Способ получения гипоаллергенного лишайникового масла - RU2092168C1

Чертежи

Описание

Изобретение касается способа получения гипоаллергенных лишайниковых масел и самих масел.

Известен способ получения гипоаллергенных лишайниковых масел путем удаления из них аллергенных веществ хроматографией, экстракцией растворителями, разделением противотоком и отделением на мембране, с последующим каталитическим гидрированием и/или щелочной обработкой. Удаленными таким образом аллергенами являются альдегиды (EP N 202647, кл. C 12 N B/02, 1986).

Способ согласно изобретению заключается в удалении некоторых аллергенных веществ, например этилгематоммата 1, этилхлоргематоммата 2, атранорина 3, хлорантранорина 4, атранола 5, хлоратранола 6

Способ заключается во взаимодействии исходного (то есть необработанного) лишайникового масла, его твердого экстракта (конкрет) или абсолютизированной формы (абсолю) с одной (по меньшей мере) аминокислотой при гомогенных условиях в растворе, предпочтительно в спиртовом растворе, и выделении нерастворимых аллергенных веществ.

Лишайниковые масла, полученные экстракцией растворителями из лишайников, включают, в частности, масло "дубового лишайника" (Evernia prunastri L.) и масло "древесного лишайника" (Evernia furfuracea L.).

Известно (S, Ohta et al. Chem. Pharm. Bull. 28 (1980), 1917), что альдегиды в водных и органических растворах могут быть обработаны водными растворами натриевой соли некоторых аминокислот с целью выделения альдегидов в виде реакционных продуктов-оснований Шиффа. Однако операция выделения в данном случае затруднена, потому что при данных условиях образуются эмульсии, которые могут быть разделены лишь с большими трудностями (при использовании обычных средств для предотвращения и/или разрушения таких эмульсий).

Новый способ свободен от таких недостатков, так как исходный материал растворяется только в органических растворителях, а аминокислота только в водных растворах. Кроме того, было найдено, что новый способ органолептически не ухудшает лишайниковое масло, другими словами никакие органолептически активные соединения не удаляются из лишайникового масла.

В контексте настоящего изобретения концентрации указанных выше альдегидов 1-6 считаются аллергенными при значениях, указанных в табл.1, и считаются гипоаллергенными при уровнях ниже указанных в табл.1.

Предпочтительные аминокислоты, используемые в настоящем способе, представлены общей формулой:

Преимущественно используются природные аминокислоты (или соответствующие, идентичные природным). Кроме того, предпочтительными являются аминокислоты, у которых изоэлектрическая точка P₁ находится в пределах 5,5-10, например, лизин, лейцин, фенилаланин, а также аланин, глицин, изолейцин и другие.

Предпочтительными являются природные аминокислоты.

Условия монофоазной среды достигаются проведением процесса, преимущественно в чистом (≥95%) спирте, например алканольном растворителе, таком как метанол, этанол, изопропанол и другие.

Концентрация аминокислот в воде: лучше концентрированные, например 30 - 80% (мас./мас.).

Количество используемой аминокислоты 0,02 0,3 г, предпочтительно 0,04 - 0,1 г на 1 г лишайникового масла.

Когда используют аминокислоту в виде моногалоидводорода (например, хлорида), добавляют один моль-эквивалент основания, например, NaOH или KOH.

pH реакционной среды находится в пределах, зависящих от P₁.

Реакцию проводят при температуре 20 80^oC, преимущественно при 70 - 80^oC. При практическом осуществлении способа предпочитают горячий органический раствор исходного лишайникового масла добавляют к горячему раствору аминокислоты.

Рекомендуемые концентрации исходных материалов в спиртовых растворах:
из конкрет: 5 40% предпочтительно 10 15% (мас./мас.) в спирте;
из абсолю: 5 40% предпочтительно 10 15% (мас./мас.) в спирте.

Полученный продукт выделяют простой фильтрацией от избытка аминокислот(ы) и основания Шиффа.

Ниже приведены примеры конкретного осуществления способа.

Измерение аллергенности.

Присутствие или отсутствие аллергии в каждом случае определялось условно, известными способами, то есть:
MT (Maximization Test), используя морских свинок;
OET (Open Epicutaneous Test), используя морских свинок; и
RIPT (Repeated Insult Patch Test) на людях.

Полученные опытные данные подтверждают данные табл.1.

