением указанного в заголовке соединения (8,02 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 2,18 (s, 3H), 6,54-6,59 (m, 1H), 7,27-7,32 (m, 1H), 7,33-7,43 (m, 2H), 7,55-7,63 (m, 1H), 8,54 (d, J=7,4 Гц, 1H), 13,74 (s, 1H).

MS [M+H]⁺=248

[0087] (3) Синтез 5-бром-1-(2-фторфенил)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-карбоновой кислоты

Раствор 1-(2-фторфенил)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-карбоновой кислоты (8,02 г, 32,4 ммоль, 1 эквивалент) и NBS (6,35 г, 35,7 ммоль, 1,1 эквивалента) в DMF (80 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. В реакционную смесь добавляли ледяную воду и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут, а затем осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали водой и н-гептаном с получением указанного в заголовке соединения (9,32 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 2,33 (s, 3H), 7,23-7,29 (m, 1H), 7,34-7,44 (m, 2H), 7,56-7,64 (m, 1H), 8,71 (s, 1H), 13,53 (s, 1H).

MS [M+H]⁺=328

[0088] (4) Синтез 5-бром-1-(2-фторфенил)-6-метилпиридин-2(1H)-она

Смесь 5-бром-1-(2-фторфенил)-6-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-карбоновой кислоты (5 г, 15,3 ммоль, 1 эквивалент), гидроксида лития (808 мг, 33,7 ммоль, 2,2 эквивалента), диглима (100 мл) и воды (10 мл) перемешивали при 150°C в течение 10 часов. В ходе реакции воду отгоняли из реакции с применением аппарата Дина-Старка. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток растирали в порошок с водой и осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали водой с получением указанного в заголовке соединения (2,70 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 2,15 (s, 3H), 6,44-6,51 (m, 1H), 7,19-7,35 (m, 3H), 7,44-7,52 (m, 2H).

MS [M+H]⁺=282

[0089] (5) Синтез 1'-(2-фторфенил)-3-(метоксиметокси)-2'-метил-[2,3'-бипиридин]-6'(1'H)-она

Смесь 5-бром-1-(2-фторфенил)-6-метилпиридин-2(1H)-она (1 г, 3,55 ммоль, 1 эквивалент), 3-(метоксиметокси)-2-(трибутилстаннил)пиридина, полученного согласно примеру получения 7 (1,55 мл, 3,90 ммоль, 1,1 эквивалента), Pd(PPh₃)₄ (205 мг, 0,177 ммоль, 0,05 эквивалента) и 1,4-диоксана (20 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 150°C в течение 7 часов. Реакционную смесь непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель на силикагеле, 10%-100% этилацетат/н-гептан, 5% метанол/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (523 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 1,89 (s, 3H), 3,44 (s, 3H), 5,18 (s, 2H), 6,59-6,66 (m, 1H), 7,24-7,34 (m, 4H), 7,42-7,50 (m, 2H), 7,55 (dd, J=8,4, 1,4 Гц, 1H), 8,35 (dd, J=4,7, 1,4 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=341

[0090] (6) Синтез 5'-бром-1'-(2-фторфенил)-3-(метоксиметокси)-2'-метил-[2,3'-бипиридин]-6'(1'H)-она

Смесь 1'-(2-фторфенил)-3-(метоксиметокси)-2'-метил-[2,3'-бипиридин]-6'(1'H)-она (523 мг, 1,54 ммоль, 1 эквивалент), NBS (301 мг, 1,69 ммоль, 1,1 эквивалента) и ацетонитрила (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. В реакционную смесь добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток экстрагировали DCM и органический слой концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 10%-90% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (586 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 1,87 (s, 3H), 3,46 (s, 3H), 5,20 (s, 2H), 7,24-7,35 (m, 4H), 7,44-7,51 (m, 1H), 7,56 (dd, J=8,4, 1,4 Гц, 1H), 7,89 (s, 1H), 8,35 (dd, J=4,7, 1,4 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=419

[0091] (7) Синтез 9-бром-7-(2-фторфенил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Раствор 5'-бром-1'-(2-фторфенил)-3-(метоксиметокси)-2'-метил-[2,3'-бипиридин]-6'(1'H)-она (586 мг, 1,40 ммоль, 1 эквивалент), NBS (269 мг, 1,51 ммоль, 1,08 эквивалента) и AIBN (11,5 мг, 0,07 ммоль, 0,05 эквивалента) в четыреххлористом углероде (12 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в THF (13,4 мл). В раствор добавляли 48% водный раствор бромистоводородной кислоты (1,58 мл, 14,0 ммоль, 10 эквивалентов). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 30 минут. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, а затем добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия (5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток экстрагировали DCM и органический слой концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 10%-70% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (222 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,69-4,79 (m, 2H), 7,08-7,13 (m, 1H), 7,13-7,17 (m, 1H), 7,28-7,38 (m, 3H), 7,51-7,59 (m, 1H), 8,25 (dd, J=4,5, 1,6 Гц, 1H), 8,76 (s, 1H).

MS [M+H]⁺=373

[0092] (8) Синтез 3-(7-(2-фторфенил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиколинонитрила

Смесь 9-бром-7-(2-фторфенил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (70 мг, 0,188 ммоль, 1 эквивалент), сложного неопентилгликолевого эфира 2-цианопиридин-3-бороновой кислоты (CAS № 868944-75-6) (60,8 мг, 0,281 ммоль, 1,5 эквивалента), (Ataphos)₂PdCl₂ (6,64 мг, 9,38 мкмоль, 0,05 эквивалента), триэтиламина (0,078 мл, 0,563 ммоль, 3 эквивалента), 1,4-диоксана (1,5 мл) и воды (0,3 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 140°C в течение 5 часов. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, а затем непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 10%-80% этилацетат/н-гептан). Полученный неочищенный продукт растирали в порошок со смешанным раствором MTBE, этилацетата и н-гептана (1:1:5) и осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали н-гептаном с получением указанного в заголовке соединения (23,9 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,81-4,91 (m, 2H), 7,09-7,14 (m, 1H), 7,15-7,20 (m, 1H), 7,31-7,43 (m, 3H), 7,51-7,60 (m, 2H), 8,09 (dd, J=8,1, 1,7 Гц, 1H), 8,25 (dd, J=4,6, 1,5 Гц, 1H), 8,67 (s, 1H), 8,69 (dd, J=4,7, 1,8 Гц, 1H).

MS [M+Na]⁺=419

[0093] Пример 13

Синтез 3-(3-фтор-8-оксо-7-фенил-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиколинонитрила

[Химическая формула 77]

(1) Синтез этил-3-оксо-3-(фениламино)пропаноата

В раствор анилина (CAS № 62-53-3) (2 мл, 21,9 ммоль, 1 эквивалент) и триэтиламина (3,37 мл, 24,1 ммоль, 1,1 эквивалента) в THF (40 мл) добавляли этилмалонилхлорид (CAS № 36239-09-5) (3,09 мл, 24,1 ммоль, 1,1 эквивалента) при 0°C и смесь перемешивали при той же температуре в течение 2 часов. В реакционную смесь добавляли 1 M хлористоводородную кислоту и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 5%-45% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (4,49 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 1,33 (t, J=7,1 Гц, 3H), 3,48 (s, 2H), 4,27 (q, J=7,1 Гц, 2H), 7,09-7,17 (m, 1H), 7,30-7,37 (m, 2H), 7,52-7,59 (m, 2H), 9,23 (br. s, 1H).

[0094] (2) Синтез 6-метил-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидропиридин-3-карбоновой кислоты

Раствор этил-3-оксо-3-(фениламино)пропаноата (10,3 г, 49,8 ммоль, 1 эквивалент), диметилацеталя ацетилацетальдегида (CAS № 5436-21-5) (7,90 мл, 59,8 ммоль, 1,2 эквивалента) и этоксида натрия (20% раствор в этаноле, 63,5 мл, 164 ммоль, 3,3 эквивалента) в этаноле (137 мл) перемешивали при 80°C в течение 15 часов. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, а затем концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли 5 M хлористоводородную кислоту и смесь экстрагировали DCM. Органический слой концентрировали при пониженном давлении. Остаток растирали в порошок со смешанным раствором этилацетата и н-гептана и осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали н-гептаном с получением указанного в заголовке соединения (10,3 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 2,12-2,17 (m, 3H), 6,51-6,58 (m, 1H), 7,20-7,25 (m, 2H), 7,53-7,67 (m, 3H), 8,52 (d, J=7,4 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=230

[0095] (3) Синтез 5-бром-6-метил-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидропиридин-3-карбоновой кислоты

Раствор 6-метил-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидропиридин-3-карбоновой кислоты (10,3 г, 44,8 ммоль, 1 эквивалент) и NBS (8,78 г, 49,3 ммоль, 1,1 эквивалента) в DMF (100 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. В реакционную смесь добавляли ледяную воду и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут, а затем осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали водой и н-гептаном с получением указанного в заголовке соединения (12,8 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 2,29 (s, 3H), 7,18-7,24 (m, 2H), 7,56-7,67 (m, 3H), 8,70 (s, 1H), 13,75 (s, 1H).

MS [M+H]⁺=308

[0096] (4) Синтез 5-бром-6-метил-1-фенилпиридин-2(1H)-она

Смесь 5-бром-6-метил-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидропиридин-3-карбоновой кислоты (12,8 г, 41,5 ммоль, 1 эквивалент) и гидроксида лития (2,19 г, 91,4 ммоль, 2,2 эквивалента) перемешивали в смешанном растворе диглима (271 мл) и воды (26,9 мл) при 150°C в течение 48 часов. В ходе реакции воду отгоняли из реакции с применением аппарата Дина-Старка. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток растирали в порошок с водой и осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали водой с получением указанного в заголовке соединения (5,86 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 2,10 (s, 3H), 6,43-6,52 (m, 1H), 7,12-7,21 (m, 2H), 7,43-7,58 (m, 4H).

