Средство для лечения коронавирусных, ретровирусных инфекций и гепатита с - RU2738719C1

Описание

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а более конкретно – к фармакологии, и может использоваться для лечения вирусных инфекций, вызванных РНК-содержащими вирусами, имеющими липидную оболочку, в частности коронавирусных инфекций, СПИДа, гепатита С и пр. Изобретение расширяет арсенал средств заявленного назначения.

Известно средство для лечения гепатита С (см. патент РФ № 2244554 по кл. МПК А61K 35/78, опуб. 20.01.2005), содержащее экстракт бересты с содержанием бетулина более 70% и фармацевтически приемлемый носитель. Препарат вводят пациенту перорально.

Поскольку средство представляет собой препарат растительного происхождения и является многокомпонентной системой, которая может не только стимулировать защиту от вирусов, но и изменять гомеостаз организма человека и животных, вызывая аллергические реакции на компоненты препарата у потенциальных аллергиков, беременных и кормящих женщин. Следует отметить, что взаимодействие Бетулина с другими лекарственными средствами не установлено, однако и не исключено.

Известна композиция из высокоочищенного экстракта дрожжевой РНК, имеющей по массе не менее 75% фрагментов 25±10 нуклеотидов, с чистотой предпочтительно, по меньшей мере, 99%, в сочетании с маннитом в пропорции по весу от 2:1 до 3:1 (см. патент РФ № 2597150 по кл. МПК А61K 31/7105, опубл. 10.09.2016), при этом экстракт дрожжевой РНК составляет не менее 50% от веса композиции. Композиция предназначена для лечения вирусных заболеваний, вызываемых вирусами семейств Orthomyxoviridae, Paramyxovirus, Hepatitis, семейства Herpesviridae, энтеровирусами и аденовирусами. Кроме того, модифицированная дрожжевая РНК способна ингибировать размножение вирусов гриппа, вируса гепатита С, генитального герпеса, вируса иммунодефицита человека, вируса Коксаки В.

Однако данный препарат не может полностью излечить от всех указанных вирусов, а может только снизить вирусную нагрузку, например при вирусном гепатите С. К тому же такое серьезное вмешательство в РНК не может не влиять на гомеостаз организма.

Известна композиция для лечения тяжелых форм вирусных инфекций в виде таблеток (см. 2559179 по кл. МПК А61K 9/10, опубл. 10.08.2015), содержащая рекомбинантный интерферон, выбранный из группы: рекомбинантный интерферон-альфа, рекомбинантный интерферон-бета, рекомбинантный интерферон-гамма; антиоксиданты, выбранные из группы: мексидол, эмоксипин, дибунол, альфа-липоевая кислота, карнитина хлорид; аминокислоты, выбранные из группы: ацетилцистеин, цистеин, лизин, аргинин; регенеранты анаболического действия, выбранные из группы: калия оротат, рибоксин, метилурацил, а также формообразующую основу.

Однако при использовании такого сложносоставного препарата имеются ограничения. Препарат следует с осторожностью применять при заболеваниях печени, тяжелых депрессивных заболеваниях и/или при суицидальных мыслях в анамнезе, при эпилепсии и беременности. Необходимо соблюдать осторожность при лечении препаратом пациентов, получающих противосудорожные средства, пациентов с сердечной недостаточностью III–IV стадии по классификации NYHA и у больных с кардиомиопатией, с нарушениями функции костного мозга, анемией или тромбоцитопенией.

Известно антисептическое средство против гриппа (см. патент РФ № 2355391 по кл. МПК A61K 31/045, опубл. 20.05.2009), содержащее катионное поверхностно-активное вещество, низкомолекулярный гликоль или глицерин, соль аммония и конституенс, карбамид, а в качестве соли аммония дополнительно - азотнокислый аммоний, при определенном соотношении компонентов. В качестве катионного поверхностно-активного вещества используют дидецилдиметиламмоний бромид, или дидецилдиметиламмоний хлорид. В качестве низкомолекулярного гликоля используют триэтиленгликоль, или 1,2-пропиленгликоль, или полипропиленгликоль. В качестве конституенса содержит воду, или 8-20%-ный водный раствор этилового или изопропилового спирта. Изобретение обеспечивает повышение биоцидной активности целевого продукта при длительном хранении, расширение спектра действия, снижение раздражающих свойств и токсичности.

