Код документа: RU2138480C1
Изобретение относится к новым лактамам с биологической активностью, в частности к новым производным азетидинона, обладающим гипохолестеринемической активностью.
Известны производные азетидинона, которые обладают гипохолестеринемической активностью (см. заявку WO 93/020 48, опуб. 4 февраля 1993 г.).
Задачей изобретения является расширение ассортимента высокоактивных производных азетидинона с гипохолестеринемической активностью.
Данная
задача
решается предлагаемыми производными азетидинона общей формулы (I)
В первую группу предпочтительных производных
азетидинона входят соединения, у которых
Ar1 - фенил или замещенный остатком R4 фенил,
Ar2 - фенил или замещенный остатком R4 фенил,
Ar3 - замещенный остатком R5 фенил.
Во вторую группу предпочтительных производных азетидинона входят соединения, у которых
Ar1
-замещенный остатком R4 фенил, где R4 означает галоид,
Ar2 -замещенный остатком R4 фенил, где R4 означает галоид или остаток -OR6, где R6 означает низший алкил или водород,
Ar3 -замещенный остатком R5 фенил, где R5 означает остаток - OR6, где R6
означает низший алкил или водород.
В третью группу предпочтительных производных азетидинона входят соединения, у которых
R1 и R3 - водород,
R и
R2 означают группу формулы -OR6, где R6 означает водород, сумма индексов m, n, p, q и r - 2 или 3.
В четвертую группу предпочтительных производных
азетидинона входят соединения, у которых m, n и r - 0,
q - 1,
p - 2.
В пятую группу предпочтительных производных азетидинона входят соединения, у которых
p,
q
и n - 0,
r - 1,
m - 2.
В частности предпочитаются производные азатидинона вышеприведенной общей формулы (I), которые выбраны из группы, включающей
относ.
3(R)-(2(R)-окси-2-фенилэтил)-4(R)-(4- метоксифенил)-1-фенил-2-азетидинон,
относ. 3(R)-(2(R)-окси-2- фенилэтил)-4(S)-(4-метоксифенил)-1-фенил-2-азетидинон,
3(S)-(1(S)- окси-3-фенилпропил)-4(S)-(4-метоксифенил)-1-фенил-2-азетидинон,
3(S)-(1(R)-окси-3-фенилпропил)-4(S)-(4-метоксифенил)-1-фенил-2- азетидинон,
относ.
3(R)-(1(R)-окси-3-фенилпропил)-4(S)-(4- метоксифенил)-1-фенил-2-азетидинон.
относ. 3(R)-[(S)-окси-(2- нафталенил)метил]-4(3)-(4-метоксифенил)-1 -фенил-2-азетидинон,
3(R)-[(R)-окси-(2-нафталенил)метил] -4(S)-(4-метоксифенил)-1-фенил- 2- азетидинон,
3(R)-(3(R)-окси-3-фенилпропил)-1,4(S)-бис-(4- метоксифенил)-2-азетидинон,
3(R)-(3(S)-окси-3-фенилпропил)- 1,4(S)-бис-(4-метоксифенил)-2-азетидинон,
4(3)-(4-оксифенил)-3(R)-(3(R)-окси-3-фенилпропил)-1-(4- метоксифенил)-2-азетидинон,
4(S)-(4-оксифенил)-3(R)-(3(S)-окси-3- фенилпропил)-1-(4-метоксифенил)-2-азетидинон,
3(R)-[3(RS)-окси-[4- (метоксиметокси)-фенил] пропил] -1,4(S)-бис-(4-метоксифенил)-2- азетидинон,
1-(4-фторфенил)-3(R)-[3(S)-(4-фторфенил)-3- оксипропил)]-4(S)-(4-окси-фенил)-2-азетидинон,
1-(4-фторфенил)- 3(R)-[3(R)-(4-фторфенил)-3-оксипропил)]-4(S)-(4-окси-фенил)-2- азетидинон,
4(S)-[4-(ацетилокси)фенил] -3(R)-(3(R)-окси-3- фенилпропил)-1-(4-метоксифенил)-2-азетидинон,
4(S)-[4- (ацетилокси)фенил]-3(R)-(3(S)-окси-3-фенилпропил)-1-(4- метоксифенил)-2-азетидинон,
1-(4-фторфенил)-3(R)-[3(S)-(4- фторфенил)-3-оксипропил)] -4(S)-[4-(фенилметокси)фенил]-2- азетидинон,
3(R)-[3(R)-(ацетилокси)-3-фенилпропил] -1,4(S)-бис-(4- метоксифенил)-2-азетидинон,
3(R)-[3(S)-(ацетилокси)-3-фенилпропил] -1,4(S)-бис-(4- метоксифенил)-2-азетидинон,
3(R)-[3(R)-(ацетилокси)-3-(4- фторфенил)пропил]
-4(S)-[4-(ацетилокси)-фенил]-1-(4-фторфенил)-2- азетидинон,
3(R)-[3(S)-(ацетилокси)-3-(4-фторфенил)пропил] -4(S)- [4-(ацетилокси)-фенил]-1-(4-фторфенил)-2-азетидинон,
3(R)-[3(R)- (ацетилокси)-3-(4-хлорфенил)пропил] -4(S)-[4-(ацетилокси)-фенил]-1- (4-хлорфенил)-2-азетидинон,
3(R)-[3(S)-(ацетилокси)-3-(4- хлорфенил)пропил]
-4(S)-[4-(ацетилокси)-фенил]-1-(4-хлорфенил)-2- азетидинон,
относ. 1-(4-фторфенил)-4(S)-(4-оксифенил)-3(R)-(1 - (R)-окси-3-фенил-пропил)-2-азетидинон.
Дальнейшим объектом изобретения является фармацевтическая композиция с гипохолестеринемической активностью, которая помимо по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого носителя содержит эффективное количество по меньшей мере одного производного азетидинона вышеприведенной обшей формулы (I) или его смеси с ингибитором редуктазы три окситриметилглутарилкоэнцима(HMG CoA), в качестве которого предпочтительно используют ловастатин, правастатин, флувастатин и симвастатин.
