Комбинация термостабильных биокатализаторов для синтеза нуклеозидов - RU2012125367A

Реферат

1. Рекомбинантный экспрессионный вектор, включающий последовательность, кодирующую фосфорилазу пуриновых нуклеозидов (ПНФаза, ЕС 2.4.2.1) одну, или совместно с последовательностью, кодирующей уридинфосфорилазу (УФаза, ЕС 2.4.2.3); при этом каждая из последовательностей функционально связана с одной или более регуляторной последовательностью, которая контролирует продукцию указанной фосфорилазы в подходящем хозяине; при этом указанные последовательности происходят из архей класса Thermoprotei и характеризуются тем, что указанная ПНФаза происходит из Sulfolobus solfataricus (SEQ ID NO 7.), а указанная УФаза происходит из Aeropyrum pernix (SEQ ID NO. 8), а указанный хозяин представляет собой Escherichia coli.2. Рекомбинантный экспрессионный вектор по п.1, отличающийся тем, что указанная клетка-хозяин представляет собой бактериальный штамм BL21 Е.coli.3. Клетка-хозяин Е.coli, которая содержит рекомбинантный экспрессионный вектор по п.1.4. Лизат, полученный посредством лизирования клетки-хозяина по п.3.5. Способ трансгликозилирования между нуклеиновым основанием, которое связано с сахаром, представляющим собой рибозу или дезоксирибозу, через бета-гликозидную связь и нуклеиновым основанием или модифицированным нуклеиновым основанием в присутствии фосфат-ионов, отличающийся тем, что указанный способ включает применение уридинфосфорилазы (УФазы) из Aeropyrum pernix (SEQ ID NO 7.), одной, или совместно с фосфорилазой пуриновых нуклеозидов (ПНФазы) из Sulfolobus solfataricus (SEQ ID NO 8), причем указанные фосфорилазы продуцируются с применением рекомбинантного экспрессионного вектора по п.1 или 2.6. Способ трансгликозилирования по п.5, по которому УФаза из Aeropyrum pernix и ПНФаза из Sulfolobus solfataricus обеспечива