Биотехнологическое получение 3-гидроксиизомасляной кислоты - RU2014127326A

Реферат

1. Способ, содержащий следующие стадии:a) обеспечение изомасляной кислоты,b) введение изомасляной кислоты в контакт с комбинацией изобутират-киназы и фосфотрансизобутирилазы и/илиизобутирил-Коэнзим А-синтазой/лигазой и/илиизобутират-Коэнзим А-трансферазой,c) введение продукта со стадии b) в контакт с изобутирил-Коэнзим А-дегидрогеназой,d) введение продукта со стадии c) в контакт с метакрилил-Коэнзим А-гидратазой, иe) гидролиз продукта со стадии d) с образованием 3-гидроксиизомасляной кислоты,где по меньшей мере один из ферментов, применяемых на стадиях b), c) и d) из группы изобутират-киназы, фосфотрансизобутирилазы, изобутирил-Коэнзим А-синтазы/лигазы и изобутират-Коэнзим А-трансферазы, предпочтительно все, обеспечивается в форме клетки, которая, по сравнению с ее диким типом, имеет уменьшенную активность 3-гидроксиизомасляной кислоты-дегидрогеназы или ее варианта.2. Способ по п. 1, где изомасляная кислота образуется посредством введения изобутана в контакт с монооксигеназой, предпочтительно алкангидроксилазой, более предпочтительно AlkBGT-типа или ее вариантом.3. Способ по п. 1, где гидролиз на стадии d) достигается посредством введения продукта со стадии d) в контакт с 3-гидроксиизобутирил-Коэнзим А-гидролазой.4. Способ по п. 1, где клетка содержит как изобутирил-Коэнзим А-дегидрогеназу со стадии с), так и метакрилил-Коэнзим А-гидратазу со стадии d), а такжекомбинацию изобутират-киназы и фосфотрансизобутирилазы и/илиизобутирил-Коэнзим А-синтазу/лигазу и/илиизобутират-Коэнзим А-трансферазу.5. Способ по п. 1, где клетка дополнительно содержит алкангидроксилазу, предпочтительно AlkBGT-типа или ее вариант.6. Способ по п. 1, где 3-гидроксиизомасляной кислоты-дегидрогеназа представл