Широко известно, что содержание холестерина в плазме крови можно снизить с помощью редуктазы HMG CоА 3-окси-3-метилглутарил- коэнзима A; ЕC1.1.1.34) [см., Witzurn, Circulation, 80, 5 (1989), стр. 1101 -1114].
Еще одним объектом изобретения является способ снижения уровня холестерина в плазме крови путем введения по меньшей мере одного производного азетидинона вышеприведенной общей формулы (I) или его смеси с ингибитором редуктазы HMG CoA в эффективном количестве.
Соединения вышеприведенной общей формулы (I) имеют по меньшей мере один асимметричный атом углерода и поэтому все изомеры, включая энантиомеры и диастереомеры, входят в объем изобретения. Изобретение включает d- и l-изомеры как в чистом виде, так и в виде смеси, включая рацемические смеси. Изомеры можно получать известными приемами, либо путем реакции хиральных исходных соединений, либо путем разделения изомеров соединений вышеприведенной общей формулы (I). Изомеры могут также представлять собой геометрические изомеры, например, в том случае, если имеется двойная связь. Все такие геометрические изомеры входят в объем изобретения.
Приведенная выше формулировка "R6, R7 и R8 независимо выбраны из группы. .." означает не только то, что радикалы R6, R7 и R8 независимо выбраны, но и то, что, если в одной молекуле существуют более одного остатка R6, R7 или R8, соответственно, то эти остатки выбраны независимо друг от друга (т.е. если R - группа - OR6, где R6 означает водород, то R4 может представлять собой группу -OR6, где R6 означает низший алкил).
Применяемый в рамках данной заявки термин "низший алкил" означает неразветвленные или разветвленные алкильные цепи с 1 - 6 атомами углерода.
Под "арилом" понимаются фенил, нафтил, инденил, тетрагидронафтил или инданил.
Под "галоидом" понимаются атомы фтора, хлора, брома или йода.
Определенные соединения настоящего изобретения имеют кислый характер, например, те соединения, которые имеют карбоксильную группу. Эти соединения образуют фармацевтически приемлемые соли с неорганическим или органическим основанием. В качестве примеров таких солей можно назвать натриевую, калиевую, кальциевую, алюминиевую, золотую и серебряную соли. Изобретением также охватываются соли, образованные фармацевтически приемлемыми аминами, такими, как, например, аммиак, алкиламины, оксиалкиламины, N-метилглюкамин и т.п.
Некоторые производные азетидинона вышеприведенной
общей формулы (I) можно получать, например, способом, включающим следующие стадии:
а) обработку сильным основанием лактона формулы
В общем все соединения общей формулы (I) можно получать известными способами, описанными, например, в нижеследующем. В приведенных ниже формулах радикалы X, Y и Z означают группу -CH2-.
Способ A:
Имины формулы (II) (Ar30-CH=N-Ar20) можно получать из альдегидов формулы Ar30-CHO и аминов формулы Ar20-NH2 известными приемами. Альдегиды формулы Ar30-CHO и амины формулы Ar20-NH2 можно покупать в торговле или получать известными приемами.
Способ A:
(б) В течение 5 - 60 минут, предпочтительно 30 минут, в продукт стадии (а) подают имин формулы (II), где Ar20 и Ar30 имеют вышеуказанные значения, при этом температуру реакционной смеси в течение 1 - 12 часов, предпочтительно примерно 3 часов, сохраняют при примерно от 0oC до -85oC, предпочтительно -78oC, или реакционную смесь в течение указанного времени нагревают на примерно 10oC/час - 70oC/час, предпочтительно примерно 30oC/час, до температуры примерно 20oC.
(в) Реакцию прекращают добавлением пригодной кислоты, такой, как, например, 1 н. соляная кислота.
(г) Защитные группы остатков R', R2', Ar10, Ar20 и Ar30, если имеются, при необходимости удаляют известными приемами, например, силильные защитные группы удаляют путем обработки фторидом.
(д) Соединения формулы (I), где R и R2 означают группы OR6, где R6 - водород, известными приемами можно перевести в другие соединения формулы (I), где R и R2 содержат функциональные группы, т.е. независимо выбраны из группы, включающей OR6a и -O(CO)R6, где R6 имеет вышеуказанные значения, a R6a означает низший алкил, незамещенный или замещенный арилом. Например, в результате взаимодействия спирта с галоидным алкилом в присутствии пригодного основания, такого, как, например, гидрид натрия, получают замещенные алкоксилом соединения (т. е. R или R2 означают OR6, где R6 - низший алкил); в результате взаимодействия спирта с агентом ацилирования, таким, как, например, ацетилхлорид, получают соединения, у которых R или R2 означают -OC(O)R6. В соединения формулы (I), где любой из остатков Ar1, Ar2 или Ar3 содержит гидроксил, или аналогичным приемом можно ввести функциональные группы с получением других соединений формулы (I), т.е. соединений, у которых остатки R4 и R5 независимо выбраны из группы, включающей -OR6a, -O(CO)R6 и -O(CH2)1-5OR7.
Продукты стадий в, г или д выделяют известными приемами, такими, как, например, экстракция, кристаллизация или, предпочтительно, хроматография на силикагеле марки 60. При применении хирального лактона получаемое соединение формулы (Iв) или (Iг) не является рацемическим соединением.
Лактоны формулы IVa можно использовать в качестве исходного вещества в процессе,
описанном стадиями (а) - (д), с получением соединений формул (Iж) и
(Iз), при этом если каждый из индексов n и r - 0, то p должен означать число 1 - 2:
Способ Б
Данным приемом получают несколько возможных диастереомеров, которые
можно отделять при помощи комбинации известных приемов, включающих кристаллизацию,
хроматографию на силикагеле и высокопроизводительную жидкостную хроматографию. Остальные диастереомеры можно
получать путем реакций транслокации, таких, как, например, нижеприведенная
последовательность реакций по Митсунобу, где изображены частичные структуры соединения формулы (Iе):
Способ
В:
Способ Г:
Способ Д:
На второй стадии продукт обрабатывают сильным ненуклеофильным основанием, таким, как, например, бистриметилсилиламид натрия или лития, при температуре примерно от -78oC до 10oC. После реакции смесь подают в водный раствор винной кислоты, а продукт выделяют из органического слоя. Так же, как и в способе А, защитные группы остатков Ar10, Ar20, Ar30, R' и R2' удаляют при необходимости.
