Способ получения производных l-тирозина - SU450399A3

1

Изобретение относится к получению производных L-тирозина, обладающих физиологической активностью, которые могут найти применение в качестве лекарственных препаратов .

Получаемые по предлагаемому способу соединения имеют общую формулу I

R

fV-Cn rCH-OOOri

IT алкокси- или алкилмеркаптогруппы, галогенили сульфгидрильные группы у атомов углерода . Гидролиз полученных анилидсв осуществляют преимуп,ественно разбавленными кислотами при нагревании, например 10%-ной соляной кислотой при температуре обратного холодильника . Гидролиз т.южно проводить также сильными кислотами, например концентрированной бромистоводородной кислотой, особенно если одновременно должно быть осуществлено расщепление имеющихся эфирных связей. Пример 1. L-N-бензоил-З-метокситирозиланилид . 31,5 г (0,1 моля) D, L-N-бекзоил-З-метокситирозина при нагревании растворяют в 200 мл 0,05 н. раствора едкого натра. Добавляют 150 мл 2М раствора ацетата натрия и затем фильтруют. К раствору добавляют сначала 300 мл 0,1 н. цитратного буфера (рН 5,0), затем 2 г хлорида цистеина и 18 мл дистиллированного анилина. Затем добавляют раствор примерно из 3 г папаина в 300 мл 0,05 н. цитратного буфера и добавлением ледяной уксусной кислоты или 1 н. раствора едкого натра устанавливают значение рН 5,80. По истечении короткого времени начинает осаждаться L-анилид. По истечении примерно 48 ч его отсасывают, промывают 300 мл воды и сущат. Анилид может быть перекристаллизован из метанола/воды. Выход количественный. Т. пл. 208,0-208,5°С. Вычислено, %: С 70,75; Н 5,68; N 7,18. C23H22N204 (390,45). Найдено, %: С 70,58; Н 5,70; N 7,00. Удельное вращение: а о +40,0°±0,15° (конц. 1,000 в метаноле). Оставшийся после отсасывания анилида маточный раствор нагревают до 80°С и после добавления 100 мл метанола, концентрированной соляной кислотой значение рН доводят до 2,0. Охлаждают, отсасывают и сушат. Полученный D-N-бензоил-3-метокситирозин можно затем рацемировать и снова применять как исходный продукт. Омыление в L-3-окситирозин. 9,75 г (25 ммолей) L-N-бензоил-З-метокситирозиланилида с 50 мл 48%-ной бромистоводородной кислоты в течение 7 ч кипятят с обратным холодильником. Охлаждают и отсасывают выделившуюся бензойную кислоту. Дополнительно промывают не очень холодной 49%-ной бромистоводородной кислотой. Слегка окрашенный в желто-коричневый цвет раствор в вакууме сгущают. После того как раствор упарен досуха, добавляют 50 мл дистиллированной воды и повторно упаривают досуха . Остаток растворяют в 500 мл метанола и концентрированным раствором аммиака устанавливают значение рН 6,0, причем осаждается L-3-окситирозин, который оставляют стоять в течение ночи в холодильном щкафу, отсасывают и сушат при температуре не выше 50°С. Выход 5,0 г. Соединение при температуре кипения растворяют в 180 мл воды, фильтруют над углем и под азотом охлаждают сначала до 20°С. До начинающейся кристаллизации оставляют стоять при этой температуре, затем ставят в течение ночи в холодильный шкаф. На следующий день отсасывают и сушат при температуре не выше 50°С. Выход 3,4 г (69,2% теории ). Маточный раствор содержит еще 0,9 г L-3окситирозина . Общий выход 4,3 г (87,4% теории ), т. пл. (290°С, разл.), удельное вращение -12,15±0,13 (конц.4,000 в 1 н. соляной кислоте). Соответствующий результат получают, если в качестве протеазы применяют бромелин или фицин. Омыление в L-3-метокситирозин. 9,75 г (25 ммолей) ЬнМ-бензоил-З-метокситирозиланилида , размещивая с 100 мл 10%ной соляной кислоты, в течение 16 ч кипятят с обратным холодильником. Затем охлаждают и несколько раз извлекают эфиром. Водную фазу фильтруют над углем и в вакууме дистиллируют досуха. Остаток растворяют в ацетоне и диэтиламином устанавливают значение рН 6. До начинающейся кристаллизации оставляют стоять сначала при комнатной температуре, а затем в течение ночи в холодильном шкафу. Отсасывают и сушат. Затем перекристаллизовывают из воды. Выход 4,1 г (71,6% теории). При высушивании при 40°С получают L-3метокситирозин в виде моногидрата с т. пл. 241-242°С. -5,83° (конц. 1,0 в 1 н. НС1). Пример 2. Ь-Ы-бензоил-4-метокси-ж-тирозиланилид . 31,5 г (0,1 моля) Ь-|М-бензоил-4-метокситирозина , нагревая, растворяют в 200 мл 0,5 н. раствора едкого натра. Добавляют 150 мл 2М раствора ацетата натрия и затем фильтруют . К прозрачному раствору, размешивая, добавляют сначала 300 мл 0,1 н. цитратного буфера (рН 5,0), затем 2 г цистеинхлорида и 18 мл дистиллированного анилина. Затем добавляют раствор примерно из 3 г папаина в 300 мл 0,05 н. цитратного буфера и добавлением ледяной уксусной кислоты или 1 н. раствора едкого натра устанавливают значение рН 5,80. При размешивании при температуре 35°С реакция идет в течение 48 ч, причем после приблизительно 8,24 и 32 ч добавлением леяной уксусной кислоты снова устанавливают значение рН 5,80. После 48 ч отсасывают, тщаельно промывают водой и сушат. Анилид пеекристаллизовывают из метанола/воды. Выход 90-95% теории. Т. пл. 161 -162°С. Удельное вращение а- о +43,6° (конц. ,000 в СНзОН). Оставшийся после отсасывания анилида маточный раствор нагревают до 80°С и после добавления 200 мл метанола, концентрированной соляной кислотой устанавливают значение рН 2,0. Охлаждают, отсасывают и сушат. Полученный таким образом О-лета-Ы-бензоил-4-метокситирозин может быть рацемирован обычным методом и снова применен в качестве исходного продукта.