Однако это средство может использоваться только для уничтожения вирусов, находящихся вне организма. И это средство не предполагается для лечения вирусных заболеваний.

Наиболее близким к заявляемому является средство для профилактики и лечения вирусных инфекций, вызываемых РНК-содержащими вирусами, предпочтительно вирусами гриппа А или риновирусами (см. патент РФ № 2524304 по кл. МПК А61М 15/00, опубл. 27.07.2014). Средство содержит в качестве активной части соль о-ацетилсалициловой кислоты, а в качестве целевой добавки - аминокислоту, выбранную из группы, включающей лизин, аргинин, орнитин, диаминомасляную кислоту. Средство предназначено для аэрозольного введения путём ингаляций через нос или рот.

Основным недостатком данного средства является то, что применение ацетилсалициловой кислоты может вызывать сильное раздражение дыхательных путей. И даже снижение такой возможности при помощи комплекса соли о-ацетилсалициловой кислоты с аминокислотой, полностью не исключают возможности аллергических реакций.

Большой риск при применения данной композиции существует у людей в анамнезе которых есть указания на крапивницу, ринит, вызванные приемом ацетилсалициловой кислоты и других НПВС, гемофилия, геморрагический диатез, гипопротромбинемия, расслаивающая аневризма аорты, портальная гипертензия, дефицит витамина K, печеночная и/или почечная недостаточность, дефицит глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, синдром Рейе, детский возраст (до 15 лет - риск развития синдрома Рейе у детей с гипертермией на фоне вирусных заболеваний), повышенная чувствительность к ацетилсалициловой кислоте и другим салицилатам.

Ацетилсалициловая кислота даже в небольших дозах уменьшает выведение мочевой кислоты из организма, что может стать причиной острого приступа подагры у предрасположенных пациентов.

Следует отметить, что ацетилсалициловая кислота часто вступает в лекарственное взаимодействие с другими препаратами, например с блокаторами кальциевых каналов, средствами, ограничивающими поступление кальция или увеличивающими выведение кальция из организма или при одновременном применении снижается эффективность диуретиков (спиронолактона, фуросемида) и т.д.

Приведенные аналоги показывают, что создание противовирусных средств является далеко не решенной задачей. Поэтому поиск новых средств защиты от вирусных инфекций весьма актуален.

Технической проблемой заявляемого изобретения является создание эффективного инъекционного средства для лечения инфекций, вызванных РНК-содержащими вирусами человека и животных и расширение арсенала фармацевтических средств против указанных инфекций.

Техническим результатом является создание средства, обладающего внутриклеточным антисептическим действием, активизирующим выработку эндогенного муравьиного альдегида в организме человека и животных при отсутствии побочных эффектов и токсического действия.

Техническая проблема и заявляемый результат достигаются тем, что средство для лечения вирусных инфекций, вызванных РНК-содержащими вирусами, содержащее активную часть химического происхождения и целевую добавку, согласно изобретению, в качестве активной части оно содержит водный раствор муравьиного альдегида 36,5-37,5%-ной концентрации, а в качестве целевой добавки – изотонический раствор натрия хлорида для инъекций 0,85-0,95%-ной концентрации при следующем соотношении компонентов, мас.%:

водный раствор муравьиного альдегида 36,5-37,5% - 0,073-0,075

изотонический раствор натрия хлорида для инъекций 0,85-0,95% - остальное.

В известных авторам источниках патентной и научно-технической информации не описано средства для лечения вирусных инфекций, вызванных РНК-содержащими вирусами, в частности, коронавирусных инфекций, СПИДа, гепатита С человека и животных на основе активизации выработки внутриклеточного эндогенного муравьиного альдегида. При этом его новая функция и предлагаемое назначение не вытекают с очевидностью из его ранее известных свойств.

В настоящее время не существует универсального антисептического препарата, который мог бы уничтожать возбудителей инфекционных заболеваний (вирусов) внутри клеток организма человека и животных без негативного влияния на гомеостаз. Существующие антисептические средства применяются, как правило, для инактивации патогенов во внешней среде.