MS [M+H]⁺=266

[0097] (5) Синтез 3,5-дифтор-2'-метил-1'-фенил-[2,3'-бипиридин]-6'(1'H)-она

Смесь 5-бром-6-метил-1-фенилпиридин-2(1H)-она (400 мг, 1,51 ммоль, 1 эквивалент), 3,5-дифтор-2-трибутилстаннилпиридина (CAS № 765917-25-7) (673 мг, 1,67 ммоль, 1,1 эквивалента), Pd(PPh₃)₄ (88 мг, 0,076 ммоль, 0,05 эквивалента) и 1,4-диоксана (12 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 150°C в течение 7 часов. Реакционную смесь непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, 10%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (191 мг).

MS [M+H]⁺=299

[0098] (6) Синтез 5'-бром-3,5-дифтор-2'-метил-1'-фенил-[2,3'-бипиридин]-6'(1'H)-она

Раствор 3,5-дифтор-2'-метил-1'-фенил-[2,3'-бипиридин]-6'(1'H)-она (191 мг, 0,64 ммоль, 1 эквивалент) и NBS (171 мг, 0,96 ммоль, 1,5 эквивалента) в ацетонитриле (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель на силикагеле, 5%-65% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (155 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 1,84-1,88 (m, 3H), 7,21-7,26 (m, 2H), 7,30-7,37 (m, 1H), 7,46-7,51 (m, 1H), 7,52-7,58 (m, 2H), 7,86-7,89 (m, 1H), 8,43-8,47 (m, 1H).

MS [M+H]⁺=377

[0099] (7) Синтез 9-бром-3-фтор-7-фенил-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Раствор 5'-бром-3,5-дифтор-2'-метил-1'-фенил-[2,3'-бипиридин]-6'(1'H)-она (162 мг, 0,429 ммоль, 1 эквивалент), NBS (84 мг, 0,472 ммоль, 1,1 эквивалента) и AIBN (3,53 мг, 0,021 ммоль, 0,05 эквивалента) в четыреххлористом углероде (4 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, а затем фильтровали. Остаток промывали четыреххлористым углеродом и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли карбонат натрия (268 мг, 2,53 ммоль, 5,89 эквивалентов), DMF (4,3 мл) и воду (2,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение 15 часов. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, а затем разбавляли водой. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали водой и н-гептаном с получением указанного в заголовке соединения (82 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,70 (s, 2H), 6,89-6,95 (m, 1H), 7,22-7,26 (m, 2H), 7,53-7,60 (m, 3H), 8,12 (d, J=2,4 Гц, 1H), 8,68 (s, 1H).

MS [M+H]⁺=375

[0100] (8) Синтез 3-(3-фтор-8-оксо-7-фенил-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)пиколинонитрила

Смесь 9-бром-3-фтор-7-фенил-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (82 мг, 0,22 ммоль, 1 эквивалент), сложного неопентилгликолевого эфира 2-цианопиридин-3-бороновой кислоты (CAS № 868944-75-6) (71,2 мг, 0,33 ммоль, 1,5 эквивалента), (Ataphos)₂PdCl₂ (7,78 мг, 11,0 мкмоль, 0,05 эквивалента), фторида калия (2,21 M водный раствор, 0,299 мл, 0,659 ммоль, 3 эквивалента), 1,4-диоксана (2,4 мл) и воды (0,3 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 130°C в течение 2 часов. Реакционную смесь непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, 5%-80% этилацетат/н-гептан). Полученный неочищенный продукт растирали в порошок со смешанным раствором этанола и н-гептана (1:5) и садок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали н-гептаном с получением указанного в заголовке соединения (55,6 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,82 (s, 2H), 6,92-6,98 (m, 1H), 7,29-7,36 (m, 2H), 7,51-7,64 (m, 4H), 8,09 (dd, J=8,1, 1,6 Гц, 1H), 8,14 (d, J=2,4 Гц, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,69 (dd, J=4,7, 1,6 Гц, 1H).

MS [M+Na]⁺=419

[0101] Пример 14

Синтез 2-фтор-6-(3-фтор-8-оксо-7-(пиридин-3-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила

[Химическая формула 78]

(1) Синтез 3-бром-6-метокси-2-((метоксиметокси)метил)пиридина

Смесь (3-бром-6-метоксипиридин-2-ил)метанола (CAS № 623942-84-7) (2,15 г, 9,86 ммоль, 1 эквивалент), хлорметилметилового эфира (2,25 мл, 29,6 ммоль, 3 эквивалента) и N,N-диизопропилэтиламина (8,61 мл, 49,3 ммоль, 5 эквивалентов) перемешивали в DCM (45 мл) при комнатной температуре в течение 15 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, 0%-5% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (2,22 г).

MS [M+H]⁺=262

[0102] (2) Синтез (6-метокси-2-((метоксиметокси)метил)пиридин-3-ил)бороновой кислоты

Раствор 3-бром-6-метокси-2-((метоксиметокси)метил)пиридина (1,09 г, 4,16 ммоль, 1 эквивалент) в THF (20 мл) охлаждали до -78°C и добавляли н-бутиллитий (2,69 M раствор в н-гексане, 1,70 мл, 4,58 ммоль, 1,1 эквивалента). Реакционную смесь перемешивали при той же температуре в течение 1 часа, а затем добавляли триметилборат (0,696 мл, 6,24 ммоль, 1,5 эквивалента). Реакционную смесь перемешивали в течение 12 часов при нагревании до комнатной температуры, а затем концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония и смесь экстрагировали DCM. Органический слой концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 10%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (570 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 3,42 (s, 3H), 3,95 (s, 3H), 4,75 (s, 2H), 4,79 (s, 2H), 6,32 (s, 2H), 6,71 (d, J=8,2 Гц, 1H), 8,08 (d, J=8,4 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=228

[0103] (3) Синтез 3,5-дифтор-6'-метокси-2'-((метоксиметокси)метил)-2,3'-бипиридина

Смесь (6-метокси-2-((метоксиметокси)метил)пиридин-3-ил)бороновой кислоты (570 мг, 2,51 ммоль, 1 эквивалент), 2-бром-3,5-дифторпиридина (CAS № 660425-16-1) (560 мг, 2,89 ммоль, 1,15 эквивалента), фторида калия (438 мг, 7,53 ммоль, 3 эквивалента), (Ataphos)₂PdCl₂ (89 мг, 0,126 ммоль, 0,05 эквивалента), 1,4-диоксана (12 мл) и воды (3 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 130°C в течение 4 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель на NH-силикагеле, 5%-35% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (648 мг).

MS [M+H]⁺=297

[0104] (4) Синтез 3,5-дифтор-2'-(гидроксиметил)-[2,3'-бипиридин]-6'-ола

Смесь 3,5-дифтор-6'-метокси-2'-((метоксиметокси)метил)-2,3'-бипиридина (648 мг, 2,19 ммоль, 1 эквивалент) и 48% водного раствора бромистоводородной кислоты (1,98 мл, 17,5 ммоль, 8 эквивалентов) перемешивали в THF (15 мл) при 55°C в течение 8 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и DCM. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, а затем полученный осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали водой с получением указанного в заголовке соединения (349 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ (ppm): 4,33 (s, 2H), 6,35 (d, J=9,3 Гц, 1H), 7,51 (dd, J=9,3, 1,8 Гц, 1H), 8,04 (ddd, J=10,1, 8,9, 2,5 Гц, 1H), 8,57 (d, J=2,4 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=239

[0105] (5) Синтез 3-фтор-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 3,5-дифтор-2'-(гидроксиметил)-[2,3'-бипиридин]-6'-ола (329 мг, 1,38 ммоль, 1 эквивалент) и карбоната калия (573 мг, 4,14 ммоль, 3 эквивалента) перемешивали в DMF (7 мл) при 100°C в течение 5 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем добавляли водный раствор хлорида аммония. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут, а затем полученный осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали водой и н-гептаном с получением указанного в заголовке соединения (251 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ (ppm): 5,20 (s, 2H), 6,46 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,38 (dd, J=9,7, 2,4 Гц, 1H), 8,04 (d, J=9,3 Гц, 1H), 8,19 (d, J=2,6 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=219

[0106] (6) Синтез 3-фтор-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 3-фтор-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (250 мг, 1,15 ммоль, 1 эквивалент), карбоната серебра (474 мг, 1,72 ммоль, 1,5 эквивалента), йодида меди(I) (131 мг, 0,687 ммоль, 0,6 эквивалента) и пиридина (0,927 мл, 11,5 ммоль, 10 эквивалентов) перемешивали в смешанном растворителе из DMF (7 мл) и DMSO (9 мл) при 80°C в течение 20 минут. В реакционную смесь медленно добавляли смешанный раствор циклического сложного 1,3-пропандиолового эфира пиридин-3-бороновой кислоты (CAS № 131534-65-1) (373 мг, 2,29 ммоль, 2 эквивалента) в DMF (4 мл) и DMSO (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 20 часов, затем наносили на силикагелевую подушку (NH-силикагель и силикагель) и элюировали этилацетатом. Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель на силикагеле, 10%-100% этилацетат/н-гептан, 10% метанол/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (43,5 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,64-4,73 (m, 1H), 4,77-4,86 (m, 1H), 6,78 (d, J=9,5 Гц, 1H), 6,94 (dd, J=8,9, 2,5 Гц, 1H), 7,51-7,58 (m, 1H), 7,65-7,72 (m, 1H), 8,14 (d, J=2,6 Гц, 1H), 8,29 (d, J=9,7 Гц, 1H), 8,53 (d, J=2,6 Гц, 1H), 8,79 (dd, J=4,8, 1,5 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=296

[0107] (7) Синтез 9-бром-3-фтор-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 3-фтор-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (43,5 мг, 0,147 ммоль, 1 эквивалент) и NBS (31,5 мг, 0,177 ммоль, 1,2 эквивалента) перемешивали в ацетонитриле (3 мл) при комнатной температуре в течение 15 часов. Реакционную смесь непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель на силикагеле, 10%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (33 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,60-4,70 (m, 1H), 4,74-4,83 (m, 1H), 6,95 (dd, J=8,6, 2,0 Гц, 1H), 7,56 (dd, J=8,1, 4,8 Гц, 1H), 7,65-7,72 (m, 1H), 8,14 (d, J=2,4 Гц, 1H), 8,53 (d, J=2,4 Гц, 1H), 8,71 (s, 1H), 8,81 (dd, J=4,9, 1,6 Гц, 1H).

