Новая псикозо-6-фосфат фосфатаза, композиция для получения псикозы, содержащая указанный фермент, способ получения псикозы с использованием указанного фермента - RU2757229C2

Код документа: RU2757229C2

Чертежи

Описание

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящая заявка относится к новой псикозо-6-фосфат фосфатазе, композиции для получения D-псикозы, содержащей фермент, и способам получения D-псикозы с использованием фермента.

Предшествующий уровень техники

D-псикозо-3-эпимераза (EC 5.1.3.30) и D-тагатозо-3-эпимераза (EC 5.1.3.31) известны в качестве ферментов, которые катализируют 3-эпимеризацию D-фруктозы с получением D-псикозы. Когда D-псикозу получают посредством единственной ферментативной реакции с использованием фермента, равновесие реакции между субстратом (то есть D-фруктозой) и продуктом (то есть D-псикозой) находится на постоянном уровне (продукт/субстрат = ~20-35%). Таким образом, получение сверхчистой D-псикозы требует дополнительного процесса разделения и удаления относительно высокой концентрации D-фруктозы из продукта ферментативной реакции.

С другой стороны, Chan et al. (2008. Biochemistry. 47:9608-9617) сообщил о D-рибулозо-5-фосфат-3-эпимеразе (EC 5.1.3.1), полученной из Streptococcus pyogenes, и о D-псикозо-6-фосфат-3-эпимеразе (EC 5.1.3.-), полученной из E. coli, способной катализировать 3-эпимеризацию D-фруктозо-6-фосфата и D-псикозо-6-фосфата. Однако, эти ферменты не применимы в промышленности из-за их слабой термоустойчивости.

В этих обстоятельствах авторы настоящего изобретения провели серьезное исследование для разработки способа увеличения скорости преобразования D-псикозы в промышленном масштабе экономичным способом. В результате авторы настоящего изобретения обнаружили, что после преобразования сахарозы или крахмала (например, мальтодекстрина) в качестве недорогого исходного материала в D-псикозо-6-фосфат, использование псикозо-6-фосфат фосфатазы, специфичной к D-псикозо-6-фосфату и участвующей в необратимом пути реакции, обеспечивает получение D-псикозы посредством однореакторного ферментативного преобразования с двумя или более ферментами, вовлеченными в пути получения D-псикозы, и может значительно увеличить скорость преобразования в D-псикозу. Настоящая заявка была выполнена на основе этого открытия.

Сущность изобретения

Техническая задача

Одной целью настоящей заявки является предоставление новой псикозо-6-фосфат фосфатазы, содержащей мотив A и мотив B.

Другой целью настоящей заявки является предоставление нуклеиновой кислоты, кодирующей псикозо-6-фосфат фосфатазу, описанную в данном документе, и трансформанта, содержащего нуклеиновую кислоту.

Дополнительной целью настоящей заявки является предоставление композиции для получения D-псикозы, содержащей инозитол-монофосфатазу, микроорганизм, экспрессирующий инозитол-монофосфатазу или культуру микроорганизмов.

Еще одной целью настоящей заявки является предоставление способа получения D-псикозы, включающего введение в контакт инозитол-монофосфатазы, микроорганизма, экспрессирующего инозитол-монофосфатазу, или культуры микроорганизмов с D-псикозо-6-фосфатом для преобразования D-псикозо-6-фосфата в D-псикозу.

Техническое решение

Далее настоящая заявка будет подробно описана. Между тем, объяснения аспектов и вариантов осуществления, раскрытых в настоящей заявке, также можно применить к объяснениям других аспектов и вариантов осуществления. Кроме того, все комбинации разных элементов, раскрытых в настоящей заявке, попадают в объем настоящей заявки. Кроме того, не следует считать, что объем настоящей заявки ограничен следующим подробным описанием.

Для достижения указанных выше и других целей настоящей заявки в одном аспекте настоящей заявки представлена псикозо-6-фосфат фосфатаза, содержащая мотив A, представленный X_a1-X_a2-X_a3-DPLDG-X_a4, причем X_a1 представляет W, F, V, I или A, X_a2 представляет I, F, V, A или гэп, X_a3 представляет V, I или L, а X_a4 представляет T или S, и мотив B, представленный Y_a1-D-Y_a2-W_a1-Y_a3-W_a2-Y_a4-W_a3, причем Y_a1 представляет W, Y, T, L или V, Y_a2 представляет V, I, C, F или A, W_a1 представляет AAG, AAS, SAG, APG, APF, AGG, APL или AGA, Y_a3 представляет W, I, P, M, V, Y, F, R, L, T или S, W_a2 представляет LLV, LIV, LLI, LII, ILI, FIA, ALV, IIA, VLV, VIL, TIG, NFC или PIF, Y_a4 представляет E, R, S, T, L, K или P, а W_a3 представляет EАGG, EGGG, EAKG, KAGG, AAGG, YVDG, EAGA или RLGV.

Конкретно, в мотиве A X_a1 может быть W или F, X_a2 может быть I или V, X_a3 может быть V или I, а X_a4 может быть T. Конкретно, в мотиве B Y_a1 может быть W, Y_a2 может быть V или I, W_a1 может быть AAG, Y_a3 может быть W, I или V, W_a2 может быть LLV, LIV, LII или LLI, Y_a4 может быть E, R или S, а W_a3 может быть EAGG или EGGG.

Между мотивом A и мотивом B может находиться одна или более аминокислот, на одном конце мотива A или на одном конце мотива B. Из последовательностей известных инозитол-монофосфатаз можно образовать аминокислотные последовательности, не являющиеся мотивом A и мотивом B (например, последовательности, не являющиеся мотивом A и мотивом B в последовательностях, приведенных в SEQ ID NO: 1-20).

Мотив A и/или мотив B представляет активный сайт в последовательности инозитол-монофосфатазы. Мотив A и/или мотив B также известен как сайт связывания инозитолфосфата в качестве субстрата фермента (см. Federation of European Biochemical Societies, Volume 294, number 1,2, 16-18, December 1991). Авторы настоящего изобретения обнаружили, что инозитол-монофосфатаза проявляет активность псикозо-6-фосфат фосфатазы. Авторы настоящего изобретения также обнаружили, что мотив A и/или мотив B инозитол-монофосфатазы может представлять собой сайт связывания субстрата фосфатазы.

Псикозо-6-фосфат фосфатаза может содержать, например, любую одну из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 1-20.

Псикозо-6-фосфат фосфатаза согласно настоящей заявке может представлять собой фермент, который имеет функции известных инозитол-монофосфатаз.

Псикозо-6-фосфат фосфатаза согласно настоящей заявке более избирательно катализирует дефосфорилирование D-псикозо-6-фосфата и может быть неспецифической для D-глюкозо-1-фосфата, D-глюкозо-6-фосфата или D-фруктозо-6-фосфата.

Псикозо-6-фосфат фосфатазу согласно настоящей заявке можно получать путем трансформации штамма ферментом как он есть или ДНК, экспрессирующей фермент (например, SEQ ID NO: 21-40), культивирования трансформированного штамма, разрушения культуры с последующей очисткой. Очистку можно выполнять путем колоночной хроматографии. Штаммом может быть, например, Escherichia coli, Corynebacterium glutamicum, Aspergillus oryzae или Bacillus subtilis.

Согласно одному варианту осуществления настоящей заявки псикозо-6-фосфат фосфатаза согласно настоящей заявке может представлять собой фермент, который имеет гомологию, сходство или идентичность по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 99% или 100% с последовательностью мотива A и/или мотива B и проявляет активность псикозо-6-фосфат фосфатазы. Альтернативно, псикозо-6-фосфат фосфатаза согласно настоящей заявке может представлять собой фермент, который имеет гомологию, сходство или идентичность по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 99% или 100% с последовательностями, не являющимися мотивом A и/или мотивом B. В одном варианте осуществления псикозо-6-фосфат фосфатаза согласно настоящей заявке может содержать белок, состоящий из последовательности, которая имеет гомологию, сходство или идентичность по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 99% или 100% с последовательностью мотива A и/или мотива B в последовательностях, приведенных в SEQ ID NO: 1-20, и имеет гомологию, сходство или идентичность по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 99% или 100% с аминокислотной последовательностью, не являющейся мотивом A и/или мотивом B в последовательностях, приведенных в SEQ ID NO: 1-20, или гомологию, сходство или идентичность в диапазоне, образованном любыми двумя из значений выше. Например, в объеме настоящей заявки также находится любая аминокислотная последовательность, которая имеет гомологию, сходство или идентичность, определенные выше, и проявляет эффективность, соответствующую эффективности белка псикозо-6-фосфат фосфатаза, например, белка, состоящего из любой одной из последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 1-20, и имеет частичную делецию, модификацию, замещение или добавление.

Белки, в которых нерелевантные последовательности добавлены впереди и позади последовательностей мотива A и мотива B, находятся в объеме настоящей заявки, и существующие в природе мутации или их молчащие мутации не исключены из объема настоящей заявки при условии, что они имеют активность, соответствующую активности псикозо-6-фосфат фосфатазы, содержащей мотив A и мотив B. В частности, белки, в которых нерелевантные последовательности добавлены впереди и позади любой одной из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 1-20, существующие в природе мутации и их молчащие мутации не исключены из объема настоящей заявки при условии, что они имеют активность, соответствующую активности псикозо-6-фосфат фосфатазы, содержащей мотив A и мотив B. Белки, содержащие мотив A и мотив B, или белки, содержащие аминокислотные последовательности, приведенные в SEQ ID NO: 1-20, также находятся в объеме настоящей заявки при условии, что они имеют активность, соответствующую активности псикозо-6-фосфат фосфатазы, содержащей мотив A и мотив B.

В другом аспекте настоящей заявки представлена нуклеиновая кислота, кодирующая псикозо-6-фосфат фосфатазу.

В рамках настоящего изобретения термин «нуклеиновая кислота» охватывает молекулы ДНК и РНК, и нуклеотид в качестве основной единицы нуклеиновой кислоты включает в себя натуральный нуклеотид, а также аналог с модифицированным сахаром или основанием (см. Scheit, Nucleotide Analogs, John Wiley, New York(1980); Uhlman and Peyman, Chemical Reviews, 90:543-584(1990)).

Конкретно, нуклеиновая кислота, кодирующая псикозо-6-фосфат фосфатазу, может содержать последовательности, содержащие нуклеотиды, которые можно транслировать в мотив A и мотив B. В одном варианте осуществления нуклеиновая кислота согласно настоящей заявке может состоять из любой одной из нуклеотидных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 21-40. Более конкретно, нуклеиновая кислота согласно настоящей заявке может содержать нуклеиновую кислоту, которая имеет гомологию, сходство или идентичность по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 99% или 100% с нуклеотидами, которые можно транслировать в мотив A и мотив B, и может проявлять требуемую ферментативную активность после трансляции. Конкретно, нуклеиновая кислота согласно настоящей заявке может содержать нуклеиновую кислоту, которая имеет гомологию, сходство или идентичность по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 99% или 100% с нуклеотидами, которые можно транслировать в мотив A и мотив B в последовательностях, приведенных в SEQ ID NO: 21-40. Альтернативно, нуклеиновая кислота согласно настоящей заявке может представлять собой нуклеиновую кислоту, которая имеет гомологию, сходство или идентичность по меньшей мере 80%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 97% или по меньшей мере 99% с нуклеотидами, которые можно транслировать в мотивы, не являющиеся мотивом A и мотивом B в последовательностях, приведенных в SEQ ID NO: 21-40. Белки, которые можно транслировать в белки, содержащие мотив A и мотив B, из-за вырожденности кодона, конкретно, белки, состоящие из любой одной из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 1-20, или полинуклеотиды, которые можно транслировать в белки имеющие гомологию, сходство или идентичность с белками, состоящими из любой одной из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 1-20, также находятся в объеме настоящей заявки.

Фермент, содержащий мотив A и мотив B согласно настоящей заявке, можно получить из термоустойчивого или теплолюбивого штамма. Конкретно, ферментом, состоящим из любой одной из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 1-20, может быть фермент, полученный из Rhodothermus marinus, Thermotoga lettingae, Meiothermus ruber, Dictyoglomus turgidum, Pyrobaculum ferrireducens, Thermoanaerobacter wiegelii, Thermus thermophilus, Thermococcus litoralis, Geobacillus stearothermophilus, Anaerolinea thermophila, Sulfolobus acidocaldarius, Thermosulfidibacter takaii, Pyrococcus furiosus, Archaeoglobus fulgidus, Alicyclobacillus acidocaldarius, Meiothermus silvanus, Meiothermus rufus, Meiothermus taiwanensis, Meiothermus chliarophilus или Meiothermus cerbereus.

В рамках настоящего изобретения термин «гомология» или «идентичность» указывает степень родства между двумя заданными аминокислотными последовательностями или нуклеотидными последовательностями, которую можно выразить в процентах.

Термины «гомология» и «идентичность» часто используют взаимозаменяемо.

Гомологию или идентичность последовательностей консервативных полинуклеотидов или полипептидов определяют с помощью стандартных алгоритмов выравнивания, и их можно использовать со штрафами за гэпы по умолчанию, устанавливаемыми с помощью используемых программ. По существу, гомологичная или идентичная последовательность обычно будет гибридизироваться со средней жесткостью или с высокой жесткостью на всем протяжении по меньшей мере приблизительно 50%, 60%, 70%, 80% или 90% полноразмерного интересующего полинуклеотида или полипептида. Также предусмотрены полинуклеотиды, которые содержат вырожденные кодоны вместо кодонов в гибридизирующихся полинуклеотидах.

Являются ли любые две полинуклеотидные или полипептидные последовательности гомологичными, сходными или идентичными, можно определить с использованием известных компьютерных алгоритмов, таких как программа «FASTA», с использованием например, параметров по умолчанию, как в Pearson et al. (1988), Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 2444. Альтернативно, гомологию, сходство или идентичность последовательностей можно определить с использованием алгоритма Needleman-Wunsch (Needleman и Wunsch, 1970, J. Mol. Biol. 48: 443-453), который реализован в программе Needle пакета EMBOSS (EMBOSS: European Molecular Biology Open Software Suite, Rice et al. 2000, Trends Genet. 16: 276-277), версия 5.0.0 или более поздняя. Другие программы включают пакет программ GCG (Devereux, J., et al, Nucleic Acids Research 12: 387 (1984)), BLASTP, BLASTN, FASTA (Atschul, [S.] [F.,] [ET AL, J MOLEC BIOL 215]: 403 (1990); Guide to Huge Computers, Martin J. Bishop, [ED.,] Academic Press, San Diego, 1994, and [CARILLO et al.] (1988) SIAM J Applied Math 48: 1073). Например, для определения гомологии, сходства или идентичности можно использовать инструмент BLAST базы данных NCBI. Также можно использовать другие коммерческие или общедоступные программы, такие как ClustalW.

Процент гомологии, сходства или идентичности полинуклеотидов или полипептидов можно определить, например, путем сравнения информации о последовательности с использованием компьютерной программы GAP (например, Needleman et al. (1970) J. Mol. Biol. 48:443, пересмотренной Smith и Waterman, Adv. Appl. Math (1981) 2:482). Кратко, программа GAP определяет сходство, как количество выровненных символов (то есть нуклеотидов или аминокислот), которые являются сходными, разделенных на общее количество символов в более короткой из двух последовательностей. Параметры по умолчанию для программы GAP могут включать: (1) унарную матрицу сравнения (содержащую значение 1 для тождеств и 0 для не тождеств) и взвешенную матрицу сравнения Gribskov et al. (1986) Nucl. Acids Res.14:6745, которая описана в Schwartz и Dayhoff, eds. Atlas Of Protein Sequence And Structure, National Biomedical Research Foundation, pp. 353-358 (1979); (2) штраф 3,0 за каждый гэп и дополнительный штраф 0,10 для каждого символа в каждом гэпе (или штраф 10,0 за открытие гэпа, штраф 0,5 за продление гэпа); и (3) отсутствие штрафа за концевые гэпы. Следовательно, термины «гомология» или «идентичность», которые использованы в данном документе, означают сравнение между полипептидами или полинуклеотидами.

В дополнительном аспекте настоящей заявки представлен вектор, содержащий нуклеиновую кислоту, кодирующую псикозо-6-фосфат фосфатазу, описанную в данном документе, или трансформант, содержащий нуклеиновую кислоту, кодирующую псикозо-6-фосфат фосфатазу, или вектор, содержащий нуклеиновую кислоту, кодирующую псикозо-6-фосфат фосфатазу.

В рамках настоящего изобретения термин «вектор» относится к любому носителю для клонирования и/или переноса оснований нуклеиновой кислоты в клетку-хозяин. Вектор может представлять собой репликон, к которому может быть присоединен другой сегмент ДНК, чтобы вызвать репликацию присоединенного сегмента. «Репликон» относится к любому генетическому элементу (например, плазмиде, фагу, космиде, хромосоме или вирусу), который функционирует в качестве автономной единицы репликации ДНК in vivo, то есть способен к репликации под своим собственным управлением. Термин «вектор» может включать как вирусные, так и невирусные носители для введения нуклеиновой кислоты в клетку-хозяин in vitro, ex vivo или in vivo. Термин «вектор» может также включать миникольцевые ДНК. Конкретно, вектором, содержащим нуклеиновую кислоту, кодирующую псикозо-6-фосфат фосфатазу согласно настоящей заявке, может быть pET21a-CJ_Rma, pET21a-CJ_Tle, pET21a-CJ_Mrub, pET21a-CJ_Dtu, pET21a-CJ_Msi, pET21a-CJ_Mruf, pET21a-CJ_Mta, pET21a-CJ_Mch, pET21a-CJ_Mce, pBT7-C-His-CJ_Pfe, pBT7-C-His-CJ_Twi, pBT7-C-His-CJ_Tth, pBT7-C-His-CJ_Tli, pBT7-C-His-CJ_Gst, pBT7-C-His-CJ_Ath, pBT7-C-His-CJ_Sac, pBT7-C-His-CJ_Tta, pBT7-C-His-CJ_Pfu, pBT7-C-His-CJ_Afu или pBT7-C-His-CJ_Aac.

В рамках настоящего изобретения термин «трансформация» относится к введению вектора, содержащего нуклеиновую кислоту, кодирующую белок-мишень, в клетку-хозяин для экспрессии белка, кодируемого нуклеиновой кислотой в клетке-хозяине. Трансформированная нуклеиновая кислота либо может быть вставлена и локализована в хромосоме клетки-хозяина, либо может существовать вне хромосом при условии, что она может экспрессироваться в клетке-хозяине. Нуклеиновая кислота включает ДНК и РНК, кодирующие белок-мишень. Нуклеиновую кислоту можно вводить в любой форме при условии, что она может быть введена и экспрессироваться в клетке-хозяине. Например, нуклеиновую кислоту можно вводить в клетку-хозяин в форме кассеты экспрессии, которая представляет собой генную конструкцию, содержащую все элементы, необходимые для ее автономной экспрессии, но ее форма этим не ограничена. Обычно экспрессионная кассета содержит промотор, функционально связанный с нуклеиновой кислотой, сигнал терминации транскрипции, домен, связывающий рибосому, и сигнал терминации трансляции. Кассета экспрессии может быть в форме самореплицируемого вектора экспрессии. Нуклеиновую кислоту можно вводить в клетку-хозяин в том виде, как она есть, и функционально связывать с последовательностью, необходимой для экспрессии в клетке-хозяине.

В рамках настоящего изобретения термин «функционально связанный» относится к функциональной связи между промоторной последовательностью, инициирующей и опосредующей транскрипцию нуклеиновой кислоты, кодирующей белок-мишень согласно настоящей заявке, и последовательностью генов.

Для аминокислот, упомянутых в настоящей заявке, используют следующие сокращения и названия.

[Таблица 1]

Тип аминокислотыСокращениеАланинAАргининRАспарагинNАспарагиновая кислотаDЦистеинCГлютаминовая кислотаEГлютаминQГлицинGГистидинHИзолейцинIЛейцинLЛизинKМетионинMФенилаланинFПролинPСеринSТреонинTТриптофанWТирозинYВалинV

Для введения нуклеиновой кислоты в клетку можно использовать любой метод трансформации. Способ трансформации можно осуществлять с помощью подходящего стандартного метода, известного в данной области техники, в зависимости от типа клетки-хозяина. Примеры таких способов трансформации включают, но без ограничения, электропорацию, осаждение фосфатом кальция (CaPO₄), осаждение хлоридом кальция (CaCl₂), ретровирусную инфекцию, микроинъекцию, полиэтиленгликолевый метод (PEG), диэтиламиноэтилдекстрановый метод, катионный липосомный метод и метод ацетата лития диметилсульфоксида.