Большой интерес вызывает муравьиный альдегид (формальдегид) - одно из простейших соединений в природе. Это вещество относят к асептическим средствам химической природы (органическим соединениям) для уничтожения возбудителей инфекционных заболеваний во внешней среде, как химический консервант для клеток и ткани в гистологии и патологической анатомии.

В настоящее время установлено, что в живых организмах имеется эндогенный формальдегид, который является естественным метаболитом и участвует во многих биохимических реакциях организма. Концентрация эндогенного формальдегида может достигать 0,2-0,5 мМ, и его содержание в крови 0,05-0,1 мМ (M. Casanova, H. D. Heck, J. I. Everitt, W. W. Harrington, J. A. Popp. Formaldehyde concentrations in the blood of Rhesus monkeys after inhalation exposure // Food Chem. Toxicol. Int. J. Publ. Br. Ind. Biol. Res. Assoc. 1988, 26,715; X. Song, X. Han, F. Yu, J. Zhang, L. Chen, C. Lv, A reversible fluorescent probe based on C[double bond, length as m-dash]N isomerization for the selective detection of formaldehyde in living cells and in vivo.//The Analyst 2018,143, 429; Human Endogenous Formaldehyde as an Anticancer Metabolite: Its Oxidation Downregulation May Be a Means of Improving Therapy Yuri L. Dorokhov Ekaterina V. Sheshukova Tatiana E. Bialik Tatiana V. Komarova //BioEssays 2018, 1800136). Известно, что формальдегид легко проникает во все клетки и легко удаляется при превышении концентрации его физиологической нормы. Физиологический уровень формальдегида в организме постоянно поддерживается за счет непрерывного действия клеточных ферментов, окисляющих формальдегид в трех отдельных путях с участием P450 монооксигеназ, митохондриальной АлДГ2 и с участием гена, кодирующего ADH5, или формальдегиддегидрогеназы (Dorokhov Y. L. Metabolic methanol: molecular pathways and physiological role //Physiol. Rev. 2015. 95(2), 603-644; Yuri L. Dorokhov Ekaterina V. Sheshukova Tatiana E. Bialik Tatiana V. Komarova Human Endogenous Formaldehyde as an Anticancer Metabolite: Its Oxidation Downregulation May Be a Means of Improving Therapy //BioEssays 2018, 1800136). Формальдегид образуется в печени при действии микросомальной диметилазы, при биотрансформации дигалоидпроизводных метана и метилметакрилата (Малютина Н.Н., Тараненко Л.А. Патофизиологические и клинические аспекты воздействия метанола и формальдегида на организм человека // Современные проблемы науки и образования. – 2014. – № 2.; URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=12826 (дата обращения: 17.03.2020)). Формальдегид используется организмом для синтеза тимидиновых, пуриновых и других кислот, образуется при разрушении серина и в меньшей степени других аминокислот. При попадании в кровь через ряд ферментативных превращений в печени окисляется до муравьиной кислоты, одновременно в печени образуется метиловый спирт. Далее муравьиная кислота метаболизируется под действием формиатдегидрогеназы до СО₂ или вовлекается в систему тетрагидрофолиевой кислоты в обмен одноуглеродных остатков. Формальдегид легко взаимодействует с белками, аминами, амидами, нуклеопротеидами, нуклеиновыми кислотами (Малютина Н.Н., Тараненко Л.А. Патофизиологические и клинические аспекты воздействия метанола и формальдегида на организм человека // Современные проблемы науки и образования. – 2014. – № 2.; URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=12826 (дата обращения: 17.03.2020)).

Он обнаруживается во всех внутренних жидкостях человека и животных в небольших количествах и только в моче его на 20% больше, чем, например, в крови, что указывает на основной способ его выведения из организма.

Исследования показали, что низкие концентрации формальдегида (например, 10 ммоль/л) способствуют пролиферации клеток HeLa. Однако, когда концентрация формальдегида достигает 62,5 ммоль/л, он ингибирует рост клеток.

Определенная концентрация формальдегида в организме важна для жизнедеятельности клеток, так как эндогенный формальдегид является важным метаболитом, однако, в случае сильного повышения концентрации, он может действовать и как генотоксин (Richard J. Hopkinson, Christopher J. Schofield. Deciphering Functions of Intracellular Formaldehyde: Linking Cancer and Aldehyde Metabolism// Biochemistry 2018, 57, 6, 904-906).

