Локусы fad3 для выполнения операций и соответствующие связывающиеся со специфическими сайтами-мишенями белки, способные к вызову направленных разрывов - RU2015112578A

Реферат

1. Способ модификации генома клетки, включающий: расщепление, сайт-специфическим образом, сайта-мишени в гене FAD3 в клетке с созданием, таким образом, разрыва в гене FAD3; причем ген FAD3 подвергается модификации после разрыва.2. Способ по п. 1, причем способ, кроме того, включает интеграцию в разрыв представляющей интерес последовательности нуклеиновой кислоты.3. Способ по п. 1 или 2, причем геном FAD3 является ген FAD3A, FAD3A′, FAD3A′′, FAD3C, FAD3C′′ и/или FAD3C′.4. Способ по п. 1 или 2, причем расщепление сайт-специфическим образом включает введение составного белка, включающего ДНК-связывающий домен и расщепляющий домен или полдомена для расщепления, в клетку или полинуклеотида, кодирующего составной белок, причем составной белок связывается со специфичностью в отношении сайта-мишени и расщепляет в и вблизи сайте(а)-мишени с созданием таким образом разрыва.5. Способ по п. 4, причем ДНК-связывающий домен выбирают из группы, состоящей из ДНК-связывающего домена мегануклеазы, ДНК-связывающего домена «лейциновая молния», ДНК-связывающего домена подобного активатору транскрипции белка (TAL), РНК-направляемой системы CRISPR-Cas9, рекомбиназы, ДНК-связывающего домена белка с цинковыми пальцами и химерных комбинаций любых из вышеизложенных доменов.6. Способ по п. 4, причем расщепляющий домен или полдомена для расщепления выбирают из группы, состоящей из полдомена для расщепления из эндонуклеазы рестрикции типа IIS, полдомена для расщепления из эндонуклеазы FokI, полдомена для расщепления из эндонуклеазы StsI и хоминг-нуклеазы.7. Способ по п. 4, причем составным белком является нуклеаза на основе цинковых пальцев.8. Способ по п. 7, причем нуклеаза на основе цинковых пальцев включает от трех до шести доменов «цинковые пальцы», при этом