Клетками-хозяевами предпочтительно являются клетки-хозяева, в которые с высокой эффективностью вводят ДНК и в которых введенная ДНК экспрессируется на высоком уровне. Примеры клеток-хозяев включают, но без ограничения, клетки микроорганизмов, относящихся к родам Corynebacterium, Escherichia и Serratia. Конкретно, клетками-хозяевами могут быть клетки E. coli.

Трансформантом согласно настоящей заявке может быть E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Rma(E. coli_P1_CJ_Rma, KCCM12057P), E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Tle(E. coli_P2_CJ_Tle, KCCM12058P), E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Mrub(E. coli_P3_CJ_Mrub, KCCM12059P), E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Dtu(E. coli_P4_CJ_Dtu, KCCM12060P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Pfe(E. coli_P5_CJ_Pfe, KCCM12061P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Twi(E. coli_P6_CJ_Twi, KCCM12062P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Tth(E. coli_P7_CJ_Tth, KCCM12063P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Tli(E. coli_P8_CJ_Tli, KCCM12064P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Gst(E. coli_P9_CJ_Gst, KCCM12065P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Ath(E. coli_P10_CJ_Ath, KCCM12066P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Sac(E. coli_P11_CJ_Sac, KCCM12067P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Tta(E. coli_P12_CJ_Tta, KCCM12068P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Pfu(E. coli_P13_CJ_Pfu, KCCM12069P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Afu(E. coli_P14_CJ_Afu, KCCM12070P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Aac(E. coli_P15_CJ_Aac, KCCM12071P), E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Msi(E. coli_P16_CJ_Msi, KCCM12072P), E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Mruf(E. coli_P17_CJ_Mruf, KCCM12073P), E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Mta(E. coli_P18_CJ_Mta, KCCM12074P), E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Mch(E. coli_P19_CJ_Mch, KCCM12075P) или E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Mce(E. coli_P20_CJ_Mce, KCCM12076P).

В другом аспекте настоящей заявки представлена композиция для получения D-псикозы, содержащая инозитол-монофосфатазу, микроорганизм, экспрессирующий инозитол-монофосфатазу, или культуру микроорганизмов, экспрессирующих инозитол-монофосфатазу.

Инозитол-монофосфатаза согласно настоящей заявке может содержать мотив A, представленный X_a1-X_a2-X_a3-DPLDG-X_a4, причем X_a1 представляет W, F, V, I или A, X_a2 представляет I, F, V, A или гэп, X_a3 представляет V, I или L, а X_a4 представляет T или S, и мотив B, представленный Y_a1-D-Y_a2-W_a1-Y_a3-W_a2-Y_a4-W_a3, причем Y_a1 представляет W, Y, T, L или V, Y_a2 представляет V, I, C, F или A, W_a1 представляет AAG, AAS, SAG, APG, APF, AGG, APL или AGA, Y_a3 представляет W, I, P, M, V, Y, F, R, L, T или S, W_a2 представляет LLV, LIV, LLI, LII, ILI, FIA, ALV, IIA, VLV, VIL, TIG, NFC или PIF, Y_a4 представляет E, R, S, T, L, K или P, а W_a3 представляет EАGG, EGGG, EAKG, KAGG, AAGG, YVDG, EAGA или RLGV. То есть, инозитол-монофосфатазу можно использовать взаимозаменяемо с псикозо-6-фосфат фосфатазой. Таким образом, объяснения псикозо-6-фосфат фосфатазы можно применять к инозитол-монофосфатазе. В одном варианте осуществления инозитол-монофосфатазой может быть фермент, состоящий из любой одной из аминокислотных последовательностей, приведенных в SEQ ID NO: 1-20.

Композиция согласно настоящей заявке может дополнительно содержать фермент и/или субстрат, вовлеченный в путь получения D-псикозы (см. ФИГ. 1) [(i) крахмал, мальтодекстрин, сахарозу или их комбинацию; (ii) фосфат; (iii) D-фруктозо-6-фосфат-3-эпимеразу; (iv) D-глюкозо-6-фосфат-изомеразу; (v) фосфоглюкомутазу или глюкокиназу; и/или (vi) α-глюканфосфорилазу, фосфорилазу крахмала, фосфорилазу мальтодекстрина, фосфорилазу сахарозы, α-амилазу, пуллуланазу, изоамилазу, глюкоамилазу или сахаразу]; микроорганизм, экспрессирующий фермент, вовлеченный в путь получения D-псикозы; или культуру микроорганизмов, экспрессирующих фермент, вовлеченный в путь получения D-псикозы. Дополнительный фермент и субстрат являются всего лишь иллюстративными и не являются ограничением при условии, что D-псикозу можно получать с использованием псикозо-6-фосфат фосфатазы согласно настоящей заявке.

Фосфорилаза крахмала/мальтодекстрина (EC 2.4.1.1) и α-глюканфосфорилаза может включать в себя любой белок, активный при переносе фосфорила в глюкозу с получением D-глюкозо-1-фосфата из крахмала или мальтодекстрина. Конкретно, белок активный при получении D-глюкозо-1-фосфата из крахмала или мальтодекстрина, может состоять из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 59. Белок, активный при получении D-глюкозо-1-фосфата из крахмала или мальтодекстрина, может кодироваться последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 60.

Фосфорилаза сахарозы (EC 2.4.1.7) может содержать любой белок, активный при переносе фосфорила в глюкозу с получением D-глюкозо-1-фосфата из сахарозы.

α-амилаза (EC 3.2.1.1), пуллуланаза (EC 3.2.1.41), глюкоамилаза (EC 3.2.1.3) и изоамилаза представляют собой разжижающие крахмал ферменты и могут содержать любой белок, активный для преобразования крахмала или мальтодекстрина в глюкозу.

Сахараза (EC 3.2.1.26) может содержать любой белок, активный для преобразования сахарозы в глюкозу.

Фосфоглюкомутаза (EC 5.4.2.2) может содержать любой белок, активный для преобразования D-глюкозо-1-фосфата в D-глюкозо-6-фосфат. Конкретно, белок, активный для преобразования D-глюкозо-1-фосфата в D-глюкозо-6-фосфат, может содержать аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 61. Белок, активный для преобразования D-глюкозо-1-фосфата в D-глюкозо-6-фосфат, может кодироваться последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 62.

Глюкокиназа может содержать любой белок, активный при переносе фосфорила в глюкозу для преобразования глюкозы в D-глюкозо-6-фосфат. Конкретно, глюкокиназа может представлять собой полифосфат-зависимую глюкокиназу. Более конкретно, глюкокиназа может представлять собой белок, состоящий из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 77 или 78. D-глюкозо-6-фосфат-изомераза может содержать любой белок, активный для преобразования D-глюкозо-6-фосфата в D-фруктозо-6-фосфат. Конкретно, D-глюкозо-6-фосфат-изомераза может представлять собой белок, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 63. D-глюкозо-6-фосфат-изомераза может кодироваться последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 64.

D-фруктозо-6-фосфат-3-эпимераза может содержать любой белок, активный для преобразования D-фруктозо-6-фосфата в D-псикозо-6-фосфат. Конкретно, D-фруктозо-6-фосфат-3-эпимераза может представлять собой белок, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 65. D-фруктозо-6-фосфат-3-эпимераза может кодироваться последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 66.

Композиция для получения D-псикозы согласно настоящей заявке может дополнительно содержать белок, активный для преобразования глюкозы в крахмал, мальтодекстрин или сахарозу. Белком может быть, например, 4-α-глюканотрансфераза. Белком, активным для преобразования глюкозы в крахмал, мальтодекстрин или сахарозу, может быть фермент, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 67. Конкретно, белок, активный для преобразования глюкозы в крахмал, мальтодекстрин или сахарозу, может кодироваться нуклеотидной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 68. Композиция для получения D-псикозы согласно настоящей заявке может дополнительно содержать любое подходящее вспомогательное вещество, известное в данной области. Примеры таких вспомогательных веществ включают, но без ограничения, консерванты, смачивающие средства, диспергаторы, суспендирующие средства, буферы, стабилизаторы изотонические средства.

Композиция для получения D-псикозы согласно настоящей заявке может дополнительно содержать ион металла или соль металла. В одном варианте осуществления ион металла может представлять собой катион двухвалентного металла. Конкретно, ион металла можно выбирать из группы, состоящей из ионов Ni, Mg, Co, Mn, Fe и Zn. Более конкретно, композиция для получения D-псикозы согласно настоящей заявке может дополнительно содержать соль металла. Еще более конкретно, соль металла можно выбирать из группы, состоящей из NiSO₄, MgSO₄, MgCl₂, NiCl₂, CoSO₄, CoCl₂, MnCl₂, FeSO₄, ZnSO₄ и их смесей.

В другом аспекте настоящей заявки представлен способ получения D-псикозы, включающий введение в контакт инозитол-монофосфатазы, микроорганизма, экспрессирующего фермент, или культуры микроорганизмов с D-псикозо-6-фосфатом для преобразования D-псикозо-6-фосфата в D-псикозу.

Инозитол-монофосфатаза может содержать мотив A, представленный X_a1-X_a2-X_a3-DPLDG-X_a4, и мотив B, представленный Y_a1-D-Y_a2-W_a1-Y_a3-W_a2-Y_a4-W_a3. В данном документе инозитол-монофосфатазу можно использовать взаимозаменяемо с псикозо-6-фосфат фосфатазой.

Способ согласно настоящей заявке может дополнительно включать перед преобразованием D-псикозо-6-фосфата в D-псикозу введение D-фруктозо-6-фосфат-3-эпимеразы, микроорганизма, экспрессирующего D-фруктозо-6-фосфат-3-эпимеразу, или культуры микроорганизмов, экспрессирующих D-фруктозо-6-фосфат-3-эпимеразу, в контакт с D-фруктозо-6-фосфатом для преобразования D-фруктозо-6-фосфата в D-псикозо-6-фосфат.

Способ согласно настоящей заявке может дополнительно включать перед преобразованием D-фруктозо-6-фосфата в D-псикозо-6-фосфат введение D-глюкозо-6-фосфат-изомеразы, микроорганизма, экспрессирующего D-глюкозо-6-фосфат-изомеразу, или культуры микроорганизмов, экспрессирующих D-глюкозо-6-фосфат-изомеразу, в контакт с D-глюкозо-6-фосфатом для преобразования D-глюкозо-6-фосфата в D-фруктозо-6-фосфат.

Способ согласно настоящей заявке может дополнительно включать перед преобразованием D-глюкозо-6-фосфата в D-фруктозо-6-фосфат введение фосфоглюкомутазы, микроорганизма, экспрессирующего фосфоглюкомутазу, или культуры микроорганизмов, экспрессирующих фосфоглюкомутазу, в контакт с D-глюкозо-1-фосфатом для преобразования D-глюкозо-1-фосфата в D-глюкозо-6-фосфат.

Способ согласно настоящей заявке может дополнительно включать перед преобразованием D-глюкозо-6-фосфата в D-фруктозо-6-фосфат введение глюкокиназы, микроорганизма, экспрессирующего глюкокиназу, или культуры микроорганизмов, экспрессирующих глюкокиназу, и фосфата в контакт с глюкозой для преобразования глюкозы в D-глюкозо-6-фосфат.

Способ согласно настоящей заявке может дополнительно включать перед преобразованием D-глюкозо-1-фосфата в D-глюкозо-6-фосфат введение α-глюканфосфорилазы, фосфорилазы крахмала, фосфорилазы мальтодекстрина или фосфорилазы сахарозы, микроорганизма, экспрессирующего фосфорилазу, или культуры микроорганизмов, экспрессирующих фосфорилазу, и фосфата в контакт с крахмалом, мальтодекстрином, сахарозой или их комбинацией для преобразования крахмала, мальтодекстрина, сахарозы или их комбинации в D-глюкозо-1-фосфат.

Способ согласно настоящей заявке может дополнительно включать перед преобразованием глюкозы в D-глюкозо-6-фосфат введение α-амилазы, пуллуланазы, глюкоамилазы, сахаразы или изоамилазы, микроорганизма, экспрессирующего α-амилазу, пуллуланазу, глюкоамилазу, сахаразу или изоамилазу, или культуры микроорганизмов, экспрессирующих α-амилазу, пуллуланазу, глюкоамилазу, сахаразу или изоамилазу, в контакт с крахмалом, мальтодекстрином, сахарозой или их комбинацией для преобразования крахмала, мальтодекстрина, сахарозы или их комбинации в глюкозу.

Еще в одном аспекте настоящей заявки представлен способ получения D-псикозы включающий введение (a) инозитол-монофосфатазы, D-фруктозо-6-фосфат-3-эпимеразы, D-глюкозо-6-фосфат-изомеразы, фосфоглюкомутазы или глюкокиназы и α-глюканфосфорилазы, фосфорилазы крахмала, фосфорилазы мальтодекстрина, фосфорилазы сахарозы, α-амилазы, пуллуланазы, изоамилазы, глюкоамилазы или сахаразы или (b) микроорганизма, экспрессирующего ферменты (a), или культуры микроорганизмов в контакт с крахмалом, мальтодекстрином, сахарозой или их комбинацией и фосфатом.

В способе согласно настоящей заявке контактную реакцию можно проводить при pH 5,0-9,0, конкретно pH 6,0-8,0.

В способе согласно настоящей заявке контактную реакцию можно проводить при температуре 40°C-80°C, конкретно при температуре 40°C-60°C или 50°C-60°C.

В способе согласно настоящей заявке контактную реакцию можно проводить в течение от 2 часов до 24 часов, конкретно 6-24 часов.

В способе согласно настоящей заявке контактную реакцию можно проводить при pH 5,0-9,0, при температуре 40°C-80°C и/или в течение от 2 часов до 24 часов. Конкретно, контактную реакцию можно проводить при pH 6,0-8,0, при температуре 40°C-60°C или 50°C-60°C и/или в течение от 6 часов до 24 часов.

Способ согласно настоящей заявке может дополнительно включать очистку продукта реакции D-псикозы. Нет особого ограничения способа очистки D-псикозы. D-псикозу можно очищать любым подходящим способом, известным в данной области. Неограничивающие примеры таких способов очистки включают хроматографию, фракционную кристаллизацию и ионную очистку, которые можно проводить отдельно или в комбинации. Например, D-псикозу можно очищать путем хроматографии. В этом случае сахарид-мишень можно отделять на основе небольших отличий в силе связывания между сахаридами и ионами металлов, присоединенными к ионной смоле.

Каждый из способов согласно настоящей заявке может дополнительно включать отбеливание и/или дименирализацию перед или после стадии очистки. Отбеливание и/или дименирализация делает D-псикозу более чистой без примесей.

Предпочтительные результаты

Новая псикозо-6-фосфат фосфатаза согласно настоящей заявке является термоустойчивой инозитол-монофосфатазой. Из-за своей термоустойчивости фермент согласно настоящей заявке может участвовать в пути преобразования D-псикозо-6-фосфата в D-псикозу, обеспечивая получение D-псикозы в промышленном масштабе. Использование фермента согласно настоящей заявке обеспечивает прохождение пути синтеза D-псикозы из глюкозы или крахмала (например, мальтодекстрина) в качестве недорогого исходного материала. Кроме того, при использовании фермента согласно настоящей заявке D-псикозу можно получать посредством необратимого дефосфорилирования D-псикозо-6-фосфата. Вследствие этого, использование фермента согласно настоящей заявке значительно увеличивает скорость преобразования в D-псикозу.

Кроме того, способы согласно настоящей заявке на основе использование инозитол-монофосфатазы обеспечивают получение высокой концентрации D-псикозы при высокой скорости преобразования, упрощая или исключая разделение и очистку продукта реакции. Вследствие этого, способы согласно настоящей заявке можно проводить простым способом, и они является предпочтительными с экономической точки зрения.

Описание чертежей

На ФИГ. 1 схематично представлены пути ферментативной реакции для получения D-псикозы из крахмала (например, мальтодекстрина) или глюкозы.

На ФИГ. 2a, 2b и 2c представлены изображения SDS-PAGE маркеров размеров (M), экспрессируемых коферментов (S) и очищенных рекомбинантных ферментов (E) (pET21a-CJ_Rma, pET21a-CJ_Tle, pET21a-CJ_Mrub, pET21a-CJ_Dtu, pBT7-C-His-CJ_Pfe, pBT7-C-His-CJ_Twi, pBT7-C-His-CJ_Tth, pBT7-C-His-CJ_Tli, pBT7-C-His-CJ_Gst, pBT7-C-His-CJ_Ath, pBT7-C-His-CJ_Sac, pBT7-C-His-CJ_Tta, pBT7-C-His-CJ_Pfu, pBT7-C-His-CJ_Afu, pBT7-C-His-CJ_Aac, pET21a-CJ_Msi, pET21a-CJ_Mruf, pET21a-CJ_Mta, pET21a-CJ_Mch, pET21a-CJ_Mce) для определения их молекулярных масс, которые получали после электрофореза белка.

На ФИГ. 3a представлена относительная активность инозитол-монофосфатаз (pET21a-CJ_Rma, pET21a-CJ_Tle, pET21a-CJ_Mrub, pET21a-CJ_Dtu, pBT7-C-His-CJ_Pfe, pBT7-C-His-CJ_Twi, pBT7-C-His-CJ_Tth, pBT7-C-His-CJ_Tli, pBT7-C-His-CJ_Gst, pBT7-C-His-CJ_Ath, pBT7-C-His-CJ_Sac, pBT7-C-His-CJ_Tta, pBT7-C-His-CJ_Pfu, pBT7-C-His-CJ_Afu, pBT7-C-His-CJ_Aac) для дефосфорилирования (%, левая ось Y, гистограмма) и избирательные скорости дефосфорилирования с помощью инозитол-монофосфатаз в смеси дефосфорилирования, содержащей D-глюкозо-6-фосфат, D-глюкозо-1-фосфат, D-фруктозо-6-фосфат и D-псикозо-6-фосфат (%, правая ось Y, квадратные точки).

На ФИГ. 3b представлено сравнение относительной активности (%) инозитол-монофосфатаз (pET21a-CJ_Mrub, pET21a-CJ_Msi, pET21a-CJ_Mruf, pET21a-CJ_Mta, pET21a-CJ_Mch, pET21a-CJ_Mce) для дефосфорилирования.

На ФИГ. 4a представлены HPLC хроматограммы, подтверждающие получение D-псикозы из мальтодекстрина посредством множества ферментативных реакций с α-глюканфосфорилазой, фосфоглюкомутазой, D-глюкозо-6-фосфат-изомеразой, 4-α-глюканотрансферазой, D-фруктозо-6-фосфат-3-эпимеразой и псикозо-6-фосфат фосфатазой.

На ФИГ. 4b представлены HPLC хроматограммы, подтверждающие получение D-псикозы посредством избирательного дефосфорилирования D-псикозо-6-фосфата в реакционном растворе, содержащем D-глюкозо-1-фосфат, D-глюкозо-6-фосфат, D-фруктозо-6-фосфат и D-псикозо-6-фосфат в присутствии инозитол-монофосфатазы согласно настоящей заявке.

Способ осуществления изобретения

Настоящая заявка будет подробно объяснена со ссылкой на следующие примеры. Однако, эти примеры представлены, чтобы помочь понять настоящую заявку, а не ограничить объем настоящей заявки.

Примеры

Пример 1: Получение рекомбинантных векторов экспрессии инозитол-монофосфатаз и трансформированных микроорганизмов

Для получения псикозо-6-фосфат фосфатазы, необходимой для пути получения D-псикозы, скринировали гены термоустойчивой инозитол-монофосфатазы. Конкретно, гены инозитол-монофосфатазы (Rma, Tle, Mrub, Dtu, Msi, Mruf, Mta, Mch, и Mce) скринировали из геномных последовательностей Rhodothermus marinus, Thermotoga lettingae, Meiothermus ruber, Dictyoglomus turgidum, Pyrobaculum ferrireducens, Thermoanaerobacter wiegelii, Thermus thermophilus, Thermococcus litoralis, Geobacillus stearothermophilus, Anaerolinea thermophila, Sulfolobus acidocaldarius, Thermosulfidibacter takaii, Pyrococcus furiosus, Archaeoglobus fulgidus, Alicyclobacillus acidocaldarius, Meiothermus silvanus, Meiothermus rufus, Meiothermus taiwanensis, Meiothermus chliarophilus и Meiothermus cerbereus, зарегистрированных в GenBank.

