Способ рекомбинантного получения полипептида в прокариотических клетках - RU2016106950A
Код документа: RU2016106950A
Формула
1. Способ получения рекомбинантным путем полипептида в Е. coli, включающий следующие стадии:
- культивирования NADH-дегидрогеназа II-недостаточного штамма Е. coli, экспрессирующего полипептид, и
- выделения полипептида из клеток или из культуральной среды,
в котором полипептид не является ферментом дыхательной цепи или полипептидом, кодируемым геном, который индуцирует устойчивость к антибиотикам.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что NADH-дегидрогеназа II-недостаточный штамм Е. coli имеет сопоставимую степень потребления кислорода, что и штамм Е. coli с тем же генотипом, за исключением наличия у него функционально активной NADH-дегидрогеназы II.
3. Способ по любому из пп. 1 и 2, отличающийся тем, что NADH-дегидрогеназа II-недостаточный штамм Е. coli обладает сопоставимой интенсивностью роста со штаммом Е. coli с таким же генотипом, за исключением наличия у него функционально активной NADH-дегидрогеназы II.
4. Способ по любому из пп. 1 и 2, отличающийся тем, что NADH-дегидрогеназа II-недостаточный штамм Е. coli обладает повышенной степенью продуктивности по сравнению со штаммом Е. coli с таким же генотипом, за исключением наличия у него функционально активной NADH-дегидрогеназы II.
5. Способ по любому из пп. 1 и 2, отличающийся тем, что NADH-дегидрогеназа II-недостаточный штамм Е. coli является штаммом Е. coli K12.
6. Способ по любому из пп. 1 и 2, отличающийся тем, что NADH-дегидрогеназа II-недостаточный штамм Е. coli имеет генотип thi-1, Δndh, ΔpyrF.
7. Способ по любому из пп. 1 и 2, отличающийся тем, что NADH-дегидрогеназа II-недостаточный штамм Е. coli дополнительно дефицитен по оксидазе типа bd.
8. Штамм Е. coli K12, который имеет генотип thi-1, Δndh, ΔpyrF.
9. Применение NADH-дегидрогеназа II-недостаточного штамма Е. coli для получения рекомбинантного полипептида, причем полипептид не является ферментом дыхательной цепи или полипептидом, кодируемым геном, который индуцирует устойчивость к антибиотикам.
10. Применение по п. 9, отличающееся тем, что NADH-дегидрогеназа II-недостаточный штамм Е. coli имеет генотип thi-1, Δndh, ΔpyrF.
11. Применение по любому из пп. 9 и 10, отличающееся тем, что NADH-дегидрогеназа II-недостаточный штамм Е. coli дополнительно дефицитен по оксидазе типа bd.
