Способы культивирования цирковирусов - RU2007110808A

Реферат

1. Способ культивирования цирковируса свиней типа 1, включающий в себя:

a) получение клеток млекопитающего, экспрессирующих функцию Е1 аденовируса млекопитающего, причем указанные клетки являются пермиссивными для репликации цирковируса свиней типа 1;

b) введение генома цирковируса свиней типа 1 или его части, способной реплицироваться, в указанные клетки млекопитающего; и

c) культивирование указанных клеток млекопитающего в условиях, пригодных для репликации указанного цирковируса свиней типа 1.

2. Способ по п.1, дополнительно включающий в себя извлечение указанного цирковируса свиней типа 1 из указанных культивируемых клеток.

3. Способ по п.1, где указанные клетки млекопитающего происходят от свиньи.

4. Способ по п.1, где указанными клетками млекопитающего являются клетки сетчатки свиньи.

5. Способ по п.1, где указанной функцией Е1 аденовируса млекопитающего является Е1 функция аденовируса человека.

6. Способ по п.1, где указанной функцией Е1 аденовируса млекопитающего является функция Е1 аденовируса свиней.

7. Способ по п.1, где указанные клетки млекопитающего, экспрессирующие функцию Е1 аденовируса млекопитающего, стабильно трансформированы последовательностью гена Е1 аденовируса млекопитающего.

8. Способ по п.7, где указанной последовательностью гена Е1 является последовательность гена Е1 аденовируса человека.

9. Способ по п.7, где указанная последовательность гена Е1 является гетерологичной по отношению к указанной клетке млекопитающего.

10. Способ по п.1, где указанной функцией Е1 является функция Е1А и/или Е1В.

11. Способ по п.1, где указанный цирковирус свиней типа 1 содержит химерную нуклеотидную последовательность.

12. Рекомбинантная клетка млекопитающего, которая экспрессирует функцию Е1 аденовируса млекопитающего и содержит геном цирковируса свиней типа 1 или его часть, способную к репликации, причем указанная клетка является пермиссивной для репликации указанного цирковируса свиней типа 1.

13. Рекомбинантная клетка млекопитающего по п.12, где указанной функцией Е1 аденовируса является функция Е1 аденовируса человека.

14. Рекомбинантная клетка млекопитающего по п.12, где указанной функцией Е1 ад еновируса является функция Е1 аденовируса свиней.

15. Рекомбинантная клетка млекопитающего по п.12, где указанная клетка происходит от свиньи.

16. Рекомбинантная клетка млекопитающего по п.15, где указанной клеткой является клетка сетчатки свиньи.

17. Рекомбинантная клетка млекопитающего по п.12, где клетка млекопитающего, экспрессирующая функцию Е1 аденовируса млекопитающего, стабильно трансформирована последовательностью гена Е1 аденовируса млекопитающего.

18. Рекомбинантная клетка млекопитающего по п.17, где указанной последовательностью гена Е1 является последовательность гена Е1 аденовируса человека.

19. Рекомбинантная клетка млекопитающего по п.17, где указанная последовательность гена Е1 аденовируса млекопитающего является гетерологичной по отношению к указанной клетке млекопитающего.

20. Рекомбинантная клетка млекопитающего, которая экспрессирует функцию Е1 аденовируса млекопитающего и содержит геном цирковируса млекопитающего или его часть, способную к репликации, причем указанная клетка является пермиссивной для репликации указанного цирковируса млекопитающего.

21. Способ получения рекомбинантной клетки млекопитающего, содержащей функцию Е1 аденовируса млекопитающего и геном цирковируса свиней типа 1, предусматривающий стадии: а) получения клетки млекопитающего, экспрессирующей функцию Е1 аденовируса млекопитающего, и b) введения указанного генома цирковируса свиней типа 1 или его части, способной реплицироваться, в эту клетку млекопитающего.

22. Способ по п.21, дополнительно включающий в себя стадию культивирования указанной клетки млекопитающего в условиях, пригодных для репликации указанного цирковируса свиней типа 1.

23. Способ по п.22, дополнительно включающий в себя стадию извлечения указанного цирковируса типа 1 из указанных культивируемых клеток.

24. Способ по п.21, где указанные клетки млекопитающего происходят от свиньи.

25. Способ по п.24, где указанные клетки млекопитающего являются клетками сетчатки свиньи.

26. Способ по п.21, где указанной функцией Е1 аденовируса является функция Е1 аденовируса человека.

27. Способ по п.21, где указанной функцией Е1 аденовируса является функция Е1 аденовируса свиней.

28. Способ по п.21, где указанный цирковирус свиней типа 1 содержит химерную нуклеотидную последовательность.

29. Способ по п.21, где указанная клетка млекопитающего, содержащая функцию Е1 аденовируса млекопитающего, стабильно трансформирована последовательностью гена Е1 аденовируса млекопитающего.

30. Способ по п.29, где указанная последовательность гена Е1 аденовируса млекопитающего является гетерологичной по отношению к указанной клетке млекопитающего.

31. Способ по п.21, где указанной функцией Е1 является функция Е1А и/или Е1В.

32. Способ репликации цирковируса млекопитающего типа 1, включающий культивирование клетки млекопитающего, содержащей геном цирковируса свиней типа 1 или его часть, способную к репликации, в условиях, пригодных для репликации указанного цирковируса свиней типа 1, где клетка млекопитающего экспрессирует функциональный белок Е1 аденовируса млекопитающего и является пермиссивной для репликации цирковируса свиней типа 1, и при необходимости извлечение указанного цирковируса свиней типа 1 из культивированной клетки.

33. Способ по п.32, где указанная клетка млекопитающего происходит от свиньи.

34. Способ по п.33, где указанной клеткой млекопитающего является клетка сетчатки свиньи.