На основе информации о нуклеотидных последовательностях (SEQ ID NO: 21, 22, 23, 24, 36, 37, 38, 39 и 40 в порядке генов) и аминокислотных последовательностях (SEQ ID NO: 1, 2, 3, 4, 16, 17, 18, 19 и 20 в порядке генов) скринированных генов, конструировали прямые праймеры (SEQ ID NO: 41, 43, 45, 47, 49, 51, 53, 55 и 57) и обратные праймеры (SEQ ID NO: 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56 и 58). Гены амплифицировали из геномных ДНК Rhodothermus marinus, Thermotoga lettingae, Meiothermus ruber, Dictyoglomus turgidum, Meiothermus silvanus, Meiothermus rufus, Meiothermus taiwanensis, Meiothermus chliarophilus и Meiothermus cerbereus посредством полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием синтезированных праймеров. Амплифицированные гены инозитол-монофосфатазы вставляли в плазмидный вектор pET21a (Novagen) для экспрессии E. coli с использованием рестрикционных ферментов NdeI и XhoI или Sa1I для конструирования рекомбинантных векторов экспрессии, которые назвали pET21a-CJ_Rma(Nde I/Xho I), pET21a-CJ_Tle(Nde I/Xho I), pET21a-CJ_Mrub(Nde I/Xho I), pET21a-CJ_Dtu(Nde I/Xho I), pET21a-CJ_Msi(Nde I/Sal I), pET21a-CJ_Mruf(Nde I/Sal I), pET21a-CJ_Mta(Nde I/Sal I), pET21a-CJ_Mch(Nde I/Sal I) и pET21a-CJ_Mce(Nde I/Sal I).

Кроме того, скринировали гены инозитол-монофосфатазы (Pfe, Twi, Tth, Tli, Gst, Ath, Sac, Tta, Pfu, Afu и Aac), полученные из Pyrobaculum ferrireducens, Thermoanaerobacter wiegelii, Thermus thermophilus, Thermococcus litoralis, Geobacillus stearothermophilus, Anaerolinea thermophila, Sulfolobus acidocaldarius, Thermosulfidibacter takaii, Pyrococcus furiosus, Archaeoglobus fulgidus и Alicyclobacillus acidocaldarius. На основе информации о нуклеотидных последовательностях (SEQ ID NO: 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34 и 35 в порядке генов) и аминокислотных последовательностях (SEQ ID NO: 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 и 15 в порядке генов) скринированных генов запросили синтез ДНК в Bioneer (Корея). ДНК вставляли в вектор pBT7-C-His (Bioneer) для конструирования рекомбинантных векторов экспрессии, которые назвали pBT7-C-His-CJ_Pfe, pBT7-C-His-CJ_Twi, pBT7-C-His-CJ_Tth, pBT7-C-His-CJ_Tli, pBT7-C-His-CJ_Gst, pBT7-C-His-CJ_Ath, pBT7-C-His-CJ_Sac, pBT7-C-His-CJ_Tta, pBT7-C-His-CJ_Pfu, pBT7-C-His-CJ_Afu и pBT7-C-His-CJ_Aac.

Векторы экспрессии трансформировали в штамм E. coli BL21(DE3) с помощью обычной методики трансформации (см. Sambrook et al. 1989) с получением трансформированных микроорганизмов, которые назвали E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Rma (E. coli_P1_CJ_Rma, KCCM12057P), E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Tle (E. coli_P2_CJ_Tle, KCCM12058P), E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Mrub (E. coli_P3_CJ_Mrub, KCCM12059P), E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Dtu (E. coli_P4_CJ_Dtu, KCCM12060P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Pfe (E. coli_P5_CJ_Pfe, KCCM12061P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Twi (E. coli_P6_CJ_Twi, KCCM12062P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Tth (E. coli_P7_CJ_Tth, KCCM12063P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Tli (E. coli_P8_CJ_Tli, KCCM12064P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Gst (E. coli_P9_CJ_Gst, KCCM12065P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Ath (E. coli_P10_CJ_Ath, KCCM12066P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Sac (E. coli_P11_CJ_Sac, KCCM12067P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Tta (E. coli_P12_CJ_Tta, KCCM12068P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Pfu (E. coli_P13_CJ_Pfu, KCCM12069P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Afu (E. coli_P14_CJ_Afu, KCCM12070P), E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Aac (E. coli_P15_CJ_Aac, KCCM12071P), E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Msi (E. coli_P16_CJ_Msi, KCCM12072P), E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Mruf (E. coli_P17_CJ_Mruf, KCCM12073P), E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Mta (E. coli_P18_CJ_Mta, KCCM12074P), E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Mch (E. coli_P19_CJ_Mch, KCCM12075P) и E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Mce (E. coli_P20_CJ_Mce, KCCM12076P).

Трансформированные штаммы депонировали в центре культур микроорганизмов Кореи (KCCM) 10 июля 2017 года по Будапештскому договору (регистрационный номер: KCCM12057P - KCCM12076P).

Пример 2: Получение ферментов, необходимых для пути получения D-псикозы

Для получения α-глюканфосфорилазы, фосфоглюкомутазы, D-глюкозо-6-фосфат-изомеразы и D-фруктозо-6-фосфат-3-эпимеразы, полученных из Thermotoga neapolitana в качестве термоустойчивых ферментов, необходимых для путей получения D-псикозы, скринировали гены, соответствующие ферментам (ct1, ct2, tn1 и fp3e в порядке ферментов).

На основе нуклеотидных последовательностей (SEQ ID NO: 60, 62, 64 и 66 в порядке ферментов) и аминокислотных последовательностей (SEQ ID NO: 59, 61, 63 и 65 в порядке ферментов) скринированных генов конструировали прямые праймеры (SEQ ID NO: 69, 71, 73 и 75) и обратные праймеры (SEQ ID NO: 70, 72, 74 и 76). Гены ферментов амплифицировали из геномной ДНК Thermotoga neapolitana в качестве матрицы посредством полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием праймеров. ПЦР проводили в течение в общей сложности 25 циклов с использованием следующих условий: денатурирование при 95°C в течение 30 сек, отжигание при 55°C в течение 30 сек и полимеризация при 68°C в течение 2 мин. Амплифицированные гены ферментов вставляли в плазмидный вектор pET21a (Novagen) для экспрессии E. coli с использованием рестрикционных ферментов NdeI и XhoI для конструирования рекомбинантных векторов экспрессии, которые назвали pET21a-CJ_ct1, pET21a-CJ_ct2, pET21a-CJ_ tn1 и pET21a-CJ_ fp3e. Рекомбинантные векторы экспрессии трансформировали в штамм E. coli BL21(DE3) посредством обычной методики трансформации (см. Sambrook et al. 1989) с получением трансформированных микроорганизмов, которые назвали E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_ct1 (KCCM11990P), E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_ct2 (KCCM11991P), E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_tn1 (KCCM11992P), и E. coli BL21(DE3)/CJ_tn_fp3e (KCCM11848P). Штаммы депонировали в центре культур микроорганизмов Кореи (KCCM) 23 июня 2016 года по Будапештскому договору.

Пример 3: Получение рекомбинантных ферментов

В этом примере получали рекомбинантные ферменты. Сначала культуральную пробирку, содержащую 5 мл жидкой среды LB, инокулировали каждым из трансформированных микроорганизмов, полученных в примерах 1 и 2. Инокулят культивировали в шейкере-инкубаторе при 37°С до достижения поглощения 2,0 при 600 нм. Культуральный бульон добавляли в жидкую среду LB в культуральной колбе с последующей основной культурой. Когда поглощение культуры при 600 нм достигло 2,0, добавляли 1 мМ IPTG для индукции экспрессии и получения рекомбинантного фермента. Температуру культуры поддерживали при 37°С при перемешивании со скоростью 180 об/мин. Культуральный бульон центрифугировали при 8000 × g и 4°С в течение 20 минут для сбора бактериальных клеток. Собранные бактериальные клетки дважды промывали 50 мМ трис-HCl-буфером (рН 8,0) и суспендировали в том же буфере. Затем клетки разрушали с помощью ультразвукового гомогенизатора. Клеточный лизат центрифугировали при 13000 × g и 4°С в течение 20 минут. Рекомбинантный фермент очищали от супернатанта с помощью аффинной хроматографии His-tag. Очищенный рекомбинантный фермент подвергали диализу против 50 мМ буфера Tris-HCl (рН 8,0) и затем использовали для последующей реакции. Молекулярную массу очищенного рекомбинантного фермента определяли с помощью SDS-PAGE.

Далее следуют названия и молекулярные массы очищенных ферментов, полученных с использованием трансформированных микроорганизмов (ФИГ. 2a, 2b и 2c):

30,3 кДа для фермента (RMA), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Rma (E. coli_P1_CJ_Rma);

28,5 кДа для фермента (TLE), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Tle (E. coli_P2_CJ_Tle);

28 кДа для фермента (MRUB), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Mrub (E. coli_P3_CJ_Mrub);

30,2 кДа для фермента (DTU), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Dtu (E. coli_P4_CJ_Dtu);

27,2 кДа для фермента (PFE), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Pfe (E. coli_P5_CJ_Pfe);

28,8 кДа для фермента (TWI), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Twi (E. coli_P6_CJ_Twi);

28,6 кДа для фермента (TTH), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Tth (E. coli_P7_CJ_Tth);

28 кДа для фермента (TLI), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Tli (E. coli_P8_CJ_Tli);

29,6 кДа для фермента (GST), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Gst (E. coli_P9_CJ_Gst);

28,7 кДа для фермента (ATH), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Ath (E. coli_P10_CJ_Ath);

29,9 кДа для фермента (SAC), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Sac (E. coli_P11_CJ_Sac);

28,6 кДа для фермента (TTA), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Tta (E. coli_P12_CJ_Tta);

27,9 кДа для фермента (PFU), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Pfu (E. coli_P13_CJ_Pfu);

28 кДа для фермента (AFU), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Afu (E. coli_P14_CJ_Afu);

29 кДа для фермента (AAC), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pBT7-C-His-CJ_Aac (E. coli_P15_CJ_Aac);

28,1 кДа для фермента (MSI), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Msi (E. coli_P16_CJ_Msi);

28 кДа для фермента (MRUF), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Mruf (E. coli_P17_CJ_Mruf);

28,1 кДа для фермента (MTA), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Mta (E. coli_P18_CJ_Mta);

28,4 кДа для фермента (MCH), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Mch (E. coli_P19_CJ_Mch);

28,1 кДа для фермента (MCE), получаемого из E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_Mce (E. coli_P20_CJ_Mce);

Фермент (CT1), получаемый из E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_ct1 (KCCM11990P);

Фермент (CT2), получаемый из E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_ct2 (KCCM11991P);

Фермент (TN1), получаемый из E. coli BL21(DE3)/pET21a-CJ_tn1 (KCCM11992P); и

Фермент (FP3E), получаемый из E. coli BL21(DE3)/CJ_tn_fp3e (KCCM11848P).

Пример 4: Анализ активности инозитол-монофосфатаз

4-1. Анализ активности псикозо-6-фосфат фосфатаз

Псикозо-6-фосфат трудно приобрести. Поэтому авторы изобретения сами получали D-псикозо-6-фосфат из D-фруктозо-6-фосфат и исследовали активность инозитол-монофосфатаз для получения D-псикозы.

В частности, 50 мМ D-фруктозо-6-фосфат суспендировали в 50 мМ Tris-HCl (рН 7,0), а затем туда добавляли D-фруктозо-6-фосфат-3-эпимеразу (FP3E), полученную в примере 3, и 0,1 ед/мл каждой из 20 инозитол-монофосфатаз. Смеси давали реагировать при 70°С в течение 1 часа. Получение D-псикозы подтверждали с помощью HPLC (колонка SP_0810 (Shodex), колонка Aminex HPX-87C (Bio-RAD), 80°С, скорость потока подвижной фазы 0,6 мл/мин, детектор показателя преломления).

Исследовали эффективность дефосфорилирования всех 20 инозитол-монофосфатаз для D-псикозо-6-фосфата (фиг. 3a и 3b).

4-2. Анализ активности инозитол-монофосфатаз для специфического дефосфорилирования D-псикозо-6-фосфата

Измеряли удельные скорости дефосфорилирования D-псикозо-6-фосфата в смеси, содержащей D-глюкозо-6-фосфат, D-глюкозо-1-фосфат, D-фруктозо-6-фосфат и D-псикозо-6-фосфат в присутствии инозитол-монофосфатаз.

Конкретно, 0,1 ед/мл каждой из инозитол-монофосфатаз и 5 мМ MgCl2 добавляли к смеси 1% (м/о) D-глюкозо-6-фосфата, D-глюкозо-1-фосфата, D-фруктозо-6-фосфата и D-псикозо-6-фосфата. Обеспечивали возможность протекания реакции при 50°С в течение 12 часов. Продукты реакции анализировали с помощью HPLC (колонка Aminex HPX-87C (Bio-RAD), 80°C, скорость потока подвижной фазы 0,6 мл/мин). Для обнаружения выработки D-псикозы и других сахаридов (фруктозы и глюкозы) использовали детектор показателя преломления.

В результате фермент MRUB показал наивысшую удельную скорость дефосфорилирования D-псикозо-6-фосфата (фиг. 3a).

Пример 5: Анализ активности ферментов посредством множества ферментативных реакций

Для получения D-псикозы из мальтодекстрина обеспечивали возможность одновременной реакции ферментов CT1, CT2, TN1, FP3E и MRUB с мальтодекстрином. 5% (м/о) мальтодекстрина добавляли к 0,1 ед/мл каждого фермента, 5 мМ MgCl2 и 20 мМ фосфата натрия (рН 7,0). Обеспечивали возможность реакции смеси при температуре 50°С в течение 12 часов. Продукты реакции анализировали с помощью HPLC (колонка Aminex HPX-87C (Bio-RAD), 80°C, скорость потока подвижной фазы 0,6 мл/мин, детектор показателя преломления).

В результате было подтверждено получение D-псикозы из мальтодекстрина посредством множества ферментативных реакций (фиг. 4а).

Хотя вариант осуществления настоящей заявки был подробно описан, специалистам в данной области техники будет понятно, что заявка может быть реализована в других конкретных формах без изменения сущности или существенных особенностей заявки. Следовательно, следует отметить, что вышеприведенные варианты осуществления являются просто иллюстративными во всех аспектах, и их не следует рассматривать в качестве ограничения заявки. Объем заявки ограничен прилагаемой формулой изобретения, а не подробным описанием заявки. Все изменения или модификации или их эквиваленты, сделанные в рамках значений и объема формулы изобретения, следует рассматривать в границах объема заявки.

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9_________________ , строка ______3__________________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12057PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)Для служебного пользования принимающего ведомства
□ Данный лист получен с международной заявкойДля служебного пользования Международного Бюро
□ Данный лист получен Международным Бюро:Уполномоченный сотрудникУполномоченный сотрудник

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9________________ , строка ______4______________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12058PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)

Для служебного пользования принимающего ведомства
□ Данный лист получен с международной заявкойДля служебного пользования Международного Бюро
□ Данный лист получен Международным Бюро:Уполномоченный сотрудникУполномоченный сотрудник

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9________________ , строка ______5______________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12059PC.ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9________________ , строка ______6______________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12060PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)Для служебного пользования принимающего ведомства
□ Данный лист получен с международной заявкойДля служебного пользования Международного Бюро
□ Данный лист получен Международным Бюро:Уполномоченный сотрудникУполномоченный сотрудник

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9_________________ , строка ______7_____________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12061PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9________________ , строка ______8______________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12062PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ (не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9________________ , строка ______9______________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12063PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)Для служебного пользования принимающего ведомства
□ Данный лист получен с международной заявкойДля служебного пользования Международного Бюро
□ Данный лист получен Международным Бюро:Уполномоченный сотрудникУполномоченный сотрудник

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9_______________ , строка _______10_____________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12064PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)Для служебного пользования принимающего ведомства
□ Данный лист получен с международной заявкойДля служебного пользования Международного Бюро
□ Данный лист получен Международным Бюро:Уполномоченный сотрудникУполномоченный сотрудник

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9_______________ , строка _______11_____________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12065PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9_______________ , строка _______12_____________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12066PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9_______________ , строка _______13_____________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12067PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9________________ , строка _______14____________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12068PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)Для служебного пользования принимающего ведомства
□ Данный лист получен с международной заявкойДля служебного пользования Международного Бюро
□ Данный лист получен Международным Бюро:Уполномоченный сотрудникУполномоченный сотрудник

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9_______________ , строка _______15_____________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12069PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ (не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9________________ , строка _______16____________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12070PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9________________ , строка _______17____________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12071PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9________________ , строка ______18_____________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12072PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ (не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ (не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9________________ , строка _____19______________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12073PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9_______________ , строка _____20_______________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12074PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9________________ , строка ____21_______________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12075PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __9________________ , строка ____22_______________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
10 июля 2017 г.Учетный номер
KCCM12076PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ (не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ (не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __18________________ , строка ____2_______________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
20 марта 2017 г.Учетный номер
KCCM11990PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __18_________________ , строка ______3____________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
20 марта 2017 г.Учетный номер
KCCM11991PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __18________________ , строка ____4_______________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
20 марта 2017 г.Учетный номер
KCCM11992PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)Для служебного пользования принимающего ведомства
□ Данный лист получен с международной заявкойДля служебного пользования Международного Бюро
□ Данный лист получен Международным Бюро:Уполномоченный сотрудникУполномоченный сотрудник

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

Регистрационный номер заявителя или агента P18-6064Международная заявка №

УКАЗАНИЯ, ОТНОСЯЩИЕСЯ К ДЕПОНИРОВАННОМУ МИКРООРГАНИЗМУ ИЛИ ДРУГОМУ БИОЛОГИЧЕСКОМУ МАТЕРИАЛУ

(PCT Правило 13bis)

A. указания, приведенные ниже, относятся к депонированному микроорганизму или другому биологическому материалу, упомянутому в описании
на странице __18_______________ , строка _____5_______________ .B. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ДЕПОЗИТА Дополнительные депозиты указаны на дополнительном листе□ Название организации-депозитария
Корейский центр культур микроорганизмов (KCCM)Адрес организации-депозитария (включая почтовый индекс и страну)
Юрим Билдинг, Хондженэ-2га-гил 45, Содэмун-Гу, Сеул, 120-091, Республика КореяДата депонирования
23 июня 2016 г.Учетный номер
KCCM11848PC. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УКАЗАНИЯ(не заполнять, если не применимо) Данная информация продолжается на дополнительном листе□D. УКАЗАННЫЕ ГОСУДАРСТВА, ДЛЯ КОТОРЫХ ДАНЫ УКАЗАНИЯ(если указания предназначены не для всех указанных государств)E. РАЗДЕЛЬНОЕ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ УКАЗАНИЙ(не заполнять, если не применимо)Указания, перечисленные ниже, будут поданы в Международное Бюро позже (определите общий характер указаний, например, «Учетный номер депозита»)Для служебного пользования принимающего ведомства
□ Данный лист получен с международной заявкойДля служебного пользования Международного Бюро
□ Данный лист получен Международным Бюро:Уполномоченный сотрудникУполномоченный сотрудник

Форма PCT/RO/134 (Июль 1998 г.; репринт январь 2004 г.)

