Полициклические средства для лечения респираторно-синцитиальных вирусных инфекций - RU2422444C2

Описание

Область, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к противовирусным соединениям, способам их получения и к композициям, содержащим данные соединения, и к применению соединений и композиций в лечении вирусных инфекций. В частности, изобретение относится к применению соединений формулы I для лечения респираторно-синцитиальной вирусной инфекции.

Уровень техники в данной области

Респираторно-синцитиальный вирус (RSV, РСВ) является основной причиной инфекции нижнего отдела респираторного тракта у взрослых и маленьких детей. В западных странах почти все дети инфицированы в возрасте до двух лет. В большинстве случаев РСВ-инфекции являются единственной причиной неопасных заболеваний верхних дыхательных путей с симптомами, напоминающими простуду. Однако тяжелое инфицирование вирусом может способствовать развитию бронхолита или пневмонии, что может привести к госпитализации или смерти. Младенцы, которые родились недоношенными или имеют предрасположенность к легочному заболеванию, находятся в группе риска тяжелой инфекции и осложнений.

Респираторно-синцитиальный вирус (RSV, РСВ) является членом подкласса Mononegalirales, который состоит из РНК-вирусов с несегментированным негативным геномом в семействах Paramyxoviridae, Rhabdoviridae и Filoviridae. РСВ-вирус человека (часто обозначаемый RSV или НRSV) является членом рода Pneumovirus подсемейства Pneumovirinae в семействе Paramyxoviridae. Другие члены рода Pneumovirus включают в себя вирусы, такие как коровий РСВ-вирус (ВRSV), овечий РСВ-вирус (ОRSV) и мышиный вирус пневмонии (MPV) наряду с другими вирусами. Подсемейство Pneumovirinae также включает в себя род Metapneumovirus, который включает недавно идентифицированный и важный для человека патогенный человеческий метапневмовирус.

Кроме описанных выше признаков генома, характерной особенностью семейства является липидная оболочка, содержащая один или более видов гликопротеинов, которые, как полагают, связаны с прикреплением и проникновением в хозяйскую клетку. Полагают, что проникновение осуществляется способом, с помощью которого вирусная оболочка сливается с мембраной клетки-хозяина. Слияние инфицированных клеток, например, с соседними клетками может привести к образованию слитых многоядерных клеток, известных как синцитии в некоторых случаях. Полагают, что процесс слияния опосредуется гликопротеинами и имеет общие характеристики с процессом слияния иных имеющих оболочки вирусов в других таксономических группах. В случае семейства Paramyxoviridae, вирусы всех родов обычно экспрессируют слитый гликопротеин (F), который опосредует слияние мембран. Единственным лекарственным средством, применяемым в лечении тяжелых случаев инфекции вирусом РСВ, является противовирусный препарат виразол, также названный как рибавирин. Данный препарат обладает широким спектром противовирусного действия с вирулицидными эффектами и действует путем ингибирования репликации вируса РСВ. Он также улучшает оксигенирование артериальной крови. К сожаленью, средство является токсичным, так что его введение ограничивается условиями госпиталя. Его введение также осложняется необходимостью строго следовать процедуре введения препарата для снижения до минимума вероятности некоторых вредных воздействий. Препарат имеет ряд отрицательных эффектов, включающих внезапное ухудшение дыхательной функции (бронхоспазм). Эффективность препарата вызывает сомнение и поэтому существует реальная потребность в разработке альтернативного средства для лечения РСВ-инфекции.

Ряд средств является известным, который ингибирует РСВ. В опубликованных патентных заявках WO 01/95910 и WO 02/26228 (Bristol Myers Squib Company), содержание которых включено посредством перекрестной ссылки, в их описании уровня техники в данной области приведен ряд различных типов соединений, которые проявляют противовирусную активность. Кроме того, в указанных заявках описаны соединения, имеющие активность против РСВ-вируса, формулы

Также имеется ряд патентных описаний производных имидазо[2,1-a]изоиндола для применения, отличного от лечения РСВ-инфекций. В патенте США №3507863 описан ряд полициклических соединений, которые обладают противовоспалительной и противосудорожной активностью. Указанные соединения имеют следующую общую структуру

где А является -NH-, -О- или -S- и n равно 1-3.

В патенте США №3770766 описаны полициклические соединения, которые проявляют антидепрессивное действие и имеют следующую общую структуру

где R₃ выбирают из различных ароматических заместителей.

В патенте США №4058529 описана противовоспалительная и противосудорожная активность полициклических соединений общей формулы А и включены соединения формулы В, где R₂ является водородом или низшей алкильной группой (включающей аминозамещенные группы) и n равно 1-3.

В СН №482697 (Graf) описан ряд соединений общей формулы В, указанной выше, где R₂ является -CO-CHR-N₃ и R является водородом или алкилом, и промежуточные продукты, где R₂ является -CO-CHR-NH₂, -CO-CHR-OH или водородом. Подобным образом, патент США №3590043 (Graf) имеет отношение к соединениям формулы B, где R₂ является -CO-CHR-NR'R”. В данном документе n равно 1-3, R означает H или низший алкил, R' и R” могут быть низшим алкилом или бензилом или могут вместе образовывать пиперидинильное или морфолинильное кольцо. Соединения Graf могут иметь применение в качестве противовоспалительных средств.

В международной публикации WO 02/066479 (Banyu Pharmaceutical) перечислены некоторые соединения общей формулы В, где R₂ является низшим алкилом, -СО-С₂Н₅ и выбранными другими фрагментами. Также, по-видимому, предлагается соединение формулы В, где конденсированное фенильное кольцо замещено пиридилом, и R₂ является метилом. Неясно, были ли все указанные соединения получены. Указанные соединения предлагается применять в лечении повышенного кровяного давления и диабета.

В патенте Великобритании GB №1038735 описаны противовоспалительные соединения общей формулы В, где n равно 1-3, R₂ является низшим алкилом или, например, диметиламиноэтильной группой.

В Канадской патентной заявке №2108899 (также см. представитель семейства WO 92/16207) описаны различные производные оксазоло[2,3-a]изоиндола и имидазо[2,1-a]изоиндола для применения в противовирусных лекарственных препаратах, особенно для использования в лечении СПИДа и ВИЧ-инфекции. Существуют значительные различия между вирусами ВИЧ и РСВ, заболеваниями, связанными с указанными вирусами, соответствующим типом действия описанных соединений. В описании приведены соединения структуры, представленной ниже, где R является C₁-С₆алкильной группой или C₁-С₆ацильной группой и, в частности, раскрыты соединения, где R является -СОСН₃ или -СН₃.

В ряде документов описаны соединения указанной выше формулы или их замещенные формы, где R является водородом. См., например, гербицидные соединения, описанные в патентах США No. 4726838 и 4846876.

Сущность изобретения

Изобретение раскрывает тот факт, что некоторые соединения проявляют благоприятную анти-РСВ активность путем ингибирования важнейших для вируса РСВ процессов слияния.

Изобретение предлагает применение соединения формулы I

и его фармацевтически приемлемых солей и производных для лечения респираторно-синцитиальных вирусных (РСВ) инфекций,

где R₁ выбирают из С_1-12алкила, С_2-12алкенила, С_2-12алкинила,

-(СН₂)_nС_3-7циклоалкила, -(СН₂)_nС_4-7циклоалкенила, -(СН₂)_nарила,

-(СН₂)_nарилС_1-12алкила, -(СН₂)_nарилС_2-12алкенила,

-(СН₂)_nарилС_2-12алкинила и -(СН₂)_nгетероциклильной группы; n равно 0-6 и указанные алкильные, алкенильные, алкинильные, циклоалкильные, циклоалкенильные, арильные и гетероциклильные группы необязательно замещены;

R₂ выбирают из -CH₂R₃, -C(Y)R₃, -C(Y)OR₃, -С(Y)N(R₄)R₃, -C(Y)CH₂N(R₄)R₃, -C(Y)CH₂SR₃ и -S(O)_wR₅, где R₃ выбирают из водорода, С_1-12алкила, С_2-12алкенила, С_2-12алкинила,

-(CH₂)_mC_3-7циклоалкила, -(CH₂)_mC_4-7циклоалкенила, -(CH₂)_mарила,

-(CH₂)_mарилС_1-12алкила, -(CH₂)_mарилС_2-12алкенила,

-(CH₂)_mарилС_2-12алкинила и -(CH₂)_mгетероциклильной группы; и когда R₂ является -CH₂R₃ или -C(Y)R₃, радикал R₃дополнительно выбирают из -S-R₅ и -O-R₅; m равно 0-6; R₄ является водородом или С_1-6алкилом; R₅ является С_1-6алкилом, С_2-6алкенилом, С_2-6алкинилом, С_3-7циклоалкилом, С_4-7циклоалкенилом, бензильной, арильной или гетероциклильной группой; w равно 0, 1 или 2; и алкильные, алкенильные, алкинильные, циклоалкильные, циклоалкенильные, арильные и гетероциклильные группы необязательно замещены;

X и Y независимо выбирают из O, S и NR₆, где R₆ независимо выбирают из водорода, низшего алкила, гидрокси и низшего алкокси;

А вместе с атомами, к которым она присоединена, необязательно образует замещенное ароматическое кольцо;

В-С вместе с атомами, к которым они присоединены, необязательно образуют замещенное гетероциклическое кольцо, имеющее от 5 до 8 атомов в кольце.

Изобретение также предлагает применение соединений формулы I, их фармацевтически приемлемых солеи и их производных для лечения РСВ-инфекций путем ингибирования процессов слияния вируса.

Изобретение также описывает новые соединения формулы I, их соли и их фармацевтически приемлемые производные.

Описание предпочтительных вариантов осуществления изобретения

Употребляемый в настоящем описании термин "ароматические" относится к арильным кольцам или кольцевым системам и ароматическим гетероциклическим кольцам или кольцевым системам, которые известны как гетероарильные или гетероароматические кольца.

Употребляемый в настоящем описании термин "арил" относится к карбоциклическим (негетероциклическим) ароматическим кольцам или кольцевым системам. Ароматические кольца могут быть моно- или бициклическими кольцевыми системами. Ароматические кольца или кольцевые системы обычно состоят из 5-10 атомов углерода. Примеры подходящих арильных групп включают, но не ограничиваются ими, фенил, бифенил, нафтил, тетрагидронафтил и тому подобное.

Предпочтительные арильные группы включают фенил, нафтил, инденил, азуленил, флуоренил или антраценил.

Термин "гетероциклические" или "гетероциклильные", употребляемый в настоящем описании, относится к моно- или бициклическим кольцам или кольцевым системам, которые включают один или более гетероатомов, выбранных из N, S или О. Обычно кольца или кольцевые системы, кроме гетероатома(ов), включают 1-9 атомов углерода и могут быть насыщенными, ненасыщенными или ароматическими (включая псевдоароматические). Термин “псевдоароматическая” относится к кольцевой системе, которая не является строго ароматической, но которая стабилизирована посредством делокализации электронов и напоминает ароматические кольца. Ароматические включают псевдоароматические кольцевые системы, такие как фурильные, тиенильные и пирролильные кольца.

Примеры 5-членных моноциклических гетероциклов включают фурил, тиенил, пирролил, Н-пирролил, пирролинил, пирролидинил, оксазолил, оксадиазолил (включая 1,2,3- и 1,2,4-оксадиазолилы), тиазолил, изоксазолил, фуразанил, изотиазолил, пиразолил, пиразолинил, пиразолидинил, имидазолил, имидазолинил, триазолил (включая 1,2,3- и 1,3,4-триазолилы), тетразолил, тиадиазолил (включая 1,2,3- и 1,3,4-тиадиазолилы). Примеры 6-членных моноциклических гетероциклов включают пиридил, пиримидинил, пиридазинил, пиранил, пиразинил, пиперидинил, 1,4-диоксанил, морфолинил, 1,4-дитианил, тиоморфолинил, пиперазинил, 1,3,5-тритианил и триазинил. Гетероциклы необязательно замещены широким рядом заместителей и предпочтительно С_1-6алкилом, С_1-6алкокси, С_2-6алкенилом, С_2-6алкинилом, галогеном, гидрокси, меркапто, трифторметилом, амино, циано или моно- или ди(С_1-6алкил)амино.

Гетероцикл может быть конденсирован с карбоциклическим кольцом, таким как фенил, нафтил, инденил, азуленил, флуоренил и антраценил.

Примеры 8-, 9- и 10-членных бициклических гетероциклов включают 1Н тиено[2,3-c]пиразолил, тиено[2,3-b]фурил, индолил, изоиндолил, бензофуранил, бензотиенил, бензоксазолил, бензотиазолил, бензизоксазолил, бензизотиазолил, бензимидазолил, индазолил, изохинолинил, хинолинил, хиноксалинил, уридинил, пуринил, циннолинил, фталазинил, хиназолинил, хиноксалинил, бензотриазинил, нафтиридинил, птеридинил и тому подобное. Указанные гетероциклы необязательно замещены, например, С_1-6алкилом, С_1-6алкокси, С_2-6алкенилом, С_2-6алкинилом, галогеном, гидрокси, меркапто, трифторметилом, амино, циано или моно- или ди(С_1-6алкил)амино.

Примеры предпочтительных гетероциклических радикалов включают (необязательно замещенные) изоксазолы, изотиазолы, 1,3,4-оксадиазолы, 1,3,4-тиадиазолы, 1,2,4-оксадиазолы, 1,2,4-тиадиазолы, оксазолы, тиазолы, пиридины, пиридазины, пиримидины, пиразины, 1,2,4-триазины, 1,3,5-триазины, бензоксазолы, бензотиазолы, бензизоксазолы, бензизотиазолы, хинолины и хиноксалины. Указанные гетероциклы необязательно замещены, например, С_1-6алкилом, С_1-6алкокси, С_2-6алкенилом, С_2-6алкинилом, галогеном, гидрокси, меркапто, трифторметилом, амино, циано или моно- или ди(С_1-6алкил)амино.