На примере вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней, который относится к коронавирусам, установлено, что формалин инактивирует вирус в концентрации 0,01% (Stepanek J., Mensik J., Pospisil Z.,Rozkony V. Vlev formalinu a betapropiolaktonuna infekcnost a antigenicitu puvodce virovegastroenterit du prasat (VGR). // Veter. Med. (CSSR). – 1973. – V. 18. -#5. – P. 269-280). Под действием формалина при 37ºС этот вирус теряет свою патогенность уже через 150 минут (Bohl E.H. Transmissible gastroenteritis virus (classical enteric variant). // Virus Infec. Procines. Amsterdam ect. – 1989. – P. 139-153). Другие коронавирусы (вирусы гепатита мышей, инфекционного бронхита кур, инфекционного перитонита кошек, вирусы гастроэнтерита и респираторных инфекций у крупного рогатого скота, гастроэнтерита человека и др.) также чувствительны к формальдегиду.

Разработанный препарат представляет собой раствор муравьиного альдегида в изотоническом водном растворе хлорида натрия, полученный по оригинальной технологии с использованием методов приготовления препаратов, активная составляющая которых растворена в носителе в сверхмалой дозе и используемая концентрация не вызывает токсического эффекта у нормальных клеток

Препарат оказывает комплексное воздействие на организм и способствует поддержанию гомеостаза. Он относится к новому классу препаратов, способствующих активации антигенспецифического иммунного ответа, при развитии которого достигается полная элиминация инфекционного агента из организма.

По нашему мнению, парентеральное введение экзогенного муравьиного альдегида (формальдегида) приводит к увеличению его концентрации в лимфе и крови человека. Это, в свою очередь, нарушает отток формальдегида из клеток организма в межклеточное пространство, что приводит к повышению его количества внутри клеток в соответствии с одним из правил Ле Шателье-Брауна, которое гласит, что при повышении концентрации одного из продуктов реакции равновесие сдвигается в направлении образования исходных веществ (влево). Благодаря этому происходит инактивация вирусов внутри клеток.

Водный раствор муравьиного альдегида - прозрачная бесцветная жидкость со своеобразным острым запахом, смешивающаяся с водой и спиртом во всех соотношениях.

Муравьиный альдегид - представитель класса альдегидов НСОН. Представляет собой бесцветный газ с резким запахом, мол, массой 30,03, плотность его при 20°С равна 0,815, температура плавления 92°С, температура кипения 19,2°С. Хорошо растворим в воде, спирте.

Изотонический раствор натрия хлорида для инъекций - бесцветная прозрачная жидкость солоноватого вкуса. Раствор стерилен, апирогенен.

Хлорид натрия - кубические кристаллы или белый кристаллический порошок соленого вкуса, без запаха. Растворим в воде (1:3).

Заявляемое средство представляет собой прозрачную бесцветную жидкость без запаха слегка солоноватого вкуса.

Средство готовят следующим образом.

Берут 2 весовых части 36,5-37,5%-ного медицинского раствора муравьиного альдегида, добавляют его в 998 весовых частей стерильного 0,85-0,95%-ного раствора хлорида натрия для инъекций до получения 0,073-0,075%-ного раствора альдегида. Средство хранят в темном месте при температуре 15-35°С.

Пример 1. Берут 0,2 мл 37%-ного медицинского раствора муравьиного альдегида, добавляют его в 99,8 мл стерильного 0,9%-ного (или 0,95%-ного) изотонического раствора хлорида натрия. Смесь растворов тщательно перемешивают. Конечная концентрация муравьиного альдегида в полученном средстве будет составлять 0,074 мас.%.

Пример 2. Берут 0,2 мл 36,5%-ного медицинского раствора муравьиного альдегида, добавляют его в 99,8 мл стерильного 0,9%-ного (или 0,95%-ного) изотонического раствора хлорида натрия. Смесь растворов тщательно перемешивают. Конечная концентрация муравьиного альдегида в полученном средстве будет равна 0,073 мас.%.