Пример 3. Ь-М-бензоил-,и-тирозиланилид.

28,5 г (0,1 моля) D, L-N-бензоил-Аг-тирозина при нагревании рг.створг.ют в 200 л 0,5 н. раствора едкого натра. Добавляют i50 мл 2М раствора ацетата натрия и затем фильтруют. К прозрачному раствору, размешивая, добавляют сначала 300 мл 0,1 н. цитратного буфера (рН 5,0), затем 2 г хлорида цистеина и 18 мл дистиллированного анилина. Затем добавляют раствор примерно 3 г папаина в 300 мл 0,05 н. цитратного буфера и посредством добавления ледяной уксусной кислоты или 1 н. раствора едкого натра устанавливают значение рН 5,80. При температуре 35° и, размешивая, дают реагировать в течение 48ч, причем после 8, 24 и 32 ч посредством добавления ледяной уксусной кислоты снова устанавливают значение рН 5,80. После 48 ч отсасывают , тшательно промывают водой и сушат . Анилид может быть перекристаллизован из водного метанола.

Выход 80-90% теории.

Т. пл. 218-219Т.

Удельное вращение о. +44,0° (конц. 0,50 в СНзОН). Оставшийся после отсасывания анилида маточьый раствор нагревают до 80°С и после добавления 200 мл метанола , концентрированной соляной кислотой устанавливают значение рН 2,0. Охлаждают, отсасывают и сушат. Полученный таким образом D-N-бензоил-л-тирозин можно рацемировать обычным методом и снова применять как исходный продукт.

Пример 4. Ь-л«-М-бензоил-0-метил- г-тирозмланилид .

29,9 г (0,1 моля) D, L-N-бензоил-О-метил-жтирознна , нагревая, растворяют в 200 мл 0,5 н. раствора едкого натра. Добавляют 150 мл 2М раствора ацетата натрия и затем фильтруют. К прозрачному раствору, размешивая , добавляют сначала 300 мл 0,1 н. цитратного буфера (рН 5,0), затем 2 г хлорида цистеина и 18 мл дистиллированного анилина. Затем добавляют раствор примерно 3 г панаина в 300 мл 0,05 н. цитратного буфера и добавлением ледяной уксусной кислоты или I н. раствором едкого натра устанавливают значение рН 5,80. При температуре 35°С и размешивании реакция идет в течение 48 ч, причем носле л; 8,24 и 32 ч добавлением ледяной уксусной 1сислот,1 снова устанавливают значение рН 5,80. Пос;:е 48 ч отсасывают, хорошо промывают водой и сушат. Анилид может быть перекристаллизован из водного метанола .

Выход 90-95% теории.

Т. пл. 178-179°С.

,20

Удельное вращение 41,8° (конц. 0,5вСНзОН).