Примеры наиболее предпочтительных гетероциклических радикалов включают фурил, тиенил, пиридил, оксазолил, тиазолил, пиразолил, фуразанил, изоксазолил, изотиазолил, 1,2,3-триазолил, 1,3,4-триазолил, 1,2,3-тиадиазолил, 1,3,4-тиадиазолил, пиридазинил, пиримидинил, бензо[b]фуранил, бензо[b]тиофенил и бензоизоксазолил.

Примеры ненасыщенных 5-членных гетероциклических колец включают оксазол, тиазол, имидазол, 1,2,3-триазол, изоксазол, изотиазол, пиразол, фуран, тиофен и пиррол. Примеры ненасыщенных 6-членных гетероциклических колец включают пиридин, пиримидин, пиразин, пиридазин и 1,2,4-триазин.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения, гетероциклическим кольцом является ароматическое кольцо. Гетероарильные и гетероароматические кольца, которые используют в изобретении, относятся к указанной подгруппе гетероциклических колец. Гетероарильные кольца включают фурил, тиенил, пиридил, пирролил, оксазолил, тиазолил, имидазолил, пиразолил, изоксазолил, изотиазолил, 1,2,3-оксадиазолил, 1,2,4-оксадиазолил, 1,2,4-оксадиазол-5-он, 1,2,3-триазолил, 1,3,4-тиадиазолил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, 1,3,5-триазинил, 1Н тиено[2,3-c]пиразолил, тиено[2,3-b]фурил, индолизинил, индолил, изоиндолил, 3Н-индолил, индолинил, бензо[b]фуранил, бензо[b]тиофенил, 1Н-индазолил, бензимидазолил, тетразолил, уридинил и цитозинил.

Наиболее предпочтительные гетероарильные или гетероароматические кольца выбирают из изоксазолильных, оксазолильных, имидазолильных, тиазолильных, тиадиазолильных, изотиазолильных, фуразанильных, триазолильных, пиридильных, пиримидинильных, фурильных, пиразолильных, пиридазинильных, тиенильных и арильных конденсированных гетероароматических колец, таких как бензофуранил, бензотиофенил и бензоизоксазолил.

В другом предпочтительном варианте осуществления изобретения, гетероциклическим кольцом является неароматическое кольцо, выбранное из группы, состоящей из пирролидина, имидазолина, 2-имидазолидона, 2-пирролидона, пирролин-2-она, тетрагидрофурана, 1,3-диоксолана, пиперидина, тетрагидропирана, оксазолина, 1,3-диоксана, 1,4-пиперазина, морфолина и тиоморфолина.

Гетероциклическое кольцо, содержащее линкерную группу В-С, может быть выбрано из описанных выше гетероциклических колец при условии, что кольцо отвечает требованиям и содержит, по крайней мере, два атома азота и исключает ароматические кольцевые системы.

Если не обусловлено иное, употребляемый в настоящем описании термин “необязательно замещенная” означает, что группа может включать один или более заместителей, которые не мешают связывающей активности соединения формулы I. В некоторых случаях заместитель может быть выбран для улучшения связывания. Группа может быть замещена одним или более заместителями, выбранными из галогенов, С_1-6алкила, С_2-6алкенила, С_2-6алкинила, -(СН₂)_рС_3-7циклоалкила, -(СН₂)_рС_4-7циклоалкенила, -(СН₂)_рарильной группы, -(СН₂)_ргетероциклильной группы, -С₆Н₄S(O)_tC_1-6алкила, -C(Ph)₃, -(CH₂)_pZ, -COZ, -CN, -OR, -O-(CH₂)_1-6-R, -O-(CH₂)_1-6-OR, -OCOR, -COR, -COOR, -OCONR'R”, -NR'R”, -NRCOR', -NRCONR'R”-NRC(S)NR'R”, -NRSO₂R', -NRCOOR', -С(NR)NR'R”, -CRNOR', -C(=NOH)NR'R”, -CONR'R”, -C(=NCN)-NR'R”, -C(=NR)NR'R”, -C(=NR')SR”, -NR'C(=NCN)SR”, -CONRSO₂R', -C(S)NR'R”, -S(O)_tR, -SO₂NR'R”, -SO₂NRCOR', -OS(O)₂R, -PO(OR)₂ и -NO₂; где p равно 0-6, t равно 0-2, Z является N-связанной аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из аланина, аспарагина, аспарагиновой кислоты, глутаминовой кислоты, глутамина, глицина, пипеколиновой кислоты, α-аминомасляной кислоты, α-аминопропионовой кислоты и иминодиуксусной кислоты, Z является группой, связанной через атом азота указанной N-связанной аминокислоты с атомом углерода, и каждый радикал R, R' и R” независимо выбирают из Н, С_1-6алкила, С_2-6алкенила, С_2-6алкинила, С_3-7циклоалкила, С_4-7циклоалкенила, арила, гетероциклильной группы, С_1-6алкиларила и С_1-6алкилгетероциклильной группы, где алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкенил, арил, гетероциклильная группа, С_1-6алкиларил или С_1-6алкилгетероциклильная группа необязательно замещены от одного до шести одинаковыми или различными заместителями, выбранными из галогена, гидрокси, низшего алкила, низшего алкокси, -СО₂Н, CF₃, CN, фенила, NH₂ и -NO₂; или когда R' и R” связаны с одним и тем же атомом азота, они могут, вместе с атомом, с которым они соединены, образовывать от 5- до 7-членного азотсодержащего гетероциклического кольца.

Когда необязательным заместителем является алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкенил, арильная или гетероциклильная группа или необязательный заместитель содержит указанные группы, группа сама по себе может быть замещена от одного до шести одинаковыми или различными атомами галогена, гидрокси, низшими алкилами, низшими алкокси, галоген-С_1-6алкилами (включая -CF₃), фенилами, бензилами, -CN, -C(O)-C_1-6алкилами, меркапто, -NH₂, моно- или ди(низший алкил)амино или -NO₂.

Что касается азотсодержащих гетероциклических колец, если не указано особо, необязательный заместитель включает соли пиридиния и N-оксид подходящих азотов кольца.

Что касается неароматических карбоциклических или гетероциклических соединений, если не указано особо, такие соединения также необязательно замещены одной или двумя =О-группами, вместо или в добавление к вышеописанным необязательным заместителям.

Примеры необязательных заместителей включают галогены, С_1-4алкил, С_2-4алкенил, С_2-4алкинил, С_1-4алкокси, С_1-4 галогеналкил, -CF₃, -OH, фенил, -NH₂, -NHC_1-4алкил, -N(C_1-4)₂, -CN, меркапто, С_1-4алкилкарбонил и С_1-4алкоксикарбонил.

Употребляемый в настоящем описании термин “С_1-12алкил” относится к насыщенной углеводородной группе с прямой или разветвленной цепью, имеющей от 1 до 12 атомов углерода. Примеры таких алкильных групп включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, сек-бутил или трет-бутил. Подобным образом, “С_1-6алкил” или “низший алкил” относится к таким группам, имеющим от 1 до 6 атомов углерода.

Употребляемый в настоящем описании термин “С_3-7циклоалкил” относится к неароматическим насыщенным циклическим группам, имеющим от 3 до 7 атомов углерода. Примеры включают циклопентил и циклогексил.

Употребляемый в настоящем описании термин “алкокси” относится к прямой или разветвленной алкильной группе, ковалентно связанной посредством О-связи, и термины “С_1-6алкокси” и “низший алкокси” относятся к таким группам, содержащим от одного до шести атомов углерода, таким как метокси, этокси, пропокси, изопропокси, бутокси, трет-бутокси и тому подобное.

Употребляемый в настоящем описании термин “С_2-12алкенил” относится к группам, образованным из С_2-12нециклического углеводорода с прямой или разветвленной цепью, содержащего одну или более двойных связей. Примеры С_2-12алкенила включают аллил, 1-метилвинил, бутенил, изобутенил, 1,3-бутадиенил, 3-метил-2-бутенил, 1,3-бутадиенил, 1,4-пентадиенил, 1-пентенил, 1-гексенил, 3-гексенил, 1,3-гексадиенил, 1,4-гексадиенил и 1,3,5-гексатриенил.

Употребляемый в настоящем описании термин “С_4-7циклоалкенил” относится к неароматическим карбоциклам, имеющим от 4 до 7 атомов углерода и одну или более двойных углеродных связей. Примеры включают циклопентенил, 1-метилциклопентенил, циклогексенил, 1,3-циклопентадиенил, 1,3-циклогексадиенил и 1,4-циклогексадиенил.

Употребляемый в настоящем описании термин “С_2-12алкинил” относится к прямому или разветвленному нециклическому углеводороду, содержащему одну или более тройных связей, предпочтительно одну или две тройные связи. Примеры включают 2-пропинил и 2- или 3-бутинил.

Термин “арилС_1-12алкил” относится к карбоциклическим ароматическим кольцам или кольцевым системам, как описано выше, и замещенным С_1-12алкильной группой, также как описано выше. Подобно, термины “арилС_2-12алкенил” и “арилС_2-12алкинил” относятся к карбоциклическим ароматическим кольцам или кольцевым системам, как описано выше, и замещенным С_2-12алкенильной или С_2-12алкинильной группой, как описано выше.

Арильная группа и алкильная, алкенильная или алкинильная группа необязательно замещены. Предпочтительно, арильная группа не является необязательно замещенной.

Предпочтительно, алкильная, алкенильная или алкинильная группа необязательно замещена и более предпочтительно, заместителем, выбранным из галогенов, -CN, -NR'R”, -COR, -COOR или -CONR'R”. Предпочтительно, R, R' и R” независимо выбирают из водорода или низшего алкила.

Употребляемый в настоящем описании термин “галоид” или “галоген” относится к группам фтора, хлора, брома или йода.

Употребляемый в настоящем описании термин “галогеналкильная” группа означает, что группа имеет один или более атомов водорода алкильной группы, замененных галогенами. Пример включает -CF₃.

Особенно предпочтительные соединения изобретения включают такие соединения, где А является двухвалентной связью из 3 или 4 атомов, выбранных из C, N, O и S. В такой конфигурации А и атомы, к которым они присоединены, вместе образуют ароматическое кольцо, имеющее пять или шесть кольцевых атомов. Когда связывающие атомы все являются углеродами, образованное кольцо является карбоциклическим ароматическим кольцом или кольцевой системой. Когда связывающие атомы включают один или более атомов N, O или S, тогда образованное кольцо является ароматическим гетероциклическим кольцом. Примеры включают такие, где субструктурой

является:

Предпочтительно, кольцо А является необязательно замещенным арильным или необязательно замещенным гетероарильным кольцом, более предпочтительно, фенильным, пиридильным, пиридазинильным, пиримидинильным или пиразинильным кольцом и наиболее предпочтительно фенильным или пиридильным кольцом. Необязательные заместители включают N-оксиды кольцевых атомов азота.

Ароматические кольца необязательно замещены, предпочтительно не более чем 3 заместителями. Из необязательных заместителей, особенно предпочтительно использовать от 1 до 3 заместителей, выбранных из галогена, низшего алкила, галоидированных форм низшего алкила, гидрокси, низшего алкокси, нитро, амино, низшего алкиламино, карбокси, карбоксамидо, фенила и бензила. N-оксидные формы атомов азота азотсодержащих колец также являются предпочтительными. Когда А является пиридильным кольцом, азот кольца может находиться в виде N-оксида, или кольцо может находиться в виде соли пиридиния.

Что касается гетероциклического кольца, образованного посредством звена В-С, станет очевидным, что указанное кольцо не может быть выбрано из всех гетероциклических колец, обсуждаемых выше в связи со значением термина, из-за атомов, с которыми В-С связано. Указанное кольцо ограничивается моноциклическими, неароматическими гетероциклическими кольцами, которые содержат, по крайней мере, два атома азота. Кольцо может содержать дополнительные гетероатомы и может быть частично ненасыщенным.

Особенно предпочтительными являются соединения, в которых В-С представляет собой двухвалентную связь из 1-3 атомов. Связь В-С вместе с атомами, к которым оно присоединено, образует неароматическое гетероциклическое кольцо. Примеры включают такие, где субструктурой:

является:

В предпочтительном аспекте изобретения В-С представляет собой -СН₂-(СН₂)_z-, где z равно 1-4, более предпочтительно 1, 2 или 3, более предпочтительно 1 или 2 и наиболее предпочтительно z равно 1.

Атомы, образующие связь В-С, необязательно замещены, предпочтительно не более чем 3 заместителями. Широкая область заместителей является возможной и включает галоген, низший алкил, гидрокси, низший алкокси, фенил и бензил.

Предпочтительный аспект изобретения включает такие соединения, где В-С представляет собой -СН₂-СН₂.

Предпочтительно Х является кислородом или серой, более предпочтительно Х является кислородом.

В варианте осуществления изобретения конденсированное кольцо А и кольцо, содержащее двухвалентную связь В-С, необязательно замещено одним или двумя заместителями, независимо выбранными из галогена и С_1-6алкила. Предпочтительно, конденсированное кольцо А и кольцо, содержащее двухвалентную связь В-С, не является замещенным.

R₁ является необязательно замещенной арильной, необязательно замещенной алкильной или необязательно замещенной гетероциклильной группой. Предпочтительно, R₁ является необязательно замещенной арильной или гетероциклильной группой, более предпочтительно фенильным, тиенильным, пирролильным или пиридильным кольцом. R₁ также может быть -С_1-6алкилфенильной группой. Кольца R₁необязательно замещены галогеном, гидрокси, нитро, -NR'R” (где R' и R” независимо выбирают из водорода, низшего алкила и -C(O)R, где R является С_1-6алкилом, фенильной или гетероциклильной группой), С_1-12алкилом, фенилом и -O-R_a, где R_a является -С_1-12алкилом, -С_3-7циклоалкилом,

-С_1-12алкилС_3-7циклоалкилом, фенилом или -С_1-12алкилфенилом, и

С_1-12алкил, фенил или R_а-группа необязательно замещены галогеном, -CN, -NR'¹⁰R”¹¹, -CO₂R¹² или -CONR'¹⁰R”¹¹, где R¹², R'¹⁰ и R”¹¹ независимо выбирают из водорода или низшего алкила. Предпочтительно, кольцом является фенил и он необязательно замещен в пара или положении 4.