MS [M+Na]⁺=396

[0108] (8) Синтез 2-фтор-6-(3-фтор-8-оксо-7-(пиридин-3-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила

Смесь 9-бром-3-фтор-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (16,5 мг, 0,044 ммоль, 1 эквивалент), сложного пинаколового эфира 2-циано-3-фторфенилбороновой кислоты (CAS № 765916-91-4) (14,2 мг, 0,057 ммоль, 1,3 эквивалента), (Ataphos)₂PdCl₂ (1,56 мг, 2,21 мкмоль, 0,05 эквивалента), триэтиламина (0,025 мл, 0,176 ммоль, 4 эквивалента), 1,4-диоксана (0,5 мл) и воды (0,15 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 130°C в течение 2,5 часов. Реакционный раствор непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель на силикагеле, 5%-90% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (11,0 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,71-4,80 (m, 1H), 4,86-4,95 (m, 1H), 6,97 (dd, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 7,20-7,28 (m, 1H), 7,46 (d, J=7,7 Гц, 1H), 7,57 (dd, J=8,2, 4,8 Гц, 1H), 7,63 (td, J=8,2, 5,8 Гц, 1H), 7,77 (ddd, J=8,1, 2,6, 1,6 Гц, 1H), 8,14 (d, J=2,6 Гц, 1H), 8,51 (s, 1H), 8,60 (d, J=2,6 Гц, 1H), 8,81 (dd, J=4,9, 1,6 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=415

[0109] Пример 15

Синтез 2-фтор-6-(7-(5-фторпиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила

[Химическая формула 79]

(1) Синтез трет-бутил-3-((5-фторпиридин-3-ил)амино)-3-оксопропаноата

3-(Трет-бутокси)-3-оксопропионовую кислоту (CAS № 40052-13-9) (2,75 мл, 17,8 ммоль, 2 эквивалента) и 3-амино-5-фторпиридин (CAS № 210169-05-4) (1,00 г, 8,92 ммоль, 1 эквивалент) растворяли в DMF (15 мл), добавляли триэтиламин (6,22 мл, 44,6 ммоль, 5 эквивалентов) и EDC (5,13 г, 26,8 ммоль, 3 эквивалента) и смесь перемешивали при 60°C в течение 24 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. В реакционную смесь добавляли воду и этилацетат и отделяли органический и водный слои. Водный слой дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 60%-90% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (2,1 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 1,52 (s, 9H), 3,42 (s, 2H), 8,16 (dt, J=10,5, 2,7 Гц, 1H), 8,23 (d, J=2,7 Гц, 1H), 8,31-8,49 (m, 1H), 9,83 (br. s., 1H).

[0110] (2) Синтез трет-бутил-3-(бензилокси)-2'-((((бензилокси)карбонил)окси)метил)-5''-фтор-6'-оксо-6'H-[2,3':1',3''-терпиридин]-5'-карбоксилата

Трет-бутил-3-((5-фторпиридин-3-ил)амино)-3-оксопропаноат (1,13 г, 4,44 ммоль, 1 эквивалент) и бензил (3-(3-(бензилокси)пиридин-2-ил)-4-метокси-2-оксобут-3-ен-1-ил)карбонат (смесь E/Z), полученный согласно примеру получения 9 (2,02 г, 4,67 ммоль, 1,05 эквивалентов), растворяли в пропионитриле (30 мл) и охлаждали до 0°C. В раствор добавляли лития бромид (772 мг, 8,89 ммоль, 2 эквивалента) и триэтиламин (2,17 мл, 15,6 ммоль, 3,5 эквивалента) и смесь перемешивали при 0°C в течение 1 часа. В реакционную смесь добавляли воду и этилацетат и отделяли органический и водный слои. Водный слой экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 60%-80% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (2,02 г).

MS [M+H]⁺=638

[0111] (3) Синтез трет-бутил-5''-фтор-3-гидрокси-2'-(гидроксиметил)-6'-оксо-6'H-[2,3':1',3''-терпиридин]-5'-карбоксилата

Трет-бутил-3-(бензилокси)-2'-((((бензилокси)карбонил)окси)метил)-5''-фтор-6'-оксо-6'H-[2,3':1',3''-терпиридин]-5'-карбоксилат (2,02 г, 3,17 ммоль, 1 эквивалент) растворяли в этаноле (45,4 мл) и добавляли метансульфоновую кислоту (0,411 мл, 6,34 ммоль, 2 эквивалента) и 10% палладий на угле (содержание воды 50,98%) (200 мг). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 1 часа. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом, а затем добавляли триэтиламин (1,33 мл, 9,50 ммоль, 3 эквивалента). Реакционную смесь фильтровали через Celite^TM и остаток промывали этилацетатом. Объединенные фильтраты концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 0%-20% метанол/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (1,23 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 1,54 (s, 9H), 3,81-3,95 (m, 1H), 3,95-4,09 (m, 1H), 7,21 (dd, J=8,2, 4,7 Гц, 1H), 7,32 (dd, J=8,2, 1,2 Гц, 1H), 7,58 (d, J=8,2 Гц, 1H), 8,11-8,28 (m, 1H), 8,42 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,57 (d, J=2,7 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=414

[0112] (4) Синтез трет-бутил-7-(5-фторпиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-карбоксилата

Трет-бутил-5''-фтор-3-гидрокси-2'-(гидроксиметил)-6'-оксо-6'H-[2,3':1',3''-терпиридин]-5'-карбоксилат (1,20 г, 2,90 ммоль, 1 эквивалент) растворяли в THF (50 мл) и добавляли раствор трифенилфосфина (837 мг, 3,19 ммоль, 1,1 эквивалента) и DMEAD (748 мг, 3,19 ммоль, 1,1 эквивалента) в THF (3 мл) при 0°C. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 часа. В реакционную смесь добавляли воду и этилацетат и отделяли органический и водный слои. Водный слой дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 50%-100% этилацетат/н-гептан, 15% метанол/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (645 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 1,60 (s, 9H), 4,67 (d, J=16,0 Гц, 1H), 4,82 (d, J=16,0 Гц, 1H), 7,09-7,23 (m, 2H), 7,49 (dt, J=8,0, 2,4 Гц, 1H), 8,29 (dd, J=4,3, 1,6 Гц, 1H), 8,35 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,68 (d, J=2,3 Гц, 1H), 8,96 (s, 1H).

MS масса/заряд=397

[0113] (5) Синтез 7-(5-фторпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Трет-бутил-7-(5-фторпиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-карбоксилат (645 мг, 1,63 ммоль, 1 эквивалент) растворяли в TFA (10 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 20 минут. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в DMSO (10 мл), добавляли дигидрат ацетата лития (1,66 г, 16,3 ммоль, 10 эквивалентов) и смесь перемешивали при 100°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. В реакционную смесь добавляли воду и этилацетат и отделяли органический и водный слои. Водный слой дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток растирали в порошок со смешанным раствором из 10% этилацетата и н-гептана и твердое вещество собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали н-гептаном с получением указанного в заголовке соединения (308 мг).

MS [M+H]⁺=296

[0114] (6) Синтез 9-бром-7-(5-фторпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

7-(5-Фторпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-он (305 мг, 1,03 ммоль, 1 эквивалент) растворяли в DMF (15 мл), добавляли NBS (202 мг, 1,14 ммоль, 1,1 эквивалента) и смесь перемешивали в течение 14 часов. В реакционную смесь добавляли дополнительное количество NBS (202 мг, 1,14 ммоль, 1,1 эквивалента) и смесь перемешивали в течение еще одного часа. В реакционную смесь добавляли воду и этилацетат и отделяли органический и водный слои. Водный слой дважды экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 50%-70% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (132 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,64 (d, J=16,0 Гц, 1H), 4,78 (d, J=16,0 Гц, 1H), 7,05-7,22 (m, 2H), 7,49 (dt, J=8,1, 2,2 Гц, 1H), 8,27 (dd, J=4,3, 1,6 Гц, 1H), 8,37 (d, J=2,3 Гц, 1H), 8,70 (d, J=2,3 Гц, 1H), 8,78 (s, 1H).

