Слитые белки hcv c модифицированными доменами ns3 - RU2005102484A

Реферат

1. Иммуногенный слитый белок, содержащий (а) модифицированный полипептид NS3, содержащий по меньшей мере одну аминокислотную замену в области NS3 HCV, такую что протеазная активность ингибируется, и (b) по меньшей мере один полипептид, полученный из другой области полибелка HCV, отличной от области NS3.

2. Слитый белок по п.1, где модификация включает в себя замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1.

3. Слитый белок по любому из п.1 или 2, где белок содержит модифицированный полипептид NS3, полипептид N34, полипептид NS5a и необязательно коровый полипептид.

4. Слитый белок по п.3, где белок дополнительно содержит полипептид NS5b и необязательно коровый полипептид.

5. Слитый белок по п.3, где белок дополнительно содержит полипептид Е2, полипептид р7, полипептид NS2 и необязательно коровый полипептид.

6. Слитый белок по п.3, где белок дополнительно содержит полипептид Е1, полипептид Е2, полипептид р7, полипептид NS2 и необязательно коровый полипептид.

7. Слитый белок по п.3, где белок дополнительно содержит полипептид Е2 и необязательно коровый полипептид.

8. Слитый белок по п.3, где белок дополнительно содержит полипептид Е1, полипептид Е2 и необязательно коровый полипептид.

9. Слитый белок по п.1, где белок содержит полипептид Е2, модифицированный полипептид NS3 и необязательно коровый полипептид.

10. Слитый белок по п.1, где белок содержит полипептид Е1, полипептид Е2, модифицированный полипептид NS3 и необязательно коровый полипептид.

11. Слитый белок по п.1 или 2, где полипептиды (а) и (b) получены из одного и того же изолята HCV.

12. Слитый белок по п.1 или 2, где по меньшей мере один из полипептидов, присутствующих в слиянии, получен из другого изолята, отличного от изолята модифицированного полипептида NS3.

13. Иммуногенный слитый белок, по существу состоящий, в направлении от аминоконца к карбоксильному концу, из

(a) модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется; полипептида NS4 и полипептида NS5a;

(b) модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется; полипептида NS4, полипептида NS5a и полипептида NS5b;

(c) полипептида Е2, полипептида р7, полипептида NS2, модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется; полипептида NS4 и полипептида NS5a;

(d) полипептида E1, полипептида Е2, полипептида р7, полипептида NS2, модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется; полипептида NS4 и полипептида NS5a;

(e) полипептида Е2, полипептида р7, полипептида NS2, модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется; полипептида NS4, полипептида NS5a и полипептида NS5b;

(f) полипептида E1, полипептида Е2, полипептида р7, полипептида NS2, модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется; полипептида NS4, полипептида NS5a и полипептида NS5b;

(g) полипептида Е2 и модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется;

(h) полипептида Е1, полипептида Е2 и модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется;

(i) полипептида Е2, полипептида р7, полипептида NS2 и модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется; или

(j) полипептида Е1, полипептида Е2, полипептида р7, полипептида NS2 и модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/ или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется.

14. Иммуногенный слитый белок, по существу, состоящий в направлении от аминоконца к карбоксильному концу, из

(a) модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется; полипептида NS4, полипептида NS5a и коревого полипептида;

(b) модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется; полипептида NS4, полипептида NS5a, полипептида NS5b и коревого полипептида;

(c) полипептида Е2, полипептида р7, полипептида NS2, модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется; полипептида NS4, полипептида NS5a и коревого полипептида;

(d) полипептида Е1, полипептида Е2, полипептида р7, полипептида NS2, модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется; полипептида NS4, полипептида NS5a и коревого полипептида;

(e) полипептида Е2, полипептида р7, полипептида NS2, модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется; полипептида NS4, полипептида NS5a, полипептида NS5b и коревого полипептида;

(f) полипептида Е1, полипептида Е2, полипептида р7, полипептида NS2, модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется; полипептида NS4, полипептида NS5a, полипептида NS5b и коревого полипептида;

(д) полипептида Е2, модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется; и коревого полипептида;

(h) полипептида Е1, полипептида Е2, модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется; и коревого полипептида;

(i) полипептида Е2, полипептида р7, полипептида NS2, модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется; и коревого полипептида; или

(j) полипептида Е1, полипептида Е2, полипептида р7, полипептида N32, модифицированного полипептида NS3, содержащего замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/ или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется; и коревого полипептида.

15. Модифицированный полипептид NS3, содержащий замену аминокислоты, соответствующей His-1083, Asp-1105 и/или Ser-1165, пронумерованным относительно полноразмерного полибелка HCV-1, такую, что протеазная активность ингибируется в том случае, когда модифицированный полипептид NS3 присутствует в слитом белке HCV.

16. Композиция, содержащая иммуногенный слитый белок по любому из пп.1-14 или модифицированный полипептид NS3 по п.15 в комбинации с фармацевтически приемлемым эксципиентом.

17. Способ стимуляции клеточного иммунного ответа у позвоночного, включающий в себя введение терапевтически эффективного количества композиции по п.16.

18. Применение композиции по п.15 в способе стимуляции клеточного иммунного ответа у позвоночного.

19. Применение иммуногенного слитого белка по любому из пп.1-14 или модифицированного полипептида NS3 по п.15 в производстве лекарственного средства для стимуляции клеточного иммунного ответа у позвоночного.

20. Способ получения композиции, заключающийся в комбинировании иммуногенного слитого белка по любому из пп.1-14 или модифицированного полипептида NS3 по п.15 с фармацевтически приемлемым эксципиентом.

21. Полинуклеотид, содержащий кодирующую последовательность, кодирующую слитый белок по любому из пп.1-14 или модифицированный полипептид NS3 по п.15.

22. Рекомбинантный вектор, содержащий

(a) полинуклеотид по п.21; и

(b) по меньшей мере один контрольный элемент, оперативно связанный с указанным полинуклеотидом, посредством которого указанная кодирующая последовательность может быть транскрибирована и транслирована в клетке-хозяине.

23. Клетка-хозяин, содержащая рекомбинантный вектор по п.22.

24. Способ получения иммуногенного слитого белка или модифицированного полипептида, при этом указанный способ включает в себя культивирование популяции клеток-хозяев по п.23 в условиях продуцирования указанного белка.