Радикал R₁ может быть фенилом, замещенным С_1-10алкильной цепью, где алкильная цепь замещена галогеном, -CN, -NR'R”, -CO₂R или -CONR'R”, где R, R' и R” независимо выбирают из водорода или низшего алкила. Более предпочтительно, алкильная цепь находится в положении 4 фенильного кольца и заместители присоединены к углероду у свободного конца алкильной группы.

Радикал R₁ может быть фенилом, необязательно замещенным заместителем, выбранным из галогена, -С_1-6алкила,

-С_1-6алкилгалогена, -С_1-6алкилCN, -OC_1-6алкила, -ОС_1-6алкилгалогена,

-ОС_1-6алкилСО₂NH₂, -OC_1-6алкилCN, -ОС_1-6алкилС_3-7циклоалкила,

-ОС_1-6алкилС₆Н₅, -ОС_1-6алкилОСН₃, -ОС₆Н₅, -ОС₆Н₄галогена, -CF₃,

-OCF₃, -NR'R”(где R' и R” независимо выбирают из водорода,

-С(О)С_1-6алкила, -С(О)С₆Н₅, -С(О)СН=СНСО₂Н, -С(О)С_1-6алкилСО₂Н,

-С(О)С_1-6алкилСО₂СН₃, -С(О)С_1-6алкилС₆Н₅, -С(О)С_1-6алкилС₆Н₄СН₃,

-С(О)С_1-6алкилС₆Н₄ОСН₃ и -С(О)С_1-6алкилС₆Н₄галогена), -СО₂Н,

-СО₂С_1-6алкила, -NO₂, -OH, -C₆H₅, -C₆H₄C_1-6алкила, -С₆Н₄галогена и

-ОС(О)С_1-6алкила.

Предпочтительно, R₁ является галогенфенилом, наиболее предпочтительно 4-хлорфенилом.

Соединения, где R₂ означает водород, не являются частью настоящего изобретения. Данные соединения используют в качестве промежуточных продуктов для получения соединений настоящего изобретения, в которых R₂ не является водородом.

Предпочтительно, R₂ не является незамещенным -С_1-6алкилом или незамещенным -С(О)-С_1-6алкилом.

Когда R₂ является -СН₂-R₃, предпочтительно, что R₃ означает -(СН₂)_m арил или -(CH₂)_m гетероциклильную группу, где m равно 0-3. Радикал R₃ может быть бензилом (m=1). Атомы кольца необязательно замещены широким рядом заместителей. Предпочтительные заместители выбирают из галогена, низшего алкила, гидрокси, низшего алкокси и фенила.

Когда R₂ является -C(Y)-R₃, предпочтительно, что Y является O. Также предпочтительно, что R₃ является -(CH₂)_mарилом или -(CH₂)_mгетероарилом, где m равно 0-3. Особенно предпочтительным для R₃ является арил или гетероарил (m=0), и более предпочтительно 5- или 6-членный моноциклический гетероцикл или 9- или 10-членный бициклический гетероцикл или арильная группа.

Когда R₂ является -C(Y)CH₂N(R₄)R₃ или -C(Y)CH₂SR₃, R₃ предпочтительно является -(CH₂)_mарильной или -(CH₂)_mгетероциклильной группой, где m равно 0-3. Гетероциклильная группа может быть сама по себе замещена оксогруппой, гидрокси или низшим алкилом.

Более предпочтительно, когда R₂ означает фенил, нафтил, фурил, тиенил, пирролил, Н-пирролил, пирролинил, пирролидинил, оксазолил, оксадиазолил (включая 1,2,3- и 1,2,4-оксадиазолилы), тиазолил, изоксазолил, фуразанил, изотиазолил, пиразолил, пиразолинил, пиразолидинил, имидазолил, имидазолинил, триазолил (включая 1,2,3- и 1,3,4-триазолилы), тетразолил, тиадиазолил (включая 1,2,3- и 1,3,4-тиадиазолилы), пиридил, пиримидинил, пиридазинил, пиранил, пиразинил, пиперидинил, 1,4-диоксанил, морфолинил, 1,4-дитианил, тиоморфолинил, пиперазинил, 1,3,5-тритианил, триазинил, 1Н тиено[2,3-c]пиразолил, тиено[2,3-b]фурил, индолил, изоиндолил, бензофуранил, бензотиенил, бензоксазолил, бензотиазолил, бензизоксазолил, бензизотиазолил, бензимидазолил, индазолил, изохинолинил, хинолинил, хиноксалинил, уридинил, пуринил, циннолинил, фталазинил, хиназолинил, хиноксалинил, бензотриазинил, нафтиридинил или птеридинил.

Гетероциклическое кольцо может быть конденсировано с карбоциклическим кольцом, таким как фенил, нафтил, инденил, азуленил, флуоренил и антраценил.

Арильная или гетероциклильная группа необязательно замещена широким рядом заместителей и, предпочтительно, С_1-6алкилом, С_1-6алкокси, С_2-6алкенилом, С_2-6алкинилом, галогеном, гидрокси, меркапто, трифторметилом, амино, нитро, циано и моно- или ди(С_1-6алкил)амино. Заместители также включают фенильную, бензильную и гетероциклильную группу.

Наиболее предпочтительно, R₃ выбирают из фенила, фурила, тиенила, пиридила, оксазолила, тиазолила, пиразолила, фуразанила, изоксазолила, изотиазолила, 1,2,3-триазолила, 1,3,4-триазолила, 1,2,3-тиадиазолила, 1,3,4-тиадиазолила, пиридазинила, пиримидинила, бензо[b]фуранила, бензо[b]тиофенила и бензоизоксазолила.

Когда R₂ является -СОR₃, предпочтительно при этом R₃ является фенилС_1-10алкилом, где алкил замещен галогеном, -CN, -NR'R”, -CO₂R или -CONR'R”, где R, R' и R” независимо выбирают из водорода или низшего алкила. Наиболее предпочтительно, когда алкильная группа находится в положении 4 фенильного кольца, и заместители соединены с углеродом у свободного конца алкильной группы.

Когда R₂ является -CON(R₄)R₃, предпочтительно при этом R₄ является водородом и R₃ является -(CH₂)_mарилом или -(CH₂)_mгетероарилом. Предпочтительно, m равно 0-2, более предпочтительно, 0-1. Атомы арильного и гетероарильного кольца необязательно замещены широким рядом заместителей. Предпочтительные заместители включают галоген, низший алкил, гидрокси, низший алкокси и фенил.

Другим предпочтительным вариантом осуществления изобретения являются такие соединения, где R₂ означает -СОR₃ и конденсированное кольцо А содержит, по крайней мере, один атом азота в кольце.

Когда изобретение относится к соединениям формулы I самим по себе, предпочтительно, если R₁ незамещен фенилом, то Х означает О, группа А вместе с атомами, с которыми она связана, образует незамещенное фенильное кольцо, и В-С является -СН₂СН₂-, R₂ означает незамещенный С_1-6алкил или -С(О)С_1-6алкил.

Следует принять во внимание, что соединение формулы I и некоторые его производные могут иметь, по крайней мере, один асимметрический центр, и поэтому такие соединения могут существовать в более чем одной стереоизомерной форме. Изобретение распространяется на каждую из данных форм индивидуально и на их смеси, включая рацематы. Изомеры могут быть разделены хроматографическими методами или с помощью агента, обладающего разрешающей способностью. Альтернативно, отдельные изомеры могут быть получены путем асимметрического синтеза с использованием хиральных промежуточных соединений. В случаях, где соединение имеет, по крайней мере, одну углерод-углеродную двойную связь, оно может находиться в виде Z- и E-изомеров, и все изомерные формы соединений включены в настоящее изобретение.

Соли соединений формулы I предпочтительно являются фармацевтически приемлемыми, однако следует отметить, что нефармацевтически приемлемые соли также подпадают под объем настоящего изобретения, поскольку их используют в качестве промежуточных продуктов в приготовлении фармацевтически приемлемых солей.

Термин “фармацевтически приемлемые производные” включает фармацевтически приемлемые сложные эфиры, пролекарства, сольваты и гидраты и фармацевтически приемлемые аддитивные соли соединений или производных. Фармацевтически приемлемые производные могут включать любую фармацевтически приемлемую соль, сольват, гидрат или любое другое соединение или пролекарство, которое, при введении субъекту, способно образовывать (прямо или косвенно) соединение формулы I или метаболит или его остаток, проявляющий противовирусную активность.

Фармацевтически приемлемые соли включают кислотно-аддитивные соли, основно-аддитивные соли, соли или фармацевтически приемлемые сложные эфиры и соли четвертичных аминов и пиримидинов. Кислотно-аддитивные соли образованы из соединения изобретения и фармацевтически приемлемой неорганической или органической кислоты, включающей, но не ограничивающейся ими, хлористоводородную, бромистоводородную, серную, фосфорную кислоты, метансульфокислоту, толуолсульфокислоту, бензолсульфокислоту, уксусную, пропионовую, аскорбиновую, лимонную, малоновую, фумаровую, малеиновую, молочную, салициловую, сульфаминовую или винную кислоты. Противоположный ион четвертичных аминов и пиримидинов включает хлорид, бромид, сульфат, фосфат, метансульфонат, цитрат, ацетат, малонат, фумарат, сульфамат и тартрат. Основно-аддитивные соли включают, но не ограничиваются ими, соли, такие как натриевая, калиевая, кальциевая, литиевая, магниевая, аммониевая и алкиламмониевая соли. Кроме того, основные азотсодержащие группы могут участвовать в образовании четвертичного основания с такими агентами, как низшие галоидалкилы, такие как метил-, этил-, пропил- и бутилхлориды, бромиды и йодиды; диалкилсульфаты, подобные диметил- и диэтилсульфату, и другие. Соли могут быть получены известным способом, например путем обработки соединения соответствующей кислотой или основанием в присутствии подходящего растворителя.

Соединения изобретения могут быть в кристаллическом виде или в виде сольватов (например, гидратов) и в объем настоящего изобретения предназначаются для включения обоих видов. Термин “сольват” относится к комплексу с различной стехиометрией, образованному растворенным веществом (в данном изобретении соединением изобретения) и растворителем. Такие растворители не должны воздействовать на биологическую активность растворенного вещества. Растворителями могут быть в качестве примера вода, этанол или уксусная кислота. Как правило, способы сольватации известны в данной области.

Термин “пролекарства” используют в самом широком смысле слова и он охватывает такие производные, которые превращаются in vivo в соединения изобретения. Такие производные должны быть хорошо известны специалистам в данной области и включать, например, соединения, где свободная гидроксигруппа превращается в сложноэфирное производное, или атом азота в кольце превращается в N-оксид. Примеры сложноэфирных производных включают сложные алкиловые эфиры, сложные фосфатные эфиры и эфиры, образованные из аминокислот, предпочтительно валина. Любое соединение, которое является пролекарством соединения изобретения, входит в объем изобретения. Обычные методики получения подходящих пролекарств изобретения описаны в учебниках, таких как “Design of Prodrugs” Ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985.

Термин “фармацевтически приемлемый сложный эфир” включает биологически приемлемые сложные эфиры соединения изобретения, такие как производные сульфокислоты, фосфокислоты и карбоновой кислоты.

Таким образом, в другом аспекте изобретения предлагается пролекарство или фармацевтически приемлемый сложный эфир соединения формулы I.

В другом аспекте изобретения, предлагается фармацевтическая композиция, которая содержит терапевтически эффективное количество одного или более вышеприведенных соединений формулы I против вируса РСВ, включая их фармацевтически приемлемые соли и производные, и необязательно фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.

Если не указано особо, термины "обработка" или "лечение" в контексте способа или использования изобретения включают как терапевтическую, так и профилактическую обработку.

В другом аспекте настоящего изобретения предлагается применение соединения формулы I, его фармацевтически приемлемой соли или производного для получения лекарственного средства для лечения (терапевтического или профилактического) РСВ-инфекций.

В другом аспекте изобретения предлагается способ лечения РСВ-инфекций путем введения соединения формулы I, включая введение фармацевтически приемлемых солей или производных, таких как пролекарства формулы I, или композиции, содержащей, по крайней мере, одно соединение формулы I пациенту, нуждающемуся в таком лечении.

В другом аспекте изобретения предлагается способ лечения млекопитающих, инфицированных РСВ и нуждающихся в лечении, включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества одного или более из вышеуказанных соединений формулы I или их фармацевтически приемлемых солей или производных.

В другом аспекте изобретения предлагается способ профилактики заражения млекопитающих вирусом РСВ, включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества одного или более из вышеуказанных соединений формулы I или их фармацевтически приемлемых производных.

Хотя изобретение описано со ссылкой на лечение инфекции вирусом РСВ и, в частности, инфекции вирусом РСВ человека, следует отметить, что изобретение также может быть применено для лечения от инфицирования другими вирусами субсемейства Pneumovirinae, особенно вида Pneumovirus и Metapneumovirus, особенно штаммами РСВ и метапневмовируса животных и человека.

В другом аспекте изобретения предлагается способ получения соединений формулы I. Указанные соединения могут быть получены с помощью методик, описанных в следующих способах.

На схеме 1 представлен общий способ получения соединений формулы III. Соединения формулы III являются промежуточными продуктами, подобными соединениям формулы I, но где R₂ означает Н. Соединения формулы III могут быть получены через соответствующие исходные соединения формулы II. Общие способы получения 2-(ароил)бензойных кислот и 3-(ароил)пиридин-2-карбоновых кислот формулы II описаны Yamaguchi, M. Et al., в J. Med. Chem. 1993, 36, 4052-4060 и Natsugari, Н. et al., J. Med. Chem. 1995, 38, 3106-3120.

