Иммуносупрессорная композиция, содержащая циклоспорин, и способ ее получения - RU2119351C1

Чертежи

Описание

Данное изобретение относится к композиции, содержащей циклоспорин, и к способу ее получения.

Описание предшествующего уровня
Циклоспорины, группа циклических полипептидов, включающих II аминокислот и имеющих структурную формулу (I), полезны в качестве иммуносупрессоров, подавляющих отторжение алогенного трансплантата, которое может иметь место при трансплантации органов животных, включая человеческие особи.

Однако, несмотря на полезность этих соединений, фармацевтические рецептуры, содержащие циклоспорины, имеют ограниченную применимость ввиду их экстремально низкой растворимости в воде (20-30 мкг/мл).

Ближайшим аналогом заявляемой композиции являются описанные в публикации международной заявки WO94/05312 фармацевтические композиции, содержащие N-метилированные циклические ундекапептиды, главным образом для внутреннего применения, в которых присутствует от 0,1 до 20 частей по массе соединения из группы циклоспоринов (A), от 0,3 до 60 частей по массе эмульгатора (B), содержащего ангидроманит олеиновый эфир и/или лактоглицерид и/или цитроглицерид, от 0,1 до 10 по массе эмульсионного стабилизатора (C), содержащего алюминиево-магниевый гидроксистеарат в виде липогеля и от 0,2 до 40 частей по массе растворителя (D), состоящего из 1,4:3,6-диангидро-2,5-0-метил-D-глюцита и/или 1, 3-диметил-2-имидазолидона и/или этанола, в соотношении A:B, равном 1:0,5-1:30.

В патенте США N 4388307 описываются фармацевтические композиции, содержащие циклоспорины (SANDIMMUN или SANDIMMUNE) в форме раствора для инъекции или для перорального введения или в форме мягких капсул, наполненных этим раствором. Раствор получают диспергированием циклоспорина в растительном масле при использовании этоксилированного касторового масла (полученного при взаимодействии натурального или гидрированного касторового масла и окиси этилена) или продукта переэтерификации триглицерида натурального растительного масла и полиалкиленполиола в качестве эмульгатора и этанола в качестве солюбилизирующего вещества. Однако этот способ имеет некоторые недостатки. Например, когда маслянистая композиция контактирует с водным раствором во рту или кишечнике, компонент лекарства часто выделяется в виде твердого вещества, в результате чего его биологическая доступность снижается до уровня, например, менее 30%. Кроме того, при длительном хранении циклоспорины имеют склонность к кристаллизации при уменьшении содержания этанола в результате испарения; и пациенты страдают из-за неприятного запаха этоксилированного касторового масла.

В связи с этим было предпринято много попыток разработать циклоспоринсодержащую рецептуру с улучшенной стабильностью и биологической доступностью. Например, в патенте Японии N 89-38029 описывается способ растворения циклоспорина в органическом растворителе с поверхностно-активным веществом с последующей сушкой продукта; в патентах Германия NN 295765 и 295766 заявляется способ растворения циклоспоринов в этаноле с поверхностно-активным веществом с лиофилизацией полученного продукта; в Международной заявке PCT N WO 90-00389 раскрывается способ солюбилизации циклоспоринов с помощью липосом с лиофилизацией полученного продукта; в патенте Германии N 293499 описывается способ растворения циклоспоринов в пропиленгликоле, суспендирование раствора полимерным полисахаридом и нанесение суспензии на твердый носитель.

Но несмотря на то, что с помощью указанных выше способов можно достичь некоторого улучшения стабильности рецептуры при минимальном содержании в ней этанола, они обладают некоторыми недостатками. Например, применение поверхностно-активных веществ, имеющих сложное строение, не является практически приемлемым или необходимым для получения рецептуры; липосома усложняет процесс в целом, и воспроизводимость размера частицы или скорость включения трудно контролировать; применение полимерного полисахарида может привести к тому, что общий объем рецептуры станет слишком большим для введения. Кроме того, разработанные ранее способы не приводят к получению циклоспоринсодержащих композиций, обладающих удовлетворительной скоростью растворения в водном растворе.

Краткое описание изобретения
В связи с вышеизложенным целью данного изобретения является циклоспорин-содержащая композиция, которая обладает улучшенной стабильностью, а также высокой скоростью растворения и высокой концентрацией циклоспорина в крови.

Другой целью данного изобретения является способ получения композиции данного изобретения.

В соответствии с одним аспектом данного изобретения предлагается композиция, включающая от 1,0 до 40 вес.% циклоспорина A, от 0,1 до 30% вес. эмульгатора и от 5 до 80% вес. пористого декстрина - из расчета на общий вес композиции.

В соответствии с другим аспектом данного изобретения предлагается способ получения циклоспоринсодержащей композиции, который включает следующие стадии: растворение циклоспорина A в этаноле с эмульгатором, добавление в раствор пористого декстрина для получения смеси и сушка смеси.

Краткое пояснение рисунка
На рисунке 1 показано изменение концентрации в крови циклоспорина композиции данного изобретения (0) и препарата SANDIMMUN (0) во времени.

