Раноочищающая композиция для лечения ран - RU2732224C9
Код документа: RU2732224C9
Чертежи
Описание
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Настоящее изобретение относится к раноочищающим композициям. В частности, настоящее изобретение относится к раноочищающим композициям, содержащим смесь протеолитических ферментов, полученную из бромелаина и находящуюся в сухой форме, и водный гель-носитель, где перед применением смесь протеолитических ферментов смешивают с водным гелем-носителем с получением раноочищающей композиции, подходящей для очистки и лечения хронических ран.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Хронические или трудноизлечимые раны являются распространенным болезненным состоянием, ежегодно поражающим миллионы людей. Большинство хронических ран вызвано местной или генерализованной сосудистой недостаточностью, которая уменьшает приток крови к коже и подкожной ткани. Наиболее распространенные типы хронических или трудноизлечимых ран включают: пролежневые язвы (или "пролежни"), диабетические язвы, артериальные язвы, венозные язвы и послеоперационные/посттравматические язвы.
Хронические раны приводят к серьезному повреждению кожи. Указанное повреждение может распространяться на всю толщину кожи и часто может задействовать более глубокие ткани. Поврежденная кожа теряет анатомическую структуру здоровой кожи, роговой слой по меньшей мере частично разрушается, и, следовательно, внутренние слои кожи теряют защиту от внешней среды. Кроме того, поврежденная кожа обычно содержит струп, пораженные и/или патологические клетки, которые необходимо удалить для обеспечения заживления. Оставаясь на ране, струп расширяет и углубляет повреждение на соседние неповрежденные ткани. Указанный струп также служит средой для роста бактерий и является источником инфекции, заражения и сепсиса, которые могут угрожать жизни.
Удаление струпа, пораженных и/или патологических клеток, также известное, как "очистка раны", осуществляют путем хирургических процедур, механических процедур (перевязка, промывание), аутолитических процедур (перевязка, способствующая мацерации) или при помощи ферментативных средств. Хирургия является одной из наиболее распространенных процедур очистки ран, при которой из всей поврежденной ткани вырезают небольшие фрагменты некротической ткани. Указанный способ ограничен небольшими несоприкасающимися поверхностями. Также он включает удаление больших фрагментов здоровой ткани, которая, если остается, может выступать в качестве источника для естественного, самостоятельно процесса заживления раны. Кроме того, хирургические процедуры являются более дорогостоящими и требуют медицинского обеспечения.
Ферментативная очистка ран является предпочтительной по сравнению с механической и хирургической очисткой ран, главным образом потому, что она является менее болезненной, более селективной и не требует помощи хорошо подготовленного медицинского персонала. Применение протеолитических ферментов для очистки ран хорошо известно в данной области. Указанные ферменты включают ферменты, выделенные из бактерий, и ферменты, обычно встречающиеся в растительных источниках, таких как папайя (папаин), инжир (фицин) и ананас (бромелаин). Гидролитические ферменты, получаемые из ананаса, которые подходят для расщепления, расслоения и отделения нежизнеспособной ткани, в частности, струпа, от здоровой ткани у млекопитающего, описаны в патентах США №№4197291; 4226854; 4307081; 4329430 и 5830739 и других.
Степень терапевтической активности, получаемой при местном нанесении протеолитических ферментов, регулируется, в том числе собственными каталитическими характеристиками ферментов. Основные проблемы, связанные с местным применением композиций, содержащих протеолитические ферменты, заключаются в том, что каталитическая активность ферментов быстро ослабевает из-за типичного низкого рН в очаге поражения, поглощения молекул ферментов поверхностью раны и/или поверхностью повязки и ингибирования ферментативной активности фрагментами экссудата из раны. Таким образом, получение стабильных ферментативных составов затруднено.
В настоящее время на рынке представлено несколько мазей для очистки ран от струпьев. Указанные мази обычно наносят ежедневно в течение нескольких месяцев для достижения желаемой очистки раны.
В патенте США №4668228, выданном Болтону (Bolton) et al., описаны раноочищающие пленки, которые содержат протеолитический фермент, подходящий для очистки ран от струпьев и некротической ткани, например, субтилизин, бромелаин, в форме сухого порошка на адгезивной поверхности окклюзивного или полуокклюзивного хирургического пластыря. Согласно патенту США №4668228 при нанесении раноочищающей пленки на поверхность ожога вода из раны, которая не способна проникать через подложку окклюзивной пленки, активирует раноочищающие ферменты.
В патенте США №4784653, выданном Болтону (Bolton) et al., описаны абсорбирующие адгезивные повязки для применении для лечения язвенных ран и ожогов, которые содержат трехслойные конструкции типа сэндвич, включающие окклюзивную пленку в качестве внешнего слоя, абсорбирующий слой волокон в качестве среднего слоя и влажный клеящий адгезив в качестве внутреннего адгезивного слоя, контактирующего с раной, который выполнен из акрилового полимера, обладающего как гидрофильными, так и гидрофобными характеристиками. Согласно патенту США №4784653 при желании в адгезив можно добавлять раноочищающий фермент.
В патенте США №5514370, выданном Штерну (Stern) et al., описаны фармацевтические композиции для местного нанесения, содержащие высокие концентрации коллагеназы в неводных вспомогательных веществах. В патенте США №5514370 также описан способ лечения ран, который включает нанесение на рану композиции, состоящей по существу из неводного вспомогательного вещества и коллагеназы.
В патенте США №5804213, выданном Рольфу (Rolf) et al., описана предварительно упакованная повязка, которая содержит сухие твердые вещества в форме частиц для получения жидкотекучего, натурального или синтетического гидроколлоидного полимерного геля на водной основе для покрытия ран. Согласно патенту США №5804213 один сухой компонент представляет собой гидроколлоид, который содержится в отделении герметичной емкости, защищенном от влаги. После смешивания с водой примесь является достаточно жидкой для того, чтобы ее можно было внести в рану или нанести на рану. После нанесения на рану гидратированная гидроколлоидная дисперсия начинает затвердевать с образованием твердой, самоудерживающейся гибкой повязки, состоящей из воды, гидроколлоида и биологически активного компонента.
В патенте США №6548556, выданном Хобсону (Hobson) et al., описан ферментативный безводный гидрофильный дебридер, который применяют в комбинации с протеолитическим ферментом и безводным гидрофильным полоксамерным носителем.
В патенте США №8062661, выданном Колдуэллу (Caldwell) et al., описаны способы очистки кожных ран, которые включают приведение кожной раны в контакт с гидрогелевым пластырем с раноочищающей композицией и удаление гидрогелевого пластыря с раноочищающей композицией с указанной кожной раны для удаления инородных материалов из кожной раны.
В опубликованной международной заявке на патент № WO 2006/054309, поданной заявителям настоящего изобретения, описана раноочищающая композиция, полученная из бромелаина, подходящая для очистки ран от струпных тканей и лечения ран.
В опубликованной международной заявке на патент № WO 2013/011514, поданной заявителям настоящего изобретения, описан протеолитический экстракт, полученный из бромелаина, для лечения заболеваний соединительной ткани, которые связаны с избыточным отложением коллагена, включая болезнь Дюпюитрена и болезнь Пейрони.
Существует долговременная и неудовлетворенная потребность в ферментативных раноочищающих композициях, которые обеспечивают улучшенное очищение ран и, в частности, хронических ран.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В настоящем изобретении предложена раноочищающая композиция, содержащая: смесь протеолитических ферментов, полученную из бромелаина и находящуюся в сухой форме, регулятор рН и водный гель-носитель, где перед применением смесь протеолитических ферментов смешивают с регулятором рН и водным гелем-носителем с получением раноочищающей композиции в форме геля, имеющего определенную вязкость и определенное значение рН. В настоящем изобретении также предложены способы очистки ран, в частности, хронических ран, включающие стадию нанесения раноочищающей композиции согласно настоящему изобретению на рану, с обеспечением таким образом очистки раны.
Очистка раны является ключевым процессом при подготовке раневого ложа (WBP) и считается важной процедурой при лечении хронических ран, которая может способствовать заживлению раны и полному закрытию раны.
Известно, что доступные в настоящее время ферментативные раноочищающие агенты для лечения хронических ран, такие как мазь Santyl®, наносят ежедневно в течение длительных периодов времени, например, в течение трех, шести или даже двенадцати месяцев, для удаления струпа.
Ранее заявителем настоящего изобретения было показано, что гелевый состав, содержащий: смесь протеолитических ферментов, полученную из бромелаина, в количестве 10% (масс/масс), Carbopol® 980NF в количестве 2,2% (масс./масс), двухосновный фосфат натрия и воду, является эффективным при очистке ожогов после одного 4-часового нанесения. Благодаря содержанию Carbopol® 980NF указанный гелевый состав имеет высокую вязкость в диапазоне от 55000 сантипуаз (сП) до 120000 сП.
Впервые описаны водные гелевые составы, имеющие вязкость в диапазоне от примерно 10000 сантипуаз (сП) до примерно 45000 сП, которые содержат: (i) смесь протеолитических ферментов, полученную из бромелаина, обозначенную в настоящей заявке "API", в количестве от 1% (масс/масс.) до 5% (масс/масс.) от общей массы носителя; (ii) регулятор рН; и (iii) носитель, содержащее сшитый полимер акриловой кислоты, полярный сорастворитель и воду; причем указанные гелевые составы способны обеспечивать проникновение API в струпную ткань хронических ран для эффективного удаления нежизнеспособной ткани. Гелевые составы согласно настоящему изобретению способны удалять струпья хронических ран за несколько дней и, как таковые, хорошо подходят для применения в качестве быстродействующего и эффективного ферментативного раноочищающего агента, в частности, для хронических или трудноизлечимых ран.
Также описано, что эффективность водных гелевых составов согласно настоящему изобретению при очистке хронических ран у людей была продемонстрирована на хронических ранах различной этиологии, такой как варикозные язвы, диабетические язвы нижних конечностей и травматические/послеоперационные раны. Была продемонстрирована неожиданно высокая эффективность при очистке варикозных язв и диабетических язв нижних конечностей.
Описано, что нанесение водных гелевых составов согласно настоящему изобретению на хронические раны у человека в течение 4 часов/день вплоть до 10 последовательных дней приводит к полному удалению струпа/шелушащейся кожи с незначительными или умеренными побочными эффектами, которые по существу схожи с эффектами, наблюдаемыми для водных гелевых составов, не содержащих API, т.е. гелей-носителей. Побочные эффекты являются временными, и пациенты восстанавливаются в течение нескольких дней. Таким образом, водные гелевые составы согласно настоящему изобретению являются безопасными и хорошо переносимыми.