Схема 1

Обычно один эквивалент соответствующей кетокислоты формулы II подвергают взаимодействию с приблизительно 3 эквивалентами соответствующего диамина общей формулы H₂N-B-C-NH₂. Смесь нагревают при кипячении с обратным холодильником в инертном растворителе, таком как толуол или ксилол, с аппаратом Дина-Старка в течение 3-10 часов. Катализатор, такой как тозилат кислоты, может быть использован. Спустя указанное время реакционную смесь оставляют охлаждаться, продукт фильтруют и перекристаллизовывают из соответствующего растворителя. Если осадок не образуется, растворитель упаривают в вакууме и остаток перекристаллизовывают или очищают флэш-хроматографией или препаративной ВЭЖХ.

Соединения формулы III также могут быть получены способами, описанными в патенте США 4058529, Sulkowski, T.S., et al., J. Org. Chem. 1967, 32, 2180-2184 и Houlihan, W.J., et al., J. Med. Chem. 1975, 18, 182-185. Другие (новые) соединения формулы I могут быть получены путем ацилирования соединений формулы III, как описано на схеме 2.

Схема 2

В одном способе, два эквивалента диизопропилэтиламина или триэтиламина добавляют к одному эквиваленту соединения формулы III в ТГФ при 0°С. Хлорангидрид или другой ацилирующий реагент добавляют к смеси и реакцию контролируют с помощью ВЭЖХ. По окончании реакции ее гасят водой, продукт экстрагируют в подходящий органический растворитель и подвергают обработке стандартными способами. Подобное ацилирование также может быть выполнено путем взаимодействия одного эквивалента соединения формулы III с одним эквивалентом соответствующего хлорангидрида в ксилоле при 120°С в течение 1-24 ч. Реакционную смесь затем оставляют охлаждаться и продукт выделяют. Альтернативно, соединения формулы III можно обрабатывать посредством приблизительно 2,2 эквивалентов соответствующего хлорангидрида или ангидрида в пиридине приблизительно при -5°С. Смесь оставляют перемешиваться до комнатной температуры и после перемешивания в течение 2-24 ч продукт выделяют стандартными способами. Ацилирования также можно достичь обработкой соответствующего соединения формулы III соответствующей карбоновой кислотой (3 эквивалента), TFFH (3,3 эквивалента) и DIEA (3,3 эквивалента) в ДМФА и нагреванием до 45°С в течение приблизительно 14 дней. По окончании указанного времени продукт выделяют стандартными методами.

N-Алкилированные и N-сульфонилированные соединения формулы I лучше всего получать при использовании подходящих N-замещенных аминов. Указанные соединения могут быть получены известными способами, например, описанными Kruse L.L., et al., в J. Med. Chem. 1990, 33, 781-789.

в которой R₂ является -CHR₃ или -S(O)₂R₅, как определено выше в разделе «сущность изобретения».

Поэтому соответствующую кетокислоту (2 эквивалента) и N-замещенный диамин (1 эквивалент) в хлорбензоле, толуоле или ксилоле помещают в колбу, снабженную мешалкой и водоотделителем Дина-Старка, и нагревают при кипячении с обратным холодильником до тех пор, пока не прекращается наблюдение отделения воды (1-8 ч). Затем растворитель удаляют дистилляцией и остаток охлаждают. Остаток может быть очищен стандартными способами.

Соединения формулы I, где R₂ является мочевиной или тиомочевиной, получают следующим способом.

Один эквивалент соответствующего соединения формулы III подвергают взаимодействию с одним эквивалентом соответствующего изоцианата или изотиоцианата в ТГФ или ксилоле при температуре, колеблющейся в области 20-120°С в течение 1-24 ч. Реакционную смесь затем оставляют охлаждаться, продукт фильтруют, промывают и обычно перекристаллизовывают из соответствующего растворителя. Если осадка не образуется, продукт может быть очищен с помощью стандартных хроматографических методов.

Другие соединения формулы I могут быть получены путем добавления, удаления или модификации имеющихся заместителей. Получение может быть достигнуто стандартными методиками, применяемыми для взаимного преобразования функциональной группы, хорошо известными в промышленности, такими как описано в публикации Всесторонние органические превращения: справочник по получению функциональных групп, опубликованном Larock R.C., New York, VCH Publishers, Inc. 1989.

Примерами взаимных превращений функциональных групп являются -C(O)NR'R” из -CO₂CH₃ путем нагревания с каталитическим цианидом металла или без него, например NaCN, и HNR'R” в CH₃OH; -OC(O)R из -OH, например с ClC(O)R в пиридине; -NC(S)NR'R” из -NHR с алкилизотиоцианатом или тиоциановой кислотой; -NRC(O)OR' из -NRH с алкиловым эфиром хлоругольной кислоты; -NRC(O)NR'R” из -NHR путем обработки изоцианатом, например HN=C=O или RN=C=O; -NRC(O)R' из -NHR путем обработки посредством ClC(O)R' в пиридине; -C(=NR)NR'R” из -C(NR'R”)SR с H₃NR⁺OAc^-путем нагревания в спирте; -C(NR'R”)SR из -C(S)NR'R” с R-I в инертном растворителе, например ацетоне; -C(S)NR'R” (где R' или R” не является водородом) из -C(S)NH₂ с HNR'R”; -C(=NCN)-NR'R” из -C(=NR'R”)-SR с NH₂CN путем нагревания в безводном спирте, альтернативно, из -C(=NH)-NR'R” путем обработки посредством BrCN и NaOEt в EtOH; -NR-C(=NCN)SR из -NHR' путем обработки посредством (RS)₂C=NCN; -NR”SO₂R из -NHR' путем обработки посредством ClSO₂R при нагревании в пиридине; -NR'C(S)R из -NR'C(O)R путем обработки реагентом Лавессона [2,4-бис(4-метоксифенил)-1,2,3,4-дитиадифосфетан-2,4-дисульфид]; -NRSO₂CF₃ из -NHR с ангидридом трифторметансульфокислоты и основанием, -CH(NH₂)CHO из -CH(NH₂)C(O)OR' с Na(Hg) и HCl/EtOH; -CH₂C(O)OH из -C(O)OH путем обработки посредством SOCl₂, затем CH₂N₂, затем H₂O/Ag₂O; -C(O)OH из -CH₂C(O)OCH₃ путем обработки посредством PhMgX/HX, затем уксусным ангидридом, затем CrO₃; R-OC(O)R' из RC(O)R' с помощью R”CO₃H; -CCH₂OH из -C(O)OR' с Na/R'OH; -CHCH₂ из -CH₂CH₂OH с помощью реакции Чугаева; -NH₂ из -C(O)OH реакцией Курциуса; -NH₂ из -C(O)NHOH с TsCl/основанием, затем H₂O; -CHC(O)CHR из -CHCHOHCHR при использовании реагента Десс-Мартина или CrO₃/водн. H₂SO₄/ацетон; -C₆H₅CHO из -C₆H₅CH₃ с CrO₂Cl₂; -CHO из -CN с SnCl₂/HCl; -CN из -C(O)NHR с PCl₅; -CH₂R из -C(O)R с N₂H₄/KOH.

В процессе проведения реакций может потребоваться защита ряда фрагментов. Подходящие защитные группы хорошо известны в промышленности и описаны во многих ссылках, таких как Protecting Groups in Organic Synthesis, Greene T.W., Wiley-Interscience, New York, 1981.

Сокращения, которые могут быть использованы в настоящем описании, включая сокращения на схемах I-II и в экспериментальной части, являются следующими, если не указано иное:

DCM: дихлорметан

DIEA: диизопропилэтиламин

ДМФА: диметилформамид

Et: этил

EtOAc: этилацетат

Me: метил

MeOH: метиловый спирт

МС: масс-спектрометрия

ЯМР: ядерный магнитный резонанс

Ph: фенил

ВЭЖХ: высокоэффективная жидкостная хроматография

TEA: триэтиламин

TFA: трифторуксусная кислота

TFFH: гексафторфосфат фтор-N,N,N”N”-тетраметилформамидиния

ТГФ: тетрагидрофуран

TsCl: тозилхлорид

TsOH: толуолсульфокислота

Изобретение также относится к терапевтическим композициям, содержащим, по крайней мере, одно соединение формулы I, включая фармацевтически приемлемые соли или пролекарства.

Композиции также могут содержать одно или более других соединений, проявляющих противовирусную активность относительно вируса РСВ, такое как виразол, или другие средства, такие как респигам (RespiGam) или синагис (Synagis).

Композиции также могут содержать другие лекарственные средства или могут быть введены в комбинации с другими лекарственными средствами для лечения симптомов заболевания, такими как противовоспалительные лекарственные препараты.

Термин “композиция” предназначен для включения в состав композиции активного ингредиента с обычными носителями и эксципиентами и также с инкапсулирующими материалами в качестве носителя для получения капсулы, в которой активный ингредиент (с другими носителями или без них) окружен носителем для заключения в капсулу.

Как легко смогут оценить специалисты в данной области, путь введения и природа фармацевтически приемлемого носителя будут зависеть от характера состояния и от животного, которое подвергается лечению. Полагают, что выбор отдельного носителя или системы доставки и способа введения может легко сделать персона, квалифицированная в данной области. При приготовлении любой композиции, содержащей соединения, следует удостовериться, что активность соединения не разрушается в процессе и что соединение способно достичь своего участка действия без разрушения. В некоторых случаях может быть необходимым защитить соединение средствами, известными в данной области, такими как, например, микроинкапсуляция. Подобным образом, выбранный путь введения должен быть таким, чтобы соединение достигло его участка действия.

Фармацевтические композиции или препараты включают такие, которые являются подходящими для перорального, ректального, назального, местного (включая щечное и подъязычное), вагинального или парентерального (включая внутримышечное, подкожное и внутривенное) введения, или которые находятся в виде, подходящем для введения путем ингаляции или инсуффляции. Полагают, что композиции должны быть в виде, подходящем для перорального или назального введения или для введения ингаляцией или инсуффляцией.

Соединения изобретения вместе с подходящим адъювантом, носителем или разбавителем могут быть представлены в виде фармацевтических композиций и их единичных дозированных форм, которые могут применяться в виде твердых материалов, таких как таблетки или наполненные капсулы, или в виде жидких материалов, таких как растворы, суспензии, эмульсии, эликсиры или капсулы, наполненные ими, все для перорального применения, в виде суппозиториев для ректального введения, или в виде стерильных инъецируемых растворов для парентерального (включая подкожное) применения.

Такие фармацевтические композиции и их единичные дозированные формы могут содержать обычные ингредиенты в обычных пропорциях с дополнительными активными соединениями или элементами или без них, и такие единичные дозированные формы могут содержать любое подходящее эффективное количество активного ингредиента, соответствующее предназначенной суточной дозированной области, которую следует использовать. Препараты, содержащие десять (10) миллиграмм активного ингредиента или, более широко, от 0,1 до ста (100) миллиграмм, на таблетку являются подходящими типичными единичными дозированными формами.

Соединения настоящего изобретения могут быть введены в виде широкого ряда пероральных и парентеральных дозированных форм. Специалистам в данной области станет очевидно, что следующие дозированные формы могут содержать в качестве активного компонента, либо соединение изобретения, либо фармацевтически приемлемую соль соединения изобретения.

Для приготовления фармацевтических композиций из соединений настоящего изобретения фармацевтически приемлемые носители могут быть либо твердыми, либо жидкими. Препараты в твердом виде включают порошки, таблетки, пилюли, капсулы, облатки, суппозитории и гранулы. Твердым носителем может быть одно или более веществ, которые также могут действовать как разбавители, ароматизаторы, солюбилизирующие реагенты, смазывающие реагенты, суспендирующие реагенты, связывающие реагенты, консерванты, дезинтегрирующие таблетку агенты или инкапсулирующий материал.

В порошках носитель представляет собой тонко измельченное твердое вещество, которое находится в смеси с тонко измельченным активным компонентом.

В таблетках активный компонент находится в смеси с носителем, имеющим необходимую связывающую способность, в подходящих пропорциях и спрессован в желаемой форме и желаемого размера.

Порошки и таблетки, предпочтительно, содержат от пяти или десяти до приблизительно семидесяти процентов активного соединения. Подходящими носителями являются карбонат магния, стеарат магния, тальк, сахар, лактоза, пектин, декстрин, крахмал, желатин, трагакант, метилцеллюлоза, натрия карбоксиметилцеллюлоза, низкоплавкий воск, масло какао и тому подобное. Термин “препарат” предназначен для включения в композицию активного соединения с инкапсулирующим материалом в качестве носителя для получения капсулы, в которой активный компонент, с носителями или без них, окружен носителем, который таким образом связан с ним. Подобным образом, облатки и лепешки являются включенными. Таблетки, порошки, капсулы, пилюли, облатки и лепешки могут быть использованы как твердые формы, подходящие для перорального введения.

Для приготовления суппозиториев низкоплавкий воск, такой как смесь глицеридов жирных кислот или масло какао, сначала расплавляют и активный компонент диспергируют в нем до гомогенного состояния путем перемешивания. Затем расплавленную гомогенную смесь выливают в формы подходящего размера, оставляют охлаждаться и затвердевать.

Композиции, подходящие для вагинального введения, могут быть представлены в виде пессариев, тампонов, кремов, гелей, паст, пенок или аэрозолей, содержащих, кроме активного ингредиента, соответствующие носители, которые известны в данной области.

Препараты в жидком виде включают растворы, суспензии и эмульсии, например воду или растворы вода-пропиленгликоль. Например, парентеральные инъецируемые жидкие препараты могут быть приготовлены в виде растворов в водном полиэтиленгликолевом растворе.

Стерильные жидкие композиции включают стерильные растворы, суспензии, эмульсии, сиропы и эликсиры. Активный ингредиент может быть растворен или суспендирован в фармацевтически приемлемом носителе, таком как стерильная вода, стерильный органический растворитель или смеси из обоих.

