Способ получения 3-/5-рибонуклеотидов/ - SU1303036A3

Код документа: SU1303036A3

Описание

Изобретение относится к микробиологии , и касается получения биологически активных веществ.

Цель изобретения - разработка способа получения новых биологически активных соединений, обладающих высокой антибактериальной активностью in vivo в отношении грамположитель- ной и грамотрицательной микрофлоры.

Пример, Streptomyces rochei NRRL 3533 выращивают в среде,, содержащей , г/л: глюкоза 10, Difco пентон 4, Difco дрожжевой экстракт 4, MgSO

«7Н,0 0,5; 2; 4, в те- чение трех дней при 28 С-в круговой

качалке. Мицелий используют для ино- кулирования ферментационной среды указанного состава. Ферментацию проводят в течение 48 ч при в круговой качалке, В конце 48-го часа ин- тывают как описано выше, Метанольные кубирования добавляют U-57930 до ко- элюаты из колонки с Амберлитом ХАД-2 нечной концентрации 50 мг/л и ферментацию продолжают при 32 С, Спустя

Фракции 12-80 объединяют, концентрируют до водного раствора и сушат вымораживанием до получения препарата АДА-34,1 в количестве 12,22 г,

В другой серии опытов 6 л -ферментационного бульона, содержащего 2 г трансформированного U-57930, обрабасобирают , раствор, не концентрируя досуха, хроматографируют на Дауэкс-1 Для зтого приготавливают колонку с 300 мл Дауэкс-1 (Х-4) в ацетатной форме. Через колонку пропускают ме- танольньш раствор АДА-143В рН 8,2. Отработанный продукт собирают со скоростью 2,5 мл/мин - фракции 1-60 по 20 мл. Затем колонку промывают 1,5л воды (10 мл/мин; фракции 66- 108), После этого колонку злюируют 5%-ной уксусной кислотой (скорость 10 мл/мин, фракции 109-310).. Получа- 35 ют следующие группы фракций:

12 ч еще раз добавляют U-57930 до концентрации 150 мг/л. Соединение U 57930 имеет следующую структурную формулу:

Н-С-С1

CONH-CH НО/-0.

SCH.

он

Спустя еще 12 ч инкубирования концентрацию и-57930 повышают до 250 мг/л, Ферментацию продолжают при 32°С в течение 24 ч. Далее собирают фильтраты культур и определяют содержание сое- динения и-57930. Концентрация последнего не более 1 мг/л, 249 мг/л соединения транспортированы в бионеактивный материал.

Используемый штамм .Streptomyces rochei я вляется известньм и хранится в коллекции NRILL под номером 3533,

Берут 12 л ферментационного бульона , содержащего 3 г инактиварованного и-57930, фильтруют при рН 7,7, Содер- жащую мицелий лепешку промывают 1,2 л воды и удаляют. Прозрачный фильтрат и промьшки объединяют, устанавливают рН 6,0 и пропускают через колонку,

тывают как описано выше, Метанольные элюаты из колонки с Амберлитом ХАД-2

заполненную 600 мл Амберлита ХАД-2 со скоростью потока 40 мл/мин, Отра- ботанньм продукт тестируют на биоактивность до и после обработки щелочной фосфатазой и сливают. Колонку промьгеают 2 л воды. Водную промывку также проверяют на биоактивность перед и после обработки щелочной фосфатазой и сливают. Затем колонку элю- ируют смесью метанол - вода (70 : : 30 об./об.), Собирают фракции по 20 мл со скоростью 20 мл/мин.

В другой серии опытов 6 л -ферментационного бульона, содержащего 2 г трансформированного U-57930, обрабатывают как описано выше, Метанольные элюаты из колонки с Амберлитом ХАД-2

собирают, раствор, не концентрируя досуха, хроматографируют на Дауэкс-1, Для зтого приготавливают колонку с 300 мл Дауэкс-1 (Х-4) в ацетатной форме. Через колонку пропускают ме- танольньш раствор АДА-143В рН 8,2. Отработанный продукт собирают со скоростью 2,5 мл/мин - фракции 1-60 по 20 мл. Затем колонку промывают 1,5л воды (10 мл/мин; фракции 66- 108), После этого колонку злюируют 5%-ной уксусной кислотой (скорость 10 мл/мин, фракции 109-310).. Получа- ют следующие группы фракций:

313

группы 1 и J. объединяют, концентрируют до водного раствора и высушивают вымораживанием до получения препарата АДА-2.1 в количестве 1,48 г. Группы 3 и 4 также объединяют и обра- батывают аналогичным образом до получения АДА-2,2 в количестве 2,5 г.Препараты АДА-2.1 и АДА-2.2 после обработки щелочной фосфатазой дают U 57930.