Также описано, что более низкие количества API в водных гелевых составах согласно настоящему изобретению могут обеспечивать эффективное удаление струпа при нанесении на хроническую рану в течение более продолжительного времени при каждом нанесении. Таким образом, в настоящем изобретении описано, что 5% (масс/масс.) API в водных гелевых составах или даже более низкие количества API, например, 2% (масс/масс.) или даже 1% (масс/масс), можно наносить на хроническую рану в течение 24 часов, 48 часов или даже в течение более длительных периодов времени при каждом нанесении в течение периода лечения, составляющего 1-4 недели, для достижения полной очистки раны.
Также описано, что полярный сорастворитель глицерин, добавленный к водным гелевым составам согласно настоящему изобретению, снижает раздражение кожи. Таким образом, водные гелевые составы согласно настоящему изобретению содержат полярный сорастворитель, предпочтительно глицерин.
В некоторых вариантах реализации водные гелевые составы согласно настоящему изобретению имеют рН в диапазоне от примерно 6,5 до примерно 8,0, например, рН примерно 7,0. В указанном диапазоне рН активность протеолитических ферментов является по существу максимальной. Для достижения указанных значений рН водные гелевые составы согласно настоящему изобретению содержат регулятор рН, что позволяет получать высокоэффективный ферментативный раноочищающий агент.
Таким образом, водные гелевые составы согласно настоящему изобретению, также обозначенные в настоящем описании и пунктах формулы изобретения, как "раноочищающие композиции", хорошо подходят для применения в качестве быстродействующего, эффективного, безопасного и хорошо переносимого ферментативного агента для очистки и лечения ран, в частности, для хронических или трудноизлечимых ран.
В соответствии с первым аспектом в настоящем изобретении предложена раноочищающая композиция, содержащая:
(a) смесь протеолитических ферментов, полученную из бромелаина, содержащего бромелаин из стеблей (ЕС 3.4.22.32), и ананаина (ЕС 3.4.22.31), при этом смесь протеолитических ферментов находится в сухой или лиофилизированной форме;
(b) регулятор рН; и
(c) носитель, содержащий:
(i) сшитый полимер акриловой кислоты; (ii) полярный сорастворитель; и (iii) воду,
где перед применением смесь протеолитических ферментов смешивают с регулятором рН и носителем с получением раноочищающей композиции в форме геля, характеризующегося вязкостью в диапазоне от примерно 10000 сантипуаз (сП) до примерно 45000 сП и рН в диапазоне от примерно 6,0 до примерно 8,0, и где указанная смесь протеолитических ферментов присутствует в раноочищающей композиции в количестве от примерно 1% (масс/масс.) до примерно 7% (масс/масс.) от общей массы носителя.
В соответствии с некоторыми вариантами реализации смесь протеолитических ферментов присутствует в раноочищающей композиции в количестве от примерно 2% (масс/масс.) до примерно 7% (масс/масс.) от общей массы носителя, например, в количестве примерно 2%, 2,5%, 3%, 3,5%, 4%, 5%, 6% или примерно 7% (масс/масс.) от общей массы носителя. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению. В соответствии с дополнительными вариантами реализации смесь протеолитических ферментов присутствует в раноочищающей композиции в количестве от примерно 1% (масс/масс.) до примерно 5% (масс/масс). В соответствии с одним приведенным в качестве примера вариантом реализации протеолитическая смесь присутствует в количестве примерно 2,5% (масс/масс.) от общей массы носителя. В соответствии с другим приведенным в качестве примера вариантом реализации протеолитическая смесь присутствует в раноочищающей композиции в количестве 5% (масс/масс.) от общей массы носителя.
В соответствии с дополнительными вариантами реализации регулятор рН выбирают из группы, состоящей из фосфата натрия, карбоната натрия, фосфата калия и карбоната калия. В соответствии с одним из вариантов реализации регулятор рН присутствует в сухой форме совместно со смесью протеолитических ферментов. В соответствии с другим вариантом реализации регулятор рН присутствует совместно с носителем. В соответствии с приведенным в качестве примера вариантом реализации регулятор рН представляет собой фосфат натрия. В соответствии с одним из вариантов реализации фосфат натрия представляет собой безводный гидрофосфат натрия. В соответствии с дополнительными вариантами реализации безводный гидрофосфат натрия присутствует в количестве от примерно 0,1% (масс/масс.) до примерно 2% (масс/масс.) от общей массы носителя. В соответствии с конкретным вариантом реализации безводный гидрофосфат натрия присутствует в количестве примерно 0,25% (масс/масс.) от общей массы носителя.
В соответствии с другими вариантами реализации сшитый полимер акриловой кислоты представляет собой карбомер. В соответствии с другими вариантами реализации карбомер выбирают из группы, состоящей из полимеров акриловой кислоты, сшитых с аллилсахарозой или аллилпентаэритритом, полимеров акриловой кислоты и С10-С30 алкилакрилата, сшитых с аллилпентаэритритом, карбомерных гомополимеров или сополимеров, которые содержат блок-сополимер полиэтиленгликоля и сложного эфира длинноцепочечной алкановой кислоты, и их комбинации. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению.
В соответствии с другими вариантами реализации карбомер выбирают из группы, состоящей из гомополимеров CARBOPOL®, сополимеров CARBOPOL®, интерполимеров CARBOPOL® и т.п. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению.
В соответствии с другими вариантами реализации карбомеры включают, но не ограничиваются ими, CARBOPOL® 980 NF, CARBOPOL® 71 G NF, CARBOPOL® 97IP NF, CARBOPOL® 974P NF, CARBOPOL® 981 NF, PEMULEN™ TR-1 NF, PEMULEN™ TR-2 NF, CARBOPOL® ETD 2020 NF, CARBOPOL® Ultrez 10 NF, карбомер 934 (CARBOPOL® 934 NF), карбомер 934P (CARBOPOL® 934P NF), карбомер 940 (CARBOPOL® 940 NF), карбомер 941 (CARBOPOL® 941 NF) и карбомер 1342 (CARBOPOL® 1342P NF). Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению. В соответствии с некоторыми вариантами реализации карбомер представляет собой Carbopol® 980 NF, присутствующий в количестве от примерно 0,5% (масс/масс.) до примерно 1,5% (масс/масс.) от общей массы носителя. В соответствии с конкретным вариантом реализации Carbopol® 980 NF присутствует в количестве примерно 1% (масс/масс.) от общей массы носителя.
В соответствии с другими вариантами реализации полярный сорастворитель выбирают из группы, состоящей из глицерина, полиэтиленгликоля (PEG), полипропиленгликоля, полиглицерина, пропиленгликоля, этанола, изопропилового спирта и их комбинации. В соответствии с другими вариантами реализации полярный сорастворитель представляет собой глицерин, присутствующий в количестве от примерно 2% (масс/масс.) до примерно 15% (масс/масс.) от общей массы носителя. В соответствии с одним приведенным в качестве примера вариантом реализации глицерин присутствует в количестве 10% (масс/масс.) от общей массы носителя.
В соответствии с другими вариантами реализации вязкость раноочищающей композиции варьируется от примерно 10000 сП до примерно 30000 сП, альтернативно, от примерно 15000 сП до примерно 25000 сП. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению. В соответствии с конкретными вариантами реализации вязкость варьируется от примерно 16000 сП до примерно 22000 сП.
В соответствии с другими вариантами реализации рН раноочищающей композиции варьируется от примерно 6,0 до примерно 7,0, альтернативно, рН составляет примерно 7,0.
В соответствии с некоторыми вариантами реализации раноочищающая композиция содержит:
(a) смесь протеолитических ферментов, полученную из бромелаина, содержащего бромелаин из стеблей (ЕС 3.4.22.32), и ананаина (ЕС 3.4.22.31) в количестве от примерно 1% (масс/масс.) до примерно 7% (масс/масс.) от общей массы носителя;
(b) регулятор рН;
(c) носитель, содержащий:
(i) полимер акриловой кислоты, сшитый с аллилсахарозой или аллилпентаэритритом; (ii) глицерин; и (iii) воду.
В соответствии с дополнительными вариантами реализации раноочищающая композиция содержит:
(a) смесь протеолитических ферментов, полученную из бромелаина и содержащую бромелаин из стеблей (ЕС 3.4.22.32) и ананаин (ЕС 3.4.22.31) в количестве от примерно 1% (масс/масс.) до примерно 7% (масс/масс.) от общей массы носителя;
(b) регулятор рН;
(c) носитель, содержащий:
(i) Carbopol® 980 NF в количестве от примерно 0,5% до примерно
1,5% (масс/масс.) от общей массы носителя; (ii) глицерин; и (iii) воду.
В соответствии с другими вариантами реализации раноочищающая композиция содержит:
(а) смесь протеолитических ферментов, полученную из бромелаина, содержащего бромелаин из стеблей (ЕС 3.4.22.32), и ананаина (ЕС 3.4.22.31), присутствующую в первой емкости в количестве от примерно 1% до примерно 7% (масс/масс), предпочтительно в количестве от примерно 1% (масс/масс.) до примерно 5% (масс/масс.) от общей массы носителя;
(b) носитель, присутствующий во второй емкости и содержащий:
(i) Carbopol® 980 NF в количестве примерно 0,9% (масс/масс.) от общей массы носителя;
(ii) глицерин в количестве примерно 10% (масс/масс.) от общей массы носителя;
(iii) безводный гидрофосфат натрия, присутствующий в количестве примерно 0,25% (масс/масс.) от общей массы носителя; и
(iv) воду,
где вязкость раноочищающей композиции варьируется от примерно 15000 сП до примерно 25000 сП, и рН варьируется от примерно 6,0 до примерно 7,0.
В соответствии с другим аспектом в настоящем изобретении предложен способ очистки раны, включающий стадию нанесения на рану у субъекта, нуждающегося в таком лечении, терапевтически эффективного количества раноочищающей композиции согласно настоящему изобретению.
В соответствии с некоторыми вариантами реализации способ включает нанесение на рану раноочищающей композиции согласно настоящему изобретению, где указанная раноочищающая композиция содержит:
(a) смесь протеолитических ферментов, полученную из бромелаина, содержащего бромелаин из стеблей (ЕС 3.4.22.32), и ананаина (ЕС 3.4.22.31), присутствующую в сухой или лиофилизированной форме;
(b) регулятор рН;
(c) носитель, содержащий:
(i) сшитый полимер акриловой кислоты;
(ii) полярный сорастворитель; и
(iii) воду.
где перед применением смесь протеолитических ферментов смешивают с регулятором рН и носителем с получением раноочищающей композиции в форме геля, характеризующегося вязкость в диапазоне от примерно 10000 сантипуаз (сП) до примерно 45000 сП и рН в диапазоне от примерно 6,0 до примерно 8,0, и где указанная смесь протеолитических ферментов присутствует в раноочищающей композиции в количестве от примерно 1% (масс/масс.) до примерно 7% (масс/масс.) от массы носителя.