Композиции настоящего изобретения могут таким образом быть составлены для парентерального введения (например, путем инъекции, например, болюсного вливания или непрерывной инфузии) и могут быть представлены в единичной дозированной форме в ампулах, предварительно заполненных шприцах, контейнерах малого объема для инфузии или в контейнерах с множеством доз с добавленным консервантом. Композиции могут быть в виде суспензий, растворов или эмульсий в масляных или водных носителях и могут содержать композиционные средства, такие как суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие реагенты. Альтернативно, активный ингредиент может быть в виде порошка, полученного путем асептического выделения стерилизованного твердого вещества или путем лиофилизации из раствора, для смешивания с подходящим носителем, например стерильной, пироген-свободной водой, до применения.

Фармацевтические формы, подходящие для инъекции, включают стерильные инъецируемые растворы или дисперсии и стерилизованные порошки для немедленного приготовления стерильных инъецируемых растворов. Они должны быть стабильными в условиях производства и хранения и могут быть защищены от окисления и заражения микроорганизмами, такими как бактерии или грибы.

Специалисты в данной области смогут легко определить соответствующие композиции для соединений настоящего изобретения, используя обычные подходы. Идентификация предпочтительных областей рН и подходящих эксципиентов, например антиоксидантов, представляется общепринятой практикой в данной области (см., например, публикацию Cleland et al., 1993). Буферные системы обычно используют для достижения величин рН в желаемой области, и они включают буферы с карбоновыми кислотами, например уксусной, лимонной, молочной и янтарной кислотами. Ряд антиоксидантов является доступным для таких препаратов, включая фенольные соединения, такие как ВНТ или витамин Е, восстановители, такие как метионин или сульфит, и хелаторы металлов, такие как ЭДТА.

Растворитель или дисперсионная среда для инъецируемого раствора или дисперсии может содержать любую из обычных систем растворителей или носителей для соединений и может содержать, например, воду, этанол, многоатомный спирт (например, глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль и тому подобное), их подходящие смеси и растительные масла. Характерная текучесть может быть сохранена, например, при использовании слоя, такого как лецитин, путем поддержания требуемого размера частиц в случае дисперсии и при использовании поверхностно-активных веществ. Профилактика действия микроорганизмов может быть осуществлена при необходимости путем включения различных антибактериальных и противогрибковых средств, например парабенов, хлорбутанола, фенола, сорбиновой кислоты, тимерозала и тому подобное. Во многих случаях будет предпочтительно включить средства для регулирования осмотического давления, например сахара или хлорид натрия. Предпочтительно, если состав для инъекции будет изотоническим с кровью. Продолжительная абсорбция инъецируемых композиций может быть достигнута при использовании в композициях средств, замедляющих абсорбцию, например моностеарата алюминия и желатина. Фармацевтические препараты, подходящие для инъекции, могут быть доставлены любым соответствующим способом, включая внутривенную, внутримышечную, интрацеребральную, подоболочечную, эпидуральную инъекцию или инфузию.

Стерильные инъецируемые растворы приготовляют путем включения активных соединений в требуемом количестве в соответствующий растворитель с различными другими ингредиентами при необходимости, такими как ингредиенты, перечисленные выше, с последующей стерилизацией фильтрованием. Обычно дисперсии приготовляют путем включения различных стерилизованных активных ингредиентов в стерильный носитель, который содержит основную дисперсионную среду и требуемые другие ингредиенты из перечисленных выше. В случае стерилизованных порошков для приготовления стерильных инъецируемых растворов, предпочтительными способами приготовления являются вакуумная сушка или сушка при температуре ниже 0°С предварительно стерилизованного фильтрованием раствора активного ингредиента плюс любых дополнительных желаемых ингредиентов.

Когда активные ингредиенты являются защищенными подходящим образом, они могут быть введены перорально, например с инертным разбавителем или с усвояемым съедобным носителем, или они могут быть заключены в капсулу из твердой или мягкой желатиновой оболочки, или они могут быть прессованы в виде таблеток, или они могут быть прямо включены в пищу. Для перорального терапевтического введения активное соединение может быть включено с эксципиентами и использовано в виде принимаемых внутрь таблеток, трансбуккальных таблеток, пастилок, капсул, эликсиров, суспензий, сиропов, облаток и тому подобных. Такие композиции и препараты, предпочтительно, содержат, по крайней мере, 1% мас. активного соединения. Процентное содержание композиций и препаратов может, конечно, изменяться и может составлять приблизительно от 5 до 80% мас. единицы. Количество активного соединения в терапевтически полезных композициях должно быть достаточным для достижения подходящей дозировки.

Таблетки, пастилки, пилюли, капсулы и тому подобное могут также содержать компоненты, перечисленные ниже: связующее вещество, такое как камедь, гуммиарабик, кукурузный крахмал или желатин; эксципиенты, такие как дикальция фосфат; дезинтегрирующее средство, такое как кукурузный крахмал, картофельный крахмал, альгиновая кислота и тому подобное; смазывающее средство, такое как стеарат магния, и подсластитель, такой как сахароза, лактоза или сахарин, может быть добавлен или ароматизатор, такой как мятное масло, винтергриновое масло или ароматизатор со вкусом вишни. Когда единичной дозированной формой является капсула, она может содержать, кроме приведенных выше материалов, жидкий носитель.

Различные другие материалы могут быть представлены в качестве покрытий или иным способом могут модифицировать физическую форму дозированной единицы. Например, таблетки, пилюли или капсулы могут быть покрыты шеллаком, сахаром или обоими. Сироп или эликсир может содержать активное соединение, сахарозу в качестве подсластителя, метил- и пропилпарабены в качестве консервантов, краситель и ароматизатор, такой как вишневая или апельсиновая отдушка. Конечно, любой материал, применяемый в приготовлении любой единичной дозированной формы, должен быть фармацевтически чистым и, в основном, нетоксичным в применяемых количествах. Кроме того, активное соединение(я) может быть включено в препараты и композиции с замедленным высвобождением, включая такие, которые осуществляют специфическую доставку активного пептида к отдельным областям кишки.

Водные растворы, подходящие для перорального применения, могут быть приготовлены путем растворения активного компонента в воде и добавления подходящих красителей, отдушек, стабилизаторов и загустителей при желании.

Водные суспензии, подходящие для перорального использования, могут быть приготовлены путем диспергирования тонко измельченного активного компонента в воде с вязким материалом, таким как природные или синтетические камеди, смолы, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза натрия или другие хорошо известные суспендирующие средства.

Фармацевтически приемлемые носители и/или разбавители включают любой растворитель и все растворители, дисперсионные среды, покрытия, антибактериальные и противогрибковые агенты, изотонические агенты и замедляющие всасывание средства и тому подобное. Использование таких сред и агентов для фармацевтически активных веществ хорошо известно в данной области. Исключение касается тех случаев, когда любая обычная среда или обычный агент не совмещается с активным ингредиентом, тогда их применение в терапевтических композициях следует рассмотреть особо. Дополнительные активные ингредиенты также могут быть включены в композиции.

Также, включенными являются препараты, находящиеся в твердом состоянии, которые незадолго до использования должны быть превращены в препараты, находящиеся в жидком состоянии, для перорального введения. Такие жидкие препараты включают растворы, суспензии и эмульсии. Данные препараты могут содержать, кроме активного компонента, красители, ароматизаторы, стабилизаторы, буферы, искусственные и природные подсластители, диспергирующие вещества, загустители, солюбилизирующие средства и тому подобное.

Для местного введения к эпидермису соединения изобретения могут быть приготовлены в виде мазей, кремов или лосьонов или в виде чрескожного пластыря. Мази и кремы могут быть приготовлены, например, с водной или масляной основой с добавлением подходящих загустителей и/или желирующих веществ. Лосьоны могут быть приготовлены с водной или масляной основой и вообще будут содержать одно или более эмульгирующих агентов, стабилизирующих агентов, диспергирующих агентов, суспендирующих агентов, загустителей или красителей.

Препараты, подходящие для местного введения в рот, включают лепешки, содержащие активный компонент в основе, придающей аромат, обычно сахарозе и гуммиарабике или трагаканте; пастилки, содержащие активный ингредиент в инертной основе, такой как желатин и глицерин или сахароза и гуммиарабик, и жидкости для полоскания рта, содержащие активный ингредиент в подходящем жидком носителе.

Растворы или суспензии применяют прямо к носовой полости обычными способами, например, с помощью капельницы, пипетки или спрэя. Препараты могут быть представлены в виде одноразовой дозы или в виде множества доз. В случае введения капельницей или пипеткой, указанное введение может быть достигнуто больным, вводящим соответствующий, предопределенный объем раствора или суспензии. В случае спрэя, введение может быть достигнуто, например, с помощью насоса-дозатора с мелкокапельным опрыскиванием. Для того чтобы улучшить назальную доставку и удерживание, соединения изобретения могут быть заключены в капсулу с циклодекстринами или могут быть приготовлены с другими агентами, способствующими усилению доставки и удерживанию в слизистой оболочке носа.

Введение к респираторному тракту также может быть достигнуто с помощью аэрозольного препарата, в котором активный ингредиент находится в упаковке под давлением с подходящим пропеллантом, таким как хлорфторуглерод (CFC), например дихлордифторметан, трихлорфторметан или дихлортетрафторэтан, диоксид углерода или другой подходящий газ. Аэрозоль также может содержать поверхностно-активное вещество, такое как лецитин. Дозу лекарственного средства можно контролировать путем обеспечения дозировочным клапаном.

Альтернативно, активные ингредиенты могут быть представлены в виде сухого порошка, например, порошковая смесь соединения в подходящей порошковой основе, такой как лактоза, крахмал, производные крахмала, такие как гидроксипропилметилцеллюлоза и поливинилпирролидон (PVP). Без труда порошковый носитель будет образовывать гель в назальной полости. Порошковая композиция может быть представлена в виде единичной дозированной формы, например в капсулах или картриджах например, желатиновых, или блистерных упаковках, из которых порошок может быть введен с помощью ингалятора.

В композициях, предназначенных для введения к респираторному тракту, включая интраназальные композиции, соединение обычно должно иметь маленький размер частиц, например порядка от 5 до 10 микрон или меньше. Такой размер частиц может быть достигнут способами, известными в данной области, например тонким измельчением.

При желании, могут быть использованы композиции, приспособленные к замедленному высвобождению активного ингредиента.

Фармацевтические препараты, предпочтительно, находятся в виде единичных дозированных форм. В такой форме препарат подразделяют на единичные дозы, содержащие соответствующие количества активного компонента. Единичная дозированная форма может быть упакованным препаратом, упаковка содержит дискретные количества препарата, такого как упакованные таблетки, капсулы и порошки в пузырьках или ампулах. Кроме того, единичная дозированная форма может находиться в виде капсулы, таблетки, облатки или лепешки, или она может представлять собой соответствующее число любых из них в упакованном виде.

Особенно предпочтительным является приготовление парентеральных композиций в единичной дозированной форме для легкости введения и единообразия дозировки. Единичная дозированная форма, используемая в данном изобретении, относится к физически дискретным единицам, пригодным как единичные дозировки для субъектов, подвергаемых лечению; каждая единица содержит предопределенное количество активного материала, рассчитанное с целью достижения желаемого терапевтического эффекта, в сочетании с требуемым фармацевтическим носителем. Разработка новых единичных дозированных форм изобретения диктуется некоторыми характеристиками и непосредственно зависит от (а) уникальных характеристик активного вещества и отдельного терапевтического эффекта, которого нужно достичь, и (b) ограничений, существующих в области приготовления композиций такого активного вещества для лечения заболевания у субъектов, при котором физическое здоровье ухудшается, как описано подробно в настоящем описании.

Изобретение также включает соединения в отсутствие носителя, где соединения находятся в единичной дозированной форме.

Введенное количество соединения формулы I может находиться в области приблизительно от 10 мг до 2000 мг в день, в зависимости от активности соединения и заболевания, которое подвергается лечению.

Жидкости или порошки для интраназального введения, таблетки или капсулы для перорального введения и жидкости для внутривенного введения являются предпочтительными композициями.

Экспериментальные данные

Спектры ЯМР записывали либо на спектрометре Bruker Avance DRX 400, AC 200, либо на спектрометре AM 300. Спектры записывали в CDCl₃, d₆-ацетоне, CD₃OD или d₆-ДМСО, используя пик остаточного растворителя в качестве ссылки. Химические сдвиги представлены на δ-шкале в миллионных долях (м.д.), используя следующие условные обозначения, чтобы установить мультиплетность: с, синглет, д, дублет, т, триплет, кв., квартет, м, мультиплет и стоящий впереди уш. (уширенный). Масс-спектры (ESI) записывали либо на спектрометре Micromass Platform QMS, либо на спектрометре Finnigan LCQ Advantage. Флэш-хроматографию осуществляли на 40-63 мкм силикагеле 60 (Merck No. 9385). Аналитическую ВЭЖХ осуществляли с использованием насоса Waters 600, автоматического самплера Waters 717 и УФ-детектора Waters 490E. Препаративную ВЭЖХ осуществляли с использованием насоса Gilson 322 с жидкостным манипулятором Gilson 215 и HP1100 PDA-детектором. Обе системы ВЭЖХ включали колонки Phenomonex C8(2), в качестве элюента использовали ацетонитрил или ацетонитрил, содержащий 0,06% ТФУ в воде, или воду, содержащую 0,1% ТФУ.

Способ А

Один эквивалент соответствующей кетокислоты формулы II подвергали взаимодействию приблизительно с 3 эквивалентами соответствующего диамина общей формулы H₂N-B-C-NH₂. Смесь нагревали при кипячении с обратным холодильником в инертном растворителе, таком как толуол или ксилол, с аппаратом Дина-Старка в течение 3-10 ч. Катализатор, такой как тозилат кислоты, может быть использован. По окончании указанного времени реакционную смесь оставляли охлаждаться, продукт фильтровали и перекристаллизовывали из соответствующего растворителя. Если осадок не образовывался, растворитель упаривали в вакууме и остаток перекристаллизовывали или очищали флэш-хроматографией или препаративной ВЭЖХ.