Подробное описание изобретения
Пористый декстрин, который может преимущественно использоваться в композиции данного изобретения, обладает высокой пористостью. Он растворим в воде, но нерастворим в этаноле. Когда пористый декстрин добавляют в этанольный раствор, содержащий циклоспорин и эмульгатор, раствор абсорбируется в поры пористого декстрина, диспергируя таким образом циклоспорин и эмульгатор в пористый декстрин. В том случае, когда смесь пористого декстрина и этанольного раствора, содержащего циклоспорин и эмульгатор, разбавляют большим количеством воды, она микроэмульгируется с образованием эмульсии, которую применяют в том случае, когда смесь вводят в организм, содержащий водную среду. Такой пористый декстрин можно также добавлять в виде его водного раствора в этанольный раствор, содержащий циклоспорин и эмульгатор, затем смесь микроэмульгируется в результате действия эмульгатора с образованием гомогенного раствора. То есть композиция данного изобретения, содержащая циклоспорин, микроэмульгируется, что повышает способность лекарства к распределению, препятствует от его кристаллизации in vivo и таким образом ускоряет растворение циклоспорина. Кроме того, композиция данного изобретения может быть получена в твердой форме, которая обладает повышенной стабильностью и высокой скоростью растворения.

Циклоспоринсодержащая композиция данного изобретения может быть получена в соответствии с методикой, подробно описанной ниже.

Сначала циклоспорин A растворяют в этаноле вместе с эмульгатором. В качестве эмульгатора можно использовать различные фармацевтически приемлемые поверхностно-активные вещества, предпочтительно Тилоксапол (Tyloxapol), Полоксамер (Poloxamer), Твин (Tween), Лабрафил (Labrafil) и Кремофор (Cremopfor). Эмульгатор можно применять в количестве от 0,1 до 30% вес., предпочтительно от 1 до 15% вес., из расчета на общий вес композиции. Количество циклоспорина A может заключаться в интервале от 1,0 до 40% вес., предпочтительно от 8 до 15% вес. - из расчета на общий вес композиции. Этанол можно применять в количестве, достаточном для растворения циклоспорина A и эмульгатора.

Затем в этанольный раствор циклоспорина A и эмульгатора добавляют пористый декстрин в количестве от 5 до 80% вес. из расчета на общий вес композиции. Пористый декстрин можно добавлять в форме водного раствора. Концентрация циклоспорина A в водном растворе заключается предпочтительно в интервале от 20 до 50% (вес./вес.).

После этого полученную смесь сушат для получения циклоспоринсодержащей композиции данного изобретения, например в форме тонкоизмельченного порошка или мелкозернистых гранул. Сушку можно проводит с помощью общепринятого способа, предпочтительно распылительной сушкой или сушкой под пониженным давлением. Например, композиция данного изобретения в форме тонкоизмельченного порошка может быть получена с хорошим выходом при применении водного раствора пористого декстрина с последующим удалением воды и этанола посредством распылительной сушки.

С другой стороны, композиция данного изобретения в форме гранул может быть получена при применении порошка пористого декстрина с последующей сушкой продукта под пониженным давлением.

Циклоспоринсодержащая композиция данного изобретения при необходимости может быть получена общеизвестным способом в форме таблеток или капсул с другими фармацевтическими носителями. Фармацевтически приемлемые носители могут представлять собой: дезинтегрирующее вещество, такое как крахмалы, альгиновая кислота, микрокристаллическая целлюлоза и т.д.; связующее вещество, такое как крахмальная паста (от 10 до 80%), желатиновый раствор (от 10 до 20%), метилцеллюлоза, этилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, полиэтиленгликоль 4000, полиэтиленгликоль 6000, поливинилпиролидон и т.д.; смазывающее вещество, такое как стеарат магния, стеарат кальция, стеариновая кислота и т.д.; наполнитель, такой как лактоза, сахар, хлорид натрия, сульфат натрия, карбонат кальция, маннит, сорбит, тальк, минеральное масло и т.д.; и другие фармацевтически приемлемые красители, корригенты, вкусовые добавки, покрытия и консерванты.

Как описано выше, композиция данного изобретения, содержащая циклоспорин, при введении в организм может микроэмульгироваться; следовательно, повышается способность циклоспорина A распределяться, понижается кристаллизационная способность in vivo, и скорость растворения заметно возрастает. Кроме того, композиция данного изобретения содержит очень небольшое количество этанола, и следовательно, по существу не имеет недостатков, обусловленных испарением этанола. Композиция данного изобретения обладает преимуществом также в том, что она может быть легко получена в твердой форме.

Композиция данного изобретения предпочтительно может вводиться перорально. Терапевтически эффективные количества циклоспорина A, которые следует вводить, хорошо известны, например ежедневная доза составляет от приблизительно 2 мг/кг до приблизительно 14-17,5 мг/кг.

Приведенные далее примеры и опыты даны для иллюстрации данного изобретения более конкретно, без ограничения его области.