В соответствии с некоторыми вариантами реализации способ включает стадию нанесения раноочищающей композиции, которая содержит:
(a) смесь протеолитических ферментов, полученную из бромелаина, содержащего бромелаин из стеблей (ЕС 3.4.22.32), и ананаина (ЕС 3.4.22.31), присутствующую в сухой или лиофилизированной форме в первой емкости в количестве от примерно 1% (масс/масс.) до примерно 7% (масс/масс), предпочтительно в количестве от примерно 1% (масс/масс.) до примерно 5% (масс/масс.) от массы носителя;
(b) носитель, присутствующий во второй емкости и содержащее:
(i) Carbopol® 980 NF в количестве примерно 0,9% (масс/масс.) от общей массы носителя;
(ii) глицерин в количестве примерно 10% (масс/масс.) от общей массы носителя;
(iii) безводный гидрофосфат натрия в количестве примерно 0,25% (масс/масс); и
(iv) воду.
где вязкость композиции варьируется от примерно 15000 сП до примерно 25000 сП, и рН варьируется от примерно 6,0 до примерно 7,0.
В соответствии с дополнительными вариантами реализации рана, подлежащая очистке раноочищающей композицией согласно настоящему изобретению, представляет собой трудноизлечимую или хроническую рану. В соответствии с другими вариантами реализации трудноизлечимую или хроническую рану выбирают из группы, состоящей из диабетической язвы, трофической язвы, язвы при артериальной недостаточности, пролежневой язвы, послеоперационной и посттравматической раны. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению. В соответствии с другими вариантами реализации трудноизлечимую или хроническую рану выбирают из группы, состоящей из диабетической язвы нижних конечностей, варикозной язвы, послеоперационной раны и посттравматической раны. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению. В соответствии с конкретными вариантами реализации трудноизлечимая или хроническая рана представляет собой диабетическую язву нижних конечностей или варикозную язву.
В соответствии с другими вариантами реализации раноочищающую композицию для лечения трудноизлечимой или хронической раны наносят на рану в режиме по меньшей мере одного нанесения, где раноочищающую композицию выдерживают в контакте с раной в течение примерно 4-24 часов при каждом нанесении. В соответствии с другими вариантами реализации раноочищающую композицию наносят на рану в режиме по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или по меньшей мере 10 нанесений или до удаления струпа, где раноочищающую композицию выдерживают в контакте с раной в течение примерно 4-24 часов при каждом нанесении. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению. В соответствии с одним приведенным в качестве примера вариантом реализации раноочищающую композицию наносят в режиме 10 нанесений, где раноочищающую композицию выдерживают в контакте с раной в течение примерно 4 часов при каждом нанесении.
В соответствии с другими вариантами реализации раноочищающую композицию наносят на рану в режиме по меньшей мере одного нанесения, где раноочищающую композицию выдерживают в контакте с раной в течение примерно 24 часов при каждом нанесении. В соответствии с другими вариантами реализации раноочищающую композицию наносят на рану в режиме по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или по меньшей мере 10 нанесений или до удаления струпа, где раноочищающую композицию выдерживают в контакте с раной в течение примерно 24 часов при каждом нанесении. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению. В соответствии с одним приведенным в качестве примера вариантом реализации раноочищающую композицию наносят в режиме 10 нанесений, где раноочищающую композицию выдерживают в контакте с раной в течение примерно 24 часов при каждом нанесении.
В соответствии с дополнительными вариантами реализации раноочищающую композицию наносят на рану в режиме по меньшей мере одного нанесения, где раноочищающую композицию выдерживают в контакте с раной в течение примерно 48, в течение примерно 72 часов или в течение любого целого числа часов между указанными значениями при каждом нанесении. В соответствии с другими вариантами реализации раноочищающую композицию наносят на рану в режиме по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или по меньшей мере 10 нанесений или до удаления струпа, где раноочищающую композицию выдерживают в контакте с раной в течение примерно 48, в течение примерно 72 часов или в течение любого целого числа часов между указанными значениями при каждом нанесении. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению. В соответствии с одним приведенным в качестве примера вариантом реализации раноочищающую композицию наносят в режиме 10 нанесений, где раноочищающую композицию выдерживают в контакте с раной в течение примерно 48 часов при каждом нанесении.
В соответствии с другими вариантами реализации раноочищающую композицию наносят на хроническую рану в режиме, составляющем по меньшей мере три раза в неделю в течение по меньшей мере одной недели, где указанную раноочищающую композицию выдерживают в контакте с раной в течение времени, выбранного из группы, состоящей из 48 часов при каждом нанесении и 72 часов при каждом нанесении. В соответствии с другими вариантами реализации раноочищающую композицию наносят на хроническую рану в режиме, составляющем по меньшей мере три раза в неделю в течение по меньшей мере 4, 5, 6, 7, 8, 9 или по меньшей мере 10 нанесений или до удаления струпа, где указанную раноочищающую композицию выдерживают в контакте с раной в течение времени, выбранного из группы, состоящей из 48 часов при каждом нанесении и 72 часов при каждом нанесении. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению. В соответствии с одним приведенным в качестве примера вариантом реализации раноочищающую композицию наносят три раза в неделю в режиме 10 нанесений.
В соответствии с другими вариантами реализации режим повторяют один, два, три или более раз или до полного удаления струпа и/или закрытия раны. Следует отметить, что при повторении режима лечения лечение может являться непрерывным, или между повторениями могут находиться один или более дней, одна или более недель или один или более месяцев. Дополнительно или альтернативно, если струп появляется повторно и еще не достигается закрытие раны, режим повторяют один, два или более раз до полного удаления струпа и/или закрытия раны.
В соответствии с другими вариантами реализации способ дополнительно включает стадию введения субъекту активного агента, выбранного из группы, состоящей из анестетиков, антибактериальных агентов, противогрибковых агентов и противовоспалительных агентов. Активный агент, такой как, например, анестетик, можно местно наносить на рану или можно вводить перорально или парентерально перед нанесением раноочищающего состава, одновременно с нанесением раноочищающего состава или после нанесения раноочищающего состава.
В соответствии с другим аспектом в настоящем изобретении предложен способ лечения ран, включающий описанную выше в настоящей заявке стадию нанесения на рану субъекта, нуждающегося в таком лечении, терапевтически эффективного количества раноочищающей композиции согласно настоящему изобретению. В соответствии с конкретным вариантом реализации рана представляет собой трудноизлечимую или хроническую рану.
В соответствии с другим аспектом в настоящем изобретении предложен способ заживления ран или закрытия ран, включающий описанную выше в настоящей заявке стадию нанесения на рану субъекта, нуждающегося в таком лечении, терапевтически эффективного количества раноочищающей композиции согласно настоящему изобретению. В соответствии с конкретным вариантом реализации рана представляет собой трудноизлечимую или хроническую рану.
В соответствии с другим аспектом в настоящем изобретении предложена раноочищающая композиция согласно настоящему изобретению для применения в способе очистки ран, и/или для лечения ран и/или для заживления ран и/или для закрытия ран, как определено выше в настоящей заявке. В соответствии с конкретным вариантом реализации рана представляет собой трудноизлечимую или хроническую рану.
Указанные и другие варианты реализации согласно настоящему изобретению будут лучше понятны посредством фигур, описания, примеров и пунктов формулы изобретения, приведенных ниже.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР
ФИГ. 1A-D представляют собой микрофотографии хронической раны у свиньи. На ФИГ. 1А представлена хроническая рана до лечения, и на ФИГ. 1В представлена хроническая рана после одиннадцати нанесений 3% геля EscharEx. В качестве контроля хроническую рану у свиньи (ФИГ. 1С) лечили путем одиннадцати нанесений геля-носителя (ФИГ. 1D).
На ФИГ. 2А-С представлены проценты струпа после 10 нанесения геля EscharEx в зависимости от количества активного фармацевтического ингредиента (API), нанесенного на рану на 1 час (ФИГ. 2А), 4 часа (ФИГ. 2В) и 24 часа (ФИГ. 2С).
На ФИГ. 3А-С представлены площади под кривыми (ППК) струпа после 10 нанесения геля EscharEx в зависимости от количества API, нанесенного на рану на 1 час (ФИГ. 3А), 4 часа (ФИГ. 3В) и 24 часа (ФИГ. 3С).
На ФИГ. 4А-В представлены квадратичные модели площадей под кривыми (ППК) струпа (верхние панели), процентов струпа после 10 нанесения (средние панели) и функций желательности (оптимизация наименьшего ППК и наименьшего струпа после 10 нанесения; нижние панели) в зависимости от количества API (ФИГ. 4А) и в зависимости от продолжительности нанесения (ФИГ. 4В). Линии с крупными штрихами обозначают доверительные интервалы (95%) модели.
На ФИГ. 5 представлено время для завершения очистки ран для группы лечения в популяции по назначенному лечению (ITT).
На ФИГ. 6 представлено время для завершения очистки ран для группы лечения для субъектов, страдающих от варикозных язв, в ITT популяции.
На ФИГ. 7 представлено время для завершения очистки ран для группы лечения для субъектов, страдающих от диабетических язв нижних конечностей, в ITT популяции.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В настоящем изобретении предложена раноочищающая композиция, которая содержит: (i) смесь протеолитических ферментов, полученную из бромелаина и присутствующую в сухой или лиофилизированной форме; (ii) регулятор рН; и (iii) носитель, содержащее сшитый полимер акриловой кислоты, полярный сорастворитель и воду, где перед применением смесь протеолитических ферментов смешивают с регулятором рН и носителем с получением раноочищающей композиции в форме геля, имеющего вязкость в диапазоне от примерно 10000 сП до примерно 45000 сП и рН в диапазоне от примерно 6,0 до примерно 8,0.
Термин "смесь протеолитических ферментов, полученная из бромелаина", применяемый в настоящем описании и пунктах формулы изобретения, относится к ферментативному препарату, частично очищенному от бромелаина.
Термин "бромелаин" относится к белковому экстракту, полученному из стеблей ананаса, который представлен на рынке.
Смесь протеолитических ферментов, полученная из бромелаина (также называемая Debrase® или NexoBrid®) и препарат на ее основе описаны в документах №№ WO 2006/054309 и WO 2013/011514, содержание которых включено в настоящую заявку во всей полноте посредством ссылки. Смесь протеолитических ферментов, полученная из бромелаина, содержит по меньшей мере две цистеиновые протеазы, присутствующие в бромелаине: бромелаин из стеблей (ЕС 3.4.22.32) и ананаин (ЕС 3.4.22.31). Протеолитическая смесь может дополнительно содержать один или более предшественников цистеиновых протеаз бромелаина, таких как, например, предшественник ананаина (ЕС 3.4.22.31), предшественник бромелаина из плодов ананаса (ЕС 3.4.22.33) и предшественник бромелаина из стеблей (ЕС 3.4.22.31). Протеолитическая смесь может дополнительно содержать фрагменты цистеиновых протеаз, джакалин-подобный лектин и/или ингибиторы бромелаина (см., например, документ №WO 2006/054309). В соответствии с конкретным вариантом реализации протеолитическая смесь, полученная из бромелаина, содержит бромелаин из стеблей (ЕС 3.4.22.32), ананаин (ЕС 3.4.22.31), предшественник цистеиновой протеазы бромелаина и необязательно джакалин-подобный лектин.