--->

<110> CJ CHEILJEDANG CORPORATION

<120> НОВАЯ ПСИКОЗО-6-ФОСФАТ ФОСФАТАЗА, КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПСИКОЗЫ,

СОДЕРЖАЩАЯ УКАЗАННЫЙ ФЕРМЕНТ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПСИКОЗЫ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ

УКАЗАННОГО ФЕРМЕНТА

<130> P18-6064

<150> KR 2017/0097334

<151> 2017-07-31

<160> 78

<170> KoPatentIn 3.0

<210> 1

<211> 272

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности RMA

<400> 1

Met Met Asp Ala Tyr Thr Leu Tyr Glu Glu Ala Arg Glu Val Ala Ala

1 5 10 15

Arg Leu Ala Arg Asp Ala Gly Gln Ile Ala Arg Tyr Tyr Ala Gly Arg

20 25 30

Val Thr Val Arg Glu Lys Gly Tyr Asn Glu Leu Val Thr Gln Ala Asp

35 40 45

Glu Glu Val Gln Arg Phe Leu Ile Glu Gln Ile His Arg His Phe Pro

50 55 60

Glu His Ala Ile Leu Ala Glu Glu Asn Leu Ser Asp Met Gln Asp Gly

65 70 75 80

Arg Glu Gly Ala Ser Phe Arg Trp Ile Ile Asp Pro Ile Asp Gly Thr

85 90 95

Thr Asn Phe Thr His Gly Val Pro Pro Tyr Gly Ile Ser Leu Ala Leu

100 105 110

Gln His Glu Gly Arg Thr Val Val Gly Val Val Tyr Asp Val Pro His

115 120 125

Asp Glu Leu Phe Thr Ala Val Arg Gly Gly Gly Leu Tyr Val Asn Gly

130 135 140

Val Arg Ala Arg Val Ser Gln Thr Glu Thr Leu Arg Glu Ala Leu Ile

145 150 155 160

Thr Thr Gly Phe Pro Tyr Arg Glu Val Val His Leu Glu Glu Tyr Leu

165 170 175

Glu Ala Leu Gly Arg Val Ile Arg Ala Thr Arg Gly Val Arg Arg Pro

180 185 190

Gly Ala Ala Ser Val Asp Leu Ala Trp Val Ala Cys Gly Arg Phe Asp

195 200 205

Gly Phe Phe Glu Thr Gly Leu Ser Pro Trp Asp Val Ala Ala Gly Ile

210 215 220

Leu Leu Val Glu Glu Gly Gly Gly Arg Val Thr Asp Phe His Gly Arg

225 230 235 240

Pro Asp Pro Ile Phe Ala Arg Gln Met Leu Ala Thr Asn Gly Arg Ile

245 250 255

His Glu Ala Leu Cys Glu Leu Val Ala Pro Leu His His Val Tyr Ala

260 265 270

<210> 2

<211> 255

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности TLE

<400> 2

Met Asp Arg Met Asp Phe Ser Ile Lys Ile Ala Arg Lys Val Gly Leu

1 5 10 15

Tyr Leu Met Glu His Trp Gly Asn Ala Glu Asn Val Arg Gln Lys Ser

20 25 30

Ser Phe Gln Asp Leu Val Ser Asp Cys Asp Lys Gln Ala Gln Lys Met

35 40 45

Ile Val Gln Lys Ile Lys Asp His Phe Pro Asp Asp Ala Ile Leu Ala

50 55 60

Glu Glu Gly Leu Phe Glu Lys Gly Asp Arg Met Trp Ile Ile Asp Pro

65 70 75 80

Ile Asp Gly Thr Met Asn Tyr Val His Gly Leu Pro Ser Phe Ala Ile

85 90 95

Gly Ile Ala Tyr Val Glu Lys Glu Gln Val Ile Leu Gly Val Ala His

100 105 110

Asp Pro Val Leu Asn Glu Thr Tyr Tyr Ala Ile Lys Gly Gln Gly Ala

115 120 125

Tyr Lys Asn Gly Glu Arg Ile Asn Val Ser Glu Asn Ser Leu Leu Lys

130 135 140

Asp Ser Ile Gly Asn Thr Gly Phe Tyr Thr Asp Phe Thr Gly Ile Phe

145 150 155 160

Ile Ser Ala Ile Glu Lys Lys Val Arg Arg Val Arg Met Thr Gly Ser

165 170 175

Ala Ile Leu Ala Gly Ala Tyr Val Ala Cys Gly Arg Phe Asp Phe Phe

180 185 190

Ile Ala Lys Arg Ala Asn Ser Trp Asp Val Ala Pro Leu Phe Val Leu

195 200 205

Val Pro Glu Ala Gly Gly Ile Val Thr Asp Leu Ser Gly Asn Gln Ala

210 215 220

His Leu Asn Thr Gly Asn Phe Leu Phe Ser Asn Gly Leu Leu His Asp

225 230 235 240

Gln Val Leu Glu Val Ile Arg Glu Val Asn Lys Lys Val Arg Lys

245 250 255

<210> 3

<211> 258

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности MRUB

<400> 3

Met Asp Leu Arg Ala Tyr Leu Gln Thr Ala Leu Asp Ala Ala Tyr Leu

1 5 10 15

Ala Lys Gly Ile His Gln Tyr Tyr Gln Glu Lys Gly Phe Thr Gln Ser

20 25 30

Thr Lys Ser Thr Pro Thr Asp Leu Val Thr Gln Ala Asp His Glu Ser

35 40 45

Glu Ala Ala Ile Arg Glu Leu Ile Ala Ser Arg His Pro Asp His Val

50 55 60

Val Leu Gly Glu Glu Gln Gly Gln Asp Lys Glu Gly Ala Phe Arg Trp

65 70 75 80

Ile Val Asp Pro Leu Asp Gly Thr Val Asn Tyr Ala His Gly Phe Pro

85 90 95

Phe Tyr Ala Val Ser Ile Gly Leu Glu Ala His Gly Glu Val Val Leu

100 105 110

Gly Val Val Leu Asp Thr Ala Arg Gly Glu Leu Phe Thr Ala Thr Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Ala Tyr Leu Asn Gly Arg Pro Ile Arg Val Ser Thr Arg

130 135 140

Ser Thr Leu Val Gly Ser Leu Leu Ala Thr Gly Phe Pro Tyr Asp Val

145 150 155 160

Ser Lys Asp Thr Glu Asn Leu Val Tyr Phe Gln Arg Ala Leu Thr Lys

165 170 175

Gly Leu Met Val Arg Arg Pro Gly Ala Ala Ala Leu Asp Leu Ala Tyr

180 185 190

Val Ala Ala Gly Arg Leu Asp Gly Phe Trp Glu Val Lys Leu Asn Pro

195 200 205

Trp Asp Val Ala Ala Gly Trp Leu Ile Val Ser Glu Ala Gly Gly Arg

210 215 220

Ile Thr Gly Leu Gln Gly Glu Asp Tyr Arg Leu Gly Asn Arg Tyr Leu

225 230 235 240

Val Ala Ser Asn Gly Leu Ile His Gly Pro Leu Leu Asp Thr Ile His

245 250 255

Gly Arg

<210> 4

<211> 265

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности DTU

<400> 4

Met Lys Arg Ile Leu Glu Val Ala Ile Lys Thr Ile Lys Glu Ser Gly

1 5 10 15

Asn Ile Leu Leu Asn Tyr Ile Gly Glu Glu Lys Glu Ile Glu Leu Lys

20 25 30

Gly Ile Ser Asn Leu Val Thr Gln Val Asp Lys Leu Ser Glu Arg His

35 40 45

Ile Leu Lys Ser Ile Glu Glu Asn Phe Pro Asp His Ser Ile Leu Thr

50 55 60

Glu Glu Thr Gly Phe Ile Asn Lys Asn Ser Glu Tyr Thr Trp Ile Val

65 70 75 80

Asp Pro Leu Asp Gly Thr Thr Asn Tyr Ala His Asn Phe Pro Phe Phe

85 90 95

Gly Ile Ser Ile Ala Leu Ile Lys Asn Lys Glu Ile Ile Leu Gly Leu

100 105 110

Ile Tyr Asp Pro Ile Arg Asp Glu Leu Phe Tyr Ala Ile Lys Asn Glu

115 120 125

Gly Ala Tyr Leu Asn Asp Arg Arg Ile Glu Val Ser Lys Thr Glu Ser

130 135 140

Leu Glu Asn Ser Leu Ile Ser Phe Ala Phe Pro Tyr Glu Leu Ser Leu

145 150 155 160

Glu Glu Lys Asn Phe Ile Pro Phe Ile Asn Phe Ser Ser Arg Thr His

165 170 175

Gly Ile Arg Arg Thr Gly Ser Ala Ala Ile Glu Ile Ala Tyr Val Gly

180 185 190

Cys Gly Arg Leu Asp Gly Phe Trp Ala Lys Lys Leu Lys Pro Trp Asp

195 200 205

Ile Ser Ala Gly Ile Leu Ile Val Glu Glu Ala Lys Gly Lys Val Thr

210 215 220

Asp Phe Ser Gly Asn Asn Ile Asp Ile His Thr Asp Asn Ile Leu Phe

225 230 235 240

Ser Asn Gly Lys Ile His Gln Glu Met Ile Lys Ile Leu Asn Leu Gly

245 250 255

Lys Ile Phe Ile Arg Asn Glu Lys Phe

260 265

<210> 5

<211> 251

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности PFE

<400> 5

Met Leu Gly Val Leu Glu Ala Val Ala Val Arg Ala Ser His Phe Leu

1 5 10 15

Met Glu Tyr Phe Arg Ala Gly Arg Gly Val Asp Val Val Ser Arg Lys

20 25 30

Glu Asp Asp Val Thr Arg Glu Val Asp Ile Ala Ala Glu Thr Leu Ile

35 40 45

Tyr Lys Met Leu Arg Glu Ala Phe Lys Glu Gly Gly Val Leu Tyr Ala

50 55 60

Glu Glu Gly Gly Ile Tyr Arg Trp Gly Asp Glu Arg Tyr Ile Phe Val

65 70 75 80

Leu Asp Pro Leu Asp Gly Ser Leu Asn Tyr Ala Val Gly Val Pro Phe

85 90 95

Phe Ala Val Ser Ile Ala Ala Gly Lys His Arg Glu Gly Thr Leu Ala

100 105 110

Asp Leu Glu Tyr Ala Val Val Ala Ile Pro Pro Thr Gly Asp Val Tyr

115 120 125

Thr Ala Ala Pro Gly Val Gly Ala Arg Lys Asn Gly Lys Pro Leu Arg

130 135 140

Arg Thr Pro Arg Ser Asn Ile Val Phe Val Ala Val Ser Asn Ser Phe

145 150 155 160

Pro Pro Lys Thr Cys Glu Val Val Arg Arg Leu Gly Leu Arg Gly Arg

165 170 175

Ser Leu Gly Ser Ser Ala Ala Glu Leu Ala Tyr Thr Val Glu Gly Ile

180 185 190

Ala Arg Gly Phe Leu Asp Leu Arg Gly Lys Leu Arg Leu Leu Asp Val

195 200 205

Ala Gly Ala Leu Thr Ile Gly Lys Tyr Val Asp Gly Phe Arg Tyr Val

210 215 220

Val Met Gly Asp Thr Lys Pro His Ser Lys Val Ser Leu Val Ala Gly

225 230 235 240

Asp Val Asp Phe Val Asn Ala Ala Thr Thr Asp

245 250

<210> 6

<211> 257

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности TWI

<400> 6

Met Lys Asp Glu Lys Gly Ile Val Val Asp Ile Ile Lys Lys Ala Gly

1 5 10 15

Glu Ile Leu Gln Asp Gly Trp Asn Lys Lys Asn Phe Lys Ile Tyr Arg

20 25 30

Lys Gly Thr Ile Asn Leu Val Thr Glu Ile Asp Lys Lys Ile Glu Phe

35 40 45

Leu Ile Ile Gln Leu Leu Lys Gln Tyr Phe Pro Asp Tyr Gly Ile Leu

50 55 60

Thr Glu Glu Ser Lys Glu Ile Asn Ser Lys Ala Asn Val Arg Trp Ile

65 70 75 80

Ile Asp Pro Leu Asp Gly Thr Thr Asn Tyr Ile Lys Gln Tyr Pro Phe

85 90 95

Val Ala Ile Ser Ile Ala Leu Glu Lys Glu Gly Glu Leu Ile Leu Gly

100 105 110

Val Val Tyr Asn Pro Ile Leu Asn Glu Met Phe Ile Ala Gln Lys Gly

115 120 125

Cys Gly Ala Thr Tyr Asn Gly Lys Ser Ile His Val Ser Lys Ile Lys

130 135 140

Glu Leu Gly Ser Ala Val Leu Ala Ser Gly Phe Pro Tyr Asp Ala Trp

145 150 155 160

Glu Asn Pro Asp Asn Asn Ala Lys Gln Trp Arg Gln Phe Leu Thr Arg

165 170 175

Ser Leu Ser Leu Arg Cys Asp Gly Ser Ala Ala Leu Asp Leu Cys Arg

180 185 190

Val Ala Cys Gly Gln Leu Asp Gly Tyr Trp Glu Lys Gly Ile Ser Pro

195 200 205

Trp Asp Val Ala Ala Gly Ile Val Ile Leu Arg Glu Ala Gly Gly Ile

210 215 220

Ile Thr Asp Tyr Leu Gly Glu Glu Asn Phe Phe Lys Arg Gly Glu Val

225 230 235 240

Val Ala Ala Asn Pro Val Leu His Ala Gln Met Leu Lys Val Leu Asn

245 250 255

Asn

<210> 7

<211> 264

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности TTH

<400> 7

Met Ile Gly Arg Arg His Pro Tyr Tyr Pro Tyr Leu Glu Ala Ala Leu

1 5 10 15

Glu Ala Ala Ser Leu Ala Arg Gly Ile His Leu Tyr Tyr Leu Glu Lys

20 25 30

Gly Phe Thr Glu Gly Thr Lys Ser Gly Pro Thr Asp Leu Val Thr Gln

35 40 45

Ala Asp Arg Glu Ala Glu Glu Ala Val Lys Gly Leu Leu Leu Ser Arg

50 55 60

Phe Pro Glu Ala Gly Phe Leu Gly Glu Glu Gly Gly Ser Glu Gly Gly

65 70 75 80

Lys Ala Leu Arg Phe Ile Val Asp Pro Leu Asp Gly Thr Val Asn Tyr

85 90 95

Ala His Gly Phe Pro Phe Phe Ala Val Ser Ile Ala Leu Glu Ala Glu

100 105 110

Gly Ala Ile Gln Met Gly Val Val Met Asp Thr Ala Arg Gly Glu Val

115 120 125

Phe Tyr Ala Leu Arg Gly Glu Gly Ala Tyr Leu Asn Gly Arg Pro Ile

130 135 140

Arg Val Thr Gly Arg Glu Ser Leu Val Gly Ser Leu Leu Ala Thr Gly

145 150 155 160

Phe Pro Tyr Asp Val Ala Lys Asp Pro Glu Asn Leu Thr Tyr Phe Glu

165 170 175

Arg Ala Leu Gly Lys Gly Leu Leu Val Arg Arg Pro Gly Ala Ala Ala

180 185 190

Leu Asp Leu Ala Tyr Val Ala Ala Gly Arg Leu Glu Gly Phe Trp Glu

195 200 205

Val Lys Leu Asn Pro Trp Asp Val Ala Ala Gly Trp Leu Leu Val Glu

210 215 220

Glu Ala Gly Gly Arg Val Thr Asp Leu Glu Gly Asn Pro Tyr Arg Leu

225 230 235 240

Gly Ser Arg Tyr Ile Leu Ala Thr Asn Gly Arg Val His Glu Ala Leu

245 250 255

Arg Arg Thr Leu Leu Gly Leu Asp

260

<210> 8

<211> 251

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности TLI

<400> 8

Met Tyr Glu Trp Asn Glu Ile Ala Leu Asn Leu Ala Lys Asp Ile Glu

1 5 10 15

Arg Glu Val Met Pro Leu Phe Gly Thr Lys Lys Ala Gly Glu Phe Ile

20 25 30

Gly Phe Ser Pro Ser Gly Asp Lys Thr Lys Leu Val Asp Lys Val Ala

35 40 45

Glu Asp Val Val Leu Glu Tyr Leu Arg Pro Leu Gly Val Asn Val Val

50 55 60

Ser Glu Glu Ile Gly Asn Ile Glu Ala Gly Ser Glu Tyr Thr Ile Val

65 70 75 80

Val Asp Pro Ile Asp Gly Ser Phe Asn Phe Ile Gln Gly Ile Pro Ile

85 90 95

Phe Gly Phe Ser Phe Ala Val Phe Lys Asn Glu Lys Pro Val Tyr Ala

100 105 110

Met Ile Tyr Glu Phe Ile Thr Lys Asn Val Tyr Glu Gly Ile Pro Gly

115 120 125

Glu Gly Ala Tyr Leu Asn Gly Glu Arg Ile Arg Val Arg His Leu Asn

130 135 140

Glu Lys Ser Ile Ser Ile Ser Phe Tyr Thr Arg Gly Arg Gly Ala Arg

145 150 155 160

Leu Val Glu Lys Val Lys Arg Thr Arg Val Leu Gly Ala Ile Ala Val

165 170 175

Glu Leu Ala Tyr Leu Ala Arg Gly Ser Leu Asp Gly Val Ile Asp Ile

180 185 190

Arg Asn Tyr Val Arg Pro Thr Asp Ile Ala Ala Gly Tyr Ile Ile Ala

195 200 205

Lys Glu Ala Gly Ala Ile Ile Thr Asp Asp Ser Gly Glu Glu Ile Lys

210 215 220

Phe Arg Leu Asp Ala Arg Glu Lys Leu Asn Ile Ile Ala Val Asn Asp

225 230 235 240

Lys Arg Leu Leu Lys Leu Ile Leu Glu Val Ile

245 250

<210> 9

<211> 264

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности GST

<400> 9

Met Ala Glu Lys Trp Glu Glu Ile Asp Arg Tyr Ala Arg Gln Trp Ile

1 5 10 15

Asp Glu Ala Gly Lys Arg Ile Arg Ala Ser Phe Ala Lys Gln Leu Thr

20 25 30

Val Glu Ala Lys Glu Asn Pro Asn Asp Leu Val Thr Asn Val Asp Arg

35 40 45

Ala Ile Glu Gln Phe Phe Ala Glu His Ile Arg Arg Gln Phe Pro Ser

50 55 60

His Arg Leu Leu Gly Glu Glu Gly Phe Gly Asp Arg Ile Asp Ala Leu

65 70 75 80

Asp Gly Val Val Trp Val Ile Asp Pro Ile Asp Gly Thr Met Asn Phe

85 90 95

Val His Gln Arg Arg His Phe Ala Val Ser Ile Gly Ile Phe Glu Asp

100 105 110

Gly Ile Gly Gln Leu Gly Tyr Val Tyr Asp Val Val Phe Asp Glu Leu

115 120 125

Tyr Ala Ala Gln Lys Gly Arg Gly Val Phe Leu Asn Gly Glu Pro Leu

130 135 140

Gly Leu Leu Gln Pro Ala Pro Val Ala Glu Ser Ile Ile Ala Ile Asn

145 150 155 160

Gly Thr Trp Leu Met Glu Asn Lys Arg Leu Asp His Arg Pro Leu Met

165 170 175

Arg Leu Ala Lys Glu Ala Arg Gly Thr Arg Ser Tyr Gly Ser Ala Ala

180 185 190

Leu Glu Leu Ala Tyr Val Ala Ala Gly Arg Leu Asp Ala Tyr Ile Ser

195 200 205

Pro Arg Leu Ser Pro Trp Asp Phe Ala Gly Gly Met Ile Leu Ile Glu

210 215 220

Glu Ala Gly Gly Met Val Thr Thr Leu Asp Gly Lys Pro Leu Asp Leu

225 230 235 240

Leu Gly Arg Asn Ser Val Leu Ala Ala Lys Pro Gly Val His Glu Glu

245 250 255

Ile Leu Arg Arg Tyr Leu His Asp

260

<210> 10

<211> 259

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности ATH

<400> 10

Met Thr Thr Ser Leu Arg Asp Leu Leu Asp Phe Ala Val Glu Thr Ala

1 5 10 15

Tyr Leu Ala Gly Arg Thr Thr Leu Ala Tyr Phe Gln Thr Gly Val Gln

20 25 30

Ala Glu Phe Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Thr Leu Ala Asp Arg Ala

