Композиции и способы, относящиеся к культивированию нейрональных стволовых клеток со стромальными клетками костного мозга - RU2006132068A

Реферат

1. Композиция, содержащая (a) выделенную стромальную клетку костного мозга (BMSC) и (b) культуральную среду с заданным химическим составом, содержащую среду для роста нейрональной стволовой клетки (NSC) и секретируемые указанной BMSC факторы.

2. Композиция по п.1, где указанная культуральная среда не содержит экзогенного фактора ингибирования лейкемии (LIF).

3. Композиция по п.1, где указанные факторы выбраны из группы, состоящей из факторов роста, трофических факторов и цитокинов.

4. Композиция по п.1, где указанные факторы выбраны из группы, состоящей из LIF, полученного из мозга нейротрофического фактора (BDNF), рецептора эпидермального фактора роста (EGF), основного фактора роста фибробластов (bFGF), FGF-6, полученного из глии нейротрофического фактора (GDNF), гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (GCSF), фактора роста гепатоцитов (HGF), IFN-γ, белка, связывающего инсулиноподобный фактор роста (IGFBP-2), IGFBP-6, IL-1ra, IL-6, IL-8, моноцитарного хемотаксического белка (MCP-1), макрофагального колониестимулирующего фактора (M-CSF), нейротрофических факторов (NT3), тканевого ингибитора металлопротеиназ (TIMP-1), TIMP-2, фактора некроза опухолей (TNF-β), фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), VEGF-D, рецептора урокиназного активатора плазминогена (uPAR), участвующего в остеогенезе белка-4 (BMP4), IL1-a, IL-3, лептина, фактора стволовых клеток (SCF), фактора из стромальных клеток-1 (SDF-1), фактора роста-BB из тромбоцитов (PDGFBB), трансформирующих факторов роста-бета (TGFβ-1) и TGFβ-3.

5. Композиция по п.1, дополнительно содержащая выделенную NSC.

6. Композиция по п.5, где указанная NSC физически контактирует с указанной BMSC.

7. Композиция по п.5, где указанная NSC физически не контактирует с указанной BMSC.

8. Композиция по п.5, где указанную NSC получают из центральной нервной системы человека.

9. Композиция по п.1, где указанную BMSC получают из [организма] человека.

10. Композиция по п.5, где в указанную NSC вводят экзогенный генетический материал.

11. Композиция по п.1, где в указанную BMSC вводят экзогенный генетический материал.

12. Кондиционированная стромальными клетками костного мозга среда (BMSC-CM), которая содержит культуральную среду с заданным химическим составом, включающую в себя среду для роста нейрональной стволовой клетки (NSC) и факторы, секретируемые выделенной BMSC.

13. BMSC-CM по п.12, где указанная BMSC-CM не содержит экзогенный LIF.

14. BMSC-CM по п.12, где указанные факторы выбраны из группы, состоящей из факторов роста, трофических факторов и цитокинов.

15. BMSC-CM по п.12, где указанные факторы выбраны из группы, состоящей из LIF, полученного из мозга нейротрофического фактора (BDNF), рецептора эпидермального фактора роста (EGF), основного фактора роста фибробластов (bFGF), FGF-6, полученного из глии нейротрофического фактора (GDNF), гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (GCSF), фактора роста гепатоцитов (HGF), IFN-γ, белка, связывающего инсулиноподобный фактор роста (IGFBP-2), IGFBP-6, IL-1ra, IL-6, IL-8, моноцитарного хемотаксического белка (MCP-1), макрофагального колониестимулирующего фактора (M-CSF), нейротрофических факторов (NT3), тканевого ингибитора металлопротеиназ (TIMP-1), TIMP-2, фактора некроза опухолей (TNF-β), фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), VEGF-D, рецептора урокиназного активатора плазминогена (uPAR), участвующего в остеогенезе белка-4 (BMP4), IL1-a, IL-3, лептина, фактора стволовых клеток (SCF), фактора из стромальных клеток-1 (SDF-1), фактора роста-BB из тромбоцитов (PDGFBB), трансформирующих факторов роста-бета (TGFβ-1) и TGFβ-3.

16. Способ модуляции экспрессии молекул главного комплекса гистосовместимости (MHC) на выделенной NSC, где указанный способ предусматривает совместное культивирование клеток, включающих в себя выделенную BMSC и выделенную NSC.