Протеолитическую смесь можно получать при помощи способа, описанного в документе № WO 2013/011514. На заключительной стадии получения протеолитическую смесь лиофилизируют и хранят в виде лиофилизированного порошка до применения. Смесь протеолитических ферментов является высокостабильной в виде лиофилизированного или высушенного порошка, и ее можно хранить при 2-8°С в течение 3 лет. После указанного периода смесь протеолитических ферментов сохраняет по меньшей мере 90% исходной ферментативной активности, определенной в конце способа получения.
Термины "сухой", "лиофилизированный" или "безводный", взаимозаменяемо применяемые в настоящем описании и пунктах формулы изобретения, относятся к смеси протеолитических ферментов или к регулятору рН, которые содержат воду в количестве до 3% (масс/масс.) от общей массы смеси или регулятора рН, альтернативно, вода присутствует в количестве до 2%, 1%, 0,5% или, альтернативно, до 0,1% (масс/масс.) от общей массы смеси или регулятора рН. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению. В соответствии с конкретным вариантом реализации протеолитическая смесь и регулятор рН не содержат воду.
Сшитый полимер акриловой кислоты, применяемый для реализации настоящего изобретения, представляет собой карбомер. Подходящие карбомеры включают, но не ограничиваются ими, различные полимеры, представленные на рынке под торговым наименованием CARBOPOL® производства Lubrizol Advanced Materials, Кливленд, штат Огайо, включая, например, гомополимеры CARBOPOL® (полимеры акриловой кислоты, сшитые с аллилсахарозой или аллилпентаэритритом), такие как CARBOPOL® 71 G NF, CARBOPOL® 971P NF, CARBOPOL® 974P NF, CARBOPOL® 980 NF и CARBOPOL® 981 NF; сополимеры CARBOPOL® (полимеры акриловой кислоты и С10-С30 алкилакрилата, сшитые с аллилпентаэритритом), такие как PEMULEN™ TR-1 NF и PEMULEN™ TR-2 NF; интерполимеры CARBOPOL® (карбомерные гомополимеры или сополимеры, которые содержат блок-сополимер полиэтиленгликоля и сложного эфира длинноцепочечной алкановой кислоты), такие как CARBOPOL® ETD 2020 NF и CARBOPOL® Ultrez 10 NF; "традиционные" карбомеры, такие как карбомер 934 (CARBOPOL® 934 NF), карбомер 934Р (CARBOPOL® 934Р NF), карбомер 940 (CARBOPOL® 940 NF), карбомер 941 (CARBOPOL® 941 NF) и карбомер 1342 (CARBOPOL® 1342P NF). Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению.
Полярные сорастворители включают, но не ограничиваются ими, глицерин, полиэтиленгликоль (PEG), полипропиленгликоль, полиглицерин, пропиленгликоль, этанол, сорбит, изопропиловый спирт и их комбинацию. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению. В соответствии с конкретным вариантом реализации полярный сорастворитель представляет собой глицерин.
Термин "фармацевтически приемлемый" означает одобренный регулирующим агентством федерального правительства или правительства штата или включенный в Фармакопею США или другую общепризнанную фармакопею для применения на людях. Все компоненты раноочищающей композиции согласно настоящему изобретению представляют собой фармацевтически приемлемые агенты.
Термин "примерно" относится к значению, которое на 10% больше или меньше указанного значения.
Раноочищающая композиция может дополнительно содержать консервант, такой как, например, бензиловый спирт, парабены, метил- или пропилгидроксибензоаты и их комбинация, и/или антиоксидант, такой как, например, аскорбиновая кислота, дигидрохинон, бутилированный гидрокситолуол, дитиотреитол и их комбинация, и/или антиагрегационный агент, такой как, например, олигосахарид, например, лактоза и т.п.
Раноочищающая композиция может дополнительно содержать активный агент, такой как, анестетик, антибактериальный агент, противогрибковый агент, противовоспалительный агент, анальгетик, фактор роста, агент, способствующий заживлению, или их комбинацию. Анестетики включают, но не ограничиваются ими, аметокаин (тетракаин), лигнокаин (лидокаин), ксилокаин, бупивакаин, прилокаин, ропивакаин, бензокаин, мепивокаин, кокаин и их комбинацию.
Антибактериальные агенты включают, но не ограничиваются ими, амантадина гидрохлорид, амантадина сульфат, амикацин, амикацина сульфат, аминогликозиды, амоксициллин, ампициллин, ансамицины, бацитрацин, бета-лактамы, кандицидин, капреомицин, карбенициллин, цефалексин, цефалоридин, цефалотин, цефазолин, цефапирин, цефрадин, цефалоглицин, хлорамфениколы, хлоргексидин, хлоргексидина глюконат, хлоргексидина гидрохлорид, хлороксин, хлорхинальдол, хлортетрациклин, хлортетрациклина гидрохлорид, ципрофлоксацин, циркулин, клиндамицин, клиндамицина гидрохлорид, клотримазол, клоксациллин, демеклоциклин, диклоксациллин, дийодогидроксихин, доксициклин, этамбутол, этамбутола гидрохлорид, эритромицин, эритромицина эстолат, эрмицина стеарат, фарнезол, флоксациллин, гентамицин, гентамицина сульфат, грамицидин, гризеофульвин, галопрогин, галохинол, гексахлорофен, иминоциклин, йодохлоргидроксихин, канамицин, канамицина сульфат, линкомицин, линеомицин, линеомицина гидрохлорид, макролиды, меклоциклин, метациклин, метациклина гидрохлорид, метенин, метенамина гиппурат, метенамина манделат, метициллин, метронидазол, миконазол, миконазола гидрохлорид, миноциклин, миноциклина гидрохлорид, мупироцин, нафциллин, неомицин, неомицина сульфат, нетилмицин, нетилмицина сульфат, нитрофуразон, норфлоксацин, нистатин, октопирокс, олеандомицин, цефалоспорины, оксациллин, окситетрациклин, окситетрациклина гидрохлорид, пара-хлор-мета-ксиленол, паромомицин, паромомицина сульфат, пенициллины, пенициллин G, пенициллин V, пентамидин, пентамидина гидрохлорид, фенетициллин, полимиксин, хинолоны, такие как фторхинолоны, стрептомицина сульфат, тетрациклин, тобрамицин, толнафтат, триклозан, рифампин, рифамицин, ролитетрациклин, серебряные соли, спектиномицин, спирамицин, стрептомицин, сульфонамид, тетрациклины, тетрациклин, тобрамицин, тобрамицина сульфат, триклокарбан, триклозан, триметоприм/сульфаметоксазол, тилозин, ванкомицин, тиротрицин и их комбинацию. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению.
Противогрибковые агенты включают, но не ограничиваются ими, нистатин, клотримазол, миконазол, кетоконазол, флуконазол, тиабендазол, эконазол, кломидазол, изоконазол, тиабендазол, тиоконазол, сулконазол, бифоназол, оксиконазол, фентиконазол, омоконазол, сертаконазол, флутримазол и их комбинацию. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению.
Противовоспалительный агент может являться нестероидным, стероидным или может представлять их комбинацию. Неограничивающие примеры нестероидных противовоспалительных агентов включают оксикамы, такие как пироксикам, изоксикам, теноксикам, судоксикам; салицилаты, такие как аспирин, дисалцид, бенорилат, трилизат, сафаприн, солприн, дифлунизал и фендозал; производные уксусной кислоты, такие как диклофенак, фенклофенак, индометацин, сулиндак, толметин, изоксепак, фурофенак, тиопинак, зидометацин, ацематацин, фентиазак, зомепирак, клинданак, оксепинак, фелбинак и кеторолак; фенаматы, такие как мефенамовая, меклофенамовая, флуфенамовая, нифлумовая и толфенамовая кислоты; производные пропионовой кислоты, такие как ибупрофен, напроксен, беноксапрофен, флурбипрофен, кетопрофен, фенопрофен, фенбуфен, индопрофен, пирпрофен, карпрофен, оксапрозин, пранопрофен, миропрофен, тиоксапрофен, супрофен, альминопрофен и тиапрофеновая кислота; пиразолы, такие как фенилбутазон, оксифенбутазол, феразон, азапропазон и триметазон. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению.
Неограничивающие примеры нестероидных противовоспалительных лекарственных средств включают кортикостероиды, такие как гидрокортизон, гидроксил-триамцинолон, альфа-метилдексаметазон, дексаметазон фосфат, беклометазона дипропионаты, клобетазола валерат, дезонид, дезоксиметазон, дезоксикортикостерона ацетат, дексаметазон, дихлоризон, дифлоразона диацетат, дифлукортолона валерат, флуадренолон, флуклоролона ацетонид, флудрокортизон, флуметазона пивалат, флуоцинолона ацетонид, флуоцинонид, сложные бутиловые эфиры флукортина, флуокортолон, флупреднидена (флупреднилидена) ацетат, флурандронолон, хальцинонид, гидрокортизона ацетат, гидрокортизона бутират, метилпреднизолон, триамцинолона ацетонид, кортизон, кортодоксон, флуцетонид, флудрокортизон, дифлуорозона диацетат, флурадренолон, флудрокортизон, дифлуорозона диацетат, флурадренолона ацетонид, медризон, амцинафел, амцинафид, бетаметазон и его сложные эфиры, хлорпреднизон, хлорпреднизона ацетат, клокортелон, клесцинолон, дихлоризон, дифлупреднат, флуклоронид, флунизолид, флуорометалон, флуперолон, флупреднизолон, гидрокортизона валерат, гидрокортизона циклопентилпропионат, гидрокортамат, мепреднизон, параметазон, преднизолон, преднизон, беклометазона дипропионат и триамцинолон. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению.
Анальгетики включают, но не ограничиваются ими, кодеин, гидрокодон, оксикодон, фентанил и пропоксифен. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации.
Факторы роста включают, но не ограничиваются ими, эпидермальные факторы роста, факторы роста фибробластов, инсулиноподобные факторы роста и т.п.
Агенты, способствующие заживлению, включают, но не ограничиваются ими, гиалуроновую кислоту и т.п.
В соответствии с предпочтительным вариантом реализации раноочищающая композиция является стерильной.
