Варианты липолитического фермента - RU2009124454A

Реферат

1. Способ получения полипептида, включающий: ! а) отбор такого родительского полипептида, который обладает активностью липолитического фермента и аминокислотной последовательностью, по меньшей мере, на 30% идентичной последовательности SEQ ID NO:1; ! b) отбор, по меньшей мере, одного аминокислотного остатка в последовательности, соответствующего любому из остатков 1, 13, 25, 38-51, 53-55, 58, 69-79, 91, 92, 96, 97, 99, 103, 104-110, 113, 132-168, 173, 187-193, 197-205, 215, 223-231, 242, 244, 256, 259, 261-298, 303, 305, 308-313 или 315 последовательности SEQ ID NO:1; ! c) изменение аминокислотной последовательности, где изменение включает замену или делецию выбранного остатка или вставку, по меньшей мере, одного остатка, примыкающего к выбранному остатку; !d) получение измененного полипептида с измененной аминокислотной последовательностью; ! e) определение специфической активности липолитического фермента, липолитической активности при щелочных значениях pH и/или энантиоселективности измененного пептида; и ! f) отбор измененного полипептида, обладающего более высокой специфической активностью липолитического фермента, более высокой активностью при щелочных значениях pH и/или более высокой энантиоселективностью, чем родительский полипептид. ! 2. Способ по п.1, где отобранный остаток соответствует любому из остатков: 1, 13, 25, 38, 42, 74, 140, 143, 147, 164, 168, 190, 199, 215, 223, 242, 244, 256, 265, 277, 280, 281, 283, 284, 285, 292, 303, 315, 135-160 или 267-295 последовательности SEQ ID NO:1. ! 3. Способ по п.1 или 2, где изменение включает замену отобранного остатка остатком, найденным в соответствующем положении любой из последовательностей SEQ ID NO:1-8. ! 4. Способ по п.1 или 2, где родительский полипептид выбирают из последовательностей SEQ ID NO:1-8. ! 5. Полипептид, ко