Препараты АДА-34.1, .1 и АДА- 2.2 объединяют и очищают методом распределения в двойном противотоке. Ма- териал, полученный при объединении указанных препаратов,, в количестве 160,20 г растворяют в 25 мл (каждая фаза) системы растворителя, состоящей из равных объемов 1-бутанола и воды (1:1). Эти растворы вводят в центральные трубки изготовленного из стекла устройства для двойного распределения в противотоке (100 трубок, 25 мл/фаза). Полученное распределение анализируют спустя 150 циклов на биоактивность перед (-Е) и после (+Е) обработки щелочной фосфатазой. Получены следующие результаты:

Нижний коллектор

Zone (Sarcina lutea-sensitive)

-Е

+Е

Нижняя машина Zone (S.lutea- sensitive)

-Е

О Следы

+Е

45 46

Получают следующие группы фракций. Каждую из групп концентрируют до водного раствора и высушивают вымораживанием до получения соответствующих препаратов: группа I - нижний коллектор 1-50} группа II - нижний коллектор 51-100; нижняя машина - 50-30; группа III - нижняя машина 29-0,верхняя машина 1-50, верхний коллектор 100-30.

5 1303036

Получают следующие группы препаратов: из первой группы - препарат АДА.-47.1. (9,78 г); из второй - пре парат АДА-47.2 (0,30 г) из третьей - препарт АДА-47.3 (5,29 г). Препараты 5 АДА-47,2 и АДА-47.3 объединяют и очищают с помощью хроматографии на ДЕАЕ-Сефадексе.

Перемешивают 300 г ДЕАЕ-Сефадекса А-25 в течение .1 ч с водой и в течение О 2 ч с 0,5 н, водной гидроокисью натрия . Ионообменник промывают водой до тех пор, пока рН не достигает значения -7,5. Затем материал перемешивают в течение 2 ч с 0,5 н.водной ук- 15 сусной кислотой, промьшают водой до нейтрального рН, выпивают в колонку и набивают под давлением 0,9 кг до постоянного веса. Затем колонку промывают 4 л воды, 8 л 0,1%-ного вод- 20 ного раствора трис-(оксиметил)ами- нометана (ТОАМ)и 3 л 0,03 М ТОАМ- ацетатного буфера рН 8,0 (получают при растворении 3,64 г ТОАМ в 800 мл воды, устанавливают рН 8,0 ледяной уксусной кислотой и затем доводят объем до 1 л). Исходные материалы - препараты АДА-47.,2 и АДА-47.3 в количестве приблизительно 5,50 г растворяют в 20 мл 0,03 М ТОАМ-ацетатного -30 буфера рН 8,О-и вводят в верхнюю часть колонны. Затем колонну элюиру- ют потоком вниз 0,3 М ТОАМ-ацетат- ным буфером рН 8,0. Собирают фракции 1-190 (20мл). В этот момент элюирова- 35 ние колонны начинают вести снизу вверх. Фракции A,B,C,D и Е (по 1 л каждая) собирают..

Тестирование на биоактивность, перед (Е) и после (+Е) обработки 40 щелочной фосфатазой дает следующие результаты:

Фракция

Zone (S.lutea- sensitive)

-Е

лучают;

ппа

III

VII

43,5

23,5

о о

15 17

22,5

20,5

о о 1620

52,5

54,5

Фракции

34-38

75-90 101-111 114-150 151-164 165-186

С, 1 лист

Объем, мл 280 (АДА-69В)

330 (АДА-69С) 180 (АДА-69В) 580 (АДА-69Е) 100 (АДА-69Г) 125 (АДА-69С) (АДА-69А)

Группа I (АДА-69В) содержит U- 57930 и ее сливают. Группа II (АДА- 69С) содержит неизвестный материал который дает U-57930 при обработке щелочной фосфатазой. УФ: нм.