С лечебной целью средство вводят внутримышечно по 5 мл в одной инъекции, при этом схемы введения могут быть различными. А именно:

- по первой схеме средство вводят дважды: на 1 и 7 сутки после первого введения;

- по второй схеме – также дважды, но с интервалом один месяц;

- по третьей схеме – на 1-й, 2-й, 3-й и 10-й день после первого введения;

- по четвёртой схеме средство вводят 3 раза с интервалом между каждой инъекцией 12 часов, затем через 1-2 суток вводят ещё 5 раз с интервалом между каждой инъекцией 12 часов. Затем через сутки после последней инъекции препарат вводят однократно, затем через трое суток осуществляют повторное однократное введение, после чего проводят завершающую однократную инъекцию через пять суток после последнего введения;

- по пятой схеме – 1 раз в день в течение семи дней.

Количество инъекций в схемах может быть увеличено в соответствии с тяжестью заболевания.

Ниже приведены примеры использования средства при различных вирусных инфекциях.

Пример 1. Коронавирусная инфекция свиней (трансмиссивный гастроэнтерит свиней), регистрируется у свиноматок, поросят сосунов и поросят-отъемышей.

В неблагополучных по трансмиссивному гастроэнтериту хозяйствах у свиноматок после опороса проявляется легочная форма заболевания, у поросят-отъемышей регистрируется одновременно легочная и кишечная, а у поросят-сосунов – кишечная.

Провели опыт на 16 свиноматках-аналогах с 153 новорожденными поросятами в одном из корпусов-маточников, где регистрировался трансмиссивный гастроэнтерит. Для этого приготовили 0,074%-ный раствор муравьиного альдегида. Первой группе животных (8 свиноматок с 75 новорожденными поросятами) вводили 0,074% раствор муравьиного альдегида из расчета 5 мл свиноматке и 2 мл каждому поросенку. Контрольной группе (8 свиноматок с 78 новорожденными поросятами) вводили аналогичный объем физиологического раствора.

За животными вели клиническое наблюдение до двухнедельного возраста, регистрировали клиническое проявление трансмиссивного гастроэнтерита и гибель животных. Полученные результаты представлены в таблице.

Таблица

Результаты введения свиноматкам 0,074% раствора муравьиного альдегида

Результаты исследований показали, что введение 0,074%-ного раствора муравьиного альдегида одновременно свиноматкам и новорожденным поросятам достоверно обеспечивало снижение заболеваемости и падежа поросят-сосунов от трансмиссивного гастроэнтерита. Это действие при двухзвенной цепи (свиноматки и новорожденные поросята) необходимо рассматривать с двух позиций. Первое введение препарата свиноматкам обеспечивало снижение количества возбудителей в организме матерей, уменьшая дозу инфекта для новорожденных. А введение препарата поросятам обеспечивало лечебный эффект.

Как видно из таблицы, заболеваемость снизилась на 50% (74,4-24,0), что было связано с профилактическим эффектом, снизившим количество вируса у матерей, а падеж снизился в 6 раз в связи с лечебным эффектом после введения препарата поросятам.

Пример 2. Доказательство антисептического действия средства на примере ретровирусной инфекции (СПИД). Исследования проведены на 6 добровольцах.

Результаты лечения:

Пациент 1, исходная вирусная нагрузка – 750 000 РНК/мл, вирусная нагрузка через два месяца после лечения – 2 187 РНК/мл, отмечено снижение вирусной нагрузки в 342 раза.

Пациент 2, исходная вирусная нагрузка – 150 201 РНК/мл, вирусная нагрузка через два месяца после лечения – 1 230 РНК/мл, отмечено снижение вирусной нагрузки в 122 раза.

Пациент 3, исходная вирусная нагрузка – 97 171 РНК/мл, вирусная нагрузка через два месяца после лечения – 1 101 РНК/мл, отмечено снижение вирусной нагрузки в 88 раз.

Пациент 4, исходная вирусная нагрузка – 78 122 РНК/мл, вирусная нагрузка через два месяца после лечения – 1 037 РНК/мл, отмечено снижение вирусной нагрузки в 75 раз.

Пациент 5, исходная вирусная нагрузка – 78 122 РНК/мл, вирусная нагрузка через два месяца после лечения – 1 837 РНК/мл, отмечено снижение вирусной нагрузки в 42,5 раза.

Пациент 6, исходная вирусная нагрузка – 11 182 РНК/мл, вирусная нагрузка через два месяца после лечения – 1 165 РНК/мл, отмечено снижение вирусной нагрузки в 9 раз.