35 40 45

Ala Glu Gln Leu Ile Arg Gln Arg Ile Glu Lys Arg Phe Pro His His

50 55 60

Ala Ile Val Gly Glu Glu Phe Gly Val Gln Gly Ser Ala Asp Ala Thr

65 70 75 80

His Arg Trp Phe Ile Asp Pro Ile Asp Gly Thr Lys Ser Phe Leu Arg

85 90 95

Gly Ile Pro Leu Tyr Ala Val Leu Leu Gly Leu Glu Ile Glu Gly Arg

100 105 110

Val Gln Val Gly Val Ala Tyr Tyr Pro Ala Met Asp Glu Met Leu Ser

115 120 125

Ala Ala Asp Gly Glu Gly Cys Trp Trp Asn Gly Arg Arg Ala Arg Val

130 135 140

Ser Thr Ala Ser Arg Leu Ala Glu Ala Trp Val Thr Ser Thr Asp Pro

145 150 155 160

Tyr Asn Phe Gln Lys Thr Gly Lys Asp Ala Ala Trp Gln Arg Ile Gln

165 170 175

Ala Val Ser Tyr His Arg Gly Gly Trp Gly Asp Ala Tyr Gly Tyr Leu

180 185 190

Leu Val Ala Thr Gly Arg Ala Glu Val Met Leu Asp Pro Ile Met Asn

195 200 205

Glu Trp Asp Cys Ala Pro Phe Pro Pro Ile Phe Arg Glu Ala Gly Gly

210 215 220

Phe Phe Gly Asp Trp Gln Gly Asn Glu Thr Ile Tyr Gly Gly Glu Ala

225 230 235 240

Leu Ala Thr Thr Gln Val Leu Leu Pro Glu Val Leu Glu Cys Leu His

245 250 255

Ser Ser Leu

<210> 11

<211> 267

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности SAC

<400> 11

Met Lys Arg Glu Asp Val Glu Lys Val Ala Ser Glu Ala Ser Lys Tyr

1 5 10 15

Ile Tyr Glu Glu Arg Glu Asn Lys Asp Val Asp Arg Val Ile Asn Val

20 25 30

His Gly Asn Asp Val Thr Arg Ile Ile Asp Lys Arg Ser Glu Asp Phe

35 40 45

Ile Val Asp Arg Leu Lys Ser Leu Gly Tyr Asn Ile Leu Ile Val Thr

50 55 60

Glu Glu Ser Gly Val Ile Asp Ser Tyr Gly Lys Asn Tyr Asp Tyr Ile

65 70 75 80

Ala Ile Val Asp Pro Leu Asp Gly Ser Thr Asn Phe Val Ser Gly Ile

85 90 95

Pro Trp Ser Ser Val Ser Ile Ala Ile Tyr Asn Arg Asp Glu Glu Asp

100 105 110

Ile Leu Ser Ser Asn Val Gly Ala Val Ser Ser Ile Phe Thr Pro Tyr

115 120 125

Thr Phe Ser Tyr Asp Glu Gly Ser Ala Tyr Val Asn Gly Val Lys Ile

130 135 140

Ala Glu Ile Lys Lys Pro Glu Lys Ile Leu Leu Leu Ala Tyr Phe Ser

145 150 155 160

Arg Ser Lys Leu Pro Asn Leu Lys Leu Phe Phe Glu Lys Ile Gly Gln

165 170 175

Gly Tyr Lys Ile Arg Ser Leu Gly Ser Ala Ser Leu Asp Met Ile Leu

180 185 190

Val Cys Thr Gly Arg Ala Thr Met Phe Phe Asp Ile Arg Gly Lys Leu

195 200 205

Arg Asn Val Asp Ile Ala Ala Ser Ser Asn Phe Cys Ser Arg Leu Gly

210 215 220

Val Ile Pro Tyr Asp Ile Gly Leu Arg Lys Ile Lys Ser Ser Leu Thr

225 230 235 240

Glu Val Ser Val Val Lys Asp Leu Val Ile Ser Leu Asp Glu Ser Leu

245 250 255

Leu Arg Ser Phe Ser Leu Ala Leu Gln Thr Val

260 265

<210> 12

<211> 258

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности TTA

<400> 12

Met Leu Glu Leu Leu Lys Asp Thr Ala Lys Lys Ala Gly Arg Leu Leu

1 5 10 15

Lys Ile Arg Phe Leu Glu Leu Leu Asn Gly Met Glu Thr Glu Val Arg

20 25 30

Glu Lys Gly Lys Ser Asp Phe Val Thr Arg Val Asp Val Glu Val Glu

35 40 45

Asn Tyr Ile Lys Glu Leu Leu Ala Asn Thr Asn Ile Ser Val Val Gly

50 55 60

Glu Glu Ser Phe Lys Gly Glu Ile Pro Gly Thr Cys Ile Phe Ile Asp

65 70 75 80

Pro Ile Asp Gly Thr Arg Asn Phe Met Arg Lys Asn Pro His Phe Ala

85 90 95

Ile Asn Leu Ala Tyr Gln Glu Lys Gly Lys Leu Leu Ala Gly Val Thr

100 105 110

Tyr Asp Pro Met Lys Asn Glu Met Phe Ser Ala Ala Phe Ser Lys Gly

115 120 125

Ala Phe Leu Asn Gly Glu Arg Ile Tyr Ala Ser Thr Asn Lys Asp Ile

130 135 140

Gly Lys Ala Ile Ile Ala Ile Gly Leu Pro Tyr Arg Gly Arg Glu Leu

145 150 155 160

Ile Asp Ile Gln Thr Asn Leu Tyr Arg Asn Ile Phe Leu Asn Gly Ala

165 170 175

Ala Thr Arg His Thr Gly Ser Ala Ala Leu Asp Leu Ala Tyr Ile Ser

180 185 190

Cys Gly Arg Tyr Asp Ala Ala Ile Tyr Phe Tyr Leu Ser Pro Trp Asp

195 200 205

Val Ala Pro Gly Ile Leu Leu Val Glu Glu Ala Gly Gly Glu Val Glu

210 215 220

Gly Thr Met Gly Arg Glu Pro Ile Gln Gly Trp Ile Ile Ala Ser Asn

225 230 235 240

Lys Val Ile His Pro Glu Val Lys Asp Ile Leu Glu Gly Ser Leu Lys

245 250 255

Ala Val

<210> 13

<211> 254

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности PFU

<400> 13

Met Lys Leu Lys Phe Trp Arg Glu Val Ala Ile Asp Ile Ile Ser Asp

1 5 10 15

Phe Glu Thr Thr Ile Met Pro Phe Phe Gly Asn Pro Asp Gly Gly Lys

20 25 30

Leu Val Lys Ile Ser Pro Ser Gly Asp Glu Thr Lys Leu Val Asp Lys

35 40 45

Leu Ala Glu Asp Leu Ile Leu Ser Arg Ile Thr Glu Leu Gly Val Asn

50 55 60

Val Val Ser Glu Glu Val Gly Val Ile Asp Asn Glu Ser Glu Tyr Thr

65 70 75 80

Val Ile Val Asp Pro Leu Asp Gly Ser Tyr Asn Phe Ile Ala Gly Ile

85 90 95

Pro Phe Phe Ala Leu Ser Leu Ala Val Phe Lys Lys Asp Lys Pro Ile

100 105 110

Tyr Ala Ile Ile Tyr Glu Pro Met Thr Glu Arg Phe Phe Glu Gly Ile

115 120 125

Pro Gly Glu Gly Ala Phe Leu Asn Gly Lys Arg Ile Lys Val Arg Lys

130 135 140

Thr Pro Asp Glu Lys Pro Ser Ile Ser Phe Tyr Ser Arg Gly Lys Gly

145 150 155 160

His Glu Ile Val Lys His Val Lys Arg Thr Arg Thr Leu Gly Ala Ile

165 170 175

Ala Leu Glu Leu Ala Tyr Leu Ala Met Gly Ala Leu Asp Gly Val Val

180 185 190

Asp Val Arg Lys Tyr Val Arg Pro Thr Asp Ile Ala Ala Gly Thr Ile

195 200 205

Ile Ala Lys Glu Ala Gly Ala Leu Ile Lys Asp Ser Ala Gly Lys Asp

210 215 220

Ile Asp Ile Ser Phe Asn Ala Thr Asp Arg Leu Asp Val Ile Ala Val

225 230 235 240

Asn Ser Glu Glu Leu Leu Lys Thr Ile Leu Ser Leu Leu Glu

245 250

<210> 14

<211> 252

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности AFU

<400> 14

Met Asp Glu Arg Asp Ala Leu Arg Ile Ser Arg Glu Ile Ala Gly Glu

1 5 10 15

Val Arg Lys Ala Ile Ala Ser Met Pro Leu Arg Glu Arg Val Lys Asp

20 25 30

Val Gly Met Gly Lys Asp Gly Thr Pro Thr Lys Ala Ala Asp Arg Val

35 40 45

Ala Glu Asp Ala Ala Leu Glu Ile Leu Arg Lys Glu Arg Val Thr Val

50 55 60

Val Thr Glu Glu Ser Gly Val Leu Gly Glu Gly Asp Val Phe Val Ala

65 70 75 80

Leu Asp Pro Leu Asp Gly Thr Phe Asn Ala Thr Arg Gly Ile Pro Val

85 90 95

Tyr Ser Val Ser Leu Cys Phe Ser Tyr Ser Asp Lys Leu Lys Asp Ala

100 105 110

Phe Phe Gly Tyr Val Tyr Asn Leu Ala Thr Gly Asp Glu Tyr Tyr Ala

115 120 125

Asp Ser Ser Gly Ala Tyr Arg Asn Gly Glu Arg Ile Glu Val Ser Asp

130 135 140

Ala Glu Glu Leu Tyr Cys Asn Ala Ile Ile Tyr Tyr Pro Asp Arg Lys

145 150 155 160

Phe Pro Phe Lys Arg Met Arg Ile Phe Gly Ser Ala Ala Thr Glu Leu

165 170 175

Cys Phe Phe Ala Asp Gly Ser Phe Asp Cys Phe Leu Asp Ile Arg Pro

180 185 190

Gly Lys Met Leu Arg Ile Tyr Asp Ala Ala Ala Gly Val Phe Ile Ala

195 200 205

Glu Lys Ala Gly Gly Lys Val Thr Glu Leu Asp Gly Glu Ser Leu Gly

210 215 220

Asn Lys Lys Phe Asp Met Gln Glu Arg Leu Asn Ile Val Ala Ala Asn

225 230 235 240

Glu Lys Leu His Pro Lys Leu Leu Glu Leu Ile Lys

245 250

<210> 15

<211> 265

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности AAC

<400> 15

Met Asp Lys Ala Trp Leu Asp Gly Leu Ala Glu Val Val Arg Glu Ala

1 5 10 15

Gly Arg Leu Val Glu Glu Ile Ala Arg Gln Gly Phe Asp Thr Gln Phe

20 25 30

Lys His Pro Glu Glu Arg Arg Asp Pro Val Thr Thr Ala Asp Leu Ala

35 40 45

Cys Asp Ala Phe Leu Lys Glu Arg Leu Leu Thr Leu Leu Pro Glu Ala

50 55 60

Gly Trp Leu Ser Glu Glu Thr Lys Asp Arg Pro Asp Arg Leu Glu Lys

65 70 75 80

Arg Trp Val Trp Ile Val Asp Pro Ile Asp Gly Thr Arg Glu Phe Val

85 90 95

Arg Arg Ile Pro Glu Tyr Ala Ile Ser Val Ala Leu Ala Arg Asp Gly

100 105 110

Glu Pro Val Ala Gly Ala Val Val Asn Pro Ala Thr Gly Asp Leu Phe

115 120 125

Leu Gly Ala Val Gly Val Gly Ala Trp Arg Asn Gly Thr Pro Met Val

130 135 140

Cys Ser Arg Ile Arg Gly Glu Arg Leu Thr Ile Leu Gly Ser Arg Ser

145 150 155 160

Glu Met Asn Arg Gly Glu Phe Glu Pro Phe Ala Gly Ile Leu Glu Val

165 170 175

Arg Ala Val Gly Ser Ile Ala Tyr Lys Leu Ala Leu Val Ala Ala Gly

180 185 190

Glu Ala Asp Gly Thr Phe Ser Leu Gly Pro Lys His Glu Trp Asp Ile

195 200 205

Ala Ala Gly Val Ala Leu Val Leu Ala Ala Gly Gly Arg Val His Asp

210 215 220

Gly Ala Gly Arg Pro Phe Arg Phe Asn Gln Pro His Thr Leu Thr Arg

225 230 235 240

Gly Ile Val Ala Ala Thr Arg Glu Ala Tyr Gly Asp Leu Ala Leu Leu

245 250 255

Ile Glu Arg His Ala Pro Arg Arg Ala

260 265

<210> 16

<211> 258

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности MSI

<400> 16

Met Asp Leu Gln Arg Tyr Leu Glu Ala Ala Leu Asp Ala Ala Tyr Leu

1 5 10 15

Ala Arg Gly Ile His Leu Tyr Tyr Arg Glu Lys Gly Phe Ala Leu Glu

20 25 30

Ser Lys Thr Ser Pro Thr Asp Leu Val Thr Gln Ala Asp Arg Glu Ser

35 40 45

Glu Glu Ala Ile Arg Ser Leu Leu Leu Glu Arg Phe Pro Asp His Val

50 55 60

Val Leu Gly Glu Glu Gly Gly Gln Glu Gly His Ser Asp Phe Arg Trp

65 70 75 80

Ile Val Asp Pro Leu Asp Gly Thr Val Asn Tyr Ala His Gly Phe Pro

85 90 95

Phe Tyr Ala Val Ser Ile Ala Leu Glu Val Gly Gly Glu Val Val Val

100 105 110

Gly Ala Val Leu Asp Thr Ala Arg Gly Glu Leu Phe Thr Ala Leu Lys

115 120 125

Gly Glu Gly Ala Phe Gln Asn Gly Arg Pro Ile Arg Val Ser Ser Thr

130 135 140

Ala Thr Leu Ile Gly Ser Leu Leu Ala Thr Gly Phe Pro Tyr Asp Val

145 150 155 160

Ala Lys Asp Ala Glu Asn Leu Thr Tyr Phe Gln Arg Ala Leu Ala Lys

165 170 175

Gly Leu Thr Val Arg Arg Pro Gly Ala Ala Ala Leu Asp Leu Ala Tyr

180 185 190

Val Ala Ala Gly Arg Leu Glu Gly Phe Trp Glu Val Lys Leu Asn Pro

195 200 205

Trp Asp Val Ala Ala Gly Trp Leu Leu Ile Thr Glu Ala Gly Gly Thr

210 215 220

Val Ser Gly Ile Gln Gly Glu Pro Tyr Arg Leu Gly Asn Arg Tyr Leu

225 230 235 240

Val Ala Ser Asn Gly Lys Ile His Glu Gln Leu Leu Asp Thr Leu His

245 250 255

Gly Arg

<210> 17

<211> 258

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности MRUF

<400> 17

Met Asp Leu Arg Pro Tyr Leu Glu Ala Ala Leu Asp Ala Ala Tyr Leu

1 5 10 15

Ala Lys Gly Ile His Gln Tyr Tyr Gln Glu Lys Gly Phe Thr His Ser

20 25 30

Thr Lys Ser Thr Pro Thr Asp Val Val Thr Gln Ala Asp His Glu Ala

35 40 45

Glu Ala Ala Ile Arg Ala Leu Ile Ala Glu Arg Phe Pro Asp His Val

50 55 60

Val Leu Gly Glu Glu Gln Gly Gln Glu Gly Glu Gly Glu Phe Arg Trp

65 70 75 80

Ile Val Asp Pro Leu Asp Gly Thr Val Asn Tyr Ala His Gly Phe Pro

85 90 95

Phe Tyr Gly Val Ser Ile Gly Leu Glu Val Arg Gly Glu Val Val Leu

100 105 110

Gly Val Val Leu Asp Thr Ala Arg Gly Asp Leu Phe Thr Ala Thr Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Ala Tyr Leu Asn Gly Arg Pro Leu Arg Val Ser Gln Arg

130 135 140

Thr Thr Leu Val Gly Ser Leu Leu Ala Thr Gly Phe Pro Tyr Asp Val

145 150 155 160

Ala Arg Asp Pro Glu Asn Leu Thr Tyr Phe Gln Arg Ala Leu Ala Lys

165 170 175

Gly Leu Thr Val Arg Arg Pro Gly Ala Ala Ala Leu Asp Leu Ala Asn

180 185 190

Val Ala Ala Gly Arg Leu Asp Gly Phe Trp Glu Val Lys Leu Asn Pro

195 200 205

Trp Asp Val Ala Ala Gly Trp Leu Leu Ile Thr Glu Ala Gly Gly Gln

210 215 220

Val Thr Gly Phe Gln Gly Glu Ala Tyr Arg Leu Gly Asn Arg Tyr Leu

225 230 235 240

Val Ala Ser Asn Gly Arg Ile His Gln Ala Leu Leu Glu Ala Leu Gln

245 250 255

Gly Arg

<210> 18

<211> 258

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности MTA

<400> 18

Met Asp Leu Arg Ala Tyr Leu Gln Thr Ala Leu Asp Ala Ala Tyr Leu

1 5 10 15

Ala Lys Gly Ile His Gln Tyr Tyr Gln Glu Lys Gly Phe Thr Gln Ser

20 25 30

Ser Lys Ser Thr Pro Thr Asp Leu Val Thr Gln Ala Asp His Glu Ser

35 40 45

Glu Ala Ala Ile Arg Glu Leu Ile Ala Ala Arg His Pro Asp His Val

50 55 60

Val Leu Gly Glu Glu Gln Gly Gln Asp Lys Glu Gly Ala Phe Arg Trp

65 70 75 80

Ile Val Asp Pro Leu Asp Gly Thr Val Asn Tyr Ala His Gly Phe Pro

85 90 95

Phe Tyr Ala Val Ser Ile Gly Leu Glu Ala His Gly Glu Val Val Leu

100 105 110

Gly Val Val Leu Asp Thr Ala Arg Gly Glu Leu Phe Thr Ala Thr Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Ala Tyr Leu Asn Gly Arg Pro Ile Arg Val Ser Thr Arg

130 135 140

Ser Thr Leu Val Gly Ser Leu Leu Ala Thr Gly Phe Pro Tyr Asp Val

145 150 155 160

Ser Lys Asp Thr Glu Asn Leu Thr Tyr Phe Gln Arg Ala Leu Thr Lys

165 170 175

Gly Leu Met Val Arg Arg Pro Gly Ala Ala Ala Leu Asp Leu Ala Tyr

180 185 190

Val Ala Ala Gly Arg Leu Asp Gly Phe Trp Glu Val Lys Leu Asn Pro

195 200 205

Trp Asp Val Ala Ala Gly Trp Leu Ile Val Ser Glu Ala Gly Gly Arg

210 215 220

Val Ser Gly Leu Gln Gly Glu Asp Tyr Arg Leu Gly Asn Arg Tyr Leu

225 230 235 240

Val Ala Ser Asn Gly Leu Ile His Gln Pro Leu Leu Asp Thr Leu His

245 250 255

Gly Arg

<210> 19

<211> 258

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности MCH

<400> 19

Met Asp Leu Arg Pro Phe Leu Glu Thr Ala Leu Ala Ala Ala Tyr Val

1 5 10 15

Ala Arg Gly Ile His Gln Leu Tyr Gln Asp Lys Gly Phe Thr Gln Ser

20 25 30

Thr Lys Ser Thr Pro Thr Asp Val Val Thr Gln Ala Asp Lys Glu Ala

35 40 45

Glu Ala Ala Ile Arg Ala Leu Ile Glu Gln Arg His Pro Gly His Val

50 55 60

Val Leu Gly Glu Glu Glu Gly Gln Gln Gly Glu Gly Glu Tyr Arg Trp

65 70 75 80

Ile Val Asp Pro Leu Asp Gly Thr Val Asn Tyr Ala His Gly Phe Pro

85 90 95

Phe Tyr Cys Val Ser Ile Gly Leu Glu Val Arg Gly Glu Val Met Val

100 105 110

Gly Val Val Leu Asp Thr Ala Arg Gly Asp Leu Phe Thr Ala Thr Arg

115 120 125

Gly Gly Gly Ala Tyr Phe Asn Gly Arg Pro Met Arg Val Ser Arg Ser

130 135 140

Pro Lys Leu Leu Gly Ser Leu Ile Ala Thr Gly Phe Pro Tyr Asp Val

145 150 155 160

Ala Arg Asp Arg Glu Asn Leu Thr Tyr Leu Glu Arg Val Leu Phe Lys

165 170 175

Gly Ile Thr Val Arg Arg Pro Gly Ala Ala Ala Leu Asp Leu Ala Tyr

180 185 190

Val Ala Cys Gly Arg Leu Asp Gly Phe Trp Glu Val Lys Leu Asn Pro

195 200 205

Trp Asp Val Ala Ala Gly Trp Leu Leu Val Glu Glu Ala Gly Gly Arg

210 215 220

Ile Thr Gly Ile His Gly Glu Pro Tyr Arg Met Gly Asn Arg Tyr Leu

225 230 235 240

Met Ala Ser Asn Gly His Ile His Glu Glu Leu Leu Ala Thr Ile His

245 250 255

Gly Arg

<210> 20

<211> 258

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности MCE

<400> 20

Met Asp Leu Arg Val Tyr Leu Gln Thr Ala Leu Asp Ala Ala Tyr Leu

1 5 10 15

Ala Lys Gly Ile His Gln Tyr Tyr Gln Glu Lys Gly Phe Thr Leu Ser

20 25 30

Ser Lys Ser Thr Pro Thr Asp Leu Val Thr Gln Ala Asp His Glu Ser

35 40 45

Glu Ala Ala Ile Arg Glu Leu Ile Ala Ala Arg His Pro Asp His Val

50 55 60

Val Leu Gly Glu Glu Gln Gly Gln Asp Arg Glu Gly Ala Phe Arg Trp

65 70 75 80

Ile Val Asp Pro Leu Asp Gly Thr Val Asn Tyr Ala His Gly Phe Pro

85 90 95

Phe Tyr Ala Val Ser Ile Gly Leu Glu Ala His Gly Glu Val Val Leu

100 105 110

Gly Val Ile Leu Asp Thr Ala Arg Gly Asp Leu Phe Thr Ala Thr Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Ala Phe Met Asn Gly Arg Pro Ile Arg Val Ser Pro Arg