Способ Е:
Способ Ж:
Способ З:
Кетон формулы (XX) растворяют в пригодном растворителе, например метаноле. Добавляют катализатор гидрирования, например палладий на угле, и в течение 1 - 24 часов, предпочтительно примерно 16 часов, смесь подвергают воздействию газообразного водорода под давлением примерно 0,984 - 7,31 кг/см3 предпочтительно примерно 4,219 кг/см3. Катализатор гидрирования удаляют путем фильтрации, а растворитель удаляют в вакууме, при этом получают соединение формулы (Iй) в виде смеси спиртовых диастереомеров, которые разделяют известными приемами.
В качестве
альтернативы кетон формулы (XX) растворяют в
пригодном растворителе, например тетрагидрофуране, при температуре примерно от -40oC до 22oC, предпочтительно примерно 0o
C, добавляют подходяющий восстановитель, такой,
как, например, боран натрия, замещенный бороводород (например, [cbz-пролин]3BHNa) или боран, при необходимости в присутствии пригодного
хирального промотора, взятого либо в каталитическом,
либо в стехиометрическом количестве, такого, как, например, хиральный боран следующих структур:
Соединения формулы (XIX) можно получать нижеприведенным многостадийным приемом:
Соединение формулы (XXII) обрабатывают приемом, описанным в качестве стадии 1 способа Д, при этом получают соединение формулы (XXIII).
Циклизацию азетидинона можно осуществлять альтернативными приемами. Первый прием заключается в том, что соединение формулы (XXIII) обрабатывают сильным ненуклеофильным основанием, таким, как, например, бистриметилсилиламид натрия или лития, в среде пригодного инертного органического растворителя, таким, как, например, дихлорметан, при температуре примерно от -78oC до 10oC, предпочтительно примерно 0oC. Реакционную смесь перемешивают в течение примерно 1 - 2 часов, при этом постепенно нагревают до температуры 22oC. Соединение формулы (XXIV) выделяют путем стандартной экстрации дихлорметаном. Другой, двухстадийный прием заключается в том, что соединение формулы (XXIII) сперва обрабатывают слабым агентом силилирования, таким, как, например, N, O-бис(триметилсилил)ацетамид, при температуре примерно 0oC - 100oC, предпочтительно примерно 40oC, в течение примерно 10 - 60 минут, предпочтительно 30 минут, после чего обрабатывают донором аниона фторида, таким, как, например, фторид тетрабутиламмония, при температуре примерно 0oC - 100oC, предпочтительно примерно 40oC, и перемешивают в течение 0,5 - 4 часов, предпочтительно 2 часов. Соединение формулы (XXIV) выделяют стандартными методами экстракции.
Соединение формулы (XXIV) подвергают гидролизу пригодным основанием, например гидроокисью лития, в среде подходящего растворителя, такого, как, например, 66%-ный водный раствор метанола, при температуре примерно 0oC - 50oC, предпочтительно примерно 22oC, в течение примерно 1 - 4 часов, предпочтительно 2 часов, после чего экстрагируют пригодным растворителем, например этилацетатом. Получаемую кислоту переводят в соответствующий хлорангидрид кислоты, как описано выше, путем обработки хлорирующим веществом, таким, как, например, оксалилхлорид, с получением соединения формулы (XIX).
Исходные вещества формул (III), (V), (VII), (VIII), (XIV), (XVII), (XXI) и (XXV) являются либо торговыми продуктами, либо широко известными соединениями, которые можно получать известными приемами.
Реакционноспособные группы, которые не участвуют в осуществлении вышеприведенных реакций, можно защищать стандартными защитными группами, которые после завершения реакции опять удаляют известными приемами. В таблице 1 (см. в конце описания) приведены некоторые типичные защитные группы.
Как уже указывалось выше, производные азетидинона согласно изобретению проявляют гипохолестеринемическую активность.
Активность ин виво соединений формулы (I)
можно определять следующим методом:
Исследование ин виво (на гиперлипидемических хомяках)
Хомяки распределяются на группы по 6 и в течение 7 дней им дают пищу Пурина Чау N 5501,
содержащую 0,5% холестерина. Расход пищи регистрируют с тем, чтобы определять общее количество подаваемого
вместе с пищей холестерина. Начиная с началом дачи пищи, раз в день животным орально дают
исследуемое соединение в виде раствора или суспензии в кукурузном масле (0,2 мл). Контрольным животным дают
только 0,2 мл кукурузного масла. Всех животных, умирающих или находящихся в плохом
состоянии, умерщвляют. Через 7 дней животных анестезируют внутримышечным впрыскиванием кетамина и умерщвляют путем
обезглавливания. Кровь собирают в трубках, содержащих этилендиаминотетрауксусную
кислоту, для осуществления анализа липидов в плазме. Кроме того, иссекают печень для осуществления анализа липидов в
ткани. Анализ липидов проводят по опубликованным приемам (Schnitzer-Polokoff. R.,
и др., Comp.Biochem. Physiol. , 99А, 4, 1991 г., стр. 665 - 670), а активность исследуемых соединений определяют как
%-ное уменьшение липидов по сравнению с контрольным опытом.
Результаты опытов сведены в таблице 2 (см. в конце описания).
Если производные азетидинона вышеприведенной общей формулы (I) применять в сочетании с редуктазой HMG CoA, то достигаемое при этом процентное уменьшение уровня холестерина в сыворотке превышает сумму эффектов, получаемых при отдельном применении средств.