17. Способ по п.16, где указанные клетки совместно культивируют в отсутствие экзогенного LIF.

18. Способ по п.16, где указанная NSC физически контактирует с указанной BMSC.

19. Способ по п.16, где указанная NSC физически не контактирует с указанной BMSC.

20. Способ по п.16, где указанную NSC получают из центральной нервной системы человека.

21. Способ по п.16, где указанную BMSC получают из [организма] человека.

22. Способ по п.16, где в указанную NSC вводят экзогенный генетический материал.

23. Способ по п.16, где в указанную BMSC вводят экзогенный генетический материал.

24. Способ модуляции экспрессии молекул MHC на выделенной NSC, где указанный способ предусматривает культивирование указанной NSC с кондиционированной стромальными клетками костного мозга средой (BMSC-CM), причем указанная BMSC-CM содержит среду для роста NSC и секретируемые указанной BMSC факторы.

25. Способ по п.24, где указанная BMSC-CM не содержит экзогенный LIF.

26. Способ по п.24, где указанная BMSC-CM практически не содержит BMSC.

27. Способ по п.24, где указанные факторы выбраны из группы, состоящей из факторов роста, трофических факторов и цитокинов.

28. Способ по п.24, где указанные факторы выбраны из группы, состоящей из LIF, полученного из мозга нейротрофического фактора (BDNF), рецептора эпидермального фактора роста (EGF), основного фактора роста фибробластов (bFGF), FGF-6, полученного из глии нейротрофического фактора (GDNF), гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (GCSF), фактора роста гепатоцитов (HGF), IFN-γ, белка, связывающего инсулиноподобный фактор роста (IGFBP-2), IGFBP-6, IL-1ra, IL-6, IL-8, моноцитарного хемотаксического белка (MCP-1), макрофагального колониестимулирующего фактора (M-CSF), нейротрофических факторов (NT3), тканевого ингибитора металлопротеиназ (TIMP-1), TIMP-2, фактора некроза опухолей (TNF-β), фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), VEGF-D, рецептора урокиназного активатора плазминогена (uPAR), участвующего в остеогенезе белка-4 (BMP4), IL1-a, IL-3, лептина, фактора стволовых клеток (SCF), фактора из стромальных клеток-1 (SDF-1), фактора роста-BB из тромбоцитов (PDGFBB), трансформирующих факторов роста-бета (TGFβ-1) и TGFβ-3.

29. Способ по п.24, где указанную NSC получают из центральной нервной системы человека.

30. Способ по п.24, где в указанную NSC вводят экзогенный генетический материал.

31. Выделенная NSC, получаемая способом совместного культивирования выделенных BMSC с выделенной NSC.

32. Выделенная NSC по п.31, где указанная NSC проявляет сниженную экспрессию молекул MHC класса I.

33. Выделенная NSC по п.31, где указанная NSC обладает базовым уровнем молекул MHC класса II.

34. Выделенная NSC по п.31, где указанную NSC получают из центральной нервной системы человека.

35. Выделенная NSC по п.31, где в указанную NSC вводят экзогенный генетический материал.

36. Выделенная NSC, получаемая культивированием выделенной NSC в BMSC-CM, где указанная BMSC-CM содержит культуральную среду с заданным химическим составом, включающую в себя среду для роста NSC и факторы, секретируемые выделенной BMSC.

37. Выделенная NSC по п.36, где указанная NSC проявляет сниженную экспрессию молекул MHC класса I.

38. Выделенная NSC по п.36, где указанная NSC обладает базовым уровнем молекул MHC класса II.

39. Выделенная NSC по п.36, где указанную NSC получают из центральной нервной системы человека.

40. Выделенная NSC по п.36, где в указанную NSC вводят экзогенный генетический материал.

41. Устройство для культивирования нейрональных клеток, содержащее

(a) выделенную NSC;

(b) выделенную BMSC;

(c) среду для роста NSC, где указанная среда для роста NSC содержит факторы, секретируемые указанной выделенной BMSC; и

(d) средства для предотвращения физического контакта между указанной NSC и указанной BMSC.

42. Устройство по п.41, дополнительно содержащее фильтр или мембрану, которая предотвращает физический контакт между указанной NSC и указанной BMSC.

43. Устройство по п.42, где указанный фильтр или мембрана имеют поры, позволяющие секретируемым указанной BMSC факторам проходить через указанный фильтр или мембрану.