130 135 140

Ala Thr Leu Val Gly Ser Leu Leu Ala Thr Gly Phe Pro Tyr Asp Val

145 150 155 160

Ser Lys Asp Thr Glu Asn Leu Val Tyr Phe Gln Arg Ala Leu Thr Arg

165 170 175

Gly Leu Met Val Arg Arg Pro Gly Ala Ala Ala Leu Asp Leu Ala Tyr

180 185 190

Val Ala Ala Gly Arg Leu Asp Gly Phe Trp Glu Val Lys Leu Asn Pro

195 200 205

Trp Asp Val Ala Ala Gly Trp Leu Ile Ile Arg Glu Ala Gly Gly Thr

210 215 220

Val Thr Gly Met Glu Gly Glu Ala Tyr Arg Leu Gly Asn Arg Tyr Leu

225 230 235 240

Val Ala Ser Asn Gly Leu Ile His Gln Pro Leu Leu Asp Thr Ile His

245 250 255

Gly Arg

<210> 21

<211> 819

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности RMA

<400> 21

atgatggatg cctacacgct ttacgaagaa gcccgtgagg tggcggcccg gctggcccgc 60

gatgccggac agatcgcccg ctactatgcc ggtcgggtga ccgtccgcga aaaaggctat 120

aacgagctgg tcacgcaggc cgacgaagaa gtacagcgct tcctgatcga gcagatccac 180

cggcatttcc ccgagcacgc gattctggcc gaggagaacc tgtccgacat gcaggacggc 240

agggaagggg cgtcgtttcg atggatcatc gatccgatcg acggcacgac gaacttcacg 300

cacggtgtgc cgccctatgg catcagtctg gcactccagc atgaaggccg gacggtcgtg 360

ggggtcgtct acgacgtgcc ccacgacgag ctgttcaccg cagtgcgggg cggcgggctg 420

tacgtcaacg gggtgcgcgc ccgggttagc cagaccgaaa cgctccggga ggcgctcatc 480

acgaccggct tcccctaccg ggaagtcgtg catctggaag aatatctgga ggcgctcggg 540

cgtgtgattc gagcgacgcg aggggtgcgt cggccgggcg cggcttcggt cgatctggcc 600

tgggtggcct gcggacgctt cgacggattc ttcgagacgg gcctgagtcc ctgggatgta 660

gcggccggca tcctgctggt cgaagaaggc ggaggacggg tgacggactt tcacgggcgg 720

cccgatccga tctttgcccg ccagatgctg gccacgaacg ggcgcatcca cgaggcgctc 780

tgcgagctgg tcgcgccgct gcaccacgtc tacgcctga 819

<210> 22

<211> 768

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности TLE

<400> 22

atggacagaa tggatttttc aataaagatc gccagaaaag tcggtctcta cctgatggaa 60

cactggggca atgcagaaaa tgttcggcaa aaaagctctt ttcaggacct ggtaagtgac 120

tgcgacaagc aagcacagaa aatgattgtt cagaagataa aagaccattt tccagatgac 180

gctattttag ccgaggaagg gctattcgaa aaaggagaca gaatgtggat aattgaccca 240

atagatggca caatgaacta cgtccatggt ctaccttctt ttgcgattgg aatcgcctac 300

gttgaaaaag agcaagttat ccttggcgta gcacacgatc cagttctcaa cgagacatac 360

tatgcaatca aagggcaggg tgcgtataaa aatggggaaa gaataaatgt ttcagaaaat 420

tcgcttttga aagactctat tggaaatact ggcttttata cagattttac agggatcttc 480

atcagcgcaa tcgaaaagaa agtcaggcgg gtgagaatga caggcagtgc tatacttgct 540

ggcgcttatg ttgcctgtgg aaggtttgat ttctttatag caaaaagagc caattcttgg 600

gatgtagctc ctttattcgt cctcgtccca gaagctggtg gaatcgtaac ggacctgtcc 660

ggaaaccagg cacatctcaa caccggtaat tttcttttca gtaacggtct attacacgat 720

caggtcttag aagtcataag agaggtgaat aaaaaagtaa gaaaatga 768

<210> 23

<211> 777

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности MRUB

<400> 23

atggacttgc gtgcctatct gcaaaccgcc ctcgacgccg cctatttagc caaaggcatc 60

caccagtact accaggaaaa aggctttacc cagagcacca agtccacccc caccgatcta 120

gtcacccagg ccgaccacga gtcggaggcg gccatccgag aactcattgc ttcgcgccac 180

cccgaccacg tggtgctggg cgaggaacaa ggccaggaca aagagggggc cttccgctgg 240

attgtagacc ccctggacgg caccgtaaac tacgcccatg gcttcccttt ttatgcggtg 300

agcatcggcc tggaagccca cggcgaggtg gtgctggggg tggttctgga taccgcccgg 360

ggcgagctat ttaccgctac caaggggggc ggggcctacc tgaatggtcg tcccattcgg 420

gtatccaccc gttcaaccct ggtgggcagc cttctagcca ccggattccc ctacgatgtg 480

agcaaggaca ccgaaaacct ggtctacttt cagcgggccc tgaccaaggg gctcatggtg 540

cggcgaccgg gcgcggcagc cctcgacctg gcttatgtgg ccgctgggcg cctggacggc 600

ttctgggaag tgaagctcaa cccctgggat gtggccgcgg gctggctcat cgttagcgag 660

gccggagggc ggataaccgg ccttcaaggg gaggattacc ggctgggcaa ccgctaccta 720

gtggcctcca acggcctgat ccacgggccg ctgctggaca ccatccacgg gcgatag 777

<210> 24

<211> 798

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности DTU

<400> 24

atgaagagaa tacttgaagt agctataaaa acaattaaag aatctggtaa tatacttttg 60

aactacatag gcgaggaaaa agaaatagaa cttaaaggaa tttccaattt agtcactcaa 120

gtagataaac tctcagaaag acatatacta aaatccatag aagaaaattt tccggatcat 180

tcaatcttga cagaagaaac aggctttata aataaaaatt ctgaatatac ctggattgta 240

gatcccttag atggaaccac aaattatgcc cataatttcc ctttttttgg aattagtatt 300

gccctcataa aaaataaaga aataatactt ggattaatct atgatcccat aagagacgag 360

ttattttatg ccataaaaaa tgaaggtgca tacctaaatg ataggagaat agaggtatca 420

aaaacagaaa gtcttgaaaa ttctctcatt agttttgcct ttccttacga attaagtctt 480

gaggagaaaa attttattcc ttttataaat ttttcctcta gaactcatgg tataagaagg 540

acaggttcgg cagcaataga aatagcctat gtagggtgtg gaagacttga tggattttgg 600

gcaaagaaac taaaaccatg ggatattagt gcaggcattc taatagtgga agaggcaaaa 660

ggtaaagtta cagattttag tggaaacaat attgatattc atacagacaa tattttgttt 720

tcaaacggta aaatacacca agagatgata aaaatcttaa atttaggtaa aatattcatt 780

agaaatgaaa aattttga 798

<210> 25

<211> 756

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности PFE

<400> 25

atgctcggcg tcttggaggc cgtggcggtc cgcgcctcgc attttttaat ggagtacttc 60

agagccggca gaggcgtaga cgtcgtgtcg cgtaaagagg acgacgtcac cagggaggtg 120

gacatcgccg cggagacgct catatacaaa atgctcagag aggcctttaa agaaggcggc 180

gtcctatacg cagaggaagg cggcatctac aggtggggag acgagcgcta catcttcgtc 240

ctagacccac tcgacgggtc gctgaactac gccgtgggcg tgcccttctt cgccgtatct 300

atcgcggcag ggaaacatag agagggcacc ctggccgatt tagaatacgc cgtcgtggcg 360

atacccccca cgggagacgt ctacacggcg gcccccggcg tcggcgcccg caaaaacgga 420

aagccgttga ggaggacccc gaggagcaat atagtattcg tagcggtgag caacagcttc 480

cccccaaaga cctgcgaagt cgtgaggcgg ctggggctca gggggaggag cctcggcagc 540

tccgccgccg agctggcgta cacggtggaa ggcatagccc gcggcttcct agacctccgg 600

ggcaagctca gactgctcga cgtggcgggg gcattgacga taggcaaata cgtagacggc 660

ttccggtacg tggtgatggg cgacaccaag ccgcactcca aggtgtctct agtggcgggc 720

gacgtagatt tcgtaaatgc cgcaaccaca gattga 756

<210> 26

<211> 774

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности TWI

<400> 26

atgaaagatg agaaaggaat tgtagtagat attataaaaa aagcaggaga gattcttcaa 60

gatgggtgga ataaaaaaaa ttttaaaatt tatcggaaag gaacaattaa tttagttaca 120

gaaatagata agaaaattga atttcttata atacaacttt taaaacaata ttttcctgat 180

tatggtattc ttacagaaga aagcaaagaa attaacagca aagcaaacgt gcgatggatt 240

atagatcccc tagatggtac tactaattat ataaaacaat atccgtttgt agccatatca 300

attgctttag agaaagaagg agaattaatt ttgggagttg tttataatcc gattttaaat 360

gaaatgttta tagctcaaaa aggatgtggt gcgacttata atgggaagtc aattcatgtt 420

tctaaaataa aagaattggg atcggcagtt ctagcatcgg gctttcctta tgatgcgtgg 480

gaaaatcctg ataataatgc taaacaatgg aggcaatttc ttactcgtag tttatctctt 540

cgatgcgatg gatcagcagc tctcgatctt tgtagagtag cttgtggaca attggatggt 600

tattgggaaa agggaattag cccgtgggat gttgcagctg gtattgtaat attgcgcgaa 660

gcaggaggaa taattactga ttatttgggt gaggaaaatt tctttaaacg tggagaagtt 720

gttgctgcaa atcctgttct ccacgcacaa atgttgaaag ttttaaataa ttag 774

<210> 27

<211> 795

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности TTH

<400> 27

atgatcggga ggcgccaccc ctactacccg tacctggagg cggccctgga ggcggcgagc 60

ctcgcccggg gcatccacct ctactacctg gaaaagggct tcaccgaggg gaccaagtcc 120

ggccccaccg acctggtgac ccaggcggac cgggaggcgg aagaggcggt gaagggcctc 180

ctcctctccc gcttccccga ggcggggttt ctgggggagg aagggggaag cgagggcggg 240

aaggccctcc gcttcatcgt ggacccgctg gacgggacgg tgaactacgc ccacggcttc 300

cccttcttcg ccgtatccat cgccctcgag gccgagggcg ccatccagat gggcgtggtg 360

atggacaccg cccgggggga ggtcttctac gccctgaggg gggaaggggc ctacctcaac 420

ggccgcccca tccgggtcac ggggcgggag agcctcgtgg ggagcctcct cgccacgggc 480

ttcccctacg acgtggccaa ggacccggaa aacctcacct actttgaacg ggccctgggc 540

aagggcctgc tcgtccgcag gcctggggcg gcggccctgg acctggccta cgtggccgcg 600

gggcggctgg agggcttctg ggaggtgaag ctgaacccct gggacgtggc ggcggggtgg 660

ctcctcgtgg aagaggcggg aggaagggtg acggacctcg aggggaaccc ctaccgcctg 720

ggcagccgct acatcctcgc caccaacggg cgggtccacg aggccctgcg ccggaccctc 780

ctgggcctgg actga 795

<210> 28

<211> 756

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности TLI

<400> 28

atgtatgaat ggaatgaaat agccctaaat ctcgcaaagg atattgaaag agaagtaatg 60

cctctctttg gaacaaagaa ggctggagaa ttcatcgggt ttagcccgag cggggacaaa 120

actaaactcg tagataaagt tgcagaagac gttgttctgg agtatctcag accccttggc 180

gtaaacgtag taagtgagga gattgggaac atagaggctg gaagtgaata cactattgtt 240

gtcgacccca tcgatggttc tttcaacttt atccaaggca tccctatctt tggattcagc 300

tttgcagttt tcaaaaatga aaaacccgtc tatgctatga tttacgagtt catcacaaag 360

aacgtttatg aaggaattcc cggtgaggga gcctatctaa acggggagag aatacgagtt 420

aggcatttaa atgaaaagtc catctcaata agcttctaca caagaggtag gggagcgagg 480

cttgttgaaa aagttaagag aacgagggtt ttaggtgcta tagcagttga gcttgcttat 540

ctcgctagag gttctctaga cggtgtaata gacataagga actatgtaag gccgacagac 600

atagcagcag gttacataat cgcaaaagaa gctggagcta ttataaccga cgatagcgga 660

gaggaaataa agtttagatt agatgcaagg gaaaagctca acataatagc ggtaaatgat 720

aagagactcc ttaagctcat acttgaagtt atttaa 756

<210> 29

<211> 795

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности GST

<400> 29

atggcagaaa aatgggaaga aatcgaccga tacgcccggc aatggatcga cgaagcagga 60

aagcgcatcc gcgcctcgtt tgccaaacag ctgacggtgg aagcgaaaga gaacccgaac 120

gacttagtga cgaatgttga ccgcgccatt gagcagtttt tcgccgagca catccgtcgc 180

cagttcccta gccaccgcct gttgggggaa gaaggatttg gcgaccggat cgatgccttg 240

gacggcgttg tttgggtgat tgacccgatc gacggcacga tgaatttcgt tcatcagcgg 300

cgccattttg ctgtatcgat cggcattttt gaagatggca tcgggcagct cggctacgtg 360

tatgacgtcg tgtttgacga actgtatgcg gcgcaaaaag ggcggggggt gtttttgaac 420

ggggagccgc tcggcctcct gcagcccgcg ccagtggcgg agtcgatcat cgccatcaac 480

gggacatggc tcatggaaaa caagcgcctc gaccatcgcc cgctcatgag gctggcgaaa 540

gaggcgcgcg gcacgcgctc gtatggttca gcggcgcttg agctcgcgta tgttgccgcc 600

ggccgtttgg acgcctacat ttcgccgcgc ctgtcgccgt gggatttcgc cggcgggatg 660

attttgattg aagaagcggg cggaatggtg acgacccttg acgggaagcc gctggatctg 720

cttggccgca attcggtgct tgccgcgaaa cctggggtgc acgaagaaat tttgcggcgc 780

tatcttcacg attga 795

<210> 30

<211> 780

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности ATH

<400> 30

atgaccactt cccttcgcga tttgctcgat tttgctgtgg aaacggcgta tctggcagga 60

cgaaccaccc tggcgtattt tcagacgggt gttcaggcgg agttcaaagc cgattcttcc 120

cccgtgactc ttgccgaccg cgccgccgag caattgattc gtcaacgcat tgaaaaacgc 180

ttccctcatc atgccattgt gggtgaggaa tttggtgttc agggaagcgc tgatgctacc 240

caccgctggt tcattgaccc gattgacggc accaaatcct tcctgcgcgg cattcccctg 300

tacgctgtgc tgttgggctt ggagattgaa ggcagggtgc aggtgggagt ggcttattac 360

cccgctatgg acgagatgct gtctgccgcc gatggcgagg gatgctggtg gaacgggcgg 420

cgggcgcgtg tctccacggc gagccgcctg gcagaagcct gggtgaccag caccgacccc 480

tacaatttcc agaaaaccgg caaagatgcc gcctggcagc gcattcaggc ggtgtcttat 540

caccgcggcg gctgggggga tgcctacggc tatctgctgg ttgctactgg gagagccgaa 600

gtgatgctcg atcccatcat gaacgagtgg gattgcgcgc cgttcccgcc catcttccgc 660

gaagccggtg gttttttcgg agactggcag ggtaacgaaa ccatctatgg cggcgaggcg 720

ctggcaacaa ctcaggttct tctccctgag gtgctggagt gtttacattc ttccctttga 780

780

<210> 31

<211> 804

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности SAC

<400> 31

atgaaaagag aagatgtaga gaaggtagct agcgaagctt ctaaatatat atatgaagag 60

agagaaaaca aggacgtcga cagagtaatt aatgtacatg gtaatgacgt gactagaatt 120

atagataaga gatctgaaga ctttattgtg gacaggttaa aaagtctagg atataatata 180

ctcatagtta cagaagaatc aggtgtaatt gacagttatg ggaaaaatta cgattacatt 240

gcaattgtag atccactgga tggaagtaca aattttgtat caggaatacc atggtcttca 300

gtatctattg ctatatacaa tagggacgaa gaagatatac tcagttcaaa tgtaggtgct 360

gtaagcagta ttttcactcc ttacacattt tcctacgatg aaggaagcgc ttacgtaaat 420

ggcgtaaaga tagcagagat aaaaaagcct gaaaaaatac tattattagc ctatttctcc 480

aggtcaaagc tacctaatct gaaattattt tttgagaaga ttggtcaggg ttataaaata 540

agaagtttag gaagtgcatc cttagatatg atattagtgt gtacaggcag ggcaacaatg 600

ttttttgata taaggggaaa actgagaaat gtggatattg cagcctcatc taacttctgt 660

tccagattag gggtaattcc atacgacata ggtttaagaa aaattaaaag tagtttgacg 720

gaagtaagtg ttgtaaaaga tttagttata agtcttgacg aaagtcttct aagatctttc 780

tctcttgctt tacagacggt ttaa 804

<210> 32

<211> 777

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности TTA

<400> 32

atgctagaac tgctaaagga tacagcaaaa aaagcaggac gactgctaaa aataagattc 60

ttggaacttt tgaacggcat ggaaaccgag gtaagagaaa agggaaaaag cgattttgta 120

acaagggtag atgttgaagt ggaaaactac ataaaggaac tgcttgctaa cacaaatata 180

tcggtggtgg gagaagaaag ctttaaaggc gagataccgg gcacctgcat cttcatagac 240

cccatagatg gcacaagaaa cttcatgaga aagaaccccc acttcgccat taaccttgct 300

tatcaggaga agggaaagct tttggctgga gtgacctatg accctatgaa gaatgaaatg 360

ttttctgctg catttagcaa aggtgcattt ttaaacggag agcgcatcta cgcttccaca 420

aacaaggata ttggcaaagc catcatcgct ataggacttc catacagagg aagagaactc 480

atagatattc aaaccaacct ttacaggaac atcttcctaa acggcgctgc tacccgccac 540

acaggctcag cagcccttga tctggcctac atatcctgcg gaagatacga tgctgctatc 600

tatttttatc tttccccctg ggacgtagct ccgggcatac tgctggtaga agaggcaggc 660

ggagaagttg aaggcaccat gggacgagaa cccatccagg ggtggataat agcatctaac 720

aaagtcatcc accccgaagt taaagacatc cttgaaggct ctttaaaagc ggtataa 777

<210> 33

<211> 765

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности PFU

<400> 33

atgaagctta agttctggag ggaagtagcc attgacataa tctcagattt cgaaactaca 60

ataatgcctt tctttggaaa ccctgatggg ggaaagctcg taaagataag ccccagtgga 120

gatgagacaa agctggttga taagctcgcc gaggatttaa tactttcaag aatcacagag 180

cttggagtca acgttgtgag cgaggaagtt ggtgttattg ataacgagag tgaatacacc 240

gttatagtag acccactaga tggttcatat aacttcattg ctggaattcc tttttttgct 300

ttgagtctag cagtatttaa aaaagataag ccaatatatg caattatcta tgaacctatg 360

acagagagat tctttgaggg aatcccagga gagggagctt ttttaaatgg aaaaagaata 420

aaggtaagaa aaaccccgga cgagaagcca tcaataagct tttattctcg aggtaaaggc 480

catgaaatcg ttaaacatgt aaagagaact agaaccttag gggcaatcgc tctagaattg 540

gcatacctag ctatgggtgc attagatgga gtagttgatg tgaggaaata cgtaaggcca 600

acggacatag ctgctggaac gataattgca aaagaggcag gagcccttat taaggactcc 660

gcgggaaagg atatagatat ttcatttaat gcaactgata ggcttgatgt gatagccgtg 720

aacagcgaag agttgctaaa aacaatttta agcttactgg agtag 765

<210> 34

<211> 759

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности AFU

<400> 34

atggatgaaa gggatgcgct gagaatttcg agggagattg caggagaggt cagaaaggcc 60

attgcgtcaa tgcccttgag ggagagagta aaggacgtgg gaatggggaa ggatggcact 120

ccaaccaagg cagccgacag agttgcggaa gatgctgcgc ttgaaatttt gagaaaggag 180

agggttacgg tggttacaga ggagtcggga gttttggggg agggagatgt ctttgttgcc 240

ctcgaccccc tcgatggaac cttcaatgct acgagaggga ttccagttta ttcagtcagc 300

ctctgcttct cctattcgga taaactgaaa gacgccttct ttggctacgt ttacaacctc 360

gcaacagggg atgaatacta cgcggactcc agcggggctt acagaaacgg ggagaggatt 420

gaggtgagcg atgctgagga gctttactgc aacgccataa tctactatcc cgacaggaag 480

tttcccttta agaggatgag gatttttgga agtgctgcaa cggagctttg cttctttgct 540

gacggctcct ttgactgctt cctcgacatc cgccccggaa agatgcttag aatctacgat 600

gccgctgcgg gtgtttttat tgcagaaaag gcaggaggaa aggttaccga acttgatgga 660

gaaagcttgg ggaataaaaa atttgatatg caggaaaggc tcaatatcgt cgccgcaaat 720

gaaaaactcc atccaaagct gctggagctg attaaatga 759

<210> 35

<211> 798

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности AAC

<400> 35

atggacaagg catggctcga tggcctggcg gaggtcgtgc gggaggctgg ccgcctggtg 60

gaggagatcg ccaggcaggg cttcgatacg caattcaagc atccggaaga gaggcgagat 120

ccggtcacga cagccgatct cgcctgtgac gcgtttctga aagagcggct gctcacgctg 180

cttccggagg cgggctggct gtccgaggag acgaaggatc ggccggatcg attggagaaa 240

aggtgggtgt ggatcgtcga tcccatcgac ggcacgcggg agttcgtccg ccgcattccc 300

gagtacgcca tctcggtggc gctcgcgcgg gacggcgagc cggtggcggg cgcggtggtg 360

aatcccgcga cgggggatct gtttctcggc gccgtgggcg tcggcgcatg gcggaatgga 420

acgcccatgg tttgttcccg catccgcggc gagcggctca cgattctcgg cagccggtcg 480

