Микроорганизмы для получения путресцина или орнитина и способ получения путресцина или орнитина с использованием указанных микроорганизмов - RU2018104512A
Код документа: RU2018104512A
Формула
1. Модифицированный микроорганизм рода Corynebacterium, продуцирующий путресцин или орнитин, в который введены активности N-ацетилглутаматсинтазы из Е. coli и ацетилорнитиндезацетилазы из Е. coli.
2. Модифицированный микроорганизм по п. 1, где N-ацетилглутаматсинтаза из Е. coli состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1.
3. Модифицированный микроорганизм по п. 1, где ацетилорнитиндезацетилаза из Е. coli состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 3.
4. Модифицированный микроорганизм по п. 1, где микроорганизм рода Corynebacterium представляет собой Corynebacterium glutamicum.
5. Модифицированный микроорганизм по п. 1, где активность фосфотрансацетилазного и ацетаткиназного оперона (оперона pta-ackA) дополнительно усилена по сравнению с его эндогенной активностью.
6. Модифицированный микроорганизм по п. 5, где фосфотрансацетилазный и ацетаткиназный оперон состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 5 или SEQ ID NO: 7.
7. Модифицированный микроорганизм по п. 1, в который дополнительно введена активность ацетил-КоА-синтетазы (acs) из Е. coli.
8. Модифицированный микроорганизм по п. 7, где ацетил-КоА-синтетаза состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 9.
9. Модифицированный микроорганизм по п. 1, в который дополнительно введена активность орнитиндекарбоксилазы (ODC).
10. Модифицированный микроорганизм по п. 1, где активность (1) орнитинкарбамоилтрансферазы (ArgF), (2) экспортера глутамата или (3) орнитинкарбамоилтрансферазы и экспортера глутамата дополнительно ослаблена по сравнению с их эндогенной активностью.
11. Модифицированный микроорганизм по п. 1, где активность по меньшей мере одного, выбранного из группы, состоящей из ацетил-гамма-глутамилфосфатредуктазы (ArgC), ацетилглутаматсинтазы или орнитинацетилтрансферазы (ArgJ), ацетилглутаматкиназы (ArgB) и ацетилорнитинаминотрансферазы (ArgD), дополнительно усилена по сравнению с их эндогенной активностью.
12. Модифицированный микроорганизм по п. 1, где активность ацетилтрансферазы дополнительно ослаблена по сравнению с ее эндогенной активностью.
13. Модифицированный микроорганизм по п. 12, где ацетилтрансфераза состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 30 или SEQ ID NO: 31.
14. Модифицированный микроорганизм по п. 1, где активность экспортера путресцина дополнительно усилена по сравнению с его эндогенной активностью.
15. Модифицированный микроорганизм по п. 14, где экспортер путресцина состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 26 или SEQ ID NO: 28.
16. Способ получения путресцина или орнитина, включающий
(1) культивирование модифицированного микроорганизма рода Corynebacterium по любому из пп. 1-15 в среде; и
(2) выделение путресцина или орнитина из культивированного микроорганизма или среды.
17. Способ по п. 16, где микроорганизм рода Corynebacterium представляет собой Corynebacterium glutamicum.