У всех пациентов отмечено резкое снижение вирусной нагрузки за счет антисептического воздействия препарата на клеточном уровне без отрицательного действия на организм и при отсутствии токсического эффекта.

Пример 3. Доказательство антисептического действия препарата на примере вирусного гепатита С. Лечение проведено на десяти добровольцах.

У всех пациентов наблюдаются ремиттирующие изменения репликации вируса, уровень вирусной нагрузки колеблется с интервалом в 1 десятичный логарифм каждые 1-3 месяца (периодически снижается и повышается). У трех пациентов начали лечение в серонегативную фазу заболевания.

Минимизация вирусной нагрузки отмечена у 7 пациентов: конечный уровень 1000 копий РНК /мл при исходном уровне от 2 500 000 копий РНК/мл.

Отрицательная ПЦР отмечена в 3 случаях при начале терапии в серонегативную фазу заболевания.

Все пациенты с вирусными гепатитами отмечали улучшение общего состояния, сна, настроения, повышение работоспособности, лучше переносились физические нагрузки. Повысилась социальная активность пациентов, улучшились взаимоотношения в семье, на работе.

Примеры № 4 и 5 – лечение при коронавирусной инфекции.

Пример 4.

Больной М., 46 лет – коронавирусная инфекция SARS-CoV-2 (на основании анамнеза, клинических признаков и рентгенограммы).

Клинические признаки: высокая температура (38-39,2°С), непродуктивный упорный кашель, дыхательная недостаточность с болью в грудной клетке, недомогание, умеренная головная боль.

Рентгенограмма грудной полости: наличие в периферических отделах легочных полей мелких очагов воспаления.

Вероятность заражения при проезде через две страны со вспышками коронавирусной инфекции. Лечение антибиотиками в течение трех дней не дало результатов.

Проведено лечение по следующей схеме. Средство вводили в дозе 5 мл, внутримышечно. Проведено три инъекции препарата через каждые 12 часов, затем через сутки еще пять инъекций препарата через каждые 12 часов. Затем через двое суток одна инъекция препарата, через трое суток еще одна инъекция препарата, через пять суток еще одна инъекция.

Результат: клинические признаки исчезли, на рентгенограмме отсутствуют очаги воспаления. Отмечено отсутствие побочных эффектов и токсического действия препарата.

Пример 5.

Больной С., 35 лет – коронавирусная инфекция (на основании анамнеза и клинических признаков).

Клинические признаки: температура тела 37,2-37,7°С, непродуктивный упорный кашель, недомогание, умеренная головная боль.

Контакт с людьми с подтвержденным диагнозом - коронавирусная инфекция. Лечение антибиотиками в течение 10 дней не дало результатов.

Проведен курс лечения препаратом по следующей схеме: семь инъекций препарата в дозе 5 мл, внутримышечно, один раз в сутки.

Результат: клинические признаки исчезли, наступило полное выздоровление. Отмечено отсутствие побочных эффектов и токсического действия препарата.

Таким образом, заявляемое инъекционное средство позволяет эффективно производить лечение инфекций, вызванных РНК-содержащими вирусами человека и животных и расширяет арсенал фармацевтических средств против указанных инфекций.

Средство обладает внутриклеточным антисептическим действием, активизирует выработку эндогенного муравьиного альдегида в организме человека и животных при отсутствии побочных эффектов и токсического действия.

Реферат

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а более конкретно – к фармакологии, и может использоваться для лечения вирусных инфекций, вызванных РНК-содержащими вирусами, имеющими липидную оболочку, в частности коронавирусных инфекций, СПИДа, гепатита С. Изобретение расширяет арсенал средств заявленного назначения. Техническим результатом является создание средства, обладающего внутриклеточным антисептическим действием, активизирующим выработку эндогенного муравьиного альдегида в организме человека и животных при отсутствии побочных эффектов и токсического действия. Технический результат достигается применением иммуномодулирующего средства, содержащего муравьиный альдегид в количестве 0,073-0,075% в изотоническом растворе хлорида натрия в качестве средства для внутримышечных инъекций с одноразовой дозировкой 5 мл на инъекцию для лечения коронавирусных, ретровирусных инфекций и гепатита С. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 5 пр., 1 табл.

Формула