Вязкость гелевых составов согласно настоящему изобретению можно измерять при помощи любых известных способов. Вязкость можно измерять путем измерения абсолютной вязкости с применением вискозиметра типа конус-пластина. Альтернативно, для расчета вязкости гелевых составов, описанных в настоящей заявке, можно применять вискозиметр Brookfield (шпиндель и чашка). Все диапазоны вязкостей, указанные в настоящей заявке, измеряют при комнатной температуре.
Смесь протеолитических ферментов и носитель можно хранить в первом отделении и втором отделении, соответственно, одной емкости или их можно хранить в двух отдельных емкостях, а именно в первой емкости и второй емкости. Регулятор рН может являться безводным или высушенным, и его можно хранить в первом отделении или емкости со смесью протеолитических ферментов. Альтернативно, регулятор рН можно хранить с носителем во втором отделении или емкости. Альтернативно, регулятор рН можно хранить в третьем, отдельном отделении или емкости. В соответствии с конкретным вариантом реализации регулятор рН хранят с носителем во втором отделении или емкости и перед применением смесь протеолитических ферментов и носитель смешивают с получением раноочищающей композиции согласно настоящему изобретению.
В соответствии с другим аспектом в настоящем изобретении предложена система, содержащая три емкости, в которой первая емкость содержит смесь протеолитических ферментов, вторая емкость содержит носитель, и третья емкость содержит регулятор рН. Альтернативно, система содержит две емкости, где первая емкость содержит смесь протеолитических ферментов, и вторая емкость содержит носитель и регулятор рН.
В соответствии с некоторыми вариантами реализации композиция не содержит адгезивных агентов, и поэтому она является не адгезивной.
Применение раноочищающей композиции
В настоящем изобретении предложен способ очистки кожных ран, включающий стадию местного нанесения терапевтически эффективного количества раноочищающей композиции согласно настоящему изобретению на кожную рану субъекта, нуждающегося в таком лечении, с обеспечением таким образом удаления струпа с раны для облегчения заживления раны и закрытия раны. В соответствии с конкретными вариантами реализации рана представляет собой хроническую или трудноизлечимую рану.
В настоящем изобретении также предложен способ лечения кожных ран, включающий стадию местного нанесения терапевтически эффективного количества раноочищающей композиции согласно настоящему изобретению на кожную рану субъекта, нуждающегося в таком лечении, с обеспечением таким образом лечения раны. В соответствии с конкретными вариантами реализации рана представляет собой хроническую или трудноизлечимую рану.
Термины "хроническая рана", "хроническая кожная рана" или "трудноизлечимая рана", взаимозаменяемо применяемые в настоящем описании и пунктах формулы изобретения, относятся к ране, в которой не произошла упорядоченная во времени последовательность процессов, которая обеспечивает надежное структурное, функциональное и/или косметическое закрытие, как в случае обычных ран. Раны, которые не заживают в течение одного месяца, считают хроническими или трудноизлечимыми ранами.
Термин "очистка раны", применяемый в настоящей заявке, относится к удалению нежизнеспособной ткани: некротического струпа, шелушащейся кожи или фибрина и бактерий/биопленки из раны. Некротический струп представляет собой тонкую или толстую, плотную, девитализированную, черную, коричневую или желтовато-коричневую ткань, тогда как шелушащаяся кожа и биопленка представляют собой экссудативную, белую или желто-зеленоватую, пятнистую, тонкую ткань на раневом ложе. Некротическая ткань, инородный материал и бактерии препятствуют попыткам организма к заживлению путем производства или стимулирования производства металлопротеаз, которые мешают местному процессу заживления раны. Указанная неблагоприятная среда позволяет бактериям размножаться и колонизировать рану через экссудаты, инородные частицы и гнойные выделения ("шелушащаяся кожа"), которые покрывают раневое ложе. Кроме того, бактерии выделяют структурные продукты, которые совместно с шелушащейся кожей образуют биопленку, защищая таким образом свои колонии от потенциального разрушения. Бактерии производят свои собственные ингибирующие рану ферменты и, что более важно, потребляют большую часть немногочисленных местных ресурсов, необходимых для заживления раны.
В случае хронических ран важную роль могут играть несколько различных факторов. Внешние поверхности, такие как кости, сухожилия, фасции или даже жировая ткань, не поддерживают клеточную пролиферацию, и они иссыхают и становятся инородными телами, такими как синтетические имплантаты. Любое вмешательство в местное кровоснабжение (артериальное, венозное, лимфатическое, кровяное давление и т.п.) может приводить к тому, что рана станет трудноизлечимой и хронической. Грануляционная ткань может становиться жесткой, атрофической, утрачивать свою обширную сосудистую сеть, становиться более темной и непрозрачной и может перестать принимать какое-либо участие в процессах заживления и закрытия ран.
Термин "подготовка раневого ложа (WBP)", применяемый в настоящей заявке, относится к раневому ложу, которое образуется при надлежащей очистке раны для ускорения эндогенного заживления или для содействия эффективности других терапевтических процедур. Она представляет собой процесс очистки, удаления различных "отложений", препятствующих заживлению, как из раны, так и из пациента. Отложения в ране включают экссудат, бактерии, биопленку и некротические/клеточные остатки. Общее состояние здоровья пациента важно для процесса заживления. В случае хронических ран удаление мешающего струпа, шелушащейся кожи или биопленки может приводить к получению чистого раневого ложа, но такое раневое ложе все еще может являться недостаточным для дальнейшего заживления, если общее состояние пациента или состояние конечностей не способны поддерживать заживление.
Раневое ложе, подготовленное для заживления, представляет собой раневое ложе без струпа, шелушащейся кожи, фибрина или биопленки, которое также имеет жизнеспособное ложе здоровых тканей и/или здоровой грануляционной ткани (уровень по шкале гранулометра >7), которое способствует самостоятельному закрытию раны путем образования рубцов, развития контрактур и эпителизации (необязательно с применением таких средств, как биологические повязки, повязки, способствующие заживлению ран, синтетические раневые повязки, системы для заживления ран на основе вакуума или озона) поверх жизнеспособного, чистого ложа, или поддерживает аутологичный STSG (расщепленный кожный трансплантат) или аллотрансплантацию кожи.
В соответствии с некоторыми вариантами реализации очистка раны относится к удалению по меньшей мере 50%, альтернативно, по меньшей мере 75% нежизнеспособной ткани, которая присутствует до начала лечения. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению. В соответствии с конкретными вариантами реализации очистка раны относится к удалению по меньшей мере 90% или по меньшей мере 95%, и предпочтительно 100% нежизнеспособной ткани, которая присутствует до начала лечения; такую очистку раны, а именно удаление 90% или более нежизнеспособной ткани, которая присутствует до начала лечения, в настоящем описании и пунктах формулы изобретения называют "полной очисткой раны".
Термин "закрытие раны" относится к процессу регенерации покровных клеточных слоев ткани. Таким образом, стимулирование закрытия раны означает создание положительного эффекта на регенерацию покровных клеточных слоев. Положительный эффект может заключаться в ускорении процесса регенерации или уменьшении пораженной раневой области.
Термин "терапевтически эффективное количество" представляет собой количество смеси протеолитических ферментов, которое является достаточным для обеспечения благоприятного эффекта у субъекта, которому вводят композицию.
В соответствии с некоторыми вариантами реализации раноочищающую композицию согласно настоящему изобретению можно наносить на хроническую рану ежедневно в течение примерно 4-24 часов или в течение любого целого числа часов между указанными значениями в течение периода лечения, составляющего по меньшей мере один день. Альтернативно, раноочищающую композицию согласно настоящему изобретению можно наносить на хроническую рану ежедневно в течение примерно 4-24 часов или в течение любого целого числа часов между указанными значениями в течение периода лечения, составляющего по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 последовательных дней или до удаления струпа. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению.
В соответствии с дополнительными вариантами реализации раноочищающую композицию согласно настоящему изобретению можно наносить на хроническую рану в режиме по меньшей мере одного нанесения, где раноочищающую композицию выдерживают в контакте с раной в течение примерно 4-24 часов, например, в течение примерно 24 часов, при каждом нанесении. Альтернативно, раноочищающую композицию согласно настоящему изобретению можно наносить на хроническую рану в режиме по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или по меньшей мере 10 нанесений или до удаления струпа, где раноочищающую композицию выдерживают в контакте с раной в течение примерно 4-24 часов, например, в течение примерно 24 часов, при каждом нанесении. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению. В соответствии с одним из вариантов реализации продолжительность режима составляет по меньшей мере один день. Альтернативно, продолжительность режима составляет до четырех недель, предпочтительно до 10 нанесений примерно по 24 часа при каждом нанесении.
В соответствии с другими вариантами реализации раноочищающую композицию согласно настоящему изобретению можно выдерживать в контакте с хронической раной в течение примерно 48 часов при каждом нанесении в режиме по меньшей мере одного нанесения. Альтернативно, раноочищающую композицию согласно настоящему изобретению можно выдерживать в контакте с хронической раной в течение примерно 48 часов при каждом нанесении в режиме по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или по меньшей мере 10 нанесений или до удаления струпа. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению. В соответствии с одним из вариантов реализации продолжительность режима составляет по меньшей мере два дня. Альтернативно, продолжительность режима составляет до четырех недель, предпочтительно до 10 нанесений примерно по 48 часов при каждом нанесении.
В соответствии с другими вариантами реализации раноочищающую композицию согласно настоящему изобретению можно выдерживать в контакте с хронической раной в течение примерно 72 часов при каждом нанесении в режиме по меньшей мере одного нанесения, например, по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или по меньшей мере 10 нанесений или до удаления струпа. Каждый из вариантов представляет отдельный вариант реализации согласно настоящему изобретению. В соответствии с одним из вариантов реализации продолжительность режима составляет по меньшей мере три дня. Альтернативно, продолжительность режима составляет до четырех недель, предпочтительно до 10 нанесений примерно по 72 часа при каждом нанесении.
В соответствии с другими вариантами реализации режим лечения можно повторять один, два, три или более раз до полного удаления струпа и/или закрытия раны. При повторении режимы могут непрерывно/последовательно следовать друг за другом, или повторения могут разделять дни, недели или месяцы.
В соответствии с некоторыми вариантами реализации способы согласно настоящему изобретению могут дополнительно включать стадию покрытия раноочищающей композиции окклюзивного слоя или повязки для поддерживания или фиксации композиции на ране.
В соответствии с некоторыми вариантами реализации способы согласно настоящему изобретению могут дополнительно включать дополнительную стадию промывания раны в конце времени нанесения/нахождения в контакте, такого как, например, через 4 часа, или через 24 часа, или через 48 часов, или через 72 часа после нанесения/нахождения в контакте.
Следует понимать, что диапазоны числовых значений, указанные в настоящем описании и пунктах формулы изобретения, включают любые целые числа, находящиеся в пределах диапазонов.
В соответствии с некоторыми вариантами реализации, если рану промывают и последующее нанесение раноочищающей композиции осуществляют через несколько часов или дней, на рану можно наносить мокрую или влажную повязку, предпочтительно марлю, пропитанную солевым раствором.