gagatgaacc gcggcgagtt cgagccgttt gccggcattc tcgaggtccg ggcggtgggc 540

tccatcgcgt ataagctcgc gctcgtcgcg gcgggcgagg cggatggcac gttcagcctc 600

ggcccgaaac acgagtggga tatcgcggcc ggcgtcgcgc tcgtcctggc ggcgggcggc 660

cgggtacacg atggcgccgg gcgcccgttt cgcttcaacc agccgcacac gctcacccgt 720

ggcatcgtcg cggccacgcg cgaggcgtat ggcgatctcg ccctgctcat cgagcggcac 780

gccccacggc gcgcctag 798

<210> 36

<211> 777

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности MSI

<400> 36

atggacttgc aacgctactt ggaagccgca ctcgatgctg cgtacttggc tcgaggcatc 60

cacctctact accgcgaaaa aggcttcgcc ctggagagca aaaccagtcc caccgacttg 120

gtcacccaag ccgaccggga gagcgaagaa gctatccgga gtttactgct cgagcgcttc 180

cccgatcatg tggtgctggg tgaagaaggt gggcaggaag gccacagcga ttttcgctgg 240

atcgtggacc cgctcgacgg cacggtcaac tacgcccacg gcttcccctt ctacgcggta 300

agcatcgccc tcgaggtggg gggcgaggtc gtggtggggg cagtgctgga caccgcacgg 360

ggcgagctgt ttaccgccct caaaggagag ggagcattcc aaaatggacg ccccattcgc 420

gtttcgagca ccgcgaccct catcggaagc ctgctggcaa ccggcttccc ctacgatgtg 480

gccaaggacg ccgagaacct gacctacttc cagcgggctc ttgccaaagg ccttaccgtg 540

cgccgccccg gagccgccgc gctggatttg gcttacgtgg cggcagggcg gctggagggt 600

ttctgggagg tcaagctcaa cccctgggac gtggccgcgg gctggctcct catcaccgag 660

gcgggcggaa ccgtgagcgg catccagggc gagccttacc ggctaggaaa ccgctacttg 720

gtagccagca acgggaagat tcatgagcag ctcctcgaca cgctccacgg gcgatga 777

<210> 37

<211> 777

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности MRUF

<400> 37

atggatctgc gtccctacct cgaggccgct ctcgatgcgg cctacctagc caaaggcatt 60

caccagtact accaggaaaa aggcttcacc cacagcacca aatctacccc taccgatgtg 120

gtcacccagg ccgaccacga ggccgaggca gccatccggg ctcttatcgc cgagcgcttc 180

cccgaccacg tggtgttagg cgaggagcag ggccaggaag gggagggcga gtttcgctgg 240

attgtagacc ccttggatgg cacggtgaac tacgcccacg gctttccctt ctatggggtg 300

agcatcgggc tggaggtacg aggagaggtg gtgttggggg tggtgctgga taccgcccgg 360

ggcgatctct tcaccgctac caaaggcggc ggggcctacc tgaatggccg cccgctgcgg 420

gtttcccagc gaaccacttt ggtgggcagt ctgctggcta ccggttttcc ctacgatgtg 480

gcacgagacc cggagaacct cacctacttc cagcgggctt tggccaaggg gctgaccgtg 540

cggcggcccg gggcagcggc cctcgacctg gccaatgtgg ccgcgggccg gctggacggt 600

ttctgggagg ttaagctcaa cccctgggat gtggctgcgg gctggctcct catcaccgag 660

gcaggcggcc aggtcaccgg gttccagggc gaggcctacc gcctgggtaa ccgctattta 720

gtggcctcca atgggcggat tcaccaggcg ctgctcgagg cccttcaggg ccgatag 777

<210> 38

<211> 777

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности MTA

<400> 38

atggacttgc gtgcctacct gcaaaccgcc ctcgacgccg cctatttagc caaaggcatc 60

caccagtact accaggaaaa aggctttacc cagagcagca agtccacccc caccgatctg 120

gtcacccagg ccgaccacga gtcggaggcg gccatccgag aactcatcgc cgcgcgccac 180

cccgaccacg tggtgctggg cgaggagcag ggccaggaca aagaaggggc cttccgctgg 240

attgtagacc ccctggacgg caccgtaaac tacgcccatg gttttccttt ttatgcggtg 300

agcattggcc tggaagccca cggcgaggtg gtgctggggg tggttctgga taccgctcga 360

ggcgagctgt ttaccgctac caaagggggt ggggcttacc tgaacggtcg tcccatccgg 420

gtttccactc gttcaaccct ggtgggcagc ctcctggcca ccggatttcc ctacgacgta 480

agcaaggata ccgaaaacct gacctacttc cagcgggcat tgaccaaagg gctcatggta 540

cggcgccccg gcgcggcggc cctcgacctg gcctatgtgg ccgccgggcg cctggacggc 600

ttctgggagg tgaagctgaa cccctgggac gtggccgcgg gctggctcat cgtcagtgag 660

gcgggggggc gggtaagcgg ccttcagggc gaggattacc ggctgggcaa ccgctacctg 720

gtggcctcca acggcctaat tcatcagccc ttgctggaca ccctccacgg gcgatag 777

<210> 39

<211> 777

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности MCH

<400> 39

atggacctgc gccccttcct cgagaccgcg ctcgccgcgg cttacgtggc tcgaggcatc 60

caccagctct accaggacaa aggcttcacc cagagcacca agtccacccc caccgacgtc 120

gtgacccaag ccgacaagga ggccgaggcc gccatccgcg ccctcatcga gcagcggcac 180

cccggccacg tggtgctcgg cgaggaggag ggccagcagg gcgagggcga gtaccgctgg 240

atcgtggacc cgctcgacgg caccgtgaat tacgcccacg gcttcccctt ctactgcgtg 300

agcatcgggc tcgaggtgcg cggcgaggtg atggtgggcg tggtgctcga caccgcccgc 360

ggcgacctct tcaccgcgac ccgcggcggc ggggcctact tcaacgggcg gcccatgcgg 420

gtctcgcggt cgcccaagct gctgggcagc ctcatcgcca ccggcttccc ctacgacgtc 480

gcccgcgacc gcgaaaacct gacctacctc gagcgcgtcc tcttcaaggg catcaccgtg 540

cgccgccccg gcgccgccgc cctcgacctc gcctacgtgg cctgcgggcg gctcgacggc 600

ttctgggagg tcaagctcaa cccctgggac gtggcggcgg gctggctgct ggtcgaggag 660

gcgggcggca ggatcaccgg catccacggc gagccctacc gcatgggcaa ccgctacctc 720

atggcctcca acggccacat ccacgaggaa ttgctggcga cgatccacgg ccggtag 777

<210> 40

<211> 777

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности MCE

<400> 40

atggacttgc gtgtatacct gcagaccgcc ctcgatgcag cctatctggc caaaggcatt 60

caccagtact accaggagaa gggttttacc ctaagcagca agtccacccc cacagacctg 120

gttactcagg ccgaccacga gtcggaagcg gccatccgag aactcattgc cgcgcgccac 180

cccgaccacg tggtgctggg agaggagcag ggccaggaca gagaaggggc ttttcgctgg 240

attgtagacc ccctggatgg caccgtaaac tacgcccacg gttttccctt ttatgcggtg 300

agtatcggcc tcgaggccca cggcgaggtg gtgctgggag tgattctcga taccgcccgg 360

ggcgacctat tcaccgctac caaggggggc ggggccttca tgaatggccg ccccatccgg 420

gtttcccctc gagccaccct ggtgggaagc ctgctggcca ccggcttccc ctatgacgtt 480

agcaaagaca ccgaaaacct ggtctacttc cagcgggccc tgaccagagg gcttatggtg 540

cggcgtcccg gcgctgccgc cctcgacctg gcctacgtgg ccgccgggcg tctggatggt 600

ttctgggagg tgaagctcaa cccctgggat gtggccgcag gctggctcat catccgcgag 660

gccgggggta cggttacggg catggagggg gaggcctacc ggctgggcaa ccgctacctg 720

gtagcctcca acggcctgat tcaccagcct ctgctggaca ccatacacgg gcgatag 777

<210> 41

<211> 26

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ДНК прямого праймера Rma

<400> 41

ctccgccata tgatggatgc ctacac 26

<210> 42

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ДНК обратного праймера Rma

<400> 42

gccacctcga gggcgtagac gtggt 25

<210> 43

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ДНК прямого праймера Tle

<400> 43

gtgcaaatca tatggacaga atggattttt caa 33

<210> 44

<211> 34

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ДНК обратного праймера Tle

<400> 44

gatattctcg agttttctta cttttttatt cacc 34

<210> 45

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ДНК прямого праймера Mrub

<400> 45

tgaccccata tggacttgcg tgcctat 27

<210> 46

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ДНК обратного праймера Mrub

<400> 46

ttctgcctcg agtcgcccgt ggatg 25

<210> 47

<211> 34

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ДНК прямого праймера Dtu

<400> 47

taagctcata tgaagagaat acttgaagta gcta 34

<210> 48

<211> 34

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ДНК обратного праймера Dtu

<400> 48

acaaaagact cgagaaattt ttcatttcta atga 34

<210> 49

<211> 34

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ДНК прямого праймера Msi

<400> 49

atatacatat ggacttgcaa cgctacttgg aagc 34

<210> 50

<211> 31

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ДНК обратного праймера Msi

<400> 50

tggtggtcga ctcgcccgtg gagcgtgtcg a 31

<210> 51

<211> 34

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ДНК прямого праймера Mruf

<400> 51

atatacatat ggatctgcgt ccctacctcg aggc 34

<210> 52

<211> 30

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ДНК обратного праймера Mruf

<400> 52

tggtggtcga ctcggccctg aagggcctcg 30

<210> 53

<211> 34

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ДНК прямого праймера Mta

<400> 53

atatacatat ggacttgcgt gcctacctgc aaac 34

<210> 54

<211> 31

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ДНК обратного праймера Mta

<400> 54

tggtggtcga ctcgcccgtg gagggtgtcc a 31

<210> 55

<211> 34

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ДНК прямого праймера Mch

<400> 55

atatacatat ggacctgcgc cccttcctcg agac 34

<210> 56

<211> 31

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ДНК обратного праймера Mch

<400> 56

tggtggtcga cccggccgtg gatcgtcgcc a 31

<210> 57

<211> 34

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ДНК прямого праймера Mce

<400> 57

atatacatat ggacttgcgt gtatacctgc agac 34

<210> 58

<211> 31

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Последовательность ДНК обратного праймера Mce

<400> 58

tggtggtcga ctcgcccgtg tatggtgtcc a 31

<210> 59

<211> 823

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности CT1

<400> 59

Met Leu Lys Lys Leu Pro Glu Asn Leu Glu His Leu Glu Glu Leu Ala

1 5 10 15

Tyr Asn Leu Trp Trp Ser Trp Ser Arg Pro Ala Gln Arg Leu Trp Arg

20 25 30

Lys Ile Asp Pro Glu Gly Trp Glu Glu His Arg Asn Pro Val Lys Ile

35 40 45

Leu Lys Glu Val Ser Asp Glu Arg Leu Glu Glu Leu Ser Lys Asp Asp

50 55 60

Asp Phe Ile Ser Leu Tyr Glu Leu Thr Ile Glu Arg Phe Lys Asp Tyr

65 70 75 80

Met Glu Lys Glu Asp Thr Trp Phe Asn Val Asn Tyr Pro Glu Trp Asp

85 90 95

Glu Lys Ile Val Tyr Met Cys Met Glu Tyr Gly Leu Thr Lys Ala Leu

100 105 110

Pro Ile Tyr Ser Gly Gly Leu Gly Ile Leu Ala Gly Asp His Leu Lys

115 120 125

Ser Ala Ser Asp Leu Gly Leu Pro Leu Ile Ala Ile Gly Leu Leu Tyr

130 135 140

Lys His Gly Tyr Phe Thr Gln Gln Ile Asp Arg Asp Gly Lys Gln Ile

145 150 155 160

Glu Ile Phe Pro Asp Tyr Asn Pro Glu Asp Leu Pro Met Lys Pro Leu

165 170 175

Lys Asp Glu Lys Gly Asn Gln Val Ile Val Glu Val Pro Leu Asp Ser

180 185 190

Thr Val Val Lys Ala Arg Val Phe Glu Val Lys Val Gly Arg Val Ser

195 200 205

Leu Tyr Leu Leu Asp Pro Asp Ile Glu Glu Asn Glu Glu Arg Tyr Arg

210 215 220

Lys Ile Cys Asn Tyr Leu Tyr Asn Pro Glu Pro Asp Val Arg Val Ser

225 230 235 240

Gln Glu Ile Leu Leu Gly Ile Gly Gly Met Lys Leu Leu Arg Ala Leu

245 250 255

Asn Leu Lys Pro Gly Val Ile His Leu Asn Glu Gly His Pro Ala Phe

260 265 270

Ser Ser Leu Glu Arg Ile Lys Asn Tyr Met Glu Glu Gly Tyr Ser Phe

275 280 285

Thr Glu Ala Leu Glu Ile Val Arg Gln Thr Ser Val Phe Thr Thr His

290 295 300

Thr Pro Val Pro Ala Gly His Asp Arg Phe Pro Phe Asp Leu Val Glu

305 310 315 320

Lys Lys Leu Ser Lys Phe Phe Glu Gly Phe Glu Lys Arg Asn Leu Leu

325 330 335

Met Asp Leu Gly Lys Asp Glu Thr Gly Ser Phe Asn Met Thr Tyr Leu

340 345 350

Ala Leu Arg Thr Ser Ser Phe Ile Asn Gly Val Ser Lys Leu His Ala

355 360 365

Glu Val Ser Arg Arg Met Phe Lys Asn Val Trp Gln Gly Val Pro Val

370 375 380

Glu Glu Ile Pro Ile Glu Gly Ile Thr Asn Gly Val His Met Gly Thr

385 390 395 400

Trp Ile Asn Arg Glu Met Arg Lys Leu Tyr Asp Arg Tyr Leu Gly Arg

405 410 415

Val Trp Arg Asp His Thr Asp Leu Glu Gly Ile Trp Tyr Gly Val Asp

420 425 430

Arg Ile Pro Asp Glu Glu Leu Trp Gln Ala His Leu Arg Ala Lys Lys

435 440 445

Arg Phe Ile Glu Tyr Ile Lys Glu Ser Val Arg Arg Arg Asn Glu Arg

450 455 460

Leu Gly Ile Asp Glu Asp Val Pro Asn Ile Asp Glu Asn Ser Leu Ile

465 470 475 480

Ile Gly Phe Ala Arg Arg Phe Ala Thr Tyr Lys Arg Ala Val Leu Leu

485 490 495

Leu Ser Asp Leu Glu Arg Leu Lys Lys Ile Leu Asn Asp Pro Glu Arg

500 505 510

Pro Val Tyr Val Val Tyr Ala Gly Lys Ala His Pro Arg Asp Asp Ala

515 520 525

Gly Lys Glu Phe Leu Lys Arg Ile Tyr Glu Val Ser Gln Met Pro Glu

530 535 540

Phe Lys Asn Arg Ile Ile Val Leu Glu Asn Tyr Asp Ile Gly Met Ala

545 550 555 560

Arg Leu Met Val Ser Gly Val Asp Val Trp Leu Asn Asn Pro Arg Arg

565 570 575

Pro Met Glu Ala Ser Gly Thr Ser Gly Met Lys Ala Ala Ala Asn Gly

580 585 590

Val Leu Asn Ala Ser Val Tyr Asp Gly Trp Trp Val Glu Gly Tyr Asn

595 600 605

Gly Arg Asn Gly Trp Val Ile Gly Asp Glu Ser Val Leu Pro Glu Thr

610 615 620

Glu Val Asp Asp Pro Arg Asp Ala Glu Ala Leu Tyr Asp Leu Leu Glu

625 630 635 640

Asn Glu Ile Ile Pro Thr Tyr Tyr Glu Asn Lys Glu Lys Trp Ile Phe

645 650 655

Met Met Lys Glu Ser Ile Lys Ser Val Ala Pro Arg Phe Ser Thr Thr

660 665 670

Arg Met Leu Lys Glu Tyr Thr Glu Lys Phe Tyr Ile Lys Gly Leu Val

675 680 685

Asn Lys Glu Trp Leu Glu Arg Lys Glu Asn Ala Glu Arg Phe Gly Ala

690 695 700

Trp Lys Glu Arg Ile Leu Arg Asn Trp Ser Ser Val Ser Ile Glu Arg

705 710 715 720

Ile Val Leu Glu Asp Thr Arg Ser Val Glu Val Thr Val Lys Leu Gly

725 730 735

Asp Leu Ser Pro Asp Asp Val Leu Val Glu Leu Leu Ile Gly Arg Gly

740 745 750

Glu Ser Met Glu Asp Leu Glu Ile Trp Lys Val Ile Gln Ile Arg Lys

755 760 765

His Arg Arg Glu Gly Asp Leu Phe Ile Tyr Ser Tyr Val Asn Gly Ala

770 775 780

Leu Gly His Leu Gly Ser Pro Gly Trp Phe Tyr Ala Val Arg Val Leu

785 790 795 800

Pro Tyr His Pro Lys Leu Pro Thr Arg Phe Leu Pro Glu Ile Pro Val

805 810 815

Val Trp Lys Lys Val Leu Gly

820

<210> 60

<211> 2472

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности CT1

<400> 60

atgctgaaga aactcccgga gaatctggag catctggaag aactcgccta caacctctgg 60

tggagctggt ctaggcccgc tcagagactc tggagaaaga tagatccgga aggctgggag 120

gaacacagaa accccgttaa aatactgaaa gaagtttctg atgaaaggct cgaagaactt 180

tcaaaagatg atgatttcat atccctctac gaactcacca ttgaaaggtt caaggattac 240

atggagaaag aagacacctg gttcaacgtg aactaccccg aatgggacga gaagatcgtc 300

tacatgtgta tggagtacgg tttgaccaaa gcccttccga tctactccgg tggtcttgga 360

atcctcgcgg gagaccatct caaatccgca agcgatcttg gacttcctct catagcgatc 420

ggacttctct acaaacatgg atatttcacc cagcagatcg acagagatgg aaaacagata 480

gagattttcc ctgattacaa cccagaggac ttacccatga agcccctgaa ggatgaaaag 540

ggaaaccagg tgatcgtgga ggttcctctc gacagtaccg tggtgaaggc acgtgttttt 600

gaagtgaagg taggaagggt gagtctgtac ctgctcgatc cggacatcga ggaaaacgag 660

gaacgataca gaaagatctg caactacctt tacaacccgg aacccgatgt gagggtctcc 720

caggagatac tcctcggaat tgggggaatg aagcttctca gggctctgaa cctgaaacca 780

ggagtcatcc atctgaacga aggacatccg gcgttctctt ccctcgaaag gataaagaac 840

tacatggaag aaggatattc cttcacagag gcccttgaga tcgtgagaca gacgagtgtg 900

tttacaaccc acacacccgt tcccgctgga cacgacagat ttccctttga cctcgtggaa 960

aagaaacttt cgaaattctt cgaaggattc gaaaagagaa atcttctcat ggatcttggg 1020

aaagatgaaa caggcagttt caacatgacg tatcttgccc tgagaacgtc ctctttcata 1080

aacggcgtga gcaaactgca tgcggaagtt tccagaagga tgttcaaaaa cgtgtggcag 1140

ggtgttcccg tggaggaaat accgatcgaa gggataacga acggcgttca catgggaacc 1200

tggatcaacc gtgagatgag aaaactgtac gacagatatc tcggaagggt atggagagat 1260

cacaccgacc ttgagggtat ctggtacggt gttgacagga ttccagatga agaactctgg 1320

caggctcacc tgagggcaaa gaagagattc atcgagtaca taaaagaatc ggtaagaaga 1380

agaaacgaga gactgggaat cgacgaagat gtgccgaaca tcgatgaaaa ttcgctcatc 1440

ataggttttg caagaaggtt tgccacttac aagagggcag ttctcctgct cagcgatctg 1500

gagagactca agaagatcct caacgatcca gaaagacccg tttacgtggt ctatgcgggg 1560

aaggcccatc caagggacga tgcggggaag gaatttttga aacgcatcta cgaagtctcg 1620

cagatgcctg agttcaaaaa caggatcatc gtactggaaa actacgacat tggaatggca 1680

cggctcatgg tgtcgggagt ggatgtgtgg ctgaacaacc cgagaagacc catggaagca 1740

agtggaacaa gcggaatgaa ggcagcagcc aacggagttc ttaacgcgag tgtttacgat 1800

ggatggtggg ttgaagggta caacggcaga aacggctggg tcataggcga tgaaagcgtt 1860

cttccagaga cggaagtgga cgatcccagg gacgcagaag cactctacga tctcctcgaa 1920

aacgaaatca tcccaaccta ctacgaaaac aaagaaaagt ggatcttcat gatgaaagag 1980

agcataaaga gtgttgctcc aagattcagc accaccagaa tgctcaaaga atacacggag 2040

aagttctaca taaagggact tgtgaacaaa gaatggcttg aaagaaaaga aaacgccgaa 2100

aggtttggtg catggaagga aaggatcctc agaaactgga gcagcgtttc catagaaaga 2160

atcgtccttg aggacacaag gagtgttgag gtgacggtga aactgggaga cctttcacct 2220

gatgatgtac tggttgaact tttgattgga agaggagaaa gcatggaaga tctggagatc 2280

tggaaggtga tacagataag aaagcacaga agggaagggg atctgttcat ctacagttat 2340

gtcaacggtg ccctcggtca tcttggctct ccgggatggt tctacgcggt gagggtgcta 2400

ccttatcatc cgaaacttcc caccagattc ttgccggaga tacctgtggt gtggaaaaag 2460

gttctcgggt ga 2472

<210> 61

<211> 441

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности CT2

<400> 61

Met Ile Gly Tyr Gln Ile Tyr Val Arg Ser Phe Arg Asp Gly Asn Phe

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asp Phe Lys Gly Leu Lys Gly Ala Ile Ser Tyr Leu