Опыты проводили на самцах собак породы Бигл одинакового веса, которые делили на группы по 5 животных. Все собаки проявляли эквивалентный уровень холестерина в крови. Вместе с содержащим мальтодекстрин кормом собакам давали а) 0,007 мг/кг/день соединения примера 6А, б) 5 мг/кг/день ловастатина, в) 2,5 мг/кг/день правастатина, г) 5 мг/кг/день флувастатина, д) 0,25 мг/кг/день симвастатина, е) 0,007 мг/кг/день соединения примера 6А и 5 мг/кг/день ловастатина, ж) 0,007 мг/кг/день соединения примера 6А и 2,5 мг/кг/день правастатина, 3) 0,007 мг/кг/день соединения примера 6А и 5 мг/кг/день флувастатина, и) 0,007 мг/кг/день соединения примера 6А и 0,25 мг/кг/день симвастатина. Опыты проводили в течение 14 дней. В дни 0, 3, 7 и 14 брали на анализ плазму крови.
В каждом опыте определялось процентное снижение уровня холестерина в сыворотке по сравнению с контрольной группой, собакам которой давали корм без добавки соединения примера 6А или указанного статина.
Результаты опытов сведены в таблице 3 (см. в конце описания).
Суточная гипохолестеринемическая доза соединения формулы (I) составляет примерно 0,1 - 30 мг/кг веса тела в день, предпочтительно примерно 0,1 - 15 мг/кг веса тела в день. Таким образом, для среднего веса тела 70 кг, дозировка составляет примерно 5 - 1000 мг медикамента в день, причем это количество дается либо одной дозой, либо 2 - 4 частичными дозами. Однако точная доза определяется лечащим врачом в зависимости от эффективности данного соединения, возраста, веса, состояния и реакции пациента.
В случае комбинированного применения производного азетидинона и ингибитора редуктазы HMG CoA типичная доза ингибитора составляет 0,1 - 80 мг/кг веса тела в день, при этом указанное количество дают либо одной дозой, либо частичными дозами, обычно 1 - 2 раза в день. Точная доза каждого компонента комбинированного средства определяется лечащим врачом в зависимости от эффективности данного соединения, возраста, веса, состояния и реакции пациента.
В случае дачи отдельных компонентов комбинированного средства, количества доз отдельных компонентов в день могут различаться, так как, например, срок активности одного компонента может быть дольше, чем срок активности другого компонента, и поэтому первый компонент можно апплицировать в более широких интервалах по сравнению со вторым компонентом.
В следующих примерах описаны методы получения соединений формулы (I). Приведенная стереохимия является относительной стереохимией, если не указано по-другому. Термины "цис" и "транс", если не указано по-другому, относятся к относительной ориентации в положениях 3 и 4 азетидинона. Термин "J" относится к константе взаимодействия протонной ЯМР, указанной в Гц, между замещенными в положении 3 и замещенными в положении 4 протонами азетидинона. Все данные по ЯМР получены с использованием раствора CDCl3, если не указано по-другому.
Пример 1
Соединение А: точка плавления: 218
- 220oC, инфракрасная спектроскопия (далее:ИК) 1730 см-1, ударная ионизация (далее: УИ) (M+H) 374, J = 5,9 Гц
Соединение Б: точка плавления: 74 - 76oC, ИК 1730 см-1, УИ (M+H) 374, J-2,3 Гц
Аналогичным методом с применением соответствующих исходных веществ получают
соединение 1В:
Точка плавл.: 167 - 169oC, ИК 1745 см-1, электр.ионизация (M+) 415, J = 5,9 Гц.
Пример 3
найдено: C 76,66; H 6,49; N 3,64.
3Д) [θ]227nM= -1,95•104 см2/дМ;
[θ]241nM= +4,45•104 см2/дМ:
элементарный анализ:
рассчитано для C25H25NO3•0,5H2O: C
75,73; H 6,61; N 3,53.
найдено: C 75,66; H 6,41; N 3,60.
3Е) [θ]226nM= +1.97•104 см2/дМ; [θ]240nM=
-5.22•104 см2/дМ;
элементарный анализ:
рассчитано для C25H25NO3: C 77,48; H 6,51; N 3,62.
найдено: C 77, 44; H 6,53; N 3,70.
3Ж) [θ ]226nM= -1,78•104 см2/дМ; [θ]241nM= -4,78•104 см2/дМ: (УИМС 388 M+H).
3З) [θ
]226nM= +2,24•104 см2/дМ; [θ]241nM= -5,4•10 см2/дМ:
[α] -54,4o (2,5 мг/мл метанола).
Элементарный анализ:
рассчитано для
C25H25NO3: C 77,
48; H 6,51; N 3,62.
найдено: C 77,11: H 6,50; N 3,72.
3И) [θ]226nM= -2,05•104 см2/дМ; [θ]241nM= +5, 2•104 см2/дМ: (УИМС 388 M+H).
3Й)
3K)
Способом, описанным выше для получения соединений 3А
и 3Б, N- фенил-4-(4-метоксифенил)-2-азетидинон
последовательно обрабатывают изопропилциклогексиламидом лития и 2-нафтальдегидом, при этом получают диастереомеры 3Л и 3М:
Стадия 3) В раствор 0,734 г (2,2 ммоль) продукта стадии 2 в 4 мл тетрагидрофурана при температуре 0oC в течение 0,25 часов подают 2,4 мл (2,4 ммоль 1,0-м. раствора в тетрагидрофуране) фенилмагния в виде бромида. По истечении 1 часа при температуре 0oC добавляют 5 мл воды, фазы разделяют, органическую фазу раз промывают 1 н. соляной кислотой, сушат над сульфатом магния и сгущают с получением масла, которое очищают путем хроматографии на силикагеле с применением в качестве элюента смеси этилацетата с гексаном в соотношении 2: 1. Получают 0,372 г целевого соединения (в виде смеси диастереомеров) в качестве масла. УИ (M+H) 418.