В соответствии с дополнительными вариантами реализации способ согласно настоящему изобретению может дополнительно включать стадию защиты краев раны и околораневой кожи при очистке раны.
Настоящее изобретение охватывает комбинированную терапию, при которой способы согласно настоящему изобретению можно комбинировать с известными способами очистки ран, такими как, хирургическая или первичная хирургическая очистка ран. В соответствии с некоторыми вариантами реализации способы согласно настоящему изобретению можно осуществлять перед хирургической или первичной хирургической очисткой ран. Альтернативно, способы согласно настоящему изобретению можно осуществлять после хирургической или первичной хирургической очистки ран.
В соответствии с некоторыми вариантами реализации терапевтически эффективное количество API наносят на рану в количестве от примерно 0,1 г до примерно 2 г на 100 см2 поверхности раны. В соответствии с дополнительными вариантами реализации количество раноочищающей композиции, наносимой на рану, составляет примерно 20 г на 100 см2 поверхности раны.
ПРИМЕР 1
Исследование токсичности гелевых составов
Указанное исследование предназначалось для оценки кожной токсичности двух гелевых составов. Оба гелевых состава представляли собой водные составы, которые содержали 0,9% Carbopol 980NF. Тем не менее только один из составов содержал 10% глицерина. Гелевые составы также содержали смесь протеолитических ферментов, полученную из бромелаина, в количестве 2,5% или 5% масс/масс. от общей массы гелевого состава.
Протеолитическую смесь, полученную из бромелаина, обозначенную в настоящей заявке, как API, для обозначения активного фармацевтического ингредиента, также известную как Debrase® или NexoBrid®, готовили, как описано ранее (см., например, документ № WO 2013/011514). Перед нанесением API в количестве 1 г порошка или 0,5 г порошка смешивали с 20 г геля-носителя, который содержал следующие компоненты: 0,9% масс/масс. Carbopol® 980NF с присутствием или при отсутствии 10% масс/масс. глицерина, 0,25% масс/масс. безводного гидрофосфата натрия и воду. Перед нанесением на кожу гель-носитель и порошок Debrase® смешивали в течение времени до 15 минут с получением гелевого состава.
Кроссбредных домашних свиней анестезировали при помощи ксилазина и кетамина НСl, вводимых внутримышечно (i.m.), диазепама, вводимого внутривенно (i.v.), и путем ингаляции 5% изофлурана и кислорода. Волосяной покров на спине свиней срезали и промывали антибактериальным мылом и стерильным раствором йода. Кожу вытирали стерильной марлей. На каждый участок кожи (3 см × 3 см) наносили по 2 г каждого из гелевых составов.
Каждый из гелевых составов наносили местно один раз в день на 4 часа на спину свиньи и состав удаляли в конце времени обработки. Участки кожи фотографировали до и после нанесения гелевого состава и оценивали на наличие эритемы и эдемы с применением шкалы Дрейза:
Эритема:
0 - Отсутствие эритемы
1 - Очень незначительная эритема (едва заметная)
2 - Хорошо различимая эритема
3 - Умеренная эритема
4 - Тяжелая эритема (бордово-красного цвета) с образованием незначительного струпа (глубокие повреждения)
Эдема:
0 - Отсутствие эдемы
1 - Очень незначительная эдема
2 - Незначительная эдема (края области четко выделяются благодаря отчетливому приподнятию)
3 - Умеренная эдема (поднятая примерно на 1 миллиметр)
4 - Тяжелая эдема (поднятая более чем на 1 миллиметр, и выходящая за пределы области воздействия).
Участки кожи также оценивали гистопатологически. Затем участки кожи перевязывали эластичной повязкой до следующего лечения. Указанную процедуру повторяли в течение 14 последовательных дней. В качестве контроля применяли гель-носитель с присутствием или при отсутствии глицерина.
Результаты
Результаты показали, что эритему впервые наблюдали для обоих гелевых составов, т.е. как с присутствием, так и при отсутствии глицерина, после 4 нанесения, и средние оценки составляли 0,5 и 1,0 для 2,5% масс/масс, и 5% масс/масс. API. Средняя оценка эритемы увеличивалась по мере увеличения количества нанесений, и эритема сохранялась до 14 дня. Эритему не наблюдали на участках кожи, обработанных только гелем-носителем. Результаты также показали, что эритема увеличивается в зависимости от количества API в гелевом составе. Максимальная средняя оценка эритемы, соответствующая гелевому составу с глицерином, который содержал API в количестве 5% масс/масс. от общей массы гелевого состава, составляла 2,33, и максимальная средняя оценка эритемы, соответствующая гелевому составу с глицерином, который содержал API в количестве 2,5% масс/масс. от общей массы гелевого состава, составляла 1,33. Максимальная средняя оценка эритемы, соответствующая гелевому составу без глицерина, который содержал API в количестве 5% масс/масс. от общей массы гелевого состава, составляла 2,66, и максимальная средняя оценка эритемы, соответствующая гелевому составу без глицерина, который содержал API в количестве 2,5% масс/масс. от общей массы гелевого состава, составляла 2,0.
Для обоих гелевых составов наблюдали только незначительную эдему (максимальная средняя оценка 0,66).
Таким образом, указанные результаты показывают, что большее количество API в гелевых составах приводит к более высокому уровню раздражения кожи, и что глицерин снижает раздражение кожи. Как результат, последующие эксперименты проводили с применением API, смешанного с гелем-носителем, содержащим 10% глицерина, 0,9% масс/масс.Carbopol® 980NF, 0,25% масс/масс. безводного гидрофосфата натрия и воду; указанный гелевый состав, содержащий API и гель-носитель, обозначали ЕХ01 или гель EscharEx.
ПРИМЕР 2
Влияние продолжительности нанесения и количества API на лечение хронической раны
Указанное исследование предназначалось для определения продолжительности нанесения и количества API в гелевом составе, которые необходимы для достижения максимальной эффективности удаления струпа в случае хронической раны.
Модель хронической раны получали с использованием кроссбредных домашних свиней. Четыре разных количества API (0, 0,75%, 1,25% и 5% масс/масс.) смешивали с гелем-носителем, содержащим глицерин, как выше описано в настоящей заявке в примере 1, и наносили на хронические раны в трех различных продолжительностях нанесения (1 час, 4 часа и 24 часа) в течение 10 последовательных дней. После десятидневного периода, также обозначаемого, как "период лечения", за хроническими ранами у свиней наблюдали в течение дополнительных 14 дней, обозначаемых, как "период восстановления", для оценки влияния очистки раны на скорость заживления хронических ран.
Хронические раны фотографировали в начале и в течение периода лечения, а также в течение периода восстановления. Площадь струпа и площадь раны оценивали визуально, измеряли при помощи программного обеспечения ImageJ (NIH, MD, USA) и анализировали при помощи программного обеспечения для статистического анализа JMP® (SAS Inc., NC, USA). На каждой из фотографий измеряли размер раны и размер струпа. Эритему и эдему оценивали, как выше описано в настоящей заявке в примере 1. Проводили биопсию из центра и краев каждой из ран перед первым нанесением, после последнего нанесения и в конце периода восстановления. Ткани заливали парафином, секционировали и окрашивали гематоксилином и эозином (Н&Е).
Измерения по фотографиям применяли для расчета следующих параметров ("/" означает "из"):
1) Процентное отношение площадь струпа/площадь раны в конце периода.
2) Площадь под кривой (ППК), где ось х представляет собой количество нанесений, а ось у представляет собой процент струпа. Указанный параметр отображает эффективность лечения: чем более эффективно лечение, тем меньше площадь под кривой.
3) Процентное отношение размер раны/начальный размер раны в конце периода.
4) Площадь под кривой (ППК), где ось х представляет собой количество нанесений, а ось у представляет собой процентное отношение размера раны к начальному размеру раны. Указанный параметр отображает закрытие раны: чем быстрей рана закрывается, тем меньше площадь.
Результаты
В начале периода лечения хронические раны уже имели сформировавшийся струп. ФИГ. 1А и 1С представляют собой типичные фотографии, демонстрирующие хроническую рану перед лечением. Струп состоял из двух отдельных областей: центра раны, в котором кожа была полностью удалена, и краев раны. В центре сформировался тонкий слой струпа, тогда как на краях струп состоял из некротической кожи.
В случае хронических ран, которые обрабатывали гелевым составом, содержащим API (обозначаемым, как гель EscharEx или ЕХ01), струп размягчался и постепенно растворялся от нанесения к нанесению до того, как растворение по периметру, приводило к полному отсоединению от жизнеспособной ткани (ФИГ. 1В). Напротив, хронические раны, которые обрабатывали гелем-носителем, незначительно меняли свой внешний вид и консистенцию в течение периода лечения (ФИГ. 1D). В нескольких случаях после 10 нанесения остатки струпа отсоединяли от раневого ложа. Как в случае геля-носителя, так и в случае гелевого состава ЕХ01, если струп оставался после последнего нанесения, он высыхал и отсоединялся от раны в течение периода восстановления.
В области, окружающей рану, которую обрабатывали гелевым составом ЕХ01, в течение периода лечения развивались эдема и эритема, несмотря на защиту вазелином. Указанное явление раздражения кожи более ярко выражалось в группе лечения, получавшей нанесение продолжительностью 24 ч 5% (масс/масс.) API. Нанесение l,25% (масс/масс.) API продолжительностью 24 ч приводило к такому же раздражению кожи, как при нанесении 5% (масс/масс.) API в гелевом составе ЕХ01 продолжительностью 4 ч. Как эритема, так и эдема полностью исчезали через 1-2 дня в течение периода восстановления.
Было установлено, что процент струпа после 10 нанесения значительно зависит от количества API в гелевом составе и продолжительности нанесения. В то время, как при нанесениях продолжительностью 1 ч не наблюдали корреляции между размером струпа после 10 нанесения и концентрацией API (ФИГ. 2А), при нанесениях продолжительностью 4 часа более высокая концентрация API приводила к меньшему размеру струпа, наблюдаемого после 10 нанесения (ФИГ. 2В). Нанесения продолжительностью 24 часа демонстрировали, что низкие концентрации API в гелевом составе снижают процент струпа зависимым от концентрации образом; тем не менее, более высокие концентрации API не приводили к дальнейшему снижению процента струпа (ФИГ. 2С).
Было установлено, что эффективность очистки раны (ППК) значительно зависит от концентрации API и продолжительности нанесения. Нанесения продолжительностью 1 час являлись менее эффективными, чем нанесения продолжительностью 4 часа и 24 часа, для всех измеренных концентраций API (ФИГ. 3А, 3В и 3С, соответственно). При нанесениях продолжительностью 4 ч значение ППК коррелировало с концентрацией API (ФИГ. 3В), тогда как при нанесениях продолжительностью 24 часа значение ППК коррелировало с концентрацией API только в области низких концентраций (ФИГ. 3С).
