Синтетический двунаправленный промотор растения - RU2017112973A
Код документа: RU2017112973A
Формула
1. Синтетический двунаправленный полинуклеотидный промотор убиквитина 3 риса, который содержит:
a) минимальный коровый промотор, который содержит полинуклеотидную последовательность с по меньшей мере 90% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 2;
b) интрон, который содержит полинуклеотидную последовательность с по меньшей мере 90% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 6;
c) 5ʹ UTR, который содержит полинуклеотидную последовательность с по меньшей мере 90% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 5;
d) промоторный элемент выше по направлению считывания, который содержит полинуклеотидную последовательность с по меньшей мере 90% идентичностью последовательностей с SEQ ID NO: 7 или SEQ ID NO: 8.
2. Синтетический двунаправленный полинуклеотидный промотор убиквитина 3 риса по п. 1, отличающийся тем, что синтетический двунаправленный полинуклеотидный промотор содержит полинуклеотидную последовательность с по меньшей мере 90% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 1.
3. Синтетический двунаправленный полинуклеотидный промотор убиквитина 3 риса по п. 2, который содержит первую полинуклеотидную последовательность, представляющую интерес, функционально связанную с 3ʹ-концом последовательности синтетического двунаправленного полинуклеотида.
4. Синтетический двунаправленный полинуклеотидный промотор убиквитина 3 риса по п. 3, который содержит вторую полинуклеотидную последовательность, представляющую интерес, функционально связанную с 5ʹ-концом последовательности синтетического двунаправленного полинуклеотида.
5. Синтетический двунаправленный полинуклеотидный промотор убиквитина 3 риса по п. 4, в котором полинуклеотидная последовательность, представляющая интерес, содержит определенный признак.
6. Синтетический двунаправленный полинуклеотидный промотор убиквитина 3 риса по п. 5, где признак выбирают из группы, состоящей из признака инсектицидной устойчивости, признака гербицидной устойчивости, признака эффективности использования азота, признака эффективности использования воды, признака алиментарного качества, признака связывания ДНК, признака селективного маркера и какого-либо их сочетания.
7. Способ получения трансгенной клетки растения, способ включает:
a) трансформацию клетки растения с использованием кассеты для экспрессии гена, содержащей синтетический двунаправленный полинуклеотидный промотор убиквитина 3 риса, функционально связанный с по меньшей мере одной полинуклеотидной последовательностью, представляющей интерес;
b) выделение трансформированной клетки растения, которая содержит кассету для экспрессии гена; и
c) получение трансгенной клетки растения, которая содержит синтетический двунаправленный полинуклеотидный промотор убиквитина 3 риса, функционально связанный по меньшей мере с одной полинуклеотидной последовательностью, представляющей интерес.
8. Способ по п. 7, в котором нуклеотидную последовательность, представляющую интерес, стабильно встраивают в геном трансгенной клетки растения.
9. Способ по п. 8, в котором трансгенная клетка растения представляет собой трансгенную клетку односеменодольного растения или трансгенную клетку двусеменодольного растения.
10. Способ по п. 9, в котором трансгенную клетку двусеменодольного растения выбирают из группы, состоящей из клетки растения Arabidopsis, клетки растения табака, клетки растения соевых бобов, клетки растения канолы и клетки растения хлопка.
11. Способ по п. 9, в котором трансгенную клетку односеменодольного растения выбирают из группы, состоящей из клетки растения маиса, клетки растения риса, клетки растения брахиподии и клетки растения пшеницы.
12. Способ по п. 7, в котором синтетический двунаправленный полинуклеотид убиквитина 3 риса содержит SEQ ID NO: 1.
13. Способ по п. 7, включающий первую полинуклеотидную последовательность, представляющую интерес, функционально связанную с 3ʹ-концом синтетического двунаправленного полинуклеотидного промотора убиквитина 3 риса, содержащего SEQ ID NO: 1.
14. Способ по п. 7, включающий вторую полинуклеотидную последовательность, представляющую интерес, функционально связанную с 5ʹ-концом синтетического двунаправленного полинуклеотидного промотора убиквитина 3 риса, содержащего SEQ ID NO: 1.
15. Трансгенная клетка растения, которая содержит синтетический двунаправленный полинуклеотидный промотор убиквитина 3 риса по п. 1.
16. Трансгенная клетка растения по п. 15, где двунаправленный полинуклеотидный промотор убиквитина 3 риса управляет транскрипцией признака устойчивости к гербициду.
17. Трансгенная клетка растения по п. 16, где признак устойчивости к гербициду содержит кодирующую последовательность aad-1.