Разделение диастереомеров: Смесь диастереомеров продукта стадии 3 обрабатывают колоночной хроматографией с использованием колонки типа
"Chiralcel OD" (изготовитель: Chiral Technologies Corp. PA). В
качестве элюента применяют смесь гексана с этанолом в соотношении 9:1. При этом получают следующие энантиомерно чистые (> 98%)
диастереомеры:
УИ (M+H) 480;1H в CDCl3 δ PhCH(OH) - 5,05 ч/милл. (далее: Ph
- фенил)
Стадия 2) Сырой продукт стадии 1 растворяют в 30 мл дихлорметана и
добавляют 30 мл 40%-ного водного раствора н-бутилNOC(O)CF3. Двухфазную реакционную смесь кипятят в
течение 24 часов, охлаждают, слои разделяют, органический слой 6 раз промывают водой.
Органический слой сгущают досуха, а получаемый остаток сразу растворяют в 10 мл насыщенного аммиаком этанола. По
истечении 1 часа реакционную смесь сгущают и частично очищают путем хроматографии на
силикагеле. Дальше очищают путем высокопроизводительной жидкостной хроматографии с получением смеси соединений 4А и
4Б в соотношении 1: 1. Возможна дальнейшая очистка смеси при помощи колонки типа
Chiracel OD, при этом получают вышеуказанные соединения 4А и 4Б в отдельном виде.
Описанным в способе 2
примера 4 приемом с применением в качестве исходного соединения
4(S)-(4-ацетоксифенил)-3(R)-(3-фенилпропил)-1 -(4-метокси-фенил)-2-азетидинона получают следующие соединения:
Пример 6
Стадия 2) В раствор 18,2 мл (0,165 моль) четыреххлористого титана в 600 мл дихлорметана при температуре 0oC подают 16,5 мл (0,055 моль) изопропоксида титана. По истечении 15 минут добавляют 49,0 г (0,17 моль) продукта стадии 1 в виде раствора в 100 мл дихлорметана. После 5 минут подают 65,2 мл (0,37 моль) диизопропилэтиламина и перемешивают при температуре 0oC в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждают до температуры -20oC и подают 114,3 г (0,37 моль) 4-бензилоксибензилидин(4-фтор)анилина в виде твердого вещества. Реакционную смесь при температуре -20oC интенсивно перемешивают в течение 4 часов, после чего в течение 15 минут каплями добавляют раствор уксусной кислоты в дихлорметане. Реакционной смеси дают нагреваться до температуры 0oC и добавляют 2-н. серную кислоту. Реакционную смесь перемешивают в течение еще 1 часа, слои разделяют и промывают водой. Органическую фазу отделяют и сушат. Сырой продукт кристаллизуют из смеси этанола с водой, при этом получают чистый промежуточный продукт.
Стадия 3) В раствор 8,9 г (14,9 ммоль) продукта стадии 2 в 100 мл толуола при температуре 50oC подают 7,50 мл (30,3 ммоль) N, O- бис(триметилсилил)ацетамида. По истечении 0,5 часов подают 0,39 г (1,5 ммоль) фторида тетрабутиламмония и реакционную смесь перемешивают при температуре 50oC в течение дополнительных 3 часов. Реакционную смесь охлаждают до температуры 22oC, добавляют 10 мл метанола, смесь промывают 1 н. соляной кислотой, 1 н. бикарбонатом натрия и насыщенным раствором хлорида натрия. Органическую фазу сушат над сульфатом магния.
Стадия 4) В раствор 0,94 г (2,2 ммоль) продукта стадии 3 в 3 мл метанола подают 1 мл воды и 102 мг (2,4 ммоль) гидроокиси лития в виде моногидрата.
Реакционную смесь перемешивают при температуре 22oC в течение 1 часа, после чего добавляют дополнительное количество 54 мг (1,3 ммоль) гидроокиси лития в виде моногидрата. По истечении всего 2 часов добавляют 1 н. соляную кислоту и этилацетат, слои разделяют, органический слой сушат и сгущают в вакууме. В раствор 0,91 г (2,2 ммоль) получаемого при этом продукта в дихлорметане при температуре 22oC подают 0,29 мл (3,3 ммоль) оксалилхлорида и перемешивают в течение 16 часов. Растворитель удаляют в вакууме.
Стадия 5) В хорошо
перемешанную суспензию 4,4 ммоль хлорида 4- фтор-фенилцинка, получаемого из
4,4 мл 1-м. раствора (4,4 ммоль) 4-фторфенил-магния в виде бромида в тетрагидрофуране и 0,6 г (4,4 ммоль) хлорида цинка,
при температуре 4oC подают 0,25 г (0,21 ммоль)
тетракис(трифенилфосфин)-палладия и раствор 0,94 г (2,2 ммоль) продукта стадии 4 в 2 мл тетрагидрофурана. Реакционную смесь перемешивают при
температуре 0oC в течение 1 часа, а затем при
температуре 22oC в течение 0,5 часов. Добавляют 5 мл 1 н. соляной кислоты и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сгущают до
масла и очищают путем хроматографии на силикагеле с
получением 1-(4-фтор-фенил)-4(S)-[4-(фенилметокси)фенил]-3(R)-[3- оксо-3-(4-фторфенил)пропил]-2-азетидинона:
ВРМС: рассчитано для C24H19F2NO3= 408,
1429, найдено 408,1411.
Стадия 6) В 0,95г (1,91 ммоль) продукта стадии 5 в 3 мл тетрагидрофурана подают 120 мг (0,43 ммоль) (R)-тетрагидро-1- метил-3,3-дифенил-1H,3H-пиррол-[1,2-с] [1, 3,2] оксазаборола, смесь охлаждают до температуры -20oC. По истечении 5 минут по каплям в течение 0.5 часов добавляют 0,85 мл 2-м. раствора (1,7 ммоль) комплекса боргидрида и диметилсульфида. По истечении всего 1,5 часов последовательно добавляют метанол и 1 н. соляную кислоту, а реакционную смесь экстрагируют этилацетатом с получением 1-(4- фторфенил)-3(R)-[3(S)-(4-фторфенил)-(3-оксипропил)] -4(S)-[4- (фенилметокси)фенил]-2-азетидинона (соединение 6А-1) в виде масла.1H в CDCl3 δ H3 = 4, 68. J = 2,3 Гц. УИ (M+H) 500.