35. Способ по п.32, где указанным функциональным белком Е1 аденовируса млекопитающего является функциональный белок Е1 аденовируса человека.

36. Способ по п.32, где указанным функциональным белком Е1.аденовируса млекопитающего является функциональный белок Е1 аденовируса свиней.

37. Способ по п.32, где указанная клетка млекопитающего, экспрессирующая функциональный белок Е1 аденовируса млекопитающего, стабильно трансформирована последовательностью гена Е1 аденовируса млекопитающего.

38. Способ по п.37, где указанной последовательностью гена Е1 является последовательность гена Е1 аденовируса человека.

39. Способ по п.37, где указанная последовательность гена Е1 аденовируса млекопитающего является гетерологичной по отношению к указанной клетке млекопитающего.

40. Способ по п.32, где указанным функциональным белком Е1 является функциональный белок Е1А и/или Е1В.

41. Способ по п.32, где указанный цирковирус свиней типа 1 содержит химерную нуклеотидную последовательность.

42. Способ получения рекомбинантной клетки млекопитающего, включающий введение генома цирковируса свиней типа 1 или его части, способной к репликации, в клетку млекопитающего, которая экспрессирует функциональный белок Е1 аденовируса млекопитающего, где клетка является пермиссивной для репликации цирковируса свиней типа 1.

43. Способ по п.42, дополнительно включающий в себя стадию культивирования указанной рекомбинантной клетки млекопитающего в условиях, пригодных для репликации указанного цирковируса свиней типа 1.

44. Способ по п.43, дополнительно включающий в себя стадию извлечения указанного цирковируса свиней типа 1 из указанной культивированной клетки.

45. Способ по п.42, где указанная клетка млекопитающего происходит от свиньи.

46. Способ по п.45, где указанной клеткой млекопитающего является клетка сетчатки свиньи.

47. Способ по п.42, где указанным функциональным белком Е1 аденовируса млекопитающего является функциональный белок Е1 аденовируса человека.

48. Способ по п.42, где указанным функциональным белком Е1 аденовируса млекопитающего является функциональный белок Е1 аденовируса свиньи.

49. Способ по п.42, где указанный цирковирус свиней типа 1 содержит химерную нуклеотидную последовательность.

50. Способ по п.42, где указанная клетка млекопитающего стабильно трансформирована последовательностью гена Е1 аденовируса млекопитающего.

51. Способ по п.42, где указанная последовательность гена Е1 аденовируса млекопитающего является гетерологичной по отношению к указанной клетке млекопитающего.

52. Способ по п.42, где указанным функциональным белком Е1 является функциональный белок Е1А и/или Е1В.

53. Способ получения рекомбинантной клетки млекопитающего, включающий введение области гена Е1 аденовируса млекопитающего в клетку млекопитающего, которая содержит геном цирковируса свиней типа 1 или его часть, способную к репликации, где клетка является пермиссивной для репликации цирковируса свиней типа 1.

54. Способ по п.53, дополнительно включающий в себя стадию культивирования указанной рекомбинантной клетки млекопитающего в условиях, пригодных для репликации указанного цирковируса свиней типа 1.

55. Способ по п.54, дополнительно включающий в себя стадию извлечения указанного цирковируса свиней типа 1 из указанной культивированной клетки.

56. Способ по п.53, где указанная клетка млекопитающего происходит от свиньи.

57. Способ по п.56, где указанной клеткой млекопитающего является клетка сетчатки свиньи.

58. Способ по п.53, где указанным функциональным белком Е1 аденовируса млекопитающего является функциональный белок Е1 аденовируса человека.

59. Способ по п.53, где указанным функциональным белком Е1 аденовируса млекопитающего является функциональный белок Е1 аденовируса свиней.

60. Способ по п.53, где указанный цирковирус свиней типа 1 содержит химерную нуклеотидную последовательность.

61. Способ по п.53, где указанная клетка млекопитающего стабильно трансформирована последовательностью гена Е1 аденовируса млекопитающего.

62. Способ по п.53, где указанная последовательность гена Е1 аденовируса млекопитающего является гетерологичной по отношению к указанной клетке млекопитающего.

63. Способ по п.53, где указанным функциональным белком Е1 является функциональный белок Е1А и/или Е1В.

64. Способ экспрессии генома цирковируса свиней типа 1 или его части, включающий культивирование клетки млекопитающего, которая содержит геном цирковируса свиней типа 1 или его часть, в условиях, пригодных для экспрессии указанного генома цирковируса свиней типа 1 или его части, где клетка млекопитающего экспрессирует функциональный белок Е1 аденовируса млекопитающего, и при необходимости извлечение указанного цирковируса свиней типа 1 или его части из культивированной клетки.

65. Способ по п.64, где указанная клетка млекопитающего происходит от свиньи.

66. Способ по п.65, где указанной клеткой млекопитающего является клетка сетчатки свиньи.

67. Способ по п.64, где указанным функциональным белком Е1 аденовируса млекопитающего является функциональный белок Е1 аденовируса человека.

68. Способ по п.64, где указанным функциональным белком Е1 аденовируса млекопитающего является функциональный белок Е1 аденовируса свиньи.

69. Способ по п.64, где указанная клетка млекопитающего стабильно трансформирована последовательностью гена Е1 аденовируса млекопитающего.

70. Способ по п.69, где указанной последовательностью гена Е1 является последовательность гена Е1 аденовируса человека.

71. Способ по п.69, где указанная последовательность гена Е1 аденовируса млекопитающего является гетерологичной по отношению к указанной клетке млекопитающего.

72. Способ по п.64, где указанным функциональным белком Е1 является функциональный белок Е1А и/или Е1В.

73. Способ по п.64, где указанный цирковирус свиней содержит химерную нуклеотидную последовательность.