Было установлено, что соответствие квадратичной модели (второго порядка для API) как для площади под кривой струпа (ППК; ФИГ. 4А и 4 В, верхние панели), так и для процента струпа (ФИГ. 4А и 4В, средние панели) после 10 нанесения, являлось значимым (значение р 0,0154). В соответствии с указанной моделью максимального значения функции желательности (т.е. наименьшего процента струпа и наименьшего значения ППК после последнего нанесения) достигали при нанесениях продолжительностью 24 часа при концентрации API ~3,5% (ФИГ. 4А и 4В, нижние панели).
Размер раны незначительно изменялся в течение периода лечения, и любые изменения размера являлись очень постепенными. Это относится ко всем группам лечения.
В течение периода восстановления: как для групп, получающих лечение гелем-носителем, так и для групп, получающих лечение ЕХ01, если струп оставался после 10 нанесения, он высыхал и отсоединялся от раны в течение периода восстановления. Таким образом, процент струпа после периода восстановления составлял 0 или был близок к 0 для всех групп. Не наблюдали значительной корреляции между процентом струпа в конце периода восстановления или значением ППК в течение периода восстановления и концентрацией API или продолжительностью нанесения.
После отсоединения струпа все раны начинали закрываться. Таким образом, не наблюдали значительной корреляции между отношением размера раны к начальному размеру раны и концентрацией API или продолжительностью нанесения. Это же верно и для значения ППК в течение периода восстановления.
Выводы
Результаты указанного исследования показали, что удаление струпа значительно более эффективно при применении гелевых составов, содержащих API, по сравнению с гелем-носителем для всех концентраций API и для всех продолжительностей нанесения. Было установлено, что оптимальная эффективность достигается при примерно 3,5% масс/масс. API при нанесении продолжительностью 24 часа, что указывает на то, что при нанесении продолжительностью 24 часа концентрации API, превышающие 3,5% масс/масс. от общей массы гелевого состава, не приводят к увеличению эффективности. Результаты указанного исследования также показали, что с точки зрения эффективности и безопасности более длительное нанесение можно компенсировать более низкой концентрацией API.
ПРИМЕР 3
Эффективность и безопасность API в гелевом составе - Клиническое исследование
Целью указанного исследования являлась оценка эффективности и безопасности геля EscharEx при подготовке раневого ложа у субъектов с трудноизлечимыми варикозными язвами, диабетическими язвами нижних конечностей и травматическими/послеоперационными ранами.
Многоцентровое, рандомизированное, слепое исследование с контролем носителем проводили на субъектах с трудноизлечимыми ранами для оценки эффективности и безопасности API в гелевом составе, описанном выше в настоящей заявке в примерах 1 и 2, применяемом для подготовки раневого ложа у пациентов с трудноизлечимыми варикозными язвами, диабетическими язвами нижних конечностей и травматическими/послеоперационными ранами.
Исследование включало 73 субъекта, которых лечили гелем EscharEx или гелем-носителем в течение до 10 ежедневных нанесений продолжительностью 4 часа ±15 минут. Указанный период определяли, как "период лечения". После каждого нанесения рану промывали, фотографировали и клинически оценивали на размер раны, удаление нежизнеспособной ткани и изменение в грануляционной ткани, состояние раны и параметры безопасности. После каждой раноочищающей обработки гелем EscharEx или гелем-носителем эксперт слепым способом принимал решение о продолжении лечения, и рану перевязывали влажной марлей, пропитанной солевым раствором.
После завершения "периода лечения" субъекты обрабатывали в соответствии со стандартными процедурами в их центрах и оценивали (оценка состояния раны) один раз в неделю до полного закрытия раны или вплоть до 12 недель с последнего нанесения (в общей сложности до 12 еженедельных визитов последующего наблюдения).
Для субъектов, у которых достигали закрытия раны, дополнительно проводили 3 ежемесячных визита последующего наблюдения (в общей сложности 3 визита) для оценки рецидива закрытой раны. Общая продолжительность исследования составляла до 27 недель.
Пациенты, задействованные в указанном исследовании, являлись взрослыми субъектами с >50% некротической ткани/шелушащейся кожи/фибринной нежизнеспособной ткани в трудноизлечимой ране (возраст раны 4 недели или более) следующей этиологии: варикозные язвы, диабетические язвы нижних конечностей и травматические/послеоперационные раны.
Для приготовления геля EscharEx два грамма стерильного порошка EscharEx® смешивали с 40 граммами стерильного геля-носителя, как описано выше в настоящей заявке в примере 1, ≤15 мин перед применением с получением 5% геля EscharEx. После смешивания порошка с гелем-носителем каждый грамм приготовленного геля EscharEx содержал 0,05 г порошка EscharEx. В соответствии со случайным распределением, 2 г порошка, смешанного с 40 граммами геля-носителя (гель EscharEx), или только 40 г геля-носителя наносили на 200 см2поверхности раны.
Безопасность оценивали путем определения тяжести и частоты проявления системных и местных побочных эффектов, показателей жизненно важных функций, оценки интенсивности боли (с применением VAS (визуально-аналоговой шкалы (англ. Visual Analog scale))), клинических признаков инфекции, лабораторных показателей безопасности (химия крови, гематология, коагуляция), проведения физического обследования и оценки кровопотери.
Для субъектов, получавших лечение гелем EscharEx, проводили следующую процедуру: в качестве превентивной анальгезии гель лидокаина или комбинацию 4% лидокаина, 0,05% эпинефрина, 0,5% тетракаина (LET гель) наносили на края раны и на саму рану за полчаса до нанесения EscharEx. Кожу, окружающую рану, защищали петролатумом (наносили на края раны). На рану брызгали стерильный изотонический (0,9%) раствор хлорида натрия. Рана являлась влажной в течение процедуры нанесения. После нанесения геля рану покрывали окклюзивной перевязочной пленкой, которая прилипала к нанесенному стерильному адгезивному защитному материалу. Гель EscharEx заполнял всю окклюзивную повязку, и особое внимание уделяли тому, чтобы в окклюзивной повязке не оставался воздух. Перевязанную рану покрывали неплотной, ворсистой повязкой, которая удерживает и фиксирует окклюзивную повязку на месте. Повязку оставляли на месте в течение 4 часов и особое внимание уделяли защите и отсутствию воздействий на повязку. После нанесения в течение 4 часов окклюзивную повязку удаляли с применением асептических способов. Адгезивный барьер удаляли с применением стерильного инструмента с тупой кромкой (например, шпателя для языка). Растворенную нежизнеспособную ткань удаляли из раны при помощи вытирания ее сухой марлей, шпателя для языка и т.п., а затем рану вытирали влажной марлей и промывали водой.
Результаты
Процент достижения полной очистки раны
Как показана в таблице 1, процент достижения полной очистки раны (удаление ≥90% нежизнеспособной ткани) в конце периода очистки раны (до 10 дней лечения) был значительно выше в группе, получавшей лечение гелем EscharEx, по сравнению с группой, получавшей лечение гелем-носителем, т.е. 55,1% против 29,2%, соответственно, в популяции по назначенному лечению (ITT).
* Двухсторонний точный критерии Фишера для проведения сравнения между группами.
Также проводили анализ процента достижения полной очистки раны в зависимости от этиологии раны. Как показано в таблице 2, разница между группами, получавшими лечение гелем EscharEx и гелем-носителем, являлась более существенной в случае "диабетической язвы нижних конечностей" (50,0% против 14,3%, соответственно) и в случае "варикозной язвы" (62,5% против 25,0%, соответственно).
* 2-сторонний точный критерий Фишера для проведения сравнения между группами.
Анализ частоты достижения полной очистки раны в объединенных популяциях пациентов с "диабетической язвой нижних конечностей" и "варикозной язвой" (исключая пациентов с "травматическими/послеоперационными ранами") приводил к более значимому эффекту в случае геля EscharEx по сравнению с гелем-носителем (частота достижения полной очистки раны 56,3% против 20,0%, соответственно, р=0,028; таблица 3).
Таблица 3. Частота достижения полной очистки раны в объединенной популяции пациентов с диабетической язвой нижних конечностей и варикозной язвой в зависимости от группы лечения (популяция ITT)
* 2-сторонний точный критерий Фишера для проведения сравнения между группами.
Время для достижения полной очистки раны
Среднее время для достижения полной очистки раны в популяции ITT менее, чем за 10 дней лечения, было меньше для группы, получавшей лечение гелем EscharEx (в среднем 7,6 дня), по сравнению с группой, получавшей лечение гелем-носителем (в среднем 8,4 дня). На ФИГ. 5 представлен график Каплана-Майера, демонстрирующий время для достижения полной очистки раны в зависимости от группы лечения. Процент пациентов, у которых достигали полной очистки раны, в каждый контрольный момент времени был выше для группы, получавшей лечение гелем EscharEx, по сравнению с группой, получавшей лечение гелем-носителем (логранговый критерий р=0,075).
Анализ по подгруппам в зависимости от этиологии показал, что среднее время для достижения полной очистки раны было меньше для группы, получавшей лечение гелем EscharEx, по сравнению с группой, получавшей лечение гелем-носителем, у пациентов с "варикозной язвой" (в среднем 6,7 против 10,5 дня, соответственно) и "диабетической язвой нижних конечностей" (в среднем 7,9 против 8,9 дня, соответственно). Графики Каплана-Майера, демонстрирующие время для достижения полной очистки раны, представлены на ФИГ. 6 для "варикозной язвы" и на ФИГ. 7 для "диабетической язвы нижних конечностей". Анализ для двух объединенных популяций: "диабетической язвы нижних конечностей" и "варикозной язвы", демонстрировал значительно более короткое время для достижения полной очистки раны для группы, получавшей лечение гелем EscharEx (в среднем 7,3 дня), по сравнению с группой, получавшей лечение гелем-носителем (в среднем 9,7 дня).
Количество нанесения для достижения полной очистки раны В таблице 4 показаны проценты субъектов, у которых достигали полной очистки раны, для каждого из визитов в популяции ITT.
Как показано в таблице 4, в общей сложности у 32,7% субъектов в группе, получавшей лечение гелем EscharEx, достигали полной очистки раны за период не более 4 дней лечения по сравнению с 8,3% в группе, получавшей лечение гелем-носителем. У более чем половины (51,0%), субъектов в группе, получавшей лечение гелем EscharEx, достигали полной очистки раны за период не более 7 дней лечения по сравнению с менее, чем третью (29,2%) субъектов, в группе, получавшей лечение гелем-носителем. Для 25 из 27 пациентов (93%), у которых достигали полной очистки раны в группе, получавшей лечение гелем EscharEx, полной очистки раны достигали не более чем за 7 нанесений.