MS [M+H]⁺=374

[0115] (7) Синтез 2-фтор-6-(7-(5-фторпиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила

Смесь 9-бром-7-(5-фторпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (4,9 мг, 0,013 ммоль, 1 эквивалент), сложного пинаколового эфира 2-циано-3-фторфенилбороновой кислоты (CAS № 765916-91-4) (4,85 мг, 0,020 ммоль, 1,5 эквивалента), (Ataphos)₂PdCl₂ (0,46 мг, 0,655 мкмоль, 0,05 эквивалента), фторида калия (2,28 мг, 0,039 ммоль, 3 эквивалента), воды (0,2 мл) и 1,4-диоксана (0,5 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 140°C в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 80%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (2,3 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,75 (d, J=15,6 Гц, 1H), 4,90 (d, J=15,6 Гц, 1H), 7,14 (dd, J=9,0, 5,1 Гц, 1H), 7,18-7,26 (m, 2H), 7,45 (d, J=7,8 Гц, 1H), 7,57 (dt, J=8,0, 2,4 Гц, 1H), 7,64 (td, J=8,1, 5,7 Гц, 1H), 8,26 (dd, J=4,7, 1,6 Гц, 1H), 8,44 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,70 (d, J=2,7 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=415

[0116] Пример 16

Синтез 2-фтор-6-(10-фтор-3-оксо-4-(пиридин-3-ил)-4,5-дигидро-3H-хромено[3,4-b]пиридин-2-ил)бензонитрила

[Химическая формула 80]

(1) Синтез 3-(2-фтор-6-метоксифенил)-6-метокси-2-метилпиридина

Смесь 3-бром-6-метокси-2-пиколина (CAS № 126717-59-7) (1 г, 4,95 ммоль, 1 эквивалент), (2-фтор-6-метоксифенил)бороновой кислоты (CAS № 78495-63-3) (925 мг, 5,44 ммоль, 1,1 эквивалента), (Ataphos)₂PdCl₂ (175 мг, 0,247 ммоль, 0,05 эквивалента), карбоната натрия (787 мг, 7,42 ммоль, 1,5 эквивалента), DME (15 мл) и воды (5 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 110°C в течение 1,5 часа. Всего выполняли четыре сходные реакции, а затем обрабатывали вместе.

В реакционную смесь добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель на силикагеле, 0%-20% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (3,41 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 2,26 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 3,96 (s, 3H), 6,59-6,69 (m, 1H), 6,74-6,83 (m, 2H), 7,30 (td, J=8,4, 6,6 Гц, 1H), 7,37 (d, J=8,6 Гц, 1H).

[0117] (2) Синтез 10-фтор-4,5-дигидро-3H-хромено[3,4-b]пиридин-3-она

Смесь 3-(2-фтор-6-метоксифенил)-6-метокси-2-метилпиридина (1,4 г, 5,66 ммоль, 1 эквивалент), NBS (1,11 г, 6,23 ммоль, 1,1 эквивалента), AIBN (46 мг, 0,283 ммоль, 0,05 эквивалента) и четыреххлористого углерода (60 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 40 минут. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 0%-9,09% этилацетат/н-гептан). Полученный неочищенный продукт растворяли в 48% водном растворе бромистоводородной кислоты (40 мл). Реакционную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение ночи. В раствор добавляли 48% водный раствор бромистоводородной кислоты (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 8 часов. В раствор добавляли 48% водный раствор бромистоводородной кислоты (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение ночи. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, а затем концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия до тех пор, пока pH раствора не составлял pH≥7. Осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество последовательно промывали водой, н-гептаном и этилацетатом с получением указанного в заголовке соединения (776 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ (ppm): 4,96 (s, 2H), 6,37 (br. s, 1H), 6,82 (d, J=8,2 Гц, 1H), 6,86-6,98 (m, 1H), 7,07-7,22 (m, 1H), 7,90 (d, J=9,0 Гц, 1H), 11,84-12,18 (m, 1H).

[0118] (3) Синтез 10-фтор-4-(пиридин-3-ил)-4,5-дигидро-3H-хромено[3,4-b]пиридин-3-она

Смесь 10-фтор-4,5-дигидро-3H-хромено[3,4-b]пиридин-3-она (300 мг, 1,38 ммоль, 1 эквивалент), карбоната серебра (571 мг, 2,07 ммоль, 1,5 эквивалента), йодида меди(I) (158 мг, 0,829 ммоль, 0,6 эквивалента), пиридина (1,12 мл, 13,8 ммоль, 10 эквивалентов) и DMF (15 мл) перемешивали при 80°C в течение 20 минут. В реакционную смесь пять раз добавляли пиридин-3-бороновую кислоту (CAS № 1692-25-7) (85 мг, 0,691 ммоль, 0,5 эквивалента) через каждые 30 минут (0,5×5=2,5 эквивалента в целом). Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, затем наносили на подушку Celite^TM (NH-силикагель на Celite^TM) и элюировали этилацетатом. Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 20%-75% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (15,7 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,45-4,54 (m, 1H), 4,58-4,65 (m, 1H), 6,71-6,79 (m, 2H), 6,84 (ddd, J=11,4, 8,4, 1,1 Гц, 1H), 7,14 (td, J=8,3, 6,1 Гц, 1H), 7,55 (ddd, J=8,1, 4,8, 0,8 Гц, 1H), 7,70 (ddd, J=8,2, 2,5, 1,6 Гц, 1H), 8,16 (d, J=9,8 Гц, 1H), 8,52 (dd, J=2,5, 0,8 Гц, 1H), 8,78 (dd, J=4,9, 1,6 Гц, 1H).

[0119] (4) Синтез 2-бром-10-фтор-4-(пиридин-3-ил)-4,5-дигидро-3H-хромено[3,4-b]пиридин-3-она

Смесь 10-фтор-4-(пиридин-3-ил)-4,5-дигидро-3H-хромено[3,4-b]пиридин-3-она (15,7 мг, 0,053 ммоль, 1 эквивалент), NBS (10,5 мг, 0,059 ммоль, 1,1 эквивалента) и DMF (0,5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часа. В реакционную смесь добавляли NBS (5 мг, 0,028 ммоль, 0,527 эквивалента). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. В реакционную смесь добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной TLC (силикагель, 60% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (6,5 мг).

MS [M+H]⁺=373

[0120] (5) Синтез 2-фтор-6-(10-фтор-3-оксо-4-(пиридин-3-ил)-4,5-дигидро-3H-хромено[3,4-b]пиридин-2-ил)бензонитрила

Смесь 2-бром-10-фтор-4-(пиридин-3-ил)-4,5-дигидро-3H-хромено[3,4-b]пиридин-3-она (50 мг, 0,134 ммоль, 1 эквивалент), сложного пинаколового эфира 2-циано-3-фторфенилбороновой кислоты (CAS № 765916-91-4) (49,7 мг, 0,201 ммоль, 1,5 эквивалента), (Ataphos)₂PdCl₂ (4,74 мг, 6,70 мкмоль, 0,05 эквивалента), фторида калия (23,4 мг, 0,402 ммоль, 3 эквивалента), 1,4-диоксана (0,8 мл) и воды (0,2 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 130°C в течение 10 минут. Реакционную смесь непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, 10%-67% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (39,8 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,54-4,61 (m, 1H), 4,65-4,72 (m, 1H), 6,80 (d, J=8,0 Гц, 1H), 6,83-6,91 (m, 1H), 7,13-7,25 (m, 2H), 7,48 (d, J=6,8 Гц, 1H), 7,57 (dd, J=8,0, 4,7 Гц, 1H), 7,64 (td, J=8,2, 5,8 Гц, 1H), 7,73-7,82 (m, 1H), 8,37 (s, 1H), 8,58 (d, J=2,5 Гц, 1H), 8,80 (dd, J=4,8, 1,5 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=414

[0121] Пример 17

Синтез 9-(2-хлор-3-фторфенил)-7-(5-фторпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

[Химическая формула 81]

(1) Синтез 9-(2-хлор-3-фторфенил)-7-(5-фторпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 9-бром-7-(5-фторпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она, полученного согласно примеру 15-(6) (7,0 мг, 0,019 ммоль, 1 эквивалент), 2-хлор-3-фторфенилбороновой кислоты (CAS № 871329-52-1) (3,26 мг, 0,019 ммоль, 1 эквивалент), (Ataphos)₂PdCl₂ (0,66 мг, 0,935 мкмоль, 0,05 эквивалента), фторида калия (3,26 мг, 0,056 ммоль, 3 эквивалента), воды (0,1 мл) и 1,4-диоксана (0,5 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 150°C в течение 5 минут. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 50%-70% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (3,8 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,75 (d, J=15,6 Гц, 1H), 4,90 (d, J=15,6 Гц, 1H), 7,08-7,41 (m, 5H), 7,50-7,63 (m, 1H), 8,25 (dd, J=4,7, 1,6 Гц, 1H), 8,38-8,48 (m, 2H), 8,68 (d, J=2,7 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=424

[0122] Пример 18

Синтез 2-фтор-6-(8-оксо-7-(пиримидин-5-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила

[Химическая формула 82]

(1) Синтез трет-бутил-3-оксо-3-(пиримидин-5-иламино)пропаноата

В смесь 5-аминопиримидина (CAS № 591-55-9) (2,00 г, 21,0 ммоль, 1 эквивалент), триэтиламина (14,7 мл, 105 ммоль, 5 эквивалентов), EDC (7,26 г, 37,9 ммоль, 1,8 эквивалента), N,N-диметил-4-аминопиридина (0,257 г, 2,10 ммоль, 0,1 эквивалента) и DCM (60,0 мл) по каплям добавляли 3-(трет-бутокси)-3-оксопропионовую кислоту (CAS № 40052-13-9) (4,86 мл, 31,5 ммоль, 1,5 эквивалента) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней. В реакционную смесь добавляли воду и этилацетат. Органический слой промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 25%-71% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (4,73 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 1,52 (s, 9H), 3,44 (s, 2H), 8,98 (s, 1H), 9,03 (s, 2H), 9,77 (br. s, 1H).