Группа III (АДА-69Б) содержит U-57930- -цитидилат, и ее затем обрабатывают. УФ: 270 нм.. Группа IV (АДА-69Е) содержит U-57930-аденилат. УФ:Л,,ц 260 нм. Группа V (АДА-69Г) содержит смесь U-57930-аденилата, U-57930-ури- дилата и и 57930-г.уанилата. Группа VI (АДА-69С) содержит U-57930-гуани55

лат, и ее затем обрабатывают. УФ Дмакс 254, плечо на 275 нм. Группа VII

(АДА-69А) содержит смесь U-57930-rya- .нилата и U-57930-уридилата, затем этот раствор обрабатывают.

Группы III, IV и VI пропускают через колонки, содержащие Амберлит ХАД-2. Отработанный продукт сливают. Колонки промьшают водой,, а затем элю- ируют смесью метанол.- вода (70 : : 30 об./об.). Фракции анализируют (УФ) и тестируют на биоактивность перед и .после обработки щелочной фос- фатазой. Соответствзтощие фракции объеции .51-60 содержит и-57930-аденш1ат, фpaкци 62-73 (АДА-92.В) - U-57930- -уридилат, фракции 75-110 - U-57930- -гуанилат.

Подготавливают колонку из 50 мл Амберлита ХАД-2. Группу фракций АДА- 94В, содержащую U-57930-уридилат, про пускают через колонку со скоростью 2 мл/мин. Отработанный продукт слидиняют , концентрируют до водного рас- О вают. Колонку промьшают 200 мл воды.

твора и высушивают вымораживанием.

В табл. 1 приведены данные об использованном количестве Амберлита для каждой группы, количестве воды, которой осуществляют промывку, ме- танольного элюата и материала, кото- рьм получают.

Материал, полученный из группы III, носит название АДА-73.1, из группы 1У-АДА-74.1, из группы VI-AДA-75.1 Удаление ТОАМ-ацетатного буфера из группы V(AflA-69F) и группы VII (АДА-69А) с помощью хроматографии на Амберлите ХАД-2 осуществляют еле- 25 дующим образом.

Готовят колонку из 300 мл Амберлита ХАД-2. Группы V и VII, содержащие смесь и-57930-аденилата,и-57930- -уридилата д U-57930-гуанидилата, npo-jQ пускают через колонку. Отработанный продукт сливают. Колонку промывают 600 мл воды. Отработанный продукт сливают Колонку злюируют смесью метанол - вода (70:30). Фракции, содержащие биоактивный материал, после обработки щелочной фосфатазой объединяют , 300 мл смеси концентрируют до водного раствора и высушивают вымораживанием , в результате чего полу- .,. чают препарат АДА-71.1 (670 мг).

Берут 600 мл ДЕАЕ-Сефадекса в ацетатной форме, промьшают 0,ОЗМ ТОАМ- ацетатом рН 8,0, набивают в стеклянную колонку (внешний диаметр 4,5 см, высота 40 см) под гидростатическим давлением.

Препарат АДА-71.1. растворяют в Ю мл 0,03 М ТОАМ-ацетатного буфера рН 8,0 и вводят в верхнюю часть колонки . Колонку элюируют: 0,ОЗМ ТОАМ- ацетатом, рН 8,0 (фракции 1-79);0,12М ТОАМ-ацетатом, рН 8,0 (фракции 80- 395); 0,25М ТОАМ-ацетатом, рН §,0

Промывки сливают. Колонку элюируют смесью метанол - вода (70:30 об./об.). Фракции,содержащие (по данным УФ-спек- троскопии) U-57930-уридилат, объеди- J5 няют (200 мл), концентрируют до вод- ного раствора и высушивают вымораживанием до получения АДА-95.1 (60 мг). Характеристики U-57930 3-(5 -цити- дилата) - ИК-спектры поглощения (в нуджоле и КВг) и наиболее сильные пики приведены в табл. 2-5.

Образец - эмульсия в минеральном масле. Т„дкс 87% (1848,0 ), при 3800 плотность 0,964 см /рт.

Образец - таблетка КВг.. Т,а 100%. (403.1); при 400 см Т 78%,- плотность 0,964 .

УФ спектр поглощения,мопс (а): в воде при. рН 2,0 279 нм (6,5); рН 7,0 270-нм (9,9); рН 11,0 271 нм (9,6).