Анализ по подгруппам процентов субъектов, у которых достигали полной очистки раны, в зависимости от этиологии в популяции ITT показал, что у половины субъектов с "диабетической язвой нижних конечностей" и "варикозной язвой" в группе, получавшей лечение гелем EscharEx, полной очистки раны достигали за период не более 7 и 5 дней, соответственно; в группе, получавшей лечение гелем-носителем, только у 14,3% и 25,0% субъектов достигали полной очистки раны после 7 дней лечения, соответственно. Для субъектов с "травматическими послеоперационными ранами" у 52,9% достигали полной очистки раны только после 9 дней лечения в группе, получавшей лечение гелем EscharEx, по сравнению с 44,4% в группе, получавшей лечение гелем-носителем.
Площадь нежизнеспособной ткани
Средняя площадь нежизнеспособной ткани перед "периодом лечения" составляла 25,3 см2 в группе, получавшей лечение гелем EscharEx, и 22,7 см2 в группе, получавшей лечение гелем-носителем. Процентное уменьшение площади нежизнеспособной ткани было больше для группы, получавшей лечение гелем EscharEx, по сравнению с группой, получавшей лечение гелем-носителем, для всех предусмотренных исследованием визитов в популяции ITT. В конце периода лечения среднее относительное уменьшение площади нежизнеспособной ткани составляло 67,4% в группе, получавшей лечение гелем EscharEx, по сравнению с 46,0% в группе, получавшей лечение гелем-носителем.
Анализ средней площади нежизнеспособной ткани в зависимости от этиологии показал, что для всех типов этиологии уменьшение средней площади нежизнеспособной ткани в группе, получавшей лечение гелем EscharEx, было больше по сравнению с группой, получавшей лечение гелем-носителем, в каждый контрольный момент времени.
Безопасность
Большинство пациентов в указанном исследовании имели незначительные и умеренные АЕ, составляющие 85,0% (130/153) от зарегистрированных АЕ. Было зарегистрировано сорок четыре серьезных побочных эффекта (SAE); доля пациентов с SAE была сопоставима для обеих групп, 39% (19/49) в группе, получавшей лечение гелем EscharEx, по сравнению с 33% (8/24) в группе, получавшей лечение гелем-носителем. Большинство пациентов с АЕ (93,5%) испытывали посторонние АЕ (87,6%о); частично связанные АЕ составляли менее 5% АЕ (7/153), и возможно связанные, вероятно связанные и связанные АЕ составляли менее 10% АЕ. Не наблюдали АЕ, приводящих к досрочному прекращению лечения.
Наиболее распространенные местные АЕ, которые отмечали у ≥5% пациентов в обеих исследуемых группах, относились к СОК (англ. system organ class -системно-органный класс) "травмы, отравления и осложнения, вызванные проведением процедур" (раневое осложнение и расхождение краев раны) и "инфекционные и паразитарные заболевания" (флегмона и раневая инфекция). Во всей исследуемой популяции у ≥5% субъектов в обеих исследуемых группах наблюдали системные АЕ, которые относились к СОК "общие расстройства и нарушения в месте введения" (пирексия), "нарушения со стороны системы кроветворения и лимфатической системы" (анемия), "нарушения со стороны желудочно-кишечного тракта" (запор и тошнота), "нарушения со стороны кожи и подкожных тканей" (зуд) и "нарушения со стороны обмена веществ и питания" (гипокалиемия).
Оценка лабораторных показателей (химия крови, гематология, факторы коагуляции), показателей жизненно важных функций (артериальное давление, частота пульса и температура), физического обследования и применения сопутствующих лекарственных средств не выявила каких-либо очевидных различий между группой, получавшей лечение гелем EscharEx, и группой, получавшей лечение гелем-носителем. Не наблюдали последовательных или кумулятивных изменений. Большинство лабораторных показателей от нормы наблюдали до начала исследования.
Оценки выраженности боли в баллах являлись почти идентичными для групп, получающих исследуемое лечение, во всех предусмотренных исследованием визитах с минимальными изменениями до и после нанесения. Присутствовали минимальные признаки тяжелой инфекции (оцениваемой по клиническим признакам флегмоны/остеомиелита) в процессе периода лечения.
Таким образом, терапия с применением геля EscharEx являлась хорошо переносимой и не была связана с заметными патологическими изменениями в оцениваемой системе организма или с последовательными изменениями лабораторных параметров, показателей жизненно важных функций, оценки интенсивности боли и применения сопутствующих лекарственных средств.
Выводы
Исследование подтвердило, что 5% гель EscharEx является эффективным ферментативным удаляющим агентом для лечения трудноизлечимых ран. Он обеспечивает клиническую пользу, заключающуюся в эффективной и быстрой нехирургической очистке хронических ран, в частности при диабетических язвах нижних конечностей и варикозных язвах.
ПРИМЕР 4
Эффективность и безопасность API в гелевом составе - Клиническое исследование
Многоцентровое, перспективное, рандомизированное, контролируемое, слепое исследование проводили на субъектах с трудноизлечимыми ранами для оценки эффективности и безопасности API в гелевом составе, описанном выше в настоящей заявке в примерах 1 и 2, применяемом для подготовки раневого ложа у пациентов с трудноизлечимыми язвами.
Исследование включало 32 субъекта (только с 2 этиологиями; варикозные язвы и диабетические язвы нижних конечностей), которых лечили гелем EscharEx или гелем-носителем. В общей сложности 20 пациентов лечили при времени нанесения 24±2 часа (первая когорта) и 12 субъектов лечили при времени нанесения 48±2 часа (вторая когорта) в течение вплоть до 8 нанесений. После завершения "периода лечения" пациентов обрабатывали в соответствии со стандартными процедурами и оценивали (оценка состояния раны) один раз в неделю до полного закрытия раны или вплоть до 12 недель с последнего нанесения (вплоть до 12 визитов). Если происходило закрытие раны, его подтверждали через 2 недели после последнего еженедельного визита. Общая продолжительность исследования составляла до 19 недель.
Исследуемая популяция включала взрослых субъектов с>50% некротической ткани/шелушащейся кожи/фибринной нежизнеспособной ткани в трудноизлечимых ранах следующих этиологий:
1. Варикозные язвы
2. Диабетические язвы нижних конечностей
После каждого нанесения геля EscharEx или геля-носителя рану промывали, фотографировали и оценивали на размер раны, удаление нежизнеспособной ткани и изменение в грануляционной ткани (при помощи программного обеспечения для планиметрии), состояние раны и параметры безопасности. После каждой раноочищающей обработки рану перевязывали влажной марлей, пропитанной солевым раствором.
Два грамма стерильного порошка Debrase® смешивали с 40 граммами стерильного геля-носителя (отношение 1:20) ≤15 мин перед применением с получением геля EscharEx.
После смешивания порошка с гелем-носителем каждый грамм приготовленного геля EscharEx содержал 0,05 г порошка EscharEx®.
В соответствии с распределением для каждой группы рандомизации 2 г порошка, смешанного с 40 граммами геля-носителя (гель EscharEx), или только 40 г геля-носителя наносили на 200 см2 поверхности раны на срок 24 ±1 час и 48 ±2 часа (2 группы лечения) при каждом нанесении, и вплоть до 10 нанесений или до достижения полной очистки раны, в зависимости от того, что произойдет раньше.
Критерии включения являлись следующими:
1. Пациенты, мужчины или женщины, от 18 до 90 лет;
2. Пациенты с варикозной язвой, диабетической язвой (нижних конечностей) или травматической/послеоперационной раной (определяли по истории болезни и физическому обследованию);
3. Рана не заживает в течение по меньшей мере 4 недель;
4. Площадь некротической ткани/шелушащейся кожи/фибринной нежизнеспособной ткани составляет по меньшей мере 50% площади раны (оценивали путем клинической оценки);
5. Площадь поверхности раны (длина х ширина) находится в диапазоне 5-200 см2;
Основным критерием оценки являлась частота достижения полной очистки раны (удаление нежизнеспособной ткани) в конце периода очистки раны (вплоть до 10 нанесений).
Второстепенные критерии оценки включали:
1. Время до достижения полной очистки раны (вплоть до 10 нанесений) (анализ выживаемости);
2. Количество нанесений для достижения полной очистки раны;
3. Время до достижения >75% очистки раны (вплоть до 10 нанесений);
4. Частота достижения >75% очистки раны (вплоть до 10 нанесений);
5. Оценка изменения состояния очистки раны в течение периода лечения: процентное уменьшение нежизнеспособной ткани (ежедневно, в течение 10 нанесений);
6. Время до достижения раневого ложа, подготовленного для заживления и закрытия: ложа, которое способно к самостоятельному заживлению;
7. Время до достижения полной грануляции и время до достижения >75% грануляции (вплоть до 12 недель);
8. Частота достижения полной грануляции и частота достижения >75% грануляции (на 12 неделе);
9. Процентное изменение грануляционной ткани с течением времени (еженедельно, от базового уровня до 12 недель);
10. Частота достижения полного закрытия раны (вплоть до 12 недель);
11. Время до достижения полного закрытия раны (вплоть до 12 недель);
12. Снижение площади раны: процентное снижение площади раны с течением времени (еженедельно, от базового уровня до 12 недель);
13. Изменение в состоянии раны (состояние заживления раны), которое оценивали при помощи прибора для измерения ножных язв (LUMT) (в конце периода очистки раны и в конце периода контролируемого закрытия раны);
14. Изменение в качестве жизни, которое оценивали при помощи SF-36 (в конце периода контролируемого закрытия раны и через 3 месяца после периода контролируемого закрытия раны);
15. Частота рецидивов ран (через 3 месяца после закрытия раны);
16. Время до рецидива раны (в течение 3 месяцев после закрытия раны). Оценивали критерии в области безопасности. Такие критерии включали:
тяжесть и частоту проявления системных и местных побочных эффектов, показатели жизненно важных функций, оценку интенсивности боли (с применением VAS), признаки инфекции, лабораторные показатели безопасности (химия крови, гематология, коагуляция), физическое обследование и кровопотерю.
Специалистам в данной области понятно, что настоящее изобретение не ограничивается элементами, конкретно представленными и описанными выше в настоящей заявке. Скорее, объем настоящего изобретения определяется пунктами нижеследующей формулы изобретения.
Реферат
Изобретение относится к медицине и биотехнологии и представляет собой раноочищающую композицию в форме водного геля. В частности, настоящее изобретение относится к раноочищающей композиции, содержащей смесь протеолитических ферментов, полученную из бромелаина и находящуюся в сухой форме, и водный гель-носитель, где перед применением смесь протеолитических ферментов смешивают с водным гелем-носителем с получением раноочищающей композиции. Композиции согласно изобретению подходят для очистки и лечения хронических ран. 2 н. и 36 з.п. ф-лы, 4 табл., 4 пр., 7 ил.