20 25 30

Lys Glu Leu Gly Val Asp Phe Val Trp Leu Met Pro Val Phe Ser Ser

35 40 45

Ile Ser Phe His Gly Tyr Asp Val Val Asp Phe Tyr Ser Phe Lys Ala

50 55 60

Glu Tyr Gly Asp Glu Lys Asp Phe Arg Glu Met Ile Glu Ala Phe His

65 70 75 80

Asp Asn Gly Ile Lys Val Val Leu Asp Leu Pro Ile His His Thr Gly

85 90 95

Phe Leu His Val Trp Phe Gln Lys Ala Leu Lys Gly Asp Pro His Tyr

100 105 110

Arg Asp Tyr Tyr Val Trp Ala Ser Glu Lys Thr Asp Leu Asp Glu Arg

115 120 125

Arg Glu Trp Asp Asn Glu Arg Ile Trp His Pro Leu Glu Asp Gly Arg

130 135 140

Phe Tyr Arg Gly Leu Phe Gly Pro Leu Ser Pro Asp Leu Asn Tyr Asp

145 150 155 160

Asn Pro Gln Val Phe Glu Glu Met Lys Lys Val Val Tyr His Leu Leu

165 170 175

Glu Met Gly Val Asp Gly Phe Arg Phe Asp Ala Ala Lys His Met Arg

180 185 190

Asp Thr Leu Glu Gln Asn Val Arg Phe Trp Arg Tyr Phe Leu Ser Asp

195 200 205

Ile Glu Gly Ile Phe Leu Ala Glu Ile Trp Ala Glu Ser Lys Val Val

210 215 220

Asp Glu His Gly Arg Ile Phe Gly Tyr Met Leu Asn Phe Asp Thr Ser

225 230 235 240

His Cys Ile Lys Glu Ala Val Trp Lys Glu Asn Phe Lys Val Leu Ile

245 250 255

Glu Ser Ile Glu Arg Ala Leu Val Gly Lys Asp Tyr Leu Pro Val Asn

260 265 270

Phe Thr Ser Asn His Asp Met Ser Arg Leu Ala Ser Phe Glu Gly Gly

275 280 285

Leu Ser Glu Glu Lys Val Lys Leu Ser Leu Ser Ile Leu Phe Thr Leu

290 295 300

Pro Gly Val Pro Leu Ile Phe Tyr Gly Asp Glu Leu Gly Met Lys Gly

305 310 315 320

Ile Tyr Arg Lys Pro Asn Thr Glu Val Val Leu Asp Pro Phe Pro Trp

325 330 335

Ser Glu Asn Met Cys Val Glu Gly Gln Thr Phe Trp Lys Trp Pro Ala

340 345 350

Tyr Asn Asp Pro Phe Ser Gly Val Ser Val Glu Tyr Gln Arg Arg Asn

355 360 365

Arg Asp Ser Ile Leu Ser His Thr Met Arg Trp Ala Gly Phe Arg Gly

370 375 380

Glu Asn His Trp Leu Asp Arg Ala Asn Ile Glu Phe Leu Cys Lys Glu

385 390 395 400

Glu Lys Leu Leu Val Tyr Arg Leu Val Asp Glu Gly Arg Ser Leu Lys

405 410 415

Val Ile His Asn Leu Ser Asn Gly Glu Met Val Phe Glu Gly Val Arg

420 425 430

Val Gln Pro Tyr Ser Thr Glu Val Val

435 440

<210> 62

<211> 1326

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности CT2

<400> 62

atgataggct accagatcta cgtgagatca ttcagggatg gaaacttcga tggtgtgggg 60

gatttcaaag gattgaaagg tgcgatttcc tacctgaaag aactgggtgt tgattttgtc 120

tggctcatgc ccgtcttttc ctccatttcc ttccacgggt atgacgtggt ggatttttat 180

tctttcaaag ccgagtacgg agacgagaaa gactttagag agatgatcga ggcgttccac 240

gacaacggta taaaagtcgt tctcgatctt cccatccatc atactggttt cctccatgtg 300

tggtttcaga aagccctgaa aggagatcca cactacaggg attattacgt atgggcgagt 360

gaaaaaacgg atctggacga aagaagagag tgggacaacg aaaggatctg gcatcctctg 420

gaggacggaa ggttctacag aggacttttc ggtcccctct cacccgatct gaactacgat 480

aacccgcagg tttttgaaga gatgaagaag gtggtttatc accttcttga aatgggagtg 540

gacggattca gattcgacgc agcaaagcac atgagagata ctctggaaca gaacgttcgc 600

ttttggaggt atttcctctc cgatattgag ggaatattcc ttgcggaaat ctgggcagaa 660

tccaaagttg tggatgaaca cggcaggata ttcggctaca tgctaaattt cgatacctca 720

cactgtatta aggaagcggt gtggaaggaa aacttcaaag tgttgatcga gtcgatcgaa 780

agggccctgg ttggaaaaga ttatctgccg gtgaacttca catcgaacca tgatatgtca 840

aggcttgcga gtttcgaagg agggttgagt gaagagaagg tgaaactctc actttccatt 900

ctgttcacgc ttcccggggt tcctctcata ttctacggag acgaactggg aatgaaagga 960

atctatcgaa aaccgaacac ggaagtcgtg ctggatccgt tcccctggag cgaaaacatg 1020

tgtgttgaag gccagacatt ttggaaatgg cccgcgtata acgatccatt ctccggtgtt 1080

tctgttgagt atcagaggag aaatcgtgat tcgattctct cacacacgat gaggtgggca 1140

ggattcagag gggaaaatca ctggctggac agggcaaaca tcgaatttct gtgcaaagaa 1200

gaaaaactgc tcgtgtacag actggtcgat gaagggcgtt ctctgaaagt gatacacaac 1260

ctgtcgaatg gtgaaatggt gtttgaggga gtgcgcgtac aaccctacag cacggaggtg 1320

gtttga 1326

<210> 63

<211> 451

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности TN1

<400> 63

Met Lys Lys Met Ala Leu Lys Phe Asp Phe Ser Asn Leu Phe Glu Pro

1 5 10 15

Asn Ile Ser Gly Gly Leu Arg Glu Glu Asp Leu Glu Ser Thr Lys Glu

20 25 30

Lys Val Ile Glu Ala Ile Lys Asn Phe Thr Glu Asn Thr Pro Asp Phe

35 40 45

Ala Arg Leu Asp Arg Lys Trp Ile Asp Ser Val Lys Glu Leu Glu Glu

50 55 60

Trp Val Val Asn Phe Asp Thr Val Val Val Leu Gly Ile Gly Gly Ser

65 70 75 80

Gly Leu Gly Asn Leu Ala Leu His Tyr Ser Leu Arg Pro Leu Asn Trp

85 90 95

Asn Glu Met Ser Arg Glu Glu Arg Asn Gly Tyr Ala Arg Val Phe Val

100 105 110

Val Asp Asn Val Asp Pro Asp Leu Met Ala Ser Val Leu Asp Arg Ile

115 120 125

Asp Leu Lys Thr Thr Leu Phe Asn Val Ile Ser Lys Ser Gly Ser Thr

130 135 140

Ala Glu Val Met Ala Asn Tyr Ser Ile Ala Arg Gly Ile Leu Glu Ala

145 150 155 160

Asn Gly Leu Asp Pro Lys Glu His Ile Leu Ile Thr Thr Asp Pro Glu

165 170 175

Lys Gly Phe Leu Arg Lys Val Val Lys Glu Glu Gly Phe Arg Ser Leu

180 185 190

Glu Val Pro Pro Gly Val Gly Gly Arg Phe Ser Val Leu Thr Pro Val

195 200 205

Gly Leu Phe Ser Ala Met Ala Glu Gly Ile Asp Ile Glu Glu Leu His

210 215 220

Asp Gly Ala Arg Asp Ala Phe Glu Arg Cys Lys Lys Glu Asp Leu Phe

225 230 235 240

Glu Asn Pro Ala Ala Met Ile Ala Leu Thr His Tyr Leu Tyr Leu Lys

245 250 255

Arg Gly Lys Ser Ile Ser Val Met Met Ala Tyr Ser Asn Arg Met Thr

260 265 270

Tyr Leu Val Asp Trp Tyr Arg Gln Leu Trp Ala Glu Ser Leu Gly Lys

275 280 285

Arg Tyr Asn Leu Lys Gly Glu Glu Val Phe Thr Gly Gln Thr Pro Val

290 295 300

Lys Ala Ile Gly Ala Thr Asp Gln His Ser Gln Ile Gln Leu Tyr Asn

305 310 315 320

Glu Gly Pro Asn Asp Lys Val Ile Thr Phe Leu Arg Leu Glu Asn Phe

325 330 335

Asp Arg Glu Ile Ile Ile Pro Asp Thr Gly Arg Glu Glu Leu Lys Tyr

340 345 350

Leu Ala Arg Lys Arg Leu Ser Glu Leu Leu Leu Ala Glu Gln Thr Gly

355 360 365

Thr Glu Glu Ala Leu Arg Lys Asn Asp Arg Pro Asn Met Lys Val Ile

370 375 380

Phe Asp Arg Leu Thr Ser Tyr Asn Val Gly Gln Phe Phe Ala Tyr Tyr

385 390 395 400

Glu Ala Ala Thr Ala Phe Met Gly Tyr Leu Leu Glu Ile Asn Pro Phe

405 410 415

Asp Gln Pro Gly Val Glu Leu Gly Lys Lys Ile Thr Phe Ala Leu Met

420 425 430

Gly Arg Glu Gly Tyr Glu Tyr Glu Ile Lys Asp Arg Thr Lys Lys Val

435 440 445

Ile Ile Glu

450

<210> 64

<211> 1356

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности TN1

<400> 64

atgaaaaaga tggctttgaa atttgatttt tcaaatcttt ttgaaccgaa catctccggt 60

ggactgagag aggaagatct ggaaagcaca aaagaaaagg tgatagaggc gataaagaat 120

ttcactgaga acacaccgga ttttgccaga ctggacagaa aatggatcga ttcggtgaag 180

gaactcgagg agtgggtggt gaacttcgac acggtggtcg ttctgggaat tgggggatcc 240

ggtcttggaa accttgccct tcattattcg ttgagaccac tgaactggaa cgagatgtcg 300

agagaggaaa gaaacggtta tgcgagagtc ttcgtggtgg acaacgtaga tcccgatctc 360

atggcctccg tccttgatag gatagatctg aagacaacgc tgttcaacgt gatctcaaaa 420

tctggatcca cggctgaggt tatggcgaat tactcgatcg caaggggaat cctggaggct 480

aatggtctgg acccgaaaga acacatcctc atcacaacag atccagagaa gggctttttg 540

agaaaagtag tgaaagaaga gggcttcaga agtcttgagg tccctcccgg cgttggagga 600

aggttcagcg tgctgacgcc cgttggcctc ttctctgcca tggcggaggg tatcgacata 660

gaagaactcc acgacggtgc ccgggatgcg ttcgagagat gcaagaagga agacctgttc 720

gaaaatccag cggcgatgat cgccctcaca cactatctct atctgaagag aggaaagagc 780

atctccgtca tgatggccta ctccaacagg atgacctacc tcgtggactg gtacagacag 840

ctgtgggcag aaagtctggg aaagagatac aacctgaaag gagaggaggt cttcacgggt 900

cagaccccgg tgaaggcaat aggagccacc gatcagcact ctcagataca gctttacaac 960

gagggcccaa acgacaaagt gataacgttt ttgcggttgg aaaacttcga tagagagatc 1020

ataataccgg acaccggaag agaagagctc aaataccttg caagaaaaag actctctgaa 1080

cttctccttg cagaacagac aggaacagag gaagccctaa ggaaaaacga cagaccgaac 1140

atgaaggtga tcttcgacag actcacctct tacaatgtgg gccagttctt cgcttattat 1200

gaagccgcaa ctgctttcat ggggtatctc ctcgagatca acccgtttga tcagccgggt 1260

gtggaacttg gaaagaagat cacgtttgcc ctcatgggaa gggaaggtta cgaatacgaa 1320

ataaaagatc gcaccaagaa ggtgatcata gaatga 1356

<210> 65

<211> 221

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности FP3E

<400> 65

Met Met Val Lys Ile Ala Ala Ser Ile Leu Ala Cys Asp Leu Ala Arg

1 5 10 15

Leu Ala Asp Glu Val Lys Arg Val Glu Glu His Ile Asp Met Val His

20 25 30

Phe Asp Val Met Asp Gly His Phe Val Pro Asn Ile Ser Phe Gly Leu

35 40 45

Pro Val Leu Lys Ala Leu Arg Lys Glu Thr Ser Leu Pro Ile Ser Val

50 55 60

His Leu Met Ile Thr Asn Pro Glu Asp Tyr Val Asp Arg Phe Val Glu

65 70 75 80

Glu Gly Ala Asp Met Val Ala Val His Tyr Glu Thr Thr Pro His Leu

85 90 95

His Arg Ile Val His Arg Ile Lys Asp Leu Gly Ala Lys Ala Phe Val

100 105 110

Ala Leu Asn Pro His Thr Pro Val Phe Leu Leu Ser Glu Ile Ile Thr

115 120 125

Asp Val Asp Gly Val Leu Val Met Ser Val Asn Pro Gly Phe Ser Gly

130 135 140

Gln Arg Phe Ile Ala Arg Ser Leu Glu Lys Ile Arg Ser Leu Lys Lys

145 150 155 160

Met Ile Arg Asp Leu Gly Leu Glu Thr Glu Ile Met Val Asp Gly Gly

165 170 175

Val Asn Glu Glu Asn Ala Ser Ile Leu Ile Lys Asn Gly Ala Thr Ile

180 185 190

Leu Val Met Gly Tyr Gly Ile Phe Lys Asn Glu Asn Tyr Val Glu Leu

195 200 205

Val Arg Ser Ile Lys Gln Glu Arg Gly Glu Ser Ala Gly

210 215 220

<210> 66

<211> 666

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности FP3E

<400> 66

atgatggtaa agatcgccgc ttcaatcctt gcgtgtgatc ttgcaagact cgccgatgag 60

gtaaaaaggg tggaagaaca catagacatg gttcacttcg atgtcatgga tggacacttc 120

gttccgaaca tctcgttcgg attgcccgtt ctcaaagccc tgagaaaaga aaccagcctt 180

cctataagtg ttcatctgat gatcacaaat ccagaggact atgtggaccg tttcgtggaa 240

gagggagcgg acatggtggc ggtccactac gagacaacgc cgcaccttca caggatagtg 300

cacaggataa aggatctcgg ggcgaaggcg ttcgtcgccc tcaacccaca cacaccggtt 360

tttctcctgt ctgagatcat aacggatgtg gatggcgtac tcgtgatgag tgtgaacccg 420

ggcttttctg gtcagagatt cattgcaagg agtctggaaa aaataaggag tctgaagaag 480

atgataaggg atctgggact cgaaacggag atcatggtcg atggtggtgt caacgaagaa 540

aacgcttcta tcttaataaa gaacggtgcg acgatccttg taatggggta cggtatcttc 600

aaaaacgaaa actatgtgga actggtgaga tccatcaagc aggaaagagg ggaatctgct 660

ggctga 666

<210> 67

<211> 441

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотные последовательности TN2

<400> 67

Met Ile Gly Tyr Gln Ile Tyr Val Arg Ser Phe Arg Asp Gly Asn Phe

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asp Phe Lys Gly Leu Lys Gly Ala Ile Ser Tyr Leu

20 25 30

Lys Glu Leu Gly Val Asp Phe Val Trp Leu Met Pro Val Phe Ser Ser

35 40 45

Ile Ser Phe His Gly Tyr Asp Val Val Asp Phe Tyr Ser Phe Lys Ala

50 55 60

Glu Tyr Gly Asp Glu Lys Asp Phe Arg Glu Met Ile Glu Ala Phe His

65 70 75 80

Asp Asn Gly Ile Lys Val Val Leu Asp Leu Pro Ile His His Thr Gly

85 90 95

Phe Leu His Val Trp Phe Gln Lys Ala Leu Lys Gly Asp Pro His Tyr

100 105 110

Arg Asp Tyr Tyr Val Trp Ala Ser Glu Lys Thr Asp Leu Asp Glu Arg

115 120 125

Arg Glu Trp Asp Asn Glu Arg Ile Trp His Pro Leu Glu Asp Gly Arg

130 135 140

Phe Tyr Arg Gly Leu Phe Gly Pro Leu Ser Pro Asp Leu Asn Tyr Asp

145 150 155 160

Asn Pro Gln Val Phe Glu Glu Met Lys Lys Val Val Tyr His Leu Leu

165 170 175

Glu Met Gly Val Asp Gly Phe Arg Phe Asp Ala Ala Lys His Met Arg

180 185 190

Asp Thr Leu Glu Gln Asn Val Arg Phe Trp Arg Tyr Phe Leu Ser Asp

195 200 205

Ile Glu Gly Ile Phe Leu Ala Glu Ile Trp Ala Glu Ser Lys Val Val

210 215 220

Asp Glu His Gly Arg Ile Phe Gly Tyr Met Leu Asn Phe Asp Thr Ser

225 230 235 240

His Cys Ile Lys Glu Ala Val Trp Lys Glu Asn Phe Lys Val Leu Ile

245 250 255

Glu Ser Ile Glu Arg Ala Leu Val Gly Lys Asp Tyr Leu Pro Val Asn

260 265 270

Phe Thr Ser Asn His Asp Met Ser Arg Leu Ala Ser Phe Glu Gly Gly

275 280 285

Leu Ser Glu Glu Lys Val Lys Leu Ser Leu Ser Ile Leu Phe Thr Leu

290 295 300

Pro Gly Val Pro Leu Ile Phe Tyr Gly Asp Glu Leu Gly Met Lys Gly

305 310 315 320

Ile Tyr Arg Lys Pro Asn Thr Glu Val Val Leu Asp Pro Phe Pro Trp

325 330 335

Ser Glu Asn Met Cys Val Glu Gly Gln Thr Phe Trp Lys Trp Pro Ala

340 345 350

Tyr Asn Asp Pro Phe Ser Gly Val Ser Val Glu Tyr Gln Arg Arg Asn

355 360 365

Arg Asp Ser Ile Leu Ser His Thr Met Arg Trp Ala Gly Phe Arg Gly

370 375 380

Glu Asn His Trp Leu Asp Arg Ala Asn Ile Glu Phe Leu Cys Lys Glu

385 390 395 400

Glu Lys Leu Leu Val Tyr Arg Leu Val Asp Glu Gly Arg Ser Leu Lys

405 410 415

Val Ile His Asn Leu Ser Asn Gly Glu Met Val Phe Glu Gly Val Arg

420 425 430

Val Gln Pro Tyr Ser Thr Glu Val Val

435 440

<210> 68

<211> 1326

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотидные последовательности TN2

<400> 68