.jNjO, S., (Мол.м.715). Рассчитано,%: С 43,64, Н 6,01; N 9,79; О 26,88; S 4,47, С1 4,89; Р 4,33

Cct. М07°(С, 0,854, вода). Хорошо растворяется в воде, метаноле и этаноле. Мало растворим в ацетоне и других кетонах, этилацетате и других сложных: эфидах, хлороформе, метиленхлориде. Нерастворим в насыщенных углеводородах. Антибактериальная активность U-57930 3-(5 -ци- тидилат) неактивен in vitro. Однако обработка щелочной фосфатазой или . фосфодиэстеразой I приводит к получению и-57930, которьш высокоактивен против различных грамположительных микроорганизмов как in vitro, так и in vivoo Т.пл. 205-207 С(с разложением ) о

Характеристики U-57930 3-(5-адени- лата) - ИК-спектр поглощения(в нуджоле и КВг) и наиболее сильные пики

(фракции 396-750).55

Фракции по 20 мл собирают, анали- приведены в табл. 6-9. зируют с помощью УФ-спектроскопии и Образец - эмульсия в минеральном тестируют на биоактивность до и после масле. 85% (1864,4); при обработки щелочной фосфатазой. Фрак- 3800 плотность О, 964 см Урт.

ции .51-60 содержит и-57930-аденш1ат, фpaкци 62-73 (АДА-92.В) - U-57930- -уридилат, фракции 75-110 - U-57930- -гуанилат.

jQ .,.

Промывки сливают. Колонку элюируют смесью метанол - вода (70:30 об./об.). Фракции,содержащие (по данным УФ-спек- троскопии) U-57930-уридилат, объеди- 5 няют (200 мл), концентрируют до вод- ного раствора и высушивают вымораживанием до получения АДА-95.1 (60 мг). Характеристики U-57930 3-(5 -цити- дилата) - ИК-спектры поглощения (в нуджоле и КВг) и наиболее сильные пики приведены в табл. 2-5.

Образец - эмульсия в минеральном масле. Т„дкс 87% (1848,0 ), при 3800 плотность 0,964 см /рт.

Образец - таблетка КВг.. Т,а 100%. (403.1); при 400 см Т 78%,- плотность 0,964 .

УФ спектр поглощения,мопс (а): в воде при. рН 2,0 279 нм (6,5); рН 7,0 270-нм (9,9); рН 11,0 271 нм (9,6).

.jNjO, S., (Мол.м.715). Рассчитано,%: С 43,64, Н 6,01; N 9,79; О 26,88; S 4,47, С1 4,89; Р 4,33

Характеристики U-57930 3-(5-адени- лата) - ИК-спектр поглощения(в нуджоле и КВг) и наиболее сильные пики

Образец таблетка КВч. (405,0); при 4000 см т 77%, плот- ность 0,964 см /рт.

УФ-спектр поглощения, Я 1, в воде при рН 2,0 258 нм (16,0), рН 7,0 261 нм (16,5); рН 11,0 261 нм (16,0)

N,0,0 SC1P Мол.м. 723).

Рассчитано,%: С 44,81 Н 5,94; N 13,55; О 22,13; S 4,41; Ct 4,84; Р 4,28.

Найдено,%: .N 12,87; S 5,39; CI 4,76; Р 3,83.

Ld.1 +94 (С, 0,887, вода).

Хорошо растворим в воде, метаноле и этаноле. Слабо растворим в ацетоне и других кетонах, этилацетате и других сложных эфирах, хлороформе и метиленхлориде. Нерастворим в насыщенных углеводородах.

.Антибактериальная активность. U- 57930 3-(5 -аденилат) неактивен in vitro. Однако после обработки щелочной фосфатазой или фосфодиэстеразой I получают и-57930, который обладает высокой активностью против различных грамположительных микроорганизмов как in vitro, так и in vivo. U-57930

Образец - эмульсия в минеральном масле. Т макс 97% (8762,6); при 3800 см Т 97% , плотность 0,964 см Урт. Образец - таблетка КВч. Т 97% (405,0); при 4000 см- Т 77%; плотность 0,964 .