Соединение 1

Соединение 1 получали способом А, используя 2-(4-хлорбензоил)бензойную кислоту и этилендиамин.

¹H ЯМР (300МГц, CDCl₃) δ 2,05 (уш.с, 1H), 3,11-3,26 (м, 2H), 3,61-3,68 (м, 1H), 3,76-3,84 (м, 1H), 7,22-7,26 (м, 1H), 7,30 (д, J=8,9 Гц, 2H), 7,42-7,48 (м, 2H), 7,62 (д, J=8,8 5 Гц, 2H), 7,74-7,80 (м, 1H).

МС m/z 285 [M+H⁺]

Соединение 2

Соединение 2 получали способом А из 2-(4-хлорбензоил)бензойной кислоты и 1,3-диаминопропана.

¹H ЯМР (300МГц, CDCl₃) δ 1,48-1,62 (м, 2H), 2,83-2,96 (м, 1H), 2,97-3,13 (м, 2H), 4,47-4,60 (м, 1H), 7,22-7,29 (м, 1H), 7,31-7,37 (м, 2H), 7,38-7,47 (м, 2H), 7,48-7,56 (м, 2H), 7,82-7,89 (м, 1H).

МС m/z [M+H⁺] 299

Соединение 7

Соединение 7 получали способом А из 2-(4-хлорбензоил)бензойной кислоты и 1,4-диаминобутана.

¹H ЯМР (300МГц, CDCl₃) δ 1,13-1,32 (м, 2H), 1,33-1,57 (м, 2H), 2,15-2,44 (м, 2H), 2,73-2,90 (м, 1H), 3,32-3,49 (м, 1H), 7,10-7,20 (м, 1H), 7,21-7,34 (м, 4H), 7,35-7,49 (м, 2H), 7,60-7,71 (м, 1H).

МС m/z [M+H⁺] 313

Способы синтеза соединений формулы III основаны на способах, описанных в патенте США №4058529 Sulkowski, T.S., et al., J. Org. Chem. 1967, 32, 2180-2184 и публикации Houlihan, W.J., et al., J. Med. Chem. 1975, 18, 182-185.

Способ В

Два эквивалента диизопропилэтиламина или триэтиламина добавляли к одному эквиваленту соединения формулы III в ТГФ при 0°С. Хлорангидрид или другой ацилирующий агент добавляли к смеси и реакцию контролировали с помощью ВЭЖХ. Когда реакция заканчивалась, ее гасили водой и продукт экстрагировали в EtOAc. Затем раствор продукта в EtOAc последовательно промывали смесью 1:1 насыщ. раствор NH₄Cl_(водн.):вода, смесью 1:1 насыщ. раствор Na₂CO_3(водн.):вода и насыщ. раствором Na₂CO_3(водн.). Слой EtOAc сушили (Na₂SO₄), растворитель упаривали в вакууме и остаток либо подвергали кристаллизации, либо очистке флэш-хроматографией, используя смесь EtOAc/гексаны, либо препаративной ВЭЖХ.

Способ С

Один эквивалент соответствующего соединения формулы III подвергали взаимодействию с одним эквивалентом соответствующего хлорангидрида в ксилоле при 120°С в течение 1-24 ч. Затем реакционную смесь оставляли охлаждаться, продукт фильтровали и перекристаллизовывали из соответствующего растворителя. Если осадок не образовывался, реакционную смесь очищали флэш-хроматографией или препаративной ВЭЖХ.

Способ D

N-Алкилированные диамины могут быть получены процедурой, описанной Kruse L.I., et al., в J. Med. Chem. 1990, 33, 781-789.

Соответствующую кетокислоту (2 эквивалента) и N-замещенный диамин (1 эквивалент) в хлорбензоле, толуоле или ксилоле помещали в колбу, снабженную мешалкой и водоотделителем Дина-Старка. Смесь кипятили с обратным холодильником до тех пор, пока дальнейшее водоотделение не наблюдалось (1-8 ч.), после чего растворитель подвергали дистилляции и остаток охлаждали. Остаток очищали флэш-хроматографией или препаративной ВЭЖХ.

Способ Е

Один эквивалент соответствующего соединения формулы III подвергали взаимодействию с одним эквивалентом соответствующего изоцианата или изотиоцианата в ТГФ или ксилоле при температуре, изменяющейся в области 20-120°С в течение 1-24 ч. Реакционную смесь затем оставляли охлаждаться, продукт фильтровали, промывали и перекристаллизовывали из соответствующего растворителя. Если осадок не образовывался, реакционную смесь очищали флэш-хроматографией или препаративной ВЭЖХ.

Соединение 12

Соединение 12 получали способом С, используя соединение 1 и 4-фторбензоилхлорид.

¹H ЯМР (300МГц, CDCl₃) δ 3,22-3,34 (м, 1H), 3,73-3,82 (м, 1H), 3,91-4,03 (м, 1H), 4,28-4,36 (м, 1H), 7,05-7,13 (м, 2H), 7,17 (д, J=7,8 Гц, 2H), 7,33 (д, J=7,8 Гц, 2H), 7,43-7,52 (м, 2H), 7,54-7,65 (м, 2H), 7,84-7,90 (м, 1H), 8,00-8,06 (м, 1H).

МС m/z 407 [M+H⁺]

Соединение 13

Соединение 13 получали способом С, используя соединение 1 и бензоилхлорид.

¹H ЯМР (300МГц, CDCl₃) δ 3,21-3,31 (м, 1H), 3,72-3,79 (м, 1H), 3,91-4,00 (м, 1H), 4,26-4,33 (м, 1H), 7,20 (д, J=8,8 Гц, 2H), 7,34 (д, J=8,8 Гц, 2H), 7,38-7,48 (м, 5H), 7,56-7,61 (м, 2H), 7,85-7,88 (м, 1H), 8,04-8,07 (м, 1H).

МС m/z 389 [M+H⁺]

Соединение 23

Соединение 23 получали способом D из 2-(4-хлорбензоил)бензойной кислоты и N-бензилэтилендиамина.

¹H ЯМР (300МГц, CDCl₃) δ 2,97 (д, JAB=13 Гц, 1H), 3,07-3,32 (м, 3H), 3,42 (д, JAB=13Гц, 1H), 3,83-3,96 (м, 1H), 7,04-7,09 (м, 1H), 7,17-7,38 (м, 8H), 7,39-7,46 (м, 1H), 7,66-7,73 (м, 2H), 7,81-7,86 (м, 1H).

МС m/z [M+H⁺] 375

Соединение 24

Соединение 24 получали способом D из 2-бензоилбензойной кислоты и N-бензилэтилендиамина.

¹H ЯМР (300МГц, CDCl₃) δ 2,99 (д, JAB=13 Гц, 1H), 3,10-3,29 (м, 3H), 3,44 (д, JAB=13 Гц, 1H), 3,84-3,99 (м, 1H), 7,07-7,13 (м, 1H), 7,18-7,44 (м, 10H), 7,73-7,81 (м, 2H), 7,82-7,87 (м, 1H).

МС m/z [M+H⁺] 341

Соединение 25

Соединение 25 получали способом D из 2-(4-толуоил)бензойной кислоты и N-бензилэтилендиамина.

¹H ЯМР (300МГц, CDCl₃) δ 2,36 (s, 3H), 3,00 (д, JAB=13 Гц, 1H), 3,11-3,29 (м, 3H), 3,45 (д, JAB=13 Гц, 1H), 3,86-3,98 (м, 1H), 7,08-7,14 (м, 1H), 7,15-7,21 (м, 2H), 7,22-7,44 (м, 7H), 7,63-7,69 (м, 2H), 7,81-7,86 (м, 1H).

МС m/z [M+H⁺] 355

Соединение 106

Соединение 106 получали способом А, используя 3-бром-(4-хлорбензоил)бензойную кислоту и этилендиамин.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ 3,12-3,25 (м, 2H), 3,64-3,71 (м, 1H), 3,76-3,83 (м, 1H), 7,13 (дд, J=8,1, 0,6 Гц, 1H), 7,33 (д, J=8,7 Гц, 2H), 7,57-7,61 (м, 3H), 7,91 (дд, J=1,8, 0,6 Гц, 1H).

МС m/z ([M+Н]+) 365

Соединение 107

Соединение 107 получали способом А, используя 4-бром-(4-хлорбензоил)бензойную кислоту и этилендиамин.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ 3,11-3,24 (м, 2H), 3,69-3,63 (м, 1H), 3,76-3,82 (м, 1H), 7,34, (д, J=8,7 Гц, 1H), 7,39 (дд, J=1,5, 0,6 Гц, 1H), 7,59-7,66 (м, 4H).

МС m/z ([M+H]+) 365

Способ F

Два эквивалента бороновой кислоты или сложного эфира, пять эквивалентов Na₂CO₃ и палладий на угле (катализатор) или 0,1 эквивалента [PdCl₂(dppf)] (дихлорметановый аддукт дихлор[1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладия(II)) добавляли к соответствующему бромзамещенному соединению формулы III в DME/H₂O (93:7). Реакционную смесь нагревали до 50°С в течение 1-4 ч. Реакционную смесь затем охлаждали, фильтровали и упаривали в вакууме с получением твердого или маслянистого остатка. Затем остаток либо перекристаллизовывали, либо очищали флэш-хроматографией, используя смесь EtOAc/гексаны, либо препаративной ВЭЖХ.

Способ G

Три эквивалента бороновой кислоты или сложного эфира, шесть эквивалентов К₂СО₃и 0,3 эквивалента тетракис(трифенилфосфин)палладия(II) добавляли к соответствующему бромзамещенному соединению формулы III в толуоле. Реакционную смесь нагревали до 100°С в течение 1-24 ч. Затем реакцию гасили посредством CH₂Cl₂ и реакционную смесь промывали водой. Слой CH₂Cl₂ сушили (Na₂SO₄) и упаривали в вакууме с получением твердого или маслянистого остатка. Затем остаток либо перекристаллизовывали, либо очищали флэш-хроматографией, используя в качестве элюента смесь EtOAc/гексаны, или препаративной хроматографией.

Способ Н

Хлорангидрид или ангидрид, или изоцианат, или изотиоцианат (2,2 экв.) добавляли прямо для жидкостей или в виде раствора в пиридине (~1М) для твердых частиц к раствору соответствующего соединения формулы III (0,1 ммоль) в пиридине (500 мкл) при -5°С. Реакционную смесь перемешивали и оставляли нагревать до комнатной температуры в течение 2-24 ч, по истечении указанного времени исходный материал полностью расходовался. Реакционную смесь последовательно разбавляли водой и экстрагировали посредством CH₂Cl₂ (3×). Объединенные экстракты CH₂Cl₂ промывали посредством 1н. NaOH ((3×)) и 10% HCl (3×). В случае основных продуктов, промывка кислотой не включается, и в случае кислотных продуктов, промывка основанием не включается. Для нейтральных или основных продуктов чистота сырого продукта улучшается в значительной степени при перемешивании объединенных CH₂Cl₂-экстрактов в присутствии смолы с карбонатными ионогенными группами (МР-карбонат ~3 экв.) в течение 0,5-12 ч. CH₂Cl₂-Экстракты сушили (MgSO₄) и растворитель упаривали в вакууме. Впоследствии, неочищенные продукты очищали флэш-хроматографией, используя систему растворителей EtOAc/гексан.

Соединение 120

Соединение 120 получали способом F, используя соединение 107 и 4-толилбороновую кислоту.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ 3,19-3,26 (м, 2H), 3,65-3,72 (м, 1H), 3,86-3,89 (м, 1H), 7,23, (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,34 (д, J=8,7 Гц, 2H), 7,39-7,45 (м, 3H), 7,65-7,71 (м, 3H), 7,82 (дд, J=8,1, 0,6 Гц, 4H).

МС m/z ([M+H]+) 375

Соединение 132

Соединение 132 получали способом G, используя соединение 107 и н.-бутилбороновую кислоту.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ 0,89 (т, J=7,5 Гц, 3H), 1,23-1,37 (м, 3H), 1,48-1,56 (м, 2H), 2,59 (т, J=7,8 Гц, 2H), 3,12-3,26 (м, 2H), 3,62-3,69 (м, 1H), 3,83-3,78 (м, 1H), 7,26-7,35 (м, 3H), 7,62-7,69 (м, 3H).

МС m/z ([M+H]+) 341

Способ I

Смесь соответствующей карбоновой кислоты (3 экв.) и TFFH (3,3 экв.) суспендировали в безводном ДМФА (0,25М) и DIEA (3,3 экв.) в атмосфере азота. Смесь нагревали при 45°С в течение 30 мин. Полученный раствор добавляли к соответствующему соединению формулы III (1 экв.) в атмосфере азота и нагревали при 45°С в течение 14 дней. Реакционную смесь переносили к 10 мл пробирке и разбавляли посредством СH₂Cl₂ (2 мл). Органическую фазу промывали 10% лимонной кислотой (2 мл), насыщ. раствором NaHCO_3(водн.) (2 мл) и выпаривали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь 0,4% метанол/СH₂Cl₂, для выделения желаемого продукта.

Способ J

Данный способ представляет собой адаптирование способа, описанного Coperet, C. et al., в J. Org. Chem., 1998, 63, 1740-1741. Перекись водорода 30% (10 экв.) добавляли к раствору либо соответствующего соединения формулы I, либо формулы III (1 экв.) и триоксорения 2,5% мол. в CH₂Cl₂ (4× объема раствора перекиси водорода) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение ночи, по истечении указанного времени смесь разбавляли водой и перемешивали в течение еще 30 мин. По истечении указанного времени слой CH₂Cl₂ отделяли, и водный слой экстрагировали посредством CH₂Cl₂ (2×). Объединенные экстракты сушили и растворитель упаривали в вакууме с получением желаемого продукта, который очищали кристаллизацией или хроматографией по требованию.

