Белок, обладающий активностью d-пантолактонгидролазы, нуклеиновая кислота, его кодирующая, вектор, штамм, способ получения белка, способ получения d-пантолактона - RU2218405C2
Код документа: RU2218405C2
Чертежи
Показать все 46 чертежа(ей)
Описание
Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть).
Реферат
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения D-пантолактона. Ген, кодирующий природную D-пантолактонгидролазу, происходящую из микроорганизма рода Fusarium, клонируют в вектор для экспрессии. Клетки-хозяева, трансформированные полученным вектором, культивируют и выделяют белок D-пантолактонгидролазу; оптическое разделение D,L-пантолактона проводят в присутствии D-пантолактонгидролазы. Изобретение позволяет усовершенствовать способ получения D-пантолактона. 6 с. и 4 з.п. ф-лы, 5 ил. , 1 табл.
Формула
1. Белок, обладающий активностью природно-встречающейся
D-пантолактонгидролазы, или его соль, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1.
2. Белок по п.1, где указанный белок, имеющий активность
природно-встречающейся D-пантолактонгидролазы, происходит из микроорганизма рода Fusarium.
3. Белок по п.1 или 2, продуцируемый экспрессией экзогенной
ДНК, кодирующей белок по п.1, в прокариотических клетках-хозяевах.
4. Нуклеиновая кислота, кодирующая белок по п.1, имеющая нуклеотидную
последовательность SEQ ID NO:2, с учетом вырожденности кода.
5. Нуклеиновая кислота по п.4, имеющая нуклеотидную последовательность, имеющую часть,
соответствующую открытой рамке считывания в нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:2.
6. Вектор для экспрессии в прокариотических или эукариотических
клетках, несущий нуклеиновую кислоту по п.4, функционально связанную с регуляторными последовательностями.
7. Штамм Escherichia coli JM 109/PFLC4QE, FERM
BP-5638 - продуцент белка, обладающего активностью D-пантолактонгидролазы.
8. Способ получения белка по п.1, предусматривающий культивирование клетки,
трансформированной вектором по п.6, в питательной среде, пригодной для выращивания, и его выделение.
9. Способ получения D-пантолактона,
предусматривающий выполнение оптического разделения D, L-пантолактона в присутствии белка с D-пантолактонгидролазной активностью по пп.1-3.
10. Способ
по п.9, отличающийся тем, что разделение происходит в присутствии белка, продуцируемого клеткой, трансформированной вектором по п.6.