УФ-спектр поглощения, (а): в воде при рН 2,0 256 нм (13,4); 280 нм (8,4), рН 7,0 254 нм (14,5); 273 нм (9,7);-рН 11,0 259 нм (12,6), 266 нм (12,4).

Найдено,%: N 13, 32; S 4,86, С1 4,49; Р 3,25.

.О,,

SC1P (мол.м.739). Рассчитано , %: С 43,84; Н 5,8Г

, ,,. , г О 23,27; S 4,33; С1 4,73; 3-(5 -аденилат) активен з.п vivo (.под-30 Р 4 19.

кожно, мышам) с CD порядка 0,62 (0,48-0,79) мг/кг против S.pyogenes. Т.пл. 203,5-205°С (с разложением). Характеристика U-57930 3-(5 -уриСыЗ

2 л

Р +97 0(0, вода, 0,855). Хорошо растворяется в воде, метаноле и этаноле. Плохо растворяется

в ацетоне и других кетонах, этил- дилат) - полосы поглощения в ИК-спек- ацетате и других сложных эфирах, хло- тре (в нуджоле и КВг) и наиболее сильные пики приведены в табл. 10-13.

роформе и метиленхлориде. Нераствбрим в насьш1;енных углеводородах, Антибактериальная активность. U-57930 3-(5- -гуанилат) неактивен in vitro. ОднаОбразец - эмульсии в минеральном масле. Т.,., 86% (3764,5); при 3800 см

плотность 0,964 CM VpT.

Образец - таблетка КВг. Т 101% (405,0) ; при 4000 см , , плотность 0,964 см /рт.

УФ-спектр поглощения, X„акс (а): в воде при рН 2,0 261 нм (11,5); рН 7,0 262 нм (10,7); рН 11,0 262 нм (11,5).

(Мол.м.716).

Рассчитано,%: С 43,57; Н 5,86; N 7,82; О 29,05; S 4,46; С1 4,89; Р 4,33.

Cccjj° +105° (С, 0,94, вода).

Хорошо растворяется в воде, метаноле , этаноле. Плохо растворяется в ацетоне и. других кетонах, этил- ацетате и других сложных эфирах, хлороформе и метиленхлориде. Нераствори в насыщенных углеводородах.

Антибактериальная активность. и-5793р 3-(5 -уридилат) неактивен in vitro. Однако после обработки щелочной фосфатазой или фосфодизсте- разой I получают U-57930, обладающий высокой активностью против различных грамположительных организмов как in vitro, так и in vivo. Т.пл. 202-203 0 (с разложением). Характеристики U-57930 3-(5 -гу- анилата) - полосы ИК-поглощения (нуд- жоль КВг); и наиболее сильные пики приведены в табл. 14-17.

УФ-спектр поглощения, (а): в воде при рН 2,0 256 нм (13,4); 280 нм (8,4), рН 7,0 254 нм (14,5); 273 нм (9,7);-рН 11,0 259 нм (12,6), 266 нм (12,4).

Найдено,%: N 13, 32; S 4,86, С1 4,49; Р 3,25.

.О,,

Рассчитано ,

СыЗ

2 л

Р +97 0(0, вода, 0,855). Хорошо растворяется в воде, метаноле и этаноле. Плохо растворяется

в ацетоне и других кетонах, этил- ацетате и других сложных эфирах, хло- роформе и метиленхлориде. Нераствбрим в насьш1;енных углеводородах, Антибактериальная активность. U-57930 3-(5- -гуанилат) неактивен in vitro. Одна40 ко после обработки щелочной фосфата- .зой или фосфодиэстеразой I получают и-57930, который обладает высокой активностью против различных грампо- ложительньк организмов как in vitro,

45 так и in vivo. Т.пл. 219-220 С (с .разложением).

Полученные вещества проявляют активность против различных грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов , в связи с чем они могут использоваться в качестве дезинфеци- .рующих и лечебных средств. В частности , они активны в отношении Staphy- lococcus aureus, микоплазм, Pseudo- monas mirabilis. Streptococcus hemo- lyticus. В качестве антибактериальных агентов их используют в виде различных композиций.

Возможные формы и композиции антибактериальных средств.

Капсулы (1).