С использованием в качестве исходного соединения (S)-тетрагидро-1-метил-3,3-дифенил-1 H,3H-пиррол-[1,2-с][1,3,2]оксазаборола получают соответствующее соединение 3(R)-оксипропил-азетидинон (соединение 6Б-1).1H в CDCl3 δ H3 = 4,69. J = 2,3 Гц. УИ (M+H) 500.
В раствор 0,4 г (0,8 ммоль) соединения 6А-1 в 2 мл этанола подают 0,03 г 10%-ного палладия на угле, реакционную смесь перемешивают под давлением водорода, равным 4,219 кг/см2 в течение 16 часов. Реакционную смесь фильтруют, растворитель сгущают с получением соединения 6А.
Точка плавления: 164 - 166oC; УИ (M+H) 410. [α]
Элементарный анализ: рассчитано для C24H21F2NO3 : C 70,41; H 5,17; N 3,42; найдено C 70,25; H 5,19; N 3,54.
Аналогичной обработкой соединения 6Б-1 получают соединение 6Б. Точка плавления: 129,5 - 132,5oC; УИ (M+ H) 410. Элементарный анализ: рассчитано для C24H21F2NO3: C 70,41; H 5,17; N 3,42; найдено C 70,30; H 5,14; N 3,52.
Стадия 6') (альтернатива) В раствор 0,14 г (0,3 ммоль) продукта стадии 5 в 2 мл этанола подают 0,03 г 10%-ного палладия на угле, реакционную смесь перемешивают под давлением водорода, равным 4,219 кг/см2 в течение 16 часов.
Реакционную смесь фильтруют, растворитель сгущают с получением смеси соединений 6А и 6Б в соотношении 1:1.
Приемом,
включающим стадии 1 - 6, с использованием
соответствующих исходных веществ получают следующие соединения:
Диастереомер 76-А (R): масло; J34 = 2,3 Гц,
δ CH(OH) = 4,86 (т); ВРМС C32H29NO4 рассчитано: 491,2097; найдено: 491,2074
Диастереомер 76-Б
(S): масло; J34 = 2,3 Гц, δ CH(OH) = 5,
06 (т); ВРМС C32H29NO4 рассчитано: 491,2097; найдено: 491,2117.
Стадия 2): В раствор 58 мг (0, 12 ммоль) диастереомера А стадии 1 в 2 мл этилацетата подают 20 мг 10%-ного палладия на угле и перемешивают при температуре 22oC в атмосфере водорода под давлением 0,984 кг/см2 в течение 12 часов. Фильтруют и сгущают с получением целевого соединения в качестве полутвердого вещества. Точка плавления: 90 - 92oC. J34 = 2,3 Гц,
Пример 8
В раствор 90 мг (0,2 ммоль) продукта примера 4А в
дихлорметане подают 80 мг (1,0 ммоль) ацетилхлорида и 8 мг (0,1 ммоль) пиридина. Перемешивают в течение 1 часа при комнатной температуре.
Добавляют воду, разделяют слои и выделяют соответствующее
ацетоксильное соединение 8А. Аналогичным приемом обрабатывают продукты примеров 4Б, 6Б и 6А с получением следующих соединений 8Б, 8В и 8Г,
соответственно:
8А:
1.4(S)- бис(4-метоксифенил)-3(R)-(3(R)-ацетокси-3-фенил-пропил)-2- азетидинон. УИ (M+H) 460; ВРМС C28H29NO5, рассчитано: 459,
2044; найдено: 459,2045.
8Б: 1,4(S)-бис(4-метоксифенил)-3(R)-(3(S)- ацетокси-3-фенил-пропил)-2-азетидинон. УИ (MH) 460; ВРМС C28H29NO5, рассчитано: 459,2044; найдено: 459,2048.
8В: 4(S)-(4- ацетилоксифенил)-3(R)-(3(В)-ацетилокси-3-(4-фторфенил)пропил)- 1- (4-фторфенил)-2-азетидинон. MС (бомбардировка быстрыми атомами) 493,4; ВРМС C28H25 NO5, рассчитано: 493,1695; найдено: 493,1701.
8Г: 4(S)-(4-ацетилоксифенил)-3(R)-(3(S)-ацетилокси-3-(4- фторфенил)пропил)-1-(4-фторфенил)-2-азетидинон. MС (бомбардировка быстрыми атомами) 493,4; ВРМС C28H25F2NO5, рассчитано: 493,1695; найдено: 493,1694.
С использованием соответствующих исходных соединений по
способу, описанному в примере 6, получают
1-(4-хлорфенил)-3(R)-(окси-3-(4- хлорфенил)пропил)-4(S)-(4-оксифенил)-2-азетидинон. Описанным в примере 8 приемом получают следующие диацетаты 8Д и 8Е:
Стадия 2) В раствор 1,78 г (4,62 ммоль) продукта стадии 1 в тетрагидрофуране при температуре -10oC подают 115 мг (4,8 ммоль) гидрида натрия. По истечении 15 минут добавляют 865 мг (4,85 ммоль) N-бромсукцинимида и перемешивают в течение 20 минут, после чего добавляют 1 н. соляную кислоту и распределяют между этилацетатом и солевым раствором. Органический слой отделяют, сушат над сульфатом магния и сгущают с получением масла. Масло подвергают флеш-хроматографии с применением в качестве элюента смеси этилацетата с гексаном в соотношении 1:10, при этом получают сперва 830 мг соединения 9а в качестве пенистого твердого вещества (выход: 39%; MС (бомбардировка быстрыми атомами) 466/464, M+H), а затем 1,1 г соединения 9б в качестве бесцветного твердого вещества (выход: 51%; MС (бомбардировка быстрыми атомами) 466/464, M+H).