Пример 1
4 г циклоспорина A (PINEFLOW, Matsutani Chemical Co. (Япония), удельный объем: 8,5 см³/г и 2 г полоксамера 407 растворяют в 20 г этанола. Раствор 10 г пористого декстрина в 40 г очищенной воды добавляют в этанольный раствор, смесь перемешивают в течение 10 мин. Полученный продукт сушат распылительной сушкой (температура на входе 105^oC, температура на выходе 75^oC, давление распыляющего воздуха 3 кг/см²) с получением композиции данного изобретения в форме порошка. Содержание этанола в порошке определяют высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЖХ), результаты представлены в таблице 1 ниже.

Примеры 2-5
Композиции данного изобретения в виде порошкообразных рецептур получают по методике примера 1, используя циклоспорин A, полоксамер 407, этанол, пористый декстрин и очищенную воду в количествах, указанных в таблице 1. Измеряют содержание этанола, результаты представлены в таблице 1 ниже.

Пример 6
4 г циклоспорина A, 2 г тилоксапола и 3 г полоксамера 407, которые используются в качестве эмульгаторов, растворяют в этаноле. 10 г пористого декстрина добавляют в этанольный раствор, из полученного продукта традиционным способом изготавливают гранулы. Содержание этанола в гранулах определяют методом ВЖХ, результаты представлены в таблице 2 ниже.

Пример 7
Композиции данного изобретения в виде гранул получают по методике примера 6, используя циклоспорин A, поликсамер 407, этанол, пористый декстрин и очищенную воду в количествах, указанных в таблице 2. Измеряют содержание в них этанола, результаты представлены в таблице 2 ниже.

Испытание 1. Тест на растворение (1)
Порошки, полученные в примерах 1-5, помещают в твердые капсулы, капсулы испытывают в описанных далее условиях. Результаты представлены в таблице 3 ниже. В качестве образца для сравнения используют простые смеси циклоспорина A, эмульгатора и декстрина, а также мягкие капсулы SANDIMMUN.

Условия проведения оценки растворения:
Раствор для испытания: искусственный желудочный сок (pH 1,2) 900 мл;
Температура: 37 ± 0,5^oC.

Метод: метод размешивания (paddle method).

Сравнительные образцы:
Сравнительный образец 1:
Циклоспорин A: Полоксамер 407: пористый декстрин = 2 : 1 : 5.

Сравнительный образец 2:
Циклоспорин A: Полоксамер 407 = 2 : 1.

Сравнительный образец 3:
Мягкие капсулы SANDIMMUM.

Испытание 2. Тест на растворение (2)
Гранулы, полученные в примерах 6 и 7, помещают в твердые капсулы, капсулы испытывают в условиях, описанных далее. Результаты представлены в таблице 4 ниже. В качестве образцов для сравнения используют образец смеси циклоспорина A, эмульгатора и декстрина, а также мягкие капсулы SANDIMMUN.

Условия проведения испытания на растворение:
Раствор для испытания: искусственный желудочный сок (pH 1,2) 900 мл;
Температура: 37 ± 0,5^oC.

Метод: метод размешивания (paddle method).

Сравнительные образцы:
Сравнительный образец 1:
Циклоспорин A: Полоксамер 407 : пористый декстрин = 2 : 1 : 5.

Сравнительный образец 2:
Циклоспорин A: Полоксамер 407 = 2 : 1.

Сравнительный образец 3:
Мягкие капсулы SANDIMMUN.

Испытание 3. Оценка биологической доступности.

Гранулы, полученные в примере 7, помещают в твердые капсулы, которые подвергаются испытанию. В качестве сравнительного образца используются мягкие капсулы SANDIMMUN.

Испытываемые капсулы и сравнительные капсулы вводят перорально собакам (Beagl Dog) (9-12 кг) в дозе 10 мг/кг циклоспорина A. Собак выдерживают без пищи в течение 16 часов перед введением и 4 часа после введения лекарства, давая только воду. Пробы крови берут в количестве по 10 мкл через 0,25, 0,5, 0,75, 1, 1,5, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 10, 12 часов и через 24 часа после введения лекарства. Концентрацию циклоспорина A в крови измеряют способом радиоиммунооценки, результаты представлены на рисунке 1.

Как видно из рисунка 1, максимальная концентрация в крови (C_max) композиции, полученной в соответствии со способом данного изобретения, выше концентрации сравнительного образца приблизительно в 1,5 раза и площадь под кривой (ППК) композиция данного изобретения больше площади под кривой сравнительного образца приблизительно в 1,3 раза.

Из представленных выше результатов видно, что композиция данного изобретения обладает значительно улучшенной скоростью растворения, а также лучшей биодоступностью.

Следует учитывать, что в пределах области данного изобретения, определенной в приведенной далее формуле изобретения, могут быть внесены различные модификации и изменения.

Реферат

Изобретение относится к области медицины. Иммуносупрессорную композицию получают путем растворения циклоспорина А в этаноле с эмульгатором, добавления пористого декстрина, перемешивания и сушки полученной смеси. Полученная композиция обладает улучшенной стабильностью, высокой скоростью растворения и высокой концентрацией выделяемого циклоспорина в крови. 3 н.п., 8 з.п.ф-лы, 4 табл., 1 ил.

Формула