Способ К

Соответствующий субстрат формулы I, где R₂ представляет собой 6-фторникотиноил или 6-хлорникотиноил, получали способом Н. К данному субстрату добавляли избыток соответствующего амина. В подходящем растворителе, таком как ТГФ или этанол, смесь нагревали в запаянном сосуде приблизительно до 150°С в течение 1-5 ч (или 60°С в течение 72 ч в случае, где нуклеофилом был гидразин). По истечении указанного времени, растворитель упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией или препаративной ВЭЖХ.

Способ L

Соответствующее фенольное соединение формулы III подвергали ацилированию способом Н. Затем гидролиз сложного эфира осуществляли путем растворения продукта в минимальном объеме метанола и обработки раствора избытком 1М раствора NaOH (водн.) при температуре окружающей среды. Затем реакционную смесь подкисляли, экстрагировали дихлорметаном и очищали флэш-хроматографией с получением фенольного соединения формулы I.

Если желательно, превращение полученного фенола в простой фениловый эфир осуществляли стандартными способами, известными в производстве, такими как способы, описанные в Vogel's Textbook of Practical Organic Chemistry by B.S.Furniss et al., Harlow, Longman Scientific & Technical, 1989 или Mitsunobu, O. Synthesis 1981, 1. Впоследствии, неочищенные продукты очищали флэш-хроматографией или препаративной ВЭЖХ.

Соединение 239

Соединение 239 получали из 9b-(4-гидроксифенил)-1,2,3,9b-тетрагидроимидазо[2,1-a]изоиндол-5-она способом L. Тетрагидроимидазоизоиндолон подвергали бис-ацилированию 4-фторбензоилхлоридом способом Н, и образовавшуюся функцию сложного эфира фенола преобразовывали в фенол путем гидролиза основанием. Затем продукт обрабатывали хлорацетонитрилом и К₂СО₃ в ацетоне и нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 30 ч с получением простого фенилового эфира соединения 239.

¹H ЯМР (300 МГц, d₆-ацетон) δ 3,28-3,38 (м, 1H), 3,91-3,97 (м, 1H), 4,09-4,27 (м, 2H), 5,12 (s, 2H), 7,08 (д, J=9,0 Гц, 2H), 7,17-7,26 (м, 2H), 7,30 (д, J=9,0 Гц, 2H), 7,61-7,71 (м, 4H), 7,79-7,82 (м, 1H), 8,05-8,08 (м, 1H).

Способ М

Данный способ включает нуклеофильное замещение R₂, когда радикал представляет собой 2-галогенэтаноил. Раствор или суспензию соответствующего соединения формулы I (R₂=COCH₂Br) (1 экв.) и соответствующего амина (3 экв.) оставляли при комнатной температуре в течение 3 дней. Смесь оставляли выпариваться досуха, остаток подвергали лиофилизации из 30% смеси ацетонитрил/вода и полученный неочищенный продукт очищали препаративной ВЭЖХ.

Способ N

Данный способ использовали для получения соединения 153.

Хлорид алюминия (2,88 моль) добавляли к перемешиваемой суспензии 3,4-пиридинангидрида (1,31 моль) в хлорбензоле (1,2 л) при комнатной температуре с получением суспензии оранжевого цвета и нагревали до 110°С в течение 5 ч. Смесь охлаждали и тщательно гидролизовали водой (2 л), нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 1 ч, фильтровали в горячем виде и сушили с получением твердого вещества коричневого цвета. Твердое вещество суспендировали в воде (3,5 л) и подщелачивали 10% раствором NaOH (350 мл). Образовавшийся раствор фильтровали, подкисляли до рН 3,1 посредством 2н. HCl. Образовавшийся осадок фильтровали и кипятили с обратным холодильником с этанолом (2 л) с получением твердого вещества белого цвета (67 г). Полученный продукт растворяли в 10% NaOH (400 мл), подкисляли до рН 6,3 посредством 2н. HCl и фильтровали с получением 3-(4-хлорбензоил)изоникотиновой кислоты (53 г) в виде твердого вещества белого цвета.

¹H ЯМР (400МГц, ДМСО-d₆) δ 7,59 (д, J=8,6 Гц, 2H), 7,68 (д, J=8,6 Гц, 2H), 7,88 (дд, J=0,7, 5,0 Гц, 1H), 8,74 (д, J=0,7 Гц, 1H), 8,93 (д, J=5,0 Гц, 1H), 13,9 (уш.с, 1H) м.д.

3-(4-Хлорбензоил)изоникотиновую кислоту (53 г) и этилендиамин (67,7 мл) в ксилолах (1,8 л) кипятили с обратным холодильником в течение 4 ч. Раствор фильтровали в горячем виде и фильтрат упаривали при пониженном давлении с получением твердого вещества (58 г). Полученный продукт перекристаллизовывали из этанола с получением соединения 153 в виде твердого вещества белого цвета (46,4 г).

¹H ЯМР (400МГц, CDCl₃) δ 2,12 (уш.с, 1H, NH), 3,19 (м, 1H), 3,21 (m, 1H), 3,71 (м, 1H), 3,83 (м, 1H), 7,36 (д, J=8,8 Гц, 2H), 7,63 (д, J=8,8 Гц, 2H), 7,66 (дд, J=1,1, 4,9 Гц, 1H), 8,64 (д, J=1,1 Гц, 1H), 8,79 (д, J=4,9 Гц, 1H) м.д.

Мс m/z ([M+H]⁺) 286

Описанные выше способы использовали для получения соединений, перечисленных в таблицах 1-3 ниже. Все соединения, приведенные в таблицах, были получены. В таблицах приведены ссылочный номер соединения, структура, наблюдаемая масса (не рассчитанная) и способ, используемый для получения соединения (основанный на соответственно различных исходных соединениях). Наблюдаемая масса для двух соединений, отмеченных^∗, не была включена.

Таблица 1:

Соединения формулы (III) (промежуточные соединения)

Таблица 2:

Соединения изобретения (формулы I, где А является арилом)

Таблица 3:

Соединения изобретения (формулы I, где А является гетероарилом)

Способ О: Разделение стереоизомеров хиральной хроматографией

Отобранные соединения изобретения могут быть разделены на отдельные стереоизомеры с помощью ВЭЖХ, используя хроматографические колонки с хиральной стационарной фазой. Например, следующие рацемические соединения были разделены на энантиомеры в описанных ниже условиях.

Колонка: Chirex 3014 (Chirex (S)-VAL и (R)-NEA)) 250×10,0 мм

Длина волны детектора: 220 нм

Разделение соединения 12

Подвижная фаза А: гексан

Подвижная фаза В: изопропанол

Скорость потока: 4 мл/мин.

Изократическое элюирование: 93% подвижной фазы А, 7% подвижной фазы В

Время разделения: 20 мин.

Температура колонки: 35°С

Впрыскиваемый объем: 20 мкл

Разделение соединения 188

Подвижная фаза А: гексан

Подвижная фаза В: изопропанол

Скорость потока: 4 мл/мин.

Изократическое элюирование: 93% подвижной фазы А, 7% подвижной фазы В

Время разделения: 26 мин.

Температура колонки: 35°С

Впрыскиваемый объем: 15 мкл

Разделение соединения 306

Подвижная фаза А: гексан

Подвижная фаза В: этанол

Скорость потока: 4 мл/мин.

Температура колонки: 25°С

Впрыскиваемый объем: 20 мкл

Схема градиента:

Разделение соединения 336

Подвижная фаза А: гексан

Подвижная фаза В: изопропанол

Скорость потока: 4 мл/мин.

Изократическое элюирование: 93% подвижной фазы А, 7% подвижной фазы В

Время разделения: 50 мин.

Температура колонки: 35°С

Впрыскиваемый объем: 25 мкл

Разделение соединения 352

Подвижная фаза А: гексан

Подвижная фаза В: этанол

Скорость потока: 4 мл/мин.

Температура колонки: 25°С

Впрыскиваемый объем: 15 мкл

Схема градиента:

Разделение соединения 363

Подвижная фаза А: гексан

Подвижная фаза В: изопропанол

Скорость потока: 4 мл/мин.

Температура колонки: 50°С

Впрыскиваемый объем: 15 мкл

Схема градиента:

Разделение соединения 368

Подвижная фаза А: гексан

Подвижная фаза В: этанол

Скорость потока: 4 мл/мин.

Температура колонки: 25°С

Впрыскиваемый объем: 15 мкл

Схема градиента:

Разделение соединения 381

Подвижная фаза А: гексан

Подвижная фаза В: этанол

Скорость потока: 4 мл/мин.

Температура колонки: 30°С

Впрыскиваемый объем: 20 мкл

Схема градиента:

Разделение соединения 414

Подвижная фаза А: гексан

Подвижная фаза В: этанол

Скорость потока: 4 мл/мин.

Изократическое элюирование: 92% подвижной фазы А, 8% подвижной фазы В

Время разделения: 25 мин.

Температура колонки: 40°С

Впрыскиваемый объем: 20 мкл

Колонка: Chiracel OD-H (250 мм×4,6 мм)

Изократическое элюирование: гексан:этанол (70:30)

Длина волны детектора: 254 нм

Скорость потока: 0,7 мл/мин.

Впрыскиваемый объем: 20 мкл

Температура колонки: 25°С

Способ Р: Разрешение соединений типа III посредством образования диастереомерной соли

Смесь соединения 153 (1,0 г, 3,5 ммоль) и гидрофосфата (R)-(-)-1,1'-бинафтил-2,2'-диила (0,85 г, 2,44 ммоль, 0,7 экв.) в этаноле (90 мл) кипятили с обратным холодильником до тех пор, пока не образовывался прозрачный раствор. Через 15 минут, смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры в течение 1 ч. и затем продолжали перемешивать при охлаждении льдом в течение 1,5 ч. Белую кристаллическую соль отфильтровывали, промывали этанолом (5 мл) и сушили в вакууме в течение 30 минут с получением 1,09 г соли.

Белую соль суспендировали в воде (25 мл) и подщелачивали 10% раствором NaOH (0,7 мл) до рН 11. Водную фазу экстрагировали этилацетатом (100 мл, затем 2×75 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO₄) и концентрировали с получением соединения 153В (0,49 г) в виде порошка белого цвета.

Гидрофосфат (R)-(-)-1,1'-бинафтил-2,2'-диила извлекали из подкисленного водного слоя (рН 2) путем экстракции этилацетатом (2×100 мл). Объединенные органические фазы промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO₄) и концентрировали с получением порошка белого цвета (0,54 г).

Анализ активности против вируса РСВ

Способ Q: Протокол анализа активности против вируса РСВ

Соединения изобретения исследовали относительно их активности против респираторно-синцитиального вируса. Анализ цитопатического эффекта (СРЕ) осуществляли, по существу, как описано в литературе (см., например, Watanabe et al., J. Virological Methods, 1994, 48, 257). Серийные разбавления тестируемых соединений были сделаны в среде для анализа. Клетки НЕр2 (1,0×10⁴ клеток/лунка) инфицировали вирусом РСВ при низкой множественности заражения (например, РСВ А2 при moi, равной 0,01), и 100 мкл добавляли к культурам, которые оценивали в отношении противовирусной активности, и клетки без вируса добавляли к клеткам, у которых определяли цитотоксичность соединения. Анализируемые образцы инкубировали в течение приблизительно 5 дней при 37°С в атмосфере 5% СО₂. Степень СРЕ определяли посредством метаболизма жизнеспособного красителя 3-(4,5-диметилтиаксол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолийбромида (МТТ). Приготовляли исходный раствор МТТ 3 мг/мл в среде для анализа и 100 мкл добавляли к каждой лунке, доводя конечную концентрацию МТТ до 1 мг/мл. После 2 часов инкубации при 37°С, раствор среда-МТТ удаляли и 200 мкл изопропанола добавляли, чтобы растворить кристаллы жизнеспособного красителя. Планшеты перемешивали встряхиванием и поглощение измеряли при 540 нм. Концентрации соединения, которые приводили к ингибированию СРЕ на 50% (ЕС50) и проявлению цитотоксичности (СС50), рассчитывали с помощью Excel программы аппроксимации кривой.

Характерные данные для соединений изобретения относительно активности против РСВ А2 приведены в таблицах 6-8, где ЕС50 находится в области А: <100 нг/мл, В: 100-250 нг/мл и С: 250-1000 нг/мл.

Способ R: Анализ слияния РСВ

Отобранные соединения изобретения испытывали на их способность ингибировать важнейшие процессы слияния респираторно-синцитиального вируса.

Произведение РСВ-F конструкций

Одноцепочечные синтетические ДНК-олигонуклеотиды, кодирующие части F-гликопротеина вируса РСВ А2, включающие в себя оптимальные кодоны и без возможного добавления поли(А) или участков сплайсинга, получали синтетическими способами (Mason et al., международная публикация WO0242326). Закрепленный в мембране полноразмерный гликопротеин F получали, по существу, способом, описанным в настоящем описании и в публикации Morton et al., Virology, 2003, 311, 275.

Анализ образования синцития

Слияние РСВ-F конструкций измеряли в клетках 293, по существу, способом, описанным Morton et al., в Virology, 2003, 311, 275. Например: клетки в шестилуночных планшетах при приблизительно 80% конфлюэнтности трансфицировали путем добавления плазмидной ДНК (2 мкг/лунка), несущей представляющие интерес конструкции, в растворе СаРО₄ в течение 4 часов. После шока глицерином и промывки, тренсфицированные клетки обрабатывали трипсином и 1,5×10⁴ клеток/лунка добавляли к 96-луночным планшетам, содержащим полу-логарифмические серийные разбавления тестируемого соединения. Образование синцития оценивали путем визуальной проверки и определяли количественно при 48 часах после трансфекции путем добавления 20 мкл раствора CellTiter One Solution (Promega) с последующей инкубацией в течение 4 часов при 37°С. Реакцию окрашивания затем останавливали путем добавления 25 мкл 10% SDS к каждой лунке, и поглощение измеряли при 492 нм. Концентрацию соединения, которая снижала поглощение относительно необработанных контрольных культур на 50% (ЕС50), рассчитывали с помощью Excel программы аппроксимации кривой.

