Способ получения трипаномицина - SU468953A1

Описание

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРИПАНОМИЦИНА условиях штамм Streptomyces, причем под этим штаммом подразумевают штамм IMETJA 10081, подобный по описанию Streptomyces diastatocliromogencs (Ваксмап, 1961 г.),его мутанты или разиовидиости. Культивирование штамма производят в подходяшей питательной среде в течение 2-6 дпей при температуре от 25 до , в токе воздуха и при перемешивании, причем в питательную среду добавляют соли тяжелых металлов. После отделения мицелия антибиотик выделяют с помощью экстракции раствор .ителем, как из культуральиого фильтрата, так и из мицелл. Переводят его в водную фазу , непосредственно за этим повторно экстрагируют из водного неочиш.енного концентрата органическим растворителем, а затем осаждают продукт из неочишенного концентрата низкокипяш,ей фракцией углеводородов. Полученный антибиотик обозначается как трипаномицин . Пример 1. В две бутылки с крутыми стенками емкостью 500 мл помеш,ают по 80 мл питательной среды для предварительного культивирования следующего состава (%): Глюкоза1,5 Соевая мука1,5 Карбонат кальцпя0,1 Хлористый натрий0,5 Первичный фосфат калия0,03 Водопроводная водаДо 1 (л) Производят фракционную стерилизацию 3 раза по 30 мин при температуре 100°С. После стерилизации рП составляет 6,3. В каждую бутыль вводят по 1/10 части суспензии спор, которую получают посредством смешепия стерильного раствора поваренной соли с четырнаддатидневной культурой IMETJA 10081, культивированной в пробирке на питательной среде состава (%): Сахароза0,300 Декстрин1,500 Мочевина0,010 Дрожжевой экстракт0,100 Пептон0,500 Хлористый натрий0,050 Сульфат железа0,001 Первичный фосфат калия0,050 Агар (промытый)2,000 Дистиллированная водаОстальное Проводят стерилизацию 40 мип при . После стерилизации рН культуральной жидкости составляет 6,5-7,0. Инкубацию проводят 48 час нри температуре 28°С и перемешивании . 8 мл приготовленпой указанным способом культуральной жидкости засевают в бутыли , в которых находится по 80 мл питательной среды следующего состава (%): Глюкоза3,0 Соевая мука2,0 Карбонат кальция0,3 Хлористый натрий0,5 Водопроводная водаОстальное Стерилизацию проводят 35 мин при 110°С. После стерилизации рП составляет 6,3. Пнкубируют при температуре 28°С и перемешивапии со скоростью 180 об/мин. Паибольшее содержание трипапомицина наблюдают по истечении 96 час (150 мг/мл) ферметации . Определение активности производят с помощью известного микробиологического снособа , при котором испытание осиовывается на диффузии агара и ири котором величина замедляющего действия на размножение температурных вирусов в бактериях является мерой активности антибиотика. Пример 2. Опыт проводят аналогично примеру 1, но на производящей питательной среде состава (%): Глюкоза3,000 Соевая мука3,000 Карбонат кальция0,300 Хлористый натрий0,300 Хлорное железо0,025 Водопроводная водаОстальное После стерилизации рН равно 6,5. Наивысшее содержание тринаномицина наблюдают по истечении 100 час-170 мг/мл. Пример 3. Опыт проводят аналогично примеру 2, но среда предварительного выращивания и ферментационная среда имеют другие составы. Среда предварительного выращивания (%): Пептон0,60 Сухие дрожжи0,30 Нитрат кальция, гидрат0,05 Водопроводная водаОстальное Стерилизацию проводят 20 мин при 120°С. После стерилизации рП среды равпо 7,2. Ферментационная питательная среда (%): Глюкоза3,000 Сухие дрожжи0,300 Хлористый натрий0,300 Вторичный фосфат калия0,100 Карбонат кальция0,150 Сульфат .магния0,010 железа0,002 Сульфат цинка0,002 Сульфат меди0,001 Водопроводная водаОстальное РН ферментационной среды равно 7,0. Стерилизацию проводят обычным обраом . Наивысшее содержание трипаномицина остигается но истечении 120 час ферментаии - 160 .мг/мл. Предмет изобретения 1. Снособ нолучения триианош-щина, отлиающийся тем, что культуру Streptomyces iastatochrornogenes IMETJy 10081 выращиают в аэробных условиях на среде, содеращей источники углерода, азота и минеальные соли, лгицелий и фильтрат культу56

ралыюй жидкости экстрагируют органическимвыращивание осуществляют в течение 2-6

растворителем и выделяют целевой нродуктдней при температуре 25-37°С.

известными приемами.3. Способ по пн. 1 и 2, отличаюп(ийся тем, 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что 5 вин солей железа.

468953

что выращивание осуществляют в присутст

Реферат

Формула