Обогащение активируемой флуоресценцией сортировки клеток (facs) для создания растений - RU2015112573A

Реферат

1. Способ получения растения из популяции растительных клеток, включающий выделение протопласта растения, содержащего представляющий интерес полинуклеотид, при этом способ включает:обеспечение популяции растительных протопластов, содержащей по меньшей мере один протопласт, который содержит представляющий интерес полинуклеотид и флуоресцирующий маркер, при этом популяция по существу не содержит растительных протопластов, содержащих флуоресцентный маркер и не содержащих представляющий интерес полинуклеотид; при этом растительный протопласт инкапсулируют в альгинат натрия;отделение по меньшей мере одного протопласта, содержащего представляющий интерес полинуклеотид и флуоресцирующий маркер, от остальных растительных протопластов в популяции и, таким образом, выделение растительного протопласта, содержащего представляющий интерес полинуклеотид;регенерацию растения из указанного выделенного растительного протопласта; икультивирование указанного растения.2. Способ по п. 1, в котором отделение по меньшей мере одного протопласта включает применение проточной цитометрии.3. Способ по п. 1, в котором отделение по меньшей мере одного протопласта включает применение активируемой флуоресценцией сортировки клеток (FACS).4. Способ по п. 1, в котором флуоресцирующим маркером является флуоресцирующий полипептид, который экспрессируется с полинуклеотида в протопласте растения.5. Способ по п. 1, в котором представляющий интерес полинуклеотид кодирует представляющий интерес полипептид.6. Способ по п. 5, в котором представляющим интерес полипептидом является нуклеаза с цинковым пальцем.7. Способ по п. 1, в котором популяция