Характерные данные для соединений изобретения приведены в таблице 9, где величины ЕС50 находятся в области А: <750 нг/мл, В: 750-1500 нг/мл и С: 1500-2250 нг/мл.

Способ S: Модель вируса РСВ хлопкового хомяка

Модель хлопкового хомяка получали, как описано в литературе (Wyde et al., Antiviral. Res. 2003, 60. 221). Кратко, хлопковых хомяков, весящих 50-100 г, анестезировали незначительно изофлураном и дозировали перорально посредством 100 мг/кг/день соединения или контрольного носителя. Вирусное заражение последовало через 2 часа после обработки подобным образом анестезированных крыс путем интраназального вкапывания посредством приблизительно 1000 TCID50 вируса РСВ А2 на животное. Через четыре дня после вирусной инокуляции, каждого хлопкового хомяка убивали и удаляли легкие и определяли титры РСВ анализом бляшкообразования.

Метод Т: Модель вируса РСВ мыши Balb/c

Модель мыши была получена, по существу, как описано Cianci et al (Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 2004, 48, 413). Кратко, восьминедельных самок крыс Balb/c взвешивали, внутрибрюшинно анестезировали посредством Avertin^TM, и соединение или носитель вводили перорально за 6 часов до предварительного заражения. Мышам интраназально вводили приблизительно 10000 TCID50 вируса РСВ А2 на животное. Через три дня после вирусной инокуляции, каждую мышь умерщвляли и легкие удаляли и определяли титры РСВ анализом бляшкообразования.

Специалистам в данной области следует признать, что многочисленные вариации и/или модификации могут быть сделаны к изобретению, как показано с помощью отдельных вариантов осуществления изобретения, без отклонения от сущности и объема изобретения, широко описанных в настоящем описании. Поэтому, варианты осуществления настоящего изобретения рассматриваются во всех отношениях как иллюстративные и неограничивающие объем изобретения.

По всему описанию и формуле изобретения, которая следует ниже, если по контексту не требуется иного, слово “включать” и вариации, такие как “содержит” и “включение”, следует понимать как включение установленного целого числа или шага или группы целых чисел или шагов, но не исключение любого другого целого числа или шага или группы целых чисел или шагов.

Ссылка на какой-либо предшествующий уровень техники в данном описании не следует рассматривать, как признание или любую форму или предположение того, что такой предшествующий уровень техники является частью общего знания в Австралии.

Реферат

Изобретение относится к соединениям формулы (I) ! ! где значения заместителей раскрыты в формуле изобретения. Предложенные соединения могут быть применены для лечения инфекций, вызванных вирусами подсемейства Pneumovirinae (RSV, РСВ). 24 н. и 29 з.п. ф-лы, 3 табл.

Формула

1. Соединение формулы I

его фармацевтически приемлемые соли или его фармацевтически приемлемые N-оксиды, где
А вместе с атомами, к которым она присоединена, образует необязательно замещенное фенильное, необязательно замещенное пиридильное, необязательно замещенное пиридазильное или необязательно замещенное пиразинильное кольцо, где необязательные заместители выбирают от 1 до 3 заместителей, выбранных из галогена, C_1-6алкила, галогенС_1-6алкила, гидрокси, C_1-6алкокси, нитро, амино, C_1-6алкиламино, карбокси, карбоксамидо, пиридила, фенила, необязательно замещенного C_1-6алкилом или галогенС_1-6алкилом, и бензила, и где атомы азота азотсодержащих колец могут быть в N-оксидной форме, и дополнительно когда А представляет собой пиридильное кольцо, кольцо может быть в форме соли пиридиния;
В-С является необязательно замещенной связью формулы -CH₂-(CH₂)_z-, где z равно 1-4, и необязательные заместители выбирают из галогена, C_1-6алкил, гидрокси, C_1-6алкокси, фенил и бензил;
R₁ выбирают из -(CH₂)_n С_5-10арила, -(CH₂)_n С_5-10арилС_1-12алкила и
-(CH₂)_nгетероциклила; n равно 0-6, и где С_5-10арильная и гетероциклильная группы необязательно замещены галогеном, гидрокси, нитро, -NR'R" (где R' и R" независимо выбирают из водорода, C_1-6алкила и -C(O)R, где R является C_1-6алкилом, C_1-6алкилфенилом, необязательно замещенным ОСН₃, фенилом или гетероциклилом), С_1-12алкилом, фенилом, гетероциклилом, необязательно замещенным бензилом или -O-R_a, где R' и R" независимо выбирают из водорода, C_1-6алкила и -C(O)R, где R является C_1-6алкилом, C_1-6алкилфенилом, необязательно замещенным ОСН₃, фенилом или гетероциклилом; R_a является -С_1-12алкилом, -С_3-7циклоалкилом,
-C_1-12алкилС_3-7циклоалкилом, фенилом, -С_1-12алкилфенилом, -(CH₂)_0-1C (=O) C_1-6алкилом, -(CH₂)_1-6-гетероциклилом, С (=O)-фенилом или С(=O)-гетероциклилом; и алкильная, фенильная или R_a группы необязательно замещены галогеном, -CN, C_1-6алкилом, C_1-6алкокси, -NR' "R"', -CO₂R' " или -CONR'"R"', где каждый R'" независимо выбирают из водорода или C_1-6алкила;
R₂ выбирают из -CH₂R₃, -С(Y)R₃, -С(Y)N(R₄)R₃, -С(Y)CH₂N(R₄)R₃ и -С(Y)CH₂SR₃, где R₃ выбирают из водорода, С_1-12алкила, С_2-12алкенила,
-(CH₂)_mС_3-7циклоалкила, -(CH₂)_mС_5-10арила, -(CH₂)_mС_5-10арилС_1-12алкила и
-(CH₂)_mгетероциклила, и когда R₂ является -CH₂R₃ или -С(Y)R₃, тогда радикал R₃ дополнительно выбирают из -O-R₅, и R₅ является C_1-6алкилом, С_2-6алкенилом, С_2-6алкинилом, С_3-7циклоалкилом, С_3-7циклоалкенилом, бензилом, С_5-10арилом или гетероциклилом; m равно 0-4, R₄ является водородом; и алкильная, алкенильная, циклоалкильная, арильная и гетероциклильная группы необязательно замещены, где необязательные заместители выбирают из галогена, галогенС_1-6алкила, С_1-6алкила, гидрокси, C_1-6алкокси, O-галогенC_1-6алкокси, С_2-6алкенила, С_2-6алкинила, необязательно замещенного фенилом, меркапто, S-C_1-6алкила, трифторметила, амино, нитро, циано, моноC_1-6алкиламино, необязательно замещенного ОН или NH₂, моноС_3-7циклоалкиламино, ди (C₁-₆алкил) амино, С (=O) C_1-6алкила, CO₂H, С(=O)ОC_1-6алкила, ОС(=O)C_1-6алкила, C(=O)NH₂, NHC(=O) C_1-6алкила, SO₂C_1-6алкила, SO₂N (C_1-6алкил)₂, фенила, O-фенила, S-фенила, бензила, O-бензила, и гетероциклила, необязательно замещенного C_1-6алкилом, и где любая фенильная группа, необязательно замещена галогеном, ОСН₃, нитро или C_1-6алкилом; при условии, что R₂ не является незамещенным С_1-12алкилом;
Х представляет собой О, и Y выбирают из О или S;
где любая гетероциклильная группа содержит один или несколько гетероатомов, выбранных из N, S и О, и представляет собой 5-членный моноциклический гетероциклил, 6-членный моноциклический гетероциклил, 9-членный бициклический гетероциклил или 10-членный бициклический гетероциклил;
где любая необязательно замещенная неароматическая карбоциклическая или гетероциклическая группа необязательно замещена одной или двумя =O-группами; и
при условии, что когда А является фенилом и R₁ является 4-хлорфенилом или незамещенным фенилом
(i) R₃ не является незамещенным циклопропилом, галогенметилом, незамещенным С₃-алкенилом, незамещенным фенилом или фенилом только с галогеном, -СН₃ и/или
-ОСН₃ заместителями, когда R₂ является СОR₃;
(ii) R₃ не является незамещенным фенилом или фенилом только с галогеном, -СН₃,
-ОСН₃ и/или -С(O)ОCH₂СН₃ заместителями, когда R₂ является C(O)NHR₃;
(iii) R₃ не является незамещенным фенилом или фенилом только с галогеном, -СН₃,
-ОСН₃ и/или -С(O)ОCH₂СН₃ заместителями, когда R₂ является C(S)NHR₃;
(iv) когда А является фенилом и R₂ является CH₂R₃, R₃ не является водородом, незамещенным фенилом, незамещенным C_1-6алкилом или C_1-6алкилом, замещенным только ОН, NH₂, моно- или ди-C_1-6алкиламиногруппами;
(v) когда А является фенилом и R₁ является 4-метоксифенилом, R₂ не является СНО;
(vi) когда А является фенилом и R₁ является фенилом, необязательно замещенным только галогеном, C_1-6алкилом и/или C_1-6алкокси, и R₂ является СОR₃, R₃ не является метилом, замещенным одним или несколькими заместителями, выбранными из C_1-6алкила, галогена, N-пиперидинила, N-морфолинила, N-метилпиперазинила и NR'R", где R' и R" каждый независимо выбирают из Н, C_1-6алкила и гидроксиэтила;
(vii) когда А является фенилом и R₁ является 3-СН₃,4-СН₃CH₂CH₂NHС(O)CH₂O-фенилом, R₂ не является -СНО, -СОCH₂СН₃, CH₂CH₂OH, -CH₂CH₂OCН₃ или C_1-6алкилом;
(viii) когда А является пиридилом и R₁ является 3-СН_3,4-СН₃СH₂CH₂NHС (О) CH₂О-фенилом, R₂ не является -СН₃.

21. Соединение по п.1, представленное формулой IV

его фармацевтически приемлемые соли, фармацевтически приемлемый N-оксид, или его пиридиниевая соль.

23. Соединение формулы

и его соль, где
пиридильное кольцо необязательно замещено, где необязательные заместители выбраны из 1 до 3 заместителей, выбранных из галогена, C_1-6алкила, галогенC_1-6алкила, гидроксила, C_1-6алкокси, нитро, амино, C_1-6алкиламино, карбокси, карбоксамидо, пиридила, фенила, необязательно замещенного C_1-6алкилом или галогенC_1-6алкилом, и бензила и включают N-оксидные формы атома азота азотсодержащих колец;
В-С является необязательно замещенным линкером формулы -СН₃-(CH₂)_z, где z равно 1-4, и необязательные заместители выбраны из галогена, C_1-6алкила, гидрокси, C_1-6алкокси, фенила и бензила;
R₁ выбирают из -(CH₂)_n С_5-10арила, -(CH₂)_n С_5-10арилС_1-12алкила и (СН₃)_nгетероциклила; n равно 0-6; и где С_5-10арильная и гетероциклильная группы необязательно замещены галогеном, гидрокси, нитро, -NR'R" (где R' и R" независимо выбирают из водорода, C_1-6алкила и -C(O)R, где R является C_1-6алкилом, C_1-6алкилфенилом, необязательно замещенным ОСН₃, фенилом или гетероциклилом), С_1-6алкилом, фенилом, гетероциклилом, необязательно замещенным бензилом и -O-R_a, где R' и R" независимо выбирают из водорода, C_1-6алкила и -C(O)R, где R является C_1-6алкилом, C_1-6алкилфенилом, необязательно замещенным ОСН₃, фенилом или гетероциклилом; R_a является -С_1-12алкилoм, -С_3-7циклоалкилом, -C_1-12алкилС₃-₇циклоалкилом, фенилом, -С_1-12алкилфенилом, -(CH₂)_0-1C (=O) C_1-6алкилом, -(СН₃)_1-6-гетероциклилом, С (=O)-фенилом или С(=O)-гетероциклилом, и алкильная, фенильная или R_a группы необязательно замещены галогеном, -CN, C_1-6алкилом, C_1-6алкокси, -NR'"R"', -CO₂R'" или -CONR'"R"', где каждый R'" независимо выбирают из водорода или C_1-6алкила;
Х представляет собой О, и Y выбирают из О или S;
где любая гетероциклильная группа содержит один или несколько гетероатомов, выбранных из N, S и О, и представляет собой 5-членный моноциклический гетероцикл, 6-членный моноциклический гетероцикл, 9-членный бициклический гетероцикл или 10-членный бициклический гетероцикл;
где любая необязательно замещенная неароматическая карбоциклическая или гетероциклическая группа необязательно замещена одной или двумя =O-группами; и
при условии, что когда -В-С- является -CH₂СН(СН(СН₃)₂)-, R₁ не является 3-СН_3,4-CH₃CH₂CH₂NHC (О) CH₂O-фенилом-.

27. Соединение формулы

и его соль, где конденсированное пиридазинильное кольцо необязательно замещено, как определено в п.23, и R₁ и Х определены в п.23, при условии, что R₁ не является фенилом, 4-хлорфенилом или 4-метоксифенилом.

28. Соединение любой одной из формул

и его соль, где конденсированное пиридильное, пиразинильное, пиридазинильное или пиримидинильное кольцо необязательно замещено, как определено в п.23, и R₁ и Х определены в п.23.

29. Применение соединения формулы III

и его соли, где R₁, кольцо А, -В-С- и Х определены в п.1, в качестве промежуточного продукта для получения соединения формулы I по п.1.

34. Энантиомер соединения, выбранного из группы, состоящей из

и

35. Соединение формулы

36. Соединение формулы

37. Соединение формулы

38. Соединение формулы

39. Соединение формулы

40. Соединение формулы

41. Соединение формулы

42. Соединение формулы

43. Соединение формулы

47. Применение соединения формулы I

или его фармацевтически приемлемой соли или N-оксида по любому из пп.1-22 для лечения инфекций, вызванных респираторно-синцитиальным вирусом (RSV).