Способ культивирования одиночной в-клетки - RU2012153785A

Реферат

1. Способ отбора В-клетки, включающий следующие этапы:а) совместное культивирование каждой В-клетки из популяции В-клеток, которые были сохранены как одиночные клетки, с фидерными клетками,б) выбор В-клеточного клона, пролиферирующего и секретирующего антитело на этапе а).2. Способ получения антитела, связывающегося с антигеном-мишенью, включающий следующие этапы:а) совместное культивирование каждой В-клетки из популяции В-клеток, которые были сохранены как одиночные клетки в отдельных контейнерах, в присутствии фидерных клеток и фидерной смеси,б) выбор В-клеточного клона, продуцирующего антитело, специфически связывающееся с антигеном-мишенью,в) культивирование клетки, которая содержит нуклеиновую кислоту, которая кодирует антитело, которое продуцируется В-клеточным клоном, выбранным в этапе б), или его гуманизированный вариант, и выделение этого антитела из клетки или культурального супернатанта и тем самым получение антитела.3. Способ по п.1 или 2, также включающий этап инкубации популяции В-клеток в среде для совместного культивирования перед сохранением одиночной клетки.4. Способ по п.3, который характеризуется тем, что инкубация осуществляется при температуре 37°C в течение примерно одного часа.5. Способ по п.1 или 2, также включающий этап центрифугирования одиночных сохраненных В-клеток перед совместным культивированием.6. Способ по п.5, который характеризуется тем, что центрифугирование осуществляется в течение 5 мин со скоростью примерно 300 g.7. Способ по п.1 или 2, который характеризуется тем, что популяцию В-клеток выделяют путем центрифугирования в градиенте плотности.8. Способ по п.1 или 2, который характери