[0123] (2) Синтез трет-бутил-3-(бензилокси)-2'-((((бензилокси)карбонил)окси)метил)-6'-оксо-1'-(пиримидин-5-ил)-1',6'-дигидро-[2,3'-бипиридин]-5'-карбоксилата

В раствор бензил(3-(3-(бензилокси)пиридин-2-ил)-4-метокси-2-оксобут-3-ен-1-ил)карбоната (смесь E/Z), полученного согласно примеру получения 9 (3,05 г, 7,03 ммоль, 1 эквивалент), в пропионитриле (50,0 мл), последовательно добавляли трет-бутил-3-оксо-3-(пиримидин-5-иламино)пропаноат (2,00 г, 8,43 ммоль, 1,2 эквивалента), лития бромид (1,22 г, 14,1 ммоль, 2 эквивалента) и триэтиламин (3,43 мл, 24,6 ммоль, 3,5 эквивалента) при 0°C. После перемешивания при той же температуре в течение 5 минут реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 часов. В реакционную смесь добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, 20%-75% этилацетат/н-гептан). Полученный неочищенный продукт растирали в порошок со смешанным раствором MTBE и н-гептана с получением указанного в заголовке соединения (2,30 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 1,55 (s, 9H), 4,70 (s, 2H), 4,93 (s, 2H), 5,07 (s, 2H), 7,24-7,27 (m, 1H), 7,29-7,42 (m, 11H), 8,26 (dd, J=4,7, 1,6 Гц, 1H), 8,34 (s, 1H), 8,62 (d, J=0,8 Гц, 2H), 9,21 (s, 1H).

[0124] (3) Синтез бензил((3-(бензилокси)-6'-оксо-1'-(пиримидин-5-ил)-1',6'-дигидро-[2,3'-бипиридин]-2'-ил)метил)карбоната

К трет-бутил-3-(бензилокси)-2'-((((бензилокси)карбонил)окси)метил)-6'-оксо-1'-(пиримидин-5-ил)-1',6'-дигидро-[2,3'-бипиридин]-5'-карбоксилату (1,56 г, 2,51 ммоль, 1 эквивалент) добавляли хлороводород (4 M раствор в этилацетате) (6,28 мл, 25,1 ммоль, 10 эквивалентов) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, к полученному остатку добавляли DMSO (46,8 мл) и дигидрат ацетата лития (2,56 г, 25,1 ммоль, 10 эквивалентов) и реакционную смесь перемешивали при 120°C в течение 4 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем в реакционную смесь добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 50%-83% этилацетат/н-гептан, 5% метанол/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (588 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,69 (s, 2H), 4,94 (s, 2H), 5,08 (s, 2H), 6,75 (d, J=9,8 Гц, 1H), 7,27-7,42 (m, 12H), 7,60 (d, J=9,4 Гц, 1H), 8,25 (dd, J=4,7, 1,6 Гц, 1H), 8,67 (s, 2H), 9,23 (s, 1H).

MS [M+H]⁺=521

[0125] (4) Синтез бензил((3-(бензилокси)-5'-бром-6'-оксо-1'-(пиримидин-5-ил)-1',6'-дигидро-[2,3'-бипиридин]-2'-ил)метил)карбоната

В раствор бензил((3-(бензилокси)-6'-оксо-1'-(пиримидин-5-ил)-1',6'-дигидро-[2,3'-бипиридин]-2'-ил)метил)карбоната (560 мг, 1,08 ммоль, 1 эквивалент) в DMF (5,00 мл) добавляли NBS (287 мг, 1,61 ммоль, 1,5 эквивалента) при комнатной температуре и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. В реакционную смесь добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 50%-77% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (595 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,66 (s, 2H), 4,93 (s, 2H), 5,08 (s, 2H), 7,26-7,42 (m, 12H), 8,03 (s, 1H), 8,25 (dd, J=4,5, 1,4 Гц, 1H), 8,64 (s, 2H), 9,23 (s, 1H).

MS [M+H]⁺=599, 601

[0126] (5) Синтез бензил((3-(бензилокси)-5'-(2-циано-3-фторфенил)-6'-оксо-1'-(пиримидин-5-ил)-1',6'-дигидро-[2,3'-бипиридин]-2'-ил)метил)карбоната

Смесь бензил((3-(бензилокси)-5'-бром-6'-оксо-1'-(пиримидин-5-ил)-1',6'-дигидро-[2,3'-бипиридин]-2'-ил)метил)карбоната (590 мг, 0,984 ммоль, 1 эквивалент), сложного пинаколового эфира 2-циано-3-фторфенилбороновой кислоты (CAS № 765916-91-4) (365 мг, 1,48 ммоль, 1,5 эквивалента), (Ataphos)₂PdCl₂ (34,8 мг, 0,049 ммоль, 0,05 эквивалента), фторида калия (172 мг, 2,95 ммоль, 3 эквивалента), 1,4-диоксана (15,0 мл) и воды (3,0 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 120°C в течение 30 минут. В реакционную смесь добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 50%-83% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (511 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,76 (s, 2H), 4,96 (s, 2H), 5,13 (s, 2H), 7,21 (t, J=8,6 Гц, 1H), 7,27-7,37 (m, 13H), 7,57 (td, J=8,2, 5,9 Гц, 1H), 7,83 (s, 1H), 8,23 (dd, J=4,7, 1,2 Гц, 1H), 8,73 (s, 2H), 9,24 (s, 1H).

MS [M+H]⁺=640

[0127] (6) Синтез 2-фтор-6-(3-гидрокси-2'-(гидроксиметил)-6'-оксо-1'-(пиримидин-5-ил)-1',6'-дигидро-[2,3'-бипиридин]-5'-ил)бензонитрила

Смесь бензил((3-(бензилокси)-5'-(2-циано-3-фторфенил)-6'-оксо-1'-(пиримидин-5-ил)-1',6'-дигидро-[2,3'-бипиридин]-2'-ил)метил)карбоната (505 мг, 0,79 ммоль, 1 эквивалент), 5% палладия на угле (84,0 мг, 0,039 ммоль, 0,05 эквивалента) и этанола (20,0 мл) энергично перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 6 часов. Реакционную смесь продували азотом, а затем фильтровали. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (311 мг).

MS [M+H]⁺=416

[0128] (7) Синтез 2-фтор-6-(8-оксо-7-(пиримидин-5-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила

В смесь 2-фтор-6-(3-гидрокси-2'-(гидроксиметил)-6'-оксо-1'-(пиримидин-5-ил)-1',6'-дигидро-[2,3'-бипиридин]-5'-ил)бензонитрила (311 мг, 0,749 ммоль, 1 эквивалент), трифенилфосфина (295 мг, 1,12 ммоль, 1,5 эквивалента) и THF (10,0 мл) медленно добавляли DMEAD (263 мг, 1,12 ммоль, 1,5 эквивалента) при комнатной температуре и смесь перемешивали в течение 10 минут. В реакционную смесь добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 25%-63% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (110 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,82 (s, 2H), 7,12-7,17 (m, 1H), 7,19-7,23 (m, 1H), 7,24-7,26 (m, 1H), 7,44 (d, J=7,8 Гц, 1H), 7,65 (td, J=8,1, 5,7 Гц, 1H), 8,27 (dd, J=4,5, 1,4 Гц, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,81 (s, 2H), 9,39 (s, 1H).

MS [M+H]⁺=398

[0129] Пример 19

Синтез 3,6-дифтор-2-(8-оксо-7-(пиридин-3-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила

[Химическая формула 83]

(1) Синтез 7-(пиридин-3-ил)-9-(трибутилстаннил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 9-бром-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она, полученного согласно примеру получения 2 (50 мг, 0,14 ммоль, 1 эквивалент), гекса-н-бутилдиолова (0,1 мл, 0,20 ммоль, 1,42 эквивалента), Pd(PPh₃)₄ (10 мг, 8,65 мкмоль, 0,062 эквивалента) и 1,4-диоксана (1,5 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 150°C в течение 10 минут. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, затем добавляли гекса-н-бутилдиолово (0,1 мл, 0,20 ммоль, 1,42 эквивалента) и Pd(PPh₃)₄ (10 мг, 8,65 мкмоль, 0,062 эквивалента) и смесь снова подвергали реакции в микроволновом реакторе при 160°C в течение 1 часа. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, а затем непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 0%-60% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (56 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 0,86-0,93 (m, 9H), 1,03-1,23 (m, 6H), 1,31-1,38 (m, 6H), 1,49-1,55 (m, 3H), 1,60-1,70 (m, 3H), 4,59-4,68 (m, 1H), 4,74-4,83 (m, 1H), 7,05-7,11 (m, 1H), 7,11-7,17 (m, 1H), 7,51 (dd, J=8,1, 4,8 Гц, 1H), 7,68 (dt, J=8,1, 2,0 Гц, 1H), 8,27 (dd, J=4,6, 1,7 Гц, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,51 (d, J=2,6 Гц, 1H), 8,74 (dd, J=4,8, 1,5 Гц, 1H).