Готовят твердые желатиновые капсулы для орального приема, содержа- щие,г: и-57930 Е 250,- кукурузный крахмал 100} тальк 75; стеарат магния 25. Компоненты тщательно перемешивают и заполняют капсулы. Используют для систематического лечения взрослых больных путем орального приема через каждые 6 ч. Можно готовить капсулы с содержанием активного компонента 10; 25;50;100;500 мг вместо 250 г.

Капсулы (2).

Готовят желатиновые капсулы для орального применения, содержащие,г: соединение U-57930E 200; тетрациклина гидрохлорид 250; тальк 75, стеарат магния 25. Тетрациклин может быть заменен хлорамфениколом, окситетрациклином , хлортетрациклином, фумагил- лином, стрептомицином, дигидроново- биоцином или новобиоцином. Если вместо тетрациклина используют пенициллин G, то доза его составляет 250000 ёд. на капсулу.

Таблетки (3).

Берут 500 г соединения U-57930E, 125 г лактозы, 65 г кукурузного крах мала, 25 г стеарата магния, и 3 г легкого жидкого вазелина, тщательно смешивают до получения комков. Их размельчают , продаливая сквозь сито № 16.

Полученные гранулы прессуют в таблетки , в которых содержится 500 мг активного соединения.

Приведенные примеры использования рибонуклеотидов являются иллюстративными и не ограничивают возможности использования иных лекарственньк форм

Формула изобретения

Способ получения 3-(5 -рибонуклеотидов ) общей формулы (I)

ОН,

Н-С-С1 CO JH-CH

HoJ-o

SCHj

он

где R - 5-рибонуклеотид, заключающийся в том, что штамм Strep- tomyces rochei NRRL 3533 культивируют в жидкой питательной среде, со- .держащей источники.углерода, азота и минеральные соли, с дробньм добавлением в процессе культивирования в культуральную жидкость соединения общей формулы (I), где R - водород, с последующим выделением целевого продукта.

Таблица 1

1303036

Примечание, Тип дан в локальной области пика: BRD - широкий;

AVG - средний; SHP - резкий; SH - плечо; М - возможно перекрывание с минеральным маслом.

Таблица 3

Продолжение табл.2

Табгица 4

35 37 33 42 32 30 18

AVG

Т 7

1 ,/0

Частота, см

1649,2 1071,5 3408,5 1057,0 1088,8 1215,1 1614,5 1491,0 3102,7

2980,1 2963,8

1528,6 1576,0

39 35 33 33 32 36

AVG AVG AVG AVG AVG

Таблица 5 T,%Частота, см

1251,8

1286,5

889,1

525,5

1462,1

1384,0

595,0

572,8

788,8

1450„5 992,3

634,5

Таблица

1303036

24 Продолжение табл.8

Таблица 9

1303036

Таблица 10

Таблица 12

Т,% Частота, см Т,% Частота,

1685,0 1070,5 1090,7 1055,0 3387,3 1647,3 1214,2 1255,7 3114,4 2962,0 2931,0 1463,0 889,1

16 19

BRD BRD

Частота,

Таблица 13

-1

см

1384,0

567,0

1605,8

1423,5

992,3

523,6

2879,0

973,1

1576,0

634,5

2863,5

1297,1

.Таблица 14

SH AVG

AVGM

BRDM

SHM

AVGM

BRDM

BED

AVG

AVGM

AVG

AVGM

AVG

1303036

32 Продолжение табл.14

39 41 14 9

42 42 52 51 36 51 46 42 .43 45 40 34

AVG

SHP

AVGM

BRD

AVG

Таблица 15

130303634

Продолжение табл.15

Редактор В. Петраш

Составитель Г. Смирнова

Техред Л.блейник Корректор Т. Колб

Заказ 1228/58 Тираж 500Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-33, Раушская наб, д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Реферат

Изобретение относится к микробиологии и касается получения биологически активных веществ. Цель изобретения - разработка способа получения новых биологически активных соединений, обладающих высокой антибактериальной активностью. Штамм Streptomyces rochei NRRL 3533 вьфа- щивают в жидкой питательной среде.. Проводят ферментацию и инкубирование . Далее собирают фильтраты культур , выделяют целевые продукты. Полу- ченные вещества проявляют активность против грамположительных и грамотри- цательных микроорганизмов. Они могут использоваться в качестве дезинфеци- рующих и лечебных средств. 17 табл. а S (У) с со о со о со О5. о