Стадия 3а) В раствор 0, 68 г (1,46 ммоль) соединения 9а в 5 мл тетрагидрофурана при температуре -50oC подают 7,3 мл 1-м. раствора комплекса трифторуксусной кислоты в виде магниевой соли и трифторуксусной кислоты в диэтиловом эфире. Реакционную смесь перемешивают в течение 5 минут после чего добавляют 254 мг (2,92 ммоль) т-бутил-аминборана. По истечении 15 минут реакционной смеси дают нагреваться в течение 20 минут до температуры 0oC, добавляют 1 н. соляную кислоту и сгущают в вакууме. Остаток распределяют между этилацетатом и солевым раствором. Органические слои сгущают, а получаемое масло растворяют в смеси дихлорметана с метанолом в соотношении 1:1. Добавляют примерно 2 ммоль этаноламина. По истечении 15 минут реакционную смесь сгущают, а остаток распределяют между этилацетатом и 1 н. соляной кислотой. Органическую фазу промывают солевым раствором и сушат над сульфатом магния с получением масла. Масло очищают путем флеш-хроматографии с применением в качестве элюента смеси этилацетата с гексаном в соотношении 1:4, при этом получают 0,52 г соединения 9a-1 в виде бесцветного твердого вещества. Продукт получают в качестве смеси диастереомеров в соотношении 4:1. Выход: 76%. Спектроскопия вторичными ионами 468/466 (M+H).
Стадия 3б) C использованием в качестве исходного вещества соединения 9б способом, аналогичным стадии 3а, с применением дихлорметана в качестве растворителя получают соединение 9б-1 в качестве смеси диастереомеров в соотношении 13:1. Выход: 80%. Спектроскопия втор. ионами 468/466 M+H. Стадия 4а) В раствор 1, 0 мл трис(триметилсилил)силана в толуоле при температуре 80oC по каплям в течение 40 минут подают раствор 0,27 г (0,58 ммоль) соединения 9а-1 и 18 мг (0,12 ммоль) 2, 2'-азобисизобутиронитрила в 40 мл толуола. По истечении 1 часа подают еще 5 мг 2,2'- азобисизобутиронитрила, а температуру в течение дополнительных 1,5 часов сохраняют при 80oC. Реакционную смесь охлаждают и сгущают, остаток растворяют в ацетонитриле и три раза промывают гексаном. Слой ацетонитрила сгущают с получением 0,25 г целевого соединения в качестве рацемической смеси. Получаемое масло очищают путем высокопроизводительной жидкостной хроматографии с использованием колонки типа "Chiralcel OD", при этом получают 3З (основной) и 3Й (неосновной).
Стадия 4б) С использованием в качестве исходного вещества соединения 9б-1 по способу стадии 4а получают масло, которое очищают путем флеш-хроматографии с применением в качестве элюента смеси этилацетата с гексаном в соотношении 1: 3. Получают рацемическое целевое соединение (выход: 70%). Получаемое масло очищают высокопроизводительной жидкостной хроматографией с использованием колонки типа "Chiralcel OD", при этом получают соединения 3Й (основной) и 3З (неосновной).
Пример 10
Стадия 2) Раствор 0,25 г цис-азетидинона стадии 1 в 21 мл ацетонитрила обрабатывают 2,5 мл 48%-ного водного раствора фтористого водорода. По истечении 18 часов реакционную смесь разбавляют холодной водой и экстрагируют диэтиловым эфиром. Дважды промывают водой, разбавляют бикарбонатом натрия и солевым раствором, сушат над сульфатом магния, сгущают слой диэтилового эфира. Остаток кристаллизуют из смеси этилацетата с гексаном в соотношении 1:2, при этом получают 123 мг целевого соединения в качестве бесцветного игольчатого вещества. Выход: 64%. Точка плавления: 168 - 171oC. Элементарный анализ C24H22O3FN, рассчитано: C 73,64; H 5, 66; N 3,58; найдено C 73,32; H 5,65; N 3,68.
Пример 11
Сложный этиловый эфир 4-[1-(4-фторфенил)-4-оксо-3(R))-(3-ацетокси-3- фенил-пропил)-2(S)-ацетидинил]-бензолуксусной
кислоты
Стадия 1) Аналогично стадиям 1) - 3) примера 6 с применением 5- бромбенимидин-(4-фторанилина), 5-фенилпентаноилхлорида и (S)-4- фенил-2-оксазолидинона получают 1
-(4-фторфенил)-3-(R)-(3- фенилпропил)-4(S)-4-бромфенил)-2-ацетидинон.
C24H21NOBrF
рассчит.: C 65,76; H 4,83; N 3,20
найдено: C 65,66; H 4,84;
N
3,23
Стадия 2) Продукт стадии 1) подвергают взаимодействию с N-бромсукцинимидом и перекисью бензоила аналогично примеру 4. Получаемую при этом смесь диастереомерных спиртов обрабатывают
ацетилхлоридом описанным в примере 8 образом с получением смеси диастереомерных ацетатов, которые используют на стадии 3).
Стадия 3). 0,193 г (0,858 ммоль) бромида цинка нагревают до температуры 140oC в вакууме в течение ночи, после чего охлаждают до комнатной температуры в атмосфере азота. Добавляют смесь 0,327 г (0,66 ммоль) продукта стадии 2) и 0,323 г (0,858 ммоль) 2- (трибутилстаннил)этилацетата в 4 мл диметилформамида, после чего добавляют 0,026 г (0,033 ммоль) дихлорида бис-(три-о- толуил)фосфин-палладия и смесь нагревают до температуры 80oC. Через 3 часа реакционную смесь фильтруют с помощью кизельгура марки (celite и остаток на фильтре промывают этилацетатом. Фильтрат подают в разделительную воронку, промывают водой, сушат над безводным сульфатом натрия и сгущают. Получаемый остаток подвергают хроматографии на силикагеле с применением в качестве элюента смеси этилацетата и гексанов в соотношении 30: 70. При этом получают 0,55 г (56 %) продукта в качестве смеси диастереомеров.
В результате разделения диастереомеров высокопроизводительной жидкостной хроматографией с использованием колонки типа Chiracel OD с применением в качестве элюента смеси изопропанола и гексанов в соотношении 3: 97 получают чистые диастереомеры А и Б.