[0130] (2) Синтез 3,6-дифтор-2-(8-оксо-7-(пиридин-3-ил)-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила

Смесь 7-(пиридин-3-ил)-9-(трибутилстаннил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (40 мг, 0,071 ммоль, 1 эквивалент), 2-бром-3,6-дифторбензонитрила (US 20150126449 A1, стр. 60) (CAS № 1502090-29-0) (18,5 мг, 0,085 ммоль, 1,2 эквивалента), йодида меди(I) (2,69 мг, 0,014 ммоль, 0,2 эквивалента), Pd(PPh₃)₄ (8,16 мг, 7,06 мкмоль, 0,1 эквивалента) и 1,4-диоксана (1,5 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 160°C в течение 1 часа. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, а затем непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, 2%-65% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (16,8 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,69-4,80 (m, 1H), 4,88 (t, J=15,4 Гц, 1H), 7,10-7,15 (m, 1H), 7,19 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,20-7,26 (m, 1H), 7,34-7,44 (m, 1H), 7,51-7,61 (m, 1H), 7,71-7,85 (m, 1H), 8,25 (dd, J=4,6, 1,3 Гц, 1H), 8,53-8,70 (m, 2H), 8,74-8,88 (m, 1H).

MS [M+H]⁺=415

[0131] Пример 20

Синтез 2-(7-(5-хлорпиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)-6-фторбензонитрила

[Химическая формула 84]

(1) Синтез 7-(5-хлорпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

В смесь 6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она, полученного согласно примеру получения 1 (200 мг, 0,999 ммоль, 1 эквивалент), карбоната серебра (413 мг, 1,50 ммоль, 1,5 эквивалента), йодида меди(I) (114 мг, 0,599 ммоль, 0,6 эквивалента), пиридина (0,808 мл, 9,99 ммоль, 10 эквивалентов) и DMF (5 мл) медленно добавляли суспензию из 5-хлорпиридин-3-бороновой кислоты (CAS № 872041-85-5) (393 мг, 2,50 ммоль, 2,5 эквивалента) в DMF (1 мл) при 80°C. Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 24 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли этилацетат. Смесь фильтровали через Celite^TM и остаток промывали этилацетатом. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 60%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (20 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,68 (d, J=16,0 Гц, 1H), 4,79 (d, J=16,0 Гц, 1H), 6,77 (d, J=10,2 Гц, 1H), 7,06-7,13 (m, 1H), 7,14-7,21 (m, 1H), 7,72 (t, J=2,0 Гц, 1H), 8,26 (dd, J=4,5, 1,0 Гц, 1H), 8,35 (d, J=9,4 Гц, 1H), 8,42 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,75 (d, J=2,3 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=312

[0132] (2) Синтез 9-бром-7-(5-хлорпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

7-(5-Хлорпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-он (20 мг, 0,064 ммоль, 1 эквивалент) растворяли в DMF (1 мл), добавляли NBS (12,6 мг, 0,071 ммоль, 1,1 эквивалента) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 50%-80% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (12 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,65 (d, J=15,6 Гц, 1H), 4,77 (d, J=15,6 Гц, 1H), 7,06-7,22 (m, 2H), 7,68-7,78 (m, 1H), 8,26 (dd, J=4,7, 1,6 Гц, 1H), 8,42 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,72-8,84 (m, 2H).

MS [M+H]⁺=390

[0133] (3) Синтез 2-(7-(5-хлорпиридин-3-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)-6-фторбензонитрила

Смесь 9-бром-7-(5-хлорпиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (6,5 мг, 0,017 ммоль, 1 эквивалент), сложного пинаколового эфира 2-циано-3-фторфенилбороновой кислоты (CAS № 765916-91-4) (6,17 мг, 0,025 ммоль, 1,5 эквивалента), (Ataphos)₂PdCl₂ (0,59 мг, 0,832 мкмоль, 0,05 эквивалента), фторида калия (2,90 мг, 0,050 ммоль, 3 эквивалента), воды (0,15 мл) и 1,4-диоксана (1,5 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 150°C в течение 10 минут. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 60%-90% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (2,4 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,77 (d, J=15,6 Гц, 1H), 4,88 (d, J=15,6 Гц, 1H), 7,05-7,17 (m, 1H), 7,18-7,30 (m, 2H), 7,44 (d, J=7,8 Гц, 1H), 7,64 (td, J=8,1, 5,7 Гц, 1H), 7,81 (t, J=2,1 Гц, 1H), 8,26 (dd, J=4,7, 1,2 Гц, 1H), 8,49 (d, J=2,3 Гц, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,77 (d, J=2,0 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=431

[0134] Пример 21

Синтез 2-фтор-6-(7-(2-метилпиримидин-5-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила

[Химическая формула 85]

(1) Синтез трет-бутил-3-((2-метилпиримидин-5-ил)амино)-3-оксопропаноата

Смесь 3-(трет-бутокси)-3-оксопропионовой кислоты (CAS № 40052-13-9) (1,61 г, 10,1 ммоль, 1,1 эквивалента), 2-метил-5-пиримидинамина (CAS № 39889-94-6) (1,00 г, 9,16 ммоль, 1,0 эквивалент), триэтиламина (1,53 мл, 11,0 ммоль, 1,2 эквивалента), EDC (2,11 г, 11,0 ммоль, 1,2 эквивалента) и DCM (20 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натри и смесь экстрагировали DCM. Органический слой концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 50%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (2,21 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 1,53 (s, 9H), 2,72 (s, 3H), 3,43 (s, 2H), 8,91 (s, 2H), 9,64 (br. s, 1H).

[0135] (2) Синтез трет-бутил-3-(бензилокси)-2'-((((бензилокси)карбонил)окси)метил)-1'-(2-метилпиримидин-5-ил)-6'-оксо-1',6'-дигидро-[2,3'-бипиридин]-5'-карбоксилата

Смесь трет-бутил-3-((2-метилпиримидин-5-ил)амино)-3-оксопропаноата (313 мг, 1,25 ммоль, 1,2 эквивалента), лития бромида (180 мг, 2,08 ммоль, 2,0 эквивалента), бензил(3-(3-(бензилокси)пиридин-2-ил)-4-метокси-2-оксобут-3-ен-1-ил)карбоната (смесь E/Z), полученного согласно примеру получения 9 (450 мг, 1,04 ммоль, 1,0 эквивалент), триэтиламина (0,506 мл, 3,63 ммоль, 3,5 эквивалента) и пропионитрила (5,00 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. Реакционную смесь непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 40%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (480 мг).

MS масса/заряд=636

[0136] (3) Синтез трет-бутил-3-гидрокси-2'-(гидроксиметил)-1'-(2-метилпиримидин-5-ил)-6'-оксо-1',6'-дигидро-[2,3'-бипиридин]-5'-карбоксилата

Смесь трет-бутил-3-(бензилокси)-2'-((((бензилокси)карбонил)окси)метил)-1'-(2-метилпиримидин-5-ил)-6'-оксо-1',6'-дигидро-[2,3'-бипиридин]-5'-карбоксилата (480 мг, 0,756 ммоль, 1,0 эквивалент), 10% палладия на угле (содержание воды 53,9%) (80,0 мг, 0,035 ммоль, 0,046 эквивалента) и метанола (3,00 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 40 минут. Реакционную смесь фильтровали через Celite^TM и остаток промывали этилацетатом. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 0%-20% метанол/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (250 мг).

MS [M+H]⁺=411

[0137] (4) Синтез трет-бутил-7-(2-метилпиримидин-5-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-карбоксилата

В смесь трет-бутил-3-гидрокси-2'-(гидроксиметил)-1'-(2-метилпиримидин-5-ил)-6'-оксо-1',6'-дигидро-[2,3'-бипиридин]-5'-карбоксилата (250 мг, 0,609 ммоль, 1,0 эквивалент), трифенилфосфина (224 мг, 0,853 ммоль, 1,4 эквивалента) и THF (3,00 мл) добавляли раствор DMEAD (200 мг, 0,853 ммоль, 1,4 эквивалента) в THF (1,00 мл) при 0°C. После того как убедились в прогрессе реакционной смеси, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении приблизительно на половину от исходного объема раствора. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 40%-100% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (239 мг).

MS [M+H]⁺=393

[0138] (5) Синтез 7-(2-метилпиримидин-5-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

К трет-бутил-7-(2-метилпиримидин-5-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-карбоксилату (239 мг, 0,609 ммоль, 1,0 эквивалент) добавляли TFA (3,00 мл) и реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли DMSO (3,00 мл) и дигидрат ацетата лития (311 мг, 3,05 ммоль, 5,0 эквивалентов) и реакционную смесь перемешивали при 120°C в течение 30 минут. В реакционную смесь добавляли 10% водный раствор хлорида натрия и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, 60%-80% этилацетат/н-гептан). Полученный неочищенный продукт снова очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 0%-15% метанол/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (34,0 мг).

MS [M+H]⁺=293

[0139] (6) Синтез 9-бром-7-(2-метилпиримидин-5-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 7-(2-метилпиримидин-5-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (34,0 мг, 0,116 ммоль, 1,0 эквивалент), NBS (31,1 мг, 0,174 ммоль, 1,5 эквивалента) и DMF (3,00 мл) перемешивали при 50°C в течение 30 минут. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 0%-25% метанол/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (22,0 мг).