Оставшийся после отсасывания анилида маточный раствор нагревают до 80°С и после добавления 200 мл метанола, вводят концентрированную соляную кислоту до установления значения рН 2,0. Охлаждают, отсасывают н сушат. Полученный таким образом D-N-бензоил-О-метил-ж-тирозин можно рацемировать обычным методом и снова нрименять как исходный продукт.

Ь-4-окси-л(-тирозин.

9,75 г (25 ммолей) Ь-М-бензоил-4-метоксил«-т1фозиланилнда с 50 мл 48%-ной бромистовсдсродной кислотой в течение 7 ч кипятят с обратным холодильником. Охлаждают и отсасывают выделившуюся бензойную кислоту. Дополнительно промывают не очень холодной 48%-ней бро.мистоводородной кислотой. Слегка окрашенный в желтый цвет раствор в вакууме сгушают досуха. Остаток растворяют в 50 мл метанола и смешивают с 5 мл окиси пропилена. Выдерживают примерно в течение одного часа нри 50°С, нока не Судет достигнуто значение рН 6,0. Затем оставляют стоять в течение ночи в холодильном шкафу, отсасывают н перекрнсталлизовывают кз воды без доступа воздуха. Охлаждают и до начала кристаллизации оставляют стоять сначала при -о:,;натной температуре, а затем в течение ночи в холодильном шкафу. На следуюш,ий день отсасывают и сушат при температуре не вы1не 50°С.

Выход 3,4 г, 69,0% теории.

Т. пл. 290°С (разл.).

Удельное враш,ение а D -12,15° (конц. 4,000 в 1 н. НС1 (Вещество идентично нолученному но примеру 2 L-3-окситирозину).

L-4-метокси-ж-тирознн.

9,75 г Ь-Н-бензоил-4-метокси-Л1-тирозиланилнда и 100 мл 2 н. соляной кислоты в течение 24 ч кипятят с обратным холодильником. Охлаждают , 3 раза экстрагируют метиленхлоридом и отфильтрованную над углем водную фазу упаривают в вакууме досуха. Остаток растворяют в 50 мл спирта. Добавляют 5 мл окиси пропилена и выдерживают 1 ч прн температуре 50°С, пока не будет достигнуто значение рН 6,0.

Оставляют стоять в течение ночи в холодильном шкафу, отсасывают и перекристаллнзовывают из воды. Водный раствор на ночь ставят в холодильный шкаф, отсасывают и сушат прн 70°С в камерной сушилке с циркуляцией воздуха.. Получают 61%-ный выход L-4-метокси-лг-тирозипа в виде моногидрата с т. пл. 251-253°С.

90

Удельное вращеинё « о -8,5° (конц

:::2,000 В 1 Н. НС1).

L-лг-тирозин.

9,0 г L- N -бензоил - м-тирозиланилида и

100 мл соляной кислоты 1 : 1 или 9,35 г L-Nбензоил-О-метил-у1/-тирозиланилида и 50 у

48%-ной бромистоводородной кислоты в течение 7 ч кипятят с обратным холодильником. Охлаждают, разбавляют водой и три раза экстрагируют метиленхлоридом. Затем отфильтрованную над углем водную фазу упаривают Б вакууме досуха. Остаток растворяют в 50 мл метанола. Добавляют 5 мл окиси пропилена и выдерживают 1 ч при 50°С до установления значения рН 6,0. Оставляют стоять в течение ночи в холодильном шкафу, отсасывают и перекристаллизовывают из воды. Получают Ь-л«-тирозин (т. пл. 296-298°С) с 80%-ным выходом.

9П

Удельное вращение да о -9,2° (конц 2,000 в 1 н. НС1).

Предмет изобретения

1. Способ получения производных L-тирозина общей формулы I

- СН1Ш .- с о о н I.

где R - водород, окси- или низшая алкоксигруппа ,

RI - окси- или низшая алкоксигруппа, причем, по меньшей мере один из радикалов

R И; RI означает оксигруппу, отличающийся тем, что, с целью повышения степени чистоты целевого продукта, соединение общей формулы

;-CH -CH-oOO i

где R и RI - имеют указанные значения, подвергают взаимодействию с анилином или его производным в буферном растворе при рН 5-7 в присутствии протеаз и полученный при этом замешенный анилид подвергают гидролизу минеральной кислотой с последующим выделением целевого продукта в свободном виде известным способом.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве протеаз используют бромелин, фицип или папаин. Приоритет по признакам:

22.07.71при R -водород;

RI - низшая алкоксигруппа.

03.01.72при R - оксигруппа,

RI - оксигруппа. 01.04.72 при R -низшая алкоксигруппа.