Способ выделения высокочистого полигидроксиалканоата из микробных клеток - RU2005121140A

Реферат

1. Способ выделения полигидроксиалканоата из полигидроксиалканоатсодержащих микробных клеток, который включает следующие стадии (a) и (b):

(a) стадию, включающую добавление щелочи к водной суспензии полигидроксиалканоатсодержащих микробных клеток при перемешивании и разрушающем физическом воздействии для разрушения клеток, растворение или эмульгирование клеточных субстанций, отличных от полигидроксиалканоата, в указанных клетках и затем отделение полигидроксиалканоата от водной суспензии и

(b) стадию, включающую обработку отделенного полигидроксиалканоата ферментом и/или сурфактантом для растворения примесей, адгезированных на полигидроксиалканоате или для растворения после их отделения от него и затем промывку полигидроксиалканоата гидрофильным растворителем и/или водой.

2. Способ выделения полигидроксиалканоата по п.1, который дополнительно включает следующую стадию (c):

(c) стадию, включающую суспендирование промытого полигидроксиалканоата в гидрофильном растворителе и/или воде и перемешивание при температуре, равной или ниже точки кипения указанной суспензии, и укрупнение полигидроксиалканоата для увеличения диаметра его частиц, и затем выделение укрупненного полигидроксиалканоата из суспензии.

3. Способ выделения полигидроксиалканоата по п.1 или 2, где полигидроксиалканоат представляет собой сополимер, получаемый сополимеризацией, по меньшей мере, двух видов мономеров гидроксиалканоата, выбранных из группы, состоящей из 3-гидроксибутирата, 3-гидроксивалерата, 3-гидроксипропионата, 4-гидроксибутирата, 4-гидроксивалерата, 5-гидроксивалерата, 3-гидроксипентаноата, 3-гидроксигексаноата, 3-гидроксигептаноата, 3-гидроксиоктаноата, 3-гидроксинонаноата, 3-гидроксидеканоата.

4. Способ выделения полигидроксиалканоата по п.3, где полигидроксиалканоат представляет собой сополимер, состоящий из 3-гидроксигексаноата и, по меньшей мере, одного вида из указанных мономеров гидроксиалканоата, отличных от 3-гидроксигексаноата.

5. Способ выделения полигидроксиалканоата по п.4, где полигидроксиалканоат представляет собой сополимер, состоящий из 3-гидроксигексаноата и 3-гидроксибутирата.

6. Способ выделения полигидроксиалканоата по п.1, где на стадии (a) обработка физическим разрушением проводится в гомогенизаторе высокого давления.

7. Способ выделения полигидроксиалканоата по п.1, где на стадии (a) щелочь добавляют непрерывно или с перерывами при контролировании уровня pH.

8. Способ выделения полигидроксиалканоата по п.7, где на стадии (a) уровень pH регулируют между значениями 9 и 13,5.

9. Способ выделения полигидроксиалканоата по п.1, где щелочь, используемая на стадии (a), является, по меньшей мере, одной из группы, состоящей из гидроксида натрия, гидроксида калия, гидроксида лития и карбоната натрия.

10. Способ выделения полигидроксиалканоата по п.1, где фермент, используемый на стадии (b), является, по меньшей мере, одним видом, выбранным из группы, состоящей из протеаз, липид-расщепляющих ферментов, ферментов, расщепляющих клеточную стенку, и ДНКаз.

11. Способ выделения полигидроксиалканоата по п.1, где сурфактант, используемый на стадии (b), является, по меньшей мере, одним видом, выбранным из группы, состоящей из анионных сурфактантов, катионных сурфактантов, амфолитных сурфактантов и неионных сурфактантов.

12. Способ выделения полигидроксиалканоата по п.1, где гидрофильный растворитель, используемый для промывки на стадии (b), является, по меньшей мере, одним видом, выбранным из группы, состоящей из метанола, этанола, ацетона, ацетонитрила и тетрагидрофурана.

13. Способ выделения полигидроксиалканоата по п.2, где гидрофильным растворителем, используемым на стадии (c), является, по меньшей мере, один, выбранный из группы, состоящей из метанола, этанола, ацетона, ацетонитрила и тетрагидрофурана.

14. Способ выделения полигидроксиалканоата по п.1, где микроорганизмом, содержащим полигидроксиалканоат, является микроорганизм, выбранный из группы, состоящей из видов, относящихся к роду Aeromonas, Alcaligenes, Azotobacter, Bacillus, Clostridium, Halobacterium, Nocardia, Rhodospirillum, Psuedomonas, Ralstonia, Zoogloea, Escherichia, Candida, Saccharomyces и Yarrowia.

15. Способ выделения полигидроксиалканоата по п.14, где микроорганизмом, содержащим полигидроксиалканоат, является Aeromonas caviae.

16. Способ выделения полигидроксиалканоата по п.1, где микроорганизмом, содержащим полигидроксиалканоат, является трансформант, получаемый введением генной группы полигидроксиалканоат-синтазы из Aeromonas caviae.

17. Способ выделения полигидроксиалканоата по п.16, где микроорганизмом, содержащим полигидроксиалканоат, является Ralstonia eutropha, получаемый введением генной группы полигидроксиалканоат-синтазы из Aeromonas caviae.