MS [M+H]⁺=371

[0140] (7) Синтез 2-фтор-6-(7-(2-метилпиримидин-5-ил)-8-оксо-7,8-дигидро-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-9-ил)бензонитрила

Смесь 9-бром-7-(2-метилпиримидин-5-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она (22,0 мг, 0,059 ммоль, 1,0 эквивалент), сложного пинаколового эфира 2-циано-3-фторфенилбороновой кислоты (CAS № 765916-91-4) (22,0 мг, 0,089 ммоль, 1,5 эквивалента), (Ataphos)₂PdCl₂ (4,20 мг, 5,93 мкмоль, 0,1 эквивалента), фторида калия (10,3 мг, 0,178 ммоль, 3,0 эквивалента), 1,4-диоксана (0,8 мл) и воды (0,4 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 140°C в течение 10 минут. Реакционную смесь непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, 80%-100% этилацетат/н-гептан). Полученный неочищенный продукт снова очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, 50%-80% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (11,5 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 2,88 (s, 3H), 4,84 (s, 2H), 7,08-7,32 (m, 3H), 7,44 (d, J=7,7 Гц, 1H), 7,64 (td, J=8,1, 5,5 Гц, 1H), 8,26 (dd, J=4,8, 1,5 Гц, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,68 (s, 2H).

MS [M+H]⁺=412

[0141] Пример 22

Синтез 9-(3-фтор-2-метилфенил)-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

[Химическая формула 86]

(1) Синтез 9-(3-фтор-2-метилфенил)-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 9-бром-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она, полученного согласно примеру получения 2 (10,7 мг, 0,03 ммоль, 1 эквивалент), (3-фтор-2-метилфенил)бороновой кислоты (CAS № 163517-61-1) (6,94 мг, 0,045 ммоль, 1,5 эквивалента), (Ataphos)₂PdCl₂ (1,06 мг, 1,50 мкмоль, 0,05 эквивалента), фторида калия (5,24 мг, 0,09 ммоль, 3 эквивалента), 1,4-диоксана (0,4 мл) и воды (0,1 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 120°C в течение 30 минут. Реакционную смесь непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, 5%-67% этилацетат/н-гептан) с получением указанного в заголовке соединения (10 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 2,20 (d, J=2,3 Гц, 3H), 4,69-4,75 (m, 1H), 4,82-4,89 (m, 1H), 7,00-7,07 (m, 1H), 7,08-7,14 (m, 2H), 7,15-7,23 (m, 2H), 7,54 (dd, J=8,0, 4,9 Гц, 1H), 7,69-7,79 (m, 1H), 8,24 (dd, J=4,7, 1,6 Гц, 1H), 8,35 (s, 1H), 8,58 (d, J=2,3 Гц, 1H), 8,78 (dd, J=4,7, 1,6 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=386

[0142] Ссылочный пример 1

Синтез 9-(2,6-дифторфенил)-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

[Химическая формула 87]

(1) Синтез 9-(2,6-дифторфенил)-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она

Смесь 9-бром-7-(пиридин-3-ил)-6H-пирано[3,2-b:5,4-b']дипиридин-8(7H)-она, полученного согласно примеру получения 2 (100 мг, 0,281 ммоль, 1 эквивалент), трибутил(2,6-дифторфенил)станнана, полученного согласно примеру получения 5 (147 мг, 0,365 ммоль, 1,3 эквивалента), (Ataphos)₂PdCl₂ (9,94 мг, 0,014 ммоль, 0,05 эквивалента), йодида меди(I) (5,35 мг, 0,028 ммоль, 0,1 эквивалента) и 1,4-диоксана (3 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 150°C в течение 7 часов. Реакционную смесь непосредственно очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель на силикагеле, 5%-95% этилацетат/н-гептан). Полученный неочищенный продукт растирали в порошок со смешанным раствором этанола и н-гептана (1:4) и осадок собирали фильтрованием. Полученное твердое вещество промывали н-гептаном с получением указанного в заголовке соединения (41,5 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 4,69-4,77 (m, 1H), 4,83-4,91 (m, 1H), 6,93-7,01 (m, 2H), 7,08-7,14 (m, 1H), 7,15-7,19 (m, 1H), 7,28-7,38 (m, 1H), 7,51-7,57 (m, 1H), 7,73-7,79 (m, 1H), 8,25 (dd, J=4,6, 1,5 Гц, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,60 (d, J=2,4 Гц, 1H), 8,78 (dd, J=4,8, 1,5 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=390

[0143] Контрольное соединение

Синтез 2-(3-оксо-4-(пиридин-3-ил)-3,5-дигидро-2H-хромено[4,3-c]пиридазин-2-ил)бензонитрила

[Химическая формула 88]

(1) Синтез 2-(4-оксохроман-3-ил)-2-(пиридин-3-ил)ацетонитрила

В раствор 3-(пиридин-3-илметилен)хроман-4-она (European Journal of Medicinal Chemistry, 2011, 46, 3201-3209) (4,74 г, 20,0 ммоль, 1 эквивалент) в DMF (67 мл) добавляли раствор цианида калия (2,60 г, 39,9 ммоль, 2 эквивалента) и хлорида аммония (1,78 г, 33,3 ммоль, 1,67 эквивалента) в воде (20 мл) при 0°C на протяжении 10 минут. Реакционную смесь перемешивали при той же температуре в течение 10 минут, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. В реакционную смесь добавляли воду и смесь экстрагировали диэтиловым эфиром и этилацетатом. Объединенные органические слои промывали водой. Органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (5,14 г).

[0144] (2) Синтез 2-(4-оксохроман-3-ил)-2-(пиридин-3-ил)уксусной кислоты

Смешанный раствор 2-(4-оксохроман-3-ил)-2-(пиридин-3-ил)ацетонитрила (12,3 г, 46,5 ммоль) в уксусной кислоте (60 мл) и концентрированной хлористоводородной кислоты (60 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 3 часов. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры и реакционную смесь выливали в ледяную воду. Раствор нейтрализовали с помощью 5 н. водного раствора гидроксида натрия и экстрагировали DCM. Объединенные органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (4,2 г).

[0145] (3) Синтез 2-(2-йодфенил)-4-(пиридин-3-ил)-4a,5-дигидро-2H-хромено[4,3-c]пиридазин-3(4H)-она

К (2-йодфенил)гидразина гидрохлориду (Journal of Medicinal Chemistry, 1988, 31 (9), 1712-1719) (4,01 г, 14,8 ммоль, 1 эквивалент) добавляли 1 н. водный раствор гидроксида натрия и смесь экстрагировали DCM. Объединенные органические слои концентрировали с получением (2-йодфенил)гидразина. Раствор вышеупомянутых (2-йодфенил)гидразина и 2-(4-оксохроман-3-ил)-2-(пиридин-3-ил)уксусной кислоты (4,20 г, 14,8 ммоль, 1 эквивалент) в н-бутаноле нагревали при 110°C в течение 5 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. В раствор полученного в результате остатка в этаноле (30 мл) добавляли пара-толуолсульфоновой кислоты моногидрат (10 мг) и (2-йодфенил)гидразин, полученный с помощью вышеуказанного способа (1 эквивалент), и смесь нагревали при 90°C в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Раствор полученного остатка в уксусной кислоте нагревали при 90°C в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли этилацетат и смесь последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия, водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом магния, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с получением указанного в заголовке соединения (1,15 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 3,61-3,84 (m, 2H), 3,95-4,09 (m, 2H), 6,92 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6,96-7,04 (m, 1H), 7,08-7,18 (m, 1H), 7,29-7,36 (m, 1H), 7,39 (dd, J=7,6, 4,9 Гц, 1H), 7,43-7,56 (m, 2H), 7,70 (br. s, 1H), 7,89-8,03 (m, 2H), 8,54 (d, J=1,6 Гц, 1H), 8,63 (dd, J=4,7, 1,6 Гц, 1H).

MS [M+H]⁺=482

[0146] (4) Синтез 2-(3-оксо-4-(пиридин-3-ил)-3,5-дигидро-2H-хромено[4,3-c]пиридазин-2-ил)бензонитрила

Смешанный раствор 2-(2-йодфенил)-4-(пиридин-3-ил)-4a,5-дигидро-2H-хромено[4,3-c]пиридазин-3(4H)-она (50 мг, 0,104 ммоль, 1 эквивалент), цианида цинка(II) (40 мг, 0,341 ммоль, 3,28 эквивалента), Pd(PPh₃)₄ (5 мг, 4,33 мкмоль, 0,042 эквивалента) и NMP (1,5 мл) подвергали реакции в микроволновом реакторе при 100°C в течение 1 часа и при 120°C в течение 3 часов. В реакционную смесь добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле и препаративной TLC с получением указанного в заголовке соединения (6,2 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ (ppm): 5,21 (s, 2H), 7,08-7,12 (m, 1H), 7,12-7,20 (m, 1H), 7,42-7,48 (m, 1H), 7,56-7,61 (m, 1H), 7,70-7,77 (m, 1H), 7,88-8,00 (m, 4H), 8,07-8,12 (m, 1H), 8,64-8,75 (m, 2H).

MS [M+Na]⁺=401

[0147] Пример фармакологического испытания

Авторы настоящего изобретения провели следующие испытания для подтверждения эффектов соединений по настоящему изобретению. Что касается ингибирующего действия в отношении AMPA-рецептора у соединений, с помощью системы первичной культуры нейронов коры головного мозга эмбрионов крыс исследовали индуцированное AMPA интранейрональное подавляющее действие в отношении поступления кальция. Что касается противосудорожного действия соединений, то использовали индуцируемые стимуляцией в 6 Гц (44 мА) судороги, известные как устойчивая к лечению модель судорог. Индуцируемое ингибитором AMPA угнетающее действие на центральную нервную систему, такое как нарушение координации, оценивали при помощи испытания на способность удерживаться на вращающемся барабане. Авторы настоящего изобретения с высокой точностью определили широту терапевтического действия соединений, одновременно определяя на одних и тех же животных эффекты подавления соединениями судорожных приступов и нарушения координации, вторично индуцированной соединениями.