Диастереомер А
1H ЯМР (CDCl3, 400
МГц) 7,30 (9 H,м), 7,21 (2H, дд, J = 4,8; 9 Гц), 6,92 (2H, т, J= 8,9 Гц), 5,73 (1H, т, J=6,5 Гц), 4,58 (1H, д, J = 2,4 Гц), 4,16 (2H, кв, J = 7,2 Гц), 3,61 (2H, с), 3,06 (1H, м), 2,06 (3H, с), 2,03
(2H, м), 1,88 (2H, м), 1,26 (3H, т, J = 7,0 Гц).
Высокопроизводительная жидкостная хроматография в колонке типа Chiracel OD с применением в качестве элюента смеси изопропанола и гексанов в соотношении 3: 97 со скоростью подачи 1,0 мл/мин: время удерживания: 12,2 мин.
MС (электронная ионизация): 503 (M+, 3), 306 (36), 141 (100).
Диастереомер Б
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц) 7,30 (9 H,м), 7,21 (2H, дд, J = 4,7; 9,1 Гц), 6,92 (2H, т, J = 8,5 Гц), 5,76 (1H, т, J=6,5 Гц), 4,58 (1H, д, J = 2,2 Гц), 4,15 (2H,
кв, J = 7,1 Гц), 3,61 (2H, с), 3,07 (1H, м), 2,06 (3H, с), 1,97 (2H, м), 1,77 (2H, м), 1,26 (3H, т, J = 7,1 Гц).
Высокопроизводительная жидкостная хроматография в колонке типа Chiracel OD с применением в качестве элюента смеси изопропанола и гексанов в соотношении 3:97 со скоростью подачи 1,0 мл/мин: время удерживания: 17,4 мин.
MС (электронная ионизация): 503 (M+, 3), 306 (35), 141 (100).
Пример 12
Сложный этиловый эфир
4-[1-(4-фторфенил)-4-оксо-3(R)-[3(S)- ацетокси-3-(4-фторфенил)-пропил]-2(S)-ацетидинил]-бензолуксусной кислоты
Данное соединение получают в качестве желтого масла аналогично описанному в
примере 11 способу.
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц) 7,25 (8H,м), 7,02 (2H, т, J = 8,7 Гц), 6,92 (2H, т, J = 8,9 Гц), 5,69 (1H, т), 4,58 (1H, д, J = 2,3 Гц), 4,16 (2H, кв, J = 7,1 Гц), 3,61 (2H, с), 3,06 (1H, м), 2,05 (3H, с), 2,02 (2H, м), 1,87 (2H, м), 1,26 (3H, т, J =7,1 Гц).
Пример 13
4-[1-(4-фторфенил)-4-оксо-3(R)-[3(S)-гидрокси-3-(4-фторфенил)- пропил] -2)-ацетидинил]-бензолуксусная кислота
0,225 г (0,43 ммоль) продукта примера 12 растворяют в смеси 11,2 мл метанола и
22,
4 мл триэтиламина. Медленно добавляют 78 мл воды и получаемую смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, после чего триэтиламин и метанол удаляют в вакууме. Остаток доводят до pH
добавлением 1 мл 1-м. хлористоводородной кислоты, после чего в смеси разбавляют небольшое количество твердого хлористого натрия, получаемый белый осадок собирают путем вакуумной фильтрации, промывают
водой и сушат в вакууме. Получают 0,175 г (90 %) целевого продукта в качестве белого твердого вещества.
1H ЯМР (CDCl3, 400 МГц) 7,27 (6H,м), 7,22 (2H,м), 7,01 (2H, т, J=8,7 Гц), 6,93 (2H, т, J = 8,4), 4,70 (1H, т), 4,61 (1H, д, J = 2,4 Гц), 3,65 (2H, с), 3,08 (1H,м), 1,94 (4H, м).
ВРМС (бомбардировка быстрыми атомами): рассчитано для
(M+H) C26H24NO4F2: 452,1673;
найдено: 452,1681.
Пример 14
(3R, 4S)-1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3(R,
S)-гидроксибутил] - 4-(фенил-метокси)фенил]-2-ацетидинон
100 мг (0,2 ммоль) продукта примера 6 в тетрагидрофуране обрабатывают 0,075 мл (0,225 ммоль) 3-м. бромида метилмагния при температуре
-78oC, после чего перемешивают в течение 3 часов. Реакцию прекращают с помощью хлористого аммония, получаемый продукт экстрагируют хлористым метиленом и получаемый экстракт сгущают с
получением масла, которое подвергают хроматографии на силикагеле с применением в качестве элюента смеси гексана и этилацетата. Получают 40 мг целевого продукта в качестве масла.
C32H29NO3F3
рассчит.: C 74,84; H 5,69; N 2,73
найдено: C 74,26; H 5,88; N 2,83.
Далее представлены примеры (см. в конце описания) препаратов предлагаемой фармацевтической композиции, причем под термином "активное вещество" понимается соединение вышеприведенной общей формулы (I).
Объектом изобретения являются пригодные в качестве гипохолестеринемического средства замещенные гидроксилом азетидиноны формулы I, где Ar1 и Ar2 - арил или замещенный остатком R4 арил; Ar3 - замещенный остатком R5 арил; R и R2 выбраны из группы, включающей OR6, -O(СО)R6; R1 и R3 выбраны из группы, включающей водород и низший алкил; q = 0 или 1; r = 0 или 1; m, n и p - число 0 - 2, при этом по меньшей мере один из индексов q и r = 1, и сумма индексов m, n, р, q и r равна 2 или 3; если р = 0, и r = 1, то сумма m, q и r равна 2 или 3; R4 выбран из группы, включающей галоид, -OR6, -O(CH2)1-5 OR7; R5 выбран из группы, включающей -OR6, -O(CO)R6 -(низший алкилен)COOR8; R6, R7 и R8 выбраны из группы, включающей водород, низший алкил, не замещенный или замещенный арилом. Дальнейшим объектом изобретения являются способ снижения содержания холестерина в сыворотке путем применения предлагаемых соединений как таковых или в комбинации с ингибитором биосинтеза холестерина, а также содержащие их фармацевтические композиции, обладающие гипохолестеринемической активностью. 3 с. и 7 з.п., 3 табл.