Обогащенная питательная среда для выращивания клеток, извлеченных из ткани пуповины человека - RU2018112452A

1. Культуральная среда для выращивания субстратзависимых клеток, содержащая:

аминокислоты L-аргинин; L-цистин; L-цистеин; L-глютамин; глицин; L-гистидин; L-изолейцин; L-лейцин; L-лизин; L-метионин; L-фенилаланин; L-серин; L-треонин; L-триптофан; L-тирозин; L-валин; L-аланин; L-аспарагин, L-аспарагиновая кислота; L-глютаминовая кислота; L-пролин; и L-таурин;

витамины D-кальций пантотенат; холина хлорид; фолиевая кислота; I-инозитол; ниацинамид; пиридоксаль; рибофлавин; тиамин; d-биотин; пиридоксин; и витамин B₁₂ (цианокобаламин);

соли кальция хлорид; калия хлорид; магнезии сульфат; натрия хлорид; и одна или несколько солей натрия фосфата;

нуклеозиды тимидин, аденозин, цитидин, уридин и гуанозин;

инсулин; трансферрин; липоевая кислота/тиоктовая кислота; этаноламин; натрия селенит; и один или несколько источников энергии.

2. Культуральная среда по п. 1, отличающаяся тем, что культуральная среда содержит одно или несколько из:

от приблизительно 0,006 г/л до приблизительно 0,1 г/л каждой из аминокислот;

от приблительно 5×10^-6 г/л до приблизительно 0,015 г/л каждого из витаминов;

от по меньшей мере приблизительно 0,0001 г/л до по меньшей мере приблизительно 0,02 г/л каждого из нуклеотидов.

3. Культуральная среда по п. 1, отличающаяся тем, что культуральная среда дополнительно содержит один или несколько дополнительных микроэлементов.

4. Культуральная среда по п. 3, отличающаяся тем, что среда дополнительно содержит от приблизительно 5×10^-4 г/л каждого из микроэлементов.

5. Культуральная среда по п. 3 или 4, отличающаяся тем, что микроэлементы представляют собой нитрат железа, сульфат меди и сульфат цинка.

6. Культуральная среда по п. 1, отличающаяся тем, что среда содержит железа нитрат (9H₂O), меди (II) сульфат пентагидрат (CuSO₄.5H₂O) и цинка сульфат, гептагидрат (ZnSO₄.7H₂O).

7. Культуральная среда по п. 1, отличающаяся тем, что среда дополнительно содержит путресцин, стабилизатор и/или противовспенивающий агент.

8. Культуральная среда по п. 1, отличающаяся тем, что источником энергии является глюкоза или натрия пируват.

9. Культуральная среда по п. 8, отличающаяся тем, что среда содержит по меньшей мере 0,8 г/л D-глюкозы и по меньшей мере 0,1 г/л натрия пирувата.

10. Культуральная среда по п. 1, отличающаяся тем, что среда содержит:

по меньшей мере 0,05 г/л L-аргинина; по меньшей мере 0,02 г/л L-цистина; по меньшей мере 0,2 г/л L-глютамина; по меньшей мере 0,01 г/л глицина; по меньшей мере 0,02 г/л L-гистидина; по меньшей мере 0,09 г/л L-изолейцина; по меньшей мере 0,09 г/л L-лейцина; по меньшей мере 0,09 г/л L-лизина; по меньшей мере 0,02 г/л L-метионина; по меньшей мере 0,05 г/л L-фенилаланина; по меньшей мере 0,03 г/л L-серина; по меньшей мере 0,08 г/л L-треонина; по меньшей мере 0,009 г/л L-триптофана; по меньшей мере 0,08 г/л L-тирозина; по меньшей мере 0,08 г/л L-валина; по меньшей мере 0,005 г/л L-цистеина; по меньшей мере 0,0004 г/л L-аланина; по меньшей мере 0,01 г/л L-аспарагина; по меньшей мере 0,006 г/л L-аспарагиновой кислоты; по меньшей мере 0,03 г/л L-глютаминовой кислоты; по меньшей мере 0,005 г/л L-пролина; и по меньшей мере 0,0003 г/л L-таурина;

от 5×10^-6 г/л до 0,015 г/л каждого из витаминов;

по меньшей мере 0,05 г/л кальция хлорида, обезвоженного, по меньшей мере 0,1 г/л калия хлорида; по меньшей мере 0,2 г/л магнезии сульфата; по меньшей мере 0,08 г/л натрия фосфата, одноосновного, H₂O и по меньшей мере 0,0005 г/л натрия фосфата двухосновного гептагидрата (Na₂HPO₄.7H₂O);

по меньшей мере 0,0001 г/л тимидина и по меньшей мере 0,005 г/л каждого из аденозина, цитидина, уридина и гуанозина; и

по меньшей мере 0,003 г/л инсулина; по меньшей мере 0,05 г/л трансферрина; по меньшей мере 5×10^-6 г/л липоевой кислоты/тиоктовой кислоты; по меньшей мере 0,05 г/л этаноламина и по меньшей мере 0,00004 г/л натрия селенита.

11. Культуральная среда по п. 1, отличающаяся тем, что субстратзависимые клетки выбраны из группы, состоящей из клеток, полученных из тканей пуповины, мезенхимальных стволовых клеток, стволовых клеток, полученных из костного мозга, клеток, полученных из плацентарной ткани, адгерентных клеток, полученных не из костомозговых тканей, клеток, полученных из дентальной пульпы зубов, и клеток, полученных из амниотической жидкости.

12. Культуральная среда по п. 11, отличающаяся тем, что субстратзависимыми клетками являются клетки, полученные из тканей пуповины.

13. Культуральная среда по п. 12, отличающаяся тем, что клетки, полученные из тканей пуповины, выделены из ткани пуповины человека по существу свободной от крови, способны к самообновлению и размножению в культуре, обладают потенциалом к дифференцированию, экспрессируют CD13, CD90 и HLA-ABC, и не экспрессируют CD34, CD117 и HLA-DR.

14. Культуральная среда по п. 1, отличающаяся тем, что среда дополнительно содержит альбумин.

15. Культуральная среда по п. 14, отличающаяся тем, что альбумином является бычий сывороточный альбумин.

16. Клеточная культуральная среда по п. 1, отличающаяся тем, что культуральная среда не содержит привнесенных извне факторов, стимулирующих рост недифференцированных клеток.

17. Клеточная культуральная среда по п. 1, отличающаяся тем, что культуральная среда не содержит содержат фактор роста фибробластов.