[0148] Индуцированное AMPA интранейрональное подавляющее действие в отношении поступления кальция

<Условия культивирования> Из матки крыс линии Вистар, подвергнутых анестезии с помощью изофлурана, извлекали целые плоды на 18 день эмбрионального развития (Charles River, Япония). Из целых плодов извлекали целый мозг и отделяли кору головного мозга в среду Лейбовича L-15 или сбалансированный солевой раствор Хенкса, содержащий 20% фетальной бычьей сыворотки. Полученный материал обрабатывали раствором трипсина/ДНКазы при 37°C в течение от 45 до 60 минут. После добавления сыворотки для остановки реакции с трипсином, полученный материал центрифугировали при 1200-1500 rpm в течение 3-5 минут. После удаления надосадочной жидкости добавляли нейробазальную среду (содержащую 2% добавки B-27 и т. п.; далее по тексту "нейробазальная среда") и клетки равномерно диспергировали путем аккуратного пипетирования. Клеточную суспензию слегка перемешивали, а затем фильтровали через нейлоновый сетчатый фильтр. Живые клетки подсчитывали с помощью гемоцитометра и разбавляли нейробазальной средой до концентрации от 8 до 10 × 10⁵ клеток/мл. Клетки высевали на 96-луночные планшеты при норме 100 μ л на лунку и культивировали в CO₂-инкубаторе (5% CO₂, 37°C). Среду заменяли через 24 часа и использовали нейроны, культивируемые в течение 7-21 дня.

В день анализа среду извлекали и заменяли раствором для измерения содержания кальция, содержащим 5-10 мкмоль/л Fura 2-AM (140 ммоль/л хлорида натрия, 5 ммоль/л хлорида калия, 2 ммоль/л хлорида магния, 3 ммоль/л хлорида кальция, 24 ммоль/л D(+)- глюкозы, 10 ммоль/л HEPES, 1 мкмоль/л MK-801, pH 7,4), и клетки обрабатывали в CO₂-инкубаторе (5% CO₂, 37°C) в течение 1-2 часов. Раствор для измерения содержания кальция, содержащий раствор Fura-2 AM, впоследствии извлекали и нейроны каждой лунки дважды промывали раствором для измерения содержания кальция в каждой лунке, а затем в каждую лунку добавляли по 50 μл раствора для измерения содержания кальция. Вслед за этим добавляли 50 μл тестируемого соединения или среды, приготовленных в концентрации в 3 раза выше, чем конечная концентрация, и клетки предварительно обрабатывали в течение приблизительно 15 минут. Планшеты затем помещали во флуоресцентную систему для скрининга лекарственного средства 6000 (Hamamatsu Photonics K.K.). Клетки стимулировали путем добавления в каждую лунку по 50 μл AMPA-стимулирующего раствора, приготовленного с концентрацией 3,3 мкмоль/л с помощью раствора для измерения содержания кальция. Изменения концентрации кальция измеряли как изменения интенсивности флуоресценции при длинах волн возбуждения, равных 340 нм и 380 нм (длина волны измерения: 540 нм). Показатель изменения внутриклеточной концентрации кальция рассчитывали в соответствии со следующим уравнением:

Показатель повышения внутриклеточной концентрации кальция (контроль, %)=(T_post - T_pre)/(C_post - C_pre) × 100,

где T_post: доля флуоресценции для лунок с образцами после стимуляции; T_pre: доля флуоресценции для лунок с образцами перед стимуляцией; C_post: доля флуоресценции для контрольных лунок после стимуляции; и C_pre: доля флуоресценции для контрольных лунок перед стимуляцией.

Значение IC₅₀ тестируемого соединения для подавления AMPA определяли на основании показателей повышения внутриклеточной концентрации кальция при различных концентрациях.

Результаты приведены в таблице 1. Данные результаты свидетельствуют о том, что соединения из примеров 1-22 обладают достаточным ингибирующим действием в отношении AMPA-рецептора.

[0149] [Таблица 1]

[0150] Испытание 1 на способность удерживаться на вращающемся барабане

Для проведения анализа использовали вращающийся барабан (MK-66°C от Muromachi Kikai Co., Ltd.). Барабан (стержень) регулировали так, чтобы он постепенного ускорялся от его стационарного состояния до скорости 40 оборотов/минута за 180 секунд. В качестве животных использовали 5- или 6-недельных самцов мышей ddY (Japan SLC, Inc.). В день, когда проводили испытание, мышей тренировали при описанных выше условиях проведения измерений, и отбирали и подвергали испытанию тех мышей, которые были способны бежать по барабану в течение 1 минуты или дольше с хорошей воспроизводимостью.

Каждое из соединений растворяли в среде (раствор готовили путем добавления DMSO в 0,5% раствор метилцеллюлозы до конечной концентрации, составляющей 10%; при необходимости добавляли 0,5-5% 1 моль/л хлористоводородной кислоты и 5% Cremophor^TM), а затем перорально вводили мышам оптимально за четыре дозы от 0,5 до 10 мг/кг. В качестве контроля перорально вводили только среду. По прошествии 25 минут после перорального введения каждого соединения, мышей подвергали испытанию на способность удерживаться на вращающемся барабане. Для группы каждого соединения использовали от пяти до двадцати пяти мышей. Для каждого соединения измеряли время до падения мышей с вращающегося барабана, и рассчитывали дозу, при которой время уменьшалось на 50% от среднего значения времени падения для контрольной группы со средой (TD₅₀).

Результаты приведены в таблице 2.

[0151] Мышиные модели судорог, 6 Гц (Matthew E. Barton et al. ʺPharmacological characterization of the 6 Hz psychomotor seizure model of partial epilepsyʺ Epilepsy Research 47 (2001) pp. 217-227)

Непосредственно после окончания испытания 1 на способность удерживаться на вращающемся барабане, роговую оболочку глаза стимулировали путем передачи электрического тока (6 Гц, 44 мA, 0,2-миллисекундный импульс в течение 3 секунд) от медного электрода, смоченного физиологическим раствором, и наблюдали наличие или отсутствие проявления припадка. Припадок определяли по проявлению акинезии, клонуса челюсти и передней конечности, тремора усов и хвоста Штрауба. Для каждого соединения рассчитывали дозу, при которой у 50% животных проявлялся припадок (ED₅₀).

Также для определения широты терапевтического действия соединений по настоящему изобретению рассчитывали терапевтический индекс (TD₅₀/ED₅₀) путем сравнения ингибирующего действия по отношению к припадкам (ED₅₀) в моделях судорог при 6 Гц и нейротоксического действия (TD₅₀) в испытании 1 на способность удерживаться на вращающемся барабане.

Результаты приведены в таблице 2. Исходя из этих результатов, соединения, полученные согласно примерам 1-22, по всей видимости, обладают потенциальной пригодностью в качестве ингибиторов AMPA, которые проявляют высокие терапевтические показатели, и обладают уменьшенным угнетающим действием на центральную нервную систему по сравнению с контрольным соединением.

[0152] [Таблица 2]

[0153] Испытание 2 на способность удерживаться на вращающемся барабане

Для проведения анализа использовали вращающийся барабан (MK-66°C от Muromachi Kikai Co., Ltd.). Барабан (стержень) регулировали так, чтобы он постепенного ускорялся от его стационарного состояния до скорости 40 оборотов/минута за 180 секунд. В качестве животных использовали 5- или 6-недельных самцов мышей ddY (Japan SLC, Inc.). В день, когда проводили испытание, мышей тренировали при описанных выше условиях проведения измерений, и отбирали и подвергали испытанию тех мышей, которые были способны бежать по барабану в течение 1 минуты или дольше с хорошей воспроизводимостью.

Каждое из соединений растворяли в среде (раствор готовили путем добавления DMSO в 0,5% раствор метилцеллюлозы до конечной концентрации, составляющей 10%; при необходимости добавляли 0,5-5% 1 моль/л хлористоводородной кислоты и 5% Cremophor^TM), а затем перорально вводили мышам в дозе ED₅₀, рассчитанной с использованием моделей судорог при 6 Гц. В качестве контроля перорально вводили только среду. По прошествии 25 минут после перорального введения каждого соединения, мышей подвергали испытанию на способность удерживаться на вращающемся барабане. Для группы каждого соединения использовали пять или шесть мышей. Для каждого соединения измеряли время до падения мышей с вращающегося барабана.

Результаты показаны в таблице 3, таблице 4, на фиг. 1 и фиг. 2. Данные результаты показывают, что соединения, полученные согласно примерам 1-22, при ED₅₀-дозах обеспечивают более продолжительное время, в течение которого мыши бегают по вращающемуся барабану, по сравнению с контрольным соединением, и более того, по всей видимости, подтверждают пригодность этих соединений в качестве ингибиторов AMPA с уменьшенным угнетающим действием на центральную нервную систему.

[Таблица 3]

[Таблица 4]

Реферат

Изобретение относится к соединениям, представленным формулами (I)-(XXII), или их фармацевтически приемлемым солям:Изобретение также относится к фармацевтической композиции, обладающей ингибирующим действием в отношении рецептора α-амино-3-гидрокси-5-метил-4-изоксазолпропионовой кислоты (AMPA), на основе указанных соединений. Технический результат – получены новые соединения и фармацевтическая композиция на их основе, которые могут найти применение в медицине для лечения эпилепсии. 12 н. и 4 з.п. ф-лы, 4 табл., 2 ил., 22 пр.

Формула