Концентрации продуктов 1, 2, 5 и 6 измеряются газовохроматографическим анализом (ГХ), например, с внутренним образцом при следующих условиях:
неподвижная фаза: (силиконовая основа) CPSIL 5 CB;
газ-носитель: гелий, 2 мл/мин;
программа: 100/270^oC/мин.

Концентрации альдегидов 3 и 4 измеряются хроматографией с высоким выходом с внешним стандартом при следующих условиях:
неподвижная фаза: RP18 (обратная фаза), размер частиц 7 мкм;
колонка: 250 х 4,6 мм;
подвижная фаза A: H₂O, pH 2,8 (H₃PO₄);
подвижная фаза B: ацетонитрил;
градиент 30 мин от 80% A до 5% A, 10 мин 5% A;
определение УФ при 260 нм.

Пример 1. Получение гипоаллергенного абсолютизированного "дубового лишайникового" масла из коммерчески доступного "дубового лишайникового" абсолютизированного масла
а). В трехгорлую круглодонную колбу загружают этанол 96^o (1,24 л) и при комнатной температуре при перемешивании добавляют раствор лизингидрохлорида (6,25 г) и один моль-эквивалент гидроксида натрия (1,4 г) в 10 мл дистиллированной воды, а затем добавляют лейцин (6,25 г) в этаноле 96^o (625 мл). После дополнительного перемешивания при комнатной температуре в течение 30 мин добавляют раствор расплавленного абсолитизированного "дубового лишайникового" масла (0250 г, т.пл. около 70^oC) в этаноле 96^o (625 мл) и общую смесь нагревают с обратным холодильником в течение часа. После охлаждения до комнатной температуры и дальнейшего перемешивания в течение 30 мин реакционную смесь фильтруют при комнатной температуре через воронку Бюхнера (на бумажном фильтре). Этанол удаляют дистилляцией при пониженном давлении (с водяной баней), не превышая температуру 65^oC. В табл.2 приведены результаты аналитического определения, полученного в результате гипоаллергенного абсолютизированного "дубового лишайникового масла (240 г, выход 95%).

б). Аналогичные результаты получают в том случае, когда лизингидрохлорид используют в виде обычной кислоты, однако в двойном количестве по сравнению с примером 1,а).

В обоих примерах 1,а) и 1,б) среда реакции остается моноосновной в течение всей реакции, то есть не наблюдается разделение на фазы.

Пример 2. Получение гипоаллергенного абсолютизированного "дубового лишайникового" из твердого экстракта "дубового лишайникового" масла.

В трехгорлую круглодонную колбу помещают этанол 96^o (900 мл) и расплавленный твердый экстракт "дубового лишайникового" масла (150 г, т.пл. около 70^oC). Смесь охлаждают до 30^oC и при перемешивании при комнатной температуре добавляют раствор лизингидрохлорида (3,75 г), нейтрализованный с одним моль-эквивалентом гидроксида калия (85%) (1,35 г) в 6 мл дистиллированной воды и лейцин (3,75 г). После дополнительного перемешивания в течение 30 мин всю смесь нагревают с обратным холодильником в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры и дальнейшего перемешивания (30 мин) реакционную смесь охлаждают до 15^oC и фильтруют через бумажный фильтр. Этанол удаляют дистилляцией при пониженном давлении (на водяной бане) при температуре не выше 65^oC. В табл. 3 приведены результаты анализа полученного гипоаллергенного абсолютизированного "дубового лишайникового" масла (110 г, выход 73% /конкрет).

Пример 3. Получение гиппоаллергенного абсолютизированного "древесного лишайникового" из коммерчески доступного абсолютизированного "древесного лишайникового" масла.

Операции аналогичны описанным в примере 1 с учетом использования "древесного лишайникового абсолютизированного" вместо "дубового лишайникового абсолютизированного". В табл.4 приведены результаты анализа полученного гипоаллергенного абсолютизированного "древесного лишайникового" (250 г, выход около 100% абсолю).

Реферат

Предлагается способ очистки гипоаллергенных лишайниковых масел от аллергенов, заключающийся во взаимодействии лишайникового масла (неочищенного или очищенного) с аминокислотой (по меньшей мере одной) при гомогенных условиях в растворе и отделение нерастворенных аллергенных веществ. 2 с.п. ф